Name: intranasal immunization and milk collection in studies of maternal immunization in new zealand white rabbits (oryctolagus cuniculus)
Uploaded: 2021-07-31T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus at JoVE.com

De auteurs willen de afdeling Laboratory Animal Resources van Duke University en hun veeteeltteam erkennen voor hun hulp en grote zorg voor de dieren. Daarnaast willen de auteurs het PhotoPath-team binnen de afdeling Pathologie herkennen voor hun hulp bij de audio- en videogedeelten van het manuscript. Dit werk werd ondersteund door discretionaire onderzoeksfondsen van het Staatslaboratorium.

Alle procedures werden goedgekeurd en uitgevoerd in overeenstemming met het IACUC-beleid van duke university.
OPMERKING: De benodigde materialen zijn opgenomen in de tabel met materialen.
1. Konijnensedatie en anesthesie
<ol><li>Verdoven van het vrouwelijke konijn (geslachtsrijp; ongeveer 5-30 maanden oud) door acepromazine intramusculair (IM) toe te dienen in een dosis van 1 mg/kg. Afhankelijk van de grootte van het dier, gebruik een spuit van 1 ...

Hoewel niet beschreven in het bovenstaande protocol, is een succesvolle fokkerij van de konijnen noodzakelijk voor dit moedermodel en om melkverzameling mogelijk te maken. Konijnen worden gemakkelijk gefokt door live dekking in een onderzoeksomgeving. Het wordt aanbevolen om deze over te brengen naar de kooi van de bok voor de fokkerij, net als territoriaal en agressief kan zijn als ze in hun eigen kooi met de bok worden gehouden. Als vrouwtjes na 15 minuten niet ontvankelijk zijn (zoals aangegeven door weg te lopen bijt...

Studies naar maternale immunisatie en antilichaamoverdracht zijn om tal van redenen van onschatbare waarde, omdat dit de eerste route van immuniteitsoverdracht en daaropvolgende bescherming tegen pathogenen en ziekten bij pasgeborenen en zuigelingen is. Maternale immunisatie kan zowel de gezondheid van moeder als kind/kind op mondiaal niveau positief beïnvloeden door de morbiditeit en mortaliteit geassocieerd met bepaalde pathogenen tijdens deze kwetsbare periode te verminderen1. Het belangrijkste doel van deze strategie is om de niveaus van specifieke maternale antilichamen tijdens de zwangerschap te verhogen. Deze antilichamen kunnen vervolgens worden overgedragen op de pasgeborene en de zuigeling op een niveau dat voldoende is om te beschermen tegen infecties totdat hun immuunsysteem volwassen genoeg is om adequaat te reageren op uitdagingen1,2,3. Eerder onderzoek heeft aangetoond dat titers met een hoger antilichaam bij de geboorte geassocieerd zijn met volledige bescherming of een vertraagd begin en verminderde ernst van tal van verschillende infectieziekten bij de pasgeborene, waaronder tetanus, kinkhoest, respiratoir syncytieel virus (RSV), influenza en streptokokkeninfecties van groep B1,2,3.
Bij mensen worden maternale antilichamen passief over de placenta overgebracht en ook via de moedermelk via borstvoeding overgedragen. Eerder werk heeft aangetoond dat hiv-specifieke IgA-niveaus in de moedermelk van moeders die besmet waren met het virus geassocieerd waren met een verminderde postnatale overdracht van het virus, wat wijst op een beschermende rol voor moedermelk anti-HIV IgA4. Studies bij niet-menselijke primaten hebben aangetoond dat immunisatie tegen HIV een significante antilichaamrespons in de moedermelk kan veroorzaken, en hoewel vergelijkbare serum-IgG-reacties werden geïnduceerd na systemische versus mucosale immunisatie, veroorzaakte mucosale immunisatie een significant hogere IgA-respons in de melk5,6.
Bij het vaststellen van een translationeel geschikt diermodel voor deze studies moet rekening worden gehouden met het placentatietype en de mechanismen voor passieve overdracht van antilichamen, alsmede met de overdracht van antilichamen via moedermelk. Er zijn drie hoofdtypen placentatie bij zoogdieren op basis van de weefseltypen en lagen op de materno-foetale interface, waaronder hemochoriale (primaten, knaagdieren en konijnen), endotheliochorial (carnivoren) en epitheliochorial (paarden, varkens en herkauwers). De hemochoriale placenta is het meest invasieve type, waardoor directe communicatie mogelijk is tussen de bloedtoevoer van de moeder en het koraal, of het buitenste foetale membraan. Op basis van het aantal trofoblastlagen zijn er verschillende variaties van hemochoriale placentatie, waaronder de hemomonochoriale placenta gevonden bij primaten, de hemodichoriale placenta bij konijnen en de hemotrichoriale placenta waargenomen bij ratten en muizen7. Dit directe contact tussen de bloedtoevoer van de moeder en het koraal zorgt voor de passieve overdracht van antilichamen over de placenta tijdens de zwangerschap. IgG is de enige antilichaamklasse die de menselijke placenta significant passeert8, terwijl IgA de overheersende klasse van Ig is die in menselijke moedermelk wordt aangetroffen9. Van de wetenschappelijk relevante modellen brengen alleen primaten (inclusief mensen), konijnen en cavia's IgG over in utero en IgA in de melk10,11. Daarom bevat het konijnenmodel factoren die vergelijkbaar zijn met die bij mensen die de transplacentale overdracht van IgG en lactaatoverdracht van IgA controleren.
Naast het dienen als een uitzonderlijk model voor maternale immuniteit en vaccinontwikkeling, maken overeenkomsten tussen het konijn en menselijke neusholtes ze een geschikt model voor intranasale immunisatie. Het volume van de neusholte van het konijn lijkt meer op mensen dan knaagdiermodellen op basis van relatieve lichaamsmassa12. Bovendien toonden Casteleyn et al. 12 aan dat het nasale geassocieerde lymfoïde weefsel (NALT) volumineuzer is bij het konijn in vergelijking met knaagdieren. De NALT bevindt zich voornamelijk op het ventrale en ventrolytische aspect van de ventrale neusvlees en op het laterale en dorsolaterale aspect van de nasofaryngeale meatus bij konijnen, terwijl bij knaagdieren het lymfoïde weefsel alleen aanwezig is langs het ventrale aspect van de nasofaryngeale meatus12. Bij konijnen zijn de structuur en locatie van de intra-epitheliale en lamina propria-lymfocyten, evenals de geïsoleerde lymfoïde follikels, vergelijkbaar met die van mensen12.
Extra voordelen van het gebruik van het konijn als model voor maternale en mucosale immuniteit zijn hun hoge vruchtbaarheid en relatief korte draagtijd. Grote auricular bloedvaten zorgen voor relatief gemakkelijke toegang tot grote hoeveelheden bloed voor seriële collecties. Een verscheidenheid van mucosal steekproeven kan voor antigeen-specifieke antilichaamreactietesten worden verzameld, met inbegrip van moedermelk13 (wanneer het lacteren), mucosal afscheidingen of wasbeurten (b.v.,mondelinge14,15,16,bronchoalveolaire lavage13,17,18,19,vaginale20, 21,22),en uitwerpselen20,23,23. Melkmonsters kunnen gemakkelijk worden verzameld tijdens de lactatie om de aanwezigheid van antigeenspecifieke antilichaamresponsen te beoordelen. Hoewel niet zo overvloedig als voor mensen en muizen, is een breed scala aan experimentele reagentia beschikbaar voor konijnenspecifieke studies en assays. In dit artikel zullen we intranasale immunisatie en melkverzameling beschrijven en demonstreren bij Nieuw-Zeelandse witte konijnen(Oryctolagus cuniculus).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Intranasal Immunization</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Machine/Vaporizer</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>901807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (25 g)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>07-806-7584</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (250 mL Bottle)</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td>2-4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Syringe (1 mL)</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>07-892-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mucosal Vaccine</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Experimental Vaccine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nose Cone</td>
			<td>McCulloch Medical</td>
			<td>07891-1097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Tips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>53503-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettor</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89079-962</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PromAce (Acepromazine maleate)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>07-893-5734</td>
			<td>1mg/kg IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Sterile Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>07-888-2572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milk Collection</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol Prep 2-ply</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>07-839-8871</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Machine/Vaporizer</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>901807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needles (25 g)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>07-806-7584</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (250 mL Bottle)</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td>2-4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Syringe (1 mL)</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>07-892-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Woven Sponge (4x4)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>07-891-5815</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nose Cone</td>
			<td>McCulloch Medical</td>
			<td>07891-1097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PromAce (Acepromazine Maleate)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>07-893-5734</td>
			<td>1mg/kg IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Sterile Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>07-888-2572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Conical Vial (15 mL)</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>14-959-49B</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intranasal immunization and milk collection in studies of maternal immunization in new zealand white rabbits (oryctolagus cuniculus)

Vanwege overeenkomsten in placentatie en antilichaamoverdracht met mensen, zijn konijnen een uitstekend model van maternale immunisatie. Extra voordelen van dit onderzoeksmodel zijn het gemak van fokken en monsterverzameling, relatief korte draagtijd en grote nestgroottes. Algemeen beoordeelde immunisatieroutes omvatten subcutane, intramusculaire, intranasale en intradermale. Niet-terminale monsterverzameling voor de chronologische detectie van de immunologische reacties op deze immunisaties omvat de verzameling van bloed, van zowel dammen als kits, en melk uit de lactatie wel. In dit artikel zullen we technieken demonstreren die ons lab heeft gebruikt in studies naar maternale immunisatie bij Nieuw-Zeelandse witte konijnen(Oryctolagus cuniculus),waaronder intranasale immunisatie en melkverzameling.

Een overzicht van een typisch ontwerp van een intranasale immunisatiestudie bij de moeder is weergegeven in figuur 1, waarin de immunisaties, fokken, aanmaak, lactatie en antilichaamoverdracht zijn opgenomen. Hoewel niet geïllustreerd, moet bloed worden verzameld voorafgaand aan de initiële immunisatie voor nulmetingen en gedurende de rest van het onderzoek met regelmatige tussenpozen. Bloed is gemakkelijk te verkrijgen via de centrale oorslagader met milde sedatie en een topisch pijnstill...

Watch this Scientific Journal Video about Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus at JoVE.com

Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus

Dit artikel beschrijft en demonstreert de toediening van intranasale vaccins en de verzameling van melk van zogende konijnen (Oryctolagus cuniculus) als een middel om mucosale immuniteit te beoordelen in een translationeel geschikt model van maternale immunisatie.

Intranasale immunisatie en melkverzameling in studies naar maternale immunisatie bij Nieuw-Zeelandse witte konijnen (Oryctolagus cuniculus)

Due to similarities in placentation and antibody transfer with humans, rabbits are an excellent model of maternal immunization. Additional advantages of ...

Studies naar maternale immunisatie en antilichaamoverdracht zijn om tal van redenen van onschatbare waarde, omdat dit de eerste route is van immuniteitsoverdracht en daaropvolgende bescherming tegen pathogenen en ziekten bij pasgeborenen en zuigelingen. Vanwege overeenkomsten in placentatie en antilichaamoverdracht met mensen, zijn konijnen een uitstekend model van maternale immunisatie. In dit videoartikel demonstreren we technieken die ons lab heeft gebruikt in studies naar maternale immunisatie bij Nieuw-Zeelandse witte konijnen, waaronder intranasale immunisatie en melkverzameling.We zullen eerst een voorbeeldtijdlijn en reeks gebeurtenissen beschrijven voor een mucosale maternale immunisatiestudie bij Nieuw-Zeelandse witte konijnen. Vrouwelijke konijnen worden geïmmuniseerd via de intranasale route, zoals aangetoond in deze video. Afhankelijk van het onderzoek kan het vaccin een boost nodig hebben of via een extra route moeten worden toegediend, zoals intramusculaire immunisatie.Hoewel niet afgebeeld, moet bloed worden verzameld voorafgaand aan de initiële immunisatie voor nulmetingen en gedurende de rest van het onderzoek met regelmatige tussenpozen. Bloed wordt gemakkelijk verkregen door de centrale oorslagader met milde sedatie en een topisch pijnstillend middel. De aanwezigheid van antigeenspecifieke IgG-niveaus kan in deze monsters worden gemeten.Konijnen worden dan gefokt. We geven er de voorkeur aan om bewezen fokkers van verkopers te kopen om te gebruiken om een hoger zwangerschapspercentage voor deze studies te garanderen. Afhankelijk van de immunisatietijdlijn kunnen konijnen tijdens de zwangerschap extra immunisaties krijgen.Antigeen-specifieke IgG wordt transplacentally overgebracht naar de kits. Bij ongeveer 30 tot 32 dagen na het fokken zal zwanger doen aanmaak. We raden aan om de behandeling van de kits de eerste dagen te beperken om afwijzing van de does te minimaliseren.Bloedmonsters kunnen worden verzameld uit de kits om antigeenspecifieke IgG-niveaus te beoordelen die transplacentaal zijn overgedragen. Bloed kan worden verzameld uit een klein aantal kits op of in de buurt van het moment van geboorte om vroege antigeenspecifieke antilichaamniveaus te beoordelen. Naast een breed scala aan voedingsstoffen, krijgen kits antigeenspecifieke IgA van de lacterende doe tijdens het verplegen.Kits worden meestal gespeend op de leeftijd van vier tot acht weken. Voorafgaand aan het spenen kan melk gemakkelijk worden verzameld uit lactaat, zoals aangetoond in deze video. De verzamelde melkmonsters worden vervolgens verwerkt voor de detectie van antigeenspecifieke IgA.Afhankelijk van de studie kunnen vaccins en een boost aan de kits worden toegediend en kunnen seriële bloedmonsters op zeer jonge leeftijd uit de kits worden verzameld met behulp van de laterale sapheneuze ader. We zullen nu intranasale immunisatie en melkverzameling demonstreren in Nieuw-Zeeland White Rabbits.Protocol. Alle procedures werden goedgekeurd en uitgevoerd in overeenstemming met het beleid van de Duke University Institutional Animal Care And Use Committee.Intranasale immunisatie. Benodigde materialen: Acepromazine, spuit en naald, oftalmisch smeermiddel, Isofluraan, neuskegel, pipet en pipettips, mucosaal vaccin. Bereid de immunisatieoplossing voor op de behandeling van dieren.Konijnen worden intramusculair verdoofd met Acepromazine één milligram per kilogram en verdoofd met Isofluraan met behulp van een neuskegel. Eenmaal volledig verdoofd zoals beoordeeld door ooglidreflex, wordt een oftalmisch smeermiddel aan elk oog toegevoegd om uitdroging van de ogen en daaropvolgende hoornvlieszweren te voorkomen. Zodra het laboratoriumlid klaar is om het vaccin toe te dienen en het konijn zich in een adequaat anesthesievlak bevindt, schakelt u de isofluraan en zuurstof uit en verwijdert u de neuskegel.Plaats het konijn in dorsale ligfiets en prop de nek en het hoofd onder een hoek van ongeveer 45 graden, waardoor beide alars gemakkelijk toegankelijk en visualisatie kunnen zijn door het laboratoriumlid dat het vaccin toedient. Laad de pipet met niet meer dan 100 microliter van de vaccinoplossing en dien de oplossing snel toe aan één neusgat en herhaal de procedure voor het tweede neusgat. De pipet moet in een hoek van ongeveer 45 graden worden gehouden.Hoek naar het mediale aspect van de neuspassage. Het doel van immunisatie is dat de oplossing in contact komt met de slijmvliezen van de nares. De punt mag dus niet in de nares worden geplaatst, omdat dit kan leiden tot slijtage of irritatie van de slijmvage delen en mogelijk de immunogeniciteit van het nasaal toegediende vaccin kan beïnvloeden.Het vaccin moet snel worden toegediend en op dezelfde manier in het andere neusgat worden toegediend. Na toediening in beide neuspassages wordt het konijn gedurende 30 seconden in dorsale liggedrag gehouden om lekkage van de vaccinoplossing te minimaliseren. Het lab zal meestal niet meer dan 100 microliter per neusgat tegelijk toedienen.Als een groter volume moet worden toegediend met een maximaal totaal volume van 500 microliter, kan het vaccin worden toegediend in 100 microliter aliquots met een rustperiode van 30 seconden tussen immunisaties. En extra toedieningen van vaccin herhaald met 30 seconden rust tussen elke toediening totdat het totale vaccinvolume is geleverd. Plaats het konijn na immunisatie op het ventrum voor herstel en houd het dier nauwlettend in de gaten totdat het in staat is om sternale ligfiets te behouden.In sommige gevallen kan de vaccinformulering niet volledig in de neusholte worden afgeleverd en kan een deel van de vaccinformulering op het buitenste deel van de nares achterblijven. In dit geval, omdat het niet duidelijk is over het exacte volume van het vaccin dat correct in de neusholte is afgeleverd, raadt u niet aan om extra vaccinmateriaal opnieuw toe te voegen, omdat dit een ongedefinieerde variabele aan het experiment zou toevoegen. Het is belangrijk om een vaccinafgiftetechniek te gebruiken die volledige en consistente levering van de vaccinformulering aan de nares biedt.Melkinzameling. Benodigde materialen: Acepromazine, spuiten en naalden, alcoholdoekje, gaas, oftalmisch smeermiddel, Isofluraan, neuskegel, oxytocine en een verzamelflacon. Konijnen worden intramusculair verdoofd met Acepromazine één milligram per kilogram en verdoofd met Isofluraan met behulp van een neuskegel.Eenmaal volledig verdoofd zoals beoordeeld door ooglidreflex, wordt een oftalmisch smeermiddel op elk oog aangebracht om uitdroging van de ogen en daaropvolgende hoornvlieszweren te voorkomen. Reinig de huid over de marginale oorader met het alcoholdoekje. Met behulp van een spuit van één mil en een naald van 25 gauge, ongeveer één tot twee internationale eenheden oxytocine intraveneus toedienen door de marginale oorader om melk te induceren die in de steek wordt gelaten.Vanwege de soepele spierontspanning is het gebruikelijk dat het konijn plast of poept na toediening van oxytocine. Oefen na toediening van oxytocine druk uit op de injectieplaats met een stuk gaas om hemostase te veroorzaken. Terwijl u het anesthesiemasker of de neuskegel over de neus van het konijn houdt, propt u het konijn op zijn achtervertrekken.Als kanttekening kan melkverzameling ook worden uitgevoerd met het dier in laterale ligligheid, maar het lab vindt dat het verzamelen gemakkelijker is wanneer het konijn op zijn romp wordt gepropt met een assistent die het konijn rechtop houdt met het anesthesiemasker. Open de steriele buis om zich voor te bereiden op het verzamelen van melk en zoek het borstweefsel en de bijbehorende spenen. Konijnen hebben meestal vier tot vijf paar borstklieren.De spenen zijn meestal omgeven door natte vacht van recente verpleging en het borstweefsel is gemakkelijk voelbaar als het vol melk zit. Grijp naar het borstweefsel geassocieerd met de speen tussen duim en wijsvinger en oefen een zachte masseerdruk uit op het klierweefsel in de richting van de speen. Plaats de opvangbuis over de speen om de uitgedrukte melk op te halen.Het kan soms enkele minuten duren voordat de oxytocine effectief is en de melkproductie lijkt te variëren tussen de borstklieren. Als de melkexpressie niet succesvol is, wacht dan enkele minuten of draai rond naar een extra borstklier. Melk van alle spenen kan in hetzelfde vileine worden verzameld.Meestal kunnen enkele milliliter melk gemakkelijk worden verzameld bij een zogende doe. Nadat het gewenste volume melk is verzameld, schakelt u de Isofluraan en zuurstof uit en verwijdert u de neuskegel van het konijn en laat u het konijn herstellen terwijl het nauwlettend wordt gevolgd totdat het dier in staat is om sternale ligfiets te behouden. Representatieve resultaten.Figuur één. Voor maternale studies is het nuttig om de zwangerschap zo vroeg mogelijk te bepalen om te bevestigen dat de doe niet opnieuw hoeft te worden gefokt. Opties voor zwangerschapsdetectie omvatten palpatie, echografie, röntgenfoto's, gewichtstoename en moleculaire technieken zoals metingen van insulinegroeifactoren en progesteron.Adequate progesteronniveaus zijn nodig voor het behoud van zwangerschap bij konijnen. Daarom hebben verschillende studies ook progesteronniveaus bij zwangere konijnen beoordeeld en verhoogde niveaus aangetoond ten opzichte van niet-zwangere konijnen, met name tijdens organogenese rond het midden van de zwangerschap. Zoals getoond in figuur één, kunnen verhoogde progesteronniveaus worden gedetecteerd bij zwangere konijnen in vergelijking met niet-zwangere konijnen, zelfs nadat paringen door een bok voor iedereen werden bevestigd.Serum progesteron niveaus werden gemeten met behulp van een geautomatiseerde chemiluminescente test. Figuur twee. Antigeenspecifieke IgG die transplacent werd overgedragen tijdens de zwangerschap kan door Elisa worden gemeten in het serum van de kits.Bloed kan worden verzameld uit een klein aantal kits op of in de buurt van het moment van geboorte om vroege antigeenspecifieke antilichaamniveaus te beoordelen. Seriële bloedafname is technisch veel gemakkelijker naarmate de kits ouder worden en in omvang toenemen. Zoals afgebeeld in figuur twee, kunnen serumspiegels van antigeenspecifieke IgG in de kits worden gemeten en vergeleken met de maternale niveaus.Maternale overgedragen IgG-niveaus zijn hoger bij de geboorte en nemen in de loop van de tijd af. Figuur drie. Konijnenmelk kan worden verzameld zoals getoond in deze video en worden verwerkt om de totale en antigeenspecifieke antilichaamniveaus door Elisa te meten.Zoals in deze figuur wordt getoond, vormt IgA een aanzienlijk deel van de totale antilichamen in de moedermelk die beschikbaar zijn voor passieve overdracht naar de kits. Zowel IgA- als IgG-niveaus zijn aanzienlijk hoger dan IgM.Summary. Dit videoartikel beschrijft en demonstreert de toediening van intranasale vaccins en het verzamelen van melk van zogende konijnen als een middel om mucosale immuniteit te beoordelen in een translationeel geschikt model van maternale immunisatie.Afgebeeld is een samenvattende afbeelding voor een typisch ontwerp van een intranasale immunisatiestudie bij de moeder waarin de immunisaties, fokken, aanmaak, lactatie en antilichaamoverdracht zijn opgenomen.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits (Oryctolagus cuniculus)

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

Retrovirale Transductie van T-cel-receptoren in Mouse T-cellen

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Tot oprichting van een Liquid bedekte cultuur van gepolariseerde menselijke luchtwegen Epiteel Calu-3 cellen aan Host Cell Reactie op respiratoire pathogenen Studie<em&gt; In vitro</em

The  apical and basolateral surfaces of airway epithelial cells demonstrate  directional responses to pathogen exposure in  vivo. Thus, ideal in vitro ...

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Monitoring Veranderingen in Membrane Polariteit, Membraan Integriteit, en intracellulaire Ion concentraties in<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; Het gebruik van fluorescente kleurstoffen

Membrane depolarization and ion fluxes are events that have been studied extensively in biological systems due to their ability to profoundly impact ...

Myeloid Cell Isolation from Mouse Skin and Draining Lymph Node Following Intradermal Immunization with Live Attenuated Plasmodium Sporozoites

Myeloid Cell Isolation from Mouse Skin and Draining Lymph Node Following Intradermal Immunization with Live Attenuated Plasmodium Sporozoites

Myeloïde Cell Isolatie van Mouse Skin en aftappen lymfkliertest Na Intradermal Immunisatie met levende verzwakte<em&gt; Plasmodium</em&gt; sporozoieten

Malaria infection begins when the sporozoite stage of Plasmodium is inoculated into the skin of a mammalian host through a mosquito bite. The highly ...

Human Placental and Decidual Organ Cultures to Study Infections at the Maternal-fetal Interface

Menselijke placenta en deciduale Organ culturen om infecties bij de moeder op foetus Interface Studie

The placenta shows a large degree of interspecies anatomic variability. To best understand biology and pathophysiology of the human placenta, it is ...

Noninvasive Sampling of Mucosal Lining Fluid for the Quantification of In Vivo Upper Airway Immune-mediator Levels

Noninvasive Sampling of Mucosal Lining Fluid for the Quantification of In Vivo Upper Airway Immune-mediator Levels

Noninvasive bemonstering van Mucosal voering vloeistof voor de kwantificering van In Vivo bovenste luchtwegen immuun-bemiddelaar niveaus

This protocol describes noninvasive sampling of undisturbed upper airway mucosal lining fluid. It also details the extraction procedure used prior to the ...

A Method for Targeted 16S Sequencing of Human Milk Samples

Een methode voor gerichte 16S sequentiebepaling van menselijke melkmonsters

Studies of microbial communities have become widespread with the development of relatively inexpensive, rapid, and high throughput sequencing. However, as ...

Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay

Karakterisering van zwezerik-afhankelijke en Thymus-onafhankelijke Immunoglobulin Isotype reacties in muizen met behulp van Enzyme-linked Immunosorbent Assay

Antibodies, also termed as immunoglobulins (Ig), secreted by differentiated B lymphocytes, plasmablasts/plasma cells, in humoral immunity provide a ...

Immunization of Adult Zebrafish for the Preclinical Screening of DNA-based Vaccines

Immunisatie van volwassen Zebrafish voor de preklinische Screening van DNA-gebaseerde vaccins

The interest in DNA-based vaccination has increased during the past two decades. DNA vaccination is based on the cloning of a sequence of a selected ...

Human Colonoid Monolayers to Study Interactions Between Pathogens, Commensals, and Host Intestinal Epithelium

Menselijke Colonoid Monolayers studie van interacties tussen ziekteverwekkers, Commensals en Host intestinaal epitheel

Human 3-dimensional (3D) enteroid or colonoid cultures derived from crypt base stem cells are currently the most advanced ex vivo model of the intestinal ...