Name: tumor allotransplantation in drosophila melanogaster with a programmable auto-nanoliter injector
Uploaded: 2021-02-02T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Tumor Allotransplantation in Drosophila melanogaster with a Programmable Auto-Nanoliter Injector at JoVE.com

We bedanken de voormalige lableden Dr. Sheng-An Yang en de heer Juan-Martin Portilla voor hun bijdrage aan de ontwikkeling van dit protocol. We zijn dankbaar voor het laboratorium van Dr. Yan Song aan de Peking University School of Life Sciences voor het delen van hun protocol over handmatige allotransplantatie. We bedanken ook de heer Calder Ellsworth en de heer Everest Shapiro voor het kritisch lezen van het manuscript.
WMD ontving financiering (GM072562, CA224381, CA227789) voor dit werk van het National Institute of Health (https://www.nih.gov/) en financiering (IOS-155790) van de National Science Foundation (htps://nsf.gov/). De financiers hadden geen rol in studieontwerp, gegevensverzameling en -analyse, beslissing om te publiceren of voorbereiding van het manuscript.

1. Voorbereiding van SG imaginaire ringtumor
<ol><li>Kruis volwassen vliegen met genotypen van UAS-NICD (Mannetje: 10-15 vliegen) en Act-Gal4, UAS-GFP / CyO; tub-Gal80ts (Virgin female: 10-15 vliegen) en laat ze 1 dag broeden bij 18 ° C. De geselecteerde volwassen vliegen moeten 5-9 dagen oud zijn om een hoge vruchtbaarheid te garanderen.</li>
	<li>Laat de volwassen vliegen eieren leggen in het vliegenvoer in injectieflacons gedurende 24 uur bij 18 °C en verwijder vervolgens de volwassen...

<ol>
	<li>Rossi, F., Gonzalez, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+tumor+growth+in+Drosophila+using+the+tissue+allograft+method.">Studying tumor growth in Drosophila using the tissue allograft method.</a> Nature Protocols. 10 (10), 1525-1534 (2015).</li><li>Magadi, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissecting+Hes-centred+transcriptional+networks+in+neural+stem+cell+maintenance+and+tumorigenesis+in+Drosophilia.">Dissecting Hes-centred transcriptional networks in neural stem cell maintenance and tumorigenesis in Drosophilia.</a> Development. 147 (22), (2020).</li><li>Haller, S., Limmer, S., Ferrandon, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pseudomonas Methods and Protocols. , 723-740 (2014).</li><li>Letini&#263;, B., Kemp, A., Christian, R., Koekemoer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inoculation+protocol+for+the+African+malaria+vector,+Anopheles+arabiensis,+by+means+of+nano-injection.">Inoculation protocol for the African malaria vector, Anopheles arabiensis, by means of nano-injection.</a> African Entomology. 26 (2), 422-428 (2018).</li><li>Mejia, M., Heghinian, M. D., Busch, A., Mar&#237;, F., Godenschwege, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paired+nanoinjection+and+electrophysiology+assay+to+screen+for+bioactivity+of+compounds+using+the+Drosophila+melanogaster+giant+fiber+system.">Paired nanoinjection and electrophysiology assay to screen for bioactivity of compounds using the Drosophila melanogaster giant fiber system.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (62), e3597 (2012).</li><li>Miles, W. O., Dyson, N. J., Walker, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+tumor+invasion+and+metastasis+in+Drosophila.">Modeling tumor invasion and metastasis in Drosophila.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 4 (6), 753 (2011).</li><li>Yang, S. A., Portilla, J. M., Mihailovic, S., Huang, Y. C., Deng, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oncogenic+notch+triggers+neoplastic+tumorigenesis+in+a+transition-zone-like+tissue+microenvironment.">Oncogenic notch triggers neoplastic tumorigenesis in a transition-zone-like tissue microenvironment.</a> Developmental Cell. 49 (3), 461-472 (2019).</li><li>Bloomington Drosophila Stock Center. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> BDSC Cornmeal Food. , (2020).</li><li>Garelli, A., Gontijo, A. M., Miguela, V., Caparros, E., Dominguez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaginal+discs+secrete+insulin-like+peptide+8+to+mediate+plasticity+of+growth+and+maturation.">Imaginal discs secrete insulin-like peptide 8 to mediate plasticity of growth and maturation.</a> Science. 336 (6081), 579-582 (2012).</li><li>Kennison, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+larval+salivary+glands+and+polytene+chromosome+preparation.">Dissection of larval salivary glands and polytene chromosome preparation.</a> CSH Protocols. 2008, (2008).</li><li>Ji, H., Han, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LarvaSPA,+a+method+for+mounting+drosophila+larva+for+long-term+time-lapse+imaging.">LarvaSPA, a method for mounting drosophila larva for long-term time-lapse imaging.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (156), (2020).</li><li>Mirzoyan, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+melanogaster:+a+model+organism+to+study+cancer.">Drosophila melanogaster: a model organism to study cancer.</a> Frontiers in Genetics. 10, 51 (2019).</li><li>Bangi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+at+the+intersection+of+infection,+inflammation,+and+cancer.">Drosophila at the intersection of infection, inflammation, and cancer.</a> Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 3, 103 (2013).</li><li>Saavedra, P., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+as+a+model+for+tumor-induced+organ+wasting.">Drosophila as a model for tumor-induced organ wasting.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 1167, 191-205 (2019).</li><li>Figueroa-Clarevega, A., Bilder, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+drosophila+tumors+interrupt+insulin+signaling+to+induce+cachexia-like+wasting.">Malignant drosophila tumors interrupt insulin signaling to induce cachexia-like wasting.</a> Developmental Cell. 33 (1), 47-55 (2015).</li><li>Koyama, L. A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bellymount+enables+longitudinal,+intravital+imaging+of+abdominal+organs+and+the+gut+microbiota+in+adult+Drosophila.">Bellymount enables longitudinal, intravital imaging of abdominal organs and the gut microbiota in adult Drosophila.</a> PLOS Biology. 18 (1), 3000567 (2020).</li></ol>

Tumor allotransplantatie kan onderzoekers helpen bij het aanpakken van bepaalde problemen die zich voordoen tijdens de groei en progressie van Drosophila-tumoren. Een van die uitdagingen is het omzeilen van voortijdige sterfgevallen van tumordragende larven of volwassenen tijdens primaire tumorkweek12. In deze context zorgt voortdurende tumorallotransplantatie ervoor dat tumoren voor onbepaalde tijd kunnen groeien, wat longitudinale studies van tumorgroei, metastase en evolutie vergemakke...

Dit protocol biedt een stapsgewijze begeleiding voor allotransplantatie van Drosophila larvale speekselklier (SG) imaginaire ringtumoren in buiken van volwassen gastheren met behulp van een auto-nanoliter injectieapparaat (bijv. Nanoject). Dit protocol geeft ook aanwijzingen voor de daaropvolgende re-allografatie van tumoren in nieuwe generaties volwassen gastheren, wat mogelijkheden biedt voor voortdurende longitudinale studie van tumorkenmerken, zoals tumorevolutie en tumor-gastheerinteracties. Het protocol kan ook worden toegepast op experimenten met het screenen van geneesmiddelen.
Deze methode is ontwikkeld om de werkzaamheid van het uitvoeren van tumor allotransplantatie in Drosophila te verbeteren met behulp van handmatige injectoren1, die vaak inconsistent zijn in hun zuig- en injectiekrachten, wat leidt tot suboptimale resultaten voor tumor allotransplantatie. Een autoinjectorapparaat zorgt voor een betere controle en kan resulteren in lagere vliegsterfte na allograft. Een getrainde operator kon een gastheeroverleving van meer dan 90% bereiken met de autoinjector, vergeleken met ongeveer 80% wanneer de handmatige injector werd gebruikt1. Het totale tumoracquisitiepercentage is 60% -80% op dag 8-12 post-allograft. De gemiddelde injectietijd is ook verbeterd van 30-40 s per vlieg met behulp van een handmatige injector tot 20-25 s per vlieg met behulp van de autoinjector.
Dit protocol is een van de eerste protocollen om het autoinjectorapparaat te gebruiken bij Drosophila tumor allotransplantatie. Een recente studie gebruikte ook de autoinjector voor allotransplantatie van tumorachtige neurale stamcellen2. Eerder werd het autoinjectorapparaat gebruikt in Drosophila om bacteriële virulentie3, parasitaire infecties en gastheerverdediging4 te bestuderen, evenals screening op bioactiviteit van verschillende verbindingen5. Ons protocol past het autoinjectorapparaat aan voor het gebruik van tumorinjecties en probeert Drosophila-onderzoekers een hogere kwaliteit en consistentere resultaten te bieden, terwijl ze veel tijd besparen. Dit protocol kan niet alleen worden gebruikt voor de allotransplantatie van tumoren, maar kan ook worden afgestemd op de allotransplantatie van wildtype en mutante weefsels van vergelijkbaar kaliber6.
De Drosophila NICD-tumor die in dit protocol wordt gebruikt, werd voor het eerst geïntroduceerd door Yang et al.7 in de SG imaginaire ringovergangszone, een "tumorhotspot" die hoge niveaus van endogene Janus Kinase / Signaaltransducer en Activators van Transcriptie (JAK-STAT) vertoont, en c-Jun N-terminal Kinase (JNK) activiteit. Bovendien heeft de overgangszone hoge niveaus van matrix metalloproteinase-1 (MMP1)7, waardoor dit gebied bijzonder bevorderlijk is voor tumorigenese. Notch pathway activatie door NICD overexpressie alleen is voldoende om consequent tumorvorming te initiëren. Deze tumoren kunnen vervolgens worden allotransplanteerd om onderzoek van een breed scala aan onderwerpen mogelijk te maken, waaronder tumorceldeling, invasie en tumor-gastheerinteracties.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Confocal Laser Scanning Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>LSM 980</td>
			<td>Also known as &#34;Zeiss LSM 980&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cornmeal Fly Food</td>
			<td>Bloomington Drosophila Stock Center</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Also known as &#34;BDSC Standard Cornmeal Food&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection Needle (30Gx1/2)</td>
			<td>BD PrecisionGlide</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection Plate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12-565B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fly Tape</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>159015A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresence Adapter for Stero Microscope</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>SFA-UV</td>
			<td>Also known as &#34;NightSea Fluorescence Adapter&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresence Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>495015-0001-000</td>
			<td>Also known as &#34;Zeiss Stereo Discovery.V8&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-10</td>
			<td>Also known as &#34;Dumont #5 Forceps&#34;&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Capillary (3.5&#39;&#39;)</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>3-000-203-G/X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glue</td>
			<td>Elmer</td>
			<td>E305</td>
			<td>Also known as &#34;Elmer Washabale Clear Glue&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>435063-9010-100</td>
			<td>Also known as &#34;Zeiss Stemi 305&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette Puller</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>PUL-1000</td>
			<td>Also known as &#34;Four Step Micropipette Puller&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoject Apparatus</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>3-000-204</td>
			<td>Also known as &#34;Nanoject II Auto-Nanoliter Injector&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schneider&#39;s Medium</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>21720001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (27G x1/2)</td>
			<td>BD PrecisionGlide</td>
			<td>305109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vial</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>AS507</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tumor allotransplantation in drosophila melanogaster with a programmable auto-nanoliter injector

Dit protocol beschrijft de allotransplantatie van tumoren in Drosophila melanogaster met behulp van een auto-nanoliter injectieapparaat. Met het gebruik van een autoinjectorapparaat kunnen getrainde operators efficiëntere en consistentere transplantatieresultaten bereiken in vergelijking met die verkregen met behulp van een handmatige injector. Hier behandelen we onderwerpen op een chronologische manier: van het kruisen van Drosophila-lijnen tot de inductie en dissectie van de primaire tumor, transplantatie van de primaire tumor in een nieuwe volwassen gastheer en voortgezette generatietransplantatie van de tumor voor uitgebreide studies. Als demonstratie gebruiken we hier Notch intracellulair domein (NICD) overexpressie geïnduceerde speekselklier imaginaire ringtumoren voor generatietransplantatie. Deze tumoren kunnen eerst betrouwbaar worden geïnduceerd in een micro-omgeving van de overgangszone binnen larvale speekselklier imaginaire ringen, vervolgens allografeerd en gekweekt in vivo om verdere tumorgroei, evolutie en metastase te bestuderen. Deze allotransplantatiemethode kan nuttig zijn in potentiële screeningsprogramma's voor geneesmiddelen, evenals voor het bestuderen van tumor-gastheerinteracties.

Hier voerden we generatie-allotransplantatie van SG-imaginaire ringtumoren uit met behulp van het nanoliter-injectieautoinjectorapparaat en voerden we daaropvolgende tumor live-imaging uit met een confocale laserscanmicroscoop, wat een diepere duik mogelijk maakte in onderwerpen van tumorgroei, tumorcelmigratie en tumor-gastheerinteracties. Bij het monteren van vliegen lijm je ze op een microscoopglaasje en houd je ze vast via een polydimethylsiloxaan (PDMS) blok11.
<st...

Watch this Scientific Journal Video about Tumor Allotransplantation in Drosophila melanogaster with a Programmable Auto-Nanoliter Injector at JoVE.com

Tumor Allotransplantation in Drosophila melanogaster with a Programmable Auto-Nanoliter Injector

Dit protocol biedt gedetailleerde richtlijnen voor de initiële en voortgezette generatie allotransplantatie van Drosophila-tumoren in de buik van volwassen gastheren voor het bestuderen van verschillende aspecten van neoplasie. Met behulp van een auto-injectorapparaat kunnen onderzoekers verbeterde efficiëntie en tumoropbrengsten bereiken in vergelijking met die bereikt door traditionele, handmatige methoden.

Tumor allotransplantatie in Drosophila melanogaster met een programmeerbare Auto-Nanoliter Injector

This protocol describes the allotransplantation of tumors in Drosophila melanogaster using an auto-nanoliter injection apparatus. With the use of an ...

Dit protocol is een van de eerste om het gebruik van een auto-injectorapparaat bij Drosophila tumor allotransplantatie te beschrijven. Een onderwerp dat de laatste jaren in populariteit is gegroeid. Het belangrijkste voordeel van deze methode is dat het de efficiëntie van kankeronderzoek in Drosophila verhoogt door de snelheid, consistentie en opbrengst van tumor allotransplantatie te verbeteren.Tumor allotransplantatie in Drosophila is een delicate techniek die moeilijk onder de knie te krijgen kan zijn. Wees geduldig en vertrouw erop dat oefening kunst baart. Nadat u de vliegen hebt gekruist en de eieren zes dagen bij 18 graden Celsius hebt uitgebroed, brengt u de injectieflacons met de uitgekomen larven over naar een broedmachine op 29 graden Celsius.Sorteer het verdoofde wilde type of gemuteerde volwassen vliegen op basis van hun geslacht. Bevestig een vijf centimeter lang stuk vliegenlint aan een microscoopglaasje met de kleverige kant naar boven. Immobiliseer de vliegen door hun vleugels met een tang aan de tape te bevestigen.Plaats de controllerbox en de autoinjector aan weerszijden van de lichtmicroscoop. Verwerk het ene uiteinde van het glazen capillair met behulp van een viertraps micropipettrekker en verwarm het tot een smal gesloten uiteinde. Gebruik een tang om het capillair in een hoek van ongeveer 60 graden te klikken om een 3,5 inch glazen capillair te bereiden.Schroef de dop van de injector lichtjes los. Houd de lege knop ingedrukt om de injectornaald vooruit te helpen totdat 70 tot 80% van de totale lengte wordt weergegeven. Gebruik een spuit om het glazen capillair te vullen met minerale olie.Selecteer een van de larven en breng over naar een dissectieplaat gevuld met 100 microliter Schneider's Medium om zich voor te bereiden op SG imaginaire ringtumordissectie. Gebruik een tang om de middensectie van het larvale lichaam vast te houden, knijp de larvale kop met behulp van een ander paar tangen en oefen een rekkracht in de lengte aan. Lokaliseer en isoleer de Y-vormige SG van de larven en ontleed vervolgens de SG-denkbeeldige ringtumor door het aangrenzende weefsel te verwijderen.Vul het glazen capillair met Schneider's Medium helemaal tot aan het bovenste segment van 0,5 centimeter door de vulknop ingedrukt te houden. Lokaliseer een primaire tumor en druk op de vulknop totdat de tumor in het capillair wordt gezogen. Zorg ervoor dat de tumor zich aan de punt van het capillair bevindt of enkele millimeters verwijderd van de punt van het capillair.Zoek een volwassen vlieg die op de tape is geïmmobiliseerd. Gebruik vervolgens een tang om de onderbuik voorzichtig vast te houden en de onderste laterale cuticula van de buik te doorboren met het capillair. Druk op de lege knop totdat de tumor de buik van de nieuwe gastheer binnendringt.Knijp met behulp van een tang voorzichtig de vleugels van de gastheer omhoog om deze van de tape te verwijderen. Plaats het vervolgens in een nieuwe injectieflacon met vers voedsel. Screen op tumoren die ongeveer 10 tot 14 dagen na de allografie in de buik van de gastheer zijn gegroeid met behulp van een fluorescentiemicroscoop en ontleed de gegroeide allografted tumor uit de gastheer met behulp van twee paar tangen.Gebruik een tang om de buik vast te houden en het andere paar om de buikschubben open te snijden, waardoor de allografted tumor wordt blootgesteld. Isoleer de tumor zorgvuldig uit de bijgevoegde gastheerweefsels. Gebruik steriele naalden en ontleed de tumoren in kleinere stukjes die geschikt zijn voor de capillaire grootte.Herhaal dit proces voor een nieuwe generatie volwassen gastheren om de allotransplantatie van de tumor te voltooien. Het proces van tumorontwikkeling werd gevolgd door live beeldvorming van een eerste generatie SG imaginaire ringtumor die groeit in een volwassen gastheerbuik op dag 10, post-allotransplantatie. Een zesde generatie SG imaginaire ringtumor die een groot deel van de buik van de gastheer bezet op dag 10, post-allotransplantatie wordt hier getoond.Beeldvorming in dit stadium kan helpen bij het onthullen van tumorgroeipatronen, evenals het migratie- en invasiegedrag. Tumortransplantatie is een geweldige techniek voor longitudinale studies voor tumorprogressie, evolutie en een metastase. Resultaten van groot belang, voor het bestuderen van tumor gastheer interacties.Deze proto heeft een groot potentieel in kankermedicijnen die de medicijnen Temodal gebruiken. Met behulp van deze techniek kunnen onderzoekers aanzienlijke tijd en moeite besparen in het onderzoek.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Tumor Allotransplantation in Drosophila melanogaster with a Programmable Auto-Nanoliter Injector

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

De<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginal Disc Tumor Model: visualisatie en kwantificering van genexpressie en Tumor Invasiviteit met behulp van genetische Mozaïeken

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Labeling of Breast Cancer Patient-derived Xenografts with Traceable Reporters for Tumor Growth and Metastasis Studies

Etikettering van borstkanker-Patient afgeleid Xenograften met Traceable Verslaggevers voor tumorgroei en metastase Studies

The use of preclinical models to study tumor biology and response to treatment is central to cancer research. Long-established human cell lines, and many ...

A Murine Orthotopic Bladder Tumor Model and Tumor Detection System

Een muizen orthotope Blaas Tumor Model en Tumor Detection System

This protocol describes the generation of bladder tumors in female C57BL/6J mice using the murine bladder cancer cell line MB49, which has been modified ...

Tumor Engraftment in a Xenograft Mouse Model of Human Mantle Cell Lymphoma

Engraftment van de tumor in een muismodel van Xenograft van menselijke mantel cel lymfoom

B lymphocytes are key players in immune cell circulation and they mainly home to and reside in lymphoid organs. While normal B cells only proliferate when ...

In Vivo EPR Assessment of pH, pO2, Redox Status, and Concentrations of Phosphate and Glutathione in the Tumor Microenvironment

In Vivo EPR Assessment of pH, pO2, Redox Status, and Concentrations of Phosphate and Glutathione in the Tumor Microenvironment

In Vivo EPR beoordeling van pH, pO2, Redox Status, en concentraties van fosfaat en glutathion in de communicatie van de Tumor

This protocol demonstrates the capability of low-field electron paramagnetic resonance (EPR)-based techniques in combination with functional paramagnetic ...

Digital Polymerase Chain Reaction Assay for the Genetic Variation in a Sporadic Familial Adenomatous Polyposis Patient Using the Chip-in-a-tube Format

Digitale Polymerase Chain Reaction Assay voor de genetische variatie in een sporadische familiale adenomateuze Polyposis patiënt met behulp van de Chip-in-a-tube-indeling

The quantitative analysis of human genetic variation is crucial for understanding the molecular characteristics of serious medical conditions, such as ...

In Vivo Inhibition of MicroRNA to Decrease Tumor Growth in Mice

In vivo remming van MicroRNA te verminderen tumor groei bij muizen

MicroRNAs (miRNAs) are important regulators of gene expression through their ability to destabilize mRNA and inhibit translation of target mRNAs. An ...

Predicting In Vivo Payloads Delivery using a Blood-brain Tumor-barrier in a Dish

Predicting In Vivo Payloads levering met behulp van een bloed-hersen Tumor-barrière in een schotel

Highly selective by nature, the blood-brain barrier (BBB) is essential for the brain homeostasis in physiological conditions. However, in the context of ...

In Vitro Assay to Study Tumor-macrophage Interaction

In vitro assay om tumor-macrofaag interactie te bestuderen

Tumor associated macrophages (TAMs) account for a large percentage of cells in the tumor mass for different types of cancers. Glioblastoma (GBM), a ...

Analyzing Tumor Gene Expression Factors with the CorExplorer Web Portal

Het analyseren van tumor genexpressie factoren met de CorExplorer Web Portal

Differential gene expression analysis is an important technique for understanding disease states. The machine learning algorithm CorEx has shown utility ...