Name: tumor allotransplantation in drosophila melanogaster with a programmable auto-nanoliter injector
Uploaded: 2021-02-02T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Tumor Allotransplantation in Drosophila melanogaster with a Programmable Auto-Nanoliter Injector at JoVE.com

אנו מודים לחברי המעבדה לשעבר ד"ר שנג-אן יאנג ולמר חואן-מרטין פורטייה על תרומתם בפיתוח פרוטוקול זה. אנו אסירי תודה למעבדתו של ד"ר יאן סונג בבית הספר למדעי החיים של אוניברסיטת פקין על שיתוף הפרוטוקול שלהם בנושא הקצאה ידנית. אנו מודים גם למר קאלדר אלסוורת' ולמר אוורסט שפירו על הקריאה הביקורתית בכתב היד.
נשק להשמדה המונית קיבל מימון (GM072562, CA224381, CA227789) עבור עבודה זו מהמכון הלאומי לבריאות (https://www.nih.gov/) ומימון (IOS-155790) מהקרן הלאומית למדע (htps://nsf.gov/). למממנים לא היה כל תפקיד בתכנון המחקר, באיסוף וניתוח הנתונים, בהחלטה על פרסום או בהכנת כתב היד.

1. הכנת גידול טבעת דמיוני SG
<ol><li>צלב זבובים בוגרים עם גנוטיפים של UAS-NICD (זכר: 10-15 זבובים) ו - Act-Gal4, UAS-GFP/CyO; tub-Gal80ts (נקבה בתולה: 10-15 זבובים) ומאפשר להם להתרבות במשך יום אחד ב -18 מעלות צלזיוס. הזבובים הבוגרים שנבחרו צריכים להיות בני 5-9 ימים כדי להבטיח פוריות גבוהה.</li>
	<li>אפשרו לזבובים ...

<ol>
	<li>Rossi, F., Gonzalez, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+tumor+growth+in+Drosophila+using+the+tissue+allograft+method.">Studying tumor growth in Drosophila using the tissue allograft method.</a> Nature Protocols. 10 (10), 1525-1534 (2015).</li><li>Magadi, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissecting+Hes-centred+transcriptional+networks+in+neural+stem+cell+maintenance+and+tumorigenesis+in+Drosophilia.">Dissecting Hes-centred transcriptional networks in neural stem cell maintenance and tumorigenesis in Drosophilia.</a> Development. 147 (22), (2020).</li><li>Haller, S., Limmer, S., Ferrandon, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pseudomonas Methods and Protocols. , 723-740 (2014).</li><li>Letini&#263;, B., Kemp, A., Christian, R., Koekemoer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inoculation+protocol+for+the+African+malaria+vector,+Anopheles+arabiensis,+by+means+of+nano-injection.">Inoculation protocol for the African malaria vector, Anopheles arabiensis, by means of nano-injection.</a> African Entomology. 26 (2), 422-428 (2018).</li><li>Mejia, M., Heghinian, M. D., Busch, A., Mar&#237;, F., Godenschwege, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paired+nanoinjection+and+electrophysiology+assay+to+screen+for+bioactivity+of+compounds+using+the+Drosophila+melanogaster+giant+fiber+system.">Paired nanoinjection and electrophysiology assay to screen for bioactivity of compounds using the Drosophila melanogaster giant fiber system.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (62), e3597 (2012).</li><li>Miles, W. O., Dyson, N. J., Walker, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+tumor+invasion+and+metastasis+in+Drosophila.">Modeling tumor invasion and metastasis in Drosophila.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 4 (6), 753 (2011).</li><li>Yang, S. A., Portilla, J. M., Mihailovic, S., Huang, Y. C., Deng, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oncogenic+notch+triggers+neoplastic+tumorigenesis+in+a+transition-zone-like+tissue+microenvironment.">Oncogenic notch triggers neoplastic tumorigenesis in a transition-zone-like tissue microenvironment.</a> Developmental Cell. 49 (3), 461-472 (2019).</li><li>Bloomington Drosophila Stock Center. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> BDSC Cornmeal Food. , (2020).</li><li>Garelli, A., Gontijo, A. M., Miguela, V., Caparros, E., Dominguez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaginal+discs+secrete+insulin-like+peptide+8+to+mediate+plasticity+of+growth+and+maturation.">Imaginal discs secrete insulin-like peptide 8 to mediate plasticity of growth and maturation.</a> Science. 336 (6081), 579-582 (2012).</li><li>Kennison, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+larval+salivary+glands+and+polytene+chromosome+preparation.">Dissection of larval salivary glands and polytene chromosome preparation.</a> CSH Protocols. 2008, (2008).</li><li>Ji, H., Han, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LarvaSPA,+a+method+for+mounting+drosophila+larva+for+long-term+time-lapse+imaging.">LarvaSPA, a method for mounting drosophila larva for long-term time-lapse imaging.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (156), (2020).</li><li>Mirzoyan, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+melanogaster:+a+model+organism+to+study+cancer.">Drosophila melanogaster: a model organism to study cancer.</a> Frontiers in Genetics. 10, 51 (2019).</li><li>Bangi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+at+the+intersection+of+infection,+inflammation,+and+cancer.">Drosophila at the intersection of infection, inflammation, and cancer.</a> Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 3, 103 (2013).</li><li>Saavedra, P., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+as+a+model+for+tumor-induced+organ+wasting.">Drosophila as a model for tumor-induced organ wasting.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 1167, 191-205 (2019).</li><li>Figueroa-Clarevega, A., Bilder, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malignant+drosophila+tumors+interrupt+insulin+signaling+to+induce+cachexia-like+wasting.">Malignant drosophila tumors interrupt insulin signaling to induce cachexia-like wasting.</a> Developmental Cell. 33 (1), 47-55 (2015).</li><li>Koyama, L. A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bellymount+enables+longitudinal,+intravital+imaging+of+abdominal+organs+and+the+gut+microbiota+in+adult+Drosophila.">Bellymount enables longitudinal, intravital imaging of abdominal organs and the gut microbiota in adult Drosophila.</a> PLOS Biology. 18 (1), 3000567 (2020).</li></ol>

אלוטרנסנטציה של גידולים יכולה לסייע לחוקרים לטפל בבעיות מסוימות המתעוררות במהלך גדילת הגידול בהתקדמותו של דרוזופילה. אתגר אחד כזה הוא עקיפת מקרי מוות בטרם עת של זחלים נושאי גידול או מבוגרים במהלך תרבית גידול ראשונית12. בהקשר זה, המשך ההקצאה של הגידול מאפשר לגידולים לגדו?...

פרוטוקול זה מספק הנחיה שלב אחר שלב להקצאה של גידולים דמיוניים של בלוטת הרוק הזחלית של דרוזופילה (SG) לתוך הבטן של מארחים בוגרים באמצעות מנגנון הזרקה אוטו-ננוליטי (למשל, Nanoject). פרוטוקול זה מספק גם כיוונים להשתלה מחדש של גידולים לדורות חדשים של מארחים בוגרים, מה שמספק הזדמנויות להמשך מחקר אורך של מאפייני הגידול, כגון אבולוציה של גידולים ואינטראקציות בין גידולים לפונדקאים. ניתן ליישם את הפרוטוקול גם על ניסויים בסינון תרופות.
שיטה זו פותחה כדי לשפר את היעילות של ביצוע allotransplantation הגידול ב Drosophila באמצעות מזרקים ידניים1, אשר לעתים קרובות אינם עקביים בכוחות היניקה וההזרקה שלהם, מה שמוביל לתוצאות לא אופטימליות עבור allotransplantation הגידול. מנגנון אוטו-איניג'קטור מספק שליטה טובה יותר ויכול לגרום לשיעורים נמוכים יותר של תמותת זבובים לאחר אלוגרפט. מפעיל מיומן יכול להשיג שיעור הישרדות של יותר מ-90% עם המזרק האוטומטי, לעומת כ-80% כאשר נעשה שימוש במזרק הידני1. שיעור רכישת הגידול הכולל הוא 60%-80% ביום 8-12 לאחר הלידה. זמן ההזרקה הממוצע השתפר גם הוא מ-30-40 שניות לטוס באמצעות מזרק ידני ל-20-25 שניות לטוס באמצעות האוטו-איניג'קטור.
פרוטוקול זה הוא בין הפרוטוקולים הראשונים שהשתמשו במנגנון האוטו-איניג'קטור באלוטרנספלנטציה של גידול דרוזופילה . מחקר שנערך לאחרונה השתמש גם ב-autoinjector עבור ההקצאה של תאי גזע עצביים סרטניים2. בעבר, מנגנון autoinjector שימש Drosophila כדי לחקור ויראליות חיידקית3, זיהומים טפיליים והגנה המארח4, כמו גם הקרנה עבור פעילות ביולוגית של תרכובות שונות5. הפרוטוקול שלנו מתאים את מנגנון ה-autoinjector לשימוש בהזרקת גידולים ומבקש לספק לחוקרי Drosophila תוצאות איכותיות ועקביות יותר תוך חיסכון בזמן רב. פרוטוקול זה יכול לשמש לא רק עבור allotransplantation של גידולים, אלא יכול להיות מותאם גם אלוטרנספלנטציה של wildtype ורקמות מוטנטיות של קליבר דומה6.
גידול ה-Drosophila NICD המשמש בפרוטוקול זה הוצג לראשונה על ידי Yang et al.7 באזור המעבר של הטבעת הדמיונית SG, "נקודה חמה של גידול" המציג רמות גבוהות של מתמר ג'אנוס קינאז/אותות אנדוגניים ומפעילי שעתוק (JAK-STAT), ופעילות c-Jun N-terminal Kinase (JNK). בנוסף, באזור המעבר יש רמות גבוהות של מטריצה metalloproteinase-1 (MMP1)7, מה שהופך את האזור הזה לתרום במיוחד לגידולים סרטניים. הפעלת מסלול חריץ באמצעות ביטוי יתר של NICD בלבד מספיקה כדי ליזום באופן עקבי היווצרות גידולים. לאחר מכן ניתן להקצות גידולים אלה כדי לאפשר חקירה של מגוון רחב של נושאים, כולל חלוקת תאי גידול, פלישה ואינטראקציות בין גידול לפונדקאי.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Confocal Laser Scanning Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>LSM 980</td>
			<td>Also known as &#34;Zeiss LSM 980&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cornmeal Fly Food</td>
			<td>Bloomington Drosophila Stock Center</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Also known as &#34;BDSC Standard Cornmeal Food&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection Needle (30Gx1/2)</td>
			<td>BD PrecisionGlide</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection Plate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12-565B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fly Tape</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>159015A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresence Adapter for Stero Microscope</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>SFA-UV</td>
			<td>Also known as &#34;NightSea Fluorescence Adapter&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresence Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>495015-0001-000</td>
			<td>Also known as &#34;Zeiss Stereo Discovery.V8&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-10</td>
			<td>Also known as &#34;Dumont #5 Forceps&#34;&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Capillary (3.5&#39;&#39;)</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>3-000-203-G/X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glue</td>
			<td>Elmer</td>
			<td>E305</td>
			<td>Also known as &#34;Elmer Washabale Clear Glue&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>435063-9010-100</td>
			<td>Also known as &#34;Zeiss Stemi 305&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette Puller</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>PUL-1000</td>
			<td>Also known as &#34;Four Step Micropipette Puller&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoject Apparatus</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>3-000-204</td>
			<td>Also known as &#34;Nanoject II Auto-Nanoliter Injector&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schneider&#39;s Medium</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>21720001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (27G x1/2)</td>
			<td>BD PrecisionGlide</td>
			<td>305109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vial</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>AS507</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tumor allotransplantation in drosophila melanogaster with a programmable auto-nanoliter injector

פרוטוקול זה מתאר את ההקצאה של גידולים ב - Drosophila melanogaster באמצעות מנגנון הזרקה אוטו-ננוליטי. עם השימוש במנגנון autoinjector, מפעילים מיומנים יכולים להשיג תוצאות השתלה יעילות ועקביות יותר בהשוואה לאלה המתקבלות באמצעות מזרק ידני. כאן אנו מכסים נושאים בצורה כרונולוגית: החל מחציית קווי דרוזופילה , דרך אינדוקציה ונתיחה של הגידול הראשוני, השתלת הגידול הראשוני לפונדקאי בוגר חדש והמשך השתלה דורית של הגידול למחקרים ממושכים. כהדגמה, כאן אנו משתמשים בתחום התוך-תאי של Notch (NICD) בביטוי יתר המושרה על ידי גידולי טבעת הרוק המושרים על ידי בלוטת הרוק לצורך השתלה דורית. גידולים אלה יכולים תחילה להיות מושרים באופן אמין במיקרו-סביבה של אזור מעבר בתוך טבעות דמיוניות של בלוטת הרוק הזחלית, ולאחר מכן להשתיל אותם ולתרבת אותם in vivo כדי לחקור את המשך גדילת הגידול, האבולוציה והגרורות. שיטת ההקצאה הזו יכולה להיות שימושית בתוכניות בדיקת תרופות פוטנציאליות, כמו גם לחקר אינטראקציות בין גידול למארח.

כאן, ביצענו הקצאה דורית של גידולי טבעת דמיוניים של SG באמצעות מנגנון ההזרקה האוטומטית של הזרקת ננוליט וביצענו הדמיה חיה של הגידול לאחר מכן עם מיקרוסקופ סריקת לייזר קונפוקלי, שאיפשר צלילה עמוקה יותר לנושאים של צמיחת גידול, נדידת תאי גידול ואינטראקציות בין גידול למארח. בעת הרכבת זבובים, הדבי...

Watch this Scientific Journal Video about Tumor Allotransplantation in Drosophila melanogaster with a Programmable Auto-Nanoliter Injector at JoVE.com

Tumor Allotransplantation in Drosophila melanogaster with a Programmable Auto-Nanoliter Injector

פרוטוקול זה מספק הדרכה מפורטת להקצאה הדורית הראשונית והמתמשכת של גידולי דרוזופילה לתוך בטנם של מארחים בוגרים לחקר היבטים שונים של ניאופלזיה. באמצעות מנגנון autoinjector, חוקרים יכולים להשיג יעילות משופרת ותפוקת הגידול בהשוואה לאלה שהושגו על ידי שיטות מסורתיות, ידניות.

אלוטרנספלנטציה של גידול בדרוזופילה מלנוגסטר עם מזרק אוטו-ננולטר הניתן לתכנות

This protocol describes the allotransplantation of tumors in Drosophila melanogaster using an auto-nanoliter injection apparatus. With the use of an ...

פרוטוקול זה הוא בין הראשונים לתאר את השימוש במנגנון אוטו-איניג'קטור באלוטרנספלנטציה של גידול דרוזופילה. נושא שצבר פופולריות בשנים האחרונות. היתרון העיקרי של שיטה זו הוא שהיא מגבירה את היעילות של מחקר הסרטן ב Drosophila על ידי שיפור המהירות, העקביות והתפוקה של allotransplantation הגידול.אלוטרנספלציה של הגידול בדרוזופילה היא טכניקה עדינה שקשה לשלוט בה. היו סבלניים וסמכו על כך שהתרגול הופך למושלם. לאחר חציית הזבובים ודגירה של הביצים במשך שישה ימים בטמפרטורה של 18 מעלות צלזיוס, מעבירים את הבקבוקונים המכילים את הזחלים הבוקעים לאינקובטור שנקבע על 29 מעלות צלזיוס.מיין את סוג הבר המרדים או את הזבובים הבוגרים המוטנטים על סמך המין שלהם. הצמידו חתיכת סרט זבוב באורך חמישה סנטימטרים לשקופית מיקרוסקופ עם הצד הדביק למעלה. לשתק את הזבובים על ידי הצמדת כנפיהם לקלטת עם מלקחיים.מקם את תיבת הבקר ואת ה- autoinjector בצדדים מנוגדים של מיקרוסקופ האור. לעבד קצה אחד של נימי הזכוכית באמצעות מושך מיקרו פיפטה בן ארבעה שלבים, חימום אותו לקצה סגור צר. השתמש במלקחיים כדי לחתוך את הנימים בזווית של כ-60 מעלות כדי להכין נימי זכוכית בקוטר 3.5 אינץ'.שחררו קלות את הכובע של המזרק. הקישו לחיצה על הכפתור הריק כדי לקדם את מחט המזרק עד שיראו 70% עד 80% מאורך המזרק הכולל שלה. השתמש במזרק כדי למלא את נימי הזכוכית בשמן מינרלי.בחר אחד מהזחלים והעביר לצלחת דיסקציה מלאה ב-100 מיקרוליטרים של המדיום של שניידר כדי להתכונן לנתיחה של גידול טבעתי דמיוני SG. באמצעות זוג מלקחיים אחד כדי להחזיק את המותניים של גוף הזחל, צובטים את ראש הזחל באמצעות זוג מלקחיים אחר ומפעילים כוח מתיחה לאורך כל הדרך. אתרו ובודדו את ה-SG בצורת Y של הזחלים, ולאחר מכן נתחו את גידול הטבעת הדמיונית SG על ידי הסרת הרקמה הסמוכה.מלאו את נימי הזכוכית במדיום של שניידר עד לקטע העליון של 0.5 סנטימטרים על ידי לחיצה על כפתור המילוי. אתרו גידול ראשוני ולחצו על כפתור המילוי עד שהגידול נשאב לתוך הנימים. ודא שהגידול יושב בקצה הנימים או במרחק של כמה מילימטרים מקצה הנימים.אתר זבוב מבוגר משותק לקלטת. לאחר מכן השתמש במלקחיים כדי להחזיק בעדינות את הבטן התחתונה ולנקב את הציפורן הלטרלית התחתונה של הבטן עם הנימים. לחץ על הכפתור הריק עד שהגידול נכנס לבטן המארחת החדשה.באמצעות מלקחיים, צובטים בעדינות את כנפיו של המארח כלפי מעלה כדי להסיר אותו מהסרט. לאחר מכן מכניסים אותו לבקבוקון חדש עם אוכל טרי. יש לסנן גידולים שגדלו בבטן המארחת באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי כ-10 עד 14 יום לאחר ה-allograph ולנתח את הגידול שגדל ב-allografted מתוך הפונדקאי באמצעות שני זוגות מלקחיים.השתמשו בזוג מלקחיים אחד כדי להחזיק את הבטן ובזוג השני כדי לפתוח את קוטיקולת הבטן, ולחשוף את הגידול הכלוגרי. בזהירות לבודד את הגידול מן הרקמות המארח המצורפות. השתמש במחטים סטריליות ונתח את הגידולים לחתיכות קטנות יותר המתאימות לגודל הנימים.חזור על תהליך זה עבור דור חדש של מארחים בוגרים כדי להשלים את ההקצאה של הגידול. תהליך התפתחות הגידול היה במעקב על ידי הדמיה חיה של גידול טבעת דמיוני SG מהדור הראשון שגדל בבטן מארחת בוגרת ביום 10, לאחר ההקצאה. דור שישי של גידול טבעת דמיוני SG התופס חלק גדול מהבטן המארחת ביום 10, לאחר ההקצאה מוצג כאן.הדמיה בשלב זה עשויה לסייע בחשיפת דפוסי גדילת הגידול, כמו גם התנהגויות הנדידה והפלישה שלו. השתלת גידולים היא טכניקה נהדרת למחקרי אורך להתקדמות הגידול, אבולוציה וגרורות. תוצאות בעלות חשיבות רבה, לחקר אינטראקציות של מארח הגידול.לפרוטו זה יש פוטנציאל גדול במסכי תרופות לסרטן באמצעות התרופות Temodal. באמצעות טכניקה זו, החוקרים יוכלו לחסוך זמן ומאמץ משמעותיים בחקירה.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Tumor Allotransplantation in Drosophila melanogaster with a Programmable Auto-Nanoliter Injector

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

ה<em&gt; תסיסנית</em&gt; דגם גידול דיסק דמותי: ויזואליזציה וכימות של ביטוי גנים סרטניים הפולשנות שימוש פסיפסים גנטי

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Labeling of Breast Cancer Patient-derived Xenografts with Traceable Reporters for Tumor Growth and Metastasis Studies

תיוג של xenografts הנגזר חולה סרטן השד עם כתבים לעקיבים עבור צמיחת גידולים וגרורים מחקרים

The use of preclinical models to study tumor biology and response to treatment is central to cancer research. Long-established human cell lines, and many ...

A Murine Orthotopic Bladder Tumor Model and Tumor Detection System

מודל גידול Murine Orthotopic שלפוחית ​​השתן סרטן מערכת איתור

This protocol describes the generation of bladder tumors in female C57BL/6J mice using the murine bladder cancer cell line MB49, which has been modified ...

Tumor Engraftment in a Xenograft Mouse Model of Human Mantle Cell Lymphoma

Engraftment גידול במודל של עכברים Xenograft של האדם מנטל לימפומה התא

B lymphocytes are key players in immune cell circulation and they mainly home to and reside in lymphoid organs. While normal B cells only proliferate when ...

In Vivo EPR Assessment of pH, pO2, Redox Status, and Concentrations of Phosphate and Glutathione in the Tumor Microenvironment

In Vivo EPR Assessment of pH, pO2, Redox Status, and Concentrations of Phosphate and Glutathione in the Tumor Microenvironment

אין ויוו הערכת EPR pH, pO2, מצב חמצון-חיזור, ואת ריכוזים של פוספט גלוטתיון ב Microenvironment הגידול

This protocol demonstrates the capability of low-field electron paramagnetic resonance (EPR)-based techniques in combination with functional paramagnetic ...

Digital Polymerase Chain Reaction Assay for the Genetic Variation in a Sporadic Familial Adenomatous Polyposis Patient Using the Chip-in-a-tube Format

פולימראז דיגיטלי Assay תגובת שרשרת עבור הווריאציה גנטי לחולה סדיר פוליפוזיס באמצעות התבנית שבב-ב--שפופרת

The quantitative analysis of human genetic variation is crucial for understanding the molecular characteristics of serious medical conditions, such as ...

In Vivo Inhibition of MicroRNA to Decrease Tumor Growth in Mice

ב Vivo עיכוב של מיקרואורנה כדי להקטין את צמיחת הגידול בעכברים

MicroRNAs (miRNAs) are important regulators of gene expression through their ability to destabilize mRNA and inhibit translation of target mRNAs. An ...

Predicting In Vivo Payloads Delivery using a Blood-brain Tumor-barrier in a Dish

Predicting ב Vivo מטענים משלוח באמצעות הגידול-מחסום דם-מוח בקערה

Highly selective by nature, the blood-brain barrier (BBB) is essential for the brain homeostasis in physiological conditions. However, in the context of ...

In Vitro Assay to Study Tumor-macrophage Interaction

בתוך שיטת חוץ גופית כדי ללמוד גידול-מקרופאג אינטראקציה

Tumor associated macrophages (TAMs) account for a large percentage of cells in the tumor mass for different types of cancers. Glioblastoma (GBM), a ...

Analyzing Tumor Gene Expression Factors with the CorExplorer Web Portal

ניתוח ביטוי גנים הגידול גורמים עם פורטל האינטרנט של CorExplorer

Differential gene expression analysis is an important technique for understanding disease states. The machine learning algorithm CorEx has shown utility ...