Name: intranasal immunization and milk collection in studies of maternal immunization in new zealand white rabbits (oryctolagus cuniculus)
Uploaded: 2021-07-31T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus at JoVE.com

ويود المؤلفون أن يعترفوا بقسم الموارد الحيوانية المختبرية في جامعة ديوك وفريق تربية الحيوانات لمساعدتهم ورعايتهم الكبيرة المقدمة للحيوانات. بالإضافة إلى ذلك ، يود المؤلفون التعرف على فريق PhotoPath داخل قسم علم الأمراض لمساعدتهم في الأجزاء الصوتية والفيديوية من المخطوطة. وقد دعم هذا العمل من أموال البحوث التقديرية من مختبر ستاتس.

تمت الموافقة على جميع الإجراءات وتنفيذها وفقا لسياسات جامعة ديوك IACUC.
ملاحظة: المواد المطلوبة متوفرة في جدول المواد.
1. تخدير الأرانب والتخدير
<ol><li>تخدير الأرنب الإناث (ناضجة جنسيا؛ ما يقرب من 5-30 شهرا من العمر) عن طريق إعطاء الأسيبرومازين عضليا (IM) بج?...

على الرغم من عدم وصفها في البروتوكول المذكور أعلاه ، فإن التكاثر الناجح للأرانب ضروري لهذا النموذج الأمومي وللسماح بجمع الحليب. يتم تربية الأرانب بسهولة عن طريق الغطاء الحي في إعداد البحوث. فمن المستحسن أن لا يتم نقلها إلى قفص باك للتربية، كما لا يمكن أن تكون إقليمية وعدوانية إذا أبقى في ق...

إن دراسات تحصين الأمهات ونقل الأجسام المضادة لا تقدر بثمن لأسباب عديدة، لأن هذا هو الطريق الأولي لنقل المناعة والحماية اللاحقة من مسببات الأمراض والأمراض لدى المواليد الجدد والرضع. 66 - يمكن للتحصين النفاسي أن يؤثر تأثيرا إيجابيا على صحة الأم والطفل على الصعيد العالمي عن طريق الحد من المراضة والوفيات المرتبطة ببعض مسببات الأمراض خلال هذه الفترة الضعيفة1. والهدف الرئيسي لهذه الاستراتيجية هو زيادة مستويات الأجسام المضادة الأمومية المحددة طوال فترة الحمل. ويمكن بعد ذلك نقل هذه الأجسام المضادة إلى الوليد والرضيع عند مستويات كافية للحماية من العدوى حتى ينضج جهاز المناعة لديهم بما يكفي للاستجابة بشكل كاف للتحديات1و2و3. وقد أظهرت الأعمال السابقة أن ارتفاع الثدي الأجسام المضادة عند الولادة ترتبط إما مع الحماية الكاملة أو تأخر بداية وانخفاض شدة العديد من الأمراض المعدية المختلفة في حديثي الولادة، بما في ذلك الكزاز والسعال الديكي وفيروس التزامن التنفسي (RSV)، والأنفلونزا، والتهابات المكورات العقدية المجموعة B1،2،3.
في البشر ، يتم نقل الأجسام المضادة للأمهات بشكل سلبي عبر المشيمة ويتم نقلها أيضا من خلال حليب الثدي عن طريق التمريض. وقد أظهرت الأعمال السابقة أن مستويات الإيغا الخاصة بفيروس نقص المناعة البشرية في حليب الثدي البشري من الأمهات المصابات بالفيروس ارتبطت بانخفاض انتقال الفيروس بعد الولادة، مما يشير إلى دور وقائي لحليب الثدي المضاد لفيروس نقص المناعة البشرية IgA4. وقد أظهرت الدراسات في الرئيسيات غير البشرية أن التحصين ضد فيروس نقص المناعة البشرية يمكن أن يؤدي إلى استجابة كبيرة للأجسام المضادة في حليب الثدي، وعلى الرغم من أن استجابات IgG المصلية المماثلة تم تحريضها بعد التحصين الجهازي مقابل التحصين المخاطي، إلا أن التحصين المخاطي أدى إلى استجابة أعلى بكثير من IgA داخل الحليب5،6.
تحديد نموذج حيواني مناسب لهذه الدراسات يجب أن يأخذ في الاعتبار نوع المشيمة وآليات نقل الأجسام المضادة السلبية ، وكذلك نقل الأجسام المضادة عن طريق حليب الثدي. هناك ثلاثة أنواع رئيسية من المشيمة في الثدييات على أساس أنواع الأنسجة والطبقات في واجهة materno-fetal ، بما في ذلك الهيموشوريال (الرئيسيات والقوارض والأرانب) ، و endotheliochorial (الحيوانات آكلة اللحوم) ، وظهارية (الخيول والخنازير والحيوانات المجترة). المشيمة المشيمية هي النوع الأكثر غزوا ، مما يسمح بالاتصال المباشر بين إمدادات دم الأم وchorion ، أو الغشاء الجنيني الأبعد. استنادا إلى عدد طبقات الأرومة التروفوسومية ، هناك العديد من الاختلافات في المشيمة المشيمية ، بما في ذلك المشيمة المشيمية الموجودة في الرئيسيات ، والمشيمة الدموية في الأرانب ، والمشيمة الدموية التي لوحظت في الفئران والجرذان7. يسمح هذا الاتصال المباشر بين إمدادات دم الأم والكوريون بالانتقال السلبي للأجسام المضادة عبر المشيمة أثناء الحمل. IgG هو فئة الأجسام المضادة الوحيدة التي تعبر بشكل كبير المشيمة البشرية8، في حين أن IgA هي الفئة السائدة من Ig الموجودة في حليب الثدي البشري9. من النماذج ذات الصلة علميا، فقط الرئيسيات (بما في ذلك البشر)، والأرانب، والخنازير غينيا نقل IgG في الرحم وIgA في الحليب10،11. لذلك ، يتضمن نموذج الأرنب عوامل مماثلة لتلك الموجودة في البشر التي تتحكم في النقل عبر المحيط من IgG ونقل الرضاعة من IgA.
بالإضافة إلى أنها نموذج استثنائي لمناعة الأم وتطور اللقاح، فإن أوجه التشابه بين الأرنب وتجاويف الأنف البشرية تجعلها نموذجا مناسبا للتحصين داخل الأنف. حجم تجويف الأنف أرنب هو أكثر مماثلة للبشر من نماذج القوارض على أساس كتلة الجسم النسبي12. بالإضافة إلى ذلك، أظهر كاستيلين وآخرون 12 أن الأنسجة اللمفاوية المرتبطة بالأنف (NALT) أكثر ضخامة في الأرنب مقارنة بالقوارض. يقع NALT في المقام الأول في الجانب البطني والبطيني للحم الأنف البطني وفي الجانب الجانبي والدرسلي للحم الأنفي الأنفي في الأرانب ، في حين أن الأنسجة اللمفاوية موجودة فقط على طول الجانب البطني للحم الأنفيالأنفي 12. في الأرانب ، وهيكل وموقع الخلايا الليمفاوية داخل الإبطين والصفائح البربريا ، وكذلك بصيلات اللمفاوية المعزولة ، تشبه البشر12.
وتشمل المزايا الإضافية لاستخدام الأرنب كنموذج لمناعة الأم والمخاطية برازها العالي وفترة الحمل القصيرة نسبيا. الأوعية الدموية الكبيرة على ارتفاع عدد الشرايين تسمح بسهولة الوصول نسبيا إلى كميات كبيرة من الدم لمجموعات المسلسل. يمكن جمع مجموعة متنوعة من العينات المخاطية لإجراء فحوصات استجابة الأجسام المضادة الخاصة بمضادات معينة، بما في ذلك حليب الثدي13 (عند الرضاعة)، إفرازات المخاطية أو يغسل (على سبيل المثال، عن طريق الفم14،15،16،رغوة القصباتالهوائية 13،17،18،19،المهبل20،21،22)،والبراز20،23،24،25. يمكن جمع عينات الحليب بسهولة أثناء الرضاعة لتقييم وجود استجابات الأجسام المضادة الخاصة بالمستضد. على الرغم من أنها ليست وفيرة كما هو الحال بالنسبة للبشر والفئران ، إلا أن مجموعة واسعة من الكواشف التجريبية متاحة للدراسات والمقاسات الخاصة بالأرانب. في هذه المقالة، سوف نقوم بوصف وإظهار التحصين داخل النعور وجمع الحليب في نيوزيلندا الأرانب البيضاء(Oryctolagus cuniculus).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Intranasal Immunization</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Machine/Vaporizer</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>901807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (25 g)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>07-806-7584</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (250 mL Bottle)</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td>2-4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Syringe (1 mL)</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>07-892-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mucosal Vaccine</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Experimental Vaccine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nose Cone</td>
			<td>McCulloch Medical</td>
			<td>07891-1097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Tips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>53503-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettor</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89079-962</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PromAce (Acepromazine maleate)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>07-893-5734</td>
			<td>1mg/kg IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Sterile Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>07-888-2572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milk Collection</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol Prep 2-ply</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>07-839-8871</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Machine/Vaporizer</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>901807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needles (25 g)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>07-806-7584</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (250 mL Bottle)</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td>2-4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Syringe (1 mL)</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>07-892-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Woven Sponge (4x4)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>07-891-5815</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nose Cone</td>
			<td>McCulloch Medical</td>
			<td>07891-1097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PromAce (Acepromazine Maleate)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>07-893-5734</td>
			<td>1mg/kg IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Sterile Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>07-888-2572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Conical Vial (15 mL)</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>14-959-49B</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intranasal immunization and milk collection in studies of maternal immunization in new zealand white rabbits (oryctolagus cuniculus)

نظرا لأوجه التشابه في المشيمة ونقل الأجسام المضادة مع البشر ، تعد الأرانب نموذجا ممتازا لتحصين الأمهات. المزايا الإضافية لهذا النموذج البحثي هي سهولة تربية وجمع العينات، وفترة الحمل قصيرة نسبيا، وأحجام القمامة الكبيرة. طرق التمنيع التي يتم تقييمها عادة تشمل تحت الجلد، والعضلي، وداخل الرحم، وداخل الجلد. جمع العينات غير المحددة للكشف الزمني للاستجابات المناعية لهذه التحصينات تشمل جمع الدم، من كل من السدود ومجموعات، والحليب من الرضاعة لا. في هذه المقالة، سوف نبين التقنيات التي استخدمها مختبرنا في دراسات تحصين الأمهات في الأرانب البيضاءالنيوزيلندية (Oryctolagus cuniculus)،بما في ذلك التحصين داخل الرحم وجمع الحليب.

يتم تصوير نظرة عامة على تصميم دراسة التمنيع الأمومي النموذجي داخل الرحم في الشكل 1، ويتضمن التحصينات والتربية والإشعال والرضاعة ونقل الأجسام المضادة. وينبغي جمع الدم قبل التمنيع الأولي لقياسات خط الأساس وطوال الفترة المتبقية من الدراسة على فترات منتظمة، وإن لم يكن ذلك مب...

Watch this Scientific Journal Video about Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus at JoVE.com

Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus

توضح هذه المقالة وتثبت إدارة اللقاحات داخل الجهاز المناعي وجمع الحليب من الأرانب المرضعة(Oryctolagus cuniculus)كوسيلة لتقييم المناعة المخاطية في نموذج مناسب ترجمة للتحصين الأمومي.

التحصين داخل النعوس وجمع الحليب في دراسات تحصين الأمهات في نيوزيلندا الأرانب البيضاء (Oryctolagus cuniculus)

Due to similarities in placentation and antibody transfer with humans, rabbits are an excellent model of maternal immunization. Additional advantages of ...

إن دراسات تحصين الأمهات ونقل الأجسام المضادة لا تقدر بثمن لأسباب عديدة لأن هذا هو الطريق الأولي لنقل المناعة والحماية اللاحقة من مسببات الأمراض والأمراض لدى المواليد الجدد والرضع. نظرا لأوجه التشابه في المشيمة ونقل الأجسام المضادة مع البشر ، تعد الأرانب نموذجا ممتازا لتحصين الأمهات. في هذا المقال الفيديو نبين التقنيات التي استخدمها مختبرنا في دراسات تحصين الأمهات في الأرانب البيضاء في نيوزيلندا، بما في ذلك التحصين داخل الرحم وجمع الحليب.سنصف أولا جدولا زمنيا وسلسلة من الأحداث لدراسة تحصين الأمهات المخاطية في الأرانب البيضاء في نيوزيلندا. يتم تحصين الأرانب الإناث عبر الطريق داخل الرحم، كما هو موضح في هذا الفيديو. واعتمادا على الدراسة، قد يحتاج اللقاح إلى دفعة أو قد يحتاج إلى إعطاءه من خلال مسار إضافي، مثل التحصين العضلي.وينبغي جمع الدم قبل التمنيع الأولي لقياسات خط الأساس، وطوال الفترة المتبقية من الدراسة على فترات منتظمة، وإن لم يكن يصور. يتم الحصول على الدم بسهولة عن طريق شريان الأذن المركزي مع التخدير الخفيف وعامل مسكن موضعي. يمكن قياس وجود مستويات IgG الخاصة بالمضاد في هذه العينات.ثم يتم تربية الأرانب. نحن نفضل شراء مربي ثبت من البائعين لاستخدامها لضمان ارتفاع معدل الحمل لهذه الدراسات. اعتمادا على الجدول الزمني للتحصين، قد تتلقى الأرانب تحصينات إضافية طوال فترة الحمل.يتم نقل IgG الخاصة بالمضاد بشكل شفاف إلى المجموعات. في ما يقرب من 30 إلى 32 يوما بعد الولادة الحوامل لا أوقد. نوصي بالحد من التعامل مع مجموعات لعدة أيام الأولى لتقليل الرفض من يفعل.يمكن جمع عينات الدم من مجموعات لتقييم مستويات محددة من IgG مستضد التي تم نقلها عبر البلاستيك. يمكن جمع الدم من عدد قليل من مجموعات في أو بالقرب من وقت الولادة لتقييم مستويات الأجسام المضادة المستضد المحددة في وقت مبكر. بالإضافة إلى مجموعة واسعة من المواد الغذائية، ومجموعات تلقي مستضد IgA محددة من دو المرضعات أثناء الرضاعة.وعادة ما يتم فطم مجموعات في أربعة إلى ثمانية أسابيع من العمر. قبل فطم الحليب يمكن بسهولة أن يتم جمعها من الرضاعة يفعل كما هو موضح في هذا الفيديو. ثم تتم معالجة عينات الحليب التي تم جمعها للكشف عن مستضد محدد IgA.اعتمادا على الدراسة، يمكن إعطاء اللقاحات ودفعة لمجموعات ويمكن جمع عينات الدم التسلسلية من مجموعات في سن مبكرة جدا باستخدام الوريد الصابني الجانبي. وسوف نبين الآن التحصين داخل الرحم وجمع الحليب في نيوزيلندا الأرانب البيضاء.البروتوكول. تمت الموافقة على جميع الإجراءات وتنفيذها وفقا لسياسات لجنة العناية والاستخدام المؤسسية للحيوانات في جامعة ديوك.التحصين داخل الرحم. المواد اللازمة: Acepromazine، حقنة وإبرة، مواد التشحيم العيون، Isoflurane، مخروط الأنف، ماصة، ونصائح ماصة، لقاح المخاطية. إعداد محلول التحصين قبل التعامل مع الحيوانات.يتم تخدير الأرانب مع Acepromazine ملليغرام واحد لكل كيلوغرام عضلي ، وتخديرها مع Isoflurane باستخدام مخروط الأنف. مرة واحدة تخدير كامل كما تم تقييمها من قبل منعكس الجفن، يتم إضافة مواد التشحيم العيون إلى كل عين لمنع تجفيف العينين وقرحة القرنية اللاحقة. بمجرد أن يكون عضو المختبر مستعدا لإدارة اللقاح والأرنب في مستوى مناسب من التخدير ، قم بإيقاف تشغيل الأيزوفلوران والأوكسجين وإزالة مخروط الأنف.ضع الأرنب في المقعد الظهري ودعم الرقبة والرأس بزاوية 45 درجة تقريبا تسمح بالوصول السهل وتصور كلا الشرين من قبل عضو المختبر الذي يدير اللقاح. قم بتحميل المصصة بما لا يزيد عن 100 ميكرولتر من محلول اللقاح وسرعان ما قم بإعطاء المحلول لمنخر واحد وكرر الإجراء الخاص بالخياشيم الثاني. وينبغي عقد ماصة في زاوية 45 درجة تقريبا.زاوية نحو الجانب الوسيط من الممر الأنفي. الهدف من التمنيع هو الحل للاتصال الأغشية المخاطية للناريس. لذلك لا ينبغي وضع طرف داخل nares لأن هذا قد يؤدي إلى كشط أو تهيج الأنسجة المخاطية ويحتمل أن تؤثر على المناعة من اللقاح تدار nasally.يجب إعطاء اللقاح بسرعة ويتم بنفس الطريقة في الأنف الآخر. بعد تناوله في كلا الممرين الأنفيين ، يتم الحفاظ على الأرنب في المقعد الظهري لمدة 30 ثانية لتقليل تسرب محلول اللقاح. عادة ما يقوم المختبر بإدارة ما لا يزيد عن 100 ميكرولتر لكل منخر في كل مرة.إذا كان من المقرر إعطاء حجم أكبر بكمية إجمالية قصوى تبلغ 500 ميكرولتر، يمكن إعطاء اللقاح في 100 ميكرولتر من المغذيات مع فترة راحة مدتها 30 ثانية بين التحصينات. وتكررت الإدارات الإضافية للقاح مع 30 ثانية من الراحة بين كل إدارة حتى يتم تسليم إجمالي حجم اللقاح. بعد التمنيع، ضع الأرنب على البطين للتعافي وراقب الحيوان عن كثب حتى يتمكن من الحفاظ على شغل المؤخرة.في بعض الحالات، قد لا يتم تسليم تركيبة اللقاح بالكامل إلى تجويف الأنف وقد يبقى جزء من تركيبة اللقاح على الجزء الخارجي من nares. في هذه الحالة، لأنه ليس واضحا من الحجم الدقيق للقاح الذي تم تسليمه بشكل صحيح إلى تجويف الأنف، لا يوصي بإعادة تطبيق مواد لقاح إضافية لأن هذا من شأنه أن يضيف متغيرا غير محدد إلى التجربة. من المهم استخدام تقنية توصيل اللقاح التي توفر تسليم كامل ومتسق لصياغة اللقاح إلى nares.جمع الحليب. المواد اللازمة: Acepromazine، والمحاقن والإبر، مسحة الكحول، الشاش، مواد التشحيم العيون، Isoflurane، مخروط الأنف، الأوكسيتوسين، وقارورة جمع. يتم تخدير الأرانب مع Acepromazine ملليغرام واحد لكل كيلوغرام عضلي ، وتخديرها مع Isoflurane باستخدام مخروط الأنف.مرة واحدة تخدير كامل كما تم تقييمها من قبل منعكس الجفن، يتم تطبيق مواد التشحيم العيون على كل عين لمنع تجفيف العينين وتقرح القرنية اللاحقة. تنظيف الجلد على الوريد الأذن هامشية مع مسحة الكحول. باستخدام حقنة واحدة مليون وإبرة قياس 25، وإدارة ما يقرب من وحدة واحدة إلى وحدتين دوليتين من الأوكسيتوسين عن طريق الوريد عن طريق الوريد الأذن هامشية للحث على الحليب خذل.بسبب استرخاء العضلات على نحو سلس، فمن الشائع للأرنب للتبول أو التبرز بعد إدارة الأوكسيتوسين. بعد إدارة الأوكسيتوسين، وتطبيق الضغط على موقع الحقن مع قطعة من الشاش لتوفير hemostasis. مع الحفاظ على قناع التخدير أو مخروط الأنف فوق أنف الأرنب ، دعم الأرنب على أرباعه الخلفية.كملاحظة جانبية ، يمكن أيضا إجراء جمع الحليب مع الحيوان في شغل المقاعد الجانبية ، ولكن المختبر يجد أن الجمع أسهل عندما يتم دعم الأرنب على الردف مع مساعد يحمل الأرنب منتصبا مع قناع التخدير. افتح الأنبوب العقيم للتحضير لجمع الحليب وتحديد موقع الأنسجة الثديية والحلب المرتبطة بها. الأرانب وعادة ما يكون أربعة إلى خمسة أزواج من الغدد الثديية.عادة ما تكون الحلمات محاطة بالفرو الرطب من التمريض الحديث والأنسجة الثديية واضحة بسهولة عندما تكون مليئة بالحليب. فهم في الأنسجة الثديية المرتبطة الحلمة بين الإبهام والسبابة وتطبيق ضغط تدليك لطيف على الأنسجة الغدية في اتجاه الحلمة. ضع أنبوب التجميع فوق الحلمة لجمع الحليب المعبر عنه.قد يستغرق الأمر عدة دقائق حتى يكون الأوكسيتوسين فعالا، ويبدو أن إنتاج الحليب يختلف بين الغدد الثديية. إذا لم يكن تعبير الحليب ناجحا، فانتظر عدة دقائق أو استدار إلى غدة مامماري إضافية. يمكن جمع الحليب من جميع الحلمات في نفس الخسيس.عادة يمكن جمع عدة ملليلترات من الحليب بسهولة من دو المرضعات. بعد أن يتم جمع الحجم المطلوب من الحليب، قم بإيقاف Isoflurane والأوكسجين وإزالة مخروط الأنف من الأرنب، والسماح للأرنب بالتعافي أثناء مراقبته عن كثب حتى يتمكن الحيوان من الحفاظ على شغل المؤخرة. النتائج التمثيلية.الشكل الأول. بالنسبة للدراسات الأمومية، من المفيد تحديد الحمل في أقرب وقت ممكن للتأكد من أن ال دو لا يحتاج إلى إعادة تربيته. وتشمل الخيارات المتاحة للكشف عن الحمل الجس، والموجات فوق الصوتية، والتصوير الإشعاعي، وزيادة الوزن، والتقنيات الجزيئية مثل قياسات عوامل نمو الأنسولين والبروجيستيرون.مستويات البروجسترون الكافية ضرورية للحفاظ على الحمل في الأرانب. لذلك قامت العديد من الدراسات أيضا بتقييم مستويات البروجسترون في الأرانب الحامل وأظهرت مستويات مرتفعة بالنسبة للأرانب غير الحامل ، خاصة أثناء تكوين الأعضاء حول منتصف الحمل. كما هو مبين في الشكل الأول، يمكن الكشف عن مستويات هرمون البروجسترون مرتفعة في الأرانب الحوامل مقارنة مع الأرانب غير الحوامل حتى بعد التزاوج من قبل باك وأكد للجميع لا.تم قياس مستويات البروجسترون المصل باستخدام المقايسة chemiluminescent الآلي. الشكل الثاني- 1- الأرقام 2- مستضد محدد IgG التي تم نقلها عبر البلاستيك أثناء الحمل يمكن قياسها في مصل مجموعات من قبل إليسا.يمكن جمع الدم من عدد قليل من مجموعات في أو بالقرب من وقت الولادة لتقييم مستويات الأجسام المضادة المستضد المحددة في وقت مبكر. جمع الدم التسلسلي هو من الناحية الفنية أسهل بكثير مع تقدم مجموعات العمر وزيادة في الحجم. وكما هو مبين في الشكل الثاني، يمكن قياس مستويات المصل من IgG محددة مستضد في مجموعات ومقارنتها بمستويات الأم.مستويات IgG المنقولة من الأمهات أعلى عند الولادة وتنخفض بمرور الوقت. الشكل الثالث - 1- الأرقام 3- يمكن جمع حليب الأرانب كما هو مبين في هذا الفيديو، ومعالجته لقياس مستويات الجسم المضاد الكلية والمضادة المحددة من قبل إليسا.كما هو مبين في هذا الرقم، تشكل IgA جزءا كبيرا من إجمالي الأجسام المضادة داخل حليب الثدي المتاحة للنقل السلبي إلى المجموعات. مستويات IgA وIgG أعلى بكثير من IgM.Summary. يصف هذا المقال الفيديوي ويدل على إعطاء اللقاحات داخل الجهاز المناعي وجمع الحليب من الأرانب المرضعة كوسيلة لتقييم المناعة المخاطية في نموذج مناسب ترجمة للتحصين ضد الأم.يصور هو صورة موجزة لتصميم دراسة التمنيع الأمومي نموذجية تتضمن التحصينات، وتربية، وإشعال، والرضاعة، ونقل الأجسام المضادة.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits (Oryctolagus cuniculus)

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

تنبيغ من فيروسات تي خلية المستقبلات في الخلايا التائية ماوس

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

إرساء ثقافة السائل المغطاة من مجرى الهواء الإنسان المستقطب طلائي Calu-3 خلايا لدراسة استجابة الخلية المضيفة لمسببات الأمراض التنفسية<em&gt; في المختبر</em

The  apical and basolateral surfaces of airway epithelial cells demonstrate  directional responses to pathogen exposure in  vivo. Thus, ideal in vitro ...

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

رصد التغيرات في غشاء التقاطب، غشاء النزاهة، وبين الخلايا ايون التركيزات في<em&gt; العقدية الرئوية</em&gt; استخدام الأصباغ نيون

Membrane depolarization and ion fluxes are events that have been studied extensively in biological systems due to their ability to profoundly impact ...

Myeloid Cell Isolation from Mouse Skin and Draining Lymph Node Following Intradermal Immunization with Live Attenuated Plasmodium Sporozoites

Myeloid Cell Isolation from Mouse Skin and Draining Lymph Node Following Intradermal Immunization with Live Attenuated Plasmodium Sporozoites

النخاعي عزل الخلايا من الجلد ماوس وتصريف العقدة الليمفاوية بعد الأدمة التحصين مع لايف الموهن<em&gt; المتصورة</em&gt; Sporozoites

Malaria infection begins when the sporozoite stage of Plasmodium is inoculated into the skin of a mammalian host through a mosquito bite. The highly ...

Human Placental and Decidual Organ Cultures to Study Infections at the Maternal-fetal Interface

الثقافات المشيمة وساقطي الجهاز الإنسان لدراسة العدوى في واجهة الأم والجنين

The placenta shows a large degree of interspecies anatomic variability. To best understand biology and pathophysiology of the human placenta, it is ...

Noninvasive Sampling of Mucosal Lining Fluid for the Quantification of In Vivo Upper Airway Immune-mediator Levels

Noninvasive Sampling of Mucosal Lining Fluid for the Quantification of In Vivo Upper Airway Immune-mediator Levels

موسع لأخذ العينات من السوائل البطانة المخاطية للتحديد الكمي للمناعة-الوسيط في فيفو مجرى الهواء العلوي في مستويات

This protocol describes noninvasive sampling of undisturbed upper airway mucosal lining fluid. It also details the extraction procedure used prior to the ...

A Method for Targeted 16S Sequencing of Human Milk Samples

أسلوب لتسلسل 16S المستهدفة من عينات اللبن البشري

Studies of microbial communities have become widespread with the development of relatively inexpensive, rapid, and high throughput sequencing. However, as ...

Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay

وصف الاستجابات ايستب الغلوبولين المناعي تعتمد على الغدة الصعترية، والغدة الصعترية مستقلة في الفئران باستخدام مقايسة الممتز المرتبط بالانزيم

Antibodies, also termed as immunoglobulins (Ig), secreted by differentiated B lymphocytes, plasmablasts/plasma cells, in humoral immunity provide a ...

Immunization of Adult Zebrafish for the Preclinical Screening of DNA-based Vaccines

تحصين الزرد الكبار للفحص السريري للقاحات الحمض النووي القائم

The interest in DNA-based vaccination has increased during the past two decades. DNA vaccination is based on the cloning of a sequence of a selected ...

Human Colonoid Monolayers to Study Interactions Between Pathogens, Commensals, and Host Intestinal Epithelium

مونولاييرس كولونويد البشرية لدراسة التفاعلات بين العوامل الممرضة، كومينسالس، وظهاره الأمعاء المضيف

Human 3-dimensional (3D) enteroid or colonoid cultures derived from crypt base stem cells are currently the most advanced ex vivo model of the intestinal ...