Name: co-culture of glioblastoma stem-like cells on patterned neurons to study migration and cellular interactions
Uploaded: 2021-02-24T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Co-culture of Glioblastoma Stem-like Cells on Patterned Neurons to Study Migration and Cellular Interactions at JoVE.com

Este trabalho foi apoiado pela Fondation ARC 2020, Ligue Contre le Cancer (Comite de la Gironde), ARTC, Plan Cancer 2021, INCA PLBIO. Alveole é apoiado pela Agence Nationale de la Recherche (Grant Labex BRAIN ANR-10-LABX-43). Joris Guyon é bolsista do Hospital Universitário de Toulouse (CHU Toulouse).

O consentimento por escrito informado foi obtido de todos os pacientes (do Hospital Haukeland, Bergen, Noruega, de acordo com os regulamentos do comitê de ética local). Este protocolo segue as diretrizes dos comitês de ética em pesquisa humana e animal da Universidade de Bordeaux. Ratos grávidas foram alojados e tratados na instalação animal da Universidade de Bordeaux. A eutanásia de um rato grávida cronometrado E18 foi realizada usando CO2. Todos os procedimentos de animais foram feitos de acordo co...

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	<li>Shergalis, A., Bankhead, A., Luesakul, U., Muangsin, N., Neamati, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+challenges+and+opportunities+in+treating+glioblastoma.">Current challenges and opportunities in treating glioblastoma.</a> Pharmacology Reviews. 70, 412-445 (2018).</li><li>Scherer, H. 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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Co-cultures+with+stem+cell-derived+human+sensory+neurons+reveal+regulators+of+peripheral+myelination.">Co-cultures with stem cell-derived human sensory neurons reveal regulators of peripheral myelination.</a> Brain. 140, 898-913 (2017).</li><li>Linkous, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+patient-derived+glioblastoma+with+cerebral+organoids.">Modeling patient-derived glioblastoma with cerebral organoids.</a> Cell Reports. 26, 3203-3211 (2019).</li><li>Han, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interfering+with+long+non-coding+RNA+MIR22HG+processing+inhibits+glioblastoma+progression+through+suppression+of+Wnt/&#946;-catenin+signalling.">Interfering with long non-coding RNA MIR22HG processing inhibits glioblastoma progression through suppression of Wnt/&#946;-catenin signalling.</a> Brain. 143, 512-530 (2020).</li></ol>

Glioblastomas invadem extensivamente o parenchyma usando diferentes modos: co-opção de vasos sanguíneos circundantes, invasão intersticiacional ou invasão em WMTs18. Este último modo não é bem caracterizado na literatura devido à dificuldade em encontrar modelos in vitro ou in vivo adequados relacionados à invasão de WMT. Aqui, foi proposto um modelo simplificado no qual neurônios de roedores cultivados foram padronizados em superfícies revestidas de laminina, e cél...

Gliomas malignos primários, incluindo GBMs, são tumores devastadores, com uma taxa média de sobrevivência de 12 a 15 meses relatada para pacientes com GBM. A terapia atual conta com grande ressecção de massa tumoral e quimioterapia aliada à radioterapia, que só aumenta a taxa de sobrevivência em poucos meses. As falhas terapêuticas estão intimamente relacionadas ao mau fornecimento de drogas através da barreira hematoencefálica (BBB) e ao crescimento invasivo em espaços perivasculares, meninges e ao longo das OTN1. A invasão perivascular, também chamada de co-opção vascular, é um processo bem estudado, e os mecanismos moleculares estão começando a ser elucidados; no entanto, o processo de invasão de células GBM ao longo de WMTs não é bem compreendido. As células tumorais migram para o cérebro saudável ao longo das estruturas secundárias de Scherer2. De fato, há quase um século, Hans-Joachim Scherer descreveu as rotas invasivas do GBM, que agora são referidas como satellitose perineuronal, satellitose perivascular, propagação subpial e invasão ao longo do WMT (Figura 1A).
Algumas quimiocinas e seus receptores, como o fator de crescimento estroboma derivado de células estromal 1α (SDF1α) e c-X-C, o receptor de quimioterapia 4 (CXCR4), mas não o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), parecem estar implicados na invasão do TNM3. Mais recentemente, um eixo TRANScelular NOTCH1-SOX2 mostrou-se um importante caminho na invasão de WMT de células GBM4. Os autores descreveram como células-tronco GBM invadem o parênquim cerebral em neurônios parcialmente nãoomiados, sugerindo a destruição de baias de mielina por células GBM. Um marco foi alcançado em 2019, quando três artigos foram publicados de forma consecutiva na revista Nature, destacando o papel da atividade elétrica no desenvolvimento do glioma5,6. O trabalho seminal de Monje e colaboradores lançou luz sobre o papel central da atividade elétrica na secreção da neuroligina-3, que promove o desenvolvimento do glioma.
Winkler e colaboradores descreveram as conexões entre as células GBM (microtubos) sendo cruciais em etapas invasivas e, ultimamente, interações entre células GBM e neurônios através de sinapses neuroglioma recém-descritas. Essas estruturas favorecem a estimulação glutamatergica de receptores de ácido α-amino-3-hidroxi-5-metil-4-isoxazolepropionic ácido (AMPA) localizados na membrana celular GBM, que promove o desenvolvimento e invasão do tumor. A invasão de células tumorais é um processo central na disseminação de metástases ou focos secundários distantes, como observado em pacientes com GBM. Vários fatores foram identificados como importantes na invasão do GBM, como o trombospondina-1, um fator de crescimento transformador beta (proteína matricellular regulada por TGFβ, ou o receptor de quimioterapia CXCR3)7,8.
Aqui, um modelo biomimético simplificado foi descrito para estudar a invasão gbm, em que os neurônios são padronizados em trilhas de laminina, e as células GBM são semeadas sobre ele, como células únicas ou como esferoides(Figura 1B). As duas configurações experimentais visam recapitular a invasão sobre neurônios, o que é observado em GBM9,10,11. Tais modelos foram desenvolvidos no passado como biomateriais de nanofibra alinhados (eletropinning de conchas centrais) que permitem estudar a migração celular através da modulação de propriedades mecânicas ou químicas12. O modelo de cocultura descrito neste artigo permite uma melhor compreensão de como as células GBM escapam nos neurônios definindo novas vias moleculares envolvidas nesse processo.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>(3-aminopropyl) triethoxysilane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>440140-100ML</td>
			<td>The amino group is useful for the bioconjugation of mPEG-SVA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well round-bottom plate</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>2582624</td>
			<td>Used to prepare spheroids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accutase</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A11105-01</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C (long-term) or 4 &#176;C (short-term), sphere dissociation enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12587</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basic Fibroblast Growth Factor</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-18B</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Countess Cell Counting ChamberSlides</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>C10283</td>
			<td>Used to cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips</td>
			<td>Marienfeld</td>
			<td>111580</td>
			<td>Cell culture substrate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dessicator cartridges</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Z363456-6EA</td>
			<td>Used to reduce mosture during (3-aminopropyl) triethoxysilane treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS 10x</td>
			<td>Pan Biotech</td>
			<td>P04-53-500</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji software, MTrack2 macro</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
			<td>Used to analyze pictures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flask 75 cm&#178;</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>10497302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H8264-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3149-100KU</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td></td>
			<td>114956-81-9</td>
			<td>Promotes neuronal adhesion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leonardo software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>loading of envisioned micropatterns</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaMorph Software&#160;</td>
			<td>Molecular Devices LLC</td>
			<td>NA</td>
			<td>Microscopy automation software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylcellulose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M0512</td>
			<td>Diluted in NBM for a 2% final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103-049</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon TiE (S Fluor, 20x/0.75 NA)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>inverted microscope equipped with a motorized stage&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin - Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLPP</td>
			<td>Alveole</td>
			<td>PLPPclassic_1ml</td>
			<td>Photoinitiator used to degrade the PEG brush</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly(ethylene glycol)-Succinimidyl Valerate (mPEG-SVA)</td>
			<td>Laysan Bio</td>
			<td>VA-PEG-VA-5000-5g</td>
			<td>Used as an anti-fouling coating</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PRIMO</td>
			<td>Alveole</td>
			<td>PRIMO1</td>
			<td>Digital micromirror device (DMD)-based UV projection apparatus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue 0.4%</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>T10282</td>
			<td>Used for cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4049-100ML</td>
			<td>Used to detach adherent cells</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

co-culture of glioblastoma stem-like cells on patterned neurons to study migration and cellular interactions

Glioblastomas (GBMs), gliomas malignos de grau IV, são um dos tipos mais mortais de câncer humano por causa de suas características agressivas. Apesar dos avanços significativos na genética desses tumores, como as células GBM invadem o parenchyma cerebral saudável não é bem compreendida. Notavelmente, foi demonstrado que as células GBM invadem o espaço peritumoral através de diferentes rotas; o principal interesse deste artigo é a rota ao longo de tratos de matéria branca (WMTs). As interações das células tumorais com os componentes das células nervosas peritumorais não são bem caracterizadas. Aqui, foi descrito um método que avalia o impacto dos neurônios na invasão celular GBM. Este artigo apresenta um ensaio avançado de cocultura in vitro que imita a invasão de WMT analisando a migração de células-tronco GBM em neurônios. O comportamento das células GBM na presença de neurônios é monitorado usando um procedimento de rastreamento automatizado com software de código aberto e de acesso livre. Este método é útil para muitas aplicações, em particular, para estudos funcionais e mecanicistas, bem como para analisar os efeitos de agentes farmacológicos que podem bloquear a migração celular GBM em neurônios.

Neurônios padronizados co-cultivados com células GBM fluorescentes foram preparados como descrito na seção de protocolo, e experimentos de rastreamento foram realizados. As células GBM modificaram rapidamente sua forma enquanto migravam nos neurônios(Figura 1B: painel 6 e vídeo 1). As células migraram ao longo das extensões neuronais, em um movimento aleatório(Vídeo 1). Células GBM fluorescentes e neurônios não fluorescentes po...

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Co-culture of Glioblastoma Stem-like Cells on Patterned Neurons to Study Migration and Cellular Interactions

Aqui, apresentamos um ensaio de cocultura fácil de usar para analisar a migração de glioblastoma (GBM) em neurônios padronizados. Desenvolvemos uma macro no software FiJi para fácil quantificação da migração celular GBM em neurônios, e observamos que os neurônios modificam a capacidade invasiva celular GBM.

Co-cultura de células-tronco semelhantes ao Glioblastoma em neurônios padronizados para estudar migração e interações celulares

Glioblastomas (GBMs), grade IV malignant gliomas, are one of the deadliest types of human cancer because of their aggressive characteristics. Despite ...

Glioblastomas são tumores cerebrais devastadores com alto perfil invasivo. Este sistema de cocultura imita a migração de células glioblastoma em neurônios para recapitular uma das rotas invasivas observadas em pacientes. A geometria e composição do nosso modelo de co-cultura é precisamente controlada.Facilita uma melhor reprodutibilidade e também uma quantificação direta de processos biológicos complexos. Este método pode ser adaptado ao diagnóstico clínico por co-cultivo de células e neurônios de glioblastoma recém-dissociados. Define um índice clínico, que é muito importante como desfecho clínico.Nosso método também pode ser usado para quantificar outras células migratórias, como fibroblastos ou células imunes. Demonstrando o procedimento será Joris Guyon, um estudante de doutorado da minha equipe. Para fazer um substrato para o micropatterning, trate as tampas de vidro circular de 18 milímetros por ativação de ar ou plasma por cinco minutos antes de colocar as tampas em um dessecador com 100 microlitres de trietoxisilano por uma hora e, em seguida, incubar uma solução de PEG-SVA a 100 mililitos por mililitro por uma hora.Para deposição de gel, no final da incubação, adicione três microliters de PLPP e 50 microliters de etanol absoluto no centro do slide e espere até que seca completamente. Para micropatters de slides de vidro, monte o deslizamento de tampa em uma câmara Ludin e coloque a câmara no palco de um microscópio equipado com um sistema de foco automático. Após a imagem, carregue as imagens de micropattern no software.Após o sequenciamento automático da iluminação UV, use uma pipeta para lavar o PLPP do deslizamento de tampas extensivamente com PBS. Em seguida, incubar o deslizamento de cobertura com 50 microgramas por mililitro de laminina por 30 minutos, seguido de outra lavagem com PBS como demonstrado. Para configurar uma cultura de neurônio hipocampal de ratos embrionários nas tampas de micropattern, após a última lavagem, reidratar os slides de vidro com meio de cultura celular neuronal.Semente cinco vezes 10 para o quarto rato neurônios hipocampais suspensos em meio neurobásico enriquecido com 3% de soro de cavalo por centímetro quadrado em cada deslizamento de cobertura micropatterada para uma incubação de 24 horas em uma incubadora de dióxido de carbono de 5% a 37 graus Celsius. Centrífuga dissociada células de glioblastoma por cinco minutos a 1.000 RPM e resuspensa a pelota no meio de cultura celular glioblastoma, em seguida, depositar uma vez 10 para o terceiro GBM células sobre os neurônios micropatterados. Para imagens de células vivas das células, coloque a co-cultura no palco de um microscópio invertido equipado com uma câmara de termostato Celsius de 37 graus e selecione o objetivo de 20X.Em seguida, use a caixa de ferramentas de aquisições multidimensionais no software de microscópio para adquirir imagens vivas de tomate Brightfield e epifluorescência GFP a cada dois minutos por 12 horas em 16 posições diferentes com base no número de padrões com neurônios. Para análise da rede neuronal, após a imagem, selecione uma imagem da pilha. Clique com o botão direito do mouse na ferramenta de rede para abrir a caixa de diálogo de opções correspondentes e ajustar as configurações para produzir uma segmentação precisa das imagens.Clique em OK. Clique à esquerda na ferramenta de rede para duplicar a imagem selecionada e dividir a imagem nos canais de cores vermelho, cinza e verde. Selecione o canal cinza e realize o aprimoramento do estiramento de contraste para melhorar a separação entre as diferentes áreas. Use o detector de bordas Sobel para executar a convolução de processamento de sinal 2D agrupada sob o comando find edge.Para filtragem dupla, aplique desfoque gaussiano e um filtro mediano para reduzir o ruído e suavizar o sinal do objeto. Para converter em máscara, execute algoritmos de limiar adaptados para obter uma imagem binária com pixels preto e branco. Em seguida, eleletize a área celular em uma rede simples e use partículas de filtro para remover pequenas partículas não-em rede nos resultados.Partículas de filtro de rede em uma imagem de rede. Para obter canais vermelhos e verdes, realize filtragem dupla e converta-se em máscara, conforme demonstrado usando o método de limiar adaptado. Use partículas de análise para determinar a morfologia celular na imagem verde binária.Use o ou operador para mesclar todos os canais usando suas regiões de interesse e reajustar sua cor inicial em uma imagem RGB simples. Para realizar uma análise de motilidade unicelular, clique com o botão direito do mouse na ferramenta de rastreamento de célula única para abrir a caixa de diálogo de opções correspondentes e ajustar as configurações para produzir uma segmentação precisa das imagens. Clique em OK e clique à esquerda no rastreamento de célula única para remover o canal cinza.Para gerar uma imagem correspondente a uma pilha de imagens de acordo com o tempo, aplique projeção Z e filtro duplo e converta para mascarar as trilhas deixadas pelas células. Remova as pequenas partículas da imagem binária vermelha e verde, como demonstrado. Use a ferramenta região de interesse para selecionar cada contorno do traço da célula e verificar a caixa de detecção de borda de pular na janela de diálogo de opções.Isole o canal vermelho na pilha original e selecione uma região de interesse. Filtre duas vezes todas as imagens e converta-se em máscara para permitir que a posição centroide XY de cada núcleo binarizado seja determinada. As posições XY podem ser usadas para calcular o deslocamento quadrado médio, a razão de direcionalidade e a velocidade média para a célula.Para análise de rastreamento de várias células, clique com o botão direito do mouse na ferramenta de rastreamento para abrir a caixa de diálogo de opções correspondentes e ajustar as configurações para produzir uma segmentação precisa das imagens. Clique à esquerda na ferramenta de rastreamento para remover o canal cinza. Divida os canais vermelho e verde, filtro duplo e converta em máscara.Em seguida, use o comando da calculadora de imagens com o operador e o operador para mesclar os canais deixando apenas o sinal do núcleo localizado dentro das membranas e calcular o enredo de trajetória, deslocamento quadrado médio, razão de direcionalidade e velocidade média para as células como demonstrado. GbM fluorescente co-cultivado com neurônios padronizados rapidamente modificam sua forma e mostram migração ao longo de extensões neuronais em um movimento aleatório. As células GBM semeadas em neurônios exibem uma forma alongada com múltiplas saliências que seguem as trilhas dos neurônios enquanto as células mantêm sua forma arredondada quando cultivadas em laminina.Em estágios posteriores da cultura, saliências finas ligando-se às células podem ser observadas em co-culturas neuronais GBM. As células GBM semeadas em neurônios demonstram uma maior capacidade migratória do que as células GBM semeadas em laminina, como observado nessas parcelas de trajetória. A análise da confluência fluorescente das células demonstra que, ao longo de um período de observação de 500 minutos, mais migração celular é observada quando os esferoides são co-cultivados com neurônios do que quando as células são cultivadas apenas em laminina.De fato, ao final da análise, quase metade do padrão é coberto com células GBM, enquanto os esferoides cultivados na laminina permanecem não aadesivos ao deslizamento de cobertura. Dependendo das questões biológicas que você deseja responder, deve-se ter cuidado para que o desenho do padrão e também a densidade celular sejam representativas das condições in vivo. As células podem ser fixadas e imagens por microscopia confocal.Imagens ao vivo também são possíveis, uma vez que nosso método não prejudica as capacidades de imagem. Esta técnica é adequada para estudar a interação molecular, como trocas metabólicas entre células de glioblastoma e neurônios. Permite a exploração de processos biológicos de função.Experimentos de alto rendimento também podem ser feitos para fins clínicos.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Coculture Assays to Study Macrophage and Microglia Stimulation of Glioblastoma Invasion

Co-cultura Ensaios para estudar macrófagos e Microglia Estimulação do Glioblastoma Invasion

Glioblastoma multiforme (grade IV glioma) is a very aggressive human cancer with a median survival of 1 year post diagnosis. Despite the increased ...

Pesquisa do câncer

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

o<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginal Modelo Disc Tumor: visualização e quantificação da expressão gênica e invasão tumoral Usando Mosaicos Genéticos

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Flow Cytometry-based Drug Screening System for the Identification of Small Molecules That Promote Cellular Differentiation of Glioblastoma Stem Cells

Drogas baseada em citometria de fluxo sistema de triagem para a identificação de pequenas moléculas que promovem a diferenciação celular de células-tronco Glioblastoma

Glioblastoma (GBM) is the most common and most lethal primary brain tumor in adults, causing roughly 14,000 deaths each year in the U.S. alone. Median ...

Using the Dot Assay to Analyze Migration of Cell Sheets

Usando o ensaio de ponto para analisar a migração de células de folhas

Although complex organisms appear static, their tissues are under a continuous turnover. As cells age, die, and are replaced by new cells, cells move ...

Acellular and Cellular Lung Model to Study Tumor Metastasis

Modelo de pulmão acelular e celular para estudar o Tumor metástase

It is difficult to isolate tumor cells at different points of tumor progression. We created an ex vivo lung model that can show the interaction of tumor ...

Live-Cell Imaging Assays to Study Glioblastoma Brain Tumor Stem Cell Migration and Invasion

Imagem latente da viver-pilha ensaios de migração de células-tronco do estudo Glioblastoma cerebral Tumor e invasão

Glioblastoma (GBM) is an aggressive brain tumor that is poorly controlled with the currently available treatment options. Key features of GBMs include ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

Isolamento de células-tronco mesenquimais de tecido pulpar e co-cultura com células cancerosas para estudar suas interações

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer

Usando Microarrays para interrogar o impacto microambiental em phenotypes celulares no cancro

Understanding the impact of the microenvironment on the phenotype of cells is a difficult problem due to the complex mixture of both soluble growth ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

Isolamento de células-tronco a partir de culturas esferóides tridimensionais

Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

Studying the Effects of Tumor-Secreted Paracrine Ligands on Macrophage Activation using Co-Culture with Permeable Membrane Supports

Estudando os efeitos dos ligantes paracrinos tumorais na ativação do macrófago usando a co-cultura com suportes permeáveis da membrana

Tumor-derived paracrine signaling is an overlooked component of local immunosuppression and can lead to a permissive environment for continued cancer ...