Name: activity of posterior lateral line afferent neurons during swimming in zebrafish
Uploaded: 2021-02-10T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Activity of Posterior Lateral Line Afferent Neurons during Swimming in Zebrafish at JoVE.com

国立衛生研究所(DC010809)、国立科学財団(IOS1257150、1856237)、ホイットニー海洋生物科学研究所からJ.C.Lへの支援を心から受け入れました。遼研究室の過去・現在のメンバーに対し、議論を刺激して頂き、感謝申し上げたいと思います。

すべての動物のケアと実験は、フロリダ大学の制度的動物ケアと使用委員会によって承認されたプロトコルに従って行われました.
1. 電気生理学的記録用材料の調製
<ol><li>シリコンエラストマー底の録音皿を作ります。<ol>
<li>自己混合シリコーンエラストマー成分(例えば、シルガード)の薄い層を、浅い縁が浅いリムとレベルアップするまで、カバーガラス底の組織培養...

説明された実験プロトコルは、脊椎動物を無傷で動作させる運動行動全体の感覚入力の内因性変化を監視する可能性を提供する。具体的には、幼虫ゼブラフィッシュにおける側線の無気泡性ニューロンと腹側運動根の同時細胞外記録を行うためのインビボアプローチを詳述する。自発的な発泡活動は、潜在的な同時運動活動1、2、39、40、41<su...

メカノ感覚系の無透過ニューロンは、聴覚とバランスの間に毛細胞から脳に情報を伝達する。電気生理学は、直接録音を通じて、刺激性ニューロンの感受性を明らかにすることができる。毛髪細胞からの全細胞のパッチ適用は困難な場合がありますが、下流の不毛なニューロンからの記録は容易であり、制御された刺激1、2、3に応答して行動電位の評価を可能にする。毛細胞を刺激すると、そのたわみ、メカノ感覚構造を変更し、したがって、刺激性ニューロン4、5、6における作用電位(スパイク)の増加を引き起こす。外部刺激がない場合、無気泡性ニューロンはまた、毛細胞から無フェ性シナプス後末端7、8へのグルタミン酸漏れにより自発的にスパイクし、感度9,10の維持に寄与することが示されている。アフェレント活性のパッチクランプ記録は、マイクロフォニックス11、12、または機能的なカルシウムイメージング13、14、15など、より低い時間分解能を有する技術を用いて不可能なヘアセル感受性およびシグナルダイナミクスの観察を可能にする。次のプロトコルは、ヘアセル感度の瞬間的な変化を明らかにするために、モータコマンドと同時に、afferentアクティビティの記録を可能にします。
ゼブラフィッシュ(Danio rerio)は、体に対する水の動きを検出するために横線系を構成する神経マストに含まれる毛髪細胞を使用し、ナビゲーション16、17、18、捕食者回避、獲物捕獲19、20、および学校教育21に不可欠な神経信号に翻訳される。水の流れは、水泳22、23、24、呼吸22、25、26、および給餌27の動きによっても自己発生することができる。これらの行動は、毛髪細胞を疲労させ、センシングを損なう繰り返しの動きを含む。したがって、横線系は、外部(エクサフェレント)と自己生成(reafferent)流動刺激を区別することが重要です。副分泌はゼブラフィッシュの移動中に自己生成流動信号を減衰させる。この抑制性予測運動信号は、センサ受容体に降下ニューロンを介して中継され、入力を変更するか、または再送フィードバック28,29の処理を中断する。このフィードフォワードシステムの早期理解に寄与する精細な研究は、神経回路の接続性および内因性活性が維持されなかったインビトロ調製に依存していた28、30、31、32、33、34、35。このプロトコルは、内因性フィードバックダイナミクスが維持され、生体内のカロリー放電をよりよく理解できる無傷の神経回路を維持するアプローチを記述する。
ここで概説するプロトコルは、幼虫ゼブラフィッシュにおける後方線の受熱性ニューロンおよび運動ニューロン活性を同時に監視する方法を説明する。運動コマンドの前後にフェレントシグナルダイナミクスを特徴付けるので、移動中の毛細胞の感度を調節する中枢神経系からのリアルタイムの内因性フィードバックに関する洞察を得られます。このプロトコルは、実験の前にどのような材料を準備する必要があるかを概説し、ゼブラフィッシュの幼虫を麻痺させ、準備する方法を説明します。プロトコルは、運動ニューロンの不フェレントニューロンおよび細胞外腹側根(VR)記録の安定した緩いパッチ記録を確立する方法を説明する。このプロトコルを用いて得ることができる代表的なデータは、例示的な個体から提示され、実験プロトコルの複数の複製に対して分析を行った。データの前処理は、MATLABでカスタムのスクリプトを使用して実行されます。全体として、このin vivo実験パラダイムは、モデル脊椎動物の毛細胞系における移動中の感覚フィードバックをよりよく理解する準備ができている。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>100 mL beaker</td>
			<td>PYREX</td>
			<td>1000</td>
			<td>resceptacle for etchant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10x water immersion objective</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>UMPLFLN10xW</td>
			<td>low magnification for positioning larvae and recording electrode</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40x water immersion objective</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>LUMPLFLN40XW</td>
			<td>higher magnification for position electrode tip and establishing patch-clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>abfload.m</td>
			<td></td>
			<td>supplemental coding file</td>
			<td>custom written MATLAB script for converting raw electrophysiology recordings to .mat files</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AffVR_preprocess.m</td>
			<td></td>
			<td>supplemental coding file</td>
			<td>custom written MATLAB script for preprocessing recording data</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BNC coaxial cables</td>
			<td>ThorLabs</td>
			<td>2249-C-12</td>
			<td>connecting amplifier and digitizer channels; require 4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>borosilicate glass capillaries w/ filament</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>G150F-3</td>
			<td>inner diameter: 0.86, outer diameter: 1.50; capillary glass used to form recording electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>burst_detect</td>
			<td></td>
			<td>supplemental coding file</td>
			<td>custom written MATLAB function necessary to run AffVR_preprocess.m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>computer</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>any computer should work</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DC Power Supply</td>
			<td>Tenma</td>
			<td>72-420</td>
			<td>used for electrically etching dissection pins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electrophysiology digitizer</td>
			<td>Axon Instruments, Molecular Devices</td>
			<td>Axon DigiData 1440A</td>
			<td>enables acquisition of patch-clamp data</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>filament</td>
			<td>Sutter Instrument Company</td>
			<td>FB255B</td>
			<td>2.5 mm box filament used in micropipette puller</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fine forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>Dumont #5 (0.05 x 0.02 mm) Item No. 11295-10</td>
			<td>used to manipulate larvae and insert pins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fixed stage DIC microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BX51WI</td>
			<td>microscope used to visualize and establish patch-clamp recordings</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>flexible, tapered pipette tip</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>02-707-169</td>
			<td>flexible tips enable insertion into recording electrode to dispense extracellular solution at the tip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FluoroDish</td>
			<td>World Precision Instruments Inc.</td>
			<td>FD3510-100</td>
			<td>cover glass bottomed dish recording dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KimWipe</td>
			<td>KimTech</td>
			<td>34155</td>
			<td>task wipe used for wicking away excess fluid from larvae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kwik-Gard</td>
			<td>World Precision Instruments Inc.</td>
			<td>710172</td>
			<td>self-mixing sylgard elastomer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB</td>
			<td>MathWorks</td>
			<td>R2020b</td>
			<td>command line software for preprocessing data</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microelectrode amplifier</td>
			<td>Axon Instruments, Molecular Devices</td>
			<td>MultiClamp 700B</td>
			<td>patch clamp amplifier for dual channel recordings</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microforge</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>MF-830 microforge</td>
			<td>to polish recording electrode</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micromanipulator control unit</td>
			<td>Siskiyou</td>
			<td>MC1000-eR/T</td>
			<td>4-axis dial coordinator for controlling micromanipulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micropipette puller</td>
			<td>Sutter Instrument Company</td>
			<td>Flaming/Brown P-97</td>
			<td>for pulling capillary glass into recording electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microscope control unit</td>
			<td>Siskiyou</td>
			<td>MC1000e</td>
			<td>positions the microscope around the fixed stage and preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>motorized micromanipulator</td>
			<td>Siskiyou</td>
			<td>MX7600</td>
			<td>positions the headstage and attached recording electrode for patch-clamp recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MultiClamp Commander</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>2.2.2</td>
			<td>downloadable from Axon MultiClamp 700B Commander download page</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>optical air table</td>
			<td>Newport Corporation</td>
			<td>VH3036W-OPT</td>
			<td>breadboard isolation table to float microscope and minimize vibrations during recordings</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pCLAMP</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>10.7.0</td>
			<td>downloadable from Axon pCLAMP 10 Electrophysiology Data Acquisition &#38; Analysis Software Download page</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>permanent ink marker</td>
			<td>Sharpie</td>
			<td>order from amazon.com</td>
			<td>for marking the leading edge side of the VR electrode to ensure proper orientation when inserting into pipette holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>petri-dish</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>35-3001</td>
			<td>used to immerse larvae in paralytic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pipette holder</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>1-HL-U</td>
			<td>hold recording electrode and connect to the headstage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pneumatic transducer</td>
			<td>Fluke Biomedical Instruments</td>
			<td>DPM1B</td>
			<td>for controlling recording electrode internal pressure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>potassium hydroxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>221473-25G</td>
			<td>etchant for etching dissection pins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silicone tubing</td>
			<td>Tygon</td>
			<td>14-169-1A</td>
			<td>tubing to connect pneumatic transducer to pipette holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>spike_detect</td>
			<td></td>
			<td>supplemental coding file</td>
			<td>custom written MATLAB function necessary to run AffVR_preprocess.m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereomicroscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>Stemi 2000-C</td>
			<td>used to visualize pin tips and during preparation of larvae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>straight edge razor blade</td>
			<td>Canopus</td>
			<td>order from amazon.com</td>
			<td>cuts the tungsten wire while making dissection pins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>swimbout_detect</td>
			<td></td>
			<td>supplemental coding file</td>
			<td>custom written MATLAB function necessary to run AffVR_preprocess.m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>syringe</td>
			<td>Becton Dickinson Compoany</td>
			<td>309602</td>
			<td>filled with extracellular solution to inject into recording electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>transfer pipette</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z135003-500EA</td>
			<td>single use, non-sterile pipette for transfering larvae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tricaine methanesulfonate</td>
			<td>Syndel</td>
			<td>12854</td>
			<td>pharmaceutical aneasthetic used to euthanize larvae with high dosage.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tungsten wire</td>
			<td>World Precision Instruments Inc.</td>
			<td>715500</td>
			<td>0.002 inch, 50.8 &#956;m diameter; used to make dissection pins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vacuum filtration unit</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>SCGVU11RE</td>
			<td>single use, sterile, vacuum filtration units used to sterilize extracellular solution used for electrophysiology electrode ringer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>voltage-clamp current-clamp headstage</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>CV-7B</td>
			<td>supplied with MultiClamp 700B amplifier used as left and right headstages</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;-bungarotoxin</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>B1601</td>
			<td>for immobilizing the larvae prior to recording</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

activity of posterior lateral line afferent neurons during swimming in zebrafish

感覚システムは、行動を演出するために不可欠な手がかりを収集しますが、動物は生物学的に関連する情報を解読する必要があります。ロコモーションは、動物が周囲の環境の関連する感覚的手がかりから離れなければならないことの深い手がかりを生成します。例えば、魚が泳ぐと、体のうねりから発生した流れは、毛細胞を含むメカノ受容性ニューロマストによって検出され、横線系を構成する。その後、毛髪細胞は感覚的な感覚的なニューロンを介してセンサーから脳に流体運動情報を送信します。同時に、モータ指令のカロリー放電は、感覚過負荷を防ぐためにヘアセルに中継される。移動中の予測運動信号の抑制効果を考慮すると、横線系の感度を評価する際に重要である。我々は、数時間続くことができるゼブラフィッシュ幼虫(受精後4〜7日)における後側索神経および腹側運動根活性を同時に監視するin vivo電気生理学的アプローチを開発した。単一または複数のニューロンからの活性を検出することができる緩いパッチクランプ技術を使用して、細胞外のニューロンの記録が達成される。腹側根の記録は運動ニューロン活動を検出するためにガラス電極で皮膚を通して行われる。当社の実験プロトコルは、脊椎動物を無傷で動作させるモータ挙動全体の感覚入力の内因性または誘発変化を監視する可能性を提供します。

ゼブラフィッシュの幼虫が適切に固定化され、後方線の斜線が気になるガングリオンとVR記録が達成された後、同時に、アフェレントと運動ニューロンの両方で活性を測定することができます。記録チャンネルは、ギャップのない記録プロトコル(ステップ1.4)を使用して表示され、afferentおよびVRアクティビティを継続的に監視します。リアルタイムでは、自発的な無フェレントスパイク率の?...

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Activity of Posterior Lateral Line Afferent Neurons during Swimming in Zebrafish

我々は、モデル脊椎動物の毛細胞系における運動コマンド中の、無毛ニューロン活動の変化をモニターするプロトコルを記述する。

ゼブラフィッシュで泳ぐ後側面線の発泡性ニューロンの活動

Sensory systems gather cues essential for directing behavior, but animals must decipher what information is biologically relevant. Locomotion generates ...

このプロトコルは、研究者が無傷の振る舞い椎骨の制御された刺激に対する単一の感覚ニューロンの活性および応答を監視することを可能にする。このパッチ電気生理学は、リアルタイムで個々のニューロンのスパイク活動から記録するための迅速かつ直接的な方法です。また、ほとんどの光学イメージング技術よりも低コストで、より優れた時間分解能と感度を提供します。横線の毛細胞は、人間の内耳のものと相同である。したがって、この技術は、人間の難聴や聴覚障害に適用される毛細胞回路の特性を明らかにする準備ができています。電気生理学は、見て、物理的に模倣する必要がある細かい運動能力を使用した工芸品です。テキストのみの指示は、誤解のためのあまりにも多くの余地を残します。まず、シルガードのような自己混合シリコーンエラストマーの薄い層をカバーガラス底の組織培養皿に分配し、シリコーンエラストマーボトムレコーディングディッシュを作ります。解剖ピンを作るために、DC電源を使用してエッチャントの100ミリリットルビーカーに5ボルトの負の電荷を提供し、正に帯電した出力にタングステンワイヤーを取り付けます。先端が鋭いポイントに狭くなるまで、ワイヤーの先端を繰り返しエッチャント浴に浸します。ステレオ顕微鏡の下で、ワイヤーを先端から約1ミリメートル切断し、ストレートエッジカミソリブレードで切断します。これを3回繰り返し、細かい鉗子を使用して硬化した録音皿にピンを挿入します。記録電極を準備するには、ボックスフィラメント付きマイクロピペットプーラーを使用してホウケイ酸ガラスキャピラリーチューブを引っ張ります。電極は後部横線からの無気泡のニューロンを記録するために使用されるテーパーが付いている直径30マイクロメートルの先端を有するべきである。追加のホウケイ酸ガラスキャピラリーチューブを、小さな1~5マイクロメートルの先端径の電極に引き込みます。各手に1つの電極を持ち、チップをそっと互いに横切って動かして先端を壊します。マイクロフォージを使用して、ベベジチップを滑らかになるまで磨きます。最終的な先端の直径は30から50マイクロメートルの間であるべきである。ゼブラフィッシュの幼虫を固定化し、ピペットを移すために大きな先端を使用して35ミリメートルのシャーレに移します。周囲のソリューションをできるだけ多く取り外します。幼虫を10マイクロリットルの0.1%α-ブンガロトキシンに約5分間浸す。麻痺した幼虫を細胞外液で10分間洗います。次いで、トランスファーピペットを使用して、幼虫を細胞外溶液浴からシリコーン底付き記録皿に移動させる。ステレオ顕微鏡の下で、このシリコーンマットの中央の上に細かい先端の鉗子で幼虫をそっと配置し、体の前部と後部端が左から右に走る横側を上に置きます。細かい先端鉗子を使用して、肛門に直接後ろ向きの幼虫の脊索を通してシリコーンに直交するエッジピンを挿入する。尾の端近くの脊索を通して2番目のピンを挿入し、ガス膀胱の脊索後回を通して3番目のピンを挿入します。4つ目のピンを大蓋小胞に挿入し、ピンがカプセル化剤に挿入する際にわずかな回転を提供します。わずかな回転が適用されると、クリースラムとオティック小胞の間の組織を監視して、発泡性ソマタのクラスターを明らかにする。DIC顕微鏡の固定ステージ上の目的の10倍の下にピン幼虫を置き、左ヘッドステージベクターに平行な筋肉ブロックのミオセプタル裂け目を向けます。地上線を浴室の溶液に入れ、それが左のヘッドステージに接続されていることを確認します。柔軟なゲルローディングピペットチップを使用してVR記録電極に30マイクロリットルの細胞外溶液を充填し、左ヘッドステージピペットホルダーに挿入します。空気圧トランスデューサで得られる正圧を加えながら、倍率を40倍にし、記録ピペットを皿溶液に下げます。2つのミオメア腹孔の間のミオセプチムの上に電極先端を持ってきて、裂け目がVR電極先端の開口部の中心になるまでピペットを下に下げて上皮にそっと接触させます。最初の接触の後、ピペットを斜めに操縦して、先端が接触し、シールを生成できることを確認します。空気圧トランスデューサで負圧を加え、保持します。パッチクランプソフトウェアで、ツールバーの再生ボタンをクリックしてVR信号を監視します。Wellsステレオタイプのバースト信号ダイナミクスを使用して運動ニューロンの活動が観察されたら、VR記録が達成されていることを確認します。30マイクロリットルの細胞外溶液でアフェレンス記録電極を充填し、右ヘッドステージピペットホルダーに挿入します。次に、空気圧トランスデューサーによって生成される陽圧を加えながら、皿溶液にそれを下げます。電極を見つけて、電極先端を試料の上に持って来なさい。マイクロマニピュレーターを使用して、クリースラムの上の位置を保持するまで、アフェレント電極先端を下げます。倍率を40倍の浸漬に増やし、後側線神経とクレイスラムの交点を見つけます。電極先端をアフェレントガングリオンの上に持ち込み、先端が上皮に接触するまでピペットを下げます。先端全体が帯の神経節に接触するように電極を穏やかに操縦する。空気圧トランスデューサで負圧を加え、保持します。パッチクランプソフトウェアで再生をクリックした後、スパイクがおよそ100〜200ミリ秒ごとに自発的に発生したときに、細胞全体の緩いパッチ記録が達成されることを確認してください。一度、発泡ニューロンと運動ニューロンの活動が検出されたら、ピーククランプ10のツールバーのRecordボタンをクリックして、両方のチャンネルで同時にギャップフリーの録音をキャプチャします。テキスト原稿に記載されているデータの前処理を行います。このギャップフリー記録プロトコルを使用して、afferentとVRニューロンのリアルタイム活動を同時に測定することができます。カスタム作成前処理スクリプトは、しきい値、最小期間、最小インタースパイク間隔などのパラメータを使用してスパイク検出の視覚化を支援するプロットを生成します。分離信号は、前処理スクリプトで下限検出変数と上限検出変数を調整することによって得られた。腹側根スパイク検出は、追加の入力を伴う同一のパラメータに従います。モーターコマンド内のバーストは、少なくとも5ミリ秒持続する0.1ミリ秒以内の最低2つのスパイクで定義され、200ミリ秒未満のインターバースト間隔を持つ最低3つのバーストによって線分化されます。この場合、平均自発活動は、時間がゼロに等しいとしてX軸に描かれた運動活動の発症に対する劇的な変化を示す。水泳前のスパイク率と水泳前と泳泳後期間の両方のスパイクレートの間の発泡スパイク率に有意な違いが検出されました。無フェレントスパイク率は泳ぐ期間と負の相関があった。相対的なスパイクレートと泳ぎの頻度の間には相関関係は検出されません。動物の健康は、この手順を試みるとき最も重要なものです。動物の福祉を確保するだけでなく、神経記録の成功の可能性を高めるために、速い血流を監視することが重要です。ゼブラフィッシュで利用可能な遺伝的ツールを活用することにより、この電気生理学プロトコルは、強力に強力にヘアセルシステムおよびそれ以降の解剖学的および機能的回路接続性を調査するためにトランスジェニックラインによって補完することができます。このパッチクランプ技術の簡単な変更により、生体内での感覚システムの機能を監視することができます。

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

胚の脊髄から交連ニューロンの解剖と文化

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

Lateral Diffusion and Exocytosis of Membrane Proteins in Cultured Neurons Assessed using Fluorescence Recovery and Fluorescence-loss Photobleaching

培養神経細胞における膜タンパク質の側方拡散とエキソサイトーシスは、蛍光回復と蛍光損失光退色を用いて評価

Membrane proteins such as receptors and ion channels undergo active trafficking in neurons, which are highly polarised and morphologically complex. This ...

Optogenetic Activation of Zebrafish Somatosensory Neurons using ChEF-tdTomato

CHEF-tdTomatoを使用してゼブラフィッシュ体性感覚ニューロンのOptogeneticアクティベーション

Larval  zebrafish are emerging as a model for describing the development and function  of simple neural circuits. Due to their  external fertilization, ...

Recording Electrical Activity from Identified Neurons in the Intact Brain of Transgenic Fish

トランスジェニックフィッシュの無傷の脳内で識別ニューロンからの電気的活動を記録する

Understanding the cell physiology of neural circuits that regulate complex behaviors is greatly enhanced by using model systems in which this work can be ...

Dissection and Lateral Mounting of Zebrafish Embryos: Analysis of Spinal Cord Development

解剖やゼブラフィッシュ胚の横方向の取付：脊髄発達の解析

The zebrafish spinal cord is an effective investigative model for nervous system research for several reasons. First, genetic, transgenic and gene ...

A Large Lateral Craniotomy Procedure for Mesoscale Wide-field Optical Imaging of Brain Activity

脳活動のメソスケール広視野光学イメージングのために大きな横開頭術手順

The craniotomy is a commonly performed procedure to expose the brain for in vivo experiments. In mouse research, most labs utilize a small craniotomy, ...

In Vitro Recording of Mesenteric Afferent Nerve Activity in Mouse Jejunal and Colonic Segments

In Vitro Recording of Mesenteric Afferent Nerve Activity in Mouse Jejunal and Colonic Segments

マウス空腸および結腸セグメントにおける腸間膜求心性神経活動のin vitro記録で

Afferent nerves not only convey information concerning normal physiology, but also signal disturbed homeostasis and pathophysiological processes of the ...

In Vitro Characterization of the Electrophysiological Properties of Colonic Afferent Fibers in Rats

In Vitro Characterization of the Electrophysiological Properties of Colonic Afferent Fibers in Rats

体外ラットの結腸求心性線維の電気生理学的特性の評価

Dysfunction of the colonic sensory nerves has been implicated in the pathophysiology of several common conditions, including functional and inflammatory ...

In Vivo Calcium Imaging of Lateral-line Hair Cells in Larval Zebrafish

ゼブラフィッシュ稚魚における側線有毛細胞の生体内カルシウム イメージング

Sensory hair cells are mechanoreceptors found in the inner ear that are required for hearing and balance. Hair cells are activated in response to sensory ...

Wireless Electrophysiological Recording of Neurons by Movable Tetrodes in Freely Swimming Fish

自由に泳ぐ魚における可動テトロデスによるニューロンの無線電気生理学的記録

The neural mechanisms governing fish behavior remain mostly unknown, although fish constitute the majority of all vertebrates. The ability to record brain ...