Name: intranasal immunization and milk collection in studies of maternal immunization in new zealand white rabbits (oryctolagus cuniculus)
Uploaded: 2021-07-31T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus at JoVE.com

लेखकों को ड्यूक विश्वविद्यालय में प्रयोगशाला पशु संसाधनों के विभाजन और उनकी सहायता और जानवरों को प्रदान की महान देखभाल के लिए उनके पशुपालन टीम को स्वीकार करना चाहते हैं । इसके अतिरिक्त, लेखक पांडुलिपि के ऑडियो और वीडियो भागों के साथ उनकी सहायता के लिए पैथोलॉजी विभाग के भीतर फोटोपाथ टीम को पहचानना चाहते हैं। इस काम को स्टैट्स प्रयोगशाला से विवेकाधीन अनुसंधान कोष द्वारा समर्थित किया गया था।

सभी प्रक्रियाओं को मंजूरी दे दी और ड्यूक विश्वविद्यालय IACUC नीतियों के अनुसार प्रदर्शन किया गया ।
नोट: आवश्यक सामग्री सामग्री की तालिकामें प्रदान की जाती हैं ।
1. खरगोश सेशन और ?...

हालांकि उपरोक्त प्रोटोकॉल में वर्णित नहीं है, खरगोशों का सफल प्रजनन इस मातृ मॉडल के लिए और दूध संग्रह के लिए अनुमति देने के लिए आवश्यक है। खरगोश आसानी से एक शोध सेटिंग में लाइव कवर द्वारा पैदा कर रहे है?...

मातृ प्रतिरक्षण और एंटीबॉडी हस्तांतरण के अध्ययन कई कारणों से अमूल्य हैं, क्योंकि यह प्रतिरक्षा हस्तांतरण और नवजात शिशुओं और शिशुओं में रोगजनकों और रोगों से बाद में सुरक्षा का प्रारंभिक मार्ग है । मातृ प्रतिरक्षण में इस कमजोर अवधि केदौरानकुछ रोगजनकों से जुड़ी रुग्णता और मृत्यु दर को कम करके वैश्विक स्तर पर मातृ और शिशु / बाल स्वास्थ्य दोनों को सकारात्मक रूप से प्रभावित करने की क्षमता है । इस रणनीति का मुख्य लक्ष्य गर्भावस्था के दौरान विशिष्ट मातृ एंटीबॉडी के स्तर को बढ़ाना है। इसके बाद इन एंटीबॉडी को नवजात शिशु और शिशु को संक्रमण से बचाने के लिए पर्याप्त स्तर पर स्थानांतरित किया जा सकता है , जब तक कि उनकी प्रतिरक्षा प्रणाली पर्याप्त रूप से परिपक्व न हो जाए कि वे चुनौतियों का पर्याप्त रूप से जवाब दे सकें1,2,3. पिछले काम ने दिखा दिया है कि जन्म के समय उच्च एंटीबॉडी टाइटर्स या तो पूर्ण सुरक्षा या देरी से शुरू होने वाले और नवजात शिशु में कई विभिन्न संक्रामक रोगों की कम गंभीरता से जुड़े होते हैं, जिनमें टिटनेस, पर्टुसिस, श्वसन सिंक्टियल वायरस (आरएसवी), इन्फ्लूएंजा और ग्रुप बी स्ट्रेप्टोकोकल संक्रमण1,2,3शामिल हैं।
मनुष्यों में, मातृ एंटीबॉडी अपरा भर में निष्क्रिय रूप से स्थानांतरित कर रहे है और यह भी नर्सिंग के माध्यम से स्तन दूध के माध्यम से स्थानांतरित कर रहे हैं । पिछले काम से पता चला है कि वायरस से संक्रमित माताओं से मानव स्तन के दूध में एचआईवी विशिष्ट IgA स्तर वायरस के कम प्रसवोत्तर संचरण के साथ जुड़े थे, स्तन दूध विरोधी एचआईवी IgA4के लिए एक सुरक्षात्मक भूमिका का सुझाव । अमानवीय वानरों के अध्ययनों से पता चला है कि एचआईवी के खिलाफ प्रतिरक्षण स्तन के दूध में एक महत्वपूर्ण एंटीबॉडी प्रतिक्रिया को प्रेरित कर सकता है, और हालांकि इसी तरह के सीरम आईजीजी प्रतिक्रियाओं को प्रणालीगत बनाम म्यूकोसल प्रतिरक्षण के बाद प्रेरित किया गया था, म्यूकोसल प्रतिरक्षण ने दूध5,6केभीतर काफी अधिक आईजीए प्रतिक्रिया को प्रेरित किया।
इन अध्ययनों के लिए एक अनुवाद उपयुक्त पशु मॉडल की पहचान करने के लिए निष्क्रिय एंटीबॉडी हस्तांतरण के अपरा प्रकार और तंत्र को ध्यान में रखना चाहिए, साथ ही स्तन के दूध के माध्यम से एंटीबॉडी का हस्तांतरण करना चाहिए। मातृत्व-भ्रूण इंटरफेस पर ऊतक प्रकार और परतों के आधार पर स्तनधारियों में तीन मुख्य प्रकार के अपराकरण होते हैं, जिनमें हीमोकोरियल (वानरों, कृंतक और खरगोश), एंडोथेलियोपोरियल (मांसाहारी), और एपिथेलियोकोरियल (घोड़े, सूअर और जुगाली) शामिल हैं। हीमोकोरियल प्लेसेंटा सबसे आक्रामक प्रकार है, जो मातृ रक्त आपूर्ति और कोरियोन, या सबसे बाहरी भ्रूण झिल्ली के बीच सीधे संचार की अनुमति देता है। ट्रोफोब्लास्ट परतों की संख्या के आधार पर, हेमोकोपोरियल प्लेंटेशन के कई रूप हैं, जिनमें वानरों में पाए जाने वाले हीमोमोनोकोरियल प्लेसेंटा, खरगोशों में हीमोडिकोरियल प्लेसेंटा, और चूहों और चूहों में मनाया जाने वाला हीमोट्रिकोरियल प्लेसेंटाशामिलहै। मातृ रक्त की आपूर्ति और कोरियोन के बीच यह सीधा संपर्क गर्भ के दौरान प्लेसेंटा में एंटीबॉडी के निष्क्रिय हस्तांतरण के लिए अनुमति देता है। आईजीजी एकमात्र एंटीबॉडी वर्ग है जो मानव नाल8को काफी हद तक पार करता है , जबकि आईजीए मानव स्तन केदूधमें पाए जाने वाले आईजी का प्रमुख वर्ग है । वैज्ञानिक रूप से प्रासंगिक मॉडलों में से, केवल वानरों (मनुष्यों सहित), खरगोश, और गिनी सूअर दूध10, 11 में गर्भाशय और आईजीए में आईजीजी स्थानांतरित करतेहैं। इसलिए, खरगोश मॉडल में मनुष्यों के उन कारकों के बराबर कारक शामिल हैं जो आईजीआई के ट्रांसप्लेसेंटल हस्तांतरण और आईजीए के स्तनपानल हस्तांतरण को नियंत्रित करते हैं।
मातृ प्रतिरक्षा और टीका विकास के लिए एक असाधारण मॉडल के रूप में सेवा करने के अलावा, खरगोश और मानव नाक गुहाओं के बीच समानताएं उन्हें इंट्रानासाल प्रतिरक्षण के लिए एक उपयुक्त मॉडल बनाती हैं। खरगोश नाक गुहा की मात्रा12के सापेक्ष शरीर द्रव्यमान के आधार पर कृंतक मॉडल की तुलना में मनुष्यों के समान है । इसके अतिरिक्त, कास्टेलियन एट अल 12 ने दिखाया कि नाक से जुड़े लिम्फोइड ऊतक (NALT) कृंतक की तुलना में खरगोश में अधिक मोटा है। एनएएलटी मुख्य रूप से वेंट्रल नाक मीटस के वेंट्रल और वेंट्रोमेडियल पहलू पर और खरगोशों में नासोफेरिंजियल मीटस के पार्श्व और डोरसोलेटरल पहलू पर स्थित है, जबकि कृंतक में, लिम्फोइड ऊतक केवल नासोफेरिंजियल मीटस12के वेंट्रल पहलू के साथ मौजूद है। खरगोशों में, इंट्रापिथेलियल और लैमिना प्रोप्रिया लिम्फोसाइट्स की संरचना और स्थान, साथ ही अलग लिम्फोइड रोम, मनुष्यों के समान हैं12।
मातृ और म्यूकोसल प्रतिरक्षा के लिए एक मॉडल के रूप में खरगोश का उपयोग करने के अतिरिक्त लाभों में उनकी उच्च मलखंभ और अपेक्षाकृत कम गर्भावधि शामिल है। बड़े ऑरिकुलर रक्त वाहिकाएं धारावाहिक संग्रह के लिए रक्त की बड़ी मात्रा तक अपेक्षाकृत आसान पहुंच की अनुमति देती हैं। एंटीजन-विशिष्ट एंटीबॉडी प्रतिक्रिया परख के लिए विभिन्न प्रकार के म्यूकोसल नमूने एकत्र किए जा सकते हैं, जिसमें स्तन का दूध13 (स्तनपान करते समय), म्यूकोसल स्राव या वॉश (जैसे, मौखिक14, 15,16,ब्रोनचोलवेलर लावगे13,17,18,19,योनि20, 21,22)और मल20,23,24,25शामिल हैं । एंटीजन-विशिष्ट एंटीबॉडी प्रतिक्रियाओं की उपस्थिति का आकलन करने के लिए स्तनपान के दौरान दूध के नमूनों को आसानी से एकत्र किया जा सकता है। हालांकि मनुष्यों और चूहों के लिए प्रचुर मात्रा में नहीं है, लेकिन खरगोश-विशिष्ट अध्ययनों और परखों के लिए विभिन्न प्रकार के प्रयोगात्मक अभिकरने वाले उपलब्ध हैं। इस लेख में, हम न्यूजीलैंड व्हाइट खरगोशों(ओरेक्टोलागस cuniculus)में इंट्रानासाल प्रतिरक्षण और दूध संग्रह का वर्णन और प्रदर्शन करेंगे।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Intranasal Immunization</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Machine/Vaporizer</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>901807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (25 g)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>07-806-7584</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (250 mL Bottle)</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td>2-4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Syringe (1 mL)</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>07-892-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mucosal Vaccine</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Experimental Vaccine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nose Cone</td>
			<td>McCulloch Medical</td>
			<td>07891-1097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Tips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>53503-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettor</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89079-962</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PromAce (Acepromazine maleate)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>07-893-5734</td>
			<td>1mg/kg IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Sterile Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>07-888-2572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milk Collection</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol Prep 2-ply</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>07-839-8871</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Machine/Vaporizer</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>901807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needles (25 g)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>07-806-7584</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (250 mL Bottle)</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td>2-4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Syringe (1 mL)</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>07-892-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Woven Sponge (4x4)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>07-891-5815</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nose Cone</td>
			<td>McCulloch Medical</td>
			<td>07891-1097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PromAce (Acepromazine Maleate)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>07-893-5734</td>
			<td>1mg/kg IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Sterile Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>07-888-2572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Conical Vial (15 mL)</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>14-959-49B</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intranasal immunization and milk collection in studies of maternal immunization in new zealand white rabbits (oryctolagus cuniculus)

मनुष्यों के साथ अपरा और एंटीबॉडी हस्तांतरण में समानताओं के कारण, खरगोश मातृ प्रतिरक्षण का एक उत्कृष्ट मॉडल हैं। इस शोध मॉडल के अतिरिक्त लाभ प्रजनन और नमूना संग्रह, अपेक्षाकृत कम गर्भावधि, और बड़े कूड़े के आकार में आसानी है। प्रतिरक्षण के आमतौर पर मूल्यांकन मार्गों में चमड़े के नीचे, इंट्रामस्कुलर, इंट्रानसल और इंट्राडरमल शामिल हैं। इन प्रतिरक्षण के लिए इम्यूनोलॉजिक प्रतिक्रियाओं का कालक्रम का पता लगाने के लिए गैर-सूक्ष्म नमूना संग्रह में बांधों और किट दोनों से रक्त का संग्रह और स्तनपान कराने वाले दूध शामिल हैं। इस लेख में, हम उन तकनीकों को प्रदर्शित करेंगे जो हमारी प्रयोगशाला ने न्यूजीलैंड व्हाइट खरगोशों(ओरेक्टोलागस क्यूनिकुलस)में मातृ प्रतिरक्षण के अध्ययन में उपयोग किया है, जिसमें इंट्रानासाल प्रतिरक्षण और दुग्ध संग्रह शामिल हैं।

एक ठेठ मातृ इंट्रानासाल प्रतिरक्षण अध्ययन डिजाइन का अवलोकन चित्र 1में चित्रित किया गया है, जिसमें प्रतिरक्षण, प्रजनन, जलाने, स्तनपान और एंटीबॉडी हस्तांतरण को शामिल किया गया है। हालांकि सचि...

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Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus

यह लेख इंट्रानासल टीकों के प्रशासन और स्तनपान कराने वाले खरगोशों(ओरिक्टोलगस क्यूनिकुलस)से दूध के संग्रह को मातृ प्रतिरक्षण के एक अनुवादीय उपयुक्त मॉडल में म्यूकोसल प्रतिरक्षा का आकलन करने के साधन के रूप में दर्शाता है।

न्यूजीलैंड व्हाइट रैबिट्स(ओरेक्टोलागस क्यूनिकुलस)में मातृ प्रतिरक्षण के अध्ययन में इंट्रानासल प्रतिरक्षण और दुग्ध संग्रह

Due to similarities in placentation and antibody transfer with humans, rabbits are an excellent model of maternal immunization. Additional advantages of ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits (Oryctolagus cuniculus)

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