Name: an easy and flexible inoculation method for accurately assessing powdery mildew-infection phenotypes of arabidopsis and other plants
Uploaded: 2021-03-09T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Easy and Flexible Inoculation Method for Accurately Assessing Powdery Mildew-Infection Phenotypes of Arabidopsis and Other Plants at JoVE.com

O trabalho foi apoiado pela National Science Foundation (IOS-1901566) para S. Xiao. Os autores gostariam de agradecer a F. Coker e C. Hooks pela manutenção da instalação de crescimento da planta, e a Jorge Zamora pela ajuda técnica associada à fabricação da caixa e câmara de inoculação.

1. Fazer uma caixa de inoculação padrão com uma tampa superior removível montada com uma malha
<ol><li>Compre um rolo de malha de membrana de nylon de 50 μm ou malha de aço inoxidável de 48 μm (recomendado) nas lojas. Certifique-se de encomendar o suficiente para cortar em várias peças de 14 em x 26 em para a substituição de malha desgastada.</li>
	<li>Compre um 1/4 em x 2 pés x 4 pés de fibra de média densidade ou compensado, e corte dois 24-1/2 em x 10 em pedaços e dois 12 em x 10 em pedaços para faz...

<ol>
	<li>Huckelhoven, R., Panstruga, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+bi+ology+of+the+plant-powdery+mildew+interaction.">Cell bi ology of the plant-powdery mildew interaction.</a> Current Opinion in Plant Biology. 14 (6), 738-746 (2011).</li><li>Dean, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+top+10+fungal+pathogens+in+molecular+plant+pathology.">The top 10 fungal pathogens in molecular plant pathology.</a> Molecular Plant Pathology. 13 (4), 414-430 (2012).</li><li>Sakurai, H., Hirata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Some+observations+on+the+relation+between+the+penetration+hypha+and+haustorium+of+barley+powdery+mildew+and+host+cell.+V.+Influence+of+water+spray+on+the+pathogen+and+host+tissue.">Some observations on the relation between the penetration hypha and haustorium of barley powdery mildew and host cell. V. Influence of water spray on the pathogen and host tissue.</a> Annual Phytopathology Society of Japan. 24, 239-245 (1959).</li><li>Shomari, S. H., Kennedy, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+of+Oidium+anacardii+on+cashew+(Anacardium+occidentale)+in+southern+Tanzania.">Survival of Oidium anacardii on cashew (Anacardium occidentale) in southern Tanzania.</a> Plant Pathology. 48 (4), 505-513 (1999).</li><li>Sitterly, W. R., Spencer, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Powdery Mildews. , 369 (1978).</li><li>Reuveni, M., Agapov, V., Reuveni, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+systemic+resistance+to+powdery+mildew+and+growth+increase+in+cucumber+by+phosphates.">Induction of systemic resistance to powdery mildew and growth increase in cucumber by phosphates.</a> Biological Agriculture &amp; Horticulture. 9 (4), 305-315 (1993).</li><li>Reifschneider, F. J. B., Boiteux, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+vacuum-operated+settling+tower+for+inoculation+of+powdery+mildew+fungi.">A vacuum-operated settling tower for inoculation of powdery mildew fungi.</a> Phytopathology. 78 (11), 1463-1465 (1988).</li><li>Chowdhury, A., Bremer, G. B., Salt, D. W., Miller, P., Ford, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+of+delivering+Blumeria+graminis+f.+sp+hordei+spores+for+laboratory+experiments.">A novel method of delivering Blumeria graminis f. sp hordei spores for laboratory experiments.</a> Crop Protection. 22 (7), 917-922 (2003).</li><li>Xiao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Broad-spectrum+mildew+resistance+in+Arabidopsis+thaliana+mediated+by+RPW8.">Broad-spectrum mildew resistance in Arabidopsis thaliana mediated by RPW8.</a> Science. 291 (5501), 118-120 (2001).</li><li>Xiao, S., Ellwood, S., Findlay, K., Oliver, R. P., Turner, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+three+loci+controlling+resistance+of+Arabidopsis+thaliana+accession+Ms-0+to+two+powdery+mildew+diseases.">Characterization of three loci controlling resistance of Arabidopsis thaliana accession Ms-0 to two powdery mildew diseases.</a> The Plant Journal. 12 (4), 757-768 (1997).</li><li>Reuber, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+defense+gene+induction+defects+with+powdery+mildew+susceptibility+in+Arabidopsis+enhanced+disease+susceptibility+mutants.">Correlation of defense gene induction defects with powdery mildew susceptibility in Arabidopsis enhanced disease susceptibility mutants.</a> The Plant Journal. 16 (4), 473-485 (1998).</li><li>Xiao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+atypical+resistance+gene,+RPW8,+recruits+components+of+basal+defence+for+powdery+mildew+resistance+in+Arabidopsis.">The atypical resistance gene, RPW8, recruits components of basal defence for powdery mildew resistance in Arabidopsis.</a> The Plant Journal. 42 (1), 95-110 (2005).</li></ol>

Nosso método de inoculação baseado em caixa de malha tem várias vantagens em relação a outros métodos de inoculação. Primeiro, pode alcançar uma distribuição uniforme dos esporos se operado corretamente, como demonstrado na Figura 5. Em segundo lugar, o uso de malha de ~ 50 μm, além de deslocamento de esporos por agitação suave de folhas infectadas pode reduzir a infecção de plantas por tripes ou outros insetos infectantes de plantas que estão presentes em plantas de orige...

O oídio é uma das doenças mais comuns e importantes de inúmeras culturas alimentares e plantas ornamentais1. Estudos de doenças do oídio têm sido muito populares, como evidenciado por mais de 10.500 publicações como o resultado da pesquisa com "oídio" como palavra-chave na Web of Science (a partir de novembro de 2020). De fato, o oídio (representado pela Blumeria graminis) é considerado um dos 10 principais patógenos fúngicos pela revista Molecular Plant Pathology2. A quantificação da suscetibilidade à doença é um passo necessário na caracterização dos genes das plantas que contribuem para a resistência ou suscetibilidade à doença, ou na identificação funcional de genes efetores candidatos no oídio. No entanto, a fenotipagem confiável da doença é muito mais desafiadora com o oídio em comparação com a maioria dos outros patógenos fúngicos, em parte porque, ao contrário dos esporos deste último, os esporos de espécies de oídio (como Golovinomyces cichoracearum UCSC1 com base em nossa experiência de laboratório) mostram viabilidade reduzida após passar por um processo de suspensão de água 3,4 . A inoculação inadequada e/ou desigual de plantas de ensaio com um determinado agente patogénico do oídio pode conduzir a resultados de fenotipagem imprecisos.
Vários métodos de inoculação foram relatados para estudos de oídio. Estes incluem (i) escovação de esporos diretamente de folhas infectadas para testar plantas5, (ii) pulverização de uma suspensão de esporos para testar plantas6, (iii) sopro de esporos usando uma torre de decantação operada a vácuo para plantas no fundo da torre7 e (iv) entrega de esporos pelo uso combinatório de uma membrana de malha de nylon e vibração baseada em som8 . O método de escovação de esporos (ou poeira) é fácil de executar, mas de natureza desigual, portanto, pode não ser preciso para avaliação quantitativa. A pulverização de esporos é conveniente e uniforme, mas, como dito acima, pode resultar em má germinação de esporos4. Os dois últimos (isto é, iii-iv) são métodos muito aprimorados capazes de alcançar até mesmo a inoculação; no entanto, ambos não são flexíveis no ajuste de sua capacidade de inoculação em termos do número de plantas a serem inoculadas em um único evento, fazendo com que qualquer aparelho não seja trivial, e sua operação é restrita a áreas de laboratório onde há vácuo e / ou fonte de eletricidade.
Nosso laboratório trabalha com interação planta-oídio há mais de 20 anos 9,10. Ao longo da última década, testamos uma série de métodos de inoculação e desenvolvemos recentemente um método de inoculação de oídio simples e eficaz. Este método de escovação de esporos à base de malha pode garantir uma inoculação uniforme e é simples e escalável, portanto, deve ser facilmente adotado por qualquer laboratório que trabalhe com oídio.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >&#160;48 &#181;m stainless steel grid mesh screen; Size: 24&#34; X 48&#34;&#160;</td>
			<td >Amazon</td>
			<td >NA</td>
			<td >For making the lid of an inoculation box</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >#6-32 x &#190;&#34; machine screws, flat washers and nuts&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >#6-32 zinc plated nylon lock nut (4-Pack)</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >#6-32x3/8&#8221; Phillips flat head machine screws, flat washers and nuts&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For securing&#160; magnet door catch plates</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >#8-32x1/2&#34; machine screws, flat washers and nuts</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For securing corner braces and door hinge</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0.250 thick clear extruded acrylic film-masked sheet;&#160; Size: 17 &#189;&#34; X 20&#34;</td>
			<td >Professional Plastics</td>
			<td >SACR.250CEF</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0.250 thick clear extruded acrylic film-masked sheet; Size: 18&#34; X 20&#34;&#160;&#160;</td>
			<td >Professional Plastics</td>
			<td >&#160;SACR.250CEF</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0.250 thick clear extruded acrylic film-masked sheet; Size: 18&#34; X 30&#34;&#160;</td>
			<td >Professional Plastics</td>
			<td >SACR.250CEF</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >0.250 thick clear extruded acrylic film-masked sheet; Size: 20&#34; X 29 &#189; &#34;</td>
			<td >Professional Plastics</td>
			<td >SACR.250CEF</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >1-5/8&#34; cabinet door magnetic catch white</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >Model #P110-W</td>
			<td>For making an inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >2&#34; steel zinc-plated corner brace (8-Pack)&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >&#160;Model #13611&#160;</td>
			<td>For making an inoculation box &#38; chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >3&#34; Corner Clamp</td>
			<td>Harbor Freight Tools</td>
			<td>SKU 63653, 1852, 60589</td>
			<td>For making inoculation chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >3/4&#34;&#160; steel zinc plated corner brace (4-Pack)</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >Model #13542</td>
			<td>For making an inoculation box &#38; chamber</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >4-7/8&#34; zinc-plated light duty door pull handles</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >Model #15184</td>
			<td>For making an inoculation box</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fine fan-blender brushes</td>
			<td>Michaels Store</td>
			<td>M10472846&#160;</td>
			<td>For inoculation</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Kelleher 3/4&#34; x 3/4&#34; x 36&#34; wood square dowel&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >NA</td>
			<td>For making the lid of an inoculation box</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Medium density fiberboard (1/4&#34; x 2&#39; x 4&#39;);&#160;</td>
			<td >Home Depot</td>
			<td >Model# 1508104</td>
			<td>For making an inoculation box</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Round glass coverslips with a 500 &#181;m grid</td>
			<td >ibidi USA Inc.</td>
			<td >10816</td>
			<td>For determining&#160; spore density</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an easy and flexible inoculation method for accurately assessing powdery mildew-infection phenotypes of arabidopsis and other plants

Reduzir as perdas de culturas devido a doenças fúngicas requer uma melhor compreensão dos mecanismos que regem a imunidade das plantas e a patogênese fúngica, o que, por sua vez, requer a determinação precisa dos fenótipos de doenças das plantas após a infecção por um patógeno fúngico específico. No entanto, a fenotipagem precisa da doença com patógenos fúngicos biotróficos incultiváveis, como o oídio, não é fácil de alcançar e pode ser uma etapa limitante da taxa de um projeto de pesquisa. Aqui, desenvolvemos um sistema de fenotipagem de doenças seguro, eficiente e fácil de operar usando a interação Arabidopsis-oídio como exemplo. Este sistema consiste principalmente em três componentes: (i) uma caixa de inoculação de madeira equipada com uma tampa removível montada com uma malha de aço inoxidável ou nylon de poros de ~50 μm para inocular um plano de plantas com esporos de fungos, (ii) uma câmara de plástico transparente com uma pequena abertura frontal para minimizar a fuga de esporos durante a realização da inoculação no interior, e (iii) um método de deslocamento e distribuição de esporos para inoculação uniforme e eficaz. Os protocolos aqui descritos incluem as etapas e parâmetros para fazer a caixa de inoculação e a câmara de plástico a um baixo custo, e uma demonstração em vídeo de como usar o sistema para permitir até mesmo a inoculação com esporos de oídio, melhorando assim a precisão e a reprodutibilidade da fenotipagem da doença.

Aqui, apresentamos um novo método de inoculação de esporos de oídio que é fácil de preparar, operar e ajustar. A Figura 1 mostra a montagem da caixa de inoculação padrão com ênfase na marca da tampa removível montada com uma malha de membrana de 50 μm. A Figura 2 mostra a montagem da câmara de inoculação. A Figura 3 ilustra as principais etapas do processo de inoculação utilizando esse sistema. ...

Watch this Scientific Journal Video about An Easy and Flexible Inoculation Method for Accurately Assessing Powdery Mildew-Infection Phenotypes of Arabidopsis and Other Plants at JoVE.com

An Easy and Flexible Inoculation Method for Accurately Assessing Powdery Mildew-Infection Phenotypes of Arabidopsis and Other Plants

Apresentamos um protocolo para a construção de um sistema simples de distribuição de esporos constituído por uma caixa de inoculação com uma malha de ~50 μm e uma câmara de plástico transparente. Isso pode ser usado para inocular uniformemente plantas com esporos de oídio, permitindo assim uma avaliação precisa e reprodutível dos fenótipos de doenças das plantas em estudo.

Um método de inoculação fácil e flexível para avaliar com precisão os fenótipos de infecção por oídio de Arabidopsis e outras plantas

Reducing crop losses due to fungal diseases requires improved understanding of the mechanisms governing plant immunity and fungal pathogenesis, which in ...

O oídio é uma importante doença vegetal. A determinação precisa do fenótipo da doença requer até mesmo a inoculação do patógeno. Como os métodos existentes são ineficientes, desenvolvemos este protocolo.Nosso método de inoculação de esporos pode facilmente alcançar até mesmo a inoculação, e é simples e escalável. Assim, qualquer laboratório que trabalhe com oídio pode facilmente usar este método. Os pesquisadores também podem montar malha sobre uma caixa de papelão e usá-la para inoculação de esporos.Como desalojar esporos e escová-los através da malha é um passo crítico. Então, demonstrar isso em vídeo pode ser muito útil. Para este protocolo, obtenha um rolo de malha de membrana de nylon de 50 micrômetros ou malha de aço inoxidável de 48 micrômetros.Corte madeira compensada de tamanho grande e de média densidade em pedaços de 24,5X10 polegadas e 12X10 polegadas para fazer uma caixa de inoculação. Para fazer uma tampa superior removível com uma malha, corte a longa cavilha quadrada de madeira em dois conjuntos de 26 polegadas e 12,75 polegadas. Cole e pregue as quatro peças para caber ao redor da caixa.Pegue as folhas de acrílico e monte todas as folhas de acrílico em uma caixa, usando oito grampos de canto. Corte uma janela de abertura de 7X2 polegadas na parte frontal da folha de acrílico da caixa. Para preparar esporos frescos de oídio como inócula, cultive plantas mutantes limpas de Arabidopsis imunocomprometida4-1 em uma câmara de crescimento a 22 graus Celsius e 65% de umidade relativa por seis a oito semanas.Cultive as plantas para determinar fenótipos de infecção em apartamentos padrão. Inocular uma ou metade das plantas de pad4-1 para construir esporos de oídio frescos suficientes. Quando esporos frescos de plantas infectadas estiverem disponíveis, mova um plano de plantas para a caixa de inoculação dentro da câmara de inoculação para um teste de infecção.Corte de 15 a 20 folhas de Arabidopsis fortemente infectadas e deixe-as secar se houver água condensada. Segure uma a duas folhas de cabeça para baixo em uma mão com um par de pinças longas. Em seguida, coloque as duas mãos através da abertura da câmara e bata suavemente no braço da pinça com um par de tesouras, enquanto move lentamente as folhas acima da malha montada na caixa de inoculação.Escove os esporos com escovas finas do liquidificador do ventilador através de toda a superfície da malha em diferentes direções para maximizar a distribuição uniforme dos esporos nas plantas. Gentilmente bata na malha algumas vezes com os pincéis para sacudir os esporos presos na malha. Uma vez que os esporos se assentam, mova para fora o plano que contém as plantas inoculadas da caixa de inoculação.Cubra o plano com uma cúpula de plástico e coloque-o em uma câmara de crescimento a 22 graus Celsius e 65% de umidade relativa. A fenotipagem da doença pode ser realizada em 5 ou 8 a 12 dias após a inoculação. Converta caixas de papelão em uma caixa de inoculação removendo os lados superior e inferior da caixa, colando o canto para firmá-lo e montando uma malha de 50 micrômetros na parte superior com cola.Mova o plano que contém as plantas dentro da câmara de inoculação e coloque a caixa de inoculação menor em cima do plano para cobrir as plantas. Em seguida, desaloje e escove os esporos. Faça uma mini caixa de inoculação um pouco maior que uma placa de Petri.Guarde os pratos a quatro graus Celsius num frigorífico até à sua utilização. Corte uma ou duas folhas totalmente expandidas da base do pecíolo para cada planta a ser testada. Insira o pecíolo das folhas destacadas no meio ágar em um ângulo de 30 graus.Inocular as folhas dentro da câmara de inoculação e mova a placa com a tampa para uma câmara de crescimento. Para avaliar os fenótipos de infecção, transfira as folhas para uma placa de ágar MS asséptica fresca aos quatro ou cinco dias após a inoculação. Corte a base do pecíolo antes de inserir as folhas no meio de ágar fresco.Avalie os fenótipos da doença em oito ou nove dias após a inoculação. A análise microscópica mostrou distribuição uniforme de esporos nas lâminas microscópicas no fundo do plano. A densidade calculada de esporos, distribuídos em seis locais diferentes após inoculações leves, não mostrou diferenças significativas.Resultados semelhantes foram alcançados após inoculações pesadas com esporos. A uniformidade da inoculação foi examinada entre os diferentes genótipos de plantas aos 12 dias após a inoculação pesada. As plantas pad4-1 apresentaram maior suscetibilidade a doenças em comparação com Columbia 0, as plantas do tipo selvagem.O uso de esporos frescos adequados, produzidos em torno de 10 dias após a inoculação, em plantas suscetíveis, é importante, pois os esporos frescos são mais fáceis de desalojar e mais propensos a estabelecer colonização. O oídio coloniza apenas as células epidérmicas das plantas. O isolamento de células infectadas por oídio descascando a epiderme, ou microdissecção a laser, permitiria um estudo transcriptômico e proteômico mais direcionado das respostas do hospedeiro.Este método ajudará os pesquisadores a determinar de forma mais eficiente os fenótipos de infecção por mofo em pó e, portanto, deve facilitar estudos funcionais mais eficazes sobre as interações de oídio vegetal.

Research

JoVE Journal

Biology

An Improved Method of RNA Isolation from Loblolly Pine (P. taeda L.) and Other Conifer Species

An Improved Method of RNA Isolation from Loblolly Pine P. taeda L. and Other Conifer Species

Um método melhorado de isolamento de RNA Pine Loblolly ( P. taeda L.) e espécies de coníferas Outros

Tissues isolated from conifer species, particularly those belonging to the Pinaceae family, such as loblolly pine (Pinus taeda L.), contain high ...

Biologia

Ice-Cap: A Method for Growing Arabidopsis and Tomato Plants in 96-well Plates for High-Throughput Genotyping

Ice-Cap: A Method for Growing Arabidopsis and Tomato Plants in 96-well Plates for High-Throughput Genotyping

Ice Cap: Um Método para Crescer Arabidopsis Plantas e tomate em placas de 96 poços para High-Throughput Genotipagem

It is becoming common for plant scientists to develop projects that require the genotyping of large numbers of plants. The first step in any genotyping ...

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

Um método simples para criação de imagens Arabidopsis Folhas Usando Perfluorodecalin como um meio de imagem infiltrativas

The problem of acquiring high-resolution images deep into biological samples is widely acknowledged1. In air-filled tissue such as the spongy mesophyll of ...

Measuring Spatial and Temporal Ca2+ Signals in Arabidopsis Plants

Measuring Spatial and Temporal Ca2+ Signals in Arabidopsis Plants

Medindo espacial e temporal Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; Sinais em Arabidopsis Plantas

Developmental and environmental cues induce Ca2+ fluctuations in plant cells. Stimulus-specific spatial-temporal Ca2+ patterns are sensed by cellular Ca2+ ...

Construction of an Affordable and Easy-to-Build Zebrafish Facility

Construção de uma compilação de fácil Facility Zebrafish Acessível e

In vivo biomedical research is pivotal to translate in vitro findings into clinical advances. Small academic institutions with limited resources find it ...

An Easy Method for Plant Polysome Profiling

Um método fácil para a planta polysome Profiling

Translation of mRNA to protein is a fundamental and highly regulated biological process. Polysome profiling is considered as a gold standard for the ...

Rapid Analysis of Circadian Phenotypes in Arabidopsis Protoplasts Transfected with a Luminescent Clock Reporter

Rápida análise de fenótipos circadianos em Arabidopsis Protoplastos transfectadas com um relógio Reporter luminescentes

The plant circadian clock allows the anticipation of daily changes to the environment. This anticipation aids the responses to temporally predictable ...

An Efficient and Flexible Cell Aggregation Method for 3D Spheroid Production

Um Método celular agregação eficiente e flexível para 3D Spheroid Produção

Monolayer cell culture does not adequately model the in vivo behavior of tissues, which involves complex cell-cell and cell-matrix interactions. ...

Standardized Method for High-throughput Sterilization of Arabidopsis Seeds

Método padronizado para a esterilização da elevado-produção de sementes de Arabidopsis

Arabidopsis thaliana (Arabidopsis) seedlings often need to be grown on sterile media. This requires prior seed sterilization to prevent the growth of ...