Name: preparing irradiated and marked male aedes aegypti mosquitoes for release in an operational sterile insect technique program
Uploaded: 2021-03-12T14:00:00
Duration: 8 min 58 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program at JoVE.com

Мы благодарим drs. R.-D. Xue, C. Bibbs, W. Qualls и V. Aryaprema из anastasia Mosquito Control District, St. Augustine, Florida, за партнерство в разработке программы SIT и экспертное понимание эффективного оперативного высвобождения стерильных самцов Aedes aegypti. Это исследование было поддержано USDA-ARS и Департаментом сельского хозяйства и потребительских услуг Флориды (FDACS). Упоминание торговых наименований или коммерческих продуктов в этой публикации исключительно с целью предоставления конкретной информации и не подразумевает рекомендации или одобрения со стороны USDA или FDACS.

<ol>
	<li>Moyes, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contemporary+status+of+insecticide+resistance+in+the+major+Aedes+vectors+of+arboviruses+infecting+humans.">Contemporary status of insecticide resistance in the major Aedes vectors of arboviruses infecting humans.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 11 (7), 0005625 (2017).</li><li>Baldacchino, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+methods+against+invasive+Aedes+mosquitoes+in+Europe:+a+review.">Control methods against invasive Aedes mosquitoes in Europe: a review.</a> Pest Management Science. 71 (11), 1471-1485 (2015).</li><li>Burkett, D. A., Cope, S. E., Strickman, D. A., White, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Deployed+Warfighter+Protection+(DWFP)+Research+Program:+Developing+new+public+health+pesticides,+application+technologies,+and+repellent+systems.">The Deployed Warfighter Protection (DWFP) Research Program: Developing new public health pesticides, application technologies, and repellent systems.</a> Journal of Integrated Pest Management. 4 (2), 1-7 (2013).</li><li>Harwood, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlling+Aedes+aegypti+in+cryptic+environments+with+manually+carried+ultra-low+volume+and+mist+blower+pesticide+applications.">Controlling Aedes aegypti in cryptic environments with manually carried ultra-low volume and mist blower pesticide applications.</a> Journal of the American Mosquito Control Association. 32 (3), 217-223 (2016).</li><li>Morrison, A. C., Zielinski-Gutierrez, E., Scott, T. W., Rosenberg, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+challenges+and+proposing+solutions+for+control+of+the+virus+vector+Aedes+aegypti.">Defining challenges and proposing solutions for control of the virus vector Aedes aegypti.</a> PLoS Medicine. 5 (3), 68 (2008).</li><li>Klassen, W., Curtis, C. F., InDyck, V. A., Hendrichs, J., Robinson, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=History+of+the+sterile+insect+technique.">History of the sterile insect technique.</a> Sterile insect technique: principles and practice in area-wide integrated pest management. , 3-36 (2005).</li><li>Alphey, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sterile-insect+methods+for+control+of+mosquito-borne+diseases:+an+analysis.">Sterile-insect methods for control of mosquito-borne diseases: an analysis.</a> Vector Borne and Zoonotic Diseases. 10 (3), 295-311 (2010).</li><li>Dame, D. A., Curtis, C. F., Benedict, M. Q., Robinson, A. S., Knols, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Historical+applications+of+induced+sterilisation+in+field+populations+of+mosquitoes.">Historical applications of induced sterilisation in field populations of mosquitoes.</a> Malaria Journal. 8, (2009).</li><li>Bond, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+irradiation+dose+to+Aedes+aegypti+and+Ae.+albopictus+in+a+sterile+insect+technique+program.">Optimization of irradiation dose to Aedes aegypti and Ae. albopictus in a sterile insect technique program.</a> PloS One. 14 (2), 0212520 (2019).</li><li>Bourtzis, K., Lees, R. S., Hendrichs, J., Vreysen, M. J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=More+than+one+rabbit+out+of+the+hat:+Radiation,+transgenic+and+symbiont-based+approaches+for+sustainable+management+of+mosquito+and+tsetse+fly+populations.">More than one rabbit out of the hat: Radiation, transgenic and symbiont-based approaches for sustainable management of mosquito and tsetse fly populations.</a> Acta Tropica. 157, 115-130 (2016).</li><li>Carvalho, D. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+production+of+genetically+modified+Aedes+aegypti+for+field+releases+in+Brazil.">Mass production of genetically modified Aedes aegypti for field releases in Brazil.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. , e3579 (2014).</li><li>Carvalho, D. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aedes+aegypti+lines+for+combined+sterile+insect+technique+and+incompatible+insect+technique+applications:+the+importance+of+host+genomic+background.">Aedes aegypti lines for combined sterile insect technique and incompatible insect technique applications: the importance of host genomic background.</a> Entomologia experimentalis et applicata. 168 (6-7), 560-572 (2020).</li><li>Mamai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aedes+aegypti+larval+development+and+pupal+production+in+the+FAO/IAEA+mass-rearing+rack+and+factors+influencing+sex+sorting+efficiency.">Aedes aegypti larval development and pupal production in the FAO/IAEA mass-rearing rack and factors influencing sex sorting efficiency.</a> Parasite. 27, 43 (2020).</li><li>Zheng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incompatible+and+sterile+insect+techniques+combined+eliminate+mosquitoes.">Incompatible and sterile insect techniques combined eliminate mosquitoes.</a> Nature. 572 (7767), 56-61 (2019).</li><li>. Methods in Aedes Research Available from: <a target="_blank" href="https://www.beiresources.org/Portals/2/VectorResources/Methods%20in%20Aedes%20Research%202016.pdf">https://www.beiresources.org/Portals/2/VectorResources/Methods%20in%20Aedes%20Research%202016.pdf</a> (2016)</li><li>Focks, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+separator+for+the+developmental+stages,+sexes,+and+species+of+mosquitoes+(Diptera:+Culicidae).">An improved separator for the developmental stages, sexes, and species of mosquitoes (Diptera: Culicidae).</a> Journal of Medical Entomology. 17 (6), 567-568 (1980).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Manual of Dosimetry in Radiotherapy. Technical Reports Series No. 110. , (1970).</li><li>Aldridge, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gamma-irradiation+reduces+survivorship,+feeding+behavior,+and+oviposition+of+female+Aedes+aegypti.">Gamma-irradiation reduces survivorship, feeding behavior, and oviposition of female Aedes aegypti.</a> Journal of the American Mosquito Control Association. 36 (3), 152-160 (2020).</li><li>Cianci, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimating+mosquito+population+size+from+mark-release-recapture+data.">Estimating mosquito population size from mark-release-recapture data.</a> Journal of Medical Entomology. 50 (3), 533-542 (2013).</li><li>Knipling, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The basic principles of insect population suppression and management. , (1979).</li></ol>

Все авторы заявили об отсутствии конфликта интересов.

Инициирование программы управления с использованием SIT, использующей радиацию, требует установления локального штамма Aedes aegypti. Этот шаг имеет решающее значение и может позволить SIT действительно отличить себя от аналогичных технологий управления. Развивая проект из местного штамма комаров, самцы, вероятно, будут иметь поведение, которое позволяет им адаптироваться к изменениям окружающей среды и сигналам, а также находить и спариваться с дикими самками в окрестностях. Кроме того, высвобождение облученных местных самцов не может вызвать негативного общественного мнения по сравнению, скажем, с выпуском неместного штамма генетически модифицированных комаров, который может, например, ввести новые аллели в местную популяцию комаров.
Расходование значительных ресурсов на выращивание огромного количества комаров только для того, чтобы иметь возможность использовать около половины из них в целях борьбы, является ограничением программы Aedes aegypti SIT. Следует внести уточнения в протокол выращивания, чтобы конденсировать созревание личинок в более определенные временные рамки, когда куколки будут готовы. Это позволило бы собрать больше куколок в оптимальное время разделения. Тем не менее, дополнительные куколки для обработки увеличивают риск того, что больше самок пупатируются, когда куколки собраны, и, следовательно, увеличивают вероятность того, что самки окажутся в чашках Петри с самцами и, возможно, будут выпущены. Хотя продолжительность жизни, кровосодержащее поведение и поведение яйцекладки у облученных самок Aedes aegypti pupae уменьшаются у взрослых, не является хорошей стратегией случайно освобождать самок вместе с облученными самцами22. Поэтому приоритетной задачей должно оставаться сведение к минимуму числа самок, непреднамеренно разделенных, облученных, маркированных и выпущенных вместе с самцами.
Успех программы SIT в конечном итоге зависит от успешного соревнования партнеров со стороны выращенных в колониях, облученных самцов. Сохранение конкурентоспособности самцов зависит от исчерпывающего экспериментального отбора дозы и максимизации расчетного соотношения стерильных и диких самцов в популяции. Выбор дозы определяется несколькими ключевыми факторами, которые включают долголетие, фертильность, плодовитость и смертность куколок. Было замечено, что самцы комаров будут демонстрировать асимптотическую кривую фертильности, которая приближается к нулю по мере увеличения радиации (неопубликованные данные KJL, RLA, SCB). Одновременно продолжительность жизни и активность самцов комаров экспоненциально уменьшаются по мере увеличения дозы радиации (неопубликованные данные KJL, RLA, SCB). Поэтому вместо того, чтобы определять дозу, которая дает 99,9% бесплодия у мужчин, предпочтительно сосредоточиться на более низком проценте стерильности, поддерживая выживаемость. После определения диапазона доз, который не дифференцирует продолжительность жизни или смертность куколок облученных самцов от необлученных самцов, следует провести дополнительные оценки фертильности для определения дозы, которая делает самцов в подавляющем большинстве стерильными, но конкурентоспособными.
В то же время важно сравнить количество самцов комаров в популяции с количеством выпущенных облученных самцов. Это может быть достигнуто путем сбора самцов из различных мест в целевой зоне высвобождения и вокруг нее неоднократно из одного и того же места и до, во время и после начала программы SIT. Следует провести исследование по маркировке, высвобождению, повторному отлову для оценки соотношения диких самцов комаров и выпущенных комаров. Исследование маркировки, высвобождения, повторного отлова опирается на высвобождение известного количества помеченных комаров из определенной точки и их последующий отлов в точках, находящихся в непосредственной близости от первоначальной точки высвобождения. Сравнивая количество пойманных самцов и диких самцов на расстояниях от точки выпуска, можно оценить общую дикую популяцию самцов в этом районе, так что конкурентные соотношения стерильных самцов могут быть выпущены23. Максимизация соотношения стерильных и диких самцов может быть достигнута путем высвобождения большего количества стерильных самцов и / или путем сокращения дикой популяции классическими средствами контроля, такими как сокращение источника, незрелый контроль или лечение взрослыми.
Чтобы оценить эффективность стерильных мужских высвобождений, коллекции взрослых можно сравнить в хронологическом порядке с областью без вмешательства. Поскольку стерильные самцы высвобождаются, а число собранных самцов и самок в районе уменьшается по отношению к сопоставимой области, не подверженной вмешательству, то можно предположить, что это связано с тем, что выпущенные стерильные самцы успешно превосходят местных фертильных самцов. Этот эффект также может наблюдаться в чашках ловушки яйцекладки, развернутых как в местах вмешательства, так и в местах невмешательства. Яйца все еще могут быть произведены в месте вмешательства, но если вылупляется меньше, чем из участка без вмешательства, можно предположить, что они не оплодотворяются из-за самок, спаривающихся со стерильными самцами. Все больше и больше яйцекладки неоплодотворенных яиц могут в конечном итоге привести к снижению яйцекладки из-за незамещения самок в месте вмешательства 8,24.
Будущие направления технологии и программ SIT естественным образом расширяются на дополнительные важные с медицинской точки зрения виды комаров. Например, эта технология может быть легко адаптирована для контроля Aedes albopictus, учитывая очень похожую биономику Aedes aegypti и Aedes albopictus. Другие виды комаров-переносчиков болезней, представляющие интерес, включают Culex quinquefasciatus, Culex tarsalis и различные виды Anopheles . Повышение эффективности этой технологии зависит от увеличения способности самцов куколок, производимых в данный момент времени, что может быть достигнуто с помощью генетических манипуляций или искусственного отбора, и повышения конкурентоспособности самцов, что может быть достигнуто путем увеличения мужественности, фертильности или долголетия.
В конечном счете, программы SIT не являются серебряной пулей для борьбы с комарами. Вместо этого они являются инструментом в наборе других методов управления, таких как программы IVM, которые перекрестно компенсируют слабые места среди методов. Например, в то время как химический контроль обеспечивает быстрый и дешевый контроль, он также способствует развитию резистентности и нецелевой смертности; и в то время как SIT является видоспецифичным и вряд ли вызовет резистентность, самцы SIT должны быть произведены и выпущены на неограниченный срок для борьбы с иммигрирующими популяциями из-за пределов района борьбы с переносчиками.

Передача переносимых комарами патогенов людям ежегодно приводит к миллионам случаев заболевания и смерти во всем мире. В отсутствие эффективных, одобренных вакцин против болезней, переносимых комарами, таких как вирус Зика или лихорадка денге, одним из наиболее эффективных способов сокращения передачи является сокращение популяций комаров-переносчиков болезней. К сожалению, все большее число видов комаров, традиционно подвергающихся воздействию пестицидов, демонстрируют растущие уровни устойчивости к пестицидам1. Одновременно государственные учреждения агрессивно отменили регистрацию или запретили ранее одобренные пестициды, и разрабатывается мало новых, эффективных мер химического контроля 2,3. Это созвездие препятствий для борьбы с комарами побудило к изучению альтернативных нехимических методов сокращения популяций комаров.
Некоторые виды комаров создают проблемы для контроля над вопросами устойчивости и регистрации пестицидов. Aedes aegypti (L.) является известным комаром-переносчиком болезней, которого чрезвычайно трудно контролировать с помощью традиционной интегрированной борьбы с переносчиками из-за загадочной перидоместической среды обитания, используемой этим видом для незрелого развития и отдыха взрослыхособей 4,5. Проблемы, связанные с эксплуатацией загадочной среды обитания вокруг жилых домов, включают в себя сложность охвата этих мест методами распыления пестицидов, а также потенциальное отсутствие согласия общественности на повторный доступ к частной собственности для агентств по борьбе с переносчиками болезней общественного здравоохранения для проведения интенсивных мероприятий по наблюдению и контролю, имеющих решающее значение для эффективной комплексной борьбы с переносчиками (КБПБ) для этого вида.
К счастью, SIT, подход, доказавший свою успешность для устойчивого контроля над другими очень сложными видами насекомых6, применяется к проблеме Aedes aegypti в новаторской серии экспериментов и эксплуатационных испытаний, базирующихся в Сент-Августине, штат Флорида (неопубликованные данные KJL, RLA, SCB). SIT применяется к целому ряду видов насекомых, включая комаров, и был подробно рассмотрен 7,8. SIT использует массовое высвобождение выращенных в колониях самцов, стерилизованных, например, путем воздействия ионизирующего излучения или химических веществ, чтобы подавить выбор партнера естественными популяциями самок. Стерилизованные самцы, которые спариваются с дикими самками, делают яйца бесплодными из-за повреждений, нанесенных мужским гаметам, и если они присутствуют в достаточном количестве, теоретически могут разрушить естественную популяцию Aedes aegypti.
Программа SIT была инициирована, чтобы попытаться сократить популяции Aedes aegypti в городской местности в Атлантическом побережье Флориды, где этот вид недавно повторно колонизировался и расширяется и представляет риск для общественного здравоохранения для передачи вирусов, таких как Зика, денге или чикунгунья. Чтобы максимизировать потенциал совместимости с дикими самками, была создана новая колония с использованием пойманных в дикой природе Aedes aegypti из целевой популяции для производства самцов для программы9. Это было основано на гипотезе о том, что местные, выращенные в колониях самцы с большей вероятностью будут конкурировать с местными дикими самцами для спаривания с местными дикими самками. Чтобы SIT был эффективным, не только подавляющее количество стерильных самцов должно присутствовать в целевой области, но они также должны быть способны эффективно ухаживать и спариваться с местными дикими самками комаров.
Была проведена серия экспериментов для определения оптимального количества стерильных самцов для высвобождения (неопубликованные данные KJL, RLA, SCB), а также оптимальных доз радиации, которые сделали бы самцов бесплодными, не мешая выживанию, поведению или принятию дикими самками (неопубликованные данные KJL, RLA, SCB). Эти данные появятся в смежных публикациях из этой группы, но некоторые из этих результатов также отражены в этом протоколе и могут быть использованы в качестве отправной точки для новых программ управления SIT Aedes aegypti в других местах. Этот вид постоянно расширяет свой ареал, и программы SIT показывают большие перспективы быть экономически эффективными, долгосрочными решениями для контроля этой популяции. Целью этого протокола является производство стерилизованных, мужских, выращенных в колониях комаров Aedes aegypti для систематического выпуска на открытые площадки с целью нарушения естественных репродуктивных циклов местных популяций Aedes aegypti в рамках оперативной программы борьбы с переносчиками инфекции общественного здравоохранения.
В то время как аналогичные протоколы и рабочие процессы были опубликованы для производства трансгенных самцов Aedes aegypti, а производственные процессы для Aedes SIT или программ несовместимости на основе Wolbachia были опубликованы в других местах, этот протокол иллюстрирует, как существующие протоколы были адаптированы для производства Aedes aegypti, разделения и облучения куколок самцов, маркировки и упаковки взрослых самцов и отправки на место выпуска для этой программы9, 10,11,12,13,14,15,16,17,18. Компонент маркировки этого протокола может не требоваться в зрелой оперативной программе SIT; тем не менее, он был включен здесь, потому что это один из способов мониторинга эффективности и контроля качества всего процесса в первые годы создания программы SIT. Программы борьбы с комарами, как правило, управляются местными властями, поэтому они могут широко варьироваться во многих аспектах своей организации от размера и базы финансирования до настройки тактики контроля для максимизации местного успеха. Таким образом, протокол, описанный в настоящем документе, должен быть оценен на совместимость с имеющимися ресурсами.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1-1/8&#34; wrench (1&#34; (1 inch) = 2.54 cm)</td>
			<td>Craftsman</td>
			<td>CMMT44707</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/2 pint cardstock cup (1/2 pint = 236.5 mL)</td>
			<td>Science Supplies WLE corp</td>
			<td>1/2 pint</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/4&#34; tubing - tygon</td>
			<td>Hudson Extrusions</td>
			<td>LLDPE1/8 X 1/4 BLK</td>
			<td>to attach to CO2 gas regulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/8&#34; brass barb w/ MIP connection</td>
			<td>B&#38;K</td>
			<td>BHB-85NLB</td>
			<td>to attach to CO2 gas regulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 mL graduated plastic beakers with handle</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>1223-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3000 mL graduated plastic beakers with handle</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>1223-3000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adult large cage</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>1450D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aspirator vials</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>2809V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine liver powder</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>290039601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brewers yeast</td>
			<td>MP Biomericals</td>
			<td>02903312-CF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 regulator</td>
			<td>Randor</td>
			<td>64003038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 tank (20# canister)</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>CDBEVCARB20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collection basin</td>
			<td>Treasure Gurus</td>
			<td>KI-ENAMELBOWL</td>
			<td>for separator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton balls - large</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-456-883</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deli cups w/lids - 470 mL</td>
			<td>Pactiv DELItainer</td>
			<td>PCTYSD2516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deli cups w/lids - 1900 mL</td>
			<td>Berry Global</td>
			<td>T60764</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DoseReader 4</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>ND0.5 and ND1.0 QA Filter Set standards</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dosimetry film</td>
			<td colspan="2">Far West Technology, Inc.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>AP10045S0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flashlight aspirator</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>2809D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps - fine featherweight</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>4748 or 4750</td>
			<td>featherweight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GAFchromic</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>radiochromic film</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gammator M</td>
			<td>Radiation Machinery Corporation, Parsippany, NJ</td>
			<td></td>
			<td>Cesium-137 irradiator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hand held mechanical aspirator</td>
			<td>Clarke Mosquito</td>
			<td>13500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lambskin condoms</td>
			<td>Trojan</td>
			<td>Naturalamb</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large CO2 chamber</td>
			<td>Sterilite</td>
			<td colspan="2">Walmart #&#160;568789514</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Larval rearing pans</td>
			<td>Blue Ridge Thermoforming</td>
			<td>&#160;01-FG-400-3N-ABS</td>
			<td>Dimensions: 22.375 x 17.5 x 3 (inches)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnets - 20# pull</td>
			<td>Master magnetics</td>
			<td>MHHH20BX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Marking dye</td>
			<td>Dayglo</td>
			<td>ECO-11</td>
			<td>Aurora Pink</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Marking dye</td>
			<td>Dayglo</td>
			<td>ECO-17</td>
			<td>Saturn Yellow</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mesh</td>
			<td>Falk</td>
			<td></td>
			<td>T301</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasture pipettes</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>02-708-006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes - large</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>25384-090 CS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes - small (60 mm x 15 mm)</td>
			<td>Fisher Brand</td>
			<td>FB0875713A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pupa separator</td>
			<td>J.W. Hock</td>
			<td>1512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red rubber hose</td>
			<td>Welch</td>
			<td>331040-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Release containers</td>
			<td>Science Supplies WLE corp</td>
			<td>1 gallon</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber bands - cross #19</td>
			<td>Alliance</td>
			<td>ALL37196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber bands - latitude #64</td>
			<td>Skillcraft</td>
			<td>NSN0589974</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>Ohaus</td>
			<td>H-4737</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seed germination paper - Heavy stock 76#</td>
			<td>Anchor Paper</td>
			<td>#76</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shipping coolers- 16 x 13 x 12.5&#34;</td>
			<td>MrBoxonline.com</td>
			<td colspan="2">Husky Foam Cooler kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sieve #20</td>
			<td>Advantech</td>
			<td>20BS8F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sieve #30</td>
			<td>Advantech</td>
			<td>30BS8F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small cage - Bug Dorm</td>
			<td>MegaView</td>
			<td>Bug Dorm-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small CO2 chamber</td>
			<td>Mainstays</td>
			<td colspan="2">Walmart #&#160;562922221</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Souffle cup lid</td>
			<td>SOLO</td>
			<td>41165277456</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Souffle cups - 4 oz (1 oz = 29.6 mL)</td>
			<td>SOLO</td>
			<td>41165024104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sponge</td>
			<td>ocelo</td>
			<td>MMM7274FD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Squeeze bottle</td>
			<td>Dynalon</td>
			<td>3UUP6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscope</td>
			<td>Meiji Techno</td>
			<td>EMZ-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stockinette</td>
			<td>BSN Medical</td>
			<td>30-1006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Styrofoam</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>extruded polystyrene foam</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropical fish flake food</td>
			<td>Tetra</td>
			<td>4.52 pound</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vaccum chamber - desiccator</td>
			<td>BelArt</td>
			<td>T9FB892757</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weigh boats</td>
			<td>Globe Scientific</td>
			<td>3621</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparing irradiated and marked male aedes aegypti mosquitoes for release in an operational sterile insect technique program

Борьба с такими заболеваниями человека, как лихорадка денге, Зика и чикунгунья, зависит от борьбы с их переносчиком, комаром Aedes aegypti , поскольку профилактики нет. Борьба с комарами-переносчиками может основываться на химических веществах, применяемых на незрелой и взрослой стадиях, что может способствовать смертности нецелевых и, что более важно, приводить к устойчивости переносчика к инсектицидам. Метод стерильных насекомых (SIT) - это метод контроля популяций вредителей путем выпуска стерилизованных взрослых самцов, которые спариваются с дикими самками для получения нежизнеспособного потомства. В этой статье описывается процесс производства стерильных самцов для использования в оперативной программе SIT по борьбе с комарами Aedes aegypti . Здесь изложены шаги, используемые в программе, включая выращивание и поддержание колонии, разделение самцов и самок куколок, облучение и маркировку взрослых самцов и доставку самцов Aedes aegypti к месту выпуска. Также обсуждаются процедурные оговорки, программные ограничения и будущие цели.

Бдительное и адекватное выращивание комаров состоит из хорошо сбалансированной доступности самцов и самок в колониальных клетках, поддержания свежего раствора сахарозы и меда, а также последовательного высококачественного кормления кровью. Эти условия обеспечат плотную упаковку яичных листов, оптимальных для использования в личиночных сковородках SIT. Правильное хранение и использование высушенных листов яиц, такое как систематическая маркировка для облегчения использования от самого старого до самого нового, будет поддерживать равномерное вылупление на всех сковородах. Заполнение всех поддонов для выращивания личинок водой перед вылуплением может уменьшить время, в течение которого яичные листы находятся в контейнерах для вылупления, и способствовать здоровому развитию. Поддержание личиночных сковородок от вылупления до окукливания требует тщательного участия персонала колонии, поскольку некоторым сковородкам может потребоваться больше или меньше пищи или дополнительной воды в зависимости от стадий развития и переменных окружающей среды. Если есть проблемы со стадией развития к запланированному дню разделения пола куколки, корректировки должны быть сделаны раньше в процессе, такие как вылупление раньше или позже, корректировка пищи или изменение температуры инкубатора.
Процесс выращивания в этом протоколе не приводит к тому, что все яйца вылупляются вовремя, чтобы развиться в куколок, которые могут быть облучены и использованы в целях контроля. От 20 до 50% комаров, выращенных в колониях, все еще будут личинками к тому времени, когда куколки должны быть разделены. Тем не менее, эти личинки не растрачиваются, но им дают созреть в течение 24 часов, чтобы получить дополнительные куколки, которые могут быть объединены с самками куколок из предыдущего дня разделения и переработаны обратно в клетки колонии. В клетках колонии куколкам будет позволено созревать во взрослых особей, спариваться, кормиться кровью и производить яйца, которые поддерживают проект SIT.
Отделение куколок, вливание куколок в чашки Петри, облучение и помещение во взрослые клетки после облучения должны происходить в один день; следовательно, должно быть выделено достаточное время для комфортной обработки всех этапов. Сборка и подготовка контейнеров для высвобождения должны производиться до процесса маркировки. Когда отгрузочные коробки возвращаются с места выпуска, контейнеры для выпуска должны быть проверены и подготовлены к их следующему использованию. Выброс влажных ватных шариков, проветривание контейнеров с влажным высвобождением, очистка посуды Петри, замена сетки и удаление резинок из контейнера, пока они не используются, значительно продлят срок службы контейнеров для выпуска.
Учитывая всемирную реальность вирусной пандемии COVID-19, этот протокол, который обычно представляет собой операцию с участием нескольких человек, был изменен, чтобы быть управляемым одним человеком, работающим в одиночку в лаборатории для каждого шага. Этапы процесса, которым больше всего мешает сценарий с одним человеком, - это этапы сексинга, маркировки, взвешивания и содержания колоний. Разделения куколок по полу одним человеком должно быть достаточно, если в разных помещениях одновременно работает несколько сепараторов. В условиях пандемии, когда социальное дистанцирование происходит на рабочем месте, требуется оснащение нескольких станций для выполнения шагов от сексинга до упаковки. В зависимости от скорости оператора, одному человеку требуется ~ 4 часа, чтобы полакомить 15 000 комаров, а затем еще 1-2 часа, чтобы маркировать, взвешивать и упаковывать их. Сценарий для двух человек уменьшает время, в течение которого комары подвергаются анестезии для маркировки, и сокращает общее рабочее время. Тем не менее, даже в сценарии с двумя людьми выделение полных 2,0 г комаров на клетку для выпуска может быть сложной задачей из-за ограниченного рабочего времени, пока комары успокаиваются. Хотя процесс очистки и подготовки личиночных и взрослых материалов для выращивания чрезвычайно трудоемкий и трудоемкий, его можно разделить таким образом, чтобы отдельные операторы могли работать независимо и безопасно во время пандемии.
Высвобождение взрослых, маркированных, облученных самцов Aedes aegypti выходит за рамки этого протокола, но представлено здесь вкратце. Процесс высвобождения маркированных, облученных самцов комаров начинается с определения равномерного распределения высвобождения контейнеров для высвобождения на основе веса (и, следовательно, предполагаемого числа стерильных самцов), как указано в таблице 3. После того, как грузы доставляются в район борьбы с переносчиками, ящики вскрываются, а контейнеры для высвобождения оцениваются на предмет любых проблем, связанных со смертностью или состоянием контейнеров для высвобождения. Затем комарам в контейнерах для выпуска разрешается акклиматизироваться к температуре и влажности окружающей среды в течение 1-2 ч перед транспортировкой в зону обработки. Места высвобождения в зоне обработки определяются после интенсивного наблюдения за горячими точками диких популяций Aedes aegypti. Сроки, частота и плотность выбросов уравновешиваются биономикой вида, а также метеорологией, общественной поддержкой и возможностями лабораторного выращивания.
Поскольку конкретные контейнеры для высвобождения сопоставляются с конкретными местами высвобождения, этикетка должна быть перекрестно проверена перед открытием контейнера для высвобождения путем разрезания сетки сверху, что позволяет оператору деформировать сетку таким образом, чтобы часть самцов могла вырваться. Этот метод дробного высвобождения повторяется в каждой назначенной точке выпуска контейнера до тех пор, пока не будут выпущены все свободно летающие самцы. Затем этот процесс повторяется для каждого контейнера для высвобождения в соответствующем назначенном им месте высвобождения до тех пор, пока все контейнеры не будут обработаны. По желанию, после того, как комары были выпущены, любые мертвые или инвалидные комары, которые не ушли свободно, могут быть собраны в чашки Петри и помечены для подсчета вручную или взвешены для корректировки предполагаемого количества выпущенных. Для оценки эффективности операции SIT проводится постоянное и повсеместное наблюдение за взрослыми, яйцами и незрелыми стадиями диких Aedes aegypti в целевом районе и, возможно, в контрольных участках без вмешательства.

Watch this Scientific Journal Video about Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program at JoVE.com

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

Метод стерильных насекомых (SIT) используется для контроля конкретных, важных с медицинской точки зрения популяций комаров, которые могут быть устойчивы к химическому контролю. Здесь мы описываем метод массового выращивания и подготовки стерильных самцов комаров к выпуску в рамках оперативной программы SIT, нацеленной на комаров Aedes aegypti .

Подготовка облученных и маркированных самцов комаров Aedes aegypti к высвобождению в рамках оперативной программы по стерильным методам насекомых

The control of such human diseases as dengue, Zika, and chikungunya relies on the control of their vector, the Aedes aegypti mosquito, because there is no ...

Уникальная ценность этого протокола заключается в том, что два сотрудника, использующие легкодоступное оборудование в небольших лабораторных помещениях, могут производить достаточно стерильных вредоносных комаров для поддержки оперативной программы SIT площадью 50 акров. Эффективность и низкая стоимость этого метода делает его доступным, трудноразрешимым даже для небольших районов борьбы с комарами для расширения их комплексной программы борьбы с переносчиками. Демонстрировать процедуру будут я и Барбара Байер, лаборант биологических наук из исследовательского подразделения.Чтобы вырастить взрослых Aedes aegypti из куколок, подготовьте 60 на 60 на 60 сантиметров складные алюминиевые клетки для выращивания с отверстиями размером 0,84 на 0,84 миллиметра из стекловолокна и гильзой на одной вертикальной стенке каждой клетки. Поместите пластиковый стаканчик размером 1 900 миллилитров с куколками Aedes aegypti в соотношении пол один к одному в каждую клетку для выращивания и завяжите рукав закрытым, оставляя чашки в клетках для эклозии в течение примерно четырех дней при температуре от 28 до 30 градусов Цельсия, превышающей относительную влажность более 50% в цикле 12: 12 или 14: 10 свет: темнота, пока больше не появятся взрослые. Через 24 часа после помещения куколок в клетки для выращивания поместите в каждую клетку контейнер с 10%-ным раствором сахарозы с губчатым фитилем и подвешивайте губку размером 10 на 2 сантиметра, смоченную в меде, с проволочного крючка, чтобы обеспечить гидратацию и питание соответственно взрослым комарам.Через 48-72 часа после того, как большинство взрослых появились каждые два-три дня в течение следующих трех-четырех недель после этого, наполните один презерватив из овечьей кожи от 50 до 100 миллилитров дефибринированной бычьей крови на клетку и согрейте презервативы примерно до 37 градусов по Цельсию в ванне с горячей водой. После тщательного поглаживания презервативов полотенцем поместите частично высушенные презервативы в отдельные бумажные выложенные чашки Петри внутри клеток на 30-60 минут. Через 48-72 часа после каждого кормления кровью поместите чашку яйцекладки объемом 1 900 миллилитров, содержащую 800 миллилитров фильтрованной воды для куколок и снабженную листом бумаги для прорастания семян размером от 8 до 10 на 30 сантиметров, вставленным в заподлицо по внутренней окружности чашки в каждую клетку.Чтобы вырастить личинок Aedes aegypti из яиц, используйте яйцекладущую бумагу с присутствием от 5 000 до 10 000 яиц и вырежьте трех-семи сантиметровый участок, перпендикулярный линии яйцекладки. Поместите кусок в новый контейнер объемом 460 миллилитров, наполовину заполненный водопроводной водой и щепоткой измельченных хлопьев рыбной пищи. Накройте и перемешайте контейнер энергично в течение по крайней мере одной минуты, прежде чем вылить все содержимое в личиночный поддон для выращивания, содержащий три литра водопроводной воды и 50 миллилитров коричневой суспензии.Отметьте кастрюлю датой начала, информацией о штамме и графиком кормления. Как только приблизительная пороговая доля личинок в личиночных сковородах будет достигнута, перелейте содержимое каждой кастрюли через сито размером от 20 до 40 и используйте бутылку с водопроводной водой, чтобы вымыть куколок и личинок из сита в трехлитровой градуированный пластиковый стакан. Чтобы отделить самцов куколок от личинок и самок куколок, разделите содержимое каждого стакана между несколькими пластиковыми контейнерами объемом 1,9 литра и поместите жесткий неглубокий четырехлитровый контейнер для сбора под шлюзом у основания сепаратора куколок.Заполните два трехлитровых градуированных пластиковых стакана примерно на три четверти, заполненных водопроводной водой, и налейте воду через пространство между стеклянными пластинами сепаратора, регулируя верхнюю и нижнюю ручки, чтобы вода непрерывно текла через сепаратор. После того, как стоячая вода собралась равномерно на высоте примерно 1,25 сантиметра от основания пластин, отметьте начальные положения на нижних ручках сепаратора лентой и начните выливать контейнеры с куколками и личинками в сепаратор, непрерывно вращая нижние ручки против часовой стрелки на один-два сантиметра от исходных положений. Когда большинство или все личинки промылись через шлюз в контейнер для сбора, приостановите поток воды и используйте сито номер 30, чтобы очистить контейнер для сбора личинок.Когда все личинки будут удалены, налейте воду и снова отрегулируйте ручки, чтобы позволить самцам куколок быть смытыми в контейнер для сбора. Затем перелейте самцов куколок из контейнера в сито No 20 и используйте литровую бутылку с водопроводной водой, чтобы промыть куколок из сита в отдельный контейнер объемом 1,9 литра. Когда все мужские куколки будут собраны, налейте воду и отрегулируйте ручки, чтобы позволить собрать самок куколок.Использование сита no 20 для переноса самок куколок в новый контейнер объемом 1,9 литра, как только что было продемонстрировано. Затем налейте воду и снова отрегулируйте ручки, пока все незрелые комары не будут смыты из сепаратора. Процедите собранные самцы куколок с помощью сита и вымойте какашки в литровый градуированный стакан с как можно меньшим количеством воды.Аккуратно вылейте куколок в чашки Петри, выстланные влажной фильтровальной бумагой в один слой. Удалите стоячую воду со дна чашки Петри, используя свежую трехмиллилитровую пастбищную пипетку, чтобы предотвратить движение куколки во время работы. Раскладывайте чашки и штабели Петри перед запечатыванием в маркированный 3,8-литровый запечатываемый пакет, чтобы поместиться в камере облучения.Чтобы отметить количественные партии взрослых облученных самцов комаров, удалите все источники питания из клетки для выращивания и поместите одну клетку в большую камеру углекислого газа на пять-семь минут, выбивая боковые стороны контейнера, чтобы выбить любых комаров, цепляющихся за стенки. В конце периода воздействия перенесите комаров во флакон аспиратора и снова обезболите комаров, прежде чем встряхнуть комаров на рабочей поверхности, покрытой белой бумагой. Осторожно аспирируйте всех самцов с рабочей поверхности в новый флакон и повторяйте экспозиции и сбор до тех пор, пока все взрослые самцы не будут собраны из всех клеток выращивания.В какой-то момент во время процесса сортировки пола сгенерируйте флакон, содержащий только 25 взрослых самцов комаров. Когда все самцы будут собраны, взвесьте каждого мерзкого комара в смоляной весовой лодке на весах и быстро вылейте взвешенных комаров в 240-миллилитровый картонный контейнер, содержащий 50 миллиграммов маркировочного красителя. Наклоните и поверните контейнер на один полный оборот по часовой стрелке и против часовой стрелки, пока все комары не будут слегка покрыты, и перелейте комаров в новую весовую лодку, затем сложите весовую лодку пополам, чтобы позволить комарам быть направленными через рукав чулки в контейнер для выпуска.Когда примерно два грамма самцов комаров были добавлены в контейнер для выпуска, завяжите рукав с завязкой и пометьте маркировку лентой на лицевой панели контейнера для выпуска цветом красителя, номером контейнера и общим весом комаров. В этом репрезентативном эксперименте по выращиванию, облучению и маркетингу комаров Aedes aegypti удалось собрать два грамма самцов взрослых комаров из трех клеток для выращивания и вместе с двумя флаконами из 25 самцов из двух клеток, чтобы можно было рассчитать средний вес на комара. Всего из двух партий было выброшено 25 самок.Своевременное и наблюдательное кормление в течение недели выращивания личинок имеет решающее значение для получения хорошо развитых куколок для отделения. Это порождает четкое различие между самцами и самками, что приводит к низкому уровню встречаемости самок на этапах маркировки. Помимо использования их в оперативных программах SIT, эти стерильные самцы также могут широко использоваться в экспериментах, изучающих брачную конкуренцию, выживание и рассеивание облученных по сравнению с дикими необлученными самцами.Модификация метода для включения самок комаров позволяет нам исследовать влияние непреднамеренного высвобождения облученных самок в отношении плодовитости и компетентности переносчиков.

Research

JoVE Journal

Biology

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

Microinjection of A. aegypti Embryos to Obtain Transgenic Mosquitoes

Микроинъекция А. Эмбрионы aegypti получить Трансгенные комары

In this video, Nijole Jasinskiene demonstrates the methodology employed to generate transgenic Aedes aegypti mosquitoes, which are vectors for dengue ...

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes (A. aegypti) and Infection Phenotype Determination

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes A. aegypti and Infection Phenotype Determination

Протокол денге инфекций в Комары (A. aegypti) и определение инфекции Фенотип

The purpose of this procedure is to infect the Aedes mosquito with dengue virus in a laboratory condition and examine the infection level and dynamic of ...

Dissection of Midgut and Salivary Glands from Ae. aegypti Mosquitoes

Препарирование Средняя кишка и слюнных желез от Ae. aegypti комаров

The mosquito midgut and salivary glands are key entry and exit points for pathogens such as Plasmodium parasites and Dengue viruses. This video protocol ...

Building a Better Mosquito: Identifying the Genes Enabling Malaria and Dengue Fever Resistance in A. gambiae and A. aegypti Mosquitoes

Строительство Лучше Mosquito: Идентификация генов Включение малярия и лихорадка денге Сопротивления в gambiae А. и А. aegypti комаров

In this interview, George Dimopoulos focuses on the physiological mechanisms used by mosquitoes to combat Plasmodium falciparum and dengue virus ...

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi-опосредованной Нокдаун гена и<em&gt; В Vivo</em&gt; Анализ Диурез в взрослых женщин<em&gt; Aedes aegypti</em&gt; Комары

This video protocol demonstrates an effective technique to knockdown a particular gene in an insect and conduct a novel bioassay to measure excretion ...

An Experimental and Bioinformatics Protocol for RNA-seq Analyses of Photoperiodic Diapause in the Asian Tiger Mosquito, Aedes albopictus

An Experimental and Bioinformatics Protocol for RNA-seq Analyses of Photoperiodic Diapause in the Asian Tiger Mosquito, Aedes albopictus

Экспериментальные и биоинформатика Протокол Секвенирование РНК Анализы ФОТОПЕРИОДИЧЕСКИХ диапаузы в Азиатско тигровый комар,<em&gt; Кусака бело-пёстрый</em

Photoperiodic diapause is an important adaptation that allows individuals to escape harsh seasonal environments via a series of physiological changes, ...

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

Физиологические Записи и РНК Секвенирование Вкусовые придатков Желто-лихорадки комаров<em&gt; Комар желтолихорадочный</em

Electrophysiological recording of action potentials from sensory neurons of mosquitoes provides investigators a glimpse into the chemical perception of ...

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

Жир тела орган культуры системы в Aedes Aegypti, вектор вируса Зика

The insect fat body plays a central role in insect metabolism and nutrient storage, mirroring functions of the liver and fat tissue in vertebrates. Insect ...

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Поддержание инфицированных комаров Aedes aegypti с Wolbachia

Aedes aegypti mosquitoes experimentally infected with Wolbachia are being utilized in programs to control the spread of arboviruses such as dengue, ...

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Средне-пропускная способность, отбор проб для оценки воздействия на Ca2 +-сигнализации и Акросома реакции в человеческой спермы

Ca2+-signaling is essential to normal sperm cell function and male fertility. Similarly, the acrosome reaction is vital for the ability of a human sperm ...