Name: an easy and flexible inoculation method for accurately assessing powdery mildew-infection phenotypes of arabidopsis and other plants
Uploaded: 2021-03-09T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Easy and Flexible Inoculation Method for Accurately Assessing Powdery Mildew-Infection Phenotypes of Arabidopsis and Other Plants at JoVE.com

Het werk werd ondersteund door de National Science Foundation (IOS-1901566) aan S. Xiao. De auteurs willen F. Coker en C. Hooks bedanken voor het onderhoud van de plantengroeifaciliteit en Jorge Zamora voor technische hulp bij de fabricage van de inentingsdoos en -kamer.

1. Het maken van een standaard inentingsdoos met een verwijderbaar bovendeksel gemonteerd met een gaas
<ol><li>Koop een rol van 50 μm nylon membraangaas of 48 μm roestvrijstalen gaas (aanbevolen) bij winkels. Zorg ervoor dat u voldoende bestelt om in meerdere stukken van 14 in x 26 te snijden voor vervanging van versleten gaas.</li>
	<li>Koop een 1/4 in x 2 ft x 4 ft vezelplaat met gemiddelde dichtheid of multiplex en snijd twee 24-1/2 in x 10 in stukken en twee 12 in x 10 in stukken voor het maken van een inentingsd...

<ol>
	<li>Huckelhoven, R., Panstruga, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+bi+ology+of+the+plant-powdery+mildew+interaction.">Cell bi ology of the plant-powdery mildew interaction.</a> Current Opinion in Plant Biology. 14 (6), 738-746 (2011).</li><li>Dean, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+top+10+fungal+pathogens+in+molecular+plant+pathology.">The top 10 fungal pathogens in molecular plant pathology.</a> Molecular Plant Pathology. 13 (4), 414-430 (2012).</li><li>Sakurai, H., Hirata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Some+observations+on+the+relation+between+the+penetration+hypha+and+haustorium+of+barley+powdery+mildew+and+host+cell.+V.+Influence+of+water+spray+on+the+pathogen+and+host+tissue.">Some observations on the relation between the penetration hypha and haustorium of barley powdery mildew and host cell. V. Influence of water spray on the pathogen and host tissue.</a> Annual Phytopathology Society of Japan. 24, 239-245 (1959).</li><li>Shomari, S. H., Kennedy, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+of+Oidium+anacardii+on+cashew+(Anacardium+occidentale)+in+southern+Tanzania.">Survival of Oidium anacardii on cashew (Anacardium occidentale) in southern Tanzania.</a> Plant Pathology. 48 (4), 505-513 (1999).</li><li>Sitterly, W. R., Spencer, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Powdery Mildews. , 369 (1978).</li><li>Reuveni, M., Agapov, V., Reuveni, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+systemic+resistance+to+powdery+mildew+and+growth+increase+in+cucumber+by+phosphates.">Induction of systemic resistance to powdery mildew and growth increase in cucumber by phosphates.</a> Biological Agriculture &amp; Horticulture. 9 (4), 305-315 (1993).</li><li>Reifschneider, F. J. B., Boiteux, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+vacuum-operated+settling+tower+for+inoculation+of+powdery+mildew+fungi.">A vacuum-operated settling tower for inoculation of powdery mildew fungi.</a> Phytopathology. 78 (11), 1463-1465 (1988).</li><li>Chowdhury, A., Bremer, G. B., Salt, D. W., Miller, P., Ford, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+of+delivering+Blumeria+graminis+f.+sp+hordei+spores+for+laboratory+experiments.">A novel method of delivering Blumeria graminis f. sp hordei spores for laboratory experiments.</a> Crop Protection. 22 (7), 917-922 (2003).</li><li>Xiao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Broad-spectrum+mildew+resistance+in+Arabidopsis+thaliana+mediated+by+RPW8.">Broad-spectrum mildew resistance in Arabidopsis thaliana mediated by RPW8.</a> Science. 291 (5501), 118-120 (2001).</li><li>Xiao, S., Ellwood, S., Findlay, K., Oliver, R. P., Turner, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+three+loci+controlling+resistance+of+Arabidopsis+thaliana+accession+Ms-0+to+two+powdery+mildew+diseases.">Characterization of three loci controlling resistance of Arabidopsis thaliana accession Ms-0 to two powdery mildew diseases.</a> The Plant Journal. 12 (4), 757-768 (1997).</li><li>Reuber, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+defense+gene+induction+defects+with+powdery+mildew+susceptibility+in+Arabidopsis+enhanced+disease+susceptibility+mutants.">Correlation of defense gene induction defects with powdery mildew susceptibility in Arabidopsis enhanced disease susceptibility mutants.</a> The Plant Journal. 16 (4), 473-485 (1998).</li><li>Xiao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+atypical+resistance+gene,+RPW8,+recruits+components+of+basal+defence+for+powdery+mildew+resistance+in+Arabidopsis.">The atypical resistance gene, RPW8, recruits components of basal defence for powdery mildew resistance in Arabidopsis.</a> The Plant Journal. 42 (1), 95-110 (2005).</li></ol>

Onze meshed-box-gebaseerde inentingsmethode heeft verschillende voordelen ten opzichte van andere inentingsmethoden. Ten eerste kan het een gelijkmatige verdeling van sporen bereiken als het op de juiste manier wordt gebruikt, zoals aangetoond in figuur 5. Ten tweede kan het gebruik van ~ 50 μm mesh, plus sporenontwrichting door zacht schudden van geïnfecteerde bladeren, planteninfectie door trips of andere plant-infecterende insecten die aanwezig zijn in bronplanten verminderen. Ten derde...

Echte meeldauw is een van de meest voorkomende en belangrijke ziekten van talrijke voedselgewassen en sierplanten1. Studies naar echte meeldauwziekten zijn erg populair, zoals blijkt uit meer dan 10.500 publicaties als zoekresultaat met "echte meeldauw" als sleutelwoord op het Web of Science (vanaf november 2020). Inderdaad, echte meeldauw (vertegenwoordigd door Blumeria graminis) wordt beschouwd als een van de top 10 schimmelpathogenen door het journal of Molecular Plant Pathology2. Kwantificering van ziektegevoeligheid is een noodzakelijke stap in de karakterisering van plantengenen die bijdragen aan ziekteresistentie of gevoeligheid, of functionele identificatie van kandidaat-effectorgenen in echte meeldauw. Betrouwbare ziektefenotypering is echter veel uitdagender met echte meeldauw in vergelijking met die met de meeste andere schimmelpathogenen, deels omdat, in tegenstelling tot sporen van de laatste, sporen van echte meeldauwsoorten (zoals Golovinomyces cichoracearum UCSC1 op basis van onze laboratoriumervaring) een verminderde levensvatbaarheid vertonen na het doorlopen van een watersuspensieproces 3,4 . Ontoereikende en/of ongelijke inenting van testplanten met een bepaald echte meeldauwpathogeen kan leiden tot onnauwkeurige fenotyperingsresultaten.
Een aantal inentingsmethoden werden gerapporteerd voor echte meeldauwstudies. Deze omvatten (i) het borstelen van sporen rechtstreeks van geïnfecteerde bladeren om planten te testen5, (ii) het spuiten van een sporensuspensie om planten te testen6, (iii) het blazen van sporen met behulp van een vacuümbewerkte bezinktoren naar planten op de bodem van de toren7, en (iv) sporenafgifte door het combinatorische gebruik van een nylon gaasmembraan en op geluid gebaseerde trillingen8 . De methode voor het borstelen (of afstoffen) van sporen is gemakkelijk uit te voeren, maar ongelijk van aard, dus het is mogelijk niet nauwkeurig voor kwantitatieve beoordeling. Sporenspuiten is handig en gelijkmatig, maar zoals hierboven vermeld, kan dit leiden tot een slechte sporenkieming4. De laatste twee (d.w.z. iii-iv) zijn sterk verbeterde methoden die in staat zijn om zelfs inenting te bereiken; beide zijn echter niet flexibel in het aanpassen van hun inentingscapaciteit in termen van het aantal planten dat in één gebeurtenis moet worden ingeënt, waardoor beide apparaten niet triviaal zijn en hun werking beperkt is tot laboratoriumgebieden waar een vacuüm- en / of elektriciteitsbron is.
Ons lab werkt al meer dan 20 jaar met plant-echte meeldauw interactie 9,10. In het afgelopen decennium hebben we een aantal inentingsmethoden getest en onlangs een eenvoudige en toch effectieve echte meeldauwinentingsmethode ontwikkeld. Deze op mesh gebaseerde sporenborstelmethode kan zorgen voor een gelijkmatige inenting en is eenvoudig en schaalbaar, dus moet gemakkelijk worden overgenomen door elk laboratorium dat met echte meeldauw werkt.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >&#160;48 &#181;m stainless steel grid mesh screen; Size: 24&#34; X 48&#34;&#160;</td>
			<td >Amazon</td>
			<td >NA</td>
			<td >For making the lid of an inoculation box</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >#6-32 x &#190;&#34; machine screws, flat washers and nuts&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >#6-32 zinc plated nylon lock nut (4-Pack)</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >#6-32x3/8&#8221; Phillips flat head machine screws, flat washers and nuts&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For securing&#160; magnet door catch plates</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >#8-32x1/2&#34; machine screws, flat washers and nuts</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For securing corner braces and door hinge</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0.250 thick clear extruded acrylic film-masked sheet;&#160; Size: 17 &#189;&#34; X 20&#34;</td>
			<td >Professional Plastics</td>
			<td >SACR.250CEF</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0.250 thick clear extruded acrylic film-masked sheet; Size: 18&#34; X 20&#34;&#160;&#160;</td>
			<td >Professional Plastics</td>
			<td >&#160;SACR.250CEF</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0.250 thick clear extruded acrylic film-masked sheet; Size: 18&#34; X 30&#34;&#160;</td>
			<td >Professional Plastics</td>
			<td >SACR.250CEF</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0.250 thick clear extruded acrylic film-masked sheet; Size: 20&#34; X 29 &#189; &#34;</td>
			<td >Professional Plastics</td>
			<td >SACR.250CEF</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >1-5/8&#34; cabinet door magnetic catch white</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >Model #P110-W</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >2&#34; steel zinc-plated corner brace (8-Pack)&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >&#160;Model #13611&#160;</td>
			<td>For making an inoculation box &#38; chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >3&#34; Corner Clamp</td>
			<td>Harbor Freight Tools</td>
			<td>SKU 63653, 1852, 60589</td>
			<td>For making inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >3/4&#34;&#160; steel zinc plated corner brace (4-Pack)</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >Model #13542</td>
			<td>For making an inoculation box &#38; chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >4-7/8&#34; zinc-plated light duty door pull handles</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >Model #15184</td>
			<td>For making an inoculation box</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fine fan-blender brushes</td>
			<td>Michaels Store</td>
			<td>M10472846&#160;</td>
			<td>For inoculation</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Kelleher 3/4&#34; x 3/4&#34; x 36&#34; wood square dowel&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For making the lid of an inoculation box</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Medium density fiberboard (1/4&#34; x 2&#39; x 4&#39;);&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >Model# 1508104</td>
			<td>For making an inoculation box</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Round glass coverslips with a 500 &#181;m grid</td>
			<td >ibidi USA Inc.</td>
			<td >10816</td>
			<td>For determining&#160; spore density</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an easy and flexible inoculation method for accurately assessing powdery mildew-infection phenotypes of arabidopsis and other plants

Het verminderen van gewasverliezen als gevolg van schimmelziekten vereist een beter begrip van de mechanismen die de immuniteit van planten en schimmelpathogenese regelen, wat op zijn beurt een nauwkeurige bepaling van ziektefenotypen van planten vereist bij infectie met een bepaalde schimmelpathogeen. Nauwkeurige ziektefenotypering met niet-culturele biotrofe schimmelpathogenen zoals echte meeldauw is echter niet gemakkelijk te bereiken en kan een snelheidsbeperkende stap van een onderzoeksproject zijn. Hier hebben we een veilig, efficiënt en gemakkelijk te bedienen ziektefenotyperingssysteem ontwikkeld met de Arabidopsis-echte meeldauwinteractie als voorbeeld. Dit systeem bestaat voornamelijk uit drie componenten: (i) een houten inentingsdoos uitgerust met een afneembaar deksel gemonteerd met een roestvrijstalen of nylon gaas van ~ 50 μm poriën voor het inenten van een flat van planten met schimmelsporen, (ii) een transparante plastic kamer met een kleine opening aan de voorkant voor het minimaliseren van sporenvlucht tijdens het uitvoeren van inenting binnenin, en (iii) een sporenontwrichtende en distributiemethode voor gelijkmatige en effectieve inenting. De hier beschreven protocollen omvatten de stappen en parameters voor het maken van de inentingsdoos en de plastic kamer tegen lage kosten, en een videodemonstratie van hoe het systeem te gebruiken om zelfs inenting met echte meeldauwsporen mogelijk te maken, waardoor de nauwkeurigheid en reproduceerbaarheid van ziektefenotypering wordt verbeterd.

Hier presenteren we een nieuwe poederachtige meeldauw sporeninentingsmethode die eenvoudig te bereiden, te bedienen en aan te passen is. Figuur 1 toont de assemblage van de standaard inentingsdoos met de nadruk op het merk van het verwijderbare deksel gemonteerd met een membraangaas van 50 μm. Figuur 2 toont de assemblage van de inentingskamer. Figuur 3 illustreert de belangrijkste stappen van het inentingsproces met behulp van dit...

Watch this Scientific Journal Video about An Easy and Flexible Inoculation Method for Accurately Assessing Powdery Mildew-Infection Phenotypes of Arabidopsis and Other Plants at JoVE.com

An Easy and Flexible Inoculation Method for Accurately Assessing Powdery Mildew-Infection Phenotypes of Arabidopsis and Other Plants

We presenteren een protocol voor het bouwen van een eenvoudig sporenverdelingssysteem bestaande uit een inentingsdoos met een gaas van ~ 50 μm en een transparante plastic kamer. Dit kan worden gebruikt om planten gelijkmatig in te enten met echte meeldauwsporen, waardoor een nauwkeurige en reproduceerbare beoordeling van ziektefenotypen van bestudeerde planten mogelijk wordt.

Een eenvoudige en flexibele inentingsmethode voor het nauwkeurig beoordelen van echte meeldauw-infectie fenotypen van Arabidopsis en andere planten

Reducing crop losses due to fungal diseases requires improved understanding of the mechanisms governing plant immunity and fungal pathogenesis, which in ...

Echte meeldauw is een belangrijke plantenziekte. Nauwkeurige bepaling van het fenotype van de ziekte vereist zelfs inenting van de ziekteverwekker. Omdat bestaande methoden inefficiënt zijn, hebben we dit protocol ontwikkeld.Onze sporeninentingsmethode kan gemakkelijk zelfs inenting bereiken en is eenvoudig en schaalbaar. Vandaar dat elk laboratorium dat met echte meeldauw werkt, deze methode gemakkelijk kan gebruiken. De onderzoekers kunnen ook gaas over een kartonnen doos monteren en gebruiken voor sporeninenting.Hoe sporen los te maken en door gaas te borstelen, is een cruciale stap. Dus dit op video demonstreren kan erg nuttig zijn. Voor dit protocol krijgt u een rol van 50 micrometer nylon membraangaas of 48 micrometer roestvrijstalen gaas.Snijd groot formaat multiplex met gemiddelde dichtheid in stukken van 24,5X10 inch en 12X10 inch voor het maken van een inentingsdoos. Om een afneembaar bovendeksel met een gaas te maken, snijdt u de lange houten vierkante deuvel in twee sets van 26 inch en 12,75 inch. Lijm en spijker de vier stukken om rond de doos te passen.Neem acrylplaten en monteer alle acrylplaten in een doos, met behulp van acht hoekklemmen. Knip een 7X2 inch openingsvenster aan de voorkant van de acrylplaat van de doos. Om verse echte meeldauwsporen als ent te bereiden, kweek je schone Arabidopsis immuungecompromitteerde pad4-1 mutante planten in een groeikamer bij 22 graden Celsius en 65% relatieve vochtigheid gedurende zes tot acht weken.Kweek de planten om infectiefenotypen in standaard flats te bepalen. Ent een of de helft van pad4-1 planten om voldoende verse echte meeldauwsporen te bouwen. Wanneer verse sporen van geïnfecteerde planten beschikbaar zijn, verplaats dan een platte plant in de inentingsdoos in de inentingskamer voor een infectietest.Snijd 15 tot 20 zwaar geïnfecteerde Arabidopsis-bladeren en laat ze drogen als er gecondenseerd water is. Houd één tot twee bladeren ondersteboven in één hand met een lange tang. Steek vervolgens beide handen door de opening van de kamer en sla zachtjes op de arm van de tang met een schaar, terwijl je langzaam de bladeren boven het gaas beweegt dat op de inentingsdoos is gemonteerd.Borstel de sporen met fijne waaierblenderborstels door het hele gaasoppervlak in verschillende richtingen om de gelijkmatige verdeling van sporen op de planten te maximaliseren. Dep het gaas een paar keer voorzichtig met de borstels om de sporen die in het gaas vastzitten af te schudden. Zodra de sporen zijn bezinkt, verplaatst u de flat met de geënte planten uit de inentingsdoos.Bedek de flat met een plastic koepel en plaats deze in een groeikamer bij 22 graden Celsius en 65% relatieve vochtigheid. Ziektefenotypering kan worden uitgevoerd op 5 of 8 tot 12 dagen na inenting. Converteer kartonnen dozen naar een inentingsdoos door de boven- en onderkant van de doos te verwijderen, de hoek vast te plakken om deze stevig te maken en een 50 micrometer gaas aan de bovenkant met lijm te monteren.Verplaats de flat met de planten in de inentingskamer en plaats de kleinere inentingsdoos bovenop de flat om de planten te bedekken. Maak vervolgens de sporen los en borstel ze. Maak een mini-inentingsdoosje iets groter dan een petrischaaltje.Bewaar de borden op vier graden Celsius in een koelkast tot gebruik. Snijd een of twee volledig uitgezette bladeren van de basis van de bladsteel voor elke te testen plant. Steek de bladsteel van de losgemaakte bladeren in het agarmedium onder een hoek van 30 graden.Ent de bladeren in de inentingskamer en verplaats de plaat met het deksel naar een groeikamer. Voor het beoordelen van infectiefenotypen, breng de bladeren over naar een verse aseptische MS-agarplaat vier of vijf dagen na inenting. Snijd de basis van de bladsteel voordat u de bladeren in het verse agarmedium steekt.Beoordeel de fenotypen van de ziekte acht of negen dagen na de inenting. De microscopische analyse toonde een gelijkmatige verdeling van sporen op de microscopische dia's op de bodem van de flat. De berekende dichtheid van sporen, verdeeld over zes verschillende locaties na lichte inentingen, vertoonde geen significante verschillen.Vergelijkbare resultaten werden bereikt na zware inentingen met sporen. De inentingsgelijkheid werd onderzocht tussen verschillende plantengenotypes op 12 dagen na zware inenting. De pad4-1-planten vertoonden een verhoogde ziektegevoeligheid in vergelijking met Columbia 0, de wilde type planten.Het gebruik van voldoende verse sporen, geproduceerd ongeveer 10 dagen na inenting, op gevoelige planten, is belangrijk, omdat verse sporen gemakkelijker te verjagen zijn en meer kans hebben om kolonisatie te vestigen. Echte meeldauw koloniseert alleen epidermale cellen van planten. Isolatie van met echte meeldauw geïnfecteerde cellen door het pellen van de epidermis, of lasermicrodissectie, zou een meer gerichte transcriptomische en proteomische studie van gastheerresponsen mogelijk maken.Deze methode zal onderzoekers helpen om de fenotypen van echte meeldauwinfectie efficiënter te bepalen en zou daarom effectievere functionele studies naar interacties tussen echte meeldauw van planten moeten vergemakkelijken.

Research

JoVE Journal

Biology

An Improved Method of RNA Isolation from Loblolly Pine (P. taeda L.) and Other Conifer Species

An Improved Method of RNA Isolation from Loblolly Pine P. taeda L. and Other Conifer Species

Een verbeterde methode van RNA isolatie uit Loblolly Pine ( P. taeda L.) en andere naaldbomen

Tissues isolated from conifer species, particularly those belonging to the Pinaceae family, such as loblolly pine (Pinus taeda L.), contain high ...

Ice-Cap: A Method for Growing Arabidopsis and Tomato Plants in 96-well Plates for High-Throughput Genotyping

Ice-Cap: A Method for Growing Arabidopsis and Tomato Plants in 96-well Plates for High-Throughput Genotyping

Ice-Cap: Een methode voor het kweken Arabidopsis En tomatenplanten in 96-well platen voor high-throughput genotypering

It is becoming common for plant scientists to develop projects that require the genotyping of large numbers of plants. The first step in any genotyping ...

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

Een eenvoudige methode voor de Imaging Arabidopsis Met behulp van Leaves Perfluorodecalin als een Infiltratieve Imaging Medium

The problem of acquiring high-resolution images deep into biological samples is widely acknowledged1. In air-filled tissue such as the spongy mesophyll of ...

Measuring Spatial and Temporal Ca2+ Signals in Arabidopsis Plants

Measuring Spatial and Temporal Ca2+ Signals in Arabidopsis Plants

Meten Ruimtelijke en temporele Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; Signalen in Arabidopsis Planten

Developmental and environmental cues induce Ca2+ fluctuations in plant cells. Stimulus-specific spatial-temporal Ca2+ patterns are sensed by cellular Ca2+ ...

Construction of an Affordable and Easy-to-Build Zebrafish Facility

Bouw van een betaalbare en makkelijk te bouwen zebravis Facility

In vivo biomedical research is pivotal to translate in vitro findings into clinical advances. Small academic institutions with limited resources find it ...

An Easy Method for Plant Polysome Profiling

Een eenvoudige methode voor Plant polysoomdisplays Profiling

Translation of mRNA to protein is a fundamental and highly regulated biological process. Polysome profiling is considered as a gold standard for the ...

Rapid Analysis of Circadian Phenotypes in Arabidopsis Protoplasts Transfected with a Luminescent Clock Reporter

Snelle analyse van het circadiaans fenotypes in Arabidopsis protoplasten getransfecteerd met een Lichtgevende klok Reporter

The plant circadian clock allows the anticipation of daily changes to the environment. This anticipation aids the responses to temporally predictable ...

An Efficient and Flexible Cell Aggregation Method for 3D Spheroid Production

Een efficiënt en flexibel Cel aggregatie voor 3D Sferoïde Production

Monolayer cell culture does not adequately model the in vivo behavior of tissues, which involves complex cell-cell and cell-matrix interactions. ...

Standardized Method for High-throughput Sterilization of Arabidopsis Seeds

Gestandaardiseerde methode voor High-throughput sterilisatie van Arabidopsis zaden

Arabidopsis thaliana (Arabidopsis) seedlings often need to be grown on sterile media. This requires prior seed sterilization to prevent the growth of ...