Name: activity of posterior lateral line afferent neurons during swimming in zebrafish
Uploaded: 2021-02-10T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Activity of Posterior Lateral Line Afferent Neurons during Swimming in Zebrafish at JoVE.com

Мы с благодарностью признаем поддержку со стороны Национального института здравоохранения (DC010809), Национального научного фонда (IOS1257150, 1856237) и Лаборатории морских биологических наук Уитни J.C.L. Мы хотели бы поблагодарить бывших и нынешних членов Лаборатории Ляо за стимулирование дискуссий.

Все исследования по уходу за животными и эксперименты проводились в соответствии с протоколами, утвержденными Комитетом по уходу и использованию животных Университета Флориды.
1. Подготовка материалов для электрофизиологических записей
<ol><li>Сделайте силиконовую элас...

Описанный экспериментальный протокол обеспечивает потенциал для мониторинга эндогенных изменений сенсорного ввода в двигательном поведении у неповрежденного, ведомого позвоночного. В частности, в нем подробно описывается подход in vivo к выполнению одновременных внеклеточных записей...

Афферентные нейроны механосенсорных систем передают информацию от волосковых клеток к мозгу во время слуха и равновесия. Электрофизиология может выявить чувствительность афферентных нейронов через прямые записи. В то время как патчинг целых клеток из волосковых клеток может быть сложным, запись из нисходящих афферентных нейронов проще и позволяет оценить потенциалы действия в ответ на контролируемые стимуляции1,2,3. Стимуляция волосковых клеток приводит к их отклонению, что модифицирует механосенсорные структуры, тем самым запуская увеличение потенциалов действия (шипов) в афферентных нейронах4,5,6. В отсутствие внешних стимулов афферентные нейроны также спонтанно скачут из-за утечки глутамата из волосковых клеток на афферентные постсинаптические терминали7,8и, как было показано, способствуют поддержанию чувствительности9,10. Запись афферентной активности за патч-зажимом позволяет наблюдать чувствительность волосковых клеток и динамику сигнала, которые невозможны с использованием методов с более низким временным разрешением, таких как в микрофонике11,12 или функциональной кальциевой визуализации13,14,15. Следующий протокол позволит регистрировать афферентную активность одновременно с двигательными командами, чтобы выявить мгновенные изменения чувствительности волосковых клеток.
Рыбки данио (Danio rerio) используют волосковые клетки, содержащиеся в нейромаматах, которые составляют систему боковой линии, для обнаружения движения воды относительно их тела, что переводится в нейронные сигналы, необходимые для навигации16,17,18,избегания хищников, захвата добычи19,20и стайки21. Поток воды также может быть самогенерируемым движениями плавания22,23,24,дыхания22,25,26и кормления27. Это поведение включает в себя повторяющиеся движения, которые могут утомлять волосковые клетки и ухудшать восприятие. Поэтому крайне важно, чтобы система боковых линий различала внешние (экзафферентные) и самогенерируемые (рефафферентные) стимулы потока. Вытекающий из этого разряд ожижает самогенерируемые сигналы потока во время передвижения у рыбок данио. Этот тормозной прогностический двигательный сигнал передается через нисходящие нейроны к сенсорным рецепторам для изменения входного сигнала или прерывания обработки обратной обратной связи28,29. Основополагающая работа, способствовающая нашему раннему пониманию этой системы, опиралась на препараты in vitro, где связь и эндогенная активность нейронной цепи не поддерживались28,30,31,32,33,34,35. Этот протокол описывает подход к сохранению неповрежденной нейронной цепи, где поддерживается динамика эндогенной обратной связи, что позволяет лучше понять сопутствующий разряд in vivo.
Протокол, описанный здесь, описывает, как контролировать активность афферентных нейронов задней боковой линии и двигательных нейронов одновременно у личинок рыбок данио. Характеристика динамики афферентного сигнала до, во время и после двигательных команд дает представление о эндогенной обратной связи центральной нервной системы в режиме реального времени, которая модулирует чувствительность волосковых клеток во время передвижения. В этом протоколе описывается, какие материалы необходимо будет подготовить до экспериментов, а затем описывается, как парализовать и подготовить личинок рыбок данио. Протокол будет описывать, как установить стабильную запись свободных пятен афферентных нейронов и внеклеточных вентральных корневых (VR) записей двигательных нейронов. Репрезентативные данные, которые могут быть получены с помощью этого протокола, представлены образцовым индивидуумом и анализ проводился на нескольких репликах экспериментального протокола. Предварительная обработка данных выполняется с использованием пользовательских письменных скриптов в MATLAB. В целом, эта экспериментальная парадигма in vivo готова обеспечить лучшее понимание сенсорной обратной связи во время передвижения в модельной системе волосковых клеток позвоночных.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>100 mL beaker</td>
			<td>PYREX</td>
			<td>1000</td>
			<td>resceptacle for etchant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10x water immersion objective</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>UMPLFLN10xW</td>
			<td>low magnification for positioning larvae and recording electrode</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40x water immersion objective</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>LUMPLFLN40XW</td>
			<td>higher magnification for position electrode tip and establishing patch-clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>abfload.m</td>
			<td></td>
			<td>supplemental coding file</td>
			<td>custom written MATLAB script for converting raw electrophysiology recordings to .mat files</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AffVR_preprocess.m</td>
			<td></td>
			<td>supplemental coding file</td>
			<td>custom written MATLAB script for preprocessing recording data</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BNC coaxial cables</td>
			<td>ThorLabs</td>
			<td>2249-C-12</td>
			<td>connecting amplifier and digitizer channels; require 4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>borosilicate glass capillaries w/ filament</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>G150F-3</td>
			<td>inner diameter: 0.86, outer diameter: 1.50; capillary glass used to form recording electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>burst_detect</td>
			<td></td>
			<td>supplemental coding file</td>
			<td>custom written MATLAB function necessary to run AffVR_preprocess.m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>computer</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>any computer should work</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DC Power Supply</td>
			<td>Tenma</td>
			<td>72-420</td>
			<td>used for electrically etching dissection pins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electrophysiology digitizer</td>
			<td>Axon Instruments, Molecular Devices</td>
			<td>Axon DigiData 1440A</td>
			<td>enables acquisition of patch-clamp data</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>filament</td>
			<td>Sutter Instrument Company</td>
			<td>FB255B</td>
			<td>2.5 mm box filament used in micropipette puller</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fine forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>Dumont #5 (0.05 x 0.02 mm) Item No. 11295-10</td>
			<td>used to manipulate larvae and insert pins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fixed stage DIC microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BX51WI</td>
			<td>microscope used to visualize and establish patch-clamp recordings</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>flexible, tapered pipette tip</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>02-707-169</td>
			<td>flexible tips enable insertion into recording electrode to dispense extracellular solution at the tip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FluoroDish</td>
			<td>World Precision Instruments Inc.</td>
			<td>FD3510-100</td>
			<td>cover glass bottomed dish recording dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KimWipe</td>
			<td>KimTech</td>
			<td>34155</td>
			<td>task wipe used for wicking away excess fluid from larvae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kwik-Gard</td>
			<td>World Precision Instruments Inc.</td>
			<td>710172</td>
			<td>self-mixing sylgard elastomer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB</td>
			<td>MathWorks</td>
			<td>R2020b</td>
			<td>command line software for preprocessing data</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microelectrode amplifier</td>
			<td>Axon Instruments, Molecular Devices</td>
			<td>MultiClamp 700B</td>
			<td>patch clamp amplifier for dual channel recordings</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microforge</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>MF-830 microforge</td>
			<td>to polish recording electrode</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micromanipulator control unit</td>
			<td>Siskiyou</td>
			<td>MC1000-eR/T</td>
			<td>4-axis dial coordinator for controlling micromanipulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micropipette puller</td>
			<td>Sutter Instrument Company</td>
			<td>Flaming/Brown P-97</td>
			<td>for pulling capillary glass into recording electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microscope control unit</td>
			<td>Siskiyou</td>
			<td>MC1000e</td>
			<td>positions the microscope around the fixed stage and preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>motorized micromanipulator</td>
			<td>Siskiyou</td>
			<td>MX7600</td>
			<td>positions the headstage and attached recording electrode for patch-clamp recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MultiClamp Commander</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>2.2.2</td>
			<td>downloadable from Axon MultiClamp 700B Commander download page</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>optical air table</td>
			<td>Newport Corporation</td>
			<td>VH3036W-OPT</td>
			<td>breadboard isolation table to float microscope and minimize vibrations during recordings</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pCLAMP</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>10.7.0</td>
			<td>downloadable from Axon pCLAMP 10 Electrophysiology Data Acquisition &#38; Analysis Software Download page</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>permanent ink marker</td>
			<td>Sharpie</td>
			<td>order from amazon.com</td>
			<td>for marking the leading edge side of the VR electrode to ensure proper orientation when inserting into pipette holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>petri-dish</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>35-3001</td>
			<td>used to immerse larvae in paralytic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pipette holder</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>1-HL-U</td>
			<td>hold recording electrode and connect to the headstage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pneumatic transducer</td>
			<td>Fluke Biomedical Instruments</td>
			<td>DPM1B</td>
			<td>for controlling recording electrode internal pressure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>potassium hydroxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>221473-25G</td>
			<td>etchant for etching dissection pins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silicone tubing</td>
			<td>Tygon</td>
			<td>14-169-1A</td>
			<td>tubing to connect pneumatic transducer to pipette holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>spike_detect</td>
			<td></td>
			<td>supplemental coding file</td>
			<td>custom written MATLAB function necessary to run AffVR_preprocess.m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereomicroscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>Stemi 2000-C</td>
			<td>used to visualize pin tips and during preparation of larvae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>straight edge razor blade</td>
			<td>Canopus</td>
			<td>order from amazon.com</td>
			<td>cuts the tungsten wire while making dissection pins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>swimbout_detect</td>
			<td></td>
			<td>supplemental coding file</td>
			<td>custom written MATLAB function necessary to run AffVR_preprocess.m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>syringe</td>
			<td>Becton Dickinson Compoany</td>
			<td>309602</td>
			<td>filled with extracellular solution to inject into recording electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>transfer pipette</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z135003-500EA</td>
			<td>single use, non-sterile pipette for transfering larvae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tricaine methanesulfonate</td>
			<td>Syndel</td>
			<td>12854</td>
			<td>pharmaceutical aneasthetic used to euthanize larvae with high dosage.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tungsten wire</td>
			<td>World Precision Instruments Inc.</td>
			<td>715500</td>
			<td>0.002 inch, 50.8 &#956;m diameter; used to make dissection pins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vacuum filtration unit</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>SCGVU11RE</td>
			<td>single use, sterile, vacuum filtration units used to sterilize extracellular solution used for electrophysiology electrode ringer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>voltage-clamp current-clamp headstage</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>CV-7B</td>
			<td>supplied with MultiClamp 700B amplifier used as left and right headstages</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;-bungarotoxin</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>B1601</td>
			<td>for immobilizing the larvae prior to recording</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

activity of posterior lateral line afferent neurons during swimming in zebrafish

Сенсорные системы собирают сигналы, необходимые для направления поведения, но животные должны расшифровать, какая информация является биологически значимой. Локомоция генерирует повторяющиеся сигналы, которые животные должны отпутать от соответствующих сенсорных сигналов окружающей среды. Например, когда рыба плавает, поток, генерируемый волнами тела, обнаруживается механорецептивными невриномачами, состоящими из волосковых клеток, которые составляют систему боковой линии. Затем волосковые клетки передают информацию о движении жидкости от датчика к мозгу через сенсорные афферентные нейроны. Одновременно, сопутствующий разряд двигательной команды передается волосковые клетки для предотвращения сенсорной перегрузки. Поэтому учет ингибирующего эффекта прогностических двигательных сигналов во время локомоции имеет решающее значение при оценке чувствительности системы боковых линий. Мы разработали электрофизиологический подход in vivo для одновременного мониторинга активности афферентного нейрона задней боковой линии и вентрального двигательного корня у личинок рыбок данио (4-7 дней после оплодотворения), которая может длиться в течение нескольких часов. Внеклеточные записи афферентных нейронов достигаются с использованием техники свободного зажима пластыря, которая может обнаруживать активность от одного или нескольких нейронов. Записи вентральных корней выполняются через кожу со стеклянными электродами для обнаружения активности двигательных нейронов. Наш экспериментальный протокол обеспечивает возможность мониторинга эндогенных или вызванных изменений сенсорного ввода в двигательном поведении у неповрежденного позвоночного.

После того, как личинки рыбок данио должным образом обездвижены и достигнут афферентный ганглий задней боковой линии и запись VR, активность как в афферентных, так и в двигательных нейронах может быть измерена одновременно. Каналы записи отображаются с использованием протоколов записи...

Watch this Scientific Journal Video about Activity of Posterior Lateral Line Afferent Neurons during Swimming in Zebrafish at JoVE.com

Activity of Posterior Lateral Line Afferent Neurons during Swimming in Zebrafish

Описан протокол мониторинга изменений активности афферентных нейронов во время двигательных команд в модельной системе волосковых клеток позвоночных.

Активность афферентных нейронов задней боковой линии во время плавания у рыбок данио

Sensory systems gather cues essential for directing behavior, but animals must decipher what information is biologically relevant. Locomotion generates ...

Этот протокол позволяет исследователю контролировать активность и реакцию отдельных сенсорных нейронов на контролируемую стимуляцию в неповрежденных позвонках. Эта патч-электрофизиология является быстрым и прямым способом записи всплесков активности отдельных нейронов в режиме реального времени. И это обеспечивает лучшее временное разрешение и чувствительность при меньших затратах, чем большинство методов оптической визуализации.Волосковые клетки боковой линии гомологичны клеткам внутреннего уха человека. Таким образом, этот метод готов выявить свойства контуров волосковых клеток, которые применяются к глухоте человека и нарушениям слуха. Электрофизиология - это ремесло, использующее мелкую моторику, которую нужно видеть и физически имитировать.Текстовые инструкции оставляют слишком много места для неправильного толкования. Для начала дозируют тонкий слой самомешиваемого силиконового эластомера, такого как Sylgard, в чашку для культивирования тканей со стеклянным дном, чтобы сделать силиконовую эластомерную нижнюю записывающую тарелку. Чтобы сделать рассеченные контакты, обеспечьте отрицательный заряд в пять вольт на 100-миллилитровый кок для травления с помощью источника питания постоянного тока и прикрепите вольфрамовый провод к положительно заряженному выходу.Многократно опускайте наконечник проволоки в ванну Etchant до тех пор, пока кончик не сузится до острой точки. Под стереомикроскопом отрежьте проволоку примерно в одном миллиметре от наконечника лезвием бритвы с прямым краем. Повторите это три раза, затем вставьте штифты в отвержденную пластину записи, используя тонкие щипцы.Для подготовки записывающих электродов вытягивайте боросиликатные стеклянные капиллярные трубки с помощью съемника микропипетки с коробчатой нитью. Электрод должен иметь наконечник диаметром 30 микрометров с конусом, который будет использоваться для записи афферентных нейронов с задней боковой линии. Потяните дополнительную боросиликатную стеклянную капиллярную трубку в пару электродов с меньшим диаметром наконечника от одного до пяти микрометров.Держа по одному электроду в каждой руке, осторожно провести кончиками друг по другу, чтобы сломать наконечники. Используя микроковалку, отполирует скошенный наконечник до однородной массы. Конечный диаметр наконечника должен составлять от 30 до 50 микрометров.Обездвиживайте личинок рыбок данио и перекладывайте их в 35-миллиметровую чашку Петри, используя большой наконечник для переноса пипетки. Удалите как можно больше окружающего раствора. Погрузите личинок в 10 микролитров 0,1% альфа-бунгаротоксина примерно на пять минут.Промыть парализованную личинку внеклеточным раствором в течение 10 минут. Затем используйте переносную пипетку, чтобы переместить личинку из ванны с внеклеточным раствором в силиконовую нижнюю записывающее блюдо. Под стереомикроскопом осторожно расположите личинок с мелкими наконечниками щипцов над центром этого силиконового коврика, боковой стороной вверх с передним и задним концами тела, идущими слева направо.Используя тонкие щипцы с наконечниками, вставьте край штыря ортогонально к силикону через дорсальную нотохорду личинок непосредственно дорсально к анусу. Вставьте второй штифт через нотохорду ближе к концу хвоста и вставьте третий штифт через нотохордную дорсальную часть газового пузыря. Вставьте четвертый штифт через отический везикулу, обеспечивая при этом небольшое вращение, когда штифт вставляется в инкапсулант.При небольшом вращении следите за тканью между клейтрумом и отическим везикулом, чтобы выявить скопление афферентных сомат. Поместите личинку штыря под 10-кратный объектив на фиксированной ступени микроскопа ДВС-КРВ и ориентируйте миоцептальные расщелины мышечных блоков параллельно вектору левой стадии головы. Поместите провод заземления в раствор ванны и убедитесь, что он подключен к левой головной ступени.Заполните записывающий электрод VR 30 микролитрами внеклеточного раствора с помощью гибкого наконечника пипетки с гелевой загрузкой и вставьте его в держатель пипетки с левой головкой. Увеличьте увеличение до 40 раз и опустите записывающую пипетку в раствор тарелки, применяя положительное давление, создаваемое пневматическим преобразователем. Поднесите наконечник электрода над миосектумом между двумя вентральными миомерами к боковой линии, пока расщелина не будет центрирована в отверстии кончика электрода VR Опускайте пипетку до тех пор, пока запаздывающий край отверстия кончика мягко не соприкоснется с эпителием.После первоначального контакта маневрируйте пипеткой по диагонали, чтобы убедиться, что передовая кромка вступает в контакт и может генерировать уплотнение. Приложить отрицательное давление с помощью пневматического преобразователя и удерживать его. В программном обеспечении patch clamp нажмите кнопку Play на панели инструментов, чтобы отслеживать сигнал VR.Убедитесь, что запись VR достигается после того, как наблюдается активность двигательных нейронов со стереотипной динамикой сигнала всплеска Уэллса. Заполните афферентный записывающий электрод 30 микролитрами внеклеточного раствора и вставьте его в держатель пипетки правой головки. Затем опуская его в раствор для посуды, применяя положительное давление, создаваемое пневматическим преобразователем.Найдите электрод и поднесите наконечник электрода к образцу. Используя микроманипулятор, опустите наконечник афферентного электрода до тех пор, пока он не удержит положение над клейтрумом. Увеличьте увеличение до 40-кратного погружения и найдите пересечение задней боковой линии нерва и клейтроума.Поднесите наконечник электрода над афферентным ганглием и опустите пипетку до тех пор, пока наконечник не соприкнется с эпителием. Осторожно маневрируйте электродом так, чтобы вся окружность кончика контактировала с афферентным ганглием. Приложить отрицательное давление с помощью пневматического преобразователя и удерживать его.После нажатия кнопки «Воспроизвести» в программном обеспечении зажима патча убедитесь, что запись афферентных нейронов вся клетка свободна, когда всплески происходят спонтанно примерно каждые 100-200 миллисекунд. После обнаружения активности афферентных нейронов и двигательных нейронов нажмите кнопку «Запись» на панели инструментов в пиковом зажиме 10, чтобы захватить одновременные записи без зазоров в обоих каналах. Выполните предварительную обработку данных, как описано в текстовой рукописи.Используя этот протокол записи без пробелов, активность афферентных и VR-нейронов в реальном времени может быть измерена одновременно. Пользовательские сценарии предварительной обработки генерируют графики, помогая в визуализации обнаружения всплесков с использованием таких параметров, как порог, минимальная продолжительность и минимальный интервал между ударами. Изолированные сигналы были получены путем настройки переменных обнаружения нижней и верхней границ в скрипте предварительной обработки.Обнаружение шипов вентральных корней следует идентичным параметрам с дополнительными входами. Всплески в команде двигателя определяются минимум двумя пиками в течение 0,1 миллисекунд продолжительностью не менее пяти миллисекунд и очерчены как минимум тремя всплесками с интервалами между вспышками менее 200 миллисекунд Сценарии предварительной обработки будут накладывать участки афферентной активности, введенные в четко определенный период интереса. В этом случае средняя спонтанная активность показывает драматические изменения в ответ на начало двигательной активности, изображенной на оси X как время, равное нулю.Были обнаружены значительные различия в афферентных показателях всплесков между показателями всплесков до заплыва и пиками как в периоды плавания, так и после заплыва. Частота афферентных всплесков отрицательно коррелировала с продолжительностью плавания. Не обнаружено никакой корреляции между относительной скоростью всплесков и частотой плавания.Здоровье животных является самой важной вещью при попытке попробовать эту процедуру. Крайне важно контролировать быстрый кровоток, чтобы не только обеспечить благополучие животных, но и увеличить вероятность успеха нейронной записи. Используя генетические инструменты, доступные в Рыбок данио, этот электрофизиологический протокол может быть дополнен трансгенными линиями для мощного исследования анатомической и функциональной связности цепей в системах волосковых клеток и за их пределами.Эта упрощенная модификация техники зажимов позволяет нам контролировать, как сенсорные системы функционируют in vivo.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

Разбор и культуры спаечный Нейроны из эмбриональных спинного мозга

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

Lateral Diffusion and Exocytosis of Membrane Proteins in Cultured Neurons Assessed using Fluorescence Recovery and Fluorescence-loss Photobleaching

Боковая диффузия и экзоцитоз мембранных белков в культивируемых нейронов оценивали по флуоресценции и флуоресценции восстановления потерь фотообесцвечивания

Membrane proteins such as receptors and ion channels undergo active trafficking in neurons, which are highly polarised and morphologically complex. This ...

Optogenetic Activation of Zebrafish Somatosensory Neurons using ChEF-tdTomato

Optogenetic активации нейронов данио рерио Соматосенсорные использованием шеф-tdTomato

Larval  zebrafish are emerging as a model for describing the development and function  of simple neural circuits. Due to their  external fertilization, ...

Recording Electrical Activity from Identified Neurons in the Intact Brain of Transgenic Fish

Запись электрической активности нейронов Выявленные в интактном мозге трансгенных рыб

Understanding the cell physiology of neural circuits that regulate complex behaviors is greatly enhanced by using model systems in which this work can be ...

Dissection and Lateral Mounting of Zebrafish Embryos: Analysis of Spinal Cord Development

Вскрытие и боковая навеска из эмбрионов данио рерио: Анализ спинномозговой развития шнура

The zebrafish spinal cord is an effective investigative model for nervous system research for several reasons. First, genetic, transgenic and gene ...

A Large Lateral Craniotomy Procedure for Mesoscale Wide-field Optical Imaging of Brain Activity

A Большой процедура Боковой Краниотомии для мезомасштабного широкоугольных оптического Визуализация активности мозга

The craniotomy is a commonly performed procedure to expose the brain for in vivo experiments. In mouse research, most labs utilize a small craniotomy, ...

In Vitro Recording of Mesenteric Afferent Nerve Activity in Mouse Jejunal and Colonic Segments

In Vitro Recording of Mesenteric Afferent Nerve Activity in Mouse Jejunal and Colonic Segments

Экстракорпоральное записи мезентериального афферентными нервными активность у мышей тощей и ободочной кишки Сегменты

Afferent nerves not only convey information concerning normal physiology, but also signal disturbed homeostasis and pathophysiological processes of the ...

In Vitro Characterization of the Electrophysiological Properties of Colonic Afferent Fibers in Rats

In Vitro Characterization of the Electrophysiological Properties of Colonic Afferent Fibers in Rats

В пробирке Характеристика электрофизиологических свойств кишечных афферентных волокон в крыс

Dysfunction of the colonic sensory nerves has been implicated in the pathophysiology of several common conditions, including functional and inflammatory ...

In Vivo Calcium Imaging of Lateral-line Hair Cells in Larval Zebrafish

В естественных условиях кальция изображений боковой линии клетки волос в личиночной данио рерио

Sensory hair cells are mechanoreceptors found in the inner ear that are required for hearing and balance. Hair cells are activated in response to sensory ...

Wireless Electrophysiological Recording of Neurons by Movable Tetrodes in Freely Swimming Fish

Беспроводная электрофизиологическая запись нейронов movable Tetrodes в Свободно плавающих рыб

The neural mechanisms governing fish behavior remain mostly unknown, although fish constitute the majority of all vertebrates. The ability to record brain ...