Name: preparing irradiated and marked male aedes aegypti mosquitoes for release in an operational sterile insect technique program
Uploaded: 2021-03-12T14:00:00
Duration: 8 min 58 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program at JoVE.com

Vi takker Drs. R.-D. Xue, C. Bibbs, W. Qualls og V. Aryaprema fra Anastasia Mosquito Control District, St. Augustine, Florida, for partnerskap i utviklingen av SIT-programmet og ekspertinnsikt om effektiv operativ frigjøring av sterile mannlige Aedes aegypti. Denne forskningen ble støttet av USDA-ARS og Florida Department of Agriculture and Consumer Services (FDACS). Omtale av handelsnavn eller kommersielle produkter i denne publikasjonen er utelukkende med det formål å gi spesifikk informasjon og innebærer ikke anbefaling eller godkjenning av USDA eller FDACS.

<ol>
	<li>Moyes, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contemporary+status+of+insecticide+resistance+in+the+major+Aedes+vectors+of+arboviruses+infecting+humans.">Contemporary status of insecticide resistance in the major Aedes vectors of arboviruses infecting humans.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 11 (7), 0005625 (2017).</li><li>Baldacchino, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+methods+against+invasive+Aedes+mosquitoes+in+Europe:+a+review.">Control methods against invasive Aedes mosquitoes in Europe: a review.</a> Pest Management Science. 71 (11), 1471-1485 (2015).</li><li>Burkett, D. A., Cope, S. E., Strickman, D. A., White, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Deployed+Warfighter+Protection+(DWFP)+Research+Program:+Developing+new+public+health+pesticides,+application+technologies,+and+repellent+systems.">The Deployed Warfighter Protection (DWFP) Research Program: Developing new public health pesticides, application technologies, and repellent systems.</a> Journal of Integrated Pest Management. 4 (2), 1-7 (2013).</li><li>Harwood, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlling+Aedes+aegypti+in+cryptic+environments+with+manually+carried+ultra-low+volume+and+mist+blower+pesticide+applications.">Controlling Aedes aegypti in cryptic environments with manually carried ultra-low volume and mist blower pesticide applications.</a> Journal of the American Mosquito Control Association. 32 (3), 217-223 (2016).</li><li>Morrison, A. C., Zielinski-Gutierrez, E., Scott, T. W., Rosenberg, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+challenges+and+proposing+solutions+for+control+of+the+virus+vector+Aedes+aegypti.">Defining challenges and proposing solutions for control of the virus vector Aedes aegypti.</a> PLoS Medicine. 5 (3), 68 (2008).</li><li>Klassen, W., Curtis, C. F., InDyck, V. A., Hendrichs, J., Robinson, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=History+of+the+sterile+insect+technique.">History of the sterile insect technique.</a> Sterile insect technique: principles and practice in area-wide integrated pest management. , 3-36 (2005).</li><li>Alphey, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sterile-insect+methods+for+control+of+mosquito-borne+diseases:+an+analysis.">Sterile-insect methods for control of mosquito-borne diseases: an analysis.</a> Vector Borne and Zoonotic Diseases. 10 (3), 295-311 (2010).</li><li>Dame, D. A., Curtis, C. F., Benedict, M. Q., Robinson, A. S., Knols, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Historical+applications+of+induced+sterilisation+in+field+populations+of+mosquitoes.">Historical applications of induced sterilisation in field populations of mosquitoes.</a> Malaria Journal. 8, (2009).</li><li>Bond, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+irradiation+dose+to+Aedes+aegypti+and+Ae.+albopictus+in+a+sterile+insect+technique+program.">Optimization of irradiation dose to Aedes aegypti and Ae. albopictus in a sterile insect technique program.</a> PloS One. 14 (2), 0212520 (2019).</li><li>Bourtzis, K., Lees, R. S., Hendrichs, J., Vreysen, M. J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=More+than+one+rabbit+out+of+the+hat:+Radiation,+transgenic+and+symbiont-based+approaches+for+sustainable+management+of+mosquito+and+tsetse+fly+populations.">More than one rabbit out of the hat: Radiation, transgenic and symbiont-based approaches for sustainable management of mosquito and tsetse fly populations.</a> Acta Tropica. 157, 115-130 (2016).</li><li>Carvalho, D. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+production+of+genetically+modified+Aedes+aegypti+for+field+releases+in+Brazil.">Mass production of genetically modified Aedes aegypti for field releases in Brazil.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. , e3579 (2014).</li><li>Carvalho, D. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aedes+aegypti+lines+for+combined+sterile+insect+technique+and+incompatible+insect+technique+applications:+the+importance+of+host+genomic+background.">Aedes aegypti lines for combined sterile insect technique and incompatible insect technique applications: the importance of host genomic background.</a> Entomologia experimentalis et applicata. 168 (6-7), 560-572 (2020).</li><li>Mamai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aedes+aegypti+larval+development+and+pupal+production+in+the+FAO/IAEA+mass-rearing+rack+and+factors+influencing+sex+sorting+efficiency.">Aedes aegypti larval development and pupal production in the FAO/IAEA mass-rearing rack and factors influencing sex sorting efficiency.</a> Parasite. 27, 43 (2020).</li><li>Zheng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incompatible+and+sterile+insect+techniques+combined+eliminate+mosquitoes.">Incompatible and sterile insect techniques combined eliminate mosquitoes.</a> Nature. 572 (7767), 56-61 (2019).</li><li>. Methods in Aedes Research Available from: <a target="_blank" href="https://www.beiresources.org/Portals/2/VectorResources/Methods%20in%20Aedes%20Research%202016.pdf">https://www.beiresources.org/Portals/2/VectorResources/Methods%20in%20Aedes%20Research%202016.pdf</a> (2016)</li><li>Focks, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+separator+for+the+developmental+stages,+sexes,+and+species+of+mosquitoes+(Diptera:+Culicidae).">An improved separator for the developmental stages, sexes, and species of mosquitoes (Diptera: Culicidae).</a> Journal of Medical Entomology. 17 (6), 567-568 (1980).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Manual of Dosimetry in Radiotherapy. Technical Reports Series No. 110. , (1970).</li><li>Aldridge, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gamma-irradiation+reduces+survivorship,+feeding+behavior,+and+oviposition+of+female+Aedes+aegypti.">Gamma-irradiation reduces survivorship, feeding behavior, and oviposition of female Aedes aegypti.</a> Journal of the American Mosquito Control Association. 36 (3), 152-160 (2020).</li><li>Cianci, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimating+mosquito+population+size+from+mark-release-recapture+data.">Estimating mosquito population size from mark-release-recapture data.</a> Journal of Medical Entomology. 50 (3), 533-542 (2013).</li><li>Knipling, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The basic principles of insect population suppression and management. , (1979).</li></ol>

Alle forfattere har ikke oppgitt noen interessekonflikter.

Initiering av et kontrollprogram med SIT som bruker stråling krever etablering av en lokal stamme av Aedes aegypti. Dette trinnet er kritisk og kan tillate SIT å virkelig skille seg fra lignende kontrollteknologier. Ved å utvikle prosjektet fra en lokal myggstamme, vil hannene som genereres sannsynligvis ha atferd som gjør at de kan tilpasse seg miljøendringer og signaler og å lokalisere og parre seg med ville kvinner i nærheten. Videre kan utgivelsen av bestrålte lokale menn ikke generere negativ opinion sammenlignet med, for eksempel, frigjøring av en ikke-lokal stamme av genetisk modifiserte mygg som for eksempel kan introdusere nye alleler i den lokale myggpopulasjonen.
Å bruke betydelige ressurser på å bake store mengder mygg bare for å kunne bruke omtrent halvparten av dem til kontrollformål, er en begrensning av Aedes aegypti SIT-programmet. Forbedringer bør gjøres til oppdrettsprotokollen for å kondensere modningen av larver til mer definerte tidsrammer når puppene vil være klare. Dette vil tillate flere pupper å bli samlet på det optimale tidspunktet for separasjon. Imidlertid øker flere pupper å behandle risikoen for at flere hunner forpupper seg når puppene samles inn, og øker dermed sannsynligheten for at hunnene havner i petriskåler med hanner og muligens blir sluppet fri. Selv om levetid, blodfôringsadferd og oviposisjonsadferd hos bestrålte kvinnelige Aedes aegypti-pupper reduseres hos voksne, er det ikke en god strategi å frigjøre kvinner tilfeldigvis sammen med bestrålte hanner22. Derfor bør det forbli en prioritet å minimere antall kvinner utilsiktet separert, bestrålt, merket og utgitt med menn.
Suksessen til et SIT-program er til syvende og sist avhengig av vellykket kompiskonkurranse av kolonioppdrettede, bestrålte hanner. Bevaring av mannlig konkurranseevne er avhengig av uttømmende eksperimentelt avledet valg av dosen og maksimering av det estimerte forholdet mellom sterile: ville menn i befolkningen. Dosevalg bestemmes av flere viktige faktorer som inkluderer lang levetid, fruktbarhet, fecundity og puppedødelighet. Det har blitt observert at mannlige mygg vil vise en asymptotisk fruktbarhetskurve som nærmer seg null når strålingen øker (KJL, RLA, SCB upubliserte data). Samtidig reduseres mannlig myggs levetid og aktivitetsnivå eksponentielt etter hvert som strålingsdosen øker (KJL, RLA, SCB upubliserte data). Derfor, i stedet for å identifisere en dose som gir 99,9% sterilitet hos menn, er det å foretrekke å fokusere på en lavere sterilitetsprosent mens du støtter overlevelse. Når et doseområde er identifisert som ikke skiller levetiden eller puppedødeligheten hos bestrålte hanner fra dødeligheten hos ikke-bestrålte hanner, bør det foretas ytterligere vurderinger av fertilitet for å identifisere en dose som gjør hannene overveldende sterile, men konkurransedyktige.
Samtidig er det viktig å sammenligne antall mannlige mygg i befolkningen med det for frigjorte bestrålte hanner. Dette kan gjøres ved å samle hanner fra forskjellige steder i og rundt målfrigjøringsområdet gjentatte ganger fra samme sted og før, under og etter oppstart av SIT-programmet. En, release, recapture studie bør utføres for å vurdere forholdet mellom ville mannlige mygg og frigjorte mygg. En, release, recapture-studie er avhengig av frigjøring av et kjent antall merkede mygg fra et bestemt punkt og deres senere gjenfangst på punkter i nærheten av det første utgivelsespunktet. Ved å sammenligne antall gjenfangede hanner og ville hanner i avstander fra utløsningspunktet, er det mulig å estimere den generelle ville populasjonen av hanner i området slik at konkurranseforholdene for sterile hanner kan frigjøres23. Maksimering av forholdet mellom sterile: ville hanner kan oppnås ved å frigjøre mer sterile hanner og / eller ved å redusere den ville befolkningen ved klassiske kontrollmidler som kildereduksjon, umoden kontroll eller adulticide behandlinger.
For å måle effektiviteten av sterile mannlige utgivelser, kan voksensamlinger sammenlignes kronologisk mot et ikke-intervensjonsområde. Etter hvert som sterile hanner frigjøres og antallet innsamlede hanner og hunner i et område avtar i forhold til et sammenlignbart ikke-intervensjonsområde, kan det hypoteses at det skyldes at de frigjorte sterile hannene lykkes med å utkonkurrere lokale fertile hanner. Denne effekten kan også observeres i oviposisjonsfellekopper utplassert både på intervensjons- og ikke-intervensjonsstedene. Egg kan fortsatt produseres på intervensjonsstedet, men hvis færre klekkes enn de fra ikke-intervensjonsstedet, kan det antas at de ikke befruktes på grunn av at hunner parrer seg med sterile hanner. Flere og flere oviposisjoner av ubefruktede egg kan etter hvert føre til redusert oviposisjon på grunn av manglende erstatning av hunner på intervensjonsstedet 8,24.
Fremtidige retninger av SIT-teknologi og programmer utvides naturlig til flere medisinsk viktige myggarter. For eksempel kan denne teknologien lett tilpasses for å kontrollere Aedes albopictus, gitt den svært like bionomikken til Aedes aegypti og Aedes albopictus. Andre sykdomsvektormyggarter av interesse inkluderer Culex quinquefasciatus, Culex tarsalis og forskjellige Anopheles-arter. Forbedring av effekten av denne teknologien avhenger av å øke kapasiteten til mannlige pupper produsert på et gitt tidspunkt, noe som kan oppnås gjennom genetisk manipulasjon eller kunstig utvalg, og forbedre mannlig konkurranseevne, som kan oppnås ved å øke virilitet, fruktbarhet eller lang levetid.
Til syvende og sist er SIT-programmer ikke en sølvkule for å kontrollere mygg. De er i stedet et verktøy i en rekke andre kontrollteknikker, for eksempel IVM-programmer, som krysskompenserer for svakheter mellom teknikker. For eksempel, mens kjemisk kontroll gir rask og billig kontroll, fremmer den også utviklingen av resistens og ikke-måldødelighet; og mens SIT er artsspesifikk og sannsynligvis ikke vil generere motstand, må SIT-hanner produseres og frigjøres i det uendelige for å kontrollere innvandrende populasjoner fra utenfor vektorkontrolldistriktet.

Overføring av myggbårne patogener til mennesker forårsaker millioner av tilfeller av sykdom og dødsfall hvert år over hele verden. I mangel av effektive, godkjente vaksiner for myggbårne sykdommer, som Zika eller denguefeber, er en av de mest effektive måtene å redusere overføring å redusere sykdomsvektormyggpopulasjoner. Det er urovekkende at et økende antall myggarter, tradisjonelt målrettet av plantevernmidler, viser økende nivåer av plantevernmiddelresistens1. Samtidig har offentlige etater aggressivt avregistrert eller forbudt tidligere godkjente plantevernmidler, og få nye, effektive kjemiske kontrolltiltak utvikles 2,3. Denne konstellasjonen av hindringer for myggkontroll har motivert utforskningen av alternative ikke-kjemiske teknikker for å redusere myggpopulasjoner.
Enkelte myggarter gir utfordringer med å kontrollere resistens og registrering av plantevernmidler. Aedes aegypti (L.) er en fremtredende sykdomsvektormygg som er ekstremt vanskelig å kontrollere gjennom tradisjonell integrert vektorstyring på grunn av det kryptiske perihomede habitatet som utnyttes av denne arten for umoden utvikling og voksen hvile 4,5. Utfordringer knyttet til utnyttelse av det kryptiske habitatet rundt boliger inkluderer vanskeligheten med å nå disse stedene med sprøyteteknikker for plantevernmidler, samt potensiell mangel på aksept fra publikum for gjentatt tilgang til privat eiendom for offentlige helsevektorkontrollbyråer for å utføre intensive overvåkings- og kontrollaktiviteter som er avgjørende for effektiv integrert vektorstyring (IVM) for denne arten.
Heldigvis blir SIT, en tilnærming som har vist seg vellykket for varig kontroll av andre svært utfordrende insektarter6, brukt på Aedes aegypti-problemet i en banebrytende serie eksperimenter og operasjonelle forsøk basert i St. Augustine, Florida (KJL, RLA, SCB upubliserte data). SIT har blitt brukt på en rekke insektarter, inkludert mygg, og har blitt gjennomgått i dybden 7,8. SIT utnytter massefrigivelsen av kolonioppdrettede hanner sterilisert, for eksempel ved eksponering for ioniserende stråling eller kjemikalier for å overvelde kompisvalget av naturlige populasjoner av kvinner. Steriliserte hanner som parrer seg med ville hunner gjør eggene ufruktbare på grunn av skader påført hanngameter, og hvis de er til stede i tilstrekkelig antall, kan de teoretisk krasje den naturlige Aedes aegypti-populasjonen.
Et SIT-program ble initiert for å forsøke å redusere populasjoner av Aedes aegypti i et byområde i Atlanterhavskysten Florida hvor denne arten nylig re-koloniserte og utvider og presenterer en folkehelserisiko for overføring av virus som Zika, dengue eller chikungunya. For å maksimere potensialet for kompatibilitet med ville hunner, ble en ny koloni etablert ved hjelp av villfangede Aedes aegypti fra målpopulasjonen for å produsere hanner til programmet9. Dette var basert på hypotesen om at lokalt avledede, kolonioppdrettede hanner ville være mer sannsynlig å være konkurransedyktige med lokale villhanner for parring med lokale ville hunner. For at SIT skal være effektiv, må ikke bare overveldende antall sterile hanner være til stede i målområdet, men de må også være i stand til effektivt å kurtisere og parre seg med lokale ville kvinnelige mygg.
En rekke eksperimenter ble utført for å bestemme det optimale antallet sterile hanner som skulle frigjøres (KJL, RLA, SCB upubliserte data) samt optimale doser av stråling som ville gjøre hannene ufruktbare uten å forstyrre overlevelse, oppførsel eller aksept av ville kvinner (KJL, RLA, SCB upubliserte data). Disse dataene kommer i allierte publikasjoner fra denne gruppen, men noen av disse funnene er også fanget opp i denne protokollen og kan brukes som utgangspunkt for nye SIT Aedes aegypti-kontrollprogrammer andre steder. Denne arten utvider stadig sitt sortiment, og SIT-programmer viser stort løfte om å være kostnadseffektive, langsiktige løsninger for å kontrollere denne befolkningen. Målet med denne protokollen er å produsere steriliserte, mannlige, kolonioppdrettede Aedes aegypti-mygg for systematisk utslipp til utendørsområder for å forstyrre de naturlige reproduktive syklusene til lokale Aedes aegypti-populasjoner i et operativt folkehelsevektorkontrollprogram.
Mens lignende protokoller og arbeidsflyter er publisert for produksjon av transgene Aedes aegypti-hanner og produksjonsarbeidsflyter for Aedes SIT, eller Wolbachia-baserte inkompatibilitetsprogrammer har blitt publisert andre steder, illustrerer denne protokollen hvordan eksisterende protokoller er tilpasset Aedes aegypti-produksjon, separasjon og bestråling av hannpupper, merking og pakking av voksne menn, og forsendelse til utgivelsesstedet for dette programmet 9, 10,11,12,13,14,15,16,17,18. Merkingskomponenten i denne protokollen er kanskje ikke nødvendig i et modent operativt SIT-program; Det har imidlertid blitt inkludert her fordi det er en måte å overvåke effekten og kontrollere kvaliteten på hele prosessen i de første årene med å etablere SIT-programmet. Myggkontrollprogrammer drives vanligvis av lokale myndigheter, slik at de kan variere mye i mange aspekter av organisasjonen fra størrelse og finansieringsbase til tuning kontrolltaktikk for å maksimere lokal suksess. Dermed bør protokollen beskrevet her evalueres for kompatibilitet med tilgjengelige ressurser.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1-1/8&#34; wrench (1&#34; (1 inch) = 2.54 cm)</td>
			<td>Craftsman</td>
			<td>CMMT44707</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/2 pint cardstock cup (1/2 pint = 236.5 mL)</td>
			<td>Science Supplies WLE corp</td>
			<td>1/2 pint</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/4&#34; tubing - tygon</td>
			<td>Hudson Extrusions</td>
			<td>LLDPE1/8 X 1/4 BLK</td>
			<td>to attach to CO2 gas regulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/8&#34; brass barb w/ MIP connection</td>
			<td>B&#38;K</td>
			<td>BHB-85NLB</td>
			<td>to attach to CO2 gas regulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 mL graduated plastic beakers with handle</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>1223-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3000 mL graduated plastic beakers with handle</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>1223-3000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adult large cage</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>1450D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aspirator vials</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>2809V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine liver powder</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>290039601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brewers yeast</td>
			<td>MP Biomericals</td>
			<td>02903312-CF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 regulator</td>
			<td>Randor</td>
			<td>64003038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 tank (20# canister)</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>CDBEVCARB20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collection basin</td>
			<td>Treasure Gurus</td>
			<td>KI-ENAMELBOWL</td>
			<td>for separator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton balls - large</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-456-883</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deli cups w/lids - 470 mL</td>
			<td>Pactiv DELItainer</td>
			<td>PCTYSD2516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deli cups w/lids - 1900 mL</td>
			<td>Berry Global</td>
			<td>T60764</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DoseReader 4</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>ND0.5 and ND1.0 QA Filter Set standards</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dosimetry film</td>
			<td colspan="2">Far West Technology, Inc.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>AP10045S0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flashlight aspirator</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>2809D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps - fine featherweight</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>4748 or 4750</td>
			<td>featherweight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GAFchromic</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>radiochromic film</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gammator M</td>
			<td>Radiation Machinery Corporation, Parsippany, NJ</td>
			<td></td>
			<td>Cesium-137 irradiator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hand held mechanical aspirator</td>
			<td>Clarke Mosquito</td>
			<td>13500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lambskin condoms</td>
			<td>Trojan</td>
			<td>Naturalamb</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large CO2 chamber</td>
			<td>Sterilite</td>
			<td colspan="2">Walmart #&#160;568789514</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Larval rearing pans</td>
			<td>Blue Ridge Thermoforming</td>
			<td>&#160;01-FG-400-3N-ABS</td>
			<td>Dimensions: 22.375 x 17.5 x 3 (inches)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnets - 20# pull</td>
			<td>Master magnetics</td>
			<td>MHHH20BX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Marking dye</td>
			<td>Dayglo</td>
			<td>ECO-11</td>
			<td>Aurora Pink</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Marking dye</td>
			<td>Dayglo</td>
			<td>ECO-17</td>
			<td>Saturn Yellow</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mesh</td>
			<td>Falk</td>
			<td></td>
			<td>T301</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasture pipettes</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>02-708-006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes - large</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>25384-090 CS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes - small (60 mm x 15 mm)</td>
			<td>Fisher Brand</td>
			<td>FB0875713A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pupa separator</td>
			<td>J.W. Hock</td>
			<td>1512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red rubber hose</td>
			<td>Welch</td>
			<td>331040-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Release containers</td>
			<td>Science Supplies WLE corp</td>
			<td>1 gallon</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber bands - cross #19</td>
			<td>Alliance</td>
			<td>ALL37196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber bands - latitude #64</td>
			<td>Skillcraft</td>
			<td>NSN0589974</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>Ohaus</td>
			<td>H-4737</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seed germination paper - Heavy stock 76#</td>
			<td>Anchor Paper</td>
			<td>#76</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shipping coolers- 16 x 13 x 12.5&#34;</td>
			<td>MrBoxonline.com</td>
			<td colspan="2">Husky Foam Cooler kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sieve #20</td>
			<td>Advantech</td>
			<td>20BS8F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sieve #30</td>
			<td>Advantech</td>
			<td>30BS8F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small cage - Bug Dorm</td>
			<td>MegaView</td>
			<td>Bug Dorm-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small CO2 chamber</td>
			<td>Mainstays</td>
			<td colspan="2">Walmart #&#160;562922221</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Souffle cup lid</td>
			<td>SOLO</td>
			<td>41165277456</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Souffle cups - 4 oz (1 oz = 29.6 mL)</td>
			<td>SOLO</td>
			<td>41165024104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sponge</td>
			<td>ocelo</td>
			<td>MMM7274FD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Squeeze bottle</td>
			<td>Dynalon</td>
			<td>3UUP6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscope</td>
			<td>Meiji Techno</td>
			<td>EMZ-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stockinette</td>
			<td>BSN Medical</td>
			<td>30-1006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Styrofoam</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>extruded polystyrene foam</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropical fish flake food</td>
			<td>Tetra</td>
			<td>4.52 pound</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vaccum chamber - desiccator</td>
			<td>BelArt</td>
			<td>T9FB892757</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weigh boats</td>
			<td>Globe Scientific</td>
			<td>3621</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparing irradiated and marked male aedes aegypti mosquitoes for release in an operational sterile insect technique program

Kontrollen av slike menneskelige sykdommer som dengue, Zika og chikungunya er avhengig av kontrollen av vektoren deres, Aedes aegypti mygg, fordi det ikke er noen forebygging. Kontroll av myggvektorer kan stole på kjemikalier som brukes på umodne og voksne stadier, noe som kan bidra til dødeligheten av ikke-mål og enda viktigere, føre til insektmiddelresistens i vektoren. Den sterile insektteknikken (SIT) er en metode for å kontrollere populasjoner av gjennom frigjøring av steriliserte voksne hanner som parrer seg med ville kvinner for å produsere ikke-levedyktige avkom. Dette papiret beskriver prosessen med å produsere sterile hanner til bruk i et operativt SIT-program for kontroll av Aedes aegypti mygg. Skissert her er trinnene som brukes i programmet, inkludert oppdrett og vedlikehold av en koloni, skille mannlige og kvinnelige pupper, bestråle og markere voksne menn og sende Aedes aegypti-menn til utgivelsesstedet. Også diskutert er prosessuelle forbehold, programbegrensninger og fremtidige mål.

Årvåken og tilstrekkelig myggoppdrett består av velbalansert tilgjengelighet av menn og kvinner i kolonibur, vedlikehold av fersk sukroseløsning og honning, og konsekvent blodfôring av høy kvalitet. Disse forholdene vil sørge for tettpakkede eggplater som er optimale for bruk i SIT-larvepanner. Riktig lagring og bruk av tørkede eggplater, for eksempel systematisk merking for å lette bruk fra eldste til nyeste, vil støtte jevn klekking på tvers av alle panner. Fylling av alle larvepanner med vann før klekking kan redusere tiden eggplatene er i lukebeholdere og fremme sunn utvikling. Vedlikehold av larvepanner fra luke til valp krever nøye engasjement av kolonipersonell, da noen panner kan trenge mer eller mindre mat eller ekstra vann, avhengig av utviklingsstadier og miljøvariabler. Hvis det er problemer med utviklingsstadiet innen den planlagte dagen for puppekjønnsseparasjon, bør justeringer gjøres tidligere i prosessen, for eksempel klekking tidligere eller senere, justering av mat eller endring av inkubatortemperaturen.
Oppdrettsprosessen i denne protokollen gjør ikke alle egg klekket i tide for å utvikle seg til pupper som kan bestråles og brukes til kontrollformål. Mellom 20 og 50% av de kolonioppdrettede myggene vil fortsatt være larver når puppene må skilles. Disse larvene blir imidlertid ikke sløst bort, men får modnes i 24 timer for å lage ekstra pupper som kan kombineres med hunnpupper fra forrige dags separasjon og resirkuleres tilbake i kolonibur. I koloniburene vil puppene få lov til å modnes til voksne, parre seg, blodfôre og produsere egg som opprettholder SIT-prosjektet.
Å skille pupper, helle pupper i petriskåler, bestråling og plassering i voksne holdebur etter bestråling må skje på en dag; Derfor bør det tildeles tilstrekkelig tid til å behandle alle trinnene komfortabelt. Montering og klargjøring av utløserbeholdere bør gjøres før merkingsprosessen. Når fraktesker returneres fra utgivelsesstedet, bør utløserbeholdere inspiseres og klargjøres for neste bruk. Å kaste våte bomullsballer, lufte ut beholdere med våt frigjøring, rengjøre petriskåler, erstatte mesh og fjerne elastiske bånd fra beholderen, mens de ikke er i bruk, vil i stor grad forlenge levetiden til utløserbeholderne.
Gitt den verdensomspennende virkeligheten av COVID-19-viruspandemien, har denne protokollen som vanligvis er en flerpersonsoperasjon blitt endret for å kunne håndteres av en person som jobber alene i et laboratorium for hvert trinn. Trinnene i prosessen som hindres mest av et enpersonsscenario er trinnene for sexing, merking, veiing og vedlikehold av kolonioppdrett. Å skille pupper etter kjønn av en person bør være tilstrekkelig hvis det er flere separatorer som opererer samtidig i forskjellige rom. I en pandemisituasjon der sosial distansering skjer på arbeidsplassen, er det nødvendig å utstyre flere stasjoner for å fullføre trinn fra sex til pakking. Avhengig av operatørens hastighet, tar det en person ~ 4 timer til sex 15.000 mygg og deretter ytterligere 1-2 timer for å markere, veie og pakke dem. Et to-personers scenario reduserer tiden hvor mygg bedøves for merking og reduserer den totale arbeidstiden. Likevel, selv i et to-personers scenario, kan tildeling av hele 2,0 g mygg per utløsningsbur være utfordrende på grunn av begrenset arbeidstid mens myggene er bedøvet. Selv om prosessen med rengjøring og forberedelse av larve- og voksenoppdrettsmaterialer er ekstremt tidkrevende og arbeidskrevende, kan den deles slik at individuelle operatører kan jobbe selvstendig og trygt under en pandemi.
Frigivelse av voksne, merkede, bestrålte Aedes aegypti-hanner er utenfor rammen av denne protokollen, men presenteres her i korte trekk. Prosessen med å slippe ut merkede, bestrålte, mannlige mygg starter med å bestemme en jevn utløsningsfordeling av utløserbeholderne basert på vekter (og dermed utledet antall sterile hanner), som rapportert i tabell 3. Etter at forsendelsene er levert til vektorkontrolldistriktet, åpnes boksene, og utgivelsesbeholderne evalueres for eventuelle problemer med dødelighet eller tilstand av utgivelsesbeholderne. Mygg i utløserbeholderne får deretter akklimatisere seg til omgivelsestemperatur og fuktighet i 1-2 timer før transport til behandlingsområdet. Utslippssteder i behandlingsområdet er identifisert etter intensiv overvåking for hot spots av ville bestander av Aedes aegypti. Tidspunktet, frekvensen og tettheten av utslipp balanseres av artens bionomikk, samt meteorologi, offentlig støtte og laboratorieoppdrettsevner.
Siden spesifikke utløserbeholdere er tilpasset bestemte utgivelsessteder, må etiketten kryssjekkes før utløserbeholderen åpnes ved å kutte nettet på toppen, slik at operatøren kan deformere nettet slik at en del av hannene kan unnslippe. Denne fraksjonelle frigjøringsmetoden gjentas ved hvert tildelte frigjøringspunkt for beholderen til alle fritt flygende hanner er frigjort. Denne prosessen gjentas deretter for hver frigivelsesbeholder på deres respektive tilordnede frigivelsessted til alle containere er behandlet. Eventuelt, etter at myggene er sluppet ut, kan eventuelle døde eller deaktiverte mygg som ikke forlot fritt, samles inn i petriskåler og merkes for å telles for hånd eller veies for å korrigere det estimerte antallet som slippes ut. Pågående og gjennomgripende overvåking av voksne, egg og umodne stadier av vill Aedes aegypti i målområdet, og muligens i ikke-intervensjonskontrollsteder, utføres for å vurdere effekten av SIT-operasjonen.

Watch this Scientific Journal Video about Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program at JoVE.com

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

Den sterile insektteknikken (SIT) brukes til å kontrollere spesifikke, medisinsk viktige myggpopulasjoner som kan være resistente mot kjemiske kontroller. Her beskriver vi en metode for masseoppdrett og forberedelse av sterile mannlige mygg for utgivelse i et operativt SIT-program rettet mot Aedes aegypti-myggen .

Forbereder bestrålte og merkede mannlige Aedes aegypti mygg for utgivelse i et operativt sterilt insektteknikkprogram

The control of such human diseases as dengue, Zika, and chikungunya relies on the control of their vector, the Aedes aegypti mosquito, because there is no ...

Den unike verdien av denne protokollen er at to personell som bruker lett tilgjengelig utstyr i små laboratorierom, kan produsere nok sterile malmygg til å støtte et 50 hektar stort operativt SIT-program. Effektiviteten og lave kostnadene ved denne teknikken gjør den tilgjengelig, ugjennomtrengelig for selv små myggkontrolldistrikter for å øke sitt integrerte vektorkontrollprogram. Demonstrere prosedyren vil være meg selv og Barbara Bayer, biologisk vitenskap laboratorieteknikere fra forskningsenheten.For å bakre voksen Aedes aegypti fra pupper, forbered 60 x 60 x 60 centimeter sammenleggbare aluminiumsoppdrettsbur med 0,84 x 0,84 millimeter hullstørrelse glassfibernettscreening, og en reach-in stockinette hylse på en vertikal vegg av hvert bur. Plasser en 1.900 milliliter plastkopp med Aedes aegypti-pupper i ett til ett kjønnsforhold i hvert oppdrettsbur og bind hylsen lukket, og la koppene stå i bur for eklosjon i omtrent fire dager ved 28 til 30 grader Celsius større enn 50% relativ fuktighet i en 12:12 eller 14:10 lys: mørk syklus til ingen flere voksne dukker opp. 24 timer etter at du har plassert puppene i oppdrettsburene, legg en beholder med 10% sukroseløsning med en svampveke i hvert bur og suspender en 10 til 2 centimeter svamp gjennomvåt i honning fra en trådkrok for å gi henholdsvis hydrering og ernæring til de voksne myggene.48 til 72 timer etter at de fleste voksne har dukket opp i hver to til tre dager de neste tre til fire ukene etterpå, fyll den ene lammeskinnkondomet med 50 til 100 ml defibrinert storfeblod per bur, og varm kondomene til omtrent 37 grader Celsius i et varmtvannsbad. Etter å ha klappet kondomene forsiktig ned med håndkleet, legg de delvis tørkede kondomene i individuelle papirforede petriskåler inne i burene i 30 til 60 minutter. 48 til 72 timer etter hver blodfôring, legg en 1.900 milliliter oviposisjonskopp som inneholder 800 ml filtrert puppevann og utstyrt med et 8 til 10 til 30 centimeter ark frøspiringspapir montert flush langs koppens indre omkrets i hvert bur.For å bakre Aedes aegypti larver fra egg, bruk et oviposisjonspapir med 5.000 til 10.000 egg tilstede og kutt en tre til syv centimeter seksjon vinkelrett på oviposisjonslinjen. Legg stykket i en ny 460 milliliter beholder halvfylt med vann fra springen og en klype pulveriserte fiskematflak. Dekk til og rør beholderen kraftig i minst ett minutt før du heller hele innholdet i en larvepanne som inneholder tre liter vann fra springen og 50 ml brun slam.Merk pannen med startdato, belastningsinformasjon og fôringsplan. Når den omtrentlige terskelandelen larver i larvepannene er nådd, hell innholdet i hver panne gjennom en størrelse 20 til 40 sil og bruk en klemmeflaske vann fra springen for å vaske puppene og larvene ut av silen i et tre liters gradert plastbeger. For å skille hannpuppene fra larvene og hunnpuppene, del innholdet i hvert beger mellom flere 1,9 liters plastbeholdere og plasser en stiv grunne fire liters oppsamlingsbeholder under sluse ved foten av en puppeseparator.Fyll to tre liters graderte plastbeger omtrent tre fjerdedeler fulle av vann fra springen og hell vannet gjennom rommet mellom glassplatene på separatoren mens du justerer topp- og bunnknappene slik at vannet kontinuerlig kan strømme gjennom separatoren. Når stående vann har samlet seg jevnt i en ca. 1,25 centimeter høyde fra bunnen av platene, markerer du startposisjonene ved de nederste knottene på separatoren med tape, og begynner å helle beholderne med pupper og larver inn i separatoren mens du kontinuerlig roterer bunnknappene mot klokken en til to centimeter fra startposisjonene. Når de fleste eller alle larvene har vasket gjennom slusen i oppsamlingsbeholderen, pause vannstrømmen og bruk et nummer 30 sil for å rydde oppsamlingsbeholderen til larvene.Når alle larvene er fjernet, hell vannet og juster knottene igjen slik at hannpuppene kan skylles inn i oppsamlingsbeholderen. Hell deretter hannpuppene fra beholderen i en nummer 20 sil og bruk en en liter klemmeflaske vann fra springen for å vaske puppene fra silen i en separat 1,9 liters beholder. Når alle hannpuppene er samlet, hell vannet og juster knottene slik at hunnpuppene kan samles opp.Ved hjelp av sil nummer 20 for å overføre hunnpuppene til en ny 1,9 liters beholder som nettopp demonstrert. Hell deretter vannet og juster knottene igjen til alle de umodne myggene er skyllet ut av separatoren. Sil de oppsamlede hannpuppene med en sil og vask bæsjen i et liter gradert beger med så lite vann som mulig.Hell puppene forsiktig i petriskåler foret med fuktig filterpapir i ett lag. Fjern stående vann fra petriskålbunnen ved hjelp av en fersk tre milliliter beitepipette for å forhindre puppebevegelse under arbeid. Pakk petriskåler og stabler før du forsegler i en merket 3,8 liters gjenlukkbar pose for å passe inn i bestrålingskammeret.For å markere kvantifiserte partier av voksne bestrålte mannlige mygg, fjern eventuelle næringskilder fra oppdrettsburet og legg ett bur i et stort karbondioksidkammer i fem til syv minutter, og bank sidene av beholderen for å løsne mygg som klamrer seg til veggene. På slutten av eksponeringsperioden, overfør myggene til et aspiratorhetteglass og bedøve myggene igjen før du rister myggene i en hvit papirdekket arbeidsflate. Aspirer forsiktig alle hannene fra arbeidsflaten til et nytt hetteglass og gjenta eksponeringene og samlingen til alle voksne hanner er samlet inn fra alle oppdrettsburene.På et tidspunkt under kjønnssorteringsprosessen, generer et hetteglass som inneholder bare 25 voksne mannlige mygg. Når alle hannene er samlet, veier du hver eneste mygg i en tjæreveiebåt på en balanse, og hell raskt de veide myggene i en 240 milliliter kartongbeholder som inneholder 50 milligram et merkefargestoff. Vipp og roter beholderen en full rotasjon med klokken og mot klokken til alle myggene er lett belagt og hell myggene i en ny veiebåt, brett deretter veiebåten i to slik at myggene kan kanaliseres gjennom lagerhylsen inn i utløserbeholderen.Når omtrent to gram mannlige mygg er lagt til frigjøringsbeholderen, bundet stockinette-hylsen lukket og merk merkingsbåndet på rammen av frigjøringsbeholderen med fargestofffargen, beholdernummeret og totalvekten til myggene. I dette representative mannlige voksne Aedes aegypti myggoppdrett, bestråling og markedsføringseksperiment kunne to gram mannlige voksne mygg samles inn fra tre oppdrettsbur og sammen med to hetteglass med 25 hanner fra to bur for å tillate beregning av gjennomsnittsvekten per mygg. Totalt ble 25 kvinner kastet fra to av batchene.Tidlig og observasjonell fôring i løpet av uken med larveoppdrett er avgjørende for å generere velutviklede pupper for separasjon. Dette genererer et klart skille mellom menn og kvinner som fører til en lav forekomst av kvinner i merkingstrinnene. I tillegg til å bruke dem i operasjonelle SIT-programmer, kan disse sterile hannene også brukes mye i eksperimenter som undersøker parringskonkurranse, overlevelse og spredning av bestrålte sammenlignet med ville ikke-bestrålte hanner.Ved å endre teknikken til å inkludere kvinnelige mygg kan vi undersøke virkningen av utilsiktet frigjøring av bestrålte kvinner med hensyn til fecundity og vektorkompetanse.

Research

JoVE Journal

Biology

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

Microinjection of A. aegypti Embryos to Obtain Transgenic Mosquitoes

In this video, Nijole Jasinskiene demonstrates the methodology employed to generate transgenic Aedes aegypti mosquitoes, which are vectors for dengue ...

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes (A. aegypti) and Infection Phenotype Determination

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes A. aegypti and Infection Phenotype Determination

The purpose of this procedure is to infect the Aedes mosquito with dengue virus in a laboratory condition and examine the infection level and dynamic of ...

Dissection of Midgut and Salivary Glands from Ae. aegypti Mosquitoes

The mosquito midgut and salivary glands are key entry and exit points for pathogens such as Plasmodium parasites and Dengue viruses. This video protocol ...

Building a Better Mosquito: Identifying the Genes Enabling Malaria and Dengue Fever Resistance in A. gambiae and A. aegypti Mosquitoes

In this interview, George Dimopoulos focuses on the physiological mechanisms used by mosquitoes to combat Plasmodium falciparum and dengue virus ...

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi-mediert Gene knockdown og<em&gt; In Vivo</em&gt; Diurese Assay i voksen hunn<em&gt; Aedes aegypti</em&gt; Mygg

This video protocol demonstrates an effective technique to knockdown a particular gene in an insect and conduct a novel bioassay to measure excretion ...

An Experimental and Bioinformatics Protocol for RNA-seq Analyses of Photoperiodic Diapause in the Asian Tiger Mosquito, Aedes albopictus

An Experimental and Bioinformatics Protocol for RNA-seq Analyses of Photoperiodic Diapause in the Asian Tiger Mosquito, Aedes albopictus

En eksperimentell og bioinformatikk protokoll for RNA-seq Analyser av Photoperiodic Diapause i den asiatiske tiger Mosquito,<em&gt; Aedes albopictus</em

Photoperiodic diapause is an important adaptation that allows individuals to escape harsh seasonal environments via a series of physiological changes, ...

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

Fysiologiske Recordings og RNA sekvensering av Gustatory vedheng av Yellow-feber Mosquito<em&gt; Aedes aegypti</em

Electrophysiological recording of action potentials from sensory neurons of mosquitoes provides investigators a glimpse into the chemical perception of ...

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

Fett kroppen Organ kultur-systemet i Aedes Aegypti, en vektor av Zika Virus

The insect fat body plays a central role in insect metabolism and nutrient storage, mirroring functions of the liver and fat tissue in vertebrates. Insect ...

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Opprettholde Aedes aegypti mygg infisert med Wolbachia

Aedes aegypti mosquitoes experimentally infected with Wolbachia are being utilized in programs to control the spread of arboviruses such as dengue, ...

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Medium gjennomstrømming Screening analyser for vurdering av virkningene på Ca2 +-signalisering og Acrosome reaksjon i menneskelig sæden

Ca2+-signaling is essential to normal sperm cell function and male fertility. Similarly, the acrosome reaction is vital for the ability of a human sperm ...