Name: an easy and flexible inoculation method for accurately assessing powdery mildew-infection phenotypes of arabidopsis and other plants
Uploaded: 2021-03-09T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Easy and Flexible Inoculation Method for Accurately Assessing Powdery Mildew-Infection Phenotypes of Arabidopsis and Other Plants at JoVE.com

Die Arbeit wurde von der National Science Foundation (IOS-1901566) an S. Xiao unterstützt. Die Autoren danken F. Coker und C. Hooks für die Wartung der Pflanzenwachstumsanlage und Jorge Zamora für die technische Hilfe bei der Herstellung der Impfbox und der Kammer.

1. Herstellung einer Standard-Impfbox mit einem abnehmbaren oberen Deckel, der mit einem Netz montiert ist
<ol><li>Kaufen Sie eine Rolle 50 μm Nylonmembrangewebe oder 48 μm Edelstahlgewebe (empfohlen) in Geschäften. Stellen Sie sicher, dass Sie genug bestellen, um in mehrere Teile von 14 in x 26 Zoll zu schneiden, um das abgenutzte Netz zu ersetzen.</li>
	<li>Kaufen Sie eine 1/4 in x 2 ft x 4 ft mitteldichte Faserplatte oder Sperrholz, und schneiden Sie zwei 24-1/2 in x 10 in Stücken und zwei 12 in x 10 in Stücken...

<ol>
	<li>Huckelhoven, R., Panstruga, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+bi+ology+of+the+plant-powdery+mildew+interaction.">Cell bi ology of the plant-powdery mildew interaction.</a> Current Opinion in Plant Biology. 14 (6), 738-746 (2011).</li><li>Dean, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+top+10+fungal+pathogens+in+molecular+plant+pathology.">The top 10 fungal pathogens in molecular plant pathology.</a> Molecular Plant Pathology. 13 (4), 414-430 (2012).</li><li>Sakurai, H., Hirata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Some+observations+on+the+relation+between+the+penetration+hypha+and+haustorium+of+barley+powdery+mildew+and+host+cell.+V.+Influence+of+water+spray+on+the+pathogen+and+host+tissue.">Some observations on the relation between the penetration hypha and haustorium of barley powdery mildew and host cell. V. Influence of water spray on the pathogen and host tissue.</a> Annual Phytopathology Society of Japan. 24, 239-245 (1959).</li><li>Shomari, S. H., Kennedy, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+of+Oidium+anacardii+on+cashew+(Anacardium+occidentale)+in+southern+Tanzania.">Survival of Oidium anacardii on cashew (Anacardium occidentale) in southern Tanzania.</a> Plant Pathology. 48 (4), 505-513 (1999).</li><li>Sitterly, W. R., Spencer, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Powdery Mildews. , 369 (1978).</li><li>Reuveni, M., Agapov, V., Reuveni, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+systemic+resistance+to+powdery+mildew+and+growth+increase+in+cucumber+by+phosphates.">Induction of systemic resistance to powdery mildew and growth increase in cucumber by phosphates.</a> Biological Agriculture &amp; Horticulture. 9 (4), 305-315 (1993).</li><li>Reifschneider, F. J. B., Boiteux, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+vacuum-operated+settling+tower+for+inoculation+of+powdery+mildew+fungi.">A vacuum-operated settling tower for inoculation of powdery mildew fungi.</a> Phytopathology. 78 (11), 1463-1465 (1988).</li><li>Chowdhury, A., Bremer, G. B., Salt, D. W., Miller, P., Ford, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+of+delivering+Blumeria+graminis+f.+sp+hordei+spores+for+laboratory+experiments.">A novel method of delivering Blumeria graminis f. sp hordei spores for laboratory experiments.</a> Crop Protection. 22 (7), 917-922 (2003).</li><li>Xiao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Broad-spectrum+mildew+resistance+in+Arabidopsis+thaliana+mediated+by+RPW8.">Broad-spectrum mildew resistance in Arabidopsis thaliana mediated by RPW8.</a> Science. 291 (5501), 118-120 (2001).</li><li>Xiao, S., Ellwood, S., Findlay, K., Oliver, R. P., Turner, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+three+loci+controlling+resistance+of+Arabidopsis+thaliana+accession+Ms-0+to+two+powdery+mildew+diseases.">Characterization of three loci controlling resistance of Arabidopsis thaliana accession Ms-0 to two powdery mildew diseases.</a> The Plant Journal. 12 (4), 757-768 (1997).</li><li>Reuber, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+defense+gene+induction+defects+with+powdery+mildew+susceptibility+in+Arabidopsis+enhanced+disease+susceptibility+mutants.">Correlation of defense gene induction defects with powdery mildew susceptibility in Arabidopsis enhanced disease susceptibility mutants.</a> The Plant Journal. 16 (4), 473-485 (1998).</li><li>Xiao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+atypical+resistance+gene,+RPW8,+recruits+components+of+basal+defence+for+powdery+mildew+resistance+in+Arabidopsis.">The atypical resistance gene, RPW8, recruits components of basal defence for powdery mildew resistance in Arabidopsis.</a> The Plant Journal. 42 (1), 95-110 (2005).</li></ol>

Unsere Meshed-Box-basierte Impfmethode hat mehrere Vorteile gegenüber anderen Impfmethoden. Erstens kann es eine gleichmäßige Verteilung der Sporen erreichen, wenn es richtig betrieben wird, wie in Abbildung 5 gezeigt. Zweitens kann die Verwendung von ~ 50 μm Mesh sowie die Sporenentfernung durch sanftes Schütteln infizierter Blätter die Pflanzeninfektion durch Thripse oder andere pflanzeninfizierende Insekten, die in Quellpflanzen vorhanden sind, reduzieren. Drittens kann die Verwendu...

Der Echte Mehltau ist eine der häufigsten und wichtigsten Erkrankungen zahlreicher Nahrungs- und Zierpflanzen1. Studien zu Mehltauerkrankungen erfreuen sich großer Beliebtheit, wie über 10.500 Publikationen als Suchergebnis mit dem Stichwort "Echter Mehltau" im Web of Science belegen (Stand November 2020). Tatsächlich wird Echter Mehltau (vertreten durch Blumeria graminis) vom Journal of Molecular Plant Pathology2 als einer der Top 10 Pilzpathogene angesehen. Die Quantifizierung der Krankheitsanfälligkeit ist ein notwendiger Schritt bei der Charakterisierung von Pflanzengenen, die zur Krankheitsresistenz oder -anfälligkeit beitragen, oder bei der funktionellen Identifizierung von Effektor-Kandidatengenen im Echten Mehltau. Die zuverlässige Phänotypisierung von Krankheiten ist jedoch beim Echten Mehltau weitaus schwieriger als bei den meisten anderen pilzlichen Krankheitserregern, zum Teil, weil Sporen von Mehltauarten (wie Golovinomyces cichoracearum UCSC1 basierend auf unseren Laborerfahrungen) im Gegensatz zu Sporen der letzteren nach einem Wassersuspensionsprozess eine verminderte Lebensfähigkeit aufweisen 3,4 . Eine unzureichende und/oder ungleichmäßige Beimpfung von Testpflanzen mit einem bestimmten Mehltau-Erreger kann zu ungenauen Phänotypisierungsergebnissen führen.
Eine Reihe von Impfmethoden wurde für Mehltaustudien berichtet. Dazu gehören (i) das Bürsten von Sporen direkt von infizierten Blättern zu Testpflanzen5, (ii) das Sprühen einer Sporensuspension auf Testpflanzen6, (iii) das Blasen von Sporen mit einem vakuumbetriebenen Absetzturm auf Pflanzen am Boden des Turms7 und (iv) die Sporenabgabe durch kombinatorische Verwendung einer Nylonnetzmembran und schallbasierte Vibration8 . Die Sporenbürsten- (oder Staub-) Methode ist einfach durchzuführen, aber ungleichmäßig in der Natur, so dass sie für die quantitative Bewertung möglicherweise nicht genau ist. Das Sprühen von Sporen ist bequem und gleichmäßig, kann aber, wie oben erwähnt, zu einer schlechten Sporenkeimung führen4. Die beiden letzteren (d.h. iii-iv) sind stark verbesserte Methoden, die eine gleichmäßige Impfung erreichen können; Beide sind jedoch nicht flexibel bei der Anpassung ihrer Impfkapazität in Bezug auf die Anzahl der zu beimpfenden Pflanzen in einem einzigen Ereignis, so dass beide Geräte nicht trivial sind und ihr Betrieb auf Laborbereiche beschränkt ist, in denen eine Vakuum- und / oder Stromquelle vorhanden ist.
Unser Labor beschäftigt sich seit über 20 Jahren mit der Interaktion zwischen Pflanzenund Mehltau 9,10. In den letzten zehn Jahren haben wir eine Reihe von Impfmethoden getestet und kürzlich eine einfache und dennoch effektive Mehltau-Impfmethode entwickelt. Diese netzbasierte Sporenbürstenmethode kann eine gleichmäßige Impfung gewährleisten, ist einfach und skalierbar und sollte daher von jedem Labor, das mit Mehltau arbeitet, leicht übernommen werden.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >&#160;48 &#181;m stainless steel grid mesh screen; Size: 24&#34; X 48&#34;&#160;</td>
			<td >Amazon</td>
			<td >NA</td>
			<td >For making the lid of an inoculation box</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >#6-32 x &#190;&#34; machine screws, flat washers and nuts&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >#6-32 zinc plated nylon lock nut (4-Pack)</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >#6-32x3/8&#8221; Phillips flat head machine screws, flat washers and nuts&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For securing&#160; magnet door catch plates</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >#8-32x1/2&#34; machine screws, flat washers and nuts</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For securing corner braces and door hinge</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0.250 thick clear extruded acrylic film-masked sheet;&#160; Size: 17 &#189;&#34; X 20&#34;</td>
			<td >Professional Plastics</td>
			<td >SACR.250CEF</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0.250 thick clear extruded acrylic film-masked sheet; Size: 18&#34; X 20&#34;&#160;&#160;</td>
			<td >Professional Plastics</td>
			<td >&#160;SACR.250CEF</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0.250 thick clear extruded acrylic film-masked sheet; Size: 18&#34; X 30&#34;&#160;</td>
			<td >Professional Plastics</td>
			<td >SACR.250CEF</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0.250 thick clear extruded acrylic film-masked sheet; Size: 20&#34; X 29 &#189; &#34;</td>
			<td >Professional Plastics</td>
			<td >SACR.250CEF</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >1-5/8&#34; cabinet door magnetic catch white</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >Model #P110-W</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >2&#34; steel zinc-plated corner brace (8-Pack)&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >&#160;Model #13611&#160;</td>
			<td>For making an inoculation box &#38; chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >3&#34; Corner Clamp</td>
			<td>Harbor Freight Tools</td>
			<td>SKU 63653, 1852, 60589</td>
			<td>For making inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >3/4&#34;&#160; steel zinc plated corner brace (4-Pack)</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >Model #13542</td>
			<td>For making an inoculation box &#38; chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >4-7/8&#34; zinc-plated light duty door pull handles</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >Model #15184</td>
			<td>For making an inoculation box</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fine fan-blender brushes</td>
			<td>Michaels Store</td>
			<td>M10472846&#160;</td>
			<td>For inoculation</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Kelleher 3/4&#34; x 3/4&#34; x 36&#34; wood square dowel&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For making the lid of an inoculation box</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Medium density fiberboard (1/4&#34; x 2&#39; x 4&#39;);&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >Model# 1508104</td>
			<td>For making an inoculation box</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Round glass coverslips with a 500 &#181;m grid</td>
			<td >ibidi USA Inc.</td>
			<td >10816</td>
			<td>For determining&#160; spore density</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an easy and flexible inoculation method for accurately assessing powdery mildew-infection phenotypes of arabidopsis and other plants

Die Verringerung von Ernteverlusten aufgrund von Pilzkrankheiten erfordert ein besseres Verständnis der Mechanismen, die die Pflanzenimmunität und die Pilzpathogenese steuern, was wiederum eine genaue Bestimmung der Krankheitsphänotypen von Pflanzen bei Infektion mit einem bestimmten Pilzpathogen erfordert. Eine genaue Krankheitsphänotypisierung mit nicht kultivierbaren biotrophen Pilzpathogenen wie Mehltau ist jedoch nicht einfach zu erreichen und kann ein geschwindigkeitsbegrenzender Schritt eines Forschungsprojekts sein. Hier haben wir ein sicheres, effizientes und einfach zu bedienendes Krankheitsphänotypisierungssystem am Beispiel der Arabidopsis-Mehltau-Interaktion entwickelt. Dieses System besteht hauptsächlich aus drei Komponenten: (i) einer hölzernen Impfbox mit einem abnehmbaren Deckel, der mit einem Edelstahl- oder Nylongeflecht aus ~50 μm Poren zur Beimpfung einer Pflanzenschicht mit Pilzsporen befestigt ist, (ii) einer transparenten Kunststoffkammer mit einer kleinen vorderen Öffnung zur Minimierung des Sporenaustritts bei der Impfung im Inneren, und (iii) eine Sporenentfernungs- und Verteilungsmethode für eine gleichmäßige und wirksame Impfung. Die hier beschriebenen Protokolle umfassen die Schritte und Parameter für die kostengünstige Herstellung der Impfbox und der Kunststoffkammer sowie eine Videodemonstration, wie das System verwendet werden kann, um eine gleichmäßige Impfung mit Mehltausporen zu ermöglichen und dadurch die Genauigkeit und Reproduzierbarkeit der Krankheitsphänotypisierung zu verbessern.

Hier stellen wir eine neue Mehltau-Sporen-Impfmethode vor, die einfach herzustellen, zu bedienen und einzustellen ist. Abbildung 1 zeigt die Montage der Standard-Impfbox mit Schwerpunkt auf der Marke des abnehmbaren Deckels, der mit einem 50-μm-Membrannetz montiert ist. Abbildung 2 zeigt den Aufbau der Impfkammer. Abbildung 3 zeigt die wichtigsten Schritte des Impfprozesses mit diesem System. Abbildung 4</stron...

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An Easy and Flexible Inoculation Method for Accurately Assessing Powdery Mildew-Infection Phenotypes of Arabidopsis and Other Plants

Wir präsentieren ein Protokoll zum Aufbau eines einfachen Sporenverteilungssystems, bestehend aus einer Impfbox mit einem ~50 μm Netz und einer transparenten Kunststoffkammer. Damit lassen sich Pflanzen gleichmäßig mit Mehltausporen impfen und so eine genaue und reproduzierbare Beurteilung der Krankheitsphänotypen der untersuchten Pflanzen ermöglichen.

Eine einfache und flexible Impfmethode zur genauen Beurteilung von Phänotypen von Arabidopsis und anderen Pflanzen bei Mehltauinfektionen

Reducing crop losses due to fungal diseases requires improved understanding of the mechanisms governing plant immunity and fungal pathogenesis, which in ...

Echter Mehltau ist eine wichtige Pflanzenkrankheit. Die genaue Bestimmung des Krankheitsphänotyps erfordert eine gleichmäßige Inokulation des Erregers. Da bestehende Methoden ineffizient sind, haben wir dieses Protokoll entwickelt.Unsere Sporenimpfmethode kann leicht eine gleichmäßige Impfung erreichen und ist einfach und skalierbar. Daher kann jedes Labor, das mit Mehltau arbeitet, diese Methode problemlos anwenden. Die Forscher können auch Mesh über einem Karton montieren und für die Sporenimpfung verwenden.Wie man Sporen entfernt und durch das Netz bürstet, ist ein kritischer Schritt. Dies auf Video zu demonstrieren, könnte sehr hilfreich sein. Für dieses Protokoll erhalten Sie eine Rolle aus 50 Mikrometer Nylonmembrangewebe oder 48 Mikrometer Edelstahlgewebe.Schneiden Sie großes, mitteldichtes Sperrholz in Stücke von 24,5X10 Zoll und 12X10 Zoll, um eine Impfbox herzustellen. Um einen abnehmbaren oberen Deckel mit einem Netz herzustellen, schneiden Sie den langen hölzernen quadratischen Dübel in zwei Sätze von 26 Zoll und 12,75 Zoll. Kleben und nageln Sie die vier Teile so, dass sie um die Box passen.Nehmen Sie Acrylplatten und montieren Sie alle Acrylplatten mit acht Eckklemmen zu einer Box. Schneiden Sie ein 7X2 Zoll großes Fenster zum Öffnen auf der Vorderseite der Acrylplatte der Box. Um frische Mehltausporen als Impfung vorzubereiten, züchten Sie sechs bis acht Wochen lang in einer Wachstumskammer bei 22 Grad Celsius und 65% relativer Luftfeuchtigkeit saubere Arabidopsis-immungeschwächte Pad4-1-Mutantenpflanzen.Züchten Sie die Pflanzen, um Infektionsphänotypen in Standardwohnungen zu bestimmen. Beimpfen Sie eine oder die Hälfte der pad4-1-Pflanzen, um ausreichend frische Mehltausporen aufzubauen. Wenn frische Sporen von infizierten Pflanzen verfügbar sind, bewegen Sie eine flache Pflanze für einen Infektionstest in die Impfbox in der Impfkammer.Schneiden Sie 15 bis 20 stark infizierte Arabidopsis-Blätter und lassen Sie sie trocknen, wenn Kondenswasser vorhanden ist. Halten Sie ein bis zwei Blätter kopfüber mit einer langen Pinzette in einer Hand. Dann legen Sie beide Hände durch die Öffnung der Kammer und schlagen Sie sanft mit einer Schere auf den Arm der Pinzette, während Sie die Blätter langsam über das auf der Impfbox montierte Netz bewegen.Bürsten Sie die Sporen mit feinen Kugelmixerbürsten durch die gesamte Netzoberfläche in verschiedene Richtungen, um die gleichmäßige Verteilung der Sporen auf die Pflanzen zu maximieren. Tupfen Sie das Netz einige Male vorsichtig mit den Bürsten, um die im Netz steckenden Sporen abzuschütteln. Sobald sich die Sporen abgesetzt haben, entfernen Sie die Wohnung mit den beimpften Pflanzen aus der Impfbox.Decken Sie die Wohnung mit einer Kunststoffkuppel ab und legen Sie sie bei 22 Grad Celsius und 65% relativer Luftfeuchtigkeit in eine Wachstumskammer. Die Phänotypisierung der Krankheit kann 5 oder 8 bis 12 Tage nach der Impfung durchgeführt werden. Wandeln Sie Kartons in eine Impfbox um, indem Sie die Ober- und Unterseite der Box entfernen, die Ecke festkleben und ein 50-Mikrometer-Netz mit Klebstoff auf der Oberseite montieren.Bewegen Sie die Wohnung mit den Pflanzen in die Impfkammer und stellen Sie die kleinere Impfbox auf die Wohnung, um die Pflanzen abzudecken. Dann entfernen und bürsten Sie die Sporen. Machen Sie eine Mini-Impfbox etwas größer als eine Petrischale.Lagern Sie die Teller bis zum Gebrauch bei vier Grad Celsius im Kühlschrank. Schneiden Sie ein oder zwei vollständig expandierte Blätter von der Basis des Blattstiels für jede zu testende Pflanze. Führen Sie den Blattstiel der abgelösten Blätter in einem Winkel von 30 Grad in das Agarmedium ein.Beimpfen Sie die Blätter in der Impfkammer und bewegen Sie die Platte mit dem Deckel in eine Wachstumskammer. Zur Beurteilung der Infektionsphänotypen werden die Blätter vier oder fünf Tage nach der Inokulation auf eine frische aseptische MS-Agarplatte übertragen. Schneiden Sie die Basis des Blattstiels ab, bevor Sie die Blätter in das frische Agarmedium einführen.Beurteilen Sie die Krankheitsphänotypen acht oder neun Tage nach der Impfung. Die mikroskopische Analyse zeigte eine gleichmäßige Verteilung der Sporen auf den mikroskopischen Objektträgern auf der Unterseite der Wohnung. Die berechnete Dichte der Sporen, die nach Lichtimpfungen an sechs verschiedenen Orten verteilt waren, zeigte keine signifikanten Unterschiede.Ähnliche Ergebnisse wurden nach starken Impfungen mit Sporen erzielt. Die Impfgleichmäßigkeit wurde 12 Tage nach schwerer Impfung zwischen verschiedenen Pflanzengenotypen untersucht. Die pad4-1-Pflanzen zeigten eine erhöhte Krankheitsanfälligkeit im Vergleich zu Columbia 0, den Wildtyp-Pflanzen.Die Verwendung ausreichender frischer Sporen, die etwa 10 Tage nach der Impfung an anfälligen Pflanzen produziert werden, ist wichtig, da frische Sporen leichter zu entfernen sind und eher eine Besiedlung etablieren. Echter Mehltau besiedelt nur pflanzliche Epidermiszellen. Die Isolierung von mit Mehltau infizierten Zellen durch Peeling der Epidermis oder Lasermikrodissektion würde eine gezieltere transkriptomische und proteomische Untersuchung der Wirtsreaktionen ermöglichen.Diese Methode wird Forschern helfen, Phänotypen von Mehltauinfektionen effizienter zu bestimmen, und sollte daher effektivere funktionelle Studien zu pflanzlichen Mehltau-Interaktionen ermöglichen.

Research

JoVE Journal

Biology

An Improved Method of RNA Isolation from Loblolly Pine (P. taeda L.) and Other Conifer Species

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Ein verbessertes Verfahren zur RNA-Isolierung aus Loblolly Pine ( P. taeda L.) und andere Nadelbaumarten

Tissues isolated from conifer species, particularly those belonging to the Pinaceae family, such as loblolly pine (Pinus taeda L.), contain high ...

Forschung

Biologie

Ice-Cap: A Method for Growing Arabidopsis and Tomato Plants in 96-well Plates for High-Throughput Genotyping

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Ice-Cap: Ein Verfahren zur Züchtung von Arabidopsis Und Tomatenpflanzen in 96-well-Platten für High-Throughput-Genotypisierung

It is becoming common for plant scientists to develop projects that require the genotyping of large numbers of plants. The first step in any genotyping ...

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

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Eine einfache Methode zur Bildgebung Arabidopsis Leaves Mit Perfluordecalin als Infiltrative Imaging Medium

The problem of acquiring high-resolution images deep into biological samples is widely acknowledged1. In air-filled tissue such as the spongy mesophyll of ...

Measuring Spatial and Temporal Ca2+ Signals in Arabidopsis Plants

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Mess räumliche und zeitliche Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; Signale in Arabidopsis-Pflanzen

Developmental and environmental cues induce Ca2+ fluctuations in plant cells. Stimulus-specific spatial-temporal Ca2+ patterns are sensed by cellular Ca2+ ...

Construction of an Affordable and Easy-to-Build Zebrafish Facility

Bau eines erschwinglichen und einfach zu bauen Zebrafisch Einrichtung

In vivo biomedical research is pivotal to translate in vitro findings into clinical advances. Small academic institutions with limited resources find it ...

An Easy Method for Plant Polysome Profiling

Eine einfache Methode für Pflanzen Polysomen Profilieren

Translation of mRNA to protein is a fundamental and highly regulated biological process. Polysome profiling is considered as a gold standard for the ...

Rapid Analysis of Circadian Phenotypes in Arabidopsis Protoplasts Transfected with a Luminescent Clock Reporter

Schnelle Analyse von Circadian Phänotypen in Arabidopsis Protoplasten Transfizierte mit einem lumineszenten Clock Reporter

The plant circadian clock allows the anticipation of daily changes to the environment. This anticipation aids the responses to temporally predictable ...

An Efficient and Flexible Cell Aggregation Method for 3D Spheroid Production

Eine effiziente und flexible Zellaggregationsmethode für 3D-Sphäroid-Produktion

Monolayer cell culture does not adequately model the in vivo behavior of tissues, which involves complex cell-cell and cell-matrix interactions. ...

Standardized Method for High-throughput Sterilization of Arabidopsis Seeds

Standardisierte Methode für Hochdurchsatz-Sterilisation von Arabidopsis Samen

Arabidopsis thaliana (Arabidopsis) seedlings often need to be grown on sterile media. This requires prior seed sterilization to prevent the growth of ...