Name: intranasal immunization and milk collection in studies of maternal immunization in new zealand white rabbits (oryctolagus cuniculus)
Uploaded: 2021-07-31T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus at JoVE.com

Forfatterne vil gerne anerkende Division of Laboratory Animal Resources på Duke University og deres opdræt team for deres hjælp og stor omhu til dyrene. Derudover vil forfatterne gerne genkende PhotoPath-teamet i Institut for Patologi for deres hjælp med lyd- og videodelene af manuskriptet. Dette arbejde blev støttet af skønsmæssige forskningsmidler fra Staats-laboratoriet.

Alle procedurer blev godkendt og udført i overensstemmelse med Duke University IACUC's politik.
BEMÆRK: De nødvendige materialer findes i materialeoversigten.
1. Kanin sedation og anæstesi
<ol><li>Bedøve den kvindelige kanin (seksuelt moden; ca. 5-30 måneder gammel) ved at administrere acepromazine intramuskulært (IM) ved en dosis på 1 mg/kg. Afhængigt af dyrets størrelse skal du bruge en 1 eller 3 mL sprøjte med en 25 G nål. Epaxial m...

Selvom det ikke er beskrevet i ovenstående protokol, er vellykket opdræt af kaninerne nødvendig for denne modermodel og for at give mulighed for mælkeindsamling. Kaniner opdrættes let af levende dækning i en forskningsindstilling. Det anbefales, at der overføres til sorteper bur til avl, som gør kan være territoriale og aggressive, hvis de holdes i deres eget bur med sorteper. Hvis hunnerne ikke er modtagelige efter 15 minutter (som angivet ved at løbe væk bidende, eller vocalizing), skal doe placeres tilbage ...

Undersøgelser af moderens immunisering og antistofoverførsel er uvurderlige af mange grunde, da dette er den første vej til immunitetsoverførsel og efterfølgende beskyttelse mod patogener og sygdomme hos nyfødte og spædbørn. Immunisering af mødre har potentiale til at have en positiv indvirkning på både mødres og spædbørns sundhed på globalt plan ved at reducere sygelighed og dødelighed i forbindelse med visse patogener i denne sårbare periode1. Hovedformålet med denne strategi er at øge niveauet af specifikke moderantistoffer under hele graviditeten. Disse antistoffer kan derefter overføres til den nyfødte og spædbarn på niveauer, der er tilstrækkelige til at beskytte modinfektioner,indtil deres immunsystem er modent nok til at reagere tilstrækkeligt på udfordringer1,2,3. Tidligere arbejde har vist, at højere antistoftitler ved fødslen er forbundet med enten fuldstændig beskyttelse eller en forsinket debut og reduceret sværhedsgrad af mange forskellige smitsomme sygdomme hos den nyfødte, herunder stivkrampe, pertussis, respiratorisk syncytial virus (RSV), influenza og gruppe B streptokokinfektioner1,2,3.
Hos mennesker overføres moderantistoffer passivt over moderkagen og overføres også gennem modermælken via sygepleje. Tidligere arbejde har vist, at HIV-specifikke IgA-niveauer i modermælk fra mødre smittet med virus var forbundet med reduceret postnatal overførsel af virus, hvilket tyder på en beskyttende rolle for modermælk anti-HIV IgA4. Undersøgelser i ikke-menneskelige primater har vist, at immunisering mod HIV kan fremkalde en signifikant antistofrespons i modermælken, og selv om lignende serum-IgG-reaktioner blev induceret efter systemisk versus slimhindevaccination, fremkaldte slimhindevaccination en betydeligt højere IgA-respons i mælken5,6.
Ved identifikationen af en translationelt passende dyremodel for disse undersøgelser bør der tages hensyn til moderkagetypen og mekanismerne for passiv overførsel af antistoffer samt overførsel af antistoffer gennem modermælk. Der er tre hovedtyper af placentation hos pattedyr baseret på vævstyper og lag på materno-føtal interface, herunder hemochorial (primater, gnavere og kaniner), endotheliochorial (kødædende dyr), og epitheliochorial (heste, svin og drøvtyggere). Den hemochoriale moderkage er den mest invasive type, der giver mulighed for direkte kommunikation mellem moderens blodforsyning og chorion, eller den yderste fostermembran. Baseret på antallet af trophoblast lag, der er flere variationer af hemochorial placentation, herunder hæmomonochorial placenta findes i primater, den hæmodale moderkage hos kaniner, og hæmotrichorial placenta observeret hos rotter og mus7. Denne direkte kontakt mellem moderens blodforsyning og chorion giver mulighed for passiv overførsel af antistoffer på tværs af moderkagen under svangerskabet. IgG er den eneste antistofklasse, der i væsentlig grad krydser den menneskelige moderkage8, mens IgA er den fremherskende klasse af Ig, der findes i modermælk9. Af de videnskabeligt relevante modeller overfører kun primater (herunder mennesker), kaniner og marsvin IgG i livmoderen og IgA i mælken10,11. Derfor indeholder kaninmodellen faktorer, der kan sammenlignes med dem hos mennesker, der styrer transplacental overførsel af IgG og amningsoverførsel af IgA.
Ud over at tjene som en ekstraordinær model for moderens immunitet og vaccine udvikling, ligheder mellem kanin og menneskelige næsehulen gør dem til en passende model for intranasal immunisering. Mængden af kaninens næsehulrum ligner mere mennesker end gnavermodeller baseret på relativ kropsmasse12. Derudover viste Casteleyn et al. 12, at det nasal-associerede lymfoide væv (NALT) er mere voluminøst i kaninen sammenlignet med gnavere. NALT er primært placeret på det ventrale og ventromediale aspekt af ventral nasal meatus og på det laterale og dorsolaterale aspekt af nasopharyngeal meatus hos kaniner, mens lymfoidvævet i gnavere kun er til stede langs det ventrale aspekt af nasopharyngeal meatus12. Hos kaniner ligner strukturen og placeringen af intraepithelial og lamina propria lymfocytter samt de isolerede lymfoidsække som mennesker12.
Yderligere fordele ved at bruge kaninen som model for moderens og slimhindeimmunitet omfatter deres høje fecundity og relativt korte drægtighedsperiode. Store auricular blodkar giver mulighed for relativt nem adgang til store mængder blod til serielle samlinger. Der kan indsamles en række slimhindeprøver til antigenspecifikke antistofresponsanalyser herunder modermælk13 (ved amning), slimhindesekretioner eller -vaske (f.eks. oral14,15,16, bronchoalveolar lavage13,17,18,19, vaginal20,21,22) og afføring20,23,24,25. Mælkeprøver kan let indsamles under amning for at vurdere tilstedeværelsen af antigenspecifikke antistofresponser. Selvom det ikke er så rigeligt som for mennesker og mus, en bred vifte af eksperimentelle reagenser er tilgængelige for kanin-specifikke undersøgelser og assays. I denne artikel vil vi beskrive og demonstrere intranasal immunisering og mælkeindsamling i New Zealand Hvide kaniner (Oryctolagus cuniculus).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Intranasal Immunization</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Machine/Vaporizer</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>901807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (25 g)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>07-806-7584</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (250 mL Bottle)</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td>2-4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Syringe (1 mL)</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>07-892-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mucosal Vaccine</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Experimental Vaccine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nose Cone</td>
			<td>McCulloch Medical</td>
			<td>07891-1097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Tips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>53503-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettor</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89079-962</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PromAce (Acepromazine maleate)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>07-893-5734</td>
			<td>1mg/kg IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Sterile Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>07-888-2572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milk Collection</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol Prep 2-ply</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>07-839-8871</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Machine/Vaporizer</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>901807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needles (25 g)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>07-806-7584</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (250 mL Bottle)</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td>2-4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Syringe (1 mL)</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>07-892-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Woven Sponge (4x4)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>07-891-5815</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nose Cone</td>
			<td>McCulloch Medical</td>
			<td>07891-1097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PromAce (Acepromazine Maleate)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>07-893-5734</td>
			<td>1mg/kg IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Sterile Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>07-888-2572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Conical Vial (15 mL)</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>14-959-49B</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intranasal immunization and milk collection in studies of maternal immunization in new zealand white rabbits (oryctolagus cuniculus)

På grund af ligheder i placentation og antistofoverførsel med mennesker er kaniner en fremragende model for moderimmunisering. Yderligere fordele ved denne forskningsmodel er den lette avl og prøvesamling, relativt kort drægtighedsperiode og store kuldstørrelser. Almindeligt vurderede immuniseringsveje omfatter subkutane, intramuskulære, intranasale og intradermale. Nonterminal prøve indsamling til kronologisk påvisning af immunologiske reaktioner på disse immuniseringer omfatter indsamling af blod, fra både dæmninger og kits, og mælk fra amning gør. I denne artikel vil vi demonstrere teknikker, som vores laboratorium har brugt i undersøgelser af moderimpusation hos New Zealand Hvide kaniner (Oryctolagus cuniculus), herunder intranasal immunisering og mælkeindsamling.

En oversigt over en typisk maternel intranasal immunisering undersøgelse design er afbildet i figur 1, der omfatter immuniseringer, avl, optænding, amning, og antistof overførsel. Selv om det ikke er illustreret, bør blodet indsamles forud for den første immunisering for baseline målinger og i hele resten af undersøgelsen med jævne mellemrum. Blod opnås let via den centrale ørearterie med mild sedation og et aktuelt smertestillende middel (f.eks. lidocain 2,5% og prilocain 2,5% fl?...

Watch this Scientific Journal Video about Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus at JoVE.com

Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus

Denne artikel beskriver og demonstrerer indgift af intranasale vacciner og indsamling af mælk fra ammende kaniner (Oryctolagus cuniculus) som et middel til at vurdere slimhindeimmunitet i en translationelt passende model for moderens immunisering.

Intranasal immunisering og mælkeindsamling i undersøgelser af mødres immunisering hos newzealandske hvide kaniner (Oryctolagus cuniculus)

Due to similarities in placentation and antibody transfer with humans, rabbits are an excellent model of maternal immunization. Additional advantages of ...

Undersøgelser af moderens immunisering og antistofoverførsel er uvurderlige af mange grunde, da dette er den første vej til immunitetsoverførsel og efterfølgende beskyttelse mod patogener og sygdomme hos nyfødte og spædbørn. På grund af ligheder i placentation og antistofoverførsel med mennesker er kaniner en fremragende model for moderimmunisering. I denne videoartikel demonstrerer vi teknikker, som vores laboratorium har brugt i undersøgelser af moderimation i New Zealand White Rabbits, herunder intranasal immunisering og mælkeindsamling.Vi vil først beskrive et eksempel tidslinje og serie af begivenheder for en slimhinde moderens immunisering undersøgelse i New Zealand White Rabbits. Kvindelige kaniner immuniseres via intranasal ruten, som det fremgår af denne video. Afhængigt af undersøgelsen kan vaccinen kræve et løft eller muligvis skal gives gennem en ekstra rute, såsom intramuskulær immunisering.Selv om det ikke er afbildet, bør blod indsamles forud for den indledende immunisering for baseline målinger, og i hele resten af undersøgelsen med jævne mellemrum. Blod opnås let ved den centrale ørearterie med mild sedation og et aktuelt smertestillende middel. Tilstedeværelsen af antigenspecifikke IgG-niveauer kan måles i disse prøver.Kaniner opdrættes derefter. Vi foretrækker at købe dokumenterede opdrættere fra leverandører til brug for at sikre en højere graviditet sats for disse undersøgelser. Afhængigt af immunisering tidslinjen, kaniner kan modtage yderligere vaccinationer under hele graviditeten.Antigenspecifik IgG overføres transplacentally til kits. På ca 30 til 32 dage efter avl gravid gør, vil fæng. Vi anbefaler, at du begrænser håndteringen af sættene i de første par dage for at minimere afvisningen fra gør.Blodprøver kan indsamles fra kits til at vurdere antigen specifikke IgG niveauer, der blev overført transplacentally. Blod kan indsamles fra et lille antal kits på eller nær fødselstidspunktet for at vurdere tidlige antigenspecifikke antistofniveauer. Ud over en bred vifte af næringsstoffer, kits modtage antigen specifikke IgA fra ammende doe, mens sygepleje.Kits er typisk fravænnede på fire til otte uger. Forud for fravænning mælk kan nemt indsamles fra ammende gør som påvist i denne video. De indsamlede mælkeprøver behandles derefter med henblik på påvisning af antigenspecifik IgA.Afhængigt af undersøgelsen, vacciner og et løft kan administreres til kits og serielle blodprøver kan indsamles fra kits i en meget tidlig alder ved hjælp af lateral saphenous vene. Vi vil nu demonstrere intranasal immunisering og mælkeindsamling i New Zealand White Rabbits.Protocol. Alle procedurer blev godkendt og udført i overensstemmelse med Duke University Institutional Animal Care and Use Committee politikker.Intranasal immunisering. Nødvendige materialer:Acepromazine, sprøjte og nål, oftalmisk smøremiddel, Isoflurane, næse kegle, pipette, og pipette tips, slimhindevaccine. Forbered immuniseringsopløsningen inden håndtering af dyr.Kaniner bedøves med Acepromazine et milligram pr. Kg intramuskulært og bedøves med Isoflurane ved hjælp af en næsekegler. Når det er fuldt bedøvet som vurderet ved øjenlåg refleks, en oftalmisk smøremiddel tilsættes til hvert øje for at forhindre tørring af øjnene og efterfølgende hornhindesår. Når laboratoriemedlemmet er klar til at administrere vaccinen, og kaninen er i et passende anæstesiplan, skal du slukke for isofluranen og ilten og fjerne næsekeflen.Placer kaninen i dorsal recumbency og prop hals og hoved på en omtrentlig 45 graders vinkel, der giver nem adgang til og visualisering af begge alars af lab medlem administrere vaccinen. Rørten må ikke fyldes med mere end 100 mikroliter af vaccineopløsningen, og opløsningen skal hurtigt administreres til ét næsebor, og proceduren for det andet næsebor gentages. Pipetten skal holdes i en omtrentlig 45 graders vinkel.Vinkel mod det mediale aspekt af næsepassagen. Målet med immunisering er for opløsningen at kontakte slimhinderne i narerne. Spidsen bør derfor ikke placeres i narerne, da dette kan resultere i slid eller irritation af slimhindevævet og potentielt påvirke immunogeniciteten af den nasally administrerede vaccine.Vaccinen skal administreres hurtigt og gøres på samme måde i det andet næsebor. Efter administration i begge næsepassager opretholdes kaninen i dorsal recumbency i 30 sekunder for at minimere lækage af vaccineopløsningen. Laboratoriet vil typisk ikke administrere mere end 100 mikroliter pr. næsebor ad gangen.Hvis et større volumen skal administreres med et maksimalt samlet volumen på 500 mikroliter, kan vaccinen gives i 100 mikroliter aliquots med en hvileperiode på 30 sekunder mellem immuniseringer. Og yderligere administrationer af vaccine gentaget med 30 sekunders hvile mellem hver administration, indtil den samlede vaccine volumen er leveret. Efter immunisering skal du placere kaninen på ventrum til genopretning og nøje overvåge dyret, indtil det er i stand til at opretholde sternal recumbency.I nogle tilfælde kan vaccineformuleringen ikke leveres helt til næsehulen, og en del af vaccineformuleringen kan forblive på den udvendige del af narerne. I dette tilfælde, fordi det ikke er klart af den nøjagtige mængde af vaccinen, der blev korrekt leveret til næsehulen, anbefaler ikke genansøgning af yderligere vaccinemateriale, da dette ville tilføje en udefineret variabel til eksperimentet. Det er vigtigt at bruge en vaccine levering teknik, der giver fuldstændig og konsekvent levering af vaccinen formulering til nares.Mælkeindsamling. Nødvendige materialer:Acepromazine, sprøjter og nåle, alkoholpind, gaze, oftalmisk smøremiddel, Isoflurane, næsekegle, oxytocin og et indsamlingsglas. Kaniner bedøves med Acepromazine et milligram pr. Kg intramuskulært og bedøves med Isoflurane ved hjælp af en næsekegler.Når det er fuldt bedøvet som vurderet ved øjenlåg refleks, en oftalmisk smøremiddel påføres hvert øje for at forhindre tørring af øjnene og efterfølgende hornhindesår. Rengør huden over den marginale øreåre med alkoholpinden. Ved hjælp af en en mil sprøjte og 25 gauge nål, administrere ca en til to internationale enheder af oxytocin intravenøst af den marginale øre vene til at fremkalde mælk svigtet.På grund af den glatte muskelafslapning er det almindeligt, at kaninen urinerer eller afføring efter administration af oxytocin. Efter oxytocin administration, lægge pres på injektionsstedet med et stykke gaze til at give hemostase. Mens du opretholder anæstesimasken eller næsekeglerne over kaninens næse, skal du støtte kaninen op på bagkvarteret.Som en side bemærkning, kan mælk indsamling også udføres med dyret i lateral recumbency, men laboratoriet konstaterer, at indsamlingen er lettere, når kaninen er understøttet op på det rump med en assistent holder kanin oprejst med anæstesi maske. Åbn det sterile rør for at forberede mælkeopsamlingen og find brystvævet og tilhørende patter. Kaniner har typisk fire til fem par brystkirtler.Patterne er typisk omgivet af våd pels fra nyere sygepleje og brystvævet er let håndgribeligt, når det er fuld af mælk. Tag fat i brystvævet, der er forbundet med patten mellem tommel- og pegefingeren, og påfør et blidt masseretryk på kirtelvævet i retning af patten. Placer opsamlingsrøret over patten for at indsamle den udtrykte mælk.Det kan nogle gange tage flere minutter for oxytocin at være effektiv, og mælkeproduktionen synes at variere blandt brystkirtlerne. Hvis mælkeudtrykket ikke lykkes, skal du vente flere minutter eller rotere rundt til en ekstra brystkirtel. Mælk fra alle patter kan opsamles i samme modbydelige.Typisk flere milliliter mælk kan nemt indsamles fra en ammende doe. Når den ønskede mængde mælk er indsamlet, skal du slukke isofluranen og ilten og fjerne næsekeglerne fra kaninen og lade kaninen komme sig, mens den overvåges nøje, indtil dyret er i stand til at opretholde sternal recumbency. Repræsentative resultater.Figur et. For mødre undersøgelser, bestemmelse graviditet så tidligt som muligt er nyttigt at bekræfte, at doe ikke behøver at blive opdrættet igen. Muligheder for graviditetsdetektion omfatter palpation, ultralyd, røntgenbilleder, vægtøgning og molekylære teknikker såsom målinger af insulinvækstfaktorer og progesteron.Tilstrækkelige progesteronniveauer er nødvendige for vedligeholdelse af graviditet hos kaniner. Derfor har flere undersøgelser også vurderet progesteronniveauer hos gravide kaniner og påvist forhøjede niveauer i forhold til ikke-gravide kaniner, især under organogenese omkring midten af svangerskabet. Som vist i figur et, forhøjede progesteron niveauer kan påvises hos gravide kaniner i forhold til ikke-gravide kaniner, selv efter parringer af en sorteper blev bekræftet for alle gør.Serum progesteron niveauer blev målt ved hjælp af en automatiseret chemiluminescent assay. Figur to. Antigenspecifik IgG, der blev overført transplaceret under svangerskabet, kan måles i Elisa's serum af sættene.Blod kan indsamles fra et lille antal kits på eller nær fødselstidspunktet for at vurdere tidlige antigenspecifikke antistofniveauer. Seriel blodopsamling er teknisk meget lettere som kits alder og stigning i størrelse. Som afbildet i figur to kan serumniveauer af antigenspecifik IgG i sættene måles og sammenlignes med moderens niveauer.Maternally overført IgG niveauer er højere ved fødslen og falde over tid. Figur tre. Kaninmælk kan indsamles som vist i denne video og behandles for at måle det samlede og antigenspecifikke antistofniveauer af Elisa.Som vist i dette tal udgør IgA en betydelig del af de samlede antistoffer i modermælken, der er tilgængelige for passiv overførsel til kits. Både IgA- og IgG-niveauerne er betydeligt højere end IgM.Summary. Denne videoartikel beskriver og demonstrerer administrationen af intranasale vacciner og indsamling af mælk fra ammende kaniner som et middel til at vurdere slimhindeimmunitet i en translationelt passende model for moderimmunisering.Afbildet er et resumé billede for en typisk maternel intranasal immunisering undersøgelse design indarbejde immuniseringer, avl, optænding, amning, og antistof overførsel.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits (Oryctolagus cuniculus)

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Etablering af en Liquid-dækket kultur Polarized humane luftveje Epitelial Calu-3-celler til at studere Host celle respons på luftvejspatogener<em&gt; In vitro</em

The  apical and basolateral surfaces of airway epithelial cells demonstrate  directional responses to pathogen exposure in  vivo. Thus, ideal in vitro ...

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Overvåge ændringer i Membrane polaritet, Membrane Integritet, og intracellulære Ion Koncentrationerne i<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; Brug fluorescerende farvestoffer

Membrane depolarization and ion fluxes are events that have been studied extensively in biological systems due to their ability to profoundly impact ...

Myeloid Cell Isolation from Mouse Skin and Draining Lymph Node Following Intradermal Immunization with Live Attenuated Plasmodium Sporozoites

Myeloid Cell Isolation from Mouse Skin and Draining Lymph Node Following Intradermal Immunization with Live Attenuated Plasmodium Sporozoites

Myeloid Cell Isolation fra Mouse Hud og drænende lymfeknude Efter Intrakutan Vaccination med levende svækket<em&gt; Plasmodium</em&gt; sporozoitter

Malaria infection begins when the sporozoite stage of Plasmodium is inoculated into the skin of a mammalian host through a mosquito bite. The highly ...

Human Placental and Decidual Organ Cultures to Study Infections at the Maternal-fetal Interface

Humane placenta og decidua Organ kulturer til at studere Infektioner på Maternal-føtal interface

The placenta shows a large degree of interspecies anatomic variability. To best understand biology and pathophysiology of the human placenta, it is ...

Noninvasive Sampling of Mucosal Lining Fluid for the Quantification of In Vivo Upper Airway Immune-mediator Levels

Noninvasive Sampling of Mucosal Lining Fluid for the Quantification of In Vivo Upper Airway Immune-mediator Levels

Noninvasiv prøveudtagning af slimhindebelægning væske til kvantificering af In Vivo øvre luftveje immun-mægler niveauer

This protocol describes noninvasive sampling of undisturbed upper airway mucosal lining fluid. It also details the extraction procedure used prior to the ...

A Method for Targeted 16S Sequencing of Human Milk Samples

En metode til målrettede 16S sekvensering af modermælk prøver

Studies of microbial communities have become widespread with the development of relatively inexpensive, rapid, and high throughput sequencing. However, as ...

Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay

Karakterisering af Thymus-afhængige og Thymus-uafhængig Immunoglobulin Isotype svar i mus ved hjælp af enzym-forbundet Immunosorbent Assay

Antibodies, also termed as immunoglobulins (Ig), secreted by differentiated B lymphocytes, plasmablasts/plasma cells, in humoral immunity provide a ...

Immunization of Adult Zebrafish for the Preclinical Screening of DNA-based Vaccines

Immunisering af voksen zebrafisk for præklinisk Screening af DNA-baserede vacciner

The interest in DNA-based vaccination has increased during the past two decades. DNA vaccination is based on the cloning of a sequence of a selected ...

Human Colonoid Monolayers to Study Interactions Between Pathogens, Commensals, and Host Intestinal Epithelium

Menneskelige Colonoid encellelag at studere samspillet mellem patogener, latente og vært intestinale epitel

Human 3-dimensional (3D) enteroid or colonoid cultures derived from crypt base stem cells are currently the most advanced ex vivo model of the intestinal ...