Name: co-culture of glioblastoma stem-like cells on patterned neurons to study migration and cellular interactions
Uploaded: 2021-02-24T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Co-culture of Glioblastoma Stem-like Cells on Patterned Neurons to Study Migration and Cellular Interactions at JoVE.com

Diese Arbeit wurde unterstützt von Fondation ARC 2020, Ligue Contre le Cancer (Comite de la Gironde), ARTC, Plan Cancer 2021, INCA PLBIO. Alveole wird unterstützt von agence Nationale de la Recherche (Grant Labex BRAIN ANR-10-LABX-43). Joris Guyon ist Stipendiat des Universitätsklinikums Toulouse (CHU Toulouse).

Die schriftliche Einwilligung aller Patienten (vom Haukeland Hospital, Bergen, Norwegen, gemäß den Vorschriften der örtlichen Ethikkommission) wurde eingeholt. Dieses Protokoll folgt den Richtlinien der Ethikkommissionen für Human- und Tierforschung der Universität Bordeaux. Trächtige Ratten wurden in der Tiereinrichtung der Universität Bordeaux untergebracht und behandelt. Die Euthanasie einer E18-getrhypten trächtigen Ratte wurde unter Verwendung von CO2durchgeführt. Alle Tierversuche wurden gemäß...

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Glioblastome dringen umfassend in das Parenchym ein, indem sie verschiedene Modi verwenden: Ko-Option der umgebenden Blutgefäße, interstitielle Invasion oder Invasion auf WMTs18. Dieser letztere Modus ist in der Literatur nicht gut charakterisiert, da es schwierig ist, geeignete In-vitro- oder In-vivo-Modelle im Zusammenhang mit der WMT-Invasion zu finden. Hier wurde ein vereinfachtes Modell vorgeschlagen, bei dem kultivierte Nagetierneuronen auf lamininbeschichteten Oberfläch...

Primäre maligne Gliome, einschließlich GBMs, sind verheerende Tumore mit einer mittleren Überlebensrate von 12 bis 15 Monaten, die für GBM-Patienten berichtet werden. Die aktuelle Therapie beruht auf einer großen Tumormassenresektion und Chemotherapie in Verbindung mit einer Strahlentherapie, die die Überlebensrate nur um wenige Monate verlängert. Therapeutische Misserfolge sind eng mit einer schlechten Medikamentenabgabe über die Blut-Hirn-Schranke (BBB) und mit invasivem Wachstum in perivaskulären Räumen, Hirnhäuten und entlang der WMTs1verbunden. Perivaskuläre Invasion, auch vaskuläre Co-Option genannt, ist ein gut untersuchter Prozess, und die molekularen Mechanismen beginnen aufgeklärt zu werden; Der Prozess der GBM-Zellinvasion entlang von WMTs ist jedoch nicht gut verstanden. Tumorzellen wandern entlang der Scherer-Sekundärstrukturen in das gesunde Gehirn2. Tatsächlich beschrieb Hans-Joachim Scherer vor fast einem Jahrhundert die invasiven Wege des GBM, die heute als perineuronale Satellitose, perivaskuläre Satellitose, subpiale Ausbreitung und Invasion entlang des WMT bezeichnet werden (Abbildung 1A).
Einige Chemokine und ihre Rezeptoren, wie stromalzellabgeleiteter Faktor-1α (SDF1α) und C-X-C-Motiv-Chemokinrezeptor 4 (CXCR4), aber nicht vaskulärer endothelialer Wachstumsfaktor (VEGF), scheinen an der WMT-Invasion beteiligt zu sein3. In jüngerer Zeit hat sich gezeigt, dass eine transzelluläre NOTCH1-SOX2-Achse ein wichtiger Weg bei der WMT-Invasion von GBM-Zellenist 4. Die Autoren beschrieben, wie GBM-Stammzellen in das Gehirnparenchym an teilweise nicht myelinisierten Neuronen eindringen, was auf die Zerstörung von Myelinscheiden durch GBM-Zellen hindeutet. Ein Meilenstein wurde 2019 erreicht, als drei Artikel in der Zeitschrift Nature veröffentlicht wurden, die die Rolle der elektrischen Aktivität bei der Gliomentwicklung unterstreichen5,6. Bahnbrechende Arbeiten von Monje und Mitarbeitern beleuchten die zentrale Rolle der elektrischen Aktivität bei der Sekretion von Neuroligin-3, das die Gliomentwicklung fördert.
Winkler und Mitarbeiter beschrieben Verbindungen zwischen GBM-Zellen (Mikroröhrchen), die in invasiven Schritten entscheidend sind, und in letzter Zeit Interaktionen zwischen GBM-Zellen und Neuronen über neu beschriebene Neurogliom-Synapsen. Diese Strukturen begünstigen die glutamaterge Stimulation von α-Amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolpropionsäure (AMPA) -Rezeptoren an der GBM-Zellmembran, die die Tumorentwicklung und -invasion fördern. Die Invasion von Tumorzellen ist ein zentraler Prozess bei der Verbreitung von Metastasen oder entfernten sekundären Herden, wie sie bei GBM-Patienten beobachtet wird. Es wurde festgestellt, dass mehrere Faktoren bei der GBM-Invasion wichtig sind, wie Thrombospondin-1, ein transformierender Wachstumsfaktor beta (TGFβ-reguliertes matrizelluläres Protein oder der Chemokinrezeptor CXCR3)7,8.
Hier wurde ein vereinfachtes biomimetisches Modell zur Untersuchung der GBM-Invasion beschrieben, bei dem Neuronen auf Spuren von Laminin gemustert und GBM-Zellen darauf gesät werden, als Einzelzellen oder als Sphäroide (Abbildung 1B). Die beiden experimentellen Einstellungen zielen darauf ab, die Invasion auf Neuronen zu rekapitulieren, die in GBM9,10,11beobachtet wird. Solche Modelle wurden in der Vergangenheit als ausgerichtete Nanofaser-Biomaterialien (Core-Shell-Elektrospinning) entwickelt, die es ermöglichen, die Zellmigration durch Modulation mechanischer oder chemischer Eigenschaften zu untersuchen12. Das in diesem Artikel beschriebene Co-Kulturmodell ermöglicht ein besseres Verständnis dafür, wie GBM-Zellen auf Neuronen entweichen, indem neue molekulare Wege definiert werden, die an diesem Prozess beteiligt sind.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>(3-aminopropyl) triethoxysilane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>440140-100ML</td>
			<td>The amino group is useful for the bioconjugation of mPEG-SVA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well round-bottom plate</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>2582624</td>
			<td>Used to prepare spheroids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accutase</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A11105-01</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C (long-term) or 4 &#176;C (short-term), sphere dissociation enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12587</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basic Fibroblast Growth Factor</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-18B</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Countess Cell Counting ChamberSlides</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>C10283</td>
			<td>Used to cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips</td>
			<td>Marienfeld</td>
			<td>111580</td>
			<td>Cell culture substrate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dessicator cartridges</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Z363456-6EA</td>
			<td>Used to reduce mosture during (3-aminopropyl) triethoxysilane treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS 10x</td>
			<td>Pan Biotech</td>
			<td>P04-53-500</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji software, MTrack2 macro</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
			<td>Used to analyze pictures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flask 75 cm&#178;</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>10497302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H8264-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3149-100KU</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td></td>
			<td>114956-81-9</td>
			<td>Promotes neuronal adhesion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leonardo software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>loading of envisioned micropatterns</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaMorph Software&#160;</td>
			<td>Molecular Devices LLC</td>
			<td>NA</td>
			<td>Microscopy automation software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylcellulose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M0512</td>
			<td>Diluted in NBM for a 2% final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103-049</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon TiE (S Fluor, 20x/0.75 NA)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>inverted microscope equipped with a motorized stage&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin - Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLPP</td>
			<td>Alveole</td>
			<td>PLPPclassic_1ml</td>
			<td>Photoinitiator used to degrade the PEG brush</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly(ethylene glycol)-Succinimidyl Valerate (mPEG-SVA)</td>
			<td>Laysan Bio</td>
			<td>VA-PEG-VA-5000-5g</td>
			<td>Used as an anti-fouling coating</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PRIMO</td>
			<td>Alveole</td>
			<td>PRIMO1</td>
			<td>Digital micromirror device (DMD)-based UV projection apparatus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue 0.4%</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>T10282</td>
			<td>Used for cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4049-100ML</td>
			<td>Used to detach adherent cells</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

co-culture of glioblastoma stem-like cells on patterned neurons to study migration and cellular interactions

Glioblastome (GBMs), maligne Gliome des Grades IV, sind aufgrund ihrer aggressiven Eigenschaften eine der tödlichsten Krebsarten beim Menschen. Trotz signifikanter Fortschritte in der Genetik dieser Tumoren ist nicht gut bekannt, wie GBM-Zellen in das gesunde Gehirnparenchym eindringen. Insbesondere wurde gezeigt, dass GBM-Zellen über verschiedene Wege in den peritumoralen Raum eindringen; Das Hauptinteresse dieses Papiers ist der Weg entlang von White Matter Tracts (WMTs). Die Wechselwirkungen von Tumorzellen mit den peritumoralen Nervenzellkomponenten sind nicht gut charakterisiert. Hierin wurde eine Methode beschrieben, die den Einfluss von Neuronen auf die GBM-Zellinvasion bewertet. Dieser Artikel stellt einen fortschrittlichen Co-Kultur-In-vitro-Assay vor, der die WMT-Invasion nachahmt, indem er die Migration von GBM-stammähnlichen Zellen auf Neuronen analysiert. Das Verhalten von GBM-Zellen in Gegenwart von Neuronen wird durch ein automatisiertes Tracking-Verfahren mit Open-Source- und Free-Access-Software überwacht. Diese Methode ist für viele Anwendungen nützlich, insbesondere für funktionelle und mechanistische Studien sowie für die Analyse der Auswirkungen pharmakologischer Wirkstoffe, die die GBM-Zellmigration auf Neuronen blockieren können.

Gemusterte Neuronen, die mit fluoreszierenden GBM-Zellen kokuliert wurden, wurden wie im Protokollabschnitt beschrieben vorbereitet und Tracking-Experimente durchgeführt. GBM-Zellen veränderten schnell ihre Form, während sie auf den Neuronen wanderten (Abbildung 1B: Panel 6 und Video 1). Zellen wanderten in einer zufälligen Bewegung entlang der neuronalen Erweiterungen (Video 1). Fluoreszierende GBM-Zellen und nicht fluoreszierende Neuro...

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Co-culture of Glioblastoma Stem-like Cells on Patterned Neurons to Study Migration and Cellular Interactions

Hier präsentieren wir einen einfach zu bedienenden Co-Kultur-Assay zur Analyse der Glioblastom-Migration (GBM) an gemusterten Neuronen. Wir entwickelten ein Makro in der FiJi-Software zur einfachen Quantifizierung der GBM-Zellmigration auf Neuronen und beobachteten, dass Neuronen die invasive Kapazität von GBM-Zellen modifizieren.

Co-Kultur von Glioblastom-Stammzellen auf gemusterten Neuronen zur Untersuchung von Migration und zellulären Interaktionen

Glioblastomas (GBMs), grade IV malignant gliomas, are one of the deadliest types of human cancer because of their aggressive characteristics. Despite ...

Glioblastome sind verheerende Hirntumoren mit einem hohen invasiven Profil. Dieses Co-Kultursystem ahmt die Migration von Glioblastomzellen auf Neuronen nach, um einen der bei Patienten beobachteten invasiven Wege zu rekapitulieren. Die Geometrie und Zusammensetzung unseres Co-Culture-Modells wird präzise gesteuert.Es ermöglicht eine bessere Reproduzierbarkeit und auch eine einfache Quantifizierung komplexer biologischer Prozesse. Diese Methode kann an die klinische Diagnose angepasst werden, indem frisch dissoziierte Glioblastomzellen und Neuronen co-kultiviert werden. Es definiert einen klinischen Index, der als klinisches Ergebnis sehr wichtig ist.Unsere Methode kann auch verwendet werden, um andere wandernde Zellen wie Fibroblasten oder Immunzellen zu quantifizieren. Das Verfahren wird von Joris Guyon, einem Doktoranden aus meinem Team, demonstriert. Um ein Substrat für die Mikrostrukturierung herzustellen, behandeln Sie 18 Millimeter kreisförmige Glasabdeckungen fünf Minuten lang durch Luft- oder Plasmaaktivierung, bevor Sie die Abdeckschichten eine Stunde lang in einen Aussicker mit 100 Mikrolitern Triethoxysilan legen und dann eine Lösung von PEG-SVA mit 100 Milligramm pro Milliliter für eine Stunde inkubieren.Für die Gelabscheidung fügen Sie am Ende der Inkubation drei Mikroliter PLPP und 50 Mikroliter absolutes Ethanol auf die Mitte des Objektträgers hinzu und warten Sie, bis er vollständig trocknet. Für die Mikrostrukturierung von Glasobjektträgern montieren Sie den Abdeckrlip in einer Ludin-Kammer und legen Sie die Kammer auf die Bühne eines Mikroskops, das mit einem Autofokussystem ausgestattet ist. Laden Sie nach der Bildgebung die Mikromusterbilder in die Software.Nach der automatischen UV-Beleuchtungssequenzierung verwenden Sie eine Pipette, um das PLPP vom Abdecklappen ausgiebig mit PBS zu waschen. Dann inkubieren Sie den Coverlip mit 50 Mikrogramm pro Milliliter Laminin für 30 Minuten, gefolgt von einer weiteren Wäsche mit PBS, wie gezeigt. Um eine embryonale Ratten-Hippocampus-Neuronenkultur auf den Mikromusterabdeckungen einzurichten, rehydrieren Sie die Glasobjektträger nach der letzten Wäsche mit neuronalem Zellkulturmedium.Samen Sie fünfmal 10 bis zur vierten Ratte Hippocampus-Neuronen, die in neurobasalem Medium suspendiert sind, angereichert mit 3% Pferdeserum pro Quadratzentimeter auf jede mikrostrukturierte Abdeckung für eine 24-stündige Inkubation in einem 5% Kohlendioxid-Inkubator bei 37 Grad Celsius. Zentrifugieren Sie dissoziierte Glioblastomzellen für fünf Minuten bei 1.000 U / min und resuspend das Pellet in Glioblastom-Zellkulturmedium, dann lagern Sie einmal 10 bis die dritten GBM-Zellen über die mikrostrukturierten Neuronen ab. Für die Live-Cell-Bildgebung der Zellen legen Sie die Co-Kultur auf die Bühne eines invertierten Mikroskops, das mit einer 37-Grad-Celsius-Thermostatkammer ausgestattet ist, und wählen Sie das 20X-Objektiv.Verwenden Sie dann die multidimensionale Erfassungs-Toolbox in der Mikroskopsoftware, um alle zwei Minuten live Hellfeld- und Epifluoreszenz-GFP-Tomatenbilder für 12 Stunden in 16 verschiedenen Positionen zu erfassen, basierend auf der Anzahl der Muster mit Neuronen. Für die neuronale Netzwerkanalyse wählen Sie nach der Bildgebung ein Bild aus dem Stapel aus. Klicken Sie mit der rechten Maustaste auf das Netzwerkwerkzeug, um das entsprechende Optionsdialogfeld zu öffnen und die Einstellungen anzupassen, um eine präzise Segmentierung der Bilder zu erzeugen.Klicken Sie auf OK. Klicken Sie mit der linken Maustaste auf das Netzwerkwerkzeug, um das ausgewählte Bild zu duplizieren und das Bild in die farblichen Kanäle Rot, Grau und Grün aufzuteilen. Wählen Sie den Graukanal aus und führen Sie eine Kontrastdehnungsverbesserung durch, um die Trennung zwischen den verschiedenen Bereichen zu verbessern. Verwenden Sie den Sobel-Kantendetektor, um die 2D-Signalverarbeitungsfaltung durchzuführen, die unter dem Befehl "Kantensuche" gruppiert ist.Für die doppelte Filterung wenden Sie Gaußsche Unschärfe und einen Medianfilter an, um das Rauschen zu reduzieren und das Objektsignal zu glätten. Um in Maske zu konvertieren, führen Sie angepasste Schwellenwertalgorithmen aus, um ein binäres Bild mit Schwarzweißpixeln zu erhalten. Als nächstes skelettieren Sie den Zellbereich in ein einfaches Netzwerk und verwenden Filterpartikel, um kleine nicht vernetzte Partikel in den Ergebnissen zu entfernen.Netzwerkfilterpartikel in einem Netzwerkabbild. Um rote und grüne Kanäle zu erhalten, führen Sie eine doppelte Filterung durch und konvertieren Sie sie in eine Maske, wie mit der angepassten Schwellenwertmethode demonstriert. Verwenden Sie Analysepartikel, um die Zellmorphologie im binären grünen Bild zu bestimmen.Verwenden Sie den Operator oder , um alle Kanäle mit ihren interessengebieten zusammenzuführen und ihre Anfangsfarbe in ein einfaches RGB-Bild anzupassen. Um eine Einzelzellmotilitätsanalyse durchzuführen, klicken Sie mit der rechten Maustaste auf das Einzelzellen-Tracking-Tool, um das entsprechende Optionsdialogfeld zu öffnen und die Einstellungen anzupassen, um eine präzise Segmentierung der Bilder zu erzeugen. Klicken Sie auf OK und klicken Sie mit der linken Maustaste auf Einzelzellenverfolgung, um den grauen Kanal zu entfernen.Um ein Bild zu generieren, das einem Bildstapel entsprechend der Zeit entspricht, wenden Sie Z-Projektion und Doppelfilter an und konvertieren Sie, um die von den Zellen hinterlassenen Spuren zu maskieren. Entfernen Sie die kleinen Partikel aus dem binären roten und grünen Bild, wie gezeigt. Verwenden Sie das Werkzeug "Region of Interest", um jede Kontur der Zellablaufverfolgung auszuwählen, und aktivieren Sie das Kontrollkästchen Kantenerkennung überspringen im Dialogfenster Optionen.Isolieren Sie den roten Kanal auf dem ursprünglichen Stapel und wählen Sie einen gewünschten Bereich aus. Filtern Sie alle Bilder doppelt und konvertieren Sie sie in eine Maske, damit die Zentroid-XY-Position jedes binarisierten Kerns bestimmt werden kann. Die XY-Positionen können verwendet werden, um die mittlere quadratische Verschiebung, das Richtungsverhältnis und die durchschnittliche Geschwindigkeit für die Zelle zu berechnen.Für die Tracking-Analyse mehrerer Zellen klicken Sie mit der rechten Maustaste auf das Tracking-Tool, um das entsprechende Optionsdialogfeld zu öffnen und die Einstellungen anzupassen, um eine präzise Segmentierung der Bilder zu erzeugen. Klicken Sie mit der linken Maustaste auf das Tracking-Tool, um den grauen Kanal zu entfernen. Teilen Sie die roten und grünen Kanäle auf, filtern Sie doppelt und konvertieren Sie sie in Maske.Verwenden Sie dann den Befehl bildrechner mit dem und-Operator, um die Kanäle zusammenzuführen, wobei sich nur das Kernsignal in den Membranen befindet, und berechnen Sie das Trajektoriendiagramm, die mittlere quadratische Verschiebung, das Richtungsverhältnis und die durchschnittliche Geschwindigkeit für die Zellen, wie gezeigt. Fluoreszierendes GBM, das mit gemusterten Neuronen kokulturiert wird, modifizieren schnell ihre Form und zeigen eine Migration entlang neuronaler Erweiterungen in einer zufälligen Bewegung. GBM-Zellen, die auf Neuronen gesät sind, zeigen eine längliche Form mit mehreren Vorsprüngen, die den Neuronenspuren folgen, während die Zellen ihre abgerundete Form behalten, wenn sie auf Laminin kultiviert werden.In späteren Stadien der Kultur können dünne Vorsprünge beobachtet werden, die mit Zellen in GBM-neuronalen Co-Kulturen verbunden sind. GBM-Zellen, die auf Neuronen ausgesät sind, zeigen eine größere Migrationskapazität als GBM-Zellen, die auf Laminin gesät werden, wie in diesen Trajektoriendiagrammen beobachtet. Die Analyse des fluoreszierenden Zusammenflusses der Zellen zeigt, dass über einen Beobachtungszeitraum von 500 Minuten mehr Zellmigration beobachtet wird, wenn die Sphäroide mit Neuronen kokuliert werden, als wenn die Zellen nur auf Laminin kultiviert werden.Tatsächlich ist am Ende der Analyse fast die Hälfte des Musters mit GBM-Zellen bedeckt, während die auf Laminin kultivierten Sphäroide nicht an der Abdeckungslippe hafteten. Abhängig von den biologischen Fragen, die man beantworten möchte, sollte man darauf achten, dass das Musterdesign und auch die Zelldichte repräsentativ für die in vivo Bedingungen sind. Die Zellen können durch konfokale Mikroskopie fixiert und abgebildet werden.Live-Imaging ist auch möglich, da unsere Methode die Bildgebungsmöglichkeiten nicht beeinträchtigt. Diese Technik eignet sich gut für die Untersuchung molekularer Interaktionen, wie z.B. des metabolischen Austauschs zwischen Glioblastomzellen und Neuronen. Es ermöglicht die Erforschung funktionsbiologischer Prozesse.Hochdurchsatzexperimente können auch für klinische Zwecke durchgeführt werden.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Coculture Assays to Study Macrophage and Microglia Stimulation of Glioblastoma Invasion

Cokultur Assays zur Untersuchung Makrophagen und Mikroglia Stimulation von Glioblastom-Invasion

Glioblastoma multiforme (grade IV glioma) is a very aggressive human cancer with a median survival of 1 year post diagnosis. Despite the increased ...

Forschung

Krebsforschung

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

Das<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginalscheibe Tumormodell: Visualisierung und Quantifizierung von Genexpression und Tumorinvasivität mit Genetischen Mosaiken

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Flow Cytometry-based Drug Screening System for the Identification of Small Molecules That Promote Cellular Differentiation of Glioblastoma Stem Cells

Flow Cytometry-based Drug Screening-System für die Identifizierung von kleinen Molekülen, die zelluläre Differenzierung von Stammzellen Glioblastom zu fördern

Glioblastoma (GBM) is the most common and most lethal primary brain tumor in adults, causing roughly 14,000 deaths each year in the U.S. alone. Median ...

Using the Dot Assay to Analyze Migration of Cell Sheets

Mit Hilfe der Dot-Assay, Migration der Zelle Blätter zu analysieren

Although complex organisms appear static, their tissues are under a continuous turnover. As cells age, die, and are replaced by new cells, cells move ...

Acellular and Cellular Lung Model to Study Tumor Metastasis

Azelluläre und zellulären Lunge Modell Tumor Metastasen zu studieren

It is difficult to isolate tumor cells at different points of tumor progression. We created an ex vivo lung model that can show the interaction of tumor ...

Live-Cell Imaging Assays to Study Glioblastoma Brain Tumor Stem Cell Migration and Invasion

Live Cell Imaging-Assays Studie Glioblastom Gehirn Tumor Stammzellen Migration und Invasion

Glioblastoma (GBM) is an aggressive brain tumor that is poorly controlled with the currently available treatment options. Key features of GBMs include ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

Mesenchymale Stammzellen isoliert von Pulpagewebe und Kokultur mit Krebszellen ihre Interaktionen zu untersuchen

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer

Verwendung von Mikroarrays zur Vernehmung von Mikroumweltauswirkungen auf zelluläre Phänotypen bei Krebs

Understanding the impact of the microenvironment on the phenotype of cells is a difficult problem due to the complex mixture of both soluble growth ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

Isolierung von Stammzellen aus 3-dimensionalen Sphäroidkulturen

Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

Studying the Effects of Tumor-Secreted Paracrine Ligands on Macrophage Activation using Co-Culture with Permeable Membrane Supports

Untersuchung der Auswirkungen von tumorgeheimen Parakrinliganden auf die Makrophagenaktivierung mit Co-Culture mit permeableMembranen unterstützt

Tumor-derived paracrine signaling is an overlooked component of local immunosuppression and can lead to a permissive environment for continued cancer ...