Name: assessing functional metrics of skeletal muscle health in human skeletal muscle microtissues
Uploaded: 2021-02-18T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing Functional Metrics of Skeletal Muscle Health in Human Skeletal Muscle Microtissues at JoVE.com

हम मोहम्मद अफशर, हाबेन अबराहा, मोहसेन अफशर-बकोशली और सैदेग दावौदी को MyoTACTIC संस्कृति मंच के आविष्कार में योगदान देने और यहां वर्णित निर्माण और विश्लेषण विधियों की स्थापना के लिए धन्यवाद देना चाहते हैं । एचएल को ऑर्गन-ऑन-ए-चिप इंजीनियरिंग एंड एंटरप्रेन्योरशिप और यूनिवर्सिटी ऑफ टोरंटो वाइल्डकैट ग्रेजुएट स्कॉलरशिप में नेचुरल साइंसेज एंड इंजीनियरिंग रिसर्च काउंसिल (एनएसईआरसी) ट्रेनिंग प्रोग्राम से फंडिंग मिली । पीएमजी एंडोजेनस रिपेयर में कनाडा रिसर्च चेयर है और इसे ओंटारियो इंस्टीट्यूट फॉर रिजेनरेटिव मेडिसिन, स्टेम सेल नेटवर्क और मेडिसिन से डिजाइन, कनाडा फर्स्ट रिसर्च एक्सीलेंस प्रोग्राम से इस अध्ययन के लिए समर्थन प्राप्त हुआ। BioRender.com के साथ योजनाबद्ध आरेख बनाए गए थे।

1. पीडीएमएस MyoTACTIC प्लेट निर्माण
नोट: PDMS MyoTACTIC प्लेट निर्माण के लिए एक पीयू नकारात्मक मोल्ड की आवश्यकता होती है, जिसे पहले वर्णित30के रूप में निर्मित किया जा सकता है। MyoTACTIC प्लेट डिजाइन के लिए ?...

<ol>
	<li>Frontera, W. R., Ochala, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+Muscle:+A+brief+review+of+structure+and+function.">Skeletal Muscle: A brief review of structure and function.</a> Calcified Tissue International. 96 (3), 183-195 (2015).</li><li>McGreevy, J. W., Hakim, C. H., McIntosh, M. A., Duan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+Duchenne+muscular+dystrophy:+From+basic+mechanisms+to+gene+therapy.">Animal models of Duchenne muscular dystrophy: From basic mechanisms to gene therapy.</a> DMM Disease Models and Mechanisms. 8 (3), 195-213 (2015).</li><li>Young, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MyoScreen,+a+high-throughput+phenotypic+screening+platform+enabling+muscle+drug+discovery.">MyoScreen, a high-throughput phenotypic screening platform enabling muscle drug discovery.</a> SLAS Discovery. 23 (8), 790-806 (2018).</li><li>DiMasi, J. A., Hansen, R. W., Grabowski, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+price+of+innovation:+New+estimates+of+drug+development+costs.">The price of innovation: New estimates of drug development costs.</a> Journal of Health Economics. 22 (2), 151-185 (2003).</li><li>Pampaloni, F., Reynaud, E. G., Stelzer, E. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+third+dimension+bridges+the+gap+between+cell+culture+and+live+tissue.">The third dimension bridges the gap between cell culture and live tissue.</a> Nature Reviews Molecular Cell Biology. 8 (10), 839-845 (2007).</li><li>Duval, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+physiological+events+in+2D+vs.+3D+cell+culture.">Modeling physiological events in 2D vs. 3D cell culture.</a> Physiology. 32 (4), 266-277 (2017).</li><li>Vandenburgh, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug-screening+platform+based+on+the+contractility+of+tissue-engineered+muscle.">Drug-screening platform based on the contractility of tissue-engineered muscle.</a> Muscle and Nerve. 37 (4), 438-447 (2008).</li><li>Vandenburgh, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+drug+screening+with+contractile+muscle+tissue+engineered+from+dystrophic+myoblasts.">Automated drug screening with contractile muscle tissue engineered from dystrophic myoblasts.</a> The FASEB Journal. 23 (10), 3325-3334 (2009).</li><li>Kim, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+bioprinted+human+skeletal+muscle+constructs+for+muscle+function+restoration.">3D bioprinted human skeletal muscle constructs for muscle function restoration.</a> Scientific Reports. 8 (1), 12307 (2018).</li><li>Takahashi, H., Shimizu, T., Okano, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineered+human+contractile+myofiber+sheets+as+a+platform+for+studies+of+skeletal+muscle+physiology.">Engineered human contractile myofiber sheets as a platform for studies of skeletal muscle physiology.</a> Scientific Reports. 8 (1), 1-11 (2018).</li><li>Afshar Bakooshli, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+3D+culture+model+of+innervated+human+skeletal+muscle+enables+studies+of+the+adult+neuromuscular+junction.">A 3D culture model of innervated human skeletal muscle enables studies of the adult neuromuscular junction.</a> eLife. 8, 1-29 (2019).</li><li>Madden, L., Juhas, M., Kraus, W. E., Truskey, G. A., Bursac, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioengineered+human+myobundles+mimic+clinical+responses+of+skeletal+muscle+to+drugs.">Bioengineered human myobundles mimic clinical responses of skeletal muscle to drugs.</a> eLife. 2015 (4), 3-5 (2015).</li><li>Urciuolo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+a+3D+in+vitro+model+of+human+skeletal+muscle+at+the+single+fiber+scale.">Engineering a 3D in vitro model of human skeletal muscle at the single fiber scale.</a> PLoS One. 15 (5), 0232081 (2020).</li><li>Cvetkovic, C., Rich, M. H., Raman, R., Kong, H., Bashir, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+3D-printed+platform+for+modular+neuromuscular+motor+units.">A 3D-printed platform for modular neuromuscular motor units.</a> Microsystems &amp; Nanoengineering. 3 (1), 1-9 (2017).</li><li>Shima, A., Morimoto, Y., Sweeney, H. L., Takeuchi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+contractile+muscle+tissue+consisting+of+human+skeletal+myocyte+cell+line.">Three-dimensional contractile muscle tissue consisting of human skeletal myocyte cell line.</a> Experimental Cell Research. 370 (1), 168-173 (2018).</li><li>Capel, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scalable+3D+printed+molds+for+human+tissue+engineered+skeletal+muscle.">Scalable 3D printed molds for human tissue engineered skeletal muscle.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 7, 20 (2019).</li><li>Gholobova, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+tissue-engineered+skeletal+muscle:+a+novel+3D+in+vitro+model+for+drug+disposition+and+toxicity+after+intramuscular+injection.">Human tissue-engineered skeletal muscle: a novel 3D in vitro model for drug disposition and toxicity after intramuscular injection.</a> Scientific Reports. 8 (1), 1-14 (2018).</li><li>Osaki, T., Uzel, S. G. M., Kamm, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microphysiological+3D+model+of+amyotrophic+lateral+sclerosis+(ALS)+from+human+iPS-derived+muscle+cells+and+optogenetic+motor+neurons.">Microphysiological 3D model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS) from human iPS-derived muscle cells and optogenetic motor neurons.</a> Science Advances. 4 (10), 5847 (2018).</li><li>Rao, L., Qian, Y., Khodabukus, A., Ribar, T., Bursac, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+human+pluripotent+stem+cells+into+a+functional+skeletal+muscle+tissue.">Engineering human pluripotent stem cells into a functional skeletal muscle tissue.</a> Nature Communications. 9 (1), (2018).</li><li>Maffioletti, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+human+iPSC-derived+artificial+skeletal+muscles+model+muscular+dystrophies+and+enable+multilineage+tissue+engineering.">Three-dimensional human iPSC-derived artificial skeletal muscles model muscular dystrophies and enable multilineage tissue engineering.</a> Cell Reports. 23 (3), 899-908 (2018).</li><li>Chal, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+human+muscle+fibers+and+satellite-like+cells+from+human+pluripotent+stem+cells+in+vitro.">Generation of human muscle fibers and satellite-like cells from human pluripotent stem cells in vitro.</a> Nature Protocols. 11 (10), 1833-1850 (2016).</li><li>Khodabukus, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrical+stimulation+increases+hypertrophy+and+metabolic+flux+in+tissue-engineered+human+skeletal+muscle.">Electrical stimulation increases hypertrophy and metabolic flux in tissue-engineered human skeletal muscle.</a> Biomaterials. 198, 259-269 (2019).</li><li>Nagashima, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+model+of+human+skeletal+muscle+tissues+with+contractility+fabricated+by+immortalized+human+myogenic+cells.">In vitro model of human skeletal muscle tissues with contractility fabricated by immortalized human myogenic cells.</a> Advanced Biosystems. , 2000121 (2020).</li><li>Mills, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+human+skeletal+micro+muscle+platform+with+pacing+capabilities.">Development of a human skeletal micro muscle platform with pacing capabilities.</a> Biomaterials. 198, 217-227 (2019).</li><li>Legant, W. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfabricated+tissue+gauges+to+measure+and+manipulate+forces+from+3D+microtissues.">Microfabricated tissue gauges to measure and manipulate forces from 3D microtissues.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (25), 10097-10102 (2009).</li><li>Pr&#252;ller, J., Mannhardt, I., Eschenhagen, T., Zammit, P. S., Figeac, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Satellite+cells+delivered+in+their+niche+efficiently+generate+functional+myotubes+in+three-dimensional+cell+culture.">Satellite cells delivered in their niche efficiently generate functional myotubes in three-dimensional cell culture.</a> PLOS One. 13 (9), 0202574 (2018).</li><li>Sakar, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+and+optogenetic+control+of+engineered+3D+skeletal+muscle+bioactuators.">Formation and optogenetic control of engineered 3D skeletal muscle bioactuators.</a> Lab on a Chip. 12 (23), 4976-4985 (2012).</li><li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+system+to+monitor+statin-induced+myopathy+in+individual+engineered+skeletal+muscle+myobundles.">A system to monitor statin-induced myopathy in individual engineered skeletal muscle myobundles.</a> Lab on a Chip. 18 (18), 2787-2796 (2018).</li><li>Rajabian, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioengineered+skeletal+muscle+as+a+model+of+muscle+aging+and+regeneration.">Bioengineered skeletal muscle as a model of muscle aging and regeneration.</a> Tissue Engineering Part A. 27 (1-2), 74-86 (2020).</li><li>Afshar, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+96-well+culture+platform+enables+longitudinal+analyses+of+engineered+human+skeletal+muscle+microtissue+strength.">A 96-well culture platform enables longitudinal analyses of engineered human skeletal muscle microtissue strength.</a> Scientific Reports. 10 (1), 6918 (2020).</li><li>Mamchaoui, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalized+pathological+human+myoblasts:+Towards+a+universal+tool+for+the+study+of+neuromuscular+disorders.">Immortalized pathological human myoblasts: Towards a universal tool for the study of neuromuscular disorders.</a> Skeletal Muscle. 1 (1), 34 (2011).</li><li>Halldorsson, S., Lucumi, E., G&#243;mez-Sj&#246;berg, R., Fleming, R. M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advantages+and+challenges+of+microfluidic+cell+culture+in+polydimethylsiloxane+devices.">Advantages and challenges of microfluidic cell culture in polydimethylsiloxane devices.</a> Biosensors and Bioelectronics. 63, 218-231 (2015).</li><li>Chen, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasensitive+fluorescent+proteins+for+imaging+neuronal+activity.">Ultrasensitive fluorescent proteins for imaging neuronal activity.</a> Nature. 499 (7458), 295-300 (2013).</li><li>Bakooshli, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+3D+model+of+human+skeletal+muscle+innervated+with+stem+cell-derived+motor+neurons+enables+epsilon-subunit+targeted+myasthenic+syndrome+studies.">A 3D model of human skeletal muscle innervated with stem cell-derived motor neurons enables epsilon-subunit targeted myasthenic syndrome studies.</a> BioRxiv. , 275545 (2018).</li><li>Vandenburgh, H. H., Karlisch, P., Farr, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+of+highly+contractile+tissue-cultured+avian+skeletal+myotubes+in+collagen+gel.">Maintenance of highly contractile tissue-cultured avian skeletal myotubes in collagen gel.</a> Vitro Cellular &amp; Developmental Biology. 24 (3), 166-174 (1988).</li><li>Bell, E., Ivarsson, B., Merrill, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+a+tissue-like+structure+by+contraction+of+collagen+lattices+by+human+fibroblasts+of+different+proliferative+potential+in+vitro.">Production of a tissue-like structure by contraction of collagen lattices by human fibroblasts of different proliferative potential in vitro.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 76 (3), 1274-1278 (1979).</li><li>Hinds, S., Bian, W., Dennis, R. G., Bursac, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+extracellular+matrix+composition+in+structure+and+function+of+bioengineered+skeletal+muscle.">The role of extracellular matrix composition in structure and function of bioengineered skeletal muscle.</a> Biomaterials. 32 (14), 3575-3583 (2011).</li></ol>

यह पांडुलिपि एक 3 डी एचएमएमटी संस्कृति मॉडल बनाने और विश्लेषण करने के तरीकों का वर्णन करती है जिसे बुनियादी मांसपेशी जीव विज्ञान, रोग मॉडलिंग, या उम्मीदवार अणु परीक्षण के अध्ययन के लिए लागू किया जा सकत?...

कंकाल की मांसपेशी मानव शरीर में सबसे प्रचुर मात्रा में ऊतकों में से एक है और लोकोमोशन, हीट होमोस्टेसिस और मेटाबोलिज्म जैसे प्रमुख शरीर के कार्यों का समर्थन करती है1। ऐतिहासिक रूप से, पशु मॉडल और दो आयामी (2डी) सेल संस्कृति प्रणालियों का उपयोग जैविक प्रक्रियाओं और रोग रोगजनकों का अध्ययन करने के साथ-साथ कंकाल मांसपेशियों की बीमारियों के उपचार में औषधीय यौगिकों के परीक्षण के लिए किया गया है2,3। जबकि पशु मॉडलों ने स्वास्थ्य और रोग में कंकाल की मांसपेशियों के बारे में हमारे ज्ञान में बहुत सुधार किया है, उनके अनुवादीय प्रभाव को उच्च लागत, नैतिक विचारों और अंतरप्रजातिमतभेदों 2,4से बाधित किया गया है। कंकाल की मांसपेशियों का अध्ययन करने के लिए मानव कोशिका आधारित प्रणालियों की ओर मुड़ने में, 2डी सेल संस्कृति प्रणालियां उनकी सादगी के कारण अनुकूल हैं। हालांकि इसकी एक सीमा भी है। यह प्रारूप अक्सर कोशिका-कोशिका और सेल-एक्सट्रासेलुलर मैट्रिक्स इंटरैक्शन को फिर से काटने में विफल रहता है जो शरीर के भीतर स्वाभाविक रूप से होते हैं5,6. पिछले कई वर्षों में, तीन आयामी (3 डी) कंकाल मांसपेशी मॉडल शारीरिक और रोग प्रासंगिक प्रक्रियाओं पूर्व वीवो7,8 के मॉडलिंग की अनुमति देकर पूरे पशु मॉडल और पारंपरिक 2 डी संस्कृति प्रणालियों के लिए एक शक्तिशाली विकल्प के रूप मेंउभराहै । दरअसल, अध्ययनों की अधिकता एक जैव कलानीय 3 डी संस्कृति प्रारूप1में मानव कंकाल मांसपेशी मॉडल के लिए रणनीतियों की सूचना दी है । इनमें से कई अध्ययनों के लिए एक सीमा यह है कि संस्कृति प्लेटफार्मों से मांसपेशियों के ऊतकों को हटाने और एक बल ट्रांसड्यूसर के प्रति लगाव के बाद सक्रिय बल की मात्रा निर्धारित की जाती है, जो विनाशकारी हैऔर इसलिए, एक अंत बिंदु परख9,10, 11,12,13,14,15,17, 18के रूप में सेवा करने तक सीमित है ,19,20,21. अन्य लोगों ने संस्कृति प्रणालियों को डिजाइन किया है जो सक्रिय बल को मापने के गैर-आक्रामक तरीकों की अनुमति देते हैं, लेकिन सभी उच्च सामग्री अणु परीक्षण अनुप्रयोगों7, 8,9,10,14, 18,22, 23,24,25,26,27, 28के लिए उत्तरदायी नहीं हैं ,29.
यह प्रोटोकॉल कंकाल की मांसपेशी (मायो) माइक्रोटिस्यू सरणी वसीयत में मानव मांसपेशी माइक्रोटिस्यूस (एचएमएमटीएस) बनाने के लिए एक विस्तृत विधि का वर्णन करता है ताकि फोर्स (MyoTACTIC) मंच की जांच की जा सके; एक 96 वेल प्लेट डिवाइस 3 डी कंकाल मांसपेशी माइक्रोटिस्यूज30के थोक उत्पादन का समर्थन करता है . MyoTACTIC प्लेट निर्माण विधि एक 96 अच्छी तरह से पॉलीडिमिथाइलसिलोक्सेन (पीडीएमएस) संस्कृति प्लेट की पीढ़ी को सक्षम बनाती है और एक ही कास्टिंग चरण में सभी समान अच्छी तरह से सुविधाओं को सक्षम बनाती है, जिससे प्रत्येक अच्छी तरह से माइक्रोटिस्यूई गठन के लिए अपेक्षाकृत कम संख्या में कोशिकाओं की आवश्यकता होती है। MyoTACTIC के भीतर गठित माइक्रोटिस्यूस में गठबंधन, स्ट्रिएटेड और बहुनीय मायोट्यूब होते हैं जो डिवाइस के अच्छी तरह से अच्छी तरह से पुन: उत्पन्न होते हैं, और परिपक्वता पर, सीटू30में रासायनिक और विद्युत उत्तेजनाओं का जवाब दे सकते हैं। इसके साथ ही, पॉलीयूरेथेन (पीयू) प्रतिकृति से पीडीएमएस मायोटेक्टिक कल्चर प्लेट डिवाइस का निर्माण करने की तकनीक, एचएमएमटी बनाने के लिए अमर मानव मायोजेनिक प्रोजेनिटर कोशिकाओं को लागू करने के लिए एक अनुकूलित विधि, और इंजीनियर एचएमएमटी बल उत्पादन और कैल्शियम हैंडलिंग गुणों के कार्यात्मक मूल्यांकन को रेखांकित और चर्चा की जाती है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% Saline Solution, Sterile</td>
			<td>House Brand</td>
			<td>1010</td>
			<td>10 mL aliquots of the solution are made and stored at 4&#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G Needle</td>
			<td>BD, Medstore, University of Toronto</td>
			<td>2548-CABD305127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-Aminocaproic Acid, &#8805;99% (titration), Powder</td>
			<td>Sigma - Aldrich</td>
			<td>A2504-100G</td>
			<td>A 50 mg / mL stock solution is generated by dissolving 5 mg of 6-aminocaproic acid powder in 100 mL of autoclaved, distilled water. The solution is vaccum filtered and 10 mL aliquots are stored at 4&#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6.35 mm ID Tubing</td>
			<td>VWR</td>
			<td>60985-528</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AB1167 Myoblast Cell Line</td>
			<td>Institut de Myologie (Paris, France)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arbitrary Waveform Generator</td>
			<td>Rigol</td>
			<td>DG1022Z</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basement Membrane Extract (Geltrex)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A14132-02</td>
			<td>Stored as aliquots of 50 &#181;L or 100 &#181;L at -80&#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benchtop Vacuum Chamber</td>
			<td>Sigma - Aldrich</td>
			<td>D2672</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BNC to Aligator Clip Cable</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Ordered from Amazon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Culture Plastics</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td></td>
			<td>Includes culture plates, serological pipettes, etc</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl Sulfoxide</td>
			<td>Sigma - Aldrich</td>
			<td>D8418-250ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS, Powder, No Calcium, No Magnesium</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>21600069</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle Medium (DMEM) (1X)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11995-065</td>
			<td>This is a high glucose DMEM with L-glutamine and sodium pyruvate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10437028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrinogen from Bovine Plasma</td>
			<td>Sigma - Aldrich</td>
			<td>F8630-5G</td>
			<td>Aliquots ranging from 7 - 10 mg of fibrinogen powder are made and stored at -20&#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filtropur Syringe Filter, 0.22um Pore Size</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>83.1826.001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse Serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16050-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Recombinant Insulin</td>
			<td>Sigma - Aldrich</td>
			<td>91077C</td>
			<td>Stock solution is 100X and made by dissolving 1 mg of human recombinant insulin in 1 mL of DMEM and 1 &#181;L of NaOH 10N. Solution is filtered and stored as 1 mL aliquots at 4&#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Acquisition Software</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>cellSens Dimension</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Processing Software</td>
			<td>National Institutes of Health</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isotemp Oven</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>IX83</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope - Camera Mount</td>
			<td>Labcam</td>
			<td>Labcam for iPhone</td>
			<td>Ordered from Amazon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin (10,000 U/mL)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic Disposable Syringes, 1cc</td>
			<td>BD</td>
			<td>2606-309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic Disposable Syringes, 50cc</td>
			<td>BD</td>
			<td>2612-309653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pluronic F-127, Powder, BioReagent</td>
			<td>Sigma - Aldrich</td>
			<td>P2443-250G</td>
			<td>A 5% stock solution of pluronic acid is made by dissolving 5 g of pluronic acid powder in 100 mL of chilled, autoclaved, distilled water. The solution is vaccum filtered and 10 mL aliquots are stored at 4&#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polydimethylsiloxane (Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit)</td>
			<td>Dow</td>
			<td>4019862</td>
			<td>Kits are also available at Thermo Fisher Scientific, Sigma - Aldrich, etc.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyurethane Negative Mold</td>
			<td>In House</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Release Agent</td>
			<td>Mann Release Technologies</td>
			<td>200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotary Vane Vacuum Pump</td>
			<td>Edwards</td>
			<td>A65401906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Almedic, Medstore, University of Toronto</td>
			<td>2586-M36-0100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single Edge Razor Blade</td>
			<td>VWR</td>
			<td>55411-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Skeletal Muscle Cell Basal Medium</td>
			<td>Promocell</td>
			<td>C-23260</td>
			<td>30 mL aliquotes are generated and at stored at 4&#176;C.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Skeletal Muscle Cell Growth Medium (Ready-to-use)</td>
			<td>Promocell</td>
			<td>C-23060</td>
			<td>42 mL aliquots are generated and stored at 4&#176;C.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Smartphone (iPhone)</td>
			<td>Apple</td>
			<td>SE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard Duty Dry Vacuum Pump</td>
			<td>Welch</td>
			<td>2546B-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterilization Bag</td>
			<td>Alliance</td>
			<td>211-SCM2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thimble</td>
			<td>Igege</td>
			<td></td>
			<td>Ordered from Amazon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thrombin from human plasma</td>
			<td>Sigma - Aldrich</td>
			<td>T6884-250UN</td>
			<td>100 units of thrombin is dissolved in 1 mL of a 0.1% BSA solution. 10 &#181;L aliquots are prepared and stored at - 20&#176;C.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tin coated copper wire</td>
			<td>Arco</td>
			<td>B8871K48</td>
			<td>Ordered from Amazon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue Solution, 0.4%</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>15250061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA, 0.25%</td>
			<td>Thermo FIsher Scientific</td>
			<td>25200072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum Chamber 2</td>
			<td>SP Bel-Art</td>
			<td>F42027-0000</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing functional metrics of skeletal muscle health in human skeletal muscle microtissues

कंकाल की मांसपेशी के विट्रो मॉडल में त्रि-आयामी (3 डी) जैव चिकित्सा अनुसंधान में एक मूल्यवान उन्नति है क्योंकि वे कंकाल मांसपेशियों में सुधार और एक स्केलेबल प्रारूप में कार्य करने का अवसर प्रदान करते हैं जो प्रयोगात्मक जोड़तोड़ के लिए उत्तरदायी है। 3 डी मांसपेशी संस्कृति प्रणालियां वांछनीय हैं क्योंकि वे वैज्ञानिकों को मानव कोशिकाओं के संदर्भ में कंकाल मांसपेशी पूर्व वीवो का अध्ययन करने में सक्षम बनाते हैं। 3 डी इन विट्रो मॉडल वयस्क कंकाल की मांसपेशियों की देशी ऊतक संरचना के पहलुओं की बारीकी से नकल करते हैं। हालांकि, उनका सार्वभौमिक अनुप्रयोग उन प्लेटफार्मों की उपलब्धता से सीमित है जो निर्माण, लागत और उपयोगकर्ता के अनुकूल सरल हैं, और मानव कंकाल मांसपेशियों के ऊतकों की अपेक्षाकृत उच्च मात्रा में उपज देते हैं। इसके अतिरिक्त, चूंकि कंकाल की मांसपेशी एक महत्वपूर्ण कार्यात्मक भूमिका निभाती है जो कई रोग राज्यों में समय के साथ बिगड़ा हुआ है, माइक्रोटिस्यूई अध्ययन के लिए एक प्रयोगात्मक मंच सबसे व्यावहारिक है जब न्यूनतम आक्रामक कैल्शियम क्षणिक और अनुबंध बल माप सीधे मंच के भीतर ही आयोजित किया जा सकता है। इस प्रोटोकॉल में, एक 96-अच्छी मंच का निर्माण जिसे 'मायोटैक्टिक' के नाम से जाना जाता है, और 3 डी मानव कंकाल मांसपेशी माइक्रोटिस्यूज़ (एचएमएमटीएस) के सामूहिक उत्पादन का वर्णन किया गया है। इसके अलावा, विद्युत उत्तेजना के न्यूनतम आक्रामक अनुप्रयोग के तरीके जो कंकाल की मांसपेशियों के बल और समय के साथ प्रत्येक माइक्रोटिस्यू के कैल्शियम हैंडलिंग के दोहराए गए माप को सक्षम बनाता है।

यहां वर्णित एक पीयू मोल्ड से एक 96-अच्छी तरह से पीडीएमएस आधारित MyoTACTIC संस्कृति मंच कास्ट करने के तरीके हैं, एचएमएमटी प्रतिकृति ऊतकों की सरणी बनाने के लिए, और संस्कृति डिवाइस-बल पीढ़ी और कैल्शियम हैंडलिंग ?...

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Assessing Functional Metrics of Skeletal Muscle Health in Human Skeletal Muscle Microtissues

यह पांडुलिपि 3 डी मानव कंकाल मांसपेशी माइक्रोटिस्यूज की सरणी का उत्पादन करने के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल का वर्णन करती है और अनुबंध बल और कैल्शियम हैंडलिंग विश्लेषण सहित कार्य के सीटू परख में न्यूनतम आक्रामक डाउनस्ट्रीम है।

मानव कंकाल मांसपेशी माइक्रोटिस्यूस में कंकाल मांसपेशी स्वास्थ्य के कार्यात्मक मैट्रिक्स का आकलन

Three-dimensional (3D) in vitro models of skeletal muscle are a valuable advancement in biomedical research as they afford the opportunity to study ...

हमारा प्रोटोकॉल 3 डी मानव कंकाल मांसपेशी माइक्रोटिस्यू संस्कृति को गढ़ने और विश्लेषण करने के लिए विस्तृत तरीकों का वर्णन करता है। मांसपेशी माइक्रोटिस्यूज को बुनियादी मांसपेशी जीव विज्ञान, रोग मॉडलिंग, या उम्मीदवार अणु परीक्षण के अध्ययन के लिए लागू किया जा सकता है। इस तकनीक का मुख्य लाभ यह है कि यह अनुबंध बल और कैल्शियम यात्रियों के इन-सीटू मूल्यांकन की अनुमति देता है।इस वजह से, आप मांसपेशियों के ऊतकों समारोह के देशांतर अध्ययन का संचालन कर सकते हैं। प्रक्रिया का प्रदर्शन ब्रेनन मस्ग्रेव और हेटा लाड, मेरी प्रयोगशाला से स्नातक छात्र होंगे। सेल सीडिंग से दो से तीन घंटे पहले, एक 10 सेंटीमीटर सेल संस्कृति पकवान में एक छह अच्छी तरह से हल्के रणनीति प्लेट भाग जगह है ।5% प्लूरोनिक एफ-127 समाधान के 100 माइक्रोलीटर जोड़कर प्रत्येक व्यक्तिगत मायोटैक्टिक संस्कृति को अच्छी तरह से तैयार करें। कुओं को कवर करने के लिए ढक्कन का उपयोग करें, और पकवान को सील करने के लिए एक पैराफिन फिल्म लागू करें। एक प्लेट स्पिनर एडाप्टर के साथ आउटफिट में एक मिनट के लिए 1, ५५० बार जी पर पकवान अपकेंद्रित्र ।जब तक कोशिकाओं बोने के लिए तैयार कर रहे हैं चार डिग्री सेल्सियस पर संस्कृति पकवान स्टोर। फिर धीरे-धीरे बेसमेंट झिल्ली निकालने के 150 माइक्रोलीटर एलिकोट को पिघला दें, और संस्कृति हुड में बर्फ पर थ्रोम्बिन के 110 माइक्रोलीटर एलिकोट। सेल कल्चर हुड में काम करते हुए, 1.5 मिलीलीटर माइक्रो सेंट्रलाइज ट्यूब में 0.9% नमकीन समाधान के 700 माइक्रोलीटर जोड़ें जिसमें सात मिलीग्राम पाउडर फाइब्रिनोजेन होते हैं।ट्यूब को बिना भंवर के तीन से पांच मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस सेल कल्चर इनक्यूबेटर में रखें। ट्यूब को धीरे-धीरे निकालें और झटका दें, फिर पल्स इसे संस्कृति हुड में लौटने से पहले एक माइक्रो अपकेंद्रित्र में भंग समाधान को स्पिन करें। 0.22 माइक्रोमीटर सिरिंज फिल्टर के साथ आउटफिट एक मिलीलीटर सिरिंज का उपयोग करके फाइब्रिनोजेन समाधान को फ़िल्टर करें।फिर तहखाने झिल्ली निकालने और थ्रोम्बिन एलिकोट्स के साथ बर्फ में घुलित फाइब्रिनोजेन समाधान स्थानांतरित करें। तैयार करें और ३७ डिग्री सेल्सियस पर ऊतक विकास मीडिया को पहले से गर्म करें, जिसे ऊतकों को बोने के बाद संस्कृति कुओं में पेश किया जाएगा । इनक्यूबेटर से सेल कल्चर प्लेट्स को हटाएं और कल्चर मीडिया को एस्पिरेट करें ।फिर प्रत्येक संस्कृति प्लेट में डीपीबीएस के पांच मिलीलीटर जोड़कर एक बार कोशिकाओं को धोएं। डीपीबीएस को एस्पिरेट करें और प्रत्येक संस्कृति डिश में 0.25% ट्राइप्सिन ईडीटीए के एक मिलीलीटर जोड़कर कोशिकाओं को अलग करें। प्लेट को सेल कल्चर इनक्यूबेटर में तीन मिनट के लिए रखें, कल्चर डिश में वॉश मीडियम के तीन मिलीलीटर जोड़कर ट्राइप्सिन को पकड़ें, फिर कोशिकाओं को उचित आकार की शंकु नली में स्थानांतरित करें।10 मिनट के लिए 400 बार जी पर अपकेंद्री द्वारा कोशिकाओं को गोली मार। सेल पेलेट को नुकसान पहुंचाए बिना मीडिया को ध्यान से एएसपिरेट करें, फिर वॉश मीडियम के एक मिलीलीटर में कोशिकाओं को फिर से निलंबित करें। चमकीले क्षेत्र माइक्रोस्कोपी के तहत एक हीमोसाइटोमीटर और ट्राइपैन ब्लू डाई का उपयोग करके कोशिकाओं की गणना करें।छह ऊतकों को बीज करने के लिए, आठ ऊतकों के लिए पर्याप्त कोशिकाओं और बाहेल मैट्रिक्स तैयार करें, इस प्रकार नुकसान और बुलबुला गठन के लिए लेखांकन। एक नई शंकुदाता के लिए 1.2 मिलियन कोशिकाओं को स्थानांतरित करें, फिर धोने के माध्यम से मात्रा को 10 मिलीमीटर तक बढ़ाएं। 10 मिनट के लिए 400 बार जी पर अपकेंद्री द्वारा कोशिकाओं को गोली मार।1.5 मिलीलीटर माइक्रो सेंट्रलाइज ट्यूब में ईसीएम मिश्रण के 150 माइक्रोलीटर तैयार करें, और उपयोग होने तक मिश्रण को बर्फ पर स्टोर करें। कोशिकाओं से युक्त शंकु नली से मीडिया को एस्पिरेट करें, सेल पेलेट से बचने के लिए ध्यान रखें। जब तक गोली एक सेल घोल के रूप में दिखाई देती है तब तक ट्यूब के अंत को दस्ताने उंगली से सख्ती से झटका दें।कोशिका घोल युक्त ट्यूब के लिए ईसीएम समाधान के 120 माइक्रोलीटर स्थानांतरित करें, और एक एकल कोशिका निलंबन उत्पन्न करने के लिए ईसीएम के भीतर कोशिकाओं को पूरी तरह से निलंबित करने के लिए सावधानी से ऊपर और नीचे पिपेट करें। बुलबुले बनाने से बचें, फिर उपयोग होने तक सेल ईसीएम निलंबन को बर्फ पर रखें। सेल कल्चर हुड के अंदर एक आइस पैक के शीर्ष पर मायोटैटिक कुओं से युक्त रेफ्रिजरेटेड 10 सेंटीमीटर डिश रखें, और प्रत्येक कुएं से प्लूरोनिक एफ-127 समाधान को एस्पिरेट करें।अवशिष्ट प्लूरोनिक एफ-१२७ समाधान असुरक्षित PDMS से जारी करने के लिए अनुमति दें, और दे कुओं बर्फ पर पांच मिनट के लिए बैठने के द्वारा अच्छी तरह से नीचे करने के लिए व्यवस्थित है, तो फिर से आकांक्षी । कोशिकाओं को फिर से निलंबित करने के लिए सेल ईसीएम निलंबन को ध्यान से पिपेट करें, फिर निलंबन के 105 माइक्रोलीटर को शीर्ष के करीब लोभी द्वारा एक ताजा, पूर्व-ठंडा 1.5 मिलीलीटर ट्यूब में स्थानांतरित करें। सेल ईसीएम सस्पेंशन के 105 माइक्रोलीटर में 100 यूनिट प्रति मिलीलीटर थ्रोम्बिन स्टॉक सॉल्यूशन के 0.84 माइक्रोलीटर जोड़ें।बुलबुले की शुरूआत से बचने के लिए, मिश्रण करने के लिए तेजी से और अच्छी तरह से पिपेट। कोशिका ईसीएम मिश्रण के 15 माइक्रोलीटर को अच्छी तरह से पाइपेट को दबाए बिना प्रत्येक कुएं में जोड़ें। दो प्रकाश गति के साथ, कुएं में प्रत्येक पोस्ट के पीछे सेल निलंबन फैलाएं।ढक्कन को 10 सेंटीमीटर कल्चर प्लेट पर रखें और इसे लगभग पांच मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस ऊतक संस्कृति इनक्यूबेटर में स्थानांतरित करें। सेल ईसीएम मिश्रण पॉलीमराइज्ड होने के बाद प्रत्येक मायोटेक्टिक में प्री-गर्म ऊतक विकास मीडिया के 200 माइक्रोलीटर अच्छी तरह से जोड़ें। 10 सेंटीमीटर डिश पर ढक्कन को बदलें और इसे इन्क्यूबेटर में डिविटेशन होने तक रखें।14 दिन की संस्कृति अवधि के दौरान, मायोब्लास्ट्स ने हल्के रणनीति में स्वयं-आयोजन करके देशी ऊतकों के पहलुओं को प्रदर्शित किया ताकि बहु-नाभिकित स्ट्रेटेड मायोट्यूब के साथ 3 डी माइक्रोटिस्यूब बनाया जा सके। मायोट्यूब में सारकोमरे स्ट्रीशन होते हैं, जिन्हें सारकोमरिक अल्फा ऐक्टिनिन के लिए इम्यूनोस्टेपिंग द्वारा कल्पना की गई थी। अच्छी तरह से गठबंधन मायोट्यूब प्राप्त करने के लिए, आकांक्षा के दौरान पिपटिंग, या हानिकारक प्लूरोनिक कोटिंग के दौरान बुलबुला गठन, या हानिकारक प्लूरोनिक कोटिंग जैसी तकनीकी त्रुटियों से बचा जाना चाहिए।कम और उच्च आवृत्ति विद्युत उत्तेजना के जवाब में मायोटाक्टिक वेल प्लेट पोस्ट का एक प्रतिनिधि विस्थापन, यहां दिखाया गया है, यह दर्शाता है कि मायोट्यूब तदनुसार अलग-अलग विद्युत उत्तेजनाओं और अनुबंध का जवाब देते हैं। विस्थापन के बाद की मात्रा एचएमएमटी के पूर्ण संकुचन बल में रूपांतरण के लिए अनुमति देती है। GCaMP6-transduced myoblasts से बने एचएमएमटी पर कैल्शियम ट्रांजेंस का भी कम और उच्च आवृत्ति उत्तेजना के जवाब में विश्लेषण किया गया था।फ्लोरोसेंट तीव्रता के मात्राकरण का उपयोग एचएमएमटीएस के कैल्शियम हैंडलिंग गुणों के लिए माप के रूप में किया जा सकता है। अधिकांश लोग जो पहली बार इस ऊतक सीडिंग करते हैं, कोशिका बाहुलर मैट्रिक्स को कुओं में जोड़ने और बुलबुला गठन के साथ संघर्ष करते हैं। हम कोशिकाओं के साथ पहले प्रयास से पहले एक बहुत ही सरल चिपचिपा समाधान के साथ कुछ अतिरिक्त माइक्रोटिस्यू संस्कृति कुओं पर तकनीक का अभ्यास करने की सलाह देते हैं।

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Engineering Skeletal Muscle Tissues from Murine Myoblast Progenitor Cells and Application of Electrical Stimulation

इंजीनियरिंग murine Myoblast पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं और बिजली की उत्तेजना के अनुप्रयोग से कंकाल मांसपेशियों के ऊतकों

Engineered muscle tissues can be used for several different purposes, which include the production of tissues for use as a disease model in vitro, e.g. to ...

Transplantation of Induced Pluripotent Stem Cell-derived Mesoangioblast-like Myogenic Progenitors in Mouse Models of Muscle Regeneration

मांसपेशियों के उत्थान के माउस मॉडल में प्रेरित Pluripotent स्टेम सेल-व्युत्पन्न मेसोंगियोब्लास्ट की तरह मायोजेनिक प्रोजेनिटर का प्रत्यारोपण

Patient-derived iPSCs could be an invaluable source of cells for future autologous cell therapy protocols. iPSC-derived myogenic stem/progenitor cells ...

Measurement of Maximum Isometric Force Generated by Permeabilized Skeletal Muscle Fibers

Permeabilized कंकाल की मांसपेशी फाइबर द्वारा उत्पन्न अधिकतम सममितीय बल के मापन

Analysis of the contractile properties of chemically skinned, or permeabilized, skeletal muscle fibers offers a powerful means by which to assess muscle ...

Engineered Vascularized Muscle Flap

इंजीनियर vascularized स्नायु फ्लैप

One of the main factors limiting the thickness of a tissue construct and its consequential viability and applicability in vivo, is the control of oxygen ...

Computed Tomography and Optical Imaging of Osteogenesis-angiogenesis Coupling to Assess Integration of Cranial Bone Autografts and Allografts

गणना टोमोग्राफी और अस्थिजनन-एंजियोजिनेसिस युग्मन के ऑप्टिकल इमेजिंग कपाल अस्थि autografts और allografts की एकता का आकलन करने के लिए

A major parameter determining the success of a bone-grafting procedure is vascularization of the area surrounding the graft. We hypothesized that ...

Applications of In Vivo Functional Testing of the Rat Tibialis Anterior for Evaluating Tissue Engineered Skeletal Muscle Repair

Applications of In Vivo Functional Testing of the Rat Tibialis Anterior for Evaluating Tissue Engineered Skeletal Muscle Repair

के आवेदन<em&gt; Vivo</em&gt; ऊतक मूल्यांकन के लिए चूहा tibialis पूर्वकाल के कार्यात्मक परीक्षण इंजीनियर कंकाल की मांसपेशी की मरम्मत

Despite the regenerative capacity of skeletal muscle, permanent functional and/or cosmetic deficits (e.g., volumetric muscle loss (VML) resulting from ...

Cardiac Muscle-cell Based Actuator and Self-stabilizing Biorobot - PART 1

कार्डिएक मस्सिकल-सेल आधारित एक्ट्यूएटर और स्व-स्थिर ब्योरोबोट - भाग 1

Biological machines often referred to as biorobots, are living cell- or tissue-based devices that are powered solely by the contractile activity of living ...

Cardiac Muscle Cell-based Actuator and Self-stabilizing Biorobot - Part 2

कार्डिएक मस्तिष्क सेल-आधारित एक्ट्यूएटर और स्व-स्थिर ब्योरोबोट - भाग 2

In recent years, hybrid devices that consist of a living cell or tissue component integrated with a synthetic mechanical backbone have been developed. ...

Semiautomated Longitudinal Microcomputed Tomography-based Quantitative Structural Analysis of a Nude Rat Osteoporosis-related Vertebral Fracture Model

Semiautomated अनुदैर्ध्य Microcomputed टोमोग्राफी-आधारित एक नग्न चूहा ऑस्टियोपोरोसिस के मात्रात्मक संरचनात्मक विश्लेषण-संबंधित कशेरुका फ्रैक्चर मॉडल

Osteoporosis-related vertebral compression fractures (OVCFs) are a common and clinically unmet need with increasing prevalence as the world population ...

Melt Electrospinning Writing of Three-dimensional Poly(&#949;-caprolactone) Scaffolds with Controllable Morphologies for Tissue Engineering Applications

Melt Electrospinning Writing of Three-dimensional PolyÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Âµ-caprolactone Scaffolds with Controllable Morphologies for Tissue Engineering Applications

पिघल Electrospinning तीन आयामी पाली (ε-caprolactone) ऊतक इंजीनियरिंग अनुप्रयोगों के लिए नियंत्रणीय Morphologies के साथ मचान के लेखन

This tutorial reflects on the fundamental principles and guidelines for electrospinning writing with polymer melts, an additive manufacturing technology ...