Name: a metric test for assessing spatial working memory in adult rats following traumatic brain injury
Uploaded: 2021-05-07T14:30:00
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Agradecemos à Professora Olena Severynovska; Maryna Kuscheriava M.Sc; Maksym Kryvonosov M.Sc; Daryna Yakumenko M.Sc; Evgenia Goncharyk M.Sc; e Olha Shapoval, doutorando no Departamento de Fisiologia, Faculdade de Biologia, Ecologia e Medicina, Universidade Oles Honchar Dnipro, Dnipro, Ucrânia por suas contribuições solidárias e úteis. Os dados foram obtidos como parte da dissertação de doutorado de Dmitry Frank.

Os experimentos foram realizados seguindo as recomendações das Declarações de Helsinque e Tóquio e das Diretrizes para o Uso de Animais Experimentais da Comunidade Europeia. Os experimentos foram aprovados pelo Comitê de Cuidados Com Animais da Universidade Ben-Gurion do Negev. Um cronograma de protocolo é ilustrado na Figura 1.
1. Procedimentos cirúrgicos e tbi de percussão de fluido
<ol><li>Selecione ratos adultos machos e femininos Sprague-Dawley, al...

<ol>
	<li>Binder, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persisting+symptoms+after+mild+head+injury:+A+review+of+the+postconcussive+syndrome.">Persisting symptoms after mild head injury: A review of the postconcussive syndrome.</a> Journal of Clinical and Experimental Neuropsychology. 8 (4), 323-346 (1986).</li><li>Binder, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+mild+head+trauma.+Part+II:+Clinical+implications.">A review of mild head trauma. Part II: Clinical implications.</a> Journal of Clinical and Experimental Neuropsychology. 19 (3), 432-457 (1997).</li><li>Binder, L. M., Rohling, M. L., Larrabee, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+mild+head+trauma.+Part+I:+Meta-analytic+review+of+neuropsychological+studies.">A review of mild head trauma. Part I: Meta-analytic review of neuropsychological studies.</a> Journal of Clinical and Experimental Neuropsychology. 19 (3), 421-431 (1997).</li><li>Leininger, B. E., Gramling, S. E., Farrell, A. D., Kreutzer, J. S., Peck, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropsychological+deficits+in+symptomatic+minor+head+injury+patients+after+concussion+and+mild+concussion.">Neuropsychological deficits in symptomatic minor head injury patients after concussion and mild concussion.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery &amp; Psychiatry. 53 (4), 293-296 (1990).</li><li>Levin, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobehavioral+outcome+following+minor+head+injury:+a+three-center+study.">Neurobehavioral outcome following minor head injury: a three-center study.</a> Journal of Neurosurgery. 66 (2), 234-243 (1987).</li><li>McMillan, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minor+head+injury.">Minor head injury.</a> Current Opinion in Neurology. 10 (6), 479-483 (1997).</li><li>Millis, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+neuropsychological+outcome+after+traumatic+brain+injury.">Long-term neuropsychological outcome after traumatic brain injury.</a> The Journal of Head Trauma Rehabilitation. 16 (4), 343-355 (2001).</li><li>Stuss, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reaction+time+after+head+injury:+fatigue,+divided+and+focused+attention,+and+consistency+of+performance.">Reaction time after head injury: fatigue, divided and focused attention, and consistency of performance.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery &amp; Psychiatry. 52 (6), 742-748 (1989).</li><li>Gurkoff, G. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+metric,+topological,+and+temporal+ordering+memory+tasks+after+lateral+fluid+percussion+injury.">Evaluation of metric, topological, and temporal ordering memory tasks after lateral fluid percussion injury.</a> Journal of Neurotrauma. 30 (4), 292-300 (2013).</li><li>Goodrich-Hunsaker, N. J., Howard, B. P., Hunsaker, M. R., Kesner, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+topological+task+adapted+for+rats:+Spatial+information+processes+of+the+parietal+cortex.">Human topological task adapted for rats: Spatial information processes of the parietal cortex.</a> Neurobiology of Learning and Memory. 90 (2), 389-394 (2008).</li><li>Goodrich-Hunsaker, N. J., Hunsaker, M. R., Kesner, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissociating+the+role+of+the+parietal+cortex+and+dorsal+hippocampus+for+spatial+information+processing.">Dissociating the role of the parietal cortex and dorsal hippocampus for spatial information processing.</a> Behavioral Neuroscience. 119 (5), 1307 (2005).</li><li>Goodrich-Hunsaker, N. J., Hunsaker, M. R., Kesner, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+interactions+and+dissociations+of+the+dorsal+hippocampus+subregions:+how+the+dentate+gyrus,+CA3,+and+CA1+process+spatial+information.">The interactions and dissociations of the dorsal hippocampus subregions: how the dentate gyrus, CA3, and CA1 process spatial information.</a> Behavioral Neuroscience. 122 (1), 16 (2008).</li><li>Rosenfeld, C. S., Ferguson, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Barnes+maze+testing+strategies+with+small+and+large+rodent+models.">Barnes maze testing strategies with small and large rodent models.</a> Journal of Visualized Experiments:JoVE. (84), e51194 (2014).</li><li>O'leary, T. P., Brown, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+apparatus+design+and+test+procedure+on+learning+and+memory+performance+of+C57BL/6J+mice+on+the+Barnes+maze.">The effects of apparatus design and test procedure on learning and memory performance of C57BL/6J mice on the Barnes maze.</a> Journal of Neuroscience Methods. 203 (2), 315-324 (2012).</li><li>Bromley-Brits, K., Deng, Y., Song, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morris+water+maze+test+for+learning+and+memory+deficits+in+Alzheimer's+disease+model+mice.">Morris water maze test for learning and memory deficits in Alzheimer's disease model mice.</a> Journal of Visualized Experiments:JoVE. (53), e2920 (2011).</li><li>Smith, C., Rose, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+a+paradoxical+sleep+window+for+place+learning+in+the+Morris+water+maze.">Evidence for a paradoxical sleep window for place learning in the Morris water maze.</a> Physiology &amp; Behavior. 59 (1), 93-97 (1996).</li><li>Roof, R. L., Zhang, Q., Glasier, M. M., Stein, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gender-specific+impairment+on+Morris+water+maze+task+after+entorhinal+cortex+lesion.">Gender-specific impairment on Morris water maze task after entorhinal cortex lesion.</a> Behavioural Brain Research. 57 (1), 47-51 (1993).</li><li>Deacon, R. M., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T-maze+alternation+in+the+rodent.">T-maze alternation in the rodent.</a> Nature Protocols. 1 (1), 7 (2006).</li><li>Penley, S. C., Gaudet, C. M., Threlkeld, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+an+eight-arm+radial+water+maze+to+assess+working+and+reference+memory+following+neonatal+brain+injury.">Use of an eight-arm radial water maze to assess working and reference memory following neonatal brain injury.</a> Journal of Visualized Experiments:JoVE. (82), e50940 (2013).</li><li>Davis, A. R., Shear, D. A., Chen, Z., Lu, X. -. C. M., Tortella, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+two+cognitive+test+paradigms+in+a+penetrating+brain+injury+model.">A comparison of two cognitive test paradigms in a penetrating brain injury model.</a> Journal of Neuroscience Methods. 189 (1), 84-87 (2010).</li><li>Jones, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+traumatic+brain+injury+induces+a+pervasive+hyperanxious+phenotype+in+rats.">Experimental traumatic brain injury induces a pervasive hyperanxious phenotype in rats.</a> Journal of Neurotrauma. 25 (11), 1367-1374 (2008).</li><li>Kabadi, S. V., Hilton, G. D., Stoica, B. A., Zapple, D. N., Faden, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluid-percussion-induced+traumatic+brain+injury+model+in+rats.">Fluid-percussion-induced traumatic brain injury model in rats.</a> Nature Protocols. 5 (9), 1552 (2010).</li><li>Ohayon, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-free+DNA+as+a+marker+for+prediction+of+brain+damage+in+traumatic+brain+injury+in+rats.">Cell-free DNA as a marker for prediction of brain damage in traumatic brain injury in rats.</a> Journal of Neurotrauma. 29 (2), 261-267 (2012).</li><li>Frank, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+Diffuse+Axonal+Brain+Injury+in+Rats+Based+on+Rotational+Acceleration.">Induction of Diffuse Axonal Brain Injury in Rats Based on Rotational Acceleration.</a> Journal of Visualized Experiments:JoVE. (159), e61198 (2020).</li><li>Hunter, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+assessments+in+mice+and+rats+after+focal+stroke.">Functional assessments in mice and rats after focal stroke.</a> Neuropharmacology. 39 (5), 806-816 (2000).</li><li>Yarnell, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+revised+neurobehavioral+severity+scale+(NSS-R)+for+rodents.">The revised neurobehavioral severity scale (NSS-R) for rodents.</a> Current Protocols in Neuroscience. 75, 1-16 (2016).</li><li>Fujimoto, S. T., Longhi, L., Saatman, K. E., McIntosh, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+and+cognitive+function+evaluation+following+experimental+traumatic+brain+injury.">Motor and cognitive function evaluation following experimental traumatic brain injury.</a> Neuroscience &amp; Biobehavioral Reviews. 28 (4), 365-378 (2004).</li><li>Hausser, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detecting+behavioral+deficits+in+rats+after+traumatic+brain+injury.">Detecting behavioral deficits in rats after traumatic brain injury.</a> Journal of Visualized Experiments:JoVE. (131), e56044 (2018).</li><li>Ma, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+in+traumatic+brain+injury:+a+multi-dimensional+exploration+in+genes,+hormones,+cells,+individuals,+and+society.">Sex differences in traumatic brain injury: a multi-dimensional exploration in genes, hormones, cells, individuals, and society.</a> Chinese Neurosurgical Journal. 5 (1), 1-9 (2019).</li><li>Shahrokhi, N., Khaksari, M., Soltani, Z., Mahmoodi, M., Nakhaee, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+sex+steroid+hormones+on+brain+edema,+intracranial+pressure,+and+neurologic+outcomes+after+traumatic+brain+injury.">Effect of sex steroid hormones on brain edema, intracranial pressure, and neurologic outcomes after traumatic brain injury.</a> Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 88 (4), 414-421 (2010).</li><li>Farace, E., Alves, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Do+women+fare+worse:+a+metaanalysis+of+gender+differences+in+traumatic+brain+injury+outcome.">Do women fare worse: a metaanalysis of gender differences in traumatic brain injury outcome.</a> Journal of Neurosurgery. 93 (4), 539-545 (2000).</li><li>Basso, M. R., Harrington, K., Matson, M., Lowery, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FORUM+sex+differences+on+the+WMS-III:+findings+concerning+verbal+paired+associates+and+faces.">FORUM sex differences on the WMS-III: findings concerning verbal paired associates and faces.</a> The Clinical Neuropsychologist. 14 (2), 231-235 (2000).</li><li>Janowsky, J. S., Chavez, B., Zamboni, B. D., Orwoll, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cognitive+neuropsychology+of+sex+hormones+in+men+and+women.">The cognitive neuropsychology of sex hormones in men and women.</a> Developmental Neuropsychology. 14 (2-3), 421-440 (1998).</li><li>Halari, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+and+individual+differences+in+cognitive+performance+and+their+relationship+to+endogenous+gonadal+hormones+and+gonadotropins.">Sex differences and individual differences in cognitive performance and their relationship to endogenous gonadal hormones and gonadotropins.</a> Behavioral Neuroscience. 119 (1), 104 (2005).</li><li>Rowe, R. K., Griffiths, D., Lifshitz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pre-Clinical and Clinical Methods in Brain Trauma Research. , 97-110 (2018).</li><li>Kabadi, S. V., Hilton, G. D., Stoica, B. A., Zapple, D. N., Faden, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluid-percussion-induced+traumatic+brain+injury+model+in+rats.">Fluid-percussion-induced traumatic brain injury model in rats.</a> Nature Protocols. 5 (9), 1552-1563 (2010).</li><li>Losurdo, M., Davidsson, J., Sk&#246;ld, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffuse+axonal+injury+in+the+rat+brain:+axonal+injury+and+oligodendrocyte+activity+following+rotational+injury.">Diffuse axonal injury in the rat brain: axonal injury and oligodendrocyte activity following rotational injury.</a> Brain Sciences. 10 (4), 229 (2020).</li><li>Kuts, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+assessing+cerebral+edema,+infarcted+zone+and+blood-brain+barrier+breakdown+in+a+single+post-stroke+rodent+brain.">A novel method for assessing cerebral edema, infarcted zone and blood-brain barrier breakdown in a single post-stroke rodent brain.</a> Frontiers in Neuroscience. 13, 1105 (2019).</li></ol>

Ao direcionar especificamente o processo de informações espaciais métricas, este teste métrico fornece uma ferramenta necessária para entender a deficiência de memória após o TBI. O protocolo apresentado neste artigo é uma modificação das tarefas comportamentais descritas anteriormente11. Uma tarefa métrica descrita anteriormente utilizou dois paradigmas diferentes, cada um consistindo de três sessões de habituação e uma sessão de teste. O primeiro paradigma consistia em aproximar...

A prevalência de déficits neurológicos como atenção, função executiva e certos déficits de memória após lesão cerebral traumática moderada (TCE) é superior a 50%1,2,3,4,5,6,7,8. O TCE pode levar a graves prejuízos na memória espacial de curto prazo, de longo prazo e de trabalho9. Estes prejuízos de memória têm sido observados em modelos de roedores de TCE. Os modelos de roedores permitiram o desenvolvimento de técnicas para testar a memória, permitindo exames mais profundos sobre o efeito do TBI no processamento da memória em sistemas de memória neural.
Dois testes, relacionados ao processamento de informações espaciais topológicas e métricas, respectivamente, auxiliam na medição da memória de trabalho espacial (SWM). O teste topológico depende da alteração do tamanho do espaço ambiental ou dos espaços relacionados de conexão ou gabinete ao redor de um objeto, enquanto o teste métrico avalia alterações nos ângulos ou distância entre os objetos10,11. Goodrich-Hunsaker et al. adaptaram pela primeira vez o teste topológico humano para ratos10 e aplicaram a tarefa métrica para dissociar os papéis do córtex parietal (PC) e do hipocampo dorsal no processamento de informações espaciais11. Da mesma forma, Gurkoff e colegas avaliaram tarefas de memória métrica, topológica e temporal após lesão de percussão de fluido lateral9. Há uma correlação entre danos a determinadas regiões do cérebro e comprometimento da memória métrica ou topológica. Tem sido sugerido que o prejuízo de memória métrica está relacionado a lesões em giros dentados dorsais bilaterais e amonose de cornu (CA) sub-região CA3 do hipocampo, e que o prejuízo de memória topológica está relacionado às lesões parietal corxais bilaterais10,12.
O objetivo deste protocolo é avaliar o déficit de memória espacial em uma população de ratos através de uma tarefa métrica. Este método é uma alternativa adequada para investigar mecanismos de SWM após lesão cerebral, e suas vantagens incluem a relativa facilidade de implementação, alta sensibilidade, baixo custo de reprodutibilidade, possibilidade de observação dinâmica e um ambiente de baixo estresse. Comparado com outras tarefas comportamentais como o labirinto Barnes13,14, Morris tarefa de navegação aquática15,16,17, ou tarefas de labirinto espacial18,19, este teste métrico é menos complicado. Devido à sua facilidade de implementação, o teste métrico requer um período de treinamento mais curto e menos estressante e ocorre durante apenas 2 dias9: 1 dia para habituação e 1 dia para a tarefa. Além disso, nosso teste proposto é mais fácil de realizar do que outros testes de baixo estresse, como a tarefa de reconhecimento de objetos novos (NOR), e não requer o dia extra de habitação20.
Este artigo fornece um modelo simples para avaliar SWM após lesão cerebral. Essa avaliação do PÓS-TBI SWM pode auxiliar em uma investigação mais abrangente de sua fisiopatologia.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2% chlorhexidine in 70% alcohol solution</td>
			<td>SIGMA - ALDRICH</td>
			<td>500 cc</td>
			<td>For general antisepsis of the skin in the operatory field</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Bupivacaine 0.1 %</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="3">4 boards of different thicknesses (1.5cm, 2.5cm, 5cm and 8.5cm)</td>
			<td>This is to evaluate neurological defect</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Nylon suture</td>
			<td>4-00</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bottles</td>
			<td>Techniplast</td>
			<td>ACBT0262SU</td>
			<td>150 ml bottles filled with 100 ml of water and 100 ml 1%(w/v) sucrose solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bottlses (four) for topological an metric tasks</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For objects used two little bottles, first round (height 13.5 cm) and second faceted (height 20 cm) shape and two big faceted bottles, first 9x6 cm (height 21 cm) and second 7x7 cm (height 21 cm).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diamond Hole Saw Drill 3mm diameter</td>
			<td></td>
			<td>Glass Hole Saw Kit</td>
			<td>Optional.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Weighing Scale</td>
			<td>SIGMA - ALDRICH</td>
			<td>Rs 4,000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting scissors</td>
			<td>SIGMA - ALDRICH</td>
			<td>Z265969</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 99.9 %</td>
			<td>&#160;Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td>5%-10% solution used to clean equipment and remove odors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EthoVision XT (Video software)</td>
			<td>Noldus, Wageningen, Netherlands</td>
			<td></td>
			<td>Optional</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluid-percussion device</td>
			<td>custom-made at the university workshop</td>
			<td></td>
			<td>&#160;&#160; No specific brand is recommended.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponges</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>22-362-178</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves (thin laboratory gloves)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Optional.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heater with thermometer</td>
			<td>Heatingpad-1</td>
			<td>Model: HEATINGPAD-1/2</td>
			<td>&#160;&#160; No specific brand is recommended.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horizon-XL</td>
			<td>Mennen Medical Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluran, USP 100%</td>
			<td>Piramamal Critical Care, Inc</td>
			<td>NDC 66794-017</td>
			<td>Anesthetic liquid for inhalation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Office 365 ProPlus</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td>-</td>
			<td>Microsoft Office Excel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olympus BX 40 microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating&#160; forceps</td>
			<td>SIGMA - ALDRICH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating&#160; Scissors</td>
			<td>SIGMA - ALDRICH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PC Computer for USV recording and data analyses</td>
			<td>Intel</td>
			<td></td>
			<td>Intel&#174; core i5-6500 CPU @ 3.2GHz, 16 GB RAM, 64-bit operating system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plexiglass boxes linked by a narrow passage</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Two transparent 30 cm &#215; 20 cm &#215; 20 cm plexiglass boxes linked by a narrow 15 cm &#215; 15 cm &#215; 60 cm passage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Purina Chow</td>
			<td>Purina</td>
			<td>5001</td>
			<td>Rodent laboratory chow given to rats, mice and hamster is a life-cycle nutrition that has been used in biomedical researc for over 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat cages&#160; (rat home cage or another enclosure)</td>
			<td>Techniplast</td>
			<td>2000P</td>
			<td>No specific brand is recommended</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blades 11</td>
			<td>SIGMA - ALDRICH</td>
			<td>S2771</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPSS</td>
			<td>SPSS Inc., Chicago, IL, USA</td>
			<td>&#160;20 package</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotaxic Instrument</td>
			<td>custom-made at the university workshop</td>
			<td></td>
			<td>&#160;&#160; No specific brand is recommended</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Timing device</td>
			<td>Interval Timer:Timing for recording USV&#39;s</td>
			<td></td>
			<td>Optional. Any timer will do, although it is convenient to use an interval timer if you are tickling multiple rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Topological and metric tasks device</td>
			<td>Self made in Ben Gurion University of Negev</td>
			<td></td>
			<td>White circular platform 200 cm in diameter and 1 cm thick on table</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Video camera</td>
			<td>Logitech</td>
			<td>C920 HD PRO WEBCAM</td>
			<td>Digital video camera for high definition recording of rat behavior under plus maze test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Windows 10</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a metric test for assessing spatial working memory in adult rats following traumatic brain injury

Prejuízos à memória sensorial, de curto e longo prazo são efeitos colaterais comuns após lesão cerebral traumática (TCE). Devido às limitações éticas dos estudos humanos, os modelos animais fornecem alternativas adequadas para testar métodos de tratamento e estudar os mecanismos e complicações relacionadas da condição. Modelos experimentais de roedores têm sido historicamente os mais utilizados devido à sua acessibilidade, baixo custo, reprodutibilidade e abordagens validadas. Um teste métrico, que testa a capacidade de recordar a colocação de dois objetos a várias distâncias e ângulos um do outro, é uma técnica para estudar o comprometimento na memória de trabalho espacial (SWM) após o TBI. As vantagens significativas das tarefas métricas incluem a possibilidade de observação dinâmica, baixo custo, reprodutibilidade, relativa facilidade de implementação e ambiente de baixo estresse. Aqui, apresentamos um protocolo de teste métrico para medir o comprometimento do SWM em ratos adultos após a TBI. Este teste fornece uma maneira viável de avaliar a fisiologia e a fisiopatologia da função cerebral de forma mais eficaz.

A significância das comparações entre os grupos foi determinada por meio do teste De Mann-Whitney. A significância estatística dos resultados foi considerada em P < 0,05, enquanto a relevância estatisticamente alta foi medida em P < 0,01.
Os resultados não mostraram diferenças no INSS entre todos os grupos antes da intervenção e 28 dias após o TCE. Cada grupo era composto por 12 fêmeas ou 12 ratos machos. As pontuações do NSS obtiveram 48 h após a apresentação do TCE na <stron...

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A Metric Test for Assessing Spatial Working Memory in Adult Rats Following Traumatic Brain Injury

Lesão cerebral traumática (TCE) é comumente associada com prejuízo de memória. Aqui, apresentamos um protocolo para avaliar a memória de trabalho espacial após o TBI através de uma tarefa métrica. Um teste métrico é uma ferramenta útil para estudar o prejuízo de memória de trabalho espacial após o TBI.

Um teste métrico para avaliar a memória espacial de trabalho em ratos adultos após lesão cerebral traumática

Impairments to sensory, short-term, and long-term memory are common side effects after traumatic brain injury (TBI). Due to the ethical limitations of ...

Lesão cerebral traumática é comumente associada com prejuízo de memória. Aqui, apresentamos um protocolo para avaliar a memória de trabalho espacial após lesão cerebral traumática, através de uma tarefa métrica. As principais vantagens das tarefas métricas incluem a possibilidade de observação dinâmica, reprodutibilidade de baixo custo, relativa facilidade de implementação e ambiente de baixo estresse.Para avaliar o escore de gravidade neurológica após lesão de percussão de fluido parasagittal, coloque o rato Adulto Sprague Dawley no centro de um círculo de 50 centímetros de diâmetro, três vezes e monitore sua capacidade de sair do círculo. Para testar a perda do reflexo de redocimento, coloque o animal de costas na palma da mão e dê uma pontuação de um se o rato for capaz de se corrigir. Para testar a hemiplegia, avalie a incapacidade do rato de resistir ao posicionamento forçado.Para testar a dobra reflexiva do membro traseiro, levante o animal pela cauda. Para testar a habilidade de andar em linha reta, coloque o rato no chão. Para testar o reflexo de pinna, realize estimulação leve e tátil para observar a retração da orelha.Para testar o reflexo da córnea, aplique levemente uma vara macia no olho e meça a resposta piscante. Para testar o reflexo do tempo, arraste uma caneta pela parte superior da gaiola de arame e registe a resposta do animal. Para avaliar a perda de comportamento em prostração, coloque o rato em um novo ambiente e observe se o rato move seus bigodes, cheira ou corre.Em seguida, teste os reflexos do membro para colocação nos membros dianteiros esquerdo e direito seguidos pelos membros traseiros esquerdo e direito. Para testar o equilíbrio, realize uma tarefa de balanceamento do feixe colocando o rato em um feixe de 1,5 centímetros de largura, para uma sessão de 20, 40 e maior que a segunda sessão. Em seguida, execute um teste de caminhada de feixe usando três feixes de larguras diferentes.Antes de realizar a tarefa métrica, coloque uma plataforma circular preta de 200 centímetros de espessura, de um centímetro de espessura, em uma mesa de 80 centímetros de altura e coloque dois objetos no centro da plataforma, com 68 centímetros de distância. Instale uma câmera com o software de computador necessário para capturar, salvar e processar dados, a uma altura de 290 centímetros do chão. Um dia antes da análise colocar o rato na plataforma por 10 minutos para habituar o animal ao novo ambiente.No dia da tarefa, coloque o rato no final da plataforma, equidistante dos objetos por um período de 15 minutos de habituação e comece a gravar. Ao final do período experimental de habituação, transfira o rato para uma gaiola individual por cinco minutos e limpe a plataforma com 5 a 10% de álcool. Reduza a distância entre os objetos para 34 centímetros e coloque o rato na plataforma por cinco minutos enquanto registra sua atividade de exploração.Limpe a plataforma novamente, antes de prosseguir com o próximo animal. Antes de analisar os arquivos de vídeo, insira a chave de hardware do software e inicie o software de rastreamento de vídeo e abra o modelo predefinido. Depois de verificar, duplicar e renomear as configurações de controle de teste e detecção da arena no campo de exibição principal, clique com o botão direito do mouse para selecionar o plano de fundo de captura.No menu de navegação selecione a localização do arquivo de vídeo a ser usada como imagem de fundo. Capture a imagem e marque as áreas e zonas investigadas para calibrar a imagem para análise. Execute a mesma configuração para as configurações de controle de teste e detecção.Depois de baixar a lista de arquivos de vídeo para análise da lista de testes, adicione os vídeos e indique o local com as configurações necessárias. Em seguida, selecione a aquisição e inicie o teste e exporte todos os dados em uma planilha. O grupo controle não mostra nenhum déficit neurológico, 48 horas após a lesão falsa.Após o TCE, os déficits neurológicos são significativamente maiores em animais feridos tanto no sexo masculino quanto no feminino. Durante a tarefa métrica, o tempo de exploração de objetos é significativamente mais curto para os ratos TBI machos do que para os ratos operados por sham masculino. O mesmo padrão é observado para as fêmeas TBI e ratos femininos operados por sham.Seguindo a tarefa métrica, podemos executar outros métodos para avaliação de memória, como o labirinto barnes e tarefas topológicas e de labirinto de água. A tarefa métrica também permite mais pesquisas sobre o prejuízo de memória em modelos comparáveis de danos neurológicos, como modelos de lesão cerebral axonal difusa e derrame.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Chromatin Immunoprecipitation from Dorsal Root Ganglia Tissue following Axonal Injury

Cromatina imunoprecipitação de Tissue Dorsal Root Gânglios seguintes Lesão Axonal

Axons in the central nervous system (CNS) do not regenerate while those in the peripheral nervous system (PNS) do regenerate 
to a limited extent after ...

Neurociência

Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer&#39;s Disease Model Mice

Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice

Morris Teste Maze Água para déficits de aprendizagem e memória em camundongos Alzheimer Disease Modelo

The Morris Water Maze (MWM) was first established by neuroscientist Richard G. Morris in 1981 in order to test hippocampal-dependent learning, including ...

Lateral Fluid Percussion: Model of Traumatic Brain Injury in Mice

Percussão Fluid lateral: Modelo de Lesão em Ratos

Traumatic brain injury (TBI) research has attained renewed momentum due to the increasing awareness of head injuries, which result in morbidity and ...

T-maze Forced Alternation and Left-right Discrimination Tasks for Assessing Working and Reference Memory in Mice

T-maze Alternância forçado e Tarefas esquerda-direita para a Avaliação da Discriminação de Trabalho e Memória de Referência em Ratos

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in ...

Investigations on Alterations of Hippocampal Circuit Function Following Mild Traumatic Brain Injury

Investigações sobre alterações da função Circuito Hippocampal Após lesão cerebral traumática leve

Traumatic Brain Injury (TBI) afflicts more than 1.7 million people in the United States each year and even mild TBI can lead to persistent neurological ...

A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila

A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila

Um Método para infligir Cabeça Fechada Lesão cerebral traumático em<em&gt; Drosophila</em

Traumatic brain injury (TBI) affects millions of people each year, causing impairment of physical, cognitive, and behavioral functions and death. Studies ...

Assessing Spatial Learning and Memory in Small Squamate Reptiles

Avaliando a aprendizagem espacial e memória em pequenas Squamata Répteis

Clinical research has leveraged a variety of paradigms to assess cognitive decline, commonly targeting spatial learning and memory abilities. However, ...

Stereotactic Atlas-Guided Laser Capture Microdissection of Brain Regions Affected by Traumatic Injury

Estereotáxica guiada por Atlas Laser Microdissection de captura de regiões do cérebro afetadas por lesão traumática

The ability to isolate specific brain regions of interest can be impeded in tissue disassociation techniques that do not preserve their spatial ...

A Novel In Vitro Model of Blast Traumatic Brain Injury

A Novel In Vitro Model of Blast Traumatic Brain Injury

Um modelo de romance In Vitro de explosão traumatismo crânio-encefálico

Traumatic brain injury is a leading cause of death and disability in military and civilian populations. Blast traumatic brain injury results from the ...

Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries

Efeitos de Neurotrauma induzida por explosão em roedores pressurizado artérias cerebrais de médio

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral ...