Name: tumor allotransplantation in drosophila melanogaster with a programmable auto-nanoliter injector
Uploaded: 2021-02-02T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Tumor Allotransplantation in Drosophila melanogaster with a Programmable Auto-Nanoliter Injector at JoVE.com

Wir danken den ehemaligen Labormitgliedern Dr. Sheng-An Yang und Juan-Martin Portilla für ihren Beitrag bei der Entwicklung dieses Protokolls. Wir sind dem Labor von Dr. Yan Song an der Peking University School of Life Sciences dankbar, dass es sein Protokoll zur manuellen Allotransplantation weitergegeben hat. Wir danken auch Herrn Calder Ellsworth und Herrn Everest Shapiro für die kritische Lektüre des Manuskripts.
WMD erhielt für diese Arbeit eine Finanzierung (GM072562, CA224381, CA227789) vom National Institute of Health (https://www.nih.gov/) und eine Finanzierung (IOS-155790) von der National Science Foundation (htps://nsf.gov/). Die Geldgeber spielten keine Rolle bei der Studiengestaltung, der Datenerhebung und -analyse, der Entscheidung über die Veröffentlichung oder der Vorbereitung des Manuskripts.

1. Vorbereitung des SG-imaginären Ringtumors
<ol><li>Kreuzen Sie erwachsene Fliegen mit Genotypen von UAS-NICD (männlich: 10-15 Fliegen) und Act-Gal4, UAS-GFP / CyO; tub-Gal80 ts (Virgin female: 10-15Fliegen ) und erlauben Sie ihnen, 1 Tag bei 18 ° C zu brüten. Die ausgewählten erwachsenen Fliegen sollten 5-9 Tage alt sein, um eine hohe Fruchtbarkeit zu gewährleisten.</li>
	<li>Lassen Sie die erwachsenen Fliegen 24 h bei 18 ° C Eier in das in Fläschchen enthaltene Fliegenfutter leg...

<ol>
	<li>Rossi, F., Gonzalez, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+tumor+growth+in+Drosophila+using+the+tissue+allograft+method.">Studying tumor growth in Drosophila using the tissue allograft method.</a> Nature Protocols. 10 (10), 1525-1534 (2015).</li><li>Magadi, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissecting+Hes-centred+transcriptional+networks+in+neural+stem+cell+maintenance+and+tumorigenesis+in+Drosophilia.">Dissecting Hes-centred transcriptional networks in neural stem cell maintenance and tumorigenesis in Drosophilia.</a> Development. 147 (22), (2020).</li><li>Haller, S., Limmer, S., Ferrandon, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pseudomonas Methods and Protocols. , 723-740 (2014).</li><li>Letini&#263;, B., Kemp, A., Christian, R., Koekemoer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inoculation+protocol+for+the+African+malaria+vector,+Anopheles+arabiensis,+by+means+of+nano-injection.">Inoculation protocol for the African malaria vector, Anopheles arabiensis, by means of nano-injection.</a> African Entomology. 26 (2), 422-428 (2018).</li><li>Mejia, M., Heghinian, M. D., Busch, A., Mar&#237;, F., Godenschwege, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paired+nanoinjection+and+electrophysiology+assay+to+screen+for+bioactivity+of+compounds+using+the+Drosophila+melanogaster+giant+fiber+system.">Paired nanoinjection and electrophysiology assay to screen for bioactivity of compounds using the Drosophila melanogaster giant fiber system.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (62), e3597 (2012).</li><li>Miles, W. O., Dyson, N. J., Walker, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+tumor+invasion+and+metastasis+in+Drosophila.">Modeling tumor invasion and metastasis in Drosophila.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 4 (6), 753 (2011).</li><li>Yang, S. A., Portilla, J. M., Mihailovic, S., Huang, Y. C., Deng, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oncogenic+notch+triggers+neoplastic+tumorigenesis+in+a+transition-zone-like+tissue+microenvironment.">Oncogenic notch triggers neoplastic tumorigenesis in a transition-zone-like tissue microenvironment.</a> Developmental Cell. 49 (3), 461-472 (2019).</li><li>Bloomington Drosophila Stock Center. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> BDSC Cornmeal Food. , (2020).</li><li>Garelli, A., Gontijo, A. M., Miguela, V., Caparros, E., Dominguez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaginal+discs+secrete+insulin-like+peptide+8+to+mediate+plasticity+of+growth+and+maturation.">Imaginal discs secrete insulin-like peptide 8 to mediate plasticity of growth and maturation.</a> Science. 336 (6081), 579-582 (2012).</li><li>Kennison, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+larval+salivary+glands+and+polytene+chromosome+preparation.">Dissection of larval salivary glands and polytene chromosome preparation.</a> CSH Protocols. 2008, (2008).</li><li>Ji, H., Han, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LarvaSPA,+a+method+for+mounting+drosophila+larva+for+long-term+time-lapse+imaging.">LarvaSPA, a method for mounting drosophila larva for long-term time-lapse imaging.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (156), (2020).</li><li>Mirzoyan, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+melanogaster:+a+model+organism+to+study+cancer.">Drosophila melanogaster: a model organism to study cancer.</a> Frontiers in Genetics. 10, 51 (2019).</li><li>Bangi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+at+the+intersection+of+infection,+inflammation,+and+cancer.">Drosophila at the intersection of infection, inflammation, and cancer.</a> Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 3, 103 (2013).</li><li>Saavedra, P., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+as+a+model+for+tumor-induced+organ+wasting.">Drosophila as a model for tumor-induced organ wasting.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 1167, 191-205 (2019).</li><li>Figueroa-Clarevega, A., Bilder, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+drosophila+tumors+interrupt+insulin+signaling+to+induce+cachexia-like+wasting.">Malignant drosophila tumors interrupt insulin signaling to induce cachexia-like wasting.</a> Developmental Cell. 33 (1), 47-55 (2015).</li><li>Koyama, L. A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bellymount+enables+longitudinal,+intravital+imaging+of+abdominal+organs+and+the+gut+microbiota+in+adult+Drosophila.">Bellymount enables longitudinal, intravital imaging of abdominal organs and the gut microbiota in adult Drosophila.</a> PLOS Biology. 18 (1), 3000567 (2020).</li></ol>

Die Tumorallotransplantation kann Forschern helfen, bestimmte Probleme anzugehen, die während des Wachstums und der Progression von Drosophila-Tumoren auftreten. Eine dieser Herausforderungen ist die Umgehung des vorzeitigen Todes von tumortragenden Larven oder Erwachsenen während der primären Tumorkultur12. In diesem Zusammenhang ermöglicht die fortgesetzte Tumorallotransplantation das unbegrenzte Wachstum von Tumoren, was Längsschnittstudien des Tumorwachstums, der Metastasierung u...

Dieses Protokoll bietet eine Schritt-für-Schritt-Anleitung für die Allotransplantation von imaginären Ringtumoren der Drosophila-Larvenspeicheldrüse (SG) in den Bauch erwachsener Wirte unter Verwendung eines Auto-Nanoliter-Injektionsapparats (z. B. Nanoject). Dieses Protokoll liefert auch Anweisungen für die anschließende Reallograftierung von Tumoren in neue Generationen von erwachsenen Wirten, was Möglichkeiten für eine fortgesetzte Längsschnittuntersuchung von Tumormerkmalen wie Tumorevolution und Tumor-Wirt-Interaktionen bietet. Das Protokoll kann auch auf Arzneimittel-Screening-Experimente angewendet werden.
Diese Methode wurde entwickelt, um die Wirksamkeit der Durchführung einer Tumorallotransplantation bei Drosophila unter Verwendung manueller Injektoren1 zu verbessern, die in ihren Saug- und Injektionskräften oft inkonsistent sind, was zu suboptimalen Ergebnissen für die Tumorallotransplantation führt. Ein Autoinjektor-Apparat bietet eine bessere Kontrolle und kann zu niedrigeren Raten der Fliegensterblichkeit nach dem Allotransplantat führen. Ein geschulter Bediener konnte mit dem Autoinjektor eine Wirtsüberlebensrate von über 90% erreichen, verglichen mit etwa 80%, wenn der manuelle Injektor verwendetwurde 1. Die Gesamttumorakquisitionsrate beträgt 60% -80% am Tag 8-12 nach dem Allotransplantat. Die durchschnittliche Injektionszeit wurde ebenfalls von 30-40 s pro Fliege mit einem manuellen Injektor auf 20-25 s pro Fliege mit dem Autoinjektor verbessert.
Dieses Protokoll gehört zu den ersten Protokollen, die den Autoinjektorapparat bei der Drosophila-Tumorallotransplantation verwenden. Eine kürzlich durchgeführte Studie verwendete den Autoinjektor auch für die Allotransplantation von tumorösen neuralen Stammzellen2. Zuvor wurde der Autoinjektorapparat in Drosophila verwendet, um die bakterielle Virulenz3, parasitäre Infektionen und die Wirtsabwehr4 sowie das Screening auf Bioaktivität verschiedener Verbindungen5 zu untersuchen. Unser Protokoll passt den Autoinjektorapparat für die Verwendung von Tumorinjektionen an und versucht, Drosophila-Forschern eine höhere Qualität und konsistentere Ergebnisse zu liefern und ihnen gleichzeitig viel Zeit zu sparen. Dieses Protokoll kann nicht nur für die Allotransplantation von Tumoren verwendet werden, sondern kann auch auf die Allotransplantation von Wildtyp- und mutiertem Gewebe ähnlichen Kalibers6 zugeschnitten werden.
Der in diesem Protokoll verwendete Drosophila NICD-Tumor wurde erstmals von Yang et al.7 in der SG-Übergangszone des imaginären Rings eingeführt, einem "Tumor-Hotspot", der hohe Konzentrationen an endogener Januskinase / Signalwandler und Aktivatoren der Transkription (JAK-STAT) und c-Jun N-terminaler Kinase (JNK) -Aktivität aufweist. Darüber hinaus weist die Übergangszone einen hohen Gehalt an Matrix-Metalloproteinase-1 (MMP1)7 auf, was diese Region besonders förderlich für die Tumorgenese macht. Die Aktivierung des Notch-Signalwegs durch NICD-Überexpression allein reicht aus, um die Tumorbildung konsequent einzuleiten. Diese Tumoren können anschließend allotransplantiert werden, um eine breite Palette von Themen zu untersuchen, einschließlich Tumorzellteilung, Invasion und Tumor-Wirt-Interaktionen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Confocal Laser Scanning Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>LSM 980</td>
			<td>Also known as &#34;Zeiss LSM 980&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cornmeal Fly Food</td>
			<td>Bloomington Drosophila Stock Center</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Also known as &#34;BDSC Standard Cornmeal Food&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection Needle (30Gx1/2)</td>
			<td>BD PrecisionGlide</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection Plate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12-565B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fly Tape</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>159015A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresence Adapter for Stero Microscope</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>SFA-UV</td>
			<td>Also known as &#34;NightSea Fluorescence Adapter&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresence Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>495015-0001-000</td>
			<td>Also known as &#34;Zeiss Stereo Discovery.V8&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-10</td>
			<td>Also known as &#34;Dumont #5 Forceps&#34;&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Capillary (3.5&#39;&#39;)</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>3-000-203-G/X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glue</td>
			<td>Elmer</td>
			<td>E305</td>
			<td>Also known as &#34;Elmer Washabale Clear Glue&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>435063-9010-100</td>
			<td>Also known as &#34;Zeiss Stemi 305&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette Puller</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>PUL-1000</td>
			<td>Also known as &#34;Four Step Micropipette Puller&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoject Apparatus</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>3-000-204</td>
			<td>Also known as &#34;Nanoject II Auto-Nanoliter Injector&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schneider&#39;s Medium</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>21720001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (27G x1/2)</td>
			<td>BD PrecisionGlide</td>
			<td>305109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vial</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>AS507</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tumor allotransplantation in drosophila melanogaster with a programmable auto-nanoliter injector

Dieses Protokoll beschreibt die Allotransplantation von Tumoren in Drosophila melanogaster unter Verwendung eines Auto-Nanoliter-Injektionsapparates. Mit dem Einsatz eines Autoinjektor-Geräts können geschulte Bediener effizientere und konsistentere Transplantationsergebnisse erzielen als mit einem manuellen Injektor. Hier behandeln wir Themen in chronologischer Weise: von der Kreuzung der Drosophila-Linien über die Induktion und Dissektion des Primärtumors, die Transplantation des Primärtumors in einen neuen erwachsenen Wirt bis hin zur fortgesetzten Generationentransplantation des Tumors für erweiterte Studien. Als Demonstration verwenden wir hier Notch intracellular domain (NICD) overexpression induced salivary doil imaginal ring tumors for generational transplantation. Diese Tumoren können zunächst zuverlässig in einer Übergangszonen-Mikroumgebung innerhalb von Larven-Speicheldrüsen-imaginären Ringen induziert und dann in vivo allotransplantiert und kultiviert werden, um das kontinuierliche Tumorwachstum, die Evolution und die Metastasierung zu untersuchen. Diese Allotransplantationsmethode kann in potenziellen Arzneimittel-Screening-Programmen sowie zur Untersuchung von Tumor-Wirt-Wechselwirkungen nützlich sein.

Hier führten wir eine generationenübergreifende Allotransplantation von SG-imaginären Ringtumoren mit dem Nanoliter-Injektions-Autoinjektorapparat durch und führten eine anschließende Tumor-Live-Bildgebung mit einem konfokalen Laser-Scanning-Mikroskop durch, die ein tieferes Eintauchen in Themen wie Tumorwachstum, Tumorzellmigration und Tumor-Wirt-Interaktionen ermöglichte. Wenn Sie Fliegen montieren, kleben Sie sie auf einen Objektträger und halten Sie sie über einen Polydimethylsiloxan (PDMS) -Block<sup class="...

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Tumor Allotransplantation in Drosophila melanogaster with a Programmable Auto-Nanoliter Injector

Dieses Protokoll bietet detaillierte Anleitungen für die anfängliche und fortgesetzte Allotransplantation von Drosophila-Tumoren in den Bauch erwachsener Wirte zur Untersuchung verschiedener Aspekte der Neoplasie. Mit einem Autoinjektor-Gerät können Forscher eine verbesserte Effizienz und Tumorausbeute im Vergleich zu herkömmlichen, manuellen Methoden erzielen.

Tumorallotransplantation in Drosophila melanogaster mit einem programmierbaren Auto-Nanoliter-Injektor

This protocol describes the allotransplantation of tumors in Drosophila melanogaster using an auto-nanoliter injection apparatus. With the use of an ...

Dieses Protokoll gehört zu den ersten, die die Verwendung eines Autoinjektorapparats bei der Drosophila-Tumorallotransplantation beschreiben. Ein Thema, das in den letzten Jahren an Popularität gewonnen hat. Der Hauptvorteil dieser Methode besteht darin, dass sie die Effizienz der Krebsforschung in Drosophila erhöht, indem sie die Geschwindigkeit, Konsistenz und Ausbeute der Tumorallotransplantation verbessert.Die Tumorallotransplantation bei Drosophila ist eine heikle Technik, die schwer zu beherrschen sein kann. Seien Sie geduldig und vertrauen Sie darauf, dass Übung den Meister macht. Nachdem Sie die Fliegen gekreuzt und die Eier sechs Tage lang bei 18 Grad Celsius bebrütet haben, bringen Sie die Fläschchen mit den geschlüpften Larven in einen Inkubator bei 29 Grad Celsius.Sortieren Sie den betäubten Wildtyp oder die mutierten erwachsenen Fliegen nach ihrem Geschlecht. Befestigen Sie ein fünf Zentimeter langes Stück Fliegenband an einem Objektträger mit der klebrigen Seite nach oben. Immobilisieren Sie die Fliegen, indem Sie ihre Flügel mit einer Pinzette an das Band kleben.Platzieren Sie die Reglerbox und den Autoinjektor auf gegenüberliegenden Seiten des Lichtmikroskops. Verarbeiten Sie ein Ende der Glaskapillare mit einem vierstufigen Mikropipettenabzieher und erhitzen Sie es auf ein schmales geschlossenes Ende. Verwenden Sie eine Pinzette, um die Kapillare in einem Winkel von etwa 60 Grad zu befestigen, um eine 3,5-Zoll-Glaskapillare vorzubereiten.Schrauben Sie die Kappe des Injektors leicht ab. Halten Sie die leere Taste gedrückt, um die Injektornadel so lange zu bewegen, bis 70 bis 80 % der Gesamtlänge angezeigt werden. Verwenden Sie eine Spritze, um die Glaskapillare mit Mineralöl zu füllen.Wählen Sie eine der Larven und übertragen Sie sie auf eine Dissektionsplatte, die mit 100 Mikrolitern Schneider's Medium gefüllt ist, um sich auf die SG-Ringtumordissektion vorzubereiten. Verwenden Sie eine Pinzette, um den Mittelteil des Larvenkörpers zu halten, klemmen Sie den Larvenkopf mit einer anderen Pinzette ein und üben Sie eine Dehnungskraft in Längsrichtung aus. Lokalisieren und isolieren Sie das Y-förmige SG der Larven und sezieren Sie dann den SG-imaginären Ringtumor, indem Sie das angrenzende Gewebe entfernen.Füllen Sie die Glaskapillare mit Schneiders Medium bis zum oberen 0,5-Zentimeter-Segment, indem Sie die Fülltaste gedrückt halten. Suchen Sie einen Primärtumor und drücken Sie die Fülltaste, bis der Tumor in die Kapillare abgesaugt wird. Stellen Sie sicher, dass der Tumor an der Spitze der Kapillare oder mehrere Millimeter von der Spitze der Kapillare entfernt sitzt.Suchen Sie eine erwachsene Fliege, die am Band immobilisiert ist. Verwenden Sie dann eine Pinzette, um den Unterbauch vorsichtig festzuhalten und die untere laterale Kutikula des Abdomens mit der Kapillare zu durchstechen. Drücken Sie die leere Taste, bis der Tumor in den neuen Wirtsbauch gelangt.Drücken Sie die Flügel des Hosts mit einer Pinzette vorsichtig nach oben, um sie vom Band zu entfernen. Dann legen Sie es in eine neue Durchstechflasche mit frischen Lebensmitteln. Screenen Sie nach Tumoren, die etwa 10 bis 14 Tage nach dem Allographen mit einem Fluoreszenzmikroskop im Wirtsbauch gewachsen sind, und sezieren Sie den gewachsenen allotransplantierten Tumor mit zwei Pinzettenpaaren aus dem Wirt.Verwenden Sie ein Paar Pinzetten, um den Bauch festzuhalten, und das andere Paar, um die Bauchkutikula aufzuschneiden und den allotransplantierten Tumor freizulegen. Isolieren Sie den Tumor vorsichtig von den angeschlossenen Wirtsgeweben. Verwenden Sie sterile Nadeln und zerlegen Sie die Tumore in kleinere Stücke, die für die Kapillargröße geeignet sind.Wiederholen Sie diesen Vorgang für eine neue Generation von erwachsenen Wirten, um die Allotransplantation des Tumors abzuschließen. Der Prozess der Tumorentwicklung wurde durch Live-Bildgebung eines imaginären SG-Ringtumors der ersten Generation verfolgt, der am 10. Tag nach der Allotransplantation in einem erwachsenen Wirtsbauch wuchs. Ein imaginärer SG-Ringtumor der sechsten Generation, der am 10. Tag einen großen Teil des Wirtsabdomens einnimmt, wird hier nach der Allotransplantation gezeigt.Die Bildgebung in diesem Stadium kann dazu beitragen, Tumorwachstumsmuster sowie sein Migrations- und Invasionsverhalten aufzudecken. Die Tumortransplantation ist eine großartige Technik für Längsschnittstudien zur Tumorprogression, Evolution und Metastasierung. Ergebnisse von großer Bedeutung für die Untersuchung von Tumor-Wirts-Interaktionen.Dieses Proto hat ein großes Potenzial in Krebsmedikamenten Screenings mit den Medikamenten Temodal. Mit dieser Technik können Forscher viel Zeit und Mühe bei der Untersuchung sparen.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Tumor Allotransplantation in Drosophila melanogaster with a Programmable Auto-Nanoliter Injector

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

Das<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginalscheibe Tumormodell: Visualisierung und Quantifizierung von Genexpression und Tumorinvasivität mit Genetischen Mosaiken

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Forschung

Krebsforschung

Labeling of Breast Cancer Patient-derived Xenografts with Traceable Reporters for Tumor Growth and Metastasis Studies

Die Markierung von Brustkrebs-Patienten stamm Xenografts mit Nachvollziehbare Reporter für Tumorwachstum und Metastasierung Studies

The use of preclinical models to study tumor biology and response to treatment is central to cancer research. Long-established human cell lines, and many ...

A Murine Orthotopic Bladder Tumor Model and Tumor Detection System

Ein Murine Orthotopische Blasentumormodell und Tumor Detection System

This protocol describes the generation of bladder tumors in female C57BL/6J mice using the murine bladder cancer cell line MB49, which has been modified ...

Tumor Engraftment in a Xenograft Mouse Model of Human Mantle Cell Lymphoma

Tumor Engraftment in einem Xenograft-Maus-Modell der menschlichen Mantel-Zell-Lymphom

B lymphocytes are key players in immune cell circulation and they mainly home to and reside in lymphoid organs. While normal B cells only proliferate when ...

In Vivo EPR Assessment of pH, pO2, Redox Status, and Concentrations of Phosphate and Glutathione in the Tumor Microenvironment

In Vivo EPR Assessment of pH, pO2, Redox Status, and Concentrations of Phosphate and Glutathione in the Tumor Microenvironment

In Vivo EPR-Bewertung der pH, pO2, Redox-Status, und Konzentrationen von Phosphat und Glutathion in der Tumor-Mikroumgebung

This protocol demonstrates the capability of low-field electron paramagnetic resonance (EPR)-based techniques in combination with functional paramagnetic ...

Digital Polymerase Chain Reaction Assay for the Genetic Variation in a Sporadic Familial Adenomatous Polyposis Patient Using the Chip-in-a-tube Format

Digitalen Polymerase-Kettenreaktion-Assay für die genetische Variation bei einem sporadischen familiäre adenomatöse Polyposis Patienten mit dem Chip-in-Rohr-Format

The quantitative analysis of human genetic variation is crucial for understanding the molecular characteristics of serious medical conditions, such as ...

In Vivo Inhibition of MicroRNA to Decrease Tumor Growth in Mice

In Vivo Hemmung von MicroRNA zur Verringerung des Tumorwachstums bei Mäusen

MicroRNAs (miRNAs) are important regulators of gene expression through their ability to destabilize mRNA and inhibit translation of target mRNAs. An ...

Predicting In Vivo Payloads Delivery using a Blood-brain Tumor-barrier in a Dish

Vorhersage In Vivo Nutzlasten Lieferung mit einem Blut-Hirnschranke Tumor in einer Petrischale

Highly selective by nature, the blood-brain barrier (BBB) is essential for the brain homeostasis in physiological conditions. However, in the context of ...

In Vitro Assay to Study Tumor-macrophage Interaction

In Vitro-Assay zur Untersuchung der Tumor-Makrophage-Interaktion

Tumor associated macrophages (TAMs) account for a large percentage of cells in the tumor mass for different types of cancers. Glioblastoma (GBM), a ...

Analyzing Tumor Gene Expression Factors with the CorExplorer Web Portal

Analysieren von Tumor-Genexpressionsfaktoren mit dem CorExplorer-Webportal

Differential gene expression analysis is an important technique for understanding disease states. The machine learning algorithm CorEx has shown utility ...