Name: preparing irradiated and marked male aedes aegypti mosquitoes for release in an operational sterile insect technique program
Uploaded: 2021-03-12T14:00:00
Duration: 8 min 58 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program at JoVE.com

Vi takker Dr. R.-D. Xue, C. Bibbs, W. Qualls og V. Aryaprema fra Anastasia Mosquito Control District, St. Augustine, Florida, for partnerskab i udviklingen af SIT-programmet og ekspertindsigt i effektiv operationel frigivelse af steril mandlig Aedes aegypti. Denne forskning blev støttet af USDA-ARS og Florida Department of Agriculture and Consumer Services (FDACS). Omtale af handelsnavne eller kommercielle produkter i denne publikation er udelukkende med det formål at give specifikke oplysninger og indebærer ikke anbefaling eller godkendelse fra USDA eller FDACS.

<ol>
	<li>Moyes, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contemporary+status+of+insecticide+resistance+in+the+major+Aedes+vectors+of+arboviruses+infecting+humans.">Contemporary status of insecticide resistance in the major Aedes vectors of arboviruses infecting humans.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 11 (7), 0005625 (2017).</li><li>Baldacchino, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+methods+against+invasive+Aedes+mosquitoes+in+Europe:+a+review.">Control methods against invasive Aedes mosquitoes in Europe: a review.</a> Pest Management Science. 71 (11), 1471-1485 (2015).</li><li>Burkett, D. A., Cope, S. E., Strickman, D. A., White, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Deployed+Warfighter+Protection+(DWFP)+Research+Program:+Developing+new+public+health+pesticides,+application+technologies,+and+repellent+systems.">The Deployed Warfighter Protection (DWFP) Research Program: Developing new public health pesticides, application technologies, and repellent systems.</a> Journal of Integrated Pest Management. 4 (2), 1-7 (2013).</li><li>Harwood, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlling+Aedes+aegypti+in+cryptic+environments+with+manually+carried+ultra-low+volume+and+mist+blower+pesticide+applications.">Controlling Aedes aegypti in cryptic environments with manually carried ultra-low volume and mist blower pesticide applications.</a> Journal of the American Mosquito Control Association. 32 (3), 217-223 (2016).</li><li>Morrison, A. C., Zielinski-Gutierrez, E., Scott, T. W., Rosenberg, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+challenges+and+proposing+solutions+for+control+of+the+virus+vector+Aedes+aegypti.">Defining challenges and proposing solutions for control of the virus vector Aedes aegypti.</a> PLoS Medicine. 5 (3), 68 (2008).</li><li>Klassen, W., Curtis, C. F., InDyck, V. A., Hendrichs, J., Robinson, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=History+of+the+sterile+insect+technique.">History of the sterile insect technique.</a> Sterile insect technique: principles and practice in area-wide integrated pest management. , 3-36 (2005).</li><li>Alphey, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sterile-insect+methods+for+control+of+mosquito-borne+diseases:+an+analysis.">Sterile-insect methods for control of mosquito-borne diseases: an analysis.</a> Vector Borne and Zoonotic Diseases. 10 (3), 295-311 (2010).</li><li>Dame, D. A., Curtis, C. F., Benedict, M. Q., Robinson, A. S., Knols, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Historical+applications+of+induced+sterilisation+in+field+populations+of+mosquitoes.">Historical applications of induced sterilisation in field populations of mosquitoes.</a> Malaria Journal. 8, (2009).</li><li>Bond, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+irradiation+dose+to+Aedes+aegypti+and+Ae.+albopictus+in+a+sterile+insect+technique+program.">Optimization of irradiation dose to Aedes aegypti and Ae. albopictus in a sterile insect technique program.</a> PloS One. 14 (2), 0212520 (2019).</li><li>Bourtzis, K., Lees, R. S., Hendrichs, J., Vreysen, M. J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=More+than+one+rabbit+out+of+the+hat:+Radiation,+transgenic+and+symbiont-based+approaches+for+sustainable+management+of+mosquito+and+tsetse+fly+populations.">More than one rabbit out of the hat: Radiation, transgenic and symbiont-based approaches for sustainable management of mosquito and tsetse fly populations.</a> Acta Tropica. 157, 115-130 (2016).</li><li>Carvalho, D. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+production+of+genetically+modified+Aedes+aegypti+for+field+releases+in+Brazil.">Mass production of genetically modified Aedes aegypti for field releases in Brazil.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. , e3579 (2014).</li><li>Carvalho, D. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aedes+aegypti+lines+for+combined+sterile+insect+technique+and+incompatible+insect+technique+applications:+the+importance+of+host+genomic+background.">Aedes aegypti lines for combined sterile insect technique and incompatible insect technique applications: the importance of host genomic background.</a> Entomologia experimentalis et applicata. 168 (6-7), 560-572 (2020).</li><li>Mamai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aedes+aegypti+larval+development+and+pupal+production+in+the+FAO/IAEA+mass-rearing+rack+and+factors+influencing+sex+sorting+efficiency.">Aedes aegypti larval development and pupal production in the FAO/IAEA mass-rearing rack and factors influencing sex sorting efficiency.</a> Parasite. 27, 43 (2020).</li><li>Zheng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incompatible+and+sterile+insect+techniques+combined+eliminate+mosquitoes.">Incompatible and sterile insect techniques combined eliminate mosquitoes.</a> Nature. 572 (7767), 56-61 (2019).</li><li>. Methods in Aedes Research Available from: <a target="_blank" href="https://www.beiresources.org/Portals/2/VectorResources/Methods%20in%20Aedes%20Research%202016.pdf">https://www.beiresources.org/Portals/2/VectorResources/Methods%20in%20Aedes%20Research%202016.pdf</a> (2016)</li><li>Focks, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+separator+for+the+developmental+stages,+sexes,+and+species+of+mosquitoes+(Diptera:+Culicidae).">An improved separator for the developmental stages, sexes, and species of mosquitoes (Diptera: Culicidae).</a> Journal of Medical Entomology. 17 (6), 567-568 (1980).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Manual of Dosimetry in Radiotherapy. Technical Reports Series No. 110. , (1970).</li><li>Aldridge, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gamma-irradiation+reduces+survivorship,+feeding+behavior,+and+oviposition+of+female+Aedes+aegypti.">Gamma-irradiation reduces survivorship, feeding behavior, and oviposition of female Aedes aegypti.</a> Journal of the American Mosquito Control Association. 36 (3), 152-160 (2020).</li><li>Cianci, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimating+mosquito+population+size+from+mark-release-recapture+data.">Estimating mosquito population size from mark-release-recapture data.</a> Journal of Medical Entomology. 50 (3), 533-542 (2013).</li><li>Knipling, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The basic principles of insect population suppression and management. , (1979).</li></ol>

Alle forfattere har erklæret ingen interessekonflikter.

Indledning af et kontrolprogram med SIT, der bruger stråling, kræver etablering af en lokal stamme af Aedes aegypti. Dette trin er kritisk og kan give SIT mulighed for virkelig at skelne sig fra lignende kontrolteknologier. Ved at udvikle projektet fra en lokal stamme af myg, vil de genererede hanner sandsynligvis have adfærd, der giver dem mulighed for at tilpasse sig miljøændringer og signaler og lokalisere og parre sig med vilde hunner i nærheden. Desuden kan udsætning af bestrålede lokale hanner ikke skabe negativ offentlig mening sammenlignet med f.eks. udsætning af en ikke-lokal stamme af genetisk modificerede myg, der f.eks. kan indføre nye alleler i den lokale mygpopulation.
At bruge betydelige ressourcer på at opdrætte store mængder myg kun for at kunne bruge omkring halvdelen af dem til kontrolformål er en begrænsning af Aedes aegypti SIT-programmet. Der bør foretages forbedringer af opdrætsprotokollen for at kondensere modningen af larver til mere definerede tidsrammer, når pupperne er klar. Dette ville gøre det muligt at indsamle flere pupper på det optimale tidspunkt for adskillelse. Yderligere pupper til forarbejdning øger dog risikoen for, at flere hunner forpupper sig, når pupperne samles, og øger dermed sandsynligheden for, at hunnerne ender i petriskåle med hanner og muligvis bliver genudsat. Selvom levetiden, blodfodringsadfærden og ovipositionsadfærden hos bestrålede kvindelige Aedes aegypti-pupper er reduceret hos voksne, er det ikke en god strategi at frigive hunner tilfældigt sammen med bestrålede hanner22. Derfor bør det fortsat være en prioritet at minimere antallet af hunner, der utilsigtet adskilles, bestråles, markeres og frigives med mænd.
Succes med et SIT-program afhænger i sidste ende af vellykket magekonkurrence fra koloniopdrættede, bestrålede hanner. Bevarelse af mandlig konkurrenceevne afhænger af udtømmende eksperimentelt afledt udvælgelse af dosis og maksimering af det estimerede forhold mellem sterile: vilde hanner i befolkningen. Dosisvalg bestemmes af flere nøglefaktorer, der inkluderer lang levetid, fertilitet, fecundity og puppedødelighed. Det er blevet observeret, at mandlige myg vil udvise en asymptotisk fertilitetskurve, der nærmer sig nul, når strålingen stiger (KJL, RLA, SCB upublicerede data). Samtidig mindskes mandlig mygs levetid og aktivitetsniveauer eksponentielt, når strålingsdosis stiger (KJL, RLA, SCB upublicerede data). Derfor, snarere end at identificere en dosis, der giver 99,9% sterilitet hos mænd, er det at foretrække at fokusere på en lavere sterilitetsprocent, samtidig med at man støtter overlevelse. Når der er identificeret et dosisinterval, der ikke adskiller bestrålede hanners levetid eller puppedødelighed fra ikke-bestrålede hanner, bør der foretages yderligere vurderinger af fertiliteten for at identificere en dosis, der gør hannerne overvældende sterile, men konkurrencedygtige.
Samtidig er det afgørende at sammenligne antallet af hanmyg i befolkningen med antallet af genudsatte bestrålede hanner. Dette kan opnås ved at indsamle hanner fra forskellige steder i og omkring målfrigivelsesområdet gentagne gange fra samme sted og før, under og efter initiering af SIT-programmet. Der bør gennemføres en mark-, release-, genfangstundersøgelse for at vurdere forholdet mellem vilde hanmyg og frigivne myg. En mark-, release-, recapture-undersøgelse er afhængig af frigivelsen af et kendt antal markerede myg fra et bestemt punkt og deres senere genfangst på steder i nærheden omkring det oprindelige frigivelsespunkt. Ved at sammenligne antallet af genfangede hanner og vilde hanner på afstande fra udsætningsstedet er det muligt at estimere den generelle vilde population af hanner i området, så konkurrenceforholdene for sterile hanner kan frigives23. Maksimering af forholdet mellem sterile: vilde hanner kan opnås ved at frigive flere sterile hanner og / eller ved at reducere den vilde befolkning ved hjælp af klassiske kontrolmidler såsom kildereduktion, umoden kontrol eller adulticide behandlinger.
For at måle effektiviteten af sterile mandlige udsætninger kan voksensamlinger sammenlignes kronologisk med et ikke-interventionsområde. Da sterile hanner frigives, og antallet af indsamlede hanner og hunner i et område falder i forhold til et sammenligneligt ikke-interventionsområde, kan det antages, at det skyldes, at de frigivne sterile hanner med succes udkonkurrerer lokale frugtbare hanner. Denne effekt kan også observeres i ovipositionsfældebægre, der anvendes i både interventions- og ikke-interventionsstederne. Æg kan stadig produceres på interventionsstedet, men hvis færre klækkes end dem fra ikke-interventionsstedet, kan det antages, at de ikke befrugtes på grund af hunner, der parrer sig med sterile hanner. Flere og flere ovipositioner af ubefrugtede æg kan i sidste ende føre til reduceret oviposition på grund af ikke-udskiftning af hunner på interventionsstedet 8,24.
Fremtidige retninger af SIT-teknologi og -programmer udvides naturligt til yderligere medicinsk vigtige mygarter. For eksempel kan denne teknologi let tilpasses til at kontrollere Aedes albopictus i betragtning af de meget lignende bionomics af Aedes aegypti og Aedes albopictus. Andre sygdomsvektormygarter af interesse omfatter Culex quinquefasciatus, Culex tarsalis og forskellige Anopheles-arter. Forbedring af effektiviteten af denne teknologi afhænger af at øge kapaciteten af mandlige pupper produceret på et givet tidspunkt, hvilket kan opnås gennem genetisk manipulation eller kunstig selektion, og forbedre mandlig konkurrenceevne, hvilket kan opnås ved at øge virilitet, frugtbarhed eller lang levetid.
I sidste ende er SIT-programmer ikke en sølvkugle til bekæmpelse af myg. De er i stedet et værktøj i en række andre kontrolteknikker, såsom IVM-programmer, der krydskompenserer for svagheder blandt teknikker. Der henviser til, at kemisk bekæmpelse f.eks. giver hurtig og billig kontrol, men at den også fremmer udviklingen af resistens og ikkemåldødelighed; og mens SIT er artsspecifik og sandsynligvis ikke vil generere resistens, skal SIT-hanner produceres og frigives i al evighed for at kontrollere immigrerende populationer uden for vektorkontroldistriktet.

Overførsel af myggebårne patogener til mennesker forårsager millioner af tilfælde af sygdom og dødsfald hvert år over hele verden. I mangel af effektive, godkendte vacciner mod myggebårne sygdomme, såsom Zika eller denguefeber, er en af de mest effektive måder at reducere transmission på at reducere sygdomsvektormygpopulationer. Det er ærgerligt, at et stigende antal myggearter, der traditionelt er mål for pesticider, udviser stigende niveauer af pesticidresistens1. Samtidig har offentlige myndigheder aggressivt afregistreret eller forbudt tidligere godkendte pesticider, og der udvikles få nye, effektive kemiske kontrolforanstaltninger 2,3. Denne konstellation af hindringer for myggekontrol har motiveret udforskningen af alternative ikke-kemiske teknikker til at reducere mygpopulationer.
Visse myggearter udgør udfordringer med at kontrollere spørgsmål om resistens og pesticidregistrering. Aedes aegypti (L.) er en fremtrædende sygdomsvektormyg, der er ekstremt vanskelig at kontrollere gennem traditionel integreret vektorstyring på grund af det kryptiske peridomestic habitat, der udnyttes af denne art til umoden udvikling og voksen hvile 4,5. Udfordringer i forbindelse med udnyttelsen af det kryptiske habitat omkring boliger omfatter vanskeligheden ved at nå disse steder med pesticidsprayteknikker samt den potentielle manglende accept fra offentligheden for gentagen adgang til privat ejendom for folkesundhedsvektorkontrolagenturer til at udføre de intensive overvågnings- og kontrolaktiviteter, der er afgørende for effektiv integreret vektorforvaltning (IVM) for denne art.
Heldigvis anvendes SIT, en tilgang, der har vist sig at være vellykket til varig kontrol af andre meget udfordrende insektarter6, på Aedes aegypti-problemet i en banebrydende række eksperimenter og operationelle forsøg baseret i St. Augustine, Florida (KJL, RLA, SCB upublicerede data). SIT er blevet anvendt på en række insektarter, herunder myg, og er blevet gennemgået i dybden 7,8. SIT udnytter massefrigivelsen af koloniopdrættede hanner, der er steriliseret, for eksempel ved udsættelse for ioniserende stråling eller kemikalier, til at overvælde magevalget af naturlige populationer af kvinder. Steriliserede hanner, der parrer sig med vilde hunner, gør æggene ufrugtbare på grund af skader, som mandlige kønsceller lider, og hvis de er til stede i tilstrækkeligt antal, kan de teoretisk nedbryde den naturlige Aedes aegypti-befolkning.
Et SIT-program blev indledt for at forsøge at reducere populationerne af Aedes aegypti i et byområde i Atlanterhavskysten Florida, hvor denne art for nylig blev genkoloniseret og udvider og udgør en folkesundhedsrisiko for overførsel af vira som Zika, dengue eller chikungunya. For at maksimere potentialet for kompatibilitet med vilde hunner blev der etableret en ny koloni ved hjælp af vildtfanget Aedes aegypti fra målpopulationen til at producere hanner til programmet9. Dette var baseret på hypotesen om, at lokalt afledte, koloniopdrættede hanner ville være mere tilbøjelige til at være konkurrencedygtige med lokale vilde hanner til parring med lokale vilde hunner. For at SIT skal være effektiv, skal der ikke kun være et overvældende antal sterile hanner til stede i målområdet, men de skal også være i stand til effektivt at kurtisere og parre sig med lokale vilde hunmyg.
En række eksperimenter blev udført for at bestemme det optimale antal sterile hanner, der skulle frigives (KJL, RLA, SCB upublicerede data) samt optimale doser af stråling, der ville gøre mændene ufrugtbare uden at forstyrre overlevelse, adfærd eller accept af vilde hunner (KJL, RLA, SCB upublicerede data). Disse data kommer i allierede publikationer fra denne gruppe, men nogle af disse fund er også fanget i denne protokol og kan bruges som udgangspunkt for nye SIT Aedes aegypti-kontrolprogrammer andre steder. Denne art udvider konstant sit sortiment, og SIT-programmer viser stort løfte om at være omkostningseffektive, langsigtede løsninger til at kontrollere denne befolkning. Formålet med denne protokol er at producere steriliserede, mandlige, koloniopdrættede Aedes aegypti-myg til systematisk frigivelse i udendørs områder for at forstyrre de naturlige reproduktive cyklusser for lokale Aedes aegypti-populationer i et operationelt folkesundhedsvektorkontrolprogram.
Mens lignende protokoller og arbejdsgange er blevet offentliggjort til produktion af transgene Aedes aegypti-hanner og produktionsarbejdsgange for Aedes SIT, eller Wolbachia-baserede inkompatibilitetsprogrammer er blevet offentliggjort andetsteds, illustrerer denne protokol, hvordan eksisterende protokoller er blevet tilpasset til Aedes aegypti-produktion, adskillelse og bestråling af mandlige pupper, mærkning og emballering af voksne mænd og forsendelse til udgivelsesstedet for dette program 9, 10,11,12,13,14,15,16,17,18. Mærkningskomponenten i denne protokol er muligvis ikke påkrævet i et modent operationelt SIT-program; Det er dog medtaget her, fordi det er en måde at overvåge effektiviteten og kontrollere kvaliteten af hele processen i de tidlige år med at etablere SIT-programmet. Myggekontrolprogrammer drives typisk af lokale myndigheder, så de kan variere meget i mange aspekter af deres organisation fra størrelse og finansieringsbase til tuning af kontroltaktik for at maksimere lokal succes. Den protokol, der er beskrevet heri, bør derfor evalueres med hensyn til kompatibilitet med tilgængelige ressourcer.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1-1/8&#34; wrench (1&#34; (1 inch) = 2.54 cm)</td>
			<td>Craftsman</td>
			<td>CMMT44707</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/2 pint cardstock cup (1/2 pint = 236.5 mL)</td>
			<td>Science Supplies WLE corp</td>
			<td>1/2 pint</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/4&#34; tubing - tygon</td>
			<td>Hudson Extrusions</td>
			<td>LLDPE1/8 X 1/4 BLK</td>
			<td>to attach to CO2 gas regulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/8&#34; brass barb w/ MIP connection</td>
			<td>B&#38;K</td>
			<td>BHB-85NLB</td>
			<td>to attach to CO2 gas regulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 mL graduated plastic beakers with handle</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>1223-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3000 mL graduated plastic beakers with handle</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>1223-3000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adult large cage</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>1450D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aspirator vials</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>2809V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine liver powder</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>290039601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brewers yeast</td>
			<td>MP Biomericals</td>
			<td>02903312-CF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 regulator</td>
			<td>Randor</td>
			<td>64003038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 tank (20# canister)</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>CDBEVCARB20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collection basin</td>
			<td>Treasure Gurus</td>
			<td>KI-ENAMELBOWL</td>
			<td>for separator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton balls - large</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-456-883</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deli cups w/lids - 470 mL</td>
			<td>Pactiv DELItainer</td>
			<td>PCTYSD2516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deli cups w/lids - 1900 mL</td>
			<td>Berry Global</td>
			<td>T60764</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DoseReader 4</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>ND0.5 and ND1.0 QA Filter Set standards</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dosimetry film</td>
			<td colspan="2">Far West Technology, Inc.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>AP10045S0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flashlight aspirator</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>2809D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps - fine featherweight</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>4748 or 4750</td>
			<td>featherweight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GAFchromic</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>radiochromic film</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gammator M</td>
			<td>Radiation Machinery Corporation, Parsippany, NJ</td>
			<td></td>
			<td>Cesium-137 irradiator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hand held mechanical aspirator</td>
			<td>Clarke Mosquito</td>
			<td>13500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lambskin condoms</td>
			<td>Trojan</td>
			<td>Naturalamb</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large CO2 chamber</td>
			<td>Sterilite</td>
			<td colspan="2">Walmart #&#160;568789514</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Larval rearing pans</td>
			<td>Blue Ridge Thermoforming</td>
			<td>&#160;01-FG-400-3N-ABS</td>
			<td>Dimensions: 22.375 x 17.5 x 3 (inches)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnets - 20# pull</td>
			<td>Master magnetics</td>
			<td>MHHH20BX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Marking dye</td>
			<td>Dayglo</td>
			<td>ECO-11</td>
			<td>Aurora Pink</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Marking dye</td>
			<td>Dayglo</td>
			<td>ECO-17</td>
			<td>Saturn Yellow</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mesh</td>
			<td>Falk</td>
			<td></td>
			<td>T301</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasture pipettes</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>02-708-006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes - large</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>25384-090 CS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes - small (60 mm x 15 mm)</td>
			<td>Fisher Brand</td>
			<td>FB0875713A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pupa separator</td>
			<td>J.W. Hock</td>
			<td>1512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red rubber hose</td>
			<td>Welch</td>
			<td>331040-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Release containers</td>
			<td>Science Supplies WLE corp</td>
			<td>1 gallon</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber bands - cross #19</td>
			<td>Alliance</td>
			<td>ALL37196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber bands - latitude #64</td>
			<td>Skillcraft</td>
			<td>NSN0589974</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>Ohaus</td>
			<td>H-4737</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seed germination paper - Heavy stock 76#</td>
			<td>Anchor Paper</td>
			<td>#76</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shipping coolers- 16 x 13 x 12.5&#34;</td>
			<td>MrBoxonline.com</td>
			<td colspan="2">Husky Foam Cooler kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sieve #20</td>
			<td>Advantech</td>
			<td>20BS8F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sieve #30</td>
			<td>Advantech</td>
			<td>30BS8F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small cage - Bug Dorm</td>
			<td>MegaView</td>
			<td>Bug Dorm-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small CO2 chamber</td>
			<td>Mainstays</td>
			<td colspan="2">Walmart #&#160;562922221</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Souffle cup lid</td>
			<td>SOLO</td>
			<td>41165277456</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Souffle cups - 4 oz (1 oz = 29.6 mL)</td>
			<td>SOLO</td>
			<td>41165024104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sponge</td>
			<td>ocelo</td>
			<td>MMM7274FD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Squeeze bottle</td>
			<td>Dynalon</td>
			<td>3UUP6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscope</td>
			<td>Meiji Techno</td>
			<td>EMZ-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stockinette</td>
			<td>BSN Medical</td>
			<td>30-1006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Styrofoam</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>extruded polystyrene foam</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropical fish flake food</td>
			<td>Tetra</td>
			<td>4.52 pound</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vaccum chamber - desiccator</td>
			<td>BelArt</td>
			<td>T9FB892757</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weigh boats</td>
			<td>Globe Scientific</td>
			<td>3621</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparing irradiated and marked male aedes aegypti mosquitoes for release in an operational sterile insect technique program

Kontrollen af sådanne menneskelige sygdomme som dengue, Zika og chikungunya er afhængig af kontrollen af deres vektor, Aedes aegypti myg, fordi der ikke er nogen forebyggelse. Kontrol af mygvektorer kan stole på kemikalier, der påføres umodne og voksne stadier, hvilket kan bidrage til dødeligheden af ikke-mål og endnu vigtigere føre til insekticidresistens i vektoren. Den sterile insektteknik (SIT) er en metode til bekæmpelse af populationer af skadedyr gennem frigivelse af steriliserede voksne mænd, der parrer sig med vilde hunner for at producere ikke-levedygtige afkom. Dette papir beskriver processen med at producere sterile hanner til brug i et operationelt SIT-program til bekæmpelse af Aedes aegypti myg. Skitseret her er de trin, der bruges i programmet, herunder opdræt og vedligeholdelse af en koloni, adskillelse af mandlige og kvindelige pupper, bestråling og mærkning af voksne hanner og forsendelse af Aedes aegypti-hanner til frigivelsesstedet. Der diskuteres også proceduremæssige forbehold, programbegrænsninger og fremtidige mål.

Årvågen og tilstrækkelig myggeopdræt består af velafbalanceret tilgængelighed af hanner og hunner i kolonibure, vedligeholdelse af frisk saccharoseopløsning og honning og konsekvent blodfodring af høj kvalitet. Disse betingelser vil give mulighed for tætpakkede ægplader, der er optimale til brug i SIT-larveopdrætspander. Korrekt opbevaring og brug af tørrede ægplader, såsom systematisk mærkning for at lette brugen fra ældste til nyeste, vil understøtte ensartet ruge på tværs af alle pander. Fyldning af alle larveopdrætspander med vand inden udklækning kan mindske den tid, som ægpladerne er i lugebeholdere i, og fremme en sund udvikling. Vedligeholdelse af larvepander fra luge til forpuppning kræver omhyggeligt engagement af kolonipersonale, da nogle pander kan have brug for mere eller mindre mad eller yderligere vand afhængigt af udviklingsstadier og miljøvariabler. Hvis der er problemer med udviklingsstadiet på den planlagte dag for puppesexseparation, skal justeringer foretages tidligere i processen, såsom udklækning tidligere eller senere, justering af mad eller ændring af inkubatortemperaturen.
Opdrætsprocessen i denne protokol gør ikke, at alle æg klækkes i tide til at udvikle sig til pupper, der kan bestråles og anvendes til kontrolformål. Mellem 20 og 50% af de koloniopdrættede myg vil stadig være larver, når pupperne skal adskilles. Disse larver spildes dog ikke, men får lov til at modnes i 24 timer for at gøre yderligere pupper, der kan kombineres med hunpupper fra den foregående dags adskillelse og genbruges tilbage i kolonibure. I koloniburene får pupper lov til at modnes til voksne, parre sig, blodfodre og producere æg, der opretholder SIT-projektet.
Adskillelse af pupper, hældning af pupper i petriskåle, bestråling og anbringelse i bure til voksne efter bestråling skal ske på en dag; Derfor bør der afsættes tilstrækkelig tid til at behandle alle trin komfortabelt. Montering og forberedelse af frigivelsesbeholdere skal ske inden mærkningsprocessen. Når forsendelseskasser returneres fra frigivelsesstedet, skal frigivelsesbeholdere inspiceres og forberedes til deres næste brug. Kassation af våde bomuldskugler, udluftning af våde frigivelsesbeholdere, rengøring af petriskåle, udskiftning af net og fjernelse af elastikker fra beholderen, mens de ikke er i brug, vil i høj grad forlænge frigivelsesbeholdernes levetid.
I betragtning af den verdensomspændende virkelighed af COVID-19-viruspandemien er denne protokol, der typisk er en flerpersonsoperation, blevet ændret til at kunne medbringes af en person, der arbejder alene i et laboratorium for hvert trin. De trin i processen, der hindres mest af et enkeltpersonsscenarie, er vedligeholdelsestrinnene til kønning, mærkning, vejning og koloniopdræt. Det bør være tilstrækkeligt at adskille pupper efter køn af én person, hvis der er flere separatorer, der fungerer samtidigt i forskellige rum. I en pandemisk situation, hvor social afstand forekommer på arbejdspladsen, er det nødvendigt at udstyre flere stationer for at gennemføre trin fra sexing til pakning. Afhængigt af operatørens hastighed tager det en person ~ 4 timer at kønne 15.000 myg og derefter yderligere 1-2 timer at markere, veje og pakke dem. Et to-personers scenario mindsker den tid, hvor myg bedøves til mærkning og reducerer den samlede arbejdstid. Men selv i et to-personers scenarie kan tildeling af de fulde 2,0 g myg pr. frigivelsesbur være udfordrende på grund af begrænset arbejdstid, mens myggene bedøves. Selvom processen med rengøring og tilberedning af larver og voksne opdrætsmaterialer er ekstremt tidskrævende og arbejdskrævende, kan den opdeles således, at individuelle operatører kan arbejde uafhængigt og sikkert under en pandemi.
Frigivelse af voksne, markerede, bestrålede Aedes aegypti-hanner ligger uden for denne protokols anvendelsesområde, men præsenteres her i korte træk. Processen med at frigive mærkede, bestrålede hanmyg starter med at bestemme en ensartet frigivelsesfordeling af frigivelsesbeholderne baseret på vægt (og dermed udledt antal sterile hanner), som rapporteret i tabel 3. Når forsendelserne er leveret til vektorkontroldistriktet, åbnes kasserne, og frigivelsesbeholderne evalueres for eventuelle problemer med dødelighed eller tilstand af frigivelsescontainerne. Myg i frigivelsesbeholderne får derefter lov til at akklimatisere sig til omgivelsestemperatur og fugtighed i 1-2 timer inden transport til behandlingsområdet. Udsætningssteder i behandlingsområdet identificeres efter intensiv overvågning for hot spots af vilde populationer af Aedes aegypti. Timingen, hyppigheden og tætheden af udsætninger afbalanceres af artens bionomik samt meteorologi, offentlig støtte og laboratorieopdrætskapacitet.
Da specifikke frigivelsesbeholdere matches med bestemte udsætningssteder, skal etiketten krydstjekkes, inden frigivelsesbeholderen åbnes, ved at skære masken på toppen, så operatøren kan deformere masken, så en del af hannerne kan slippe ud. Denne fraktionerede frigivelsesmetode gentages ved hvert tildelt frigivelsespunkt for beholderen, indtil alle frit flyvende hanner er blevet frigivet. Denne proces gentages derefter for hver frigivelsescontainer på deres respektive tildelte frigivelsessted, indtil alle containere er blevet behandlet. Valgfrit, efter at myggene er blevet frigivet, kan alle døde eller handicappede myg, der ikke forlod frit, samles i petriskåle og mærkes til at blive talt i hånden eller vejet for at korrigere det anslåede antal frigivet. Løbende og gennemgribende overvågning af voksne, æg og umodne stadier af vilde Aedes aegypti i målområdet og muligvis på ikke-interventionskontrolsteder udføres for at vurdere effektiviteten af SIT-operationen.

Watch this Scientific Journal Video about Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program at JoVE.com

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

Den sterile insektteknik (SIT) bruges til at kontrollere specifikke, medicinsk vigtige mygpopulationer, der kan være resistente over for kemiske kontroller. Her beskriver vi en metode til masseopdræt og forberedelse af sterile hanmyg til frigivelse i et operationelt SIT-program rettet mod Aedes aegypti-myggen .

Forberedelse af bestrålede og markerede mandlige Aedes aegypti myg til frigivelse i et operationelt sterilt insektteknikprogram

The control of such human diseases as dengue, Zika, and chikungunya relies on the control of their vector, the Aedes aegypti mosquito, because there is no ...

Den unikke værdi af denne protokol er, at to medarbejdere, der bruger let tilgængeligt udstyr i små laboratorierum, kan producere nok sterile malmyg til at understøtte et 50 hektar stort operationelt SIT-program. Effektiviteten og de lave omkostninger ved denne teknik gør den tilgængelig, uhåndterlig for selv små mygkontroldistrikter at udvide deres integrerede vektorkontrolprogram. Demonstrerer proceduren vil være mig selv og Barbara Bayer, biologiske videnskabslaboranter fra forskningsenheden.For at bageste voksne Aedes aegypti fra pupper skal du forberede 60 x 60 x 60 centimeter sammenklappelige aluminiumsopdrætsbure med 0,84 x 0,84 millimeter glasfibernetscreening i hulstørrelse og en reach-in stockinette sleeve på en lodret væg i hvert bur. Placer en 1.900 milliliter plastikkop med Aedes aegypti-pupper i et forhold mellem et og et køn i hvert opdrætsbur, og bind ærmet lukket, og lad kopperne stå i bure til eclosion i cirka fire dage ved 28 til 30 grader Celsius større end 50% relativ luftfugtighed i en 12:12 eller 14:10 lys: mørk cyklus, indtil der ikke kommer flere voksne frem. 24 timer efter at pupperne er anbragt i opdrætsburene, skal du placere en beholder med 10% saccharoseopløsning med en svampevæge i hvert bur og suspendere en 10 x 2 centimeter svamp gennemblødt i honning fra en trådkrog for at give henholdsvis hydrering og ernæring til de voksne myg.48 til 72 timer efter, at de fleste voksne er dukket op hver anden til tredje dag i de næste tre til fire uger derefter, skal du fylde det ene lammeskindskondom med 50 til 100 ml defibrineret kvægblod pr. Bur og varme kondomerne til ca. 37 grader Celsius i et varmt vandbad. Efter forsigtigt at have klappet kondomerne ned med håndklædet, skal du placere de delvist tørrede kondomer i individuelle papirforede petriskåle inde i burene i 30 til 60 minutter. 48 til 72 timer efter hver blodfodring anbringes en 1.900 ml ovipositionskop indeholdende 800 ml filtreret puppevand og forsynes med et 8 til 10 x 30 centimeter ark frøspiringspapir monteret flush langs koppens indre omkreds i hvert bur.For at opdrætte Aedes aegypti larver fra æg skal du bruge et ovipositionspapir med 5.000 til 10.000 æg til stede og skære en tre til syv centimeter sektion vinkelret på ovipositionslinjen. Læg stykket i en ny 460 milliliter beholder halvt fyldt med ledningsvand og en knivspids pulveriserede fiskemadsflager. Dæk og omrør beholderen kraftigt i mindst et minut, før du hælder hele indholdet i en larveopdrætspande indeholdende tre liter ledningsvand og 50 ml brun gylle.Markér gryden med startdato, belastningsoplysninger og fodringsplan. Når den omtrentlige tærskelandel af larver i larvepanderne er nået, hældes indholdet af hver gryde gennem en sigte i størrelse 20 til 40 og bruger en klemmeflaske postevand til at vaske pupper og larver ud af sigten til et tre liters gradueret plastbægerglas. For at adskille hanpupperne fra larverne og hunpupperne skal du dele indholdet af hvert bægerglas mellem flere 1,9 liters plastbeholdere og placere en stiv lav fire liters opsamlingsbeholder under slusen i bunden af en puppeseparator.Fyld to treliters graduerede plastbægre, der er cirka tre fjerdedele fulde af postevand, og hæld vandet gennem mellemrummet mellem separatorens glasplader, mens du justerer de øverste og nederste knapper, så vandet kontinuerligt kan strømme gennem separatoren. Når stående vand er opsamlet jævnt i en højde på ca. 1,25 centimeter fra bunden af pladerne, skal du markere startpositionerne ved separatorens nederste knapper med tape og begynde at hælde beholderne med pupper og larver i separatoren, mens du kontinuerligt roterer bundknapperne mod uret en til to centimeter fra startpositionerne. Når de fleste eller alle larverne er skyllet gennem slusen ind i opsamlingsbeholderen, sættes vandstrømmen på pause og bruger en sigte nummer 30 til at rense larvernes opsamlingsbeholder.Når alle larverne er fjernet, hældes vandet og drejeknapperne igen, så hanpupperne kan skylles ind i opsamlingsbeholderen. Hæld derefter hanpupperne fra beholderen i en sigte nummer 20 og brug en en liter klemmeflaske postevand til at vaske pupperne fra sigten i en separat 1,9 liters beholder. Når alle hanpupperne er opsamlet, hældes vandet og knapperne, så hunpupperne kan opsamles.Brug af sigte nummer 20 til at overføre hunpupperne til en ny 1,9 liters beholder som netop demonstreret. Hæld derefter vandet og juster knapperne igen, indtil alle de umodne myg er skyllet ud af separatoren. Sil de opsamlede hanpupper med en sigte og vask i et en liter gradueret bægerglas med så lidt vand som muligt.Hæld forsigtigt pupperne i petriskåle foret med fugtigt filterpapir i et enkelt lag. Fjern stående vand fra petriskålbunden ved hjælp af en frisk tre milliliter græspipette for at forhindre puppebevægelse under arbejdet. Bundt petriskåle og stakke, inden de forsegles i en mærket 3,8 liters genlukkelig pose, så den passer ind i bestrålingskammeret.For at markere kvantificerede partier af voksne bestrålede hanmyg skal du fjerne eventuelle ernæringskilder fra opdrætsburet og placere et bur i et stort kuldioxidkammer i fem til syv minutter og banke siderne af beholderen for at løsne myg, der klamrer sig til væggene. I slutningen af eksponeringsperioden overføres myggene til et aspiratorhætteglas og bedøves myggene igen, før myggene rystes i en hvid papirdækket arbejdsflade. Opsæt forsigtigt alle hannerne fra arbejdsfladen i et nyt hætteglas, og gentag eksponeringerne og indsamlingen, indtil alle voksne hanner er blevet indsamlet fra alle opdrætsburene.På et tidspunkt under kønssorteringsprocessen genereres et hætteglas, der kun indeholder 25 voksne mandlige myg. Når alle hannerne er samlet, vejes hver myggeunge i en tjæret vejebåd på en balance, og hæld hurtigt de vejede myg i en 240 milliliter kartonbeholder indeholdende 50 milligram et markeringsfarvestof. Vip og drej beholderen en fuld rotation med uret og mod uret, indtil alle myggene er blevet let belagt, og hæld myggene i en ny vejebåd, og fold derefter vejebåden i to for at lade myggene kanaliseres gennem stockinette-ærmet ind i frigivelsesbeholderen.Når der er tilsat ca. to gram mandlige myg til frigivelsesbeholderen, skal du binde stockinette-ærmet lukket og markere mærkningsbåndet på rammen på frigivelsesbeholderen med myggenes farvestoffarve, beholdernummer og samlede vægt. I dette repræsentative mandlige voksne Aedes aegypti mygopdræt, bestråling og markedsføringseksperiment kunne to gram mandlige voksne myg indsamles fra tre opdrætsbure og sammen med to hætteglas med 25 mænd fra to bure for at muliggøre beregning af gennemsnitsvægten pr. Myg. 25 kvinder blev kasseret i alt fra to af partierne.Rettidig og observationsfodring i løbet af ugen med larveopdræt er afgørende for at generere veludviklede pupper til adskillelse. Dette skaber en klar skelnen mellem mænd og kvinder, hvilket fører til en lav forekomst af kvinder i markeringstrinnene. Udover at bruge dem i operationelle SIT-programmer kan disse sterile hanner også bruges i vid udstrækning i eksperimenter, der undersøger parringskonkurrence, overlevelse og spredning af bestrålet sammenlignet med vilde ikke-bestrålede hanner.Ved at ændre teknikken til at omfatte hunmyg kan vi undersøge virkningen af utilsigtet frigivelse af bestrålede hunner med hensyn til frugtbarhed og vektorkompetence.

Research

JoVE Journal

Biology

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

Microinjection of A. aegypti Embryos to Obtain Transgenic Mosquitoes

In this video, Nijole Jasinskiene demonstrates the methodology employed to generate transgenic Aedes aegypti mosquitoes, which are vectors for dengue ...

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes (A. aegypti) and Infection Phenotype Determination

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes A. aegypti and Infection Phenotype Determination

The purpose of this procedure is to infect the Aedes mosquito with dengue virus in a laboratory condition and examine the infection level and dynamic of ...

Dissection of Midgut and Salivary Glands from Ae. aegypti Mosquitoes

The mosquito midgut and salivary glands are key entry and exit points for pathogens such as Plasmodium parasites and Dengue viruses. This video protocol ...

Building a Better Mosquito: Identifying the Genes Enabling Malaria and Dengue Fever Resistance in A. gambiae and A. aegypti Mosquitoes

In this interview, George Dimopoulos focuses on the physiological mechanisms used by mosquitoes to combat Plasmodium falciparum and dengue virus ...

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi-medieret Gene Knockdown og<em&gt; In Vivo</em&gt; Diurese Assay i Voksen Kvinde<em&gt; Aedes aegypti</em&gt; Myg

This video protocol demonstrates an effective technique to knockdown a particular gene in an insect and conduct a novel bioassay to measure excretion ...

An Experimental and Bioinformatics Protocol for RNA-seq Analyses of Photoperiodic Diapause in the Asian Tiger Mosquito, Aedes albopictus

An Experimental and Bioinformatics Protocol for RNA-seq Analyses of Photoperiodic Diapause in the Asian Tiger Mosquito, Aedes albopictus

En eksperimentel og Bioinformatik Protokol for RNA-seq Analyser af Fotoperiodisk diapause i den asiatiske Tiger Mosquito,<em&gt; Aedes albopictus</em

Photoperiodic diapause is an important adaptation that allows individuals to escape harsh seasonal environments via a series of physiological changes, ...

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

Fysiologiske Recordings og RNA-sekventering af smags- Vedhæng i gul-feber Mosquito<em&gt; Aedes aegypti</em

Electrophysiological recording of action potentials from sensory neurons of mosquitoes provides investigators a glimpse into the chemical perception of ...

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

Fedt kroppen organsystem kultur i Aedes Aegypti, en vektor af Zika Virus

The insect fat body plays a central role in insect metabolism and nutrient storage, mirroring functions of the liver and fat tissue in vertebrates. Insect ...

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Opretholdelse af Aedes aegypti myg inficeret med Wolbachia

Aedes aegypti mosquitoes experimentally infected with Wolbachia are being utilized in programs to control the spread of arboviruses such as dengue, ...

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Medium-throughput Screening Assays til vurdering af virkninger på Ca2 +-signalering og Acrosome reaktion i menneskelige sædceller

Ca2+-signaling is essential to normal sperm cell function and male fertility. Similarly, the acrosome reaction is vital for the ability of a human sperm ...