Name: preparing irradiated and marked male aedes aegypti mosquitoes for release in an operational sterile insect technique program
Uploaded: 2021-03-12T14:00:00
Duration: 8 min 58 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program at JoVE.com

Vi tackar Drs. R.-D. Xue, C. Bibbs, W. Qualls och V. Aryaprema från Anastasia Mosquito Control District, St. Augustine, Florida, för partnerskap i utvecklingen av SIT-programmet och expertinsikt om effektiv operativ frisättning av sterila manliga Aedes aegypti. Denna forskning stöddes av USDA-ARS och Florida Department of Agriculture and Consumer Services (FDACS). Omnämnande av handelsnamn eller kommersiella produkter i denna publikation är endast i syfte att tillhandahålla specifik information och innebär inte rekommendation eller godkännande av USDA eller FDACS.

<ol>
	<li>Moyes, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contemporary+status+of+insecticide+resistance+in+the+major+Aedes+vectors+of+arboviruses+infecting+humans.">Contemporary status of insecticide resistance in the major Aedes vectors of arboviruses infecting humans.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 11 (7), 0005625 (2017).</li><li>Baldacchino, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+methods+against+invasive+Aedes+mosquitoes+in+Europe:+a+review.">Control methods against invasive Aedes mosquitoes in Europe: a review.</a> Pest Management Science. 71 (11), 1471-1485 (2015).</li><li>Burkett, D. A., Cope, S. E., Strickman, D. A., White, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Deployed+Warfighter+Protection+(DWFP)+Research+Program:+Developing+new+public+health+pesticides,+application+technologies,+and+repellent+systems.">The Deployed Warfighter Protection (DWFP) Research Program: Developing new public health pesticides, application technologies, and repellent systems.</a> Journal of Integrated Pest Management. 4 (2), 1-7 (2013).</li><li>Harwood, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlling+Aedes+aegypti+in+cryptic+environments+with+manually+carried+ultra-low+volume+and+mist+blower+pesticide+applications.">Controlling Aedes aegypti in cryptic environments with manually carried ultra-low volume and mist blower pesticide applications.</a> Journal of the American Mosquito Control Association. 32 (3), 217-223 (2016).</li><li>Morrison, A. C., Zielinski-Gutierrez, E., Scott, T. W., Rosenberg, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+challenges+and+proposing+solutions+for+control+of+the+virus+vector+Aedes+aegypti.">Defining challenges and proposing solutions for control of the virus vector Aedes aegypti.</a> PLoS Medicine. 5 (3), 68 (2008).</li><li>Klassen, W., Curtis, C. F., InDyck, V. A., Hendrichs, J., Robinson, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=History+of+the+sterile+insect+technique.">History of the sterile insect technique.</a> Sterile insect technique: principles and practice in area-wide integrated pest management. , 3-36 (2005).</li><li>Alphey, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sterile-insect+methods+for+control+of+mosquito-borne+diseases:+an+analysis.">Sterile-insect methods for control of mosquito-borne diseases: an analysis.</a> Vector Borne and Zoonotic Diseases. 10 (3), 295-311 (2010).</li><li>Dame, D. A., Curtis, C. F., Benedict, M. Q., Robinson, A. S., Knols, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Historical+applications+of+induced+sterilisation+in+field+populations+of+mosquitoes.">Historical applications of induced sterilisation in field populations of mosquitoes.</a> Malaria Journal. 8, (2009).</li><li>Bond, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+irradiation+dose+to+Aedes+aegypti+and+Ae.+albopictus+in+a+sterile+insect+technique+program.">Optimization of irradiation dose to Aedes aegypti and Ae. albopictus in a sterile insect technique program.</a> PloS One. 14 (2), 0212520 (2019).</li><li>Bourtzis, K., Lees, R. S., Hendrichs, J., Vreysen, M. J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=More+than+one+rabbit+out+of+the+hat:+Radiation,+transgenic+and+symbiont-based+approaches+for+sustainable+management+of+mosquito+and+tsetse+fly+populations.">More than one rabbit out of the hat: Radiation, transgenic and symbiont-based approaches for sustainable management of mosquito and tsetse fly populations.</a> Acta Tropica. 157, 115-130 (2016).</li><li>Carvalho, D. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+production+of+genetically+modified+Aedes+aegypti+for+field+releases+in+Brazil.">Mass production of genetically modified Aedes aegypti for field releases in Brazil.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. , e3579 (2014).</li><li>Carvalho, D. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aedes+aegypti+lines+for+combined+sterile+insect+technique+and+incompatible+insect+technique+applications:+the+importance+of+host+genomic+background.">Aedes aegypti lines for combined sterile insect technique and incompatible insect technique applications: the importance of host genomic background.</a> Entomologia experimentalis et applicata. 168 (6-7), 560-572 (2020).</li><li>Mamai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aedes+aegypti+larval+development+and+pupal+production+in+the+FAO/IAEA+mass-rearing+rack+and+factors+influencing+sex+sorting+efficiency.">Aedes aegypti larval development and pupal production in the FAO/IAEA mass-rearing rack and factors influencing sex sorting efficiency.</a> Parasite. 27, 43 (2020).</li><li>Zheng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incompatible+and+sterile+insect+techniques+combined+eliminate+mosquitoes.">Incompatible and sterile insect techniques combined eliminate mosquitoes.</a> Nature. 572 (7767), 56-61 (2019).</li><li>. Methods in Aedes Research Available from: <a target="_blank" href="https://www.beiresources.org/Portals/2/VectorResources/Methods%20in%20Aedes%20Research%202016.pdf">https://www.beiresources.org/Portals/2/VectorResources/Methods%20in%20Aedes%20Research%202016.pdf</a> (2016)</li><li>Focks, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+separator+for+the+developmental+stages,+sexes,+and+species+of+mosquitoes+(Diptera:+Culicidae).">An improved separator for the developmental stages, sexes, and species of mosquitoes (Diptera: Culicidae).</a> Journal of Medical Entomology. 17 (6), 567-568 (1980).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Manual of Dosimetry in Radiotherapy. Technical Reports Series No. 110. , (1970).</li><li>Aldridge, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gamma-irradiation+reduces+survivorship,+feeding+behavior,+and+oviposition+of+female+Aedes+aegypti.">Gamma-irradiation reduces survivorship, feeding behavior, and oviposition of female Aedes aegypti.</a> Journal of the American Mosquito Control Association. 36 (3), 152-160 (2020).</li><li>Cianci, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimating+mosquito+population+size+from+mark-release-recapture+data.">Estimating mosquito population size from mark-release-recapture data.</a> Journal of Medical Entomology. 50 (3), 533-542 (2013).</li><li>Knipling, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The basic principles of insect population suppression and management. , (1979).</li></ol>

Samtliga författare har inte deklarerat några intressekonflikter.

Initiering av ett kontrollprogram med SIT som använder strålning kräver etablering av en lokal stam av Aedes aegypti. Detta steg är kritiskt och kan göra det möjligt för SIT att verkligen skilja sig från liknande styrtekniker. Genom att utveckla projektet från en lokal myggstam kommer de män som genereras sannolikt att ha beteenden som gör att de kan anpassa sig till miljöförändringar och ledtrådar och att lokalisera och para sig med vilda honor i närheten. Dessutom kan det hända att utsättningen av bestrålade lokala hanar inte genererar en negativ allmän opinion jämfört med till exempel utsläpp av en icke-lokal stam av genetiskt modifierade myggor som till exempel kan införa nya alleler i den lokala myggpopulationen.
Att spendera betydande resurser för att föda upp stora mängder myggor bara för att kunna använda ungefär hälften av dem för kontrolländamål är en begränsning av Aedes aegypti SIT-programmet. Förfining bör göras i uppfödningsprotokollet för att kondensera mognaden av larver till mer definierade tidsramar när pupporna kommer att vara klara. Detta skulle göra det möjligt att samla in fler puppor vid den optimala separationstidpunkten. Ytterligare puppor att bearbeta ökar dock risken för att fler honor förpuppas när pupporna samlas in och ökar därför sannolikheten för att honor hamnar i petriskålar med hanar och eventuellt släpps. Även om livslängden, blodmatningsbeteendet och ovipositionsbeteendet hos bestrålade kvinnliga Aedes aegypti-puppor reduceras hos vuxna, är det inte en bra strategi att släppa kvinnor för övrigt tillsammans med bestrålade män22. Därför bör det förbli en prioritet att minimera antalet honor som oavsiktligt separeras, bestrålas, markeras och släpps ut med män.
Framgången för ett SIT-program är i slutändan beroende av framgångsrik kompiskonkurrens av koloniuppfödda, bestrålade hanar. Att bevara manlig konkurrenskraft bygger på uttömmande experimentellt härledd val av dos och maximering av det uppskattade förhållandet mellan sterila:vilda hanar i populationen. Dosval bestäms av flera nyckelfaktorer som inkluderar livslängd, fertilitet, fecundity och pupal mortalitet. Det har observerats att manliga myggor kommer att uppvisa en asymptotisk fertilitetskurva som närmar sig noll när strålningen ökar (KJL, RLA, SCB opublicerade data). Samtidigt minskar manlig mygglivslängd och aktivitetsnivåer exponentiellt när strålningsdosen ökar (KJL, RLA, SCB opublicerade data). Därför, snarare än att identifiera en dos som ger 99.9% sterilitet hos män, är det att föredra att fokusera på en lägre sterilitetsprocent samtidigt som man stöder överlevnad. När ett dosintervall har identifierats som inte skiljer livslängden eller valpdödligheten hos bestrålade män från den hos icke-bestrålade män, bör ytterligare bedömningar av fertiliteten utföras för att identifiera en dos som gör män överväldigande sterila men ändå konkurrenskraftiga.
Samtidigt är det viktigt att jämföra antalet manliga myggor i befolkningen med antalet frisläppta bestrålade män. Detta kan åstadkommas genom att samla in hanar från olika platser i och runt målutsättningsområdet upprepade gånger från samma plats och före, under och efter initiering av SIT-programmet. En studie av märke, frisättning, återfångst bör genomföras för att bedöma förhållandet mellan vilda manliga myggor och frisläppta myggor. En studie av mark, release, recapture förlitar sig på frisättningen av ett känt antal markerade myggor från en specifik punkt och deras senare återerövring vid punkter i närheten av den ursprungliga frisättningspunkten. Genom att jämföra antalet återfångade hanar och vilda hanar på avstånd från utsättningspunkten är det möjligt att uppskatta den allmänna vilda populationen av hanar i området så att konkurrenskraftiga förhållanden för sterila hanar kan släppas23. Maximering av förhållandet mellan sterila:vilda hanar kan uppnås genom att släppa ut mer sterila hanar och/eller genom att minska den vilda populationen med klassiska kontrollmedel som källreduktion, omogen kontroll eller adulticidbehandlingar.
För att mäta effektiviteten hos sterila manliga utgåvor kan vuxna samlingar jämföras kronologiskt mot ett icke-interventionsområde. När sterila hanar frigörs och antalet insamlade hanar och honor i ett område minskar i förhållande till ett jämförbart icke-interventionsområde, kan det antas att det beror på att de frisläppta sterila hanarna framgångsrikt konkurrerar ut lokala fertila hanar. Denna effekt kan också observeras i ovipositionsfällor som används på både interventions- och icke-interventionsställena. Ägg kan fortfarande produceras på interventionsplatsen, men om färre kläcks än de från icke-interventionsplatsen kan det antas att de inte befruktas på grund av att honor parar sig med sterila hanar. Mer och mer oviposition av obefruktade ägg kan så småningom leda till minskad oviposition på grund av att honor inte ersätts på interventionsstället 8,24.
Framtida riktningar för SIT-teknik och program expanderar naturligt till ytterligare medicinskt viktiga myggarter. Till exempel kan denna teknik lätt anpassas för att kontrollera Aedes albopictus, med tanke på den mycket liknande bionomiken hos Aedes aegypti och Aedes albopictus. Andra sjukdomsvektormyggarter av intresse inkluderar Culex quinquefasciatus, Culex tarsalis och olika Anopheles-arter. Att förbättra effektiviteten av denna teknik beror på att öka kapaciteten hos manliga puppor som produceras vid en viss tidpunkt, vilket kan uppnås genom genetisk manipulation eller artificiellt urval, och förbättra manlig konkurrenskraft, vilket kan uppnås genom att öka viriliteten, fertiliteten eller livslängden.
I slutändan är SIT-program inte en silverkula för att kontrollera myggor. De är istället ett verktyg i en svit av andra kontrolltekniker, till exempel IVM-program, som korskompenserar för svagheter bland tekniker. Kemisk kontroll erbjuder till exempel snabb och billig kontroll, men den främjar också utvecklingen av resistens och dödlighet som inte är målarter. och medan SIT är artspecifikt och sannolikt inte kommer att generera resistens, måste SIT-hanar produceras och släppas ut för all framtid för att kontrollera invandrande populationer utanför vektorkontrolldistriktet.

Överföring av myggburna patogener till människor orsakar miljontals fall av sjukdomar och dödsfall varje år över hela världen. I avsaknad av effektiva, godkända vacciner för myggburna sjukdomar, såsom zika eller denguefeber, är ett av de mest effektiva sätten att minska överföringen att minska sjukdomsvektormyggpopulationerna. Irriterande nog uppvisar ett ökande antal myggarter, som traditionellt är måltavlor för bekämpningsmedel, ökande nivåer av bekämpningsmedelsresistens1. Samtidigt har myndigheter aggressivt avregistrerat eller förbjudit tidigare godkända bekämpningsmedel, och få nya, effektiva kemiska kontrollåtgärder utvecklas 2,3. Denna konstellation av hinder för myggbekämpning har motiverat utforskningen av alternativa icke-kemiska tekniker för att minska myggpopulationerna.
Vissa myggarter innebär utmaningar när det gäller att kontrollera resistens och registrering av bekämpningsmedel. Aedes aegypti (L.) är en framträdande sjukdomsvektormygga som är extremt svår att kontrollera genom traditionell integrerad vektorhantering på grund av den kryptiska peridomestica livsmiljön som utnyttjas av denna art för omogen utveckling och vuxen vila 4,5. Utmaningar relaterade till utnyttjandet av den kryptiska livsmiljön runt bostäder inkluderar svårigheten att nå dessa platser med bekämpningsmedelsspraytekniker samt den potentiella bristen på acceptans från allmänheten för upprepad tillgång till privat egendom för folkhälsovektorkontrollbyråer för att genomföra de intensiva övervaknings- och kontrollaktiviteter som är avgörande för effektiv integrerad vektorhantering (IVM) för denna art.
Lyckligtvis tillämpas SIT, ett tillvägagångssätt som visat sig framgångsrikt för varaktig kontroll av andra mycket utmanande insektsarter6, på Aedes aegypti-problemet i en banbrytande serie experiment och operativa försök baserade i St. Augustine, Florida (KJL, RLA, SCB opublicerade data). SIT har applicerats på en rad insektsarter, inklusive myggor, och har granskats på djupet 7,8. SIT utnyttjar massfrisättningen av koloniuppfödda män som steriliseras, till exempel genom exponering för joniserande strålning eller kemikalier för att överväldiga kompisvalet av naturliga populationer av honor. Steriliserade hanar som parar sig med vilda honor gör äggen infertila på grund av skador som manliga könsceller lidit, och om de finns i tillräckligt antal kan de teoretiskt krascha den naturliga Aedes aegypti-populationen.
Ett SIT-program initierades för att försöka minska populationerna av Aedes aegypti i ett stadsområde i Atlantkusten Florida där denna art nyligen återkoloniserades och expanderar och utgör en folkhälsorisk för överföring av virus som Zika, dengue eller chikungunya. För att maximera potentialen för kompatibilitet med vilda honor etablerades en ny koloni med vildfångad Aedes aegypti från målpopulationen för att producera hanar för programmet9. Detta baserades på hypotesen att lokalt härledda, koloniuppfödda hanar skulle vara mer benägna att vara konkurrenskraftiga med lokala vilda hanar för parning med lokala vilda honor. För att SIT ska vara effektivt måste inte bara ett överväldigande antal sterila hanar vara närvarande i målområdet, utan de måste också kunna uppvakta och para sig effektivt med lokala vilda kvinnliga myggor.
En serie experiment genomfördes för att bestämma det optimala antalet sterila män att släppa (KJL, RLA, SCB opublicerade data) samt optimala doser av strålning som skulle göra hanarna infertila utan att störa överlevnad, beteende eller acceptans av vilda honor (KJL, RLA, SCB opublicerade data). Dessa data kommer i allierade publikationer från denna grupp, men några av dessa fynd fångas också i detta protokoll och kan användas som utgångspunkt för nya SIT Aedes aegypti-kontrollprogram någon annanstans. Denna art utökar ständigt sitt utbredningsområde, och SIT-program visar stort löfte om att vara kostnadseffektiva, långsiktiga lösningar för att kontrollera denna population. Målet med detta protokoll är att producera steriliserade, manliga, koloniuppfödda Aedes aegypti-myggor för systematisk utsättning i utomhusområden för att störa de naturliga reproduktionscyklerna hos lokala Aedes aegypti-populationer i ett operativt folkhälsovektorkontrollprogram.
Medan liknande protokoll och arbetsflöden har publicerats för produktion av transgena Aedes aegypti-män och produktionsarbetsflöden för Aedes SIT, eller Wolbachia-baserade inkompatibilitetsprogram har publicerats någon annanstans, illustrerar detta protokoll hur befintliga protokoll har anpassats för Aedes aegypti-produktion, separation och bestrålning av manliga puppor, märkning och förpackning av vuxna män och leverans till släppplatsen för detta program9, 10,11,12,13,14,15,16,17,18. Märkningskomponenten i detta protokoll kanske inte krävs i ett moget operativt SIT-program; Det har dock inkluderats här eftersom det är ett sätt att övervaka effektiviteten och kontrollera kvaliteten på hela processen under de första åren av upprättandet av SIT-programmet. Myggkontrollprogram drivs vanligtvis av lokala myndigheter, så de kan variera mycket i många aspekter av deras organisation från storlek och finansieringsbas till inställning av kontrolltaktik för att maximera lokal framgång. Således bör protokollet som beskrivs häri utvärderas för kompatibilitet med tillgängliga resurser.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1-1/8&#34; wrench (1&#34; (1 inch) = 2.54 cm)</td>
			<td>Craftsman</td>
			<td>CMMT44707</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/2 pint cardstock cup (1/2 pint = 236.5 mL)</td>
			<td>Science Supplies WLE corp</td>
			<td>1/2 pint</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/4&#34; tubing - tygon</td>
			<td>Hudson Extrusions</td>
			<td>LLDPE1/8 X 1/4 BLK</td>
			<td>to attach to CO2 gas regulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/8&#34; brass barb w/ MIP connection</td>
			<td>B&#38;K</td>
			<td>BHB-85NLB</td>
			<td>to attach to CO2 gas regulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 mL graduated plastic beakers with handle</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>1223-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3000 mL graduated plastic beakers with handle</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>1223-3000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adult large cage</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>1450D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aspirator vials</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>2809V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine liver powder</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>290039601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brewers yeast</td>
			<td>MP Biomericals</td>
			<td>02903312-CF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 regulator</td>
			<td>Randor</td>
			<td>64003038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 tank (20# canister)</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>CDBEVCARB20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collection basin</td>
			<td>Treasure Gurus</td>
			<td>KI-ENAMELBOWL</td>
			<td>for separator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton balls - large</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-456-883</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deli cups w/lids - 470 mL</td>
			<td>Pactiv DELItainer</td>
			<td>PCTYSD2516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deli cups w/lids - 1900 mL</td>
			<td>Berry Global</td>
			<td>T60764</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DoseReader 4</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>ND0.5 and ND1.0 QA Filter Set standards</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dosimetry film</td>
			<td colspan="2">Far West Technology, Inc.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>AP10045S0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flashlight aspirator</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>2809D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps - fine featherweight</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>4748 or 4750</td>
			<td>featherweight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GAFchromic</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>radiochromic film</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gammator M</td>
			<td>Radiation Machinery Corporation, Parsippany, NJ</td>
			<td></td>
			<td>Cesium-137 irradiator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hand held mechanical aspirator</td>
			<td>Clarke Mosquito</td>
			<td>13500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lambskin condoms</td>
			<td>Trojan</td>
			<td>Naturalamb</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large CO2 chamber</td>
			<td>Sterilite</td>
			<td colspan="2">Walmart #&#160;568789514</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Larval rearing pans</td>
			<td>Blue Ridge Thermoforming</td>
			<td>&#160;01-FG-400-3N-ABS</td>
			<td>Dimensions: 22.375 x 17.5 x 3 (inches)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnets - 20# pull</td>
			<td>Master magnetics</td>
			<td>MHHH20BX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Marking dye</td>
			<td>Dayglo</td>
			<td>ECO-11</td>
			<td>Aurora Pink</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Marking dye</td>
			<td>Dayglo</td>
			<td>ECO-17</td>
			<td>Saturn Yellow</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mesh</td>
			<td>Falk</td>
			<td></td>
			<td>T301</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasture pipettes</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>02-708-006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes - large</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>25384-090 CS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes - small (60 mm x 15 mm)</td>
			<td>Fisher Brand</td>
			<td>FB0875713A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pupa separator</td>
			<td>J.W. Hock</td>
			<td>1512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red rubber hose</td>
			<td>Welch</td>
			<td>331040-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Release containers</td>
			<td>Science Supplies WLE corp</td>
			<td>1 gallon</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber bands - cross #19</td>
			<td>Alliance</td>
			<td>ALL37196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber bands - latitude #64</td>
			<td>Skillcraft</td>
			<td>NSN0589974</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>Ohaus</td>
			<td>H-4737</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seed germination paper - Heavy stock 76#</td>
			<td>Anchor Paper</td>
			<td>#76</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shipping coolers- 16 x 13 x 12.5&#34;</td>
			<td>MrBoxonline.com</td>
			<td colspan="2">Husky Foam Cooler kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sieve #20</td>
			<td>Advantech</td>
			<td>20BS8F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sieve #30</td>
			<td>Advantech</td>
			<td>30BS8F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small cage - Bug Dorm</td>
			<td>MegaView</td>
			<td>Bug Dorm-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small CO2 chamber</td>
			<td>Mainstays</td>
			<td colspan="2">Walmart #&#160;562922221</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Souffle cup lid</td>
			<td>SOLO</td>
			<td>41165277456</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Souffle cups - 4 oz (1 oz = 29.6 mL)</td>
			<td>SOLO</td>
			<td>41165024104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sponge</td>
			<td>ocelo</td>
			<td>MMM7274FD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Squeeze bottle</td>
			<td>Dynalon</td>
			<td>3UUP6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscope</td>
			<td>Meiji Techno</td>
			<td>EMZ-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stockinette</td>
			<td>BSN Medical</td>
			<td>30-1006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Styrofoam</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>extruded polystyrene foam</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropical fish flake food</td>
			<td>Tetra</td>
			<td>4.52 pound</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vaccum chamber - desiccator</td>
			<td>BelArt</td>
			<td>T9FB892757</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weigh boats</td>
			<td>Globe Scientific</td>
			<td>3621</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparing irradiated and marked male aedes aegypti mosquitoes for release in an operational sterile insect technique program

Kontrollen av sådana mänskliga sjukdomar som dengue, Zika och chikungunya är beroende av kontrollen av deras vektor, Aedes aegypti-myggan , eftersom det inte finns något förebyggande. Kontroll av myggvektorer kan förlita sig på kemikalier som appliceras på de omogna och vuxna stadierna, vilket kan bidra till dödligheten hos icke-mål och ännu viktigare, leda till insekticidresistens i vektorn. Den sterila insektstekniken (SIT) är en metod för att kontrollera populationer av skadedjur genom frisättning av steriliserade vuxna män som parar sig med vilda honor för att producera icke-livskraftiga avkommor. Detta dokument beskriver processen att producera sterila män för användning i ett operativt SIT-program för kontroll av Aedes aegypti-myggor . Här beskrivs stegen som används i programmet, inklusive uppfödning och underhåll av en koloni, separera manliga och kvinnliga puppor, bestråla och markera vuxna män och skicka Aedes aegypti-män till utsättningsplatsen. Dessutom diskuteras procedurmässiga varningar, programbegränsningar och framtida mål.

Vaksam och adekvat mygguppfödning består av välbalanserad tillgång på män och kvinnor i koloniburar, underhåll av färsk sackaroslösning och honung och konsekvent högkvalitativ blodmatning. Dessa förhållanden kommer att ge tätt packade äggplåtar som är optimala för användning i SIT-larvuppfödningspannor. Korrekt lagring och användning av torkade äggark, såsom systematisk märkning för att underlätta användning från äldsta till nyaste, kommer att stödja enhetlig kläckning över alla kokkärl. Att fylla alla larvuppfödningspannor med vatten före kläckning kan minska tiden för äggbladen i kläckbehållare och främja en sund utveckling. Underhåll av larvpannor från lucka till förpupp kräver noggrant engagemang av kolonipersonal eftersom vissa kokkärl kan behöva mer eller mindre mat eller ytterligare vatten beroende på utvecklingsstadier och miljövariabler. Om det finns problem med utvecklingsstadiet vid den schemalagda dagen för pupal könsseparation, bör justeringar göras tidigare i processen, såsom kläckning tidigare eller senare, justering av mat eller ändring av inkubatortemperaturen.
Uppfödningsprocessen i detta protokoll gör inte att alla ägg kläcks i tid för att utvecklas till puppor som kan bestrålas och användas för kontrolländamål. Mellan 20 och 50% av de koloniuppfödda myggorna kommer fortfarande att vara larver när pupporna behöver separeras. Dessa larver slösas dock inte bort utan får mogna i 24 timmar för att göra ytterligare puppor som kan kombineras med kvinnliga puppor från föregående dags separation och återvinnas tillbaka till koloniburar. I koloniburarna kommer puppor att få mogna till vuxna, para sig, blodmata och producera ägg som upprätthåller SIT-projektet.
Att separera puppor, hälla puppor i petriskålar, bestrålning och placering i vuxna burar efter bestrålning måste ske på en dag; Därför bör tillräcklig tid avsättas för att behandla alla steg bekvämt. Montering och beredning av frigöringsbehållare bör göras före märkningsprocessen. När fraktlådor returneras från frisläppningsplatsen bör frigöringsbehållare inspekteras och förberedas för nästa användning. Kassering av våta bomullsbollar, luftning av våta frigöringsbehållare, rengöring av petriskålar, byte av nät och avlägsnande av elastiska band från behållaren, även om de inte används, kommer att förlänga livslängden på frigöringsbehållarna kraftigt.
Med tanke på den globala verkligheten i COVID-19-viruspandemin har detta protokoll som vanligtvis är en operation med flera personer modifierats för att kunna hanteras av en person som arbetar ensam i ett laboratorium för varje steg. De steg i processen som hindras mest av ett enpersonsscenario är könsbestämning, märkning, vägning och koloniuppfödning underhållssteg. Att separera puppor efter kön av en person bör vara tillräckligt om det finns flera separatorer som arbetar samtidigt i olika rum. I en pandemisk situation där social distansering sker på arbetsplatsen krävs utrustning av flera stationer för att slutföra steg från sexing till packning. Beroende på operatörens hastighet tar det en person ~ 4 h att köna 15 000 myggor och sedan ytterligare 1-2 timmar för att markera, väga och paketera dem. Ett scenario med två personer minskar den tid under vilken myggor bedövas för märkning och minskar den totala arbetstiden. Men även i ett scenario med två personer kan det vara utmanande att fördela hela 2,0 g myggor per utsättningsbur på grund av begränsad arbetstid medan myggorna är nedsövda. Även om processen med rengöring och beredning av larv- och vuxenuppfödningsmaterial är extremt tidskrävande och arbetskrävande, kan den delas upp så att enskilda operatörer kan arbeta självständigt och säkert under en pandemi.
Att släppa ut vuxna, märkta, bestrålade Aedes aegypti-hanar ligger utanför ramen för detta protokoll men presenteras här i korthet. Processen att frigöra markerade, bestrålade, manliga myggor börjar med att bestämma en enhetlig frisättningsfördelning av frisättningsbehållarna baserat på vikter (och därmed härledda antal sterila hanar), som rapporterats i tabell 3. Efter att leveranserna har levererats till vektorkontrolldistriktet öppnas lådorna och frigöringsbehållarna utvärderas för eventuella problem med dödlighet eller tillstånd hos frisättningsbehållarna. Myggor i utlösningsbehållarna får sedan acklimatisera sig till omgivningstemperatur och luftfuktighet i 1-2 timmar före transport till behandlingsområdet. Utsättningsplatser i behandlingsområdet identifieras efter intensiv övervakning av heta platser i vilda populationer av Aedes aegypti. Tidpunkten, frekvensen och tätheten av utsläpp balanseras av artens bionomik samt meteorologi, offentligt stöd och laboratorieuppfödningsförmåga.
Eftersom specifika frigöringsbehållare matchas med särskilda frisläppningsplatser måste etiketten dubbelkontrolleras innan frigöringsbehållaren öppnas genom att nätet på ovansidan skärs av, så att operatören kan deformera maskorna så att en del av hanarna kan komma ut. Denna metod med fraktionerad frisättning upprepas vid varje tilldelad frigöringspunkt för behållaren tills alla fritt flygande hanar har släppts. Den här processen upprepas sedan för varje frigöringsbehållare på respektive tilldelade frigöringsplats tills alla behållare har bearbetats. Alternativt, efter att myggorna har släppts, kan alla döda eller funktionshindrade myggor som inte lämnade fritt samlas in i petriskålar och märkas för att räknas för hand eller vägas för att korrigera det uppskattade antalet som släpptes. Pågående och genomgripande övervakning av vuxna, ägg och omogna stadier av vilda Aedes aegypti i målområdet, och eventuellt på icke-interventionskontrollplatser, utförs för att bedöma effektiviteten av SIT-operationen.

Watch this Scientific Journal Video about Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program at JoVE.com

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

Den sterila insektstekniken (SIT) används för att kontrollera specifika, medicinskt viktiga myggpopulationer som kan vara resistenta mot kemiska kontroller. Här beskriver vi en metod för massuppfödning och beredning av sterila hanmyggor för frisättning i ett operativt SIT-program riktat mot Aedes aegypti-myggan .

Förbereda bestrålade och märkta manliga Aedes aegypti-myggor för frisättning i ett operativt sterilt insektsteknikprogram

The control of such human diseases as dengue, Zika, and chikungunya relies on the control of their vector, the Aedes aegypti mosquito, because there is no ...

Det unika värdet av detta protokoll är att två personal som använder lättillgänglig utrustning i små laboratorieutrymmen kan producera tillräckligt med sterila malmyggor för att stödja ett 50 hektar stort operativt SIT-program. Effektiviteten och den låga kostnaden för denna teknik gör den tillgänglig, svårhanterlig för även små myggkontrolldistrikt att utöka sitt integrerade vektorkontrollprogram. Demonstrerar proceduren kommer att vara jag och Barbara Bayer, biologiska vetenskapslaboratorietekniker från forskningsenheten.För att föda upp vuxna Aedes aegypti från puppor, förbered 60 x 60 x 60 centimeter hopfällbara aluminiumuppfödningsburar med 0,84 x 0,84 millimeter hålstorlek glasfibernätskärm och en reach-in stockinettehylsa på en vertikal vägg i varje bur. Placera en 1 900 ml plastkopp med Aedes aegypti puppar i ett till ett könsförhållande i varje uppfödningsbur och knyt hylsan stängd och lämna kopparna i burar för eclosion i cirka fyra dagar vid 28 till 30 grader Celsius större än 50% relativ luftfuktighet i en 12:12 eller 14:10 ljus: mörk cykel tills inga fler vuxna dyker upp. 24 timmar efter att ha placerat popparna i uppfödningsburarna, placera en behållare med 10% sackaroslösning med en svampveke i varje bur och häng upp en 10 x 2 centimeter svamp indränkt i honung från en trådkrok för att ge hydrering respektive näring till de vuxna myggorna.48 till 72 timmar efter att de flesta vuxna har dykt upp varannan till var tredje dag under de kommande tre till fyra veckorna därefter, fyll den ena lammskinnskondomen med 50 till 100 ml defibrinerat nötkreaturblod per bur och värm kondomerna till cirka 37 grader Celsius i ett varmt vattenbad. Efter att ha klappat försiktigt ner kondomerna med handduken, placera de delvis torkade kondomerna i enskilda pappersfodrade petriskålar inuti burarna i 30 till 60 minuter. 48 till 72 timmar efter varje blodmatning, placera en 1 900 ml ovipositionskopp innehållande 800 ml filtrerat valpvatten och försedd med ett 8 till 10 x 30 centimeter ark frögroningspapper monterat jämnt längs koppens inre omkrets i varje bur.För att höja Aedes aegypti larverna från ägg, använd ett ovipositionspapper med 5 000 till 10 000 ägg närvarande och skär en tre till sju centimeter sektion vinkelrätt mot ovipositionslinjen. Lägg biten i en ny 460 ml behållare halvfylld med kranvatten och en nypa pulveriserade fiskmatflingor. Täck över och rör om behållaren kraftigt i minst en minut innan du häller hela innehållet i en larvuppfödningspanna som innehåller tre liter kranvatten och 50 ml brun uppslamning.Markera pannan med startdatum, belastningsinformation och matningsschema. När den ungefärliga tröskelandelen larver i larvpannorna har uppnåtts, häll innehållet i varje kastrull genom en sil i storlek 20 till 40 och använd en pressflaska kranvatten för att tvätta pupporna och larverna ur sikten till en treliters graderad plastbägare. För att skilja hanpupporna från larverna och honpupporna, dela innehållet i varje bägare mellan flera 1,9 liters plastbehållare och placera en styv grund fyra liters uppsamlingsbehållare under slussen vid basen av en valpseparator.Fyll två tre liters graderade plastbägare cirka tre fjärdedelar fulla med kranvatten och häll vattnet genom utrymmet mellan separatorns glasplattor medan du justerar de övre och nedre vreden så att vattnet kontinuerligt kan strömma genom separatorn. När stående vatten har samlats jämnt på en cirka 1,25 centimeter höjd från plattans botten, markera startpositionerna vid separatorns nedre knoppar med tejp och börja hälla behållarna med puppar och larver i separatorn medan du kontinuerligt roterar bottenvreden moturs moturs en till två centimeter från startpositionerna. När de flesta eller alla larver har tvättats genom slussen i uppsamlingsbehållaren, pausa vattenflödet och använd en sikt nummer 30 för att rensa larvernas uppsamlingsbehållare.När alla larver har tagits bort, häll vattnet och justera vreden igen så att hanpupporna kan spolas i uppsamlingsbehållaren. Häll sedan hanpupporna från behållaren i en sikt nummer 20 och använd en liter pressflaska kranvatten för att tvätta popparna från sikten i en separat 1,9 liters behållare. När alla hanpuppor har samlats in, häll vattnet och justera vreden så att honpupporna kan samlas upp.Använda sikten nummer 20 för att överföra honpupporna till en ny 1,9 liters behållare som just visats. Häll sedan vattnet och justera vreden igen tills alla omogna myggor har spolats ut ur separatorn. Sila de uppsamlade manliga popparna med en sil och tvätta bajset i en liter graderad bägare med så lite vatten som möjligt.Häll försiktigt popparna i petriskålar fodrade med fuktigt filterpapper i ett enda lager. Ta bort stående vatten från petriskålens botten med en ny tre milliliter betespipett för att förhindra pupalrörelse under arbetet. Bunta petriskålar och staplar innan de förseglas i en märkt 3,8 liters återförslutningsbar påse för att passa in i bestrålningskammaren.För att markera kvantifierade partier av vuxna bestrålade hanmyggor, ta bort eventuella näringskällor från uppfödningsburen och placera en bur i en stor koldioxidkammare i fem till sju minuter och knacka på behållarens sidor för att lossa eventuella myggor som klamrar sig fast vid väggarna. I slutet av exponeringsperioden, överför myggorna till en aspiratorflaska och bedöva myggorna igen innan du skakar myggorna i en vit papperstäckt arbetsyta. Sug försiktigt alla hanar från arbetsytan till en ny injektionsflaska och upprepa exponeringarna och insamlingen tills alla vuxna hanar har samlats in från alla uppfödningsburar.Vid någon tidpunkt under könssorteringsprocessen, generera en injektionsflaska som innehåller endast 25 vuxna manliga myggor. När alla hanar har samlats in, väg varje elak mygg i en tjärad vägbåt på en balans och häll snabbt de vägda myggorna i en 240 ml kartongbehållare som innehåller 50 milligram ett märkningsfärgämne. Luta och rotera behållaren en full rotation medurs och moturs tills alla myggor har belagts lätt och häll myggorna i en ny vägbåt, vik sedan vägbåten på mitten så att myggorna kan kanaliseras genom stockinettehylsan in i frigöringsbehållaren.När cirka två gram manliga myggor har lagts till i frigöringsbehållaren, bundet stockinettehylsan stängd och markera märkningstejpen på ramen på frigöringsbehållaren med färgfärg, behållarnummer och myggans totala vikt. I detta representativa manliga vuxna Aedes aegypti mygguppfödning, bestrålning och marknadsföringsexperiment kunde två gram manliga vuxna myggor samlas in från tre uppfödningsburar och tillsammans med två flaskor med 25 män från två burar för att möjliggöra beräkning av den genomsnittliga vikten per mygga. Totalt kastades 25 honor från två av partierna.Tidig och observationsmatning under veckan med larvuppfödning är avgörande för att generera välutvecklade puppor för separation. Detta genererar en tydlig skillnad mellan män och kvinnor vilket leder till en låg förekomst av honor i markeringsstegen. Förutom att använda dem i operativa SIT-program kan dessa sterila män också användas i stor utsträckning i experiment som undersöker parningskonkurrens, överlevnad och spridning av bestrålade jämfört med vilda icke-bestrålade män.Genom att modifiera tekniken för att inkludera kvinnliga myggor kan vi undersöka effekterna av oavsiktlig frisättning av bestrålade honor med avseende på fecundity och vektorkompetens.

Research

JoVE Journal

Biology

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

Microinjection of A. aegypti Embryos to Obtain Transgenic Mosquitoes

Mikroinjektion av A. aegypti Embryon Skaffa Transgena myggor

In this video, Nijole Jasinskiene demonstrates the methodology employed to generate transgenic Aedes aegypti mosquitoes, which are vectors for dengue ...

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes (A. aegypti) and Infection Phenotype Determination

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes A. aegypti and Infection Phenotype Determination

Protokoll för Dengue Infektioner i Myggor (A. aegypti) och infektion Fenotyp Fastställande

The purpose of this procedure is to infect the Aedes mosquito with dengue virus in a laboratory condition and examine the infection level and dynamic of ...

Dissection of Midgut and Salivary Glands from Ae. aegypti Mosquitoes

Dissekering av midgut och spottkörtlar från AE. aegypti Myggor

The mosquito midgut and salivary glands are key entry and exit points for pathogens such as Plasmodium parasites and Dengue viruses. This video protocol ...

Building a Better Mosquito: Identifying the Genes Enabling Malaria and Dengue Fever Resistance in A. gambiae and A. aegypti Mosquitoes

Bygga en bättre Mosquito: Identifiera gener Aktivera malaria och denguefeber Motståndet i A. gambiae och A. aegypti myggor

In this interview, George Dimopoulos focuses on the physiological mechanisms used by mosquitoes to combat Plasmodium falciparum and dengue virus ...

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi-mediated gene Knockdown och<em&gt; In Vivo</em&gt; Diures Analys hos vuxna kvinnliga<em&gt; Aedes aegypti</em&gt; Myggor

This video protocol demonstrates an effective technique to knockdown a particular gene in an insect and conduct a novel bioassay to measure excretion ...

An Experimental and Bioinformatics Protocol for RNA-seq Analyses of Photoperiodic Diapause in the Asian Tiger Mosquito, Aedes albopictus

An Experimental and Bioinformatics Protocol for RNA-seq Analyses of Photoperiodic Diapause in the Asian Tiger Mosquito, Aedes albopictus

En experimentell och bioinformatik Protokoll för RNA-seq Analyser av fotoperiodisk diapaus i den asiatiska tigern Mosquito,<em&gt; Asiatisk tigermygga</em

Photoperiodic diapause is an important adaptation that allows individuals to escape harsh seasonal environments via a series of physiological changes, ...

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

Fysiologiska Inspelningar och RNA sekvensering av de smak bihang till Gula-febern Mosquito<em&gt; Aedes aegypti</em

Electrophysiological recording of action potentials from sensory neurons of mosquitoes provides investigators a glimpse into the chemical perception of ...

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

Fett kroppen kultur organsystem i Aedes Aegypti, en vektor av zikaviruset

The insect fat body plays a central role in insect metabolism and nutrient storage, mirroring functions of the liver and fat tissue in vertebrates. Insect ...

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Att upprätthålla Aedes aegypti myggor infekterade med Wolbachia

Aedes aegypti mosquitoes experimentally infected with Wolbachia are being utilized in programs to control the spread of arboviruses such as dengue, ...

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Medium-throughput Screening analyser för bedömning av effekter på Ca2 +-signalering och akrosomen reaktion i mänskliga spermier

Ca2+-signaling is essential to normal sperm cell function and male fertility. Similarly, the acrosome reaction is vital for the ability of a human sperm ...