Name: directed induction of retinal organoids from human pluripotent stem cells
Uploaded: 2021-04-21T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Directed Induction of Retinal Organoids from Human Pluripotent Stem Cells at JoVE.com

We bedanken de leden van het 502-laboratorium voor hun technische ondersteuning en nuttige opmerkingen over het manuscript. Dit werk werd gedeeltelijk ondersteund door de Beijing Municipal Natural Science Foundation (Z200014) en het National Key R&D Program of China (2017YFA0105300).

Deze studie werd goedgekeurd door de institutionele ethische commissie van het Beijing Tongren Hospital, Capital Medical University. H9 hESCs werden verkregen van het WiCell Research Institute en genetisch gemanipuleerd tot tdTomato-gelabelde cellijn.
1. Generatie van menselijke RO's
<ol><li>Kweek de hESCs onder feedervrije omstandigheden.<ol><li>Bekleed een putje van een 6-wellsplaat met 1 ml reagens A (materiaaltabel) bij 37 °C gedurende ten minste een half uur volgens de...

<ol>
	<li>Xie, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chromatin+accessibility+analysis+reveals+regulatory+dynamics+of+developing+human+retina+and+hiPSC-derived+retinal+organoids.">Chromatin accessibility analysis reveals regulatory dynamics of developing human retina and hiPSC-derived retinal organoids.</a> Science Advances. 6 (6), 5247 (2020).</li><li>Lu, Y. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-Cell+Analysis+of+Human+Retina+Identifies+Evolutionarily+Conserved+and+Species-Specific+Mechanisms+Controlling+Development.">Single-Cell Analysis of Human Retina Identifies Evolutionarily Conserved and Species-Specific Mechanisms Controlling Development.</a> Developmental Cell. 53 (4), 473-491 (2020).</li><li>Cowan, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Types+of+the+Human+Retina+and+Its+Organoids+at+Single-Cell+Resolution.">Cell Types of the Human Retina and Its Organoids at Single-Cell Resolution.</a> Cell. 182 (6), 1623-1640 (2020).</li><li>Jin, Z. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stemming+retinal+regeneration+with+pluripotent+stem+cells.">Stemming retinal regeneration with pluripotent stem cells.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 69, 38-56 (2019).</li><li>Nakano, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-formation+of+optic+cups+and+storable+stratified+neural+retina+from+human+ESCs.">Self-formation of optic cups and storable stratified neural retina from human ESCs.</a> Cell Stem Cell. 10 (6), 771-785 (2012).</li><li>Pan, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=COCO+enhances+the+efficiency+of+photoreceptor+precursor+differentiation+in+early+human+embryonic+stem+cell-derived+retinal+organoids.">COCO enhances the efficiency of photoreceptor precursor differentiation in early human embryonic stem cell-derived retinal organoids.</a> Stem Cell Research and Therapy. 11 (1), 366 (2020).</li><li>Zhou, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+of+human+embryonic+stem+cells+into+cone+photoreceptors+through+simultaneous+inhibition+of+BMP,+TGFbeta+and+Wnt+signaling.">Differentiation of human embryonic stem cells into cone photoreceptors through simultaneous inhibition of BMP, TGFbeta and Wnt signaling.</a> Development. 142 (19), 3294-3306 (2015).</li><li>Deng, W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+Correction+Reverses+Ciliopathy+and+Photoreceptor+Loss+in+iPSC-Derived+Retinal+Organoids+from+Retinitis+Pigmentosa+Patients.">Gene Correction Reverses Ciliopathy and Photoreceptor Loss in iPSC-Derived Retinal Organoids from Retinitis Pigmentosa Patients.</a> Stem Cell Reports. 10 (4), 1267-1281 (2018).</li><li>Gao, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient-Specific+Retinal+Organoids+Recapitulate+Disease+Features+of+Late-Onset+Retinitis+Pigmentosa.">Patient-Specific Retinal Organoids Recapitulate Disease Features of Late-Onset Retinitis Pigmentosa.</a> Frontiers in Cell and Developmental Biology. 8, 128 (2020).</li><li>Zhang, C. J., Ma, Y., Jin, Z. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+road+to+restore+vision+with+photoreceptor+regeneration.">The road to restore vision with photoreceptor regeneration.</a> Experimental Eye Research. 202, 108283 (2020).</li><li>Reichman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+confluent+human+iPS+cells+to+self-forming+neural+retina+and+retinal+pigmented+epithelium.">From confluent human iPS cells to self-forming neural retina and retinal pigmented epithelium.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the U. S. A. 111 (23), 8518-8523 (2014).</li><li>Kuwahara, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+a+ciliary+margin-like+stem+cell+niche+from+self-organizing+human+retinal+tissue.">Generation of a ciliary margin-like stem cell niche from self-organizing human retinal tissue.</a> Nature Communications. 6, 6286 (2015).</li></ol>

Retinale organoïde differentiatie is een wenselijke methode voor het genereren van ruime functionele retinale cellen. De RO is een samenstelling van verschillende retinale cellen, zoals ganglioncellen, bipolaire cellen en fotoreceptoren, gegenereerd door pluripotente stamcellen in de richting van het neurale netvlies 4,5,8,9. Hoewel confluente RO's kunnen worden geoogst, is het tijdrovend, wat...

Pluripotente stamcellen (PSC's) worden gekenmerkt door hun zelfvernieuwing en het vermogen om te differentiëren in allerlei somatische cellen. Zo zijn organoïden afgeleid van PSC's een belangrijke hulpbron geworden in onderzoek naar regeneratieve geneeskunde. Retinale degeneratie wordt gekenmerkt door het verlies van fotoreceptoren (staafjes en kegeltjes) en retinaal pigmentepitheel. Retinale celvervanging kan een bemoedigende behandeling zijn voor deze ziekte. Het is echter niet haalbaar om menselijke netvliezen te verkrijgen voor ziekteonderzoek en therapie. Daarom zijn retinale organoïden (RO's) afgeleid van PSC's, die effectief en met succes meerlagige inheemse retinale cellen recapituleren, gunstig voor fundamenteel en translationeel onderzoek 1,2,3. Ons onderzoek richt zich op RO-differentiatie om voldoende en kwaliteitscellen te leveren voor het bestuderen van retinale degeneratie4.
Methoden voor het differentiëren van RO's zijn voortdurend in opkomst, met driedimensionale (3D) suspensiedifferentiatie die in 2012 door het Sasai-laboratorium werd gepionierd5. We introduceerden de CRX-tdTomato-tag in de menselijke embryonale stamcellen (hESCs) om specifiek de voorlopercellen van de fotoreceptor te volgen en pasten de methode aan met de toevoeging van COCO, een multifunctionele antagonist van de Wnt-, TGF-β- en BMP-routes6. Van COCO is aangetoond dat het de differentiatie-efficiëntie van fotoreceptorvoorlopers en kegels efficiënt verbetert 6,7.
Al met al hebben we, door de klassieke differentiatiemethode aan te passen, een toegankelijk protocol ontwikkeld om overvloedige voorlopers en kegels van fotoreceptoren van menselijke RO's te oogsten voor het analyseren van de retinale ziekte geassocieerd met de fotoreceptoren door middel van laboratoriumonderzoek en voor verdere klinische toepassing / transplantatie.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-mercaptoethanol</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>21985-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>COCO</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>3047-CC-050</td>
			<td>DAN Domain family of BMP antagonists</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F-12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10565-042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D2650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C141905005BT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>15575020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS), Qualified for Human Embryonic Stem Cells</td>
			<td>Biological Industry</td>
			<td>04-002-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GMEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11710-035</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KnockOut Serum Replacement-Multi-Species</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A3181502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Non-essential Amino Acid Solution (100X)</td>
			<td>sigma</td>
			<td>M7145</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen Strep</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primesurface 96 V-plate</td>
			<td>Sbio</td>
			<td>MS9096SZ</td>
			<td>Cell aggregation in 1.2.7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyruvate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S8636</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagent A</td>
			<td>BD</td>
			<td>356231</td>
			<td>Matrigel in 1.1.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagent B</td>
			<td>StemCell</td>
			<td>5990</td>
			<td>mTeSR- E8 , PSCs basal medium in 1.1.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagent C</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12563-011</td>
			<td>TrypLE Express in 1.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagent D</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11284932001</td>
			<td>DNase I , in 1.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retinoic acid</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R2625-100MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SAG</td>
			<td>Enzo Life Science</td>
			<td>ALX-270-426-M001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Supplement 1</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>17502-048</td>
			<td>N-2 Supplement (100X), Liquid, supplemet in medum III</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taurine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T-8691-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200056</td>
			<td>organoids dissociation in 2.1.3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wnt Antagonist I, IWR-1-endo - Calbiochem</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>681669</td>
			<td>Wnt inhibitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y-27632 2HCl</td>
			<td>Selleck</td>
			<td>S1049</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

directed induction of retinal organoids from human pluripotent stem cells

Retinale celtransplantatie is een veelbelovende therapeutische aanpak, die de retinale architectuur kan herstellen en de visuele mogelijkheden voor het gedegenereerde netvlies kan stabiliseren of zelfs verbeteren. Niettemin wordt de vooruitgang in celvervangingstherapie momenteel geconfronteerd met de uitdagingen van het vereisen van een kant-en-klare bron van hoogwaardige en gestandaardiseerde menselijke netvliezen. Daarom is een eenvoudig en stabiel protocol nodig voor de experimenten. Hier ontwikkelen we een geoptimaliseerd protocol, gebaseerd op een zelforganiserende methode met behulp van exogene moleculen en reagens A, evenals handmatige excisie om de driedimensionale human retina organoids (RO) te genereren. De van menselijke pluripotente stamcellen (PSC's) afgeleide RO drukt specifieke markers voor fotoreceptoren uit. Met de toevoeging van COCO, een multifunctionele antagonist, wordt de differentiatie-efficiëntie van voorlopers en kegels van fotoreceptoren aanzienlijk verhoogd. Het efficiënte gebruik van dit systeem, dat de voordelen heeft van cellijnen en primaire cellen, en zonder de bronproblemen die met de laatste gepaard gaan, zou confluente retinale cellen kunnen produceren, vooral fotoreceptoren. De differentiatie van PSC's naar RO biedt dus een optimaal en biorelevant platform voor ziektemodellering, geneesmiddelenscreening en celtransplantatie.

De schematische illustratie toont het differentiatieprotocol om voorlopercellen met COCO te verbeteren (figuur 1). Van PSC tot RO's, tal van details kunnen resultaatvariaties veroorzaken. Het wordt aanbevolen om elke stap en zelfs het catalogusnummer en het lotnummer van elk medium vast te leggen om de hele procedure bij te houden.
Hierin bieden we heldere veldbeelden voor dag 6, 12, 18 en 45 (figuur 2). Op dag 6 hebben de organoïden...

Watch this Scientific Journal Video about Directed Induction of Retinal Organoids from Human Pluripotent Stem Cells at JoVE.com

Directed Induction of Retinal Organoids from Human Pluripotent Stem Cells

Met behulp van een zelforganiserende methode ontwikkelen we met de toevoeging van COCO een protocol dat de generatie van fotoreceptoren aanzienlijk zou kunnen verhogen.

Gerichte inductie van retinale organoïden uit menselijke pluripotente stamcellen

Retinal cell transplantation is a promising therapeutic approach, which could restore the retinal architecture and stabilize or even improve the visual ...

Dit is een model voor retinale ziekte en emuleert het in vivo netvlies. Tot op zekere hoogte zou het dierproeven kunnen vervangen. Het protocol is geoptimaliseerd voor de kwaliteit en kwantiteit van de voorlopers van de fotoreceptor in de retinale organoïden, en de fotoreceptor is de sleutel tot verschillende onomkeerbare blindheidsaandoeningen.Begin met het kweken van de menselijke embryonale stamcellen, of hESCs, onder feedervrije omstandigheden. Om dit te doen, bedekt u een put van een zesputtenplaat met één milliliter van 100 microgram per milliliter reagens A en incubeert u de plaat gedurende ten minste een half uur bij 37 graden Celsius. Ontdooi een aliquot van een miljoen hESCs en centrifugeer het gedurende vijf minuten op 200 xg.Na het verwijderen van het supernatant, zaaien de cellen in de eerder gecoate plaat, samen met twee milliliter reagens B.Passeer de cellen na het bereiken van ongeveer 80% samenvloeiing na ongeveer vier dagen. Nadat u de samenvloeiing hebt bereikt, wast u de cellen met voorverwarmd DPBS en brengt u ze over in 500 microliter vers bereid reagens. Incubeer vervolgens de cellen gedurende 3,5 minuten bij 37 graden Celsius en 5% koolstofdioxide.Maak de cellen los door een paar seconden met de zijkant en onderkant van de plaat te vegen en voeg 500 microliter voorbereid medium één toe. Oogst de losgemaakte cellen in een nieuwe buis van 1,5 milliliter en pipetteer de celsuspensie op en neer. Voeg voor het tellen van cellen 100 microliter celsuspensie toe aan 900 microliter DPBS.Verdun de 900 microliter van de resterende celsuspensie met medium één in de petrischaal om negen keer 10 tot de vierde krachtcellen per milliliter te bereiken. Voeg 100 microliter verdunde celsuspensie toe aan elke put van een niet-hechtende, V-bodem, 96-well plaat. Draai de plaat gedurende vijf minuten lichtjes op een schudder met lage snelheid en incubeer bij 37 graden Celsius en 5% koolstofdioxide tot dag twee.Voeg op dag twee 20 microliter 1% reagens A toe aan elke put van de 96-well plaat en pipetteer twee keer in het midden om de dode cellen te verspreiden. Reinig de bodem van de plaat voordat u deze incubeert bij 37 graden Celsius en 5% koolstofdioxide tot dag zes. Vervang op dag zes 58 microliter van het medium door 60 microliter vers medium één en ga verder met de incubatie.Oogst op dag 12 de celpellets van de 96-well plaat in een conische buis van 15 milliliter en laat de pellets vijf minuten op natuurlijke wijze bezinken bij kamertemperatuur. Wanneer pellets bezinken, verwijdert u het supernatant zonder de organoïden te verstoren en brengt u de celaggregaten over naar een suspensieschaal van 10 centimeter met 18 milliliter medium twee met reagens A.Incubateer de schaal op 37 graden Celsius en 5% koolstofdioxide tot dag 18. Bevestig op dag 18 de generatie van een semi-transparant optisch blaasje in de schaal en snijd de gegenereerde organoïden met een microchirurgisch mes.Verzamel alle gesneden pellets naar het midden van het gerecht. Oogst vervolgens de cellen in een conische Falcon-buis van 15 milliliter. Wanneer de cellen bezinken, verwijdert u voorzichtig het supernatant en resuspenseert u de pellets in twee petrischalen van 10 centimeter met 18 milliliter medium, drie per schaal.Breng de gerechten voorzichtig over naar de incubator om celaggregatie te voorkomen. Ga door met het kweken van de cellen en verander het medium wekelijks. Analyseer de CRX-expressie na dag 45 tot dag 120.In deze representatieve analyse worden verschillende stadia van de menselijke retinale generatie weergegeven. Op dag zes verschenen organoïden als een aggregaat van dichte verbindingen in een heldere rand met een diameter van ongeveer 600 micrometer. Op dag 12 vond de eerste generatie van de optische blaasjesachtige structuren plaats.De organoïden zonder de juiste blaasjesachtige architectuur werden weggegooid voordat ze op dag 18 in een petrischaaltje werden gekweekt. Tegen dag 30 van de cultuur was de blaasjesachtige architectuur duidelijker en konden inferieure RO's gemakkelijk worden onderscheiden en verwijderd. Vanaf dag 45 drukten de organoïden verschillende markers van voorlopers van fotoreceptoren uit, zoals CRX, RCVRN en OTX2.Door de superieure retinale organoïden te splitsen, wordt de differentiatie-efficiëntie aanzienlijk verbeterd en kunnen meer dan 100 superieure organoïden uit 96 platen worden geoogst.

Research

JoVE Journal

Medicine

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolatie, karakterisering en vergelijkende differentiatie van humane Dental Pulp stamcellen uit permanente tanden met behulp van twee verschillende methoden

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Isolation of Cancer Stem Cells From Human Prostate Cancer Samples

Isolatie van kanker stamcellen uit menselijke stalen van prostaatkanker

The cancer stem cell (CSC) model has been considerably revisited over the last two decades. During this time CSCs have been identified and directly ...

Enrichment for Chemoresistant Ovarian Cancer Stem Cells from Human Cell Lines

Verrijking voor chemoresistent eierstokkanker stamcellen uit menselijke cellijnen

Cancer stem cells (CSCs) are defined as a subset of slow cycling and undifferentiated cells that divide asymmetrically to generate highly proliferative, ...

Generation of Induced Pluripotent Stem Cells from Muscular Dystrophy Patients: Efficient Integration-free Reprogramming of Urine Derived Cells

Generatie van geïnduceerde pluripotente stamcellen van spierdystrofie patiënten: Efficiënte-Integratie gratis herprogrammeren van Urine-afgeleide cellen

Dystrophic cardiomyopathy is a poorly understood consequence of muscular dystrophy. Generating induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) from patients with ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

Studeren alvleesklier- Stamcel Kenmerken voor het ontwikkelen van nieuwe behandelingsstrategieën

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Inductie van versnelde atherosclerose bij muizen: het "Wire-Injury" Model

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Rapid and Efficient Generation of Recombinant Human Pluripotent Stem Cells by Recombinase-mediated Cassette Exchange in the AAVS1 Locus

Rapid and Efficient Generation of Recombinant Human Pluripotent Stem Cells by Recombinase-mediated Cassette Exchange in the AAVS1 Locus

Snelle en efficiënte generatie van recombinant humaan pluripotente stamcellen door Recombinase-gemedieerde Cassette Exchange in de<em&gt; AAVS1</em&gt; Locus

Even with the revolution of gene-targeting technologies led by CRISPR-Cas9, genetic modification of human pluripotent stem cells&#160;(hPSCs)&#160;is ...

Forskolin-induced Swelling in Intestinal Organoids: An In Vitro Assay for Assessing Drug Response in Cystic Fibrosis Patients

Forskolin-induced Swelling in Intestinal Organoids: An In Vitro Assay for Assessing Drug Response in Cystic Fibrosis Patients

Forskoline-geïnduceerde zwelling in Intestinal Organoids: An<em&gt; In Vitro</em&gt; Assay voor het beoordelen van de Drug Response in patiënten met cystische fibrose

Recently-developed cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR)-modulating drugs correct surface expression and/or function of the mutant ...

Ex Vivo Expansion of Hematopoietic Stem Cells from Human Umbilical Cord Blood-derived CD34+ Cells Using Valproic Acid

Ex Vivo Expansion of Hematopoietic Stem Cells from Human Umbilical Cord Blood-derived CD34+ Cells Using Valproic Acid

Ex Vivo expansie van hematopoietische stamcellen uit menselijke navelstreng bloed afkomstige CD34+ cellen met behulp van Valproic zuur

Umbilical cord blood (UCB) units provide an alternative source of human hematopoietic stem cells (HSCs) for patients who require allogeneic bone marrow ...

Induction and Analysis of Oxidative Stress in Sleeping Beauty Transposon-Transfected Human Retinal Pigment Epithelial Cells

Induction and Analysis of Oxidative Stress in Sleeping Beauty Transposon-Transfected Human Retinal Pigment Epithelial Cells

Inductie en analyse van oxidatieve stress in doornroosje Transposon-getransfecteerde menselijke retinale pigmentepitheelcellen

Oxidative stress plays a critical role in several degenerative diseases, including age-related macular degeneration (AMD), a pathology that affects ~30 ...