Name: a large animal model for acute kidney injury by temporary bilateral renal artery occlusion
Uploaded: 2021-02-02T15:00:00
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Vorremmo ringraziare il Dr. Arthur Nedder per il suo aiuto e la sua guida. Questo lavoro è stato supportato dal Richard A. and Susan F. Smith President's Innovation Award, Michael B. Klein and Family, The Sidman Family Foundation, The Michael B. Rukin Charitable Foundation, The Kenneth C. Griffin Charitable Research Fund e The Boston Investment Council.

Tutti gli studi in vivo sono stati condotti in conformità con le linee guida del National Institutes of Health sulla cura e l'uso degli animali e sono stati approvati dal Boston Children's Hospital's Animal Care and Use Committee (Protocol 18-06-3715). Tutti gli animali hanno ricevuto cure umane nel rispetto della Guida alla cura e all'uso degli animali da laboratorio. La figura 1 mostra la sequenza temporale, tra cui anestesia, preparazione chirurgica e punti di tempo per le misurazioni de...

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	<li>Ali Pour, P., Kenney, M. C., Kheradvar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioenergetics+consequences+of+mitochondrial+transplantation+in+cardiomyocytes.">Bioenergetics consequences of mitochondrial transplantation in cardiomyocytes.</a> Journal of the American Heart Association. 9 (7), 014501 (2020).</li><li>Giraud, S., Favreau, F., Chatauret, N., Thuillier, R., Maiga, S., Hauet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+large+pig+for+renal+ischemia-reperfusion+and+transplantation+studies:+The+Preclinical+Model.">Contribution of large pig for renal ischemia-reperfusion and transplantation studies: The Preclinical Model.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 14 (2011).</li><li>Amdisen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testing+Danegaptide+effects+on+kidney+function+after+ischemia/reperfusion+injury+in+a+new+porcine+two+week+model.">Testing Danegaptide effects on kidney function after ischemia/reperfusion injury in a new porcine two week model.</a> PLoS ONE. 11 (10), 1-13 (2016).</li><li>Bhargava, P., Schnellmann, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+energetics+in+the+kidney.">Mitochondrial energetics in the kidney.</a> Nature Reviews Nephrology. 13 (10), 629-646 (2017).</li><li>Bonventre, J. V., Weinberg, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+the+pathophysiology+of+ischemic+acute+renal+failure.">Recent advances in the pathophysiology of ischemic acute renal failure.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 14 (8), 2199-2210 (2003).</li><li>Case, J., Khan, S., Khalid, R., Khan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+Acute+Kidney+Injury+in+the+Intensive+Care+Unit.">Epidemiology of Acute Kidney Injury in the Intensive Care Unit.</a> Critical Care Research and Practice. 2013, 9 (2013).</li><li>Jabbari, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+transplantation+ameliorates+ischemia/reperfusion-induced+kidney+injury+in+rat.">Mitochondrial transplantation ameliorates ischemia/reperfusion-induced kidney injury in rat.</a> Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis of Disease. 1866 (8), 165809 (2020).</li><li>Malagrino, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheter-based+induction+of+renal+ischemia/reperfusion+in+swine:+Description+of+an+experimental+model.">Catheter-based induction of renal ischemia/reperfusion in swine: Description of an experimental model.</a> Physiological Reports. 2 (9), 1-13 (2014).</li><li>Freeman, R. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nephropathy+requiring+dialysis+after+percutaneous+coronary+intervention+and+the+critical+role+of+an+adjusted+contrast+dose.">Nephropathy requiring dialysis after percutaneous coronary intervention and the critical role of an adjusted contrast dose.</a> American Journal of Cardiology. 90 (10), 1068-1073 (2002).</li><li>Gasthuys, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+maturation+of+the+glomerular+filtration+rate+in+conventional+growing+piglets+as+potential+juvenile+animal+model+for+preclinical+pharmaceutical+research.">Postnatal maturation of the glomerular filtration rate in conventional growing piglets as potential juvenile animal model for preclinical pharmaceutical research.</a> Frontiers in Pharmacology. 8 (431), 1-7 (2017).</li><li>Doulamis, I. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+transplantation+by+intra-arterial+injection+for+acute+kidney+injury.">Mitochondrial transplantation by intra-arterial injection for acute kidney injury.</a> American Journal of Physiology - Renal Physiology. 319 (3), 403-413 (2020).</li><li>Rewa, O., Bagshaw, S. 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K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Volume-to-creatinine+clearance+ratio.+A+pharmacokinetically+based+risk+factor+for+prediction+of+early+creatinine+increase+after+percutaneous+coronary+intervention.">Volume-to-creatinine clearance ratio. A pharmacokinetically based risk factor for prediction of early creatinine increase after percutaneous coronary intervention.</a> Journal of the American College of Cardiology. 50 (7), 584-590 (2007).</li></ol>

L'AKI è un disturbo clinico comune che colpisce fino al 50% dei pazienti adulti ricoverati in tuttoil mondo 6,12. È necessario un modello animale clinicamente rilevante per indagare ulteriormente la fisiopatologia della malattia e potenziali obiettivi terapeutici. Sebbene ci siano diversi modelli murini che replicano l'AKI, questi non imitano completamente i rispettivi scenari clinici e l'anatomia del rene umano. Questo studio propone un modello suino clinicame...

La lesione renale acuta (AKI) è una condizione comunemente diagnosticata tra i pazienti chirurgici associati a morbilitàe mortalità significative 1,2. I dati disponibili mostrano che l'AKI può colpire anche la metà di tutti i pazienti ricoverati in tutto il mondo e porta al tasso di mortalità del 50% nei pazienti nell'unità di terapiaintensiva 1,3. Nonostante la sua elevata prevalenza, l'attuale terapia AKI rimane limitata alle strategie preventive, come la gestione dei fluidi e la dialisi. Pertanto, c'è un interesse costante nell'esplorare terapie alternative per AKI4,5,6.
L'AKI è tipicamente classificato in pre-renale, intrinseco e post-renale in base alla suaeziologia 4,5,6. La maggior parte dei pazienti chirurgici con AKI sono associati a cause pre-renali dovute all'ipovolemia, con conseguente lesione da ischemia-riperfusione (IRI) dei reni2. Clinicamente, la produzione di urina diminuisce e i livelli di creatinina aumentano a causa della diminuzione della funzione renale. Il rene è un organo ad alto tasso metabolico e suscettibile all'ischemia. Un modello animale di grandi dimensioni altamente riproducibile di IRI renale è necessario per ottenere una migliore comprensione della fisiopatologia dell'AKI e dei suoi potenziali approcci terapeutici5.
Per imitare lo scenario clinico dell'ipoperfusione renale peri-operativamente, si ritiene opportuno un modello di occlusione bilaterale dell'arteria renale. I modelli precedentemente descritti che comportano un'occlusione unilaterale dell'arteria renale con o senza resezione del rene contralaterale non forniscono un'applicabilitàclinica sufficiente 7,8. Sebbene questi modelli siano sufficienti per causare L'AKI, non assomigliano a scenari clinici reali né in termini di tipo né di durata della lesione.
Lo scopo di questo documento è quello di presentare un modello porcino di occlusione temporanea bilaterale percutanea delle arterie renali mediante occlusione palloncino-catetere sotto angiografia. L'occlusione bilaterale dell'arteria renale imita lo scenario clinico dell'ipoperfusione renale, seguita dalla successiva rimozione del palloncino per la riperfusione9,10. Vengono descritti i passaggi tecnici, tra cui cateterizzazione, guida del catetere, angiografia e monitoraggio emodinamico. Questo metodo non solo consente un'occlusione altamente controllata e replicabile delle arterie renali, ma l'approccio percutaneo riduce al minimo l'impatto della risposta infiammatoria limitando la quantità di insulto al corpo rispetto a un approccio aperto.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% sodium chloride injection, usp, 100 ml viaflex plastic container</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>2B1302</td>
			<td>For animal hydration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agent contrast 100.0ml injection media btl ioversal 74%</td>
			<td>CARDINAL HEALTH</td>
			<td>133311</td>
			<td>For visualizing the vasculature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bard Bardia Closed System Urinary Drainage Bag</td>
			<td>BARD Inc</td>
			<td>802001</td>
			<td>For urine collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Vacutainer K2 EDTA</td>
			<td>BD</td>
			<td>367841</td>
			<td>For blood sample storage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Vacutainer Lithium Heparin</td>
			<td>BD</td>
			<td>366667</td>
			<td>For blood sample storage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>6906950</td>
			<td>For skin disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bookwalker retractor</td>
			<td>Codman</td>
			<td></td>
			<td>For skin retraction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bupivacaine 0.25%</td>
			<td>Hospira</td>
			<td></td>
			<td>Administer at incision site for analgesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR</td>
			<td>Zoo Pharm</td>
			<td></td>
			<td>10mg/ml bottle, Dose: 0.2mg/kg SC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cath angio 5.0 Fr x100.0 cm 0.038 in JR4</td>
			<td>MERIT MEDICAL SYSTEM INC</td>
			<td>7523-21</td>
			<td>For identification of the renal arteries</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cuffed endotracheal tube</td>
			<td>Emdamed</td>
			<td></td>
			<td>To establish a secure airway for the duration of the operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EKG Medtronics- Physiocontrol LifePak 20 Oxygen saturation monitor</td>
			<td>GE Healthcare Madison WI</td>
			<td></td>
			<td>For oxygen saturation monitoring</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Encore 26 inflator</td>
			<td>BOSTON SCIENTIFIC</td>
			<td>710113</td>
			<td>For inflating the balloon catheters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 95% (Ethyl alcohol)</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td></td>
			<td>For skin disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fentanyl patch</td>
			<td>Mylan</td>
			<td></td>
			<td>Dose: 25-50mcg/hr, TD</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gold silicone coated Foley</td>
			<td>TELEFLEX MEDICAL INC</td>
			<td>180730160</td>
			<td>For urine collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium</td>
			<td>LEO Pharma A/S</td>
			<td></td>
			<td>Dose: 200 IU/kg IV</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>i33 ultrasound machine</td>
			<td>Phillips</td>
			<td></td>
			<td>Use ultrasonographic guidance for femoral catherization if necessary</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inqwire diagnostic guide wire - 0.035&#34; (0.89 mm) - 260 cm (102&#34;) - 1.5 mm j-tip</td>
			<td>MERIT MEDICAL SYSTEM INC</td>
			<td>6609-33</td>
			<td>For guiding the balloon catheters to the renal arteries</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intravenous catheter, size 20 gauge</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>Inc SC-360097</td>
			<td>For fluid administration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Patterson Veterinary Supply, Inc.</td>
			<td>21283620</td>
			<td>Dose: 3%, INH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum blunt curved 14.5 cm - 5(3/4)&#34;</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU-1311-14M</td>
			<td>For tissue dissection and cutting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neonatal disposable transducer kit with 30ml/hr flush device and double 4-way stopcocks for continuous monitoring</td>
			<td>Argon Medical</td>
			<td>041588505A</td>
			<td>For pressure measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Powerflex pro PTA dilatation catheter 6 x 20 mm - shaft length (135cm)</td>
			<td>CARDINAL HEALTH</td>
			<td>4400602X</td>
			<td>For occlusion of the renal arteries</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressure monitoring lines mll/mll - 12&#34; clear, mll/mll</td>
			<td>Smiths Medical</td>
			<td>B1571/MX571</td>
			<td>For pressure measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Procedure pack</td>
			<td>Molnlycke Health Care</td>
			<td>97027809</td>
			<td>Surgical drape, gauze pads, syringes, beaker etc</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protamine</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>1044148</td>
			<td>For heparin reversal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blade - size #10</td>
			<td>Cardinal Health (Allegiance)</td>
			<td>32295-010</td>
			<td>For the skin incisions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stopcock iv 4 way lrg bore rotg male ll adptr strl</td>
			<td>Peoplesoft</td>
			<td>1550</td>
			<td>For connecting tubings</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight lateral retractor</td>
			<td>Codman</td>
			<td></td>
			<td>For skin retraction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture perma hnd 18in 2-0 braid silk blk</td>
			<td>CARDINAL HEALTH 1</td>
			<td>A185H</td>
			<td>For suturing incision site and securing catheters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe contrast injection 10ml fixed male luer red</td>
			<td>MERIT MEDICAL SYSTEM INC</td>
			<td>MSS111-R</td>
			<td>To administer the contrast agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe medical 60ml ll plst strl ltx free disp</td>
			<td>CARDINAL HEALTH 1</td>
			<td>BF309653</td>
			<td>For urine collection and flushing of the angiocath</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tilzolan (tiletamine/zolazepam)</td>
			<td>Patterson Veterinary Supply, Inc.</td>
			<td>07-893-1467</td>
			<td>Dose: 4-6 mg/kg, IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Putney, INC</td>
			<td></td>
			<td>Dose: 1.1-2.2 mg/kg, IM</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a large animal model for acute kidney injury by temporary bilateral renal artery occlusion

La lesione renale acuta (AKI) è associata a un rischio più elevato di morbilità e mortalità post-operatoria. La lesione da ischemia-riperfusione (IRI) è la causa più comune di AKI. Per imitare questo scenario clinico, questo studio presenta un modello animale di grandi dimensioni altamente riproducibile di IRI renale nei suini utilizzando un'occlusione bilaterale temporanea percutanea palloncino-catetere delle arterie renali. Le arterie renali sono occluse per 60 minuti introducendo i cateteri a palloncino attraverso l'arteria femorale e carotide e avanzandoli nella porzione prossimale delle arterie. Il contrasto iodinato viene iniettato nell'aorta per valutare eventuali opacifica dei vasi renali e confermare il successo dell'occlusione dell'arteria. Ciò è ulteriormente confermato dall'appiattimento della forma d'onda dell'impulso sulla punta dei cateteri a palloncino. I palloncini vengono sgonfiati e rimossi dopo 60 minuti di occlusione bilaterale dell'arteria renale e gli animali possono riprendersi per 24 ore. Alla fine dello studio, la creatinina plasmatica e l'azoto urea nel sangue aumentano significativamente, mentre l'eGFR e la produzione di urina diminuiscono significativamente. La necessità di contrasto iodinato è minima e non influisce sulla funzione renale. L'occlusione bilaterale dell'arteria renale imita meglio lo scenario clinico dell'ipoperfusione renale perioperatoria e l'approccio percutaneo riduce al minimo l'impatto della risposta infiammatoria e il rischio di infezione visto con un approccio aperto, come una laparotomia. La capacità di creare e riprodurre questo modello suino clinicamente rilevante facilita la traduzione clinica all'uomo.

Analisi funzionale I risultati rappresentativi di questo studio provengono da 6 animali e i dati mostrati sono ± errore standard della media. La funzione renale viene valutata determinando la produzione di urina, il tasso di filtrazione glomerulare stimato (eGFR), la creatina plasmatica e l'azoto urea nel sangue (BUN). I biomarcatori della funzione renale sono valutati utilizzando un analizzatore di chimica portatile. l'eGFR è calcolato secondo la seguente formula: eGFR =1,879 × BW1,092/...

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A Large Animal Model for Acute Kidney Injury by Temporary Bilateral Renal Artery Occlusion

Questo studio presenta un modello animale di grandi dimensioni altamente riproducibile di lesione renale ischemia-riperfusione nei suini utilizzando occlusione bilaterale percutanea percutanea palloncino-catetere delle arterie renali per 60 minuti e riperfusione per 24 ore.

Un modello animale di grandi dimensioni per lesioni renali acute da occlusione temporanea bilaterale dell'arteria renale

Acute kidney injury (AKI) is associated with higher risk for morbidity and mortality post-operatively. Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the most ...

Questo studio descrive un modello animale di grandi dimensioni riproducibile di lesione renale da riperfusione di ischemia, che può essere utilizzato per studiare la fisiopatologia della lesione renale acuta ed esplorare potenziali modalità terapeutiche. Questo metodo è altamente riproducibile e riduce al minimo l'impatto della risposta infiammatoria limitando la quantità di insulto al corpo rispetto a un approccio aperto. Questo modello preclinico imita scenari clinici, come il trapianto renale, l'ipoperfusione renale a seguito di shock cardiogenico, procedure trascateteriche con conseguente ischemia renale e procedure cardiovascolari con tempi di arresto cardio-circolatori prolungati.Per iniziare, disinfettare l'area laterale destra del collo applicando betadina e quindi 95% di etanolo tre volte. Drappeggia l'animale in modo sterile. Eseguire un taglio per la cateterizzazione dell'arteria carotidea destra e della vena giugulare destra.Ritrarre lateralmente il muscolo sternocleidomastoide e sezionarlo fino all'arteria carotidea destra e alla vena giugulare destra. Inserire una toria angioografica 5F sia nell'arteria che nella vena. Fissalo con una sutura 2-0 di seta.Inserire una toria angioografica 5F utilizzando la tecnica Seldinger nell'arteria femorale sinistra forando l'arteria con un ago cavo. Inserire un filo guida a punta morbida attraverso il lume e farlo avanzare nell'arteria femorale. Tenere il filo guida sicuro con una mano mentre si rimuove l'ago.Passare la torcia angioografica sopra il filo guida nell'arteria femorale e ritirare il filo guida utilizzando la guida ad ultrasuoni, se necessario. Somministrare per via endovenosa 200 UI per chilogrammo di eparina di sodio per ottenere l'anticoagulazione sistemica. Per eseguire l'angiografia, iniettare un agente di contrasto iodinato sotto fluoroscopia per identificare le arterie renali.Identificare le arterie renali e far avanzare manualmente il filo guida nel catetere guida. Posizionare il catetere guida 5F JL4 nell'arteria renale sinistra attraverso l'arteria carotidea destra. Posizionare il secondo catetere guida 5F JL4 nell'arteria renale destra attraverso l'arteria femorale sinistra.Utilizzare i fili guida per dirigere un'angioplastica transluminale percutanea 5F, o catetere di dilatazione PTA, in ogni arteria renale. Posizionare ogni catetere a palloncino in posizione e collegare una linea di pressione a ciascun catetere. Controllare la presenza di forme di onda d'impulso arteriosa nel monitor di pressione per garantire il corretto posizionamento del catetere.Gonfiare ogni palloncino e mirare a una pressione di circa 2,5 pressione atmosferica all'interno del palloncino. Per confermare la cessazione del flusso sanguigno ai reni, osservare l'appiattimento della forma d'onda del polso sulla punta del catetere a palloncino. Iniettare un mezzo di contrasto iodinato in una diluizione 1:1 con soluzione salina e verificare la presenza di eventuali opacizza dei vasi renali.Dopo 60 minuti di occlusione, sgonfiare e rimuovere accuratamente i cateteri a palloncino dalle arterie renali. Eseguire un'angiografia utilizzando un mezzo di contrasto diluito 1:1 per confermare la persistenza dell'arteria renale e la creazione di una riperfusione renale. Rimuovere la toria angioografica 5F dall'arteria femorale sinistra.Applicare dalla pressione nel sito di cateterizzazione per 30 minuti. Invertire l'effetto dell'eparina con la somministrazione di tre milligrammi per chilogrammo di protamina fino alla normalizzazione del tempo di coagulazione attivo. Per campionare l'urina durante il periodo post-operatorio, fissare un tubo al catetere Foley con una sutura di seta 2-0 usando un punto interrotto sulla pelle.Per il prelievo del sangue, lasciare le suonerie angioografiche nell'arteria carotidea destra e la vena giugulare destra in posizione e fissarle con una sutura di seta 2-0. somministrare tre milligrammi per chilogrammo di bupivacaina nel sito di incisione per ridurre al minimo il dolore. Continuare a idratare l'animale con 0,9 cloruro di sodio per un totale di due ore dopo la fine dell'ischemia.Chiudi l'incisione del collo con una sutura di seta 2-0 usando un punto interrotto in due strati. Posizionare una macchia di fentanil da 25 a 50 microgrammi all'ora sul retro dell'animale per ridurre al minimo il dolore post-operatorio e monitorare l'animale sulla ventilazione meccanica fino a quando non si sveglia. Raccogliere i campioni finali di sangue e urine e calcolare l'uscita delle urine.Eseguire un'incisione di laparotomia della linea mediana utilizzando una lama di dimensioni 10 dallo xifoide fino al bacino medio. Utilizzare un retrattile laterale dritto per ritrarre la pelle addominale. Sezionare gli attacchi peritoneali laterale della parete addominale per esporre il retroperitoneo destro e sinistro.Identificare e sezionare senza mezzi termini sia le arterie renali che le vene. Ligate sia arterie renali che vene con una sutura di seta 2-0 ed eseguire nefromie bilaterali per raccogliere campioni di tessuto intero per l'analisi istologica e metabolica. La funzione renale è stata valutata determinando la produzione di urina, eGFR, creatina plasmatica e BUN.Dopo 60 minuti di occlusione bilaterale dell'arteria renale, la produzione di urina è stata significativamente diminuita ed è rimasta in questo modo a sei e 24 ore dopo la riperfusione. Allo stesso modo, è stata osservata una significativa diminuzione dell'eGFR, che è sceso dal basale rispetto alla fine dell'ischemia a due ore, sei ore e 24 ore di riperfusione. La creatinina plasmatica è stata significativamente aumentata a due, sei e 24 ore di riperfusione rispetto al basale.Bun è stato aumentato rispetto al basale a sei e 24 ore di riperfusione. Evidenti aree necrotiche ed emorragiche sono state distribuite in modo non uniforme in entrambi i reni alla fine dei 60 minuti di ischemia renale bilaterale e delle 24 ore di riperfusione. La colorazione tricromatica di Masson rivelò una necrosi coagulativa confluente, che si trovava nei tubuli prossimali della corteccia renale.Sono state valutate anche le sezioni in plastica incorporata. Tutte le diapositive tricromatiche di Masson sono state valutate per necrosi cellulare, perdita del bordo del pennello, formazione del calco e dilatazione dei tubuli. La necrosi tubolare acuta, o punteggio ATN, ha mostrato lesioni significative alla corteccia renale e al midollo.Quando si esegue questo protocollo, controllare il posizionamento dei siti di palloncini sulla vicinanza di RC e occludere totalmente il flusso al rene. Assicurati che non si piei in quell'acqua. Seguendo questa procedura, le sonde di flusso del catetere endovascolare possono essere inserite nelle arterie renali per valutare il flusso sanguigno renale, oppure possono essere eseguite biopsie renali per valutare la lesione renale del tessuto.

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Trombosi dell'arteria carotica canini cloruro ferrico-indotta: Un grande modello animale di danno vascolare

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Misurazione di contrattilità isometrica dell'arteria mesenterica Mouse con filo Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Modified Two Kidney One Clip Mouse Model of Renin Regulation in Renal Artery Stenosis

Un modello di topo modificato a due rene una clip della regolazione della renina nella stenosi dell'arteria renale

Renal artery stenosis is a common condition in patients with coronary or peripheral vascular disease where the renin angiotensin aldosterone system (RAAS) ...

Acute Kidney Injury Model Induced by Cisplatin in Adult Zebrafish

Modello di lesione renale acuta indotto dal cisplatino nel pesce zebra adulto

Cisplatin is commonly used as chemotherapy. Although it has positive effects in cancer-treated individuals, cisplatin can easily accumulate in the kidney ...