Name: co-culture of glioblastoma stem-like cells on patterned neurons to study migration and cellular interactions
Uploaded: 2021-02-24T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Co-culture of Glioblastoma Stem-like Cells on Patterned Neurons to Study Migration and Cellular Interactions at JoVE.com

Este trabajo fue apoyado por fondation ARC 2020, Ligue Contre le Cancer (Comite de la Gironde), ARTC, Plan Cancer 2021, INCA PLBIO. Alveole cuenta con el apoyo de la Agence Nationale de la Recherche (Grant Labex BRAIN ANR-10-LABX-43). Joris Guyon ha recibido una beca del Hospital Universitario de Toulouse (CHU Toulouse).

Se obtuvo el consentimiento informado por escrito de todos los pacientes (del Hospital Haukeland, Bergen, Noruega, de acuerdo con las regulaciones del comité de ética local). Este protocolo sigue las directrices de los comités de ética de la investigación humana y animal de la Universidad de Burdeos. Las ratas embarazadas fueron alojadas y tratadas en las instalaciones para animales de la Universidad de Burdeos. La eutanasia de una rata embarazada de E18-timed fue realizada usando elCO2. Todos los procedi...

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	<li>Shergalis, A., Bankhead, A., Luesakul, U., Muangsin, N., Neamati, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+challenges+and+opportunities+in+treating+glioblastoma.">Current challenges and opportunities in treating glioblastoma.</a> Pharmacology Reviews. 70, 412-445 (2018).</li><li>Scherer, H. 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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Co-cultures+with+stem+cell-derived+human+sensory+neurons+reveal+regulators+of+peripheral+myelination.">Co-cultures with stem cell-derived human sensory neurons reveal regulators of peripheral myelination.</a> Brain. 140, 898-913 (2017).</li><li>Linkous, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+patient-derived+glioblastoma+with+cerebral+organoids.">Modeling patient-derived glioblastoma with cerebral organoids.</a> Cell Reports. 26, 3203-3211 (2019).</li><li>Han, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interfering+with+long+non-coding+RNA+MIR22HG+processing+inhibits+glioblastoma+progression+through+suppression+of+Wnt/&#946;-catenin+signalling.">Interfering with long non-coding RNA MIR22HG processing inhibits glioblastoma progression through suppression of Wnt/&#946;-catenin signalling.</a> Brain. 143, 512-530 (2020).</li></ol>

Los glioblastomas invaden ampliamente el parénquima mediante el uso de diferentes modos: cooptación de los vasos sanguíneos circundantes, invasión intersticial o invasión en las TMM18. Este último modo no se caracteriza bien en la literatura debido a la dificultad en encontrar los modelos ines vitro o in vivo convenientes relacionados con la invasión de WMT. Aquí, se ha propuesto un modelo simplificado en el que las neuronas de roedores cultivadas se modelaron en superfic...

Las gliomas malas primarias, incluyendo GBMs, son tumores devastadores, con una tasa de supervivencia media de 12 a 15 meses divulgada para los pacientes de GBM. La terapia actual se basa en la resección de la masa tumoral grande y la quimioterapia juntadas con la radioterapia, que extiende solamente la tasa de supervivencia por pocos meses. Los fracasos terapéuticos están íntimamente relacionados con la mala administración de fármacos a través de la barrera hematoencefálica (BBB) y con el crecimiento invasivo en espacios perivascularios, meninges y a lo largo de las TMM1. La invasión perivascularia, también llamada cooptación vascular, es un proceso bien estudiado, y los mecanismos moleculares están empezando a dilucidarse; sin embargo, el proceso de invasión de células GBM a lo largo de wmts no se entiende bien. Las células tumorales migran al cerebro sano a lo largo de las estructuras secundarias de Scherer2. De hecho, hace casi un siglo, Hans-Joachim Scherer describió las rutas invasivas de gbm, que ahora se conocen como satellitosis perineuronal, satellitosis perivascularia, propagación subagal, e invasión a lo largo de la WMT (Figura 1A).
Algunas quimiocinas y sus receptores, como el factor-1α derivado de células del estroma (SDF1α) y el receptor de quimioquinas C-X-C (CXCR4), pero no el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), parecen estar implicados en la invasión de WMT3. Más recientemente, se ha demostrado que un eje NOTCH1-SOX2 transcelular es una vía importante en la invasión WMT de células GBM4. Los autores describieron cómo gbm stem-like células invaden el parénquima cerebral en las neuronas parcialmente unmyelinated, lo que sugiere la destrucción de las hellas de mielina por las células GBM. Un hito se alcanzó en 2019 cuando se publicaron de formaconsecutiva tres artículos en la revista Nature, subrayando el papel de la actividad eléctrica en el desarrollo del glioma5,6. El trabajo seminal de Monje y colaboradores arrojó luz sobre el papel central de la actividad eléctrica en la secreción de neuroligina-3, que promueve el desarrollo del glioma.
Winkler y colaboradores describieron las conexiones entre las células GBM (microtubos) siendo cruciales en los pasos invasivos, y últimamente, las interacciones entre las células GBM y las neuronas a través de las sinapsis neuroglioma recientemente descritas. Esas estructuras favorecen el estímulo glutamatérgico de los receptores α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid (AMPA) situados en la membrana celular de GBM, que promueve el desarrollo y la invasión del tumor. La invasión de células tumorales es un proceso central en la diseminación de metástasis o focos secundarios distantes, como se observa en pacientes con GBM. Se han identificado varios factores importantes en la invasión de GBM, como la trombospondina-1, un factor de crecimiento transformante beta (proteína matricelular regulada por TGFβ, o el receptor de quimioquinas CXCR3)7,8.
Aquí, se ha descrito un modelo biomimético simplificado para estudiar la invasión gbm, en la que las neuronas se modelan en pistas de laminina, y las células GBM se siembran en ella, como uni células o como esferoides (Figura 1B). Los dos entornos experimentales están dirigidos a recapitular la invasión en las neuronas, que se observa en GBM9,10,11. Tales modelos han sido desarrollados en el pasado como biomateriales de nanofibra alineados (electrospinning core-shell) que permiten estudiar la migración celular mediante la modulación de propiedades mecánicas o químicas12. El modelo de co-cultivo descrito en este artículo permite una mejor comprensión de cómo las células GBM escapan en las neuronas mediante la definición de nuevas vías moleculares involucradas en este proceso.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>(3-aminopropyl) triethoxysilane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>440140-100ML</td>
			<td>The amino group is useful for the bioconjugation of mPEG-SVA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well round-bottom plate</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>2582624</td>
			<td>Used to prepare spheroids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accutase</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A11105-01</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C (long-term) or 4 &#176;C (short-term), sphere dissociation enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12587</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basic Fibroblast Growth Factor</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-18B</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Countess Cell Counting ChamberSlides</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>C10283</td>
			<td>Used to cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips</td>
			<td>Marienfeld</td>
			<td>111580</td>
			<td>Cell culture substrate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dessicator cartridges</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Z363456-6EA</td>
			<td>Used to reduce mosture during (3-aminopropyl) triethoxysilane treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS 10x</td>
			<td>Pan Biotech</td>
			<td>P04-53-500</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji software, MTrack2 macro</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
			<td>Used to analyze pictures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flask 75 cm&#178;</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>10497302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H8264-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3149-100KU</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td></td>
			<td>114956-81-9</td>
			<td>Promotes neuronal adhesion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leonardo software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>loading of envisioned micropatterns</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaMorph Software&#160;</td>
			<td>Molecular Devices LLC</td>
			<td>NA</td>
			<td>Microscopy automation software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylcellulose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M0512</td>
			<td>Diluted in NBM for a 2% final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103-049</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon TiE (S Fluor, 20x/0.75 NA)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>inverted microscope equipped with a motorized stage&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin - Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLPP</td>
			<td>Alveole</td>
			<td>PLPPclassic_1ml</td>
			<td>Photoinitiator used to degrade the PEG brush</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly(ethylene glycol)-Succinimidyl Valerate (mPEG-SVA)</td>
			<td>Laysan Bio</td>
			<td>VA-PEG-VA-5000-5g</td>
			<td>Used as an anti-fouling coating</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PRIMO</td>
			<td>Alveole</td>
			<td>PRIMO1</td>
			<td>Digital micromirror device (DMD)-based UV projection apparatus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue 0.4%</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>T10282</td>
			<td>Used for cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4049-100ML</td>
			<td>Used to detach adherent cells</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

co-culture of glioblastoma stem-like cells on patterned neurons to study migration and cellular interactions

Los glioblastomas (GBMs), gliomas malignos de grado IV, son uno de los tipos más mortales de cáncer humano debido a sus características agresivas. A pesar de los avances significativos en la genética de estos tumores, cómo las células GBM invaden el parénquima cerebral sano no se entiende bien. En particular, se ha demostrado que las células GBM invaden el espacio peritumoral a través de diferentes rutas; el principal interés de este trabajo es la ruta a lo largo de los tractos de materia blanca (WMTs). Las interacciones de las células tumorales con los componentes de la célula nerviosa peritumoral no están bien caracterizadas. Aquí, se ha descrito un método que evalúa el impacto de las neuronas en la invasión celular GBM. Este papel presenta un análisis in vitro avanzado de la co-cultura que mímico la invasión de WMT analizando la migración de GBM vástago-como las células en neuronas. El comportamiento de las células GBM en presencia de neuronas se monitorea mediante el uso de un procedimiento de seguimiento automatizado con software de código abierto y de libre acceso. Este método es útil para muchas aplicaciones, en particular, para estudios funcionales y mecanicistas, así como para analizar los efectos de los agentes farmacológicos que pueden bloquear la migración celular GBM en las neuronas.

Las neuronas modeladas co-cultivadas con las células fluorescentes de GBM fueron preparadas según lo descrito en la sección del protocolo, y los experimentos de seguimiento fueron realizados. Las células GBM modificaron rápidamente su forma mientras migraban sobre las neuronas (Figura 1B:panel 6 y Video 1). Las células migraron a lo largo de las extensiones neuronales, en un movimiento aleatorio (Video 1). Las células fluorescentes GB...

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Co-culture of Glioblastoma Stem-like Cells on Patterned Neurons to Study Migration and Cellular Interactions

Aquí, presentamos un ensayo de co-cultivo fácil de usar para analizar la migración de glioblastoma (GBM) en neuronas modeladas. Desarrollamos una macro en el software FiJi para una fácil cuantificación de la migración de células GBM en las neuronas, y observamos que las neuronas modifican la capacidad invasiva de las células GBM.

Co-cultivo De Glioblastoma Células Madre-como En Las Neuronas Modeladas Para Estudiar La Migración Y Las Interacciones Celulares

Glioblastomas (GBMs), grade IV malignant gliomas, are one of the deadliest types of human cancer because of their aggressive characteristics. Despite ...

Los glioblastomas son tumores cerebrales devastadores con un alto perfil invasivo. Este sistema de co-cultivo imita la migración de las células de glioblastoma en las neuronas para recapitular una de las rutas invasivas observadas en los pacientes. La geometría y composición de nuestro modelo de co-cultivo se controla con precisión.Facilita una mejor reproducibilidad y también una cuantificación directa de procesos biológicos complejos. Este método se puede adaptar a la diagnosis clínica co-cultivando las células y las neuronas recién disociadas del glioblastoma. Define un índice clínico, que es muy importante como resultado clínico.Nuestro método también se puede utilizar para cuantificar otras células migratorias, como fibroblastos o células inmunes. Demostrando el procedimiento estará Joris Guyon, un estudiante de doctorado de mi equipo. Para hacer un sustrato para el micropatterning, tratar 18 milímetros de tapas de vidrio circulares por aire o activación de plasma durante cinco minutos antes de colocar los cubrebocas en un desecador con 100 microlitros de trietoxisilano durante una hora, a continuación, incubar una solución de PEG-SVA a 100 miligramos por mililitro durante una hora.Para la deposición de gel, al final de la incubación, agregue tres microlitros de PLPP y 50 microlitros de etanol absoluto en el centro del portaobjetos y espere hasta que se seque por completo. Para el micropatterning de diapositivas de vidrio, monte el cubrebocas en una cámara Ludin y coloque la cámara en el escenario de un microscopio equipado con un sistema de enfoque automático. Después de la creación de imágenes, cargue las imágenes de micropatrones en el software.Después de la secuenciación automática de iluminación UV, utilice una pipeta para lavar el PLPP de la cubierta extensivamente con PBS. A continuación, incubar el cubrebocas con 50 microgramos por mililitro de laminina durante 30 minutos, seguido de otro lavado con PBS como se ha demostrado. Para establecer un cultivo de neuronas del hipocampo de rata embrionaria en las cubiertas de micropatrones, después del último lavado, rehidrate los portaobjetos de vidrio con medio de cultivo celular neuronal.Semilla cinco veces 10 a las cuartas neuronas del hipocampo de la rata suspendidas en medio neurobasal enriquecido con el suero del caballo del 3%por centímetro cuadrado sobre cada cubrebocas micropatterned para una incubación de 24 horas en una incubadora del dióxido de carbono del 5% en 37 grados de centígrado. Centrífuga disociado células de glioblastoma durante cinco minutos a 1, 000 RPM y resuspend la pelotilla en el medio de cultivo celular de glioblastoma, a continuación, depositar una vez 10 a las terceras células GBM sobre las neuronas micropatterned. Para obtener imágenes de células vivas de las células, coloque el co-cultivo en el escenario de un microscopio invertido equipado con una cámara de termostato de 37 grados Celsius y seleccione el objetivo 20X.A continuación, utilice la caja de herramientas de adquisiciones multidimensionales en el software de microscopio para adquirir imágenes de tomate GFP brightfield y epifluorescencia en vivo cada dos minutos durante 12 horas en 16 posiciones diferentes en función del número de patrones con neuronas. Para el análisis de redes neuronales, después de la creación de imágenes, seleccione una imagen de la pila. Haga clic con el botón derecho en la herramienta de red para abrir el cuadro de diálogo de opciones correspondiente y ajustar la configuración para producir una segmentación precisa de las imágenes.Haga clic en Aceptar. Haga clic con el botón izquierdo en la herramienta de red para duplicar la imagen seleccionada y dividirla en los canales de color rojo, gris y verde. Seleccione el canal gris y realice la mejora de estiramiento de contraste para mejorar la separación entre las diferentes áreas. Utilice el detector de borde Sobel para realizar la convolución de procesamiento de señal 2D tal como se agrupa bajo el comando find edge.Para el doble filtrado, aplique desenfoque gaussiano y un filtro mediano para reducir el ruido y suavizar la señal del objeto. Para convertir a máscara, ejecute algoritmos de umbral adaptados para obtener una imagen binaria con píxeles en blanco y negro. A continuación, esqueletice el área de la celda en una red simple y utilice partículas de filtro para eliminar pequeñas partículas no interconectadas en los resultados.Partículas de filtro de red en una imagen de red. Para obtener canales rojos y verdes, realice un doble filtrado y conviértalo en máscara, como se muestra mediante el método de umbral adaptado. Utilice analizar partículas para determinar la morfología celular en la imagen verde binaria.Utilice el operador or para combinar todos los canales utilizando sus regiones de interés y reajustar su color inicial en una imagen RGB simple. Para realizar un análisis de motilidad de una sola celda, haga clic con el botón derecho en la herramienta de seguimiento de una sola celda para abrir el cuadro de diálogo de opciones correspondiente y ajustar la configuración para producir una segmentación precisa de las imágenes. Haga clic en Aceptar y haga clic con el botón izquierdo en seguimiento de una sola celda para quitar el canal gris.Para generar una imagen correspondiente a una pila de imágenes según el tiempo, aplique la proyección Z y el doble filtro y convierta para enmascarar los rastros dejados por las celdas. Quite las partículas pequeñas de la imagen binaria roja y verde como se muestra. Utilice la herramienta región de interés para seleccionar cada contorno del trazado de celda y active el cuadro de detección de bordes de omisión en la ventana de diálogo de opciones.Aísle el canal rojo en la pila original y seleccione una región de interés. Doble filtro de todas las imágenes y convertir a máscara para permitir que se determine la posición centroide XY de cada núcleo binarizado. Las posiciones XY se pueden utilizar para calcular el desplazamiento cuadrático medio, la relación de direccionalidad y la velocidad media de la celda.Para el análisis de seguimiento de varias celdas, haga clic con el botón derecho en la herramienta de seguimiento para abrir el cuadro de diálogo de opciones correspondiente y ajustar la configuración para producir una segmentación precisa de las imágenes. Haga clic con el botón izquierdo en la herramienta de seguimiento para eliminar el canal gris. Divida los canales rojo y verde, doble filtro y convertir a máscara.Luego use el comando de calculadora de imágenes con el operador and para fusionar los canales dejando solo la señal del núcleo ubicada dentro de las membranas y calcule la gráfica de trayectoria, el desplazamiento cuadrático medio, la relación de direccionalidad y la velocidad promedio de las celdas como se ha demostrado. Gbm fluorescente co-cultivado con neuronas modeladas modifican rápidamente su forma y muestran la migración a lo largo de extensiones neuronales en un movimiento aleatorio. Las células GBM sembradas en las neuronas muestran una forma alargada con múltiples protuberancias que siguen las huellas de las neuronas, mientras que las células conservan su forma redondeada cuando se cultivan en laminina.En etapas posteriores del cultivo, se pueden observar protuberancias delgadas que se unen a las células en los cocultivos neuronales de GBM. Las células GBM sembradas en las neuronas demuestran una mayor capacidad migratoria que las células GBM sembradas en laminina como se observa en estas gráficas de trayectoria. El análisis de la confluencia fluorescente de las células demuestra que durante un período de observación de 500 minutos, se observa más migración celular cuando los esferoides se co-cultivan con las neuronas que cuando las células se cultivan solo en laminina.De hecho, al final del análisis, casi la mitad del patrón está cubierto con células GBM, mientras que los esferoides cultivados en laminina permanecen intactos al cubrebocas. Dependiendo de las preguntas biológicas que desee responder, uno debe tener cuidado de que el diseño del patrón y también la densidad celular sean representativos de las condiciones in vivo. Las células pueden ser fijadas e imágenes por microscopía confocal.La proyección de imagen viva es también posible puesto que nuestro método no empeora las capacidades de la proyección de imagen. Esta técnica es muy adecuada para estudiar la interacción molecular, como los intercambios metabólicos entre las células y las neuronas del glioblastoma. Permite la exploración de procesos biológicos de función.Los experimentos de alto rendimiento también se pueden hacer con fines clínicos.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Coculture Assays to Study Macrophage and Microglia Stimulation of Glioblastoma Invasion

Cocultivo Los ensayos para Estudiar macrófagos y microglia Estimulación de Glioblastoma Invasion

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Investigación

Investigación sobre el cáncer

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

los<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginal modelo de tumor de disco: visualización y cuantificación de la expresión génica y la invasividad tumoral Uso Genético Mosaicos

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

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Detección sistema para la identificación de pequeñas moléculas que promueven la diferenciación celular de células de Glioblastoma de drogas basados en citometría flujo

Glioblastoma (GBM) is the most common and most lethal primary brain tumor in adults, causing roughly 14,000 deaths each year in the U.S. alone. Median ...

Using the Dot Assay to Analyze Migration of Cell Sheets

Usando el análisis de punto para analizar la migración de células de hojas

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Modelo de pulmón acelular y celular para el estudio de metástasis de Tumor

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Live-Cell Imaging Assays to Study Glioblastoma Brain Tumor Stem Cell Migration and Invasion

Análisis de imágenes de células vivas para estudio Glioblastoma cerebral Tumor células madre migración y la invasión

Glioblastoma (GBM) is an aggressive brain tumor that is poorly controlled with the currently available treatment options. Key features of GBMs include ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

Aislamiento de células madre mesenquimales del tejido de la pulpa y cocultivo con células de cáncer para estudiar sus interacciones

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer

Uso de microarrays para interrogar el impacto microambiental en fenotipos celulares en cáncer

Understanding the impact of the microenvironment on the phenotype of cells is a difficult problem due to the complex mixture of both soluble growth ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

Aislamiento de células similares a tallos de cultivos esferoides tridimensionales

Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

Studying the Effects of Tumor-Secreted Paracrine Ligands on Macrophage Activation using Co-Culture with Permeable Membrane Supports

Estudio de los efectos de los ligandos paracrinos secretos de tumor en la activación de macrófagos utilizando co-cultivo con soportes de membrana permeable

Tumor-derived paracrine signaling is an overlooked component of local immunosuppression and can lead to a permissive environment for continued cancer ...