Name: intranasal immunization and milk collection in studies of maternal immunization in new zealand white rabbits (oryctolagus cuniculus)
Uploaded: 2021-07-31T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus at JoVE.com

Forfatterne ønsker å anerkjenne Divisjon for laboratorie dyreressurser ved Duke University og deres husdyrholdsteam for deres hjelp og stor omsorg gitt til dyrene. I tillegg vil forfatterne gjerne gjenkjenne PhotoPath-teamet i Avdeling for patologi for deres hjelp med lyd- og videodelene av manuskriptet. Dette arbeidet ble støttet av skjønnsmessige forskningsmidler fra Staats-laboratoriet.

Alle prosedyrer ble godkjent og utført i samsvar med Duke University IACUC retningslinjer.
MERK: Materialer som trengs finnes i materiallisten.
1. Kanin sedasjon og anestesi
<ol><li>Sedate den kvinnelige kaninen (seksuelt moden; ca. 5-30 måneder gammel) ved å administrere acepromazin intramuskulært (IM) i en dose på 1 mg/kg. Avhengig av dyrets størrelse, bruk en 1 eller 3 ml sprøyte med en 25 G nål. Epaxial muskler er det foretrukne stedet...

Selv om det ikke er beskrevet i ovennevnte protokoll, er vellykket avl av kaninene nødvendig for denne morsmodellen og for å tillate melkeoppsamling. Kaniner blir lett avlet av levende deksel i en forskningsinnstilling. Det anbefales at det overføres til bukkens bur for avl, som det kan være territorialt og aggressivt hvis det holdes i sitt eget bur med bukken. Hvis kvinner ikke er mottakelige etter 15 minutter (som indikert ved å løpe bort biting eller vokalisering), bør doe plasseres tilbake i sitt eget bur. Det...

Studier av mors immunisering og antistoffoverføring er uvurderlige av mange grunner, da dette er den første ruten for immunitetsoverføring og etterfølgende beskyttelse mot patogener og sykdommer hos nyfødte og spedbarn. Mors immunisering har potensial til å påvirke både mødre- og spedbarns-/barnehelsen positivt på globalt nivå ved å redusere sykelighet og dødelighet forbundet med visse patogener i denne sårbare perioden1. Hovedmålet med denne strategien er å øke nivåene av spesifikke mors antistoffer gjennom graviditet. Disse antistoffene kan deretter overføres til nyfødte og spedbarn på nivåer som er tilstrekkelige til å beskytte mot infeksjoner til immunforsvaret er modent nok til å reagere tilstrekkelig på utfordringer1,2,3. Tidligere arbeid har vist at høyere antistofftipper ved fødselen er forbundet med enten fullstendig beskyttelse eller forsinket utbrudd og redusert alvorlighetsgrad av mange forskjellige smittsomme sykdommer hos nyfødte, inkludert stivkrampe, pertussis, respiratorisk synytialvirus (RSV), influensa og gruppe B streptokokkinfeksjoner1,2,3.
Hos mennesker overføres mors antistoffer passivt over morkaken og overføres også gjennom morsmelk via sykepleie. Tidligere arbeid har vist at HIV-spesifikke IgA-nivåer i morsmelk hos mennesker fra mødre som er smittet med viruset, var forbundet med redusert postnatal overføring av viruset, noe som tyder på en beskyttende rolle for morsmelk anti-HIV IgA4. Studier hos ikke-menneskelige primater har vist at immunisering mot HIV kan indusere en betydelig antistoffrespons i morsmelken, og selv om lignende serum IgG-responser ble indusert etter systemisk versus mukosal immunisering, induserte mukosal immunisering en betydelig høyere IgA-respons i melken5,6.
Identifisering av en oversettelsesmessig passende dyremodell for disse studiene bør ta hensyn til placentation type og mekanismer for passiv antistoffoverføring, samt overføring av antistoffer gjennom morsmelk. Det er tre hovedtyper av placentation hos pattedyr basert på vevstyper og lag ved materno-fostergrensesnittet, inkludert hemochorial (primater, gnagere og kaniner), endotheliochorial (rovdyr) og epitheliochorial (hester, griser og drøvtyggere). Hemochorial placenta er den mest invasive typen, noe som muliggjør direkte kommunikasjon mellom mors blodtilførsel og korionen, eller den ytterste fostermembranen. Basert på antall trophoblastlag, er det flere variasjoner av hemochorial placentation, inkludert hemomonochorial placenta som finnes i primater, hemodichorial placenta hos kaniner, og hemotrichorial placenta observert hos rotter og mus7. Denne direkte kontakten mellom mors blodtilførsel og korion muliggjør passiv overføring av antistoffer over morkaken under svangerskapet. IgG er den eneste antistoffklassen som betydelig krysser den menneskeligemorkaken 8, mens IgA er den dominerende klassen av Ig som finnes i morsmelk hos mennesker9. Av de vitenskapelig relevante modellene overfører bare primater (inkludert mennesker), kaniner og marsvin IgG i utero og IgA i melken10,11. Derfor inneholder kaninmodellen faktorer som kan sammenlignes med de hos mennesker som kontrollerer transplacental overføring av IgG og laktasjonell overføring av IgA.
I tillegg til å tjene som en eksepsjonell modell for mors immunitet og vaksineutvikling, gjør likheter mellom kaninen og menneskelige nesehuler dem til en passende modell for intranasal immunisering. Volumet av kaninens nesehule er mer lik mennesker enn gnagermodeller basert på relativ kroppsmasse12. I tillegg viste Casteleyn et al. 12 at nese assosiert lymfoidvev (NALT) er mer voluminøst i kaninen sammenlignet med gnagere. NALT ligger hovedsakelig på det ventrale og ventromediale aspektet av det ventrale nesekjøttet og i det laterale og dorsolaterale aspektet av nasopharyngeal meatus hos kaniner, mens i gnagere er lymfoidvevet bare til stede langs det ventrale aspektet av nasopharyngeal meatus12. Hos kaniner er strukturen og plasseringen av intraepithelial og lamina propria lymfocytter, samt isolerte lymfoide follikler, lik mennesker12.
Ytterligere fordeler ved å bruke kaninen som modell for mors- og slimhinneimmunitet inkluderer deres høye fecundity og relativt kort svangerskapstid. Store auricular blodkar gir relativt enkel tilgang til store mengder blod for serielle samlinger. En rekke slimhinneprøver kan samles inn for antigenspesifikke antistoffresponsanalyser, inkludert morsmelk13 (ved amming), slimhinne sekresjoner eller vasker (f.eks. oral14,15,16, bronkoalveolar lavage13,17,18,19, vaginal20,21,22) og avføring20,23,24,25. Melkeprøver kan enkelt samles inn under amming for å vurdere tilstedeværelsen av antigenspesifikke antistoffresponser. Selv om det ikke er så rikelig som for mennesker og mus, er et bredt utvalg av eksperimentelle reagenser tilgjengelige for kaninspesifikke studier og analyser. I denne artikkelen vil vi beskrive og demonstrere intranasal immunisering og melkesamling i New Zealand Hvite kaniner (Oryctolagus cuniculus).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Intranasal Immunization</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Machine/Vaporizer</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>901807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (25 g)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>07-806-7584</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (250 mL Bottle)</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td>2-4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Syringe (1 mL)</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>07-892-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mucosal Vaccine</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Experimental Vaccine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nose Cone</td>
			<td>McCulloch Medical</td>
			<td>07891-1097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Tips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>53503-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettor</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89079-962</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PromAce (Acepromazine maleate)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>07-893-5734</td>
			<td>1mg/kg IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Sterile Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>07-888-2572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milk Collection</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol Prep 2-ply</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>07-839-8871</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Machine/Vaporizer</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>901807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needles (25 g)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>07-806-7584</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (250 mL Bottle)</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td>2-4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Syringe (1 mL)</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>07-892-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Woven Sponge (4x4)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>07-891-5815</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nose Cone</td>
			<td>McCulloch Medical</td>
			<td>07891-1097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PromAce (Acepromazine Maleate)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>07-893-5734</td>
			<td>1mg/kg IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Sterile Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>07-888-2572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Conical Vial (15 mL)</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>14-959-49B</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intranasal immunization and milk collection in studies of maternal immunization in new zealand white rabbits (oryctolagus cuniculus)

På grunn av likheter i placentation og antistoffoverføring med mennesker, er kaniner en utmerket modell for mors immunisering. Ytterligere fordeler med denne forskningsmodellen er den enkle avl og prøvesamling, relativt kort svangerskapstid og store kullstørrelser. Ofte vurderte ruter for immunisering inkluderer subkutane, intramuskulære, intranasale og intradermale. Ikke-terminal prøvetaking for kronologisk deteksjon av immunologiske responser på disse immuniseringene inkluderer innsamling av blod, fra både dammer og sett, og melk fra lakterende gjør det. I denne artikkelen vil vi demonstrere teknikker laboratoriet vårt har brukt i studier av mors immunisering i New Zealand Hvite kaniner (Oryctolagus cuniculus), inkludert intranasal immunisering og melkesamling.

En oversikt over en typisk mors intranasal immuniseringsstudiedesign er avbildet i figur 1, som inkluderer immuniseringer, avl, opptenning, amming og antistoffoverføring. Selv om det ikke er illustrert, bør blod samles inn før den første immuniseringen for baselinemålinger og gjennom resten av studien med jevne mellomrom. Blod oppnås lett via den sentrale ørearterien med mild sedasjon og et aktuelt smertestillende middel (f.eks. lidokain 2,5% og prilocaine 2,5% krem). Tilstedeværelse...

Watch this Scientific Journal Video about Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus at JoVE.com

Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus

Denne artikkelen beskriver og demonstrerer administrering av intranasale vaksiner og innsamling av melk fra lakterende kaniner (Oryctolagus cuniculus) som et middel til å vurdere mukosal immunitet i en oversettingsmessig passende modell for mors immunisering.

Intranasal immunisering og melkesamling i studier av mors immunisering i New Zealand hvite kaniner (Oryctolagus cuniculus)

Due to similarities in placentation and antibody transfer with humans, rabbits are an excellent model of maternal immunization. Additional advantages of ...

Studier av mors immunisering og antistoffoverføring er uvurderlige av mange grunner, da dette er den første ruten for immunitetsoverføring og etterfølgende beskyttelse mot patogener og sykdom hos nyfødte og spedbarn. På grunn av likheter i placentation og antistoffoverføring med mennesker, er kaniner en utmerket modell for mors immunisering. I denne videoartikkelen demonstrerer vi teknikker laboratoriet vårt har brukt i studier av mors immunisering i New Zealand White Rabbits, inkludert intranasal immunisering og melkesamling.Vi vil først beskrive et eksempel tidslinje og serier av hendelser for en mucosal mors immunisering studie i New Zealand White Rabbits. Kvinnelige kaniner immuniseres via intranasalruten, som vist i denne videoen. Avhengig av studien kan vaksinen kreve et løft eller må kanskje gis gjennom en ekstra rute, for eksempel intramuskulær immunisering.Selv om det ikke er avbildet, bør blod samles inn før den første immuniseringen for baselinemålinger, og gjennom resten av studien med jevne mellomrom. Blod oppnås lett av den sentrale ørearterien med mild sedasjon og et aktuelt smertestillende middel. Tilstedeværelsen av antigenspesifikke IgG-nivåer kan måles i disse prøvene.Kaniner blir deretter avlet. Vi foretrekker å kjøpe påviste oppdrettere fra leverandører å bruke for å sikre en høyere graviditetsrate for disse studiene. Avhengig av immuniseringstidslinjen kan kaniner få ytterligere immuniseringer gjennom hele svangerskapet.Antigenspesifikk IgG overføres transplacent til settene. På ca 30 til 32 dager etter avl gravid vil kindle. Vi anbefaler å begrense håndteringen av settene de første dagene for å minimere avvisning fra gjør.Blodprøver kan samles inn fra settene for å vurdere antigenspesifikke IgG-nivåer som ble overført transplacentalt. Blod kan samles fra et lite antall sett på eller i nærheten av fødselstidspunktet for å vurdere tidlige antigenspesifikke antistoffnivåer. I tillegg til et bredt utvalg av næringsstoffer, får sett antigenspesifikk IgA fra lakterende doe mens de ammer.Settene avvennes vanligvis ved fire til åtte ukers alder. Før avvenning av melk kan lett samles fra lakterende gjør som demonstrert i denne videoen. De innsamlede melkeprøvene behandles deretter for påvisning av antigenspesifikk IgA.Avhengig av studien kan vaksiner og et løft administreres til settene, og serielle blodprøver kan samles inn fra settene i en svært tidlig alder ved hjelp av lateral saphenous vene. Vi vil nå demonstrere intranasal immunisering og melk samling i New Zealand White Rabbits.Protocol. Alle prosedyrer ble godkjent og utført i samsvar med Duke University Institutional Animal Care And Use Committee retningslinjer.Intranasal immunisering. Nødvendige materialer:Acepromazin, sprøyte og nål, oftalmisk smøremiddel, Isofluran, nesekjegle, pipette og pipettespisser, slimhinnevaksine. Forbered immuniseringsløsningen før dyrehåndtering.Kaniner er bedøvet med Acepromazin ett milligram per kilo intramuskulært, og bedøvet med Isofluran ved hjelp av en nesekegle. Når det er fullstendig bedøvet som vurdert av øyelokk refleks, tilsettes et oftalmisk smøremiddel til hvert øye for å forhindre tørking av øynene og påfølgende hornhinnen sårdannelse. Når labmedlemmet er klar til å administrere vaksinen og kaninen er i et tilstrekkelig plan av anestesi, slå av isofluran og oksygen og fjern nesekjeglen.Plasser kaninen i dorsal recumbency og prop nakke og hode i en omtrent 45 graders vinkel som gir enkel tilgang og visualisering av begge alars av labmedlemmet som administrerer vaksinen. Last pipetten med ikke mer enn 100 mikroliter av vaksineløsningen og administrer løsningen raskt til ett nesebor og gjenta prosedyren for det andre neseboret. Pipetten skal holdes i en omtrentlig 45 graders vinkel.Vinkel mot mediale aspektet av nesepassasjen. Målet med immunisering er at løsningen skal komme i kontakt med slimhinnene i nares. Så tipset bør ikke plasseres i nares, da dette kan føre til slitasje eller irritasjon av slimhinnen vev og potensielt påvirke immunogenisiteten til den nasalt administrerte vaksinen.Vaksinen skal administreres raskt og gjøres på samme måte i det andre neseboret. Etter administrering i begge nesepassasjene opprettholdes kaninen i dorsal recumbency i 30 sekunder for å minimere lekkasje av vaksineløsningen. Laboratoriet vil vanligvis ikke administrere mer enn 100 mikroliter per nesebor om gangen.Hvis et større volum skal administreres med et maksimalt totalt volum på 500 mikroliter, kan vaksinen gis i 100 mikroliter aliquots med en 30 sekunders hvileperiode mellom immuniseringer. Og ytterligere administrasjoner av vaksine gjentatt med 30 sekunder hvile mellom hver administrasjon til det totale vaksinevolumet er levert. Etter immunisering, plasser kaninen på ventrum for utvinning og overvåk dyret nøye til det er i stand til å opprettholde sternal heftelse.I noen tilfeller kan vaksineformuleringen ikke leveres helt til nesehulen, og en del av vaksineformuleringen kan forbli på den ytre delen av nares. I dette tilfellet, fordi det ikke er klart for det nøyaktige volumet av vaksinen som ble riktig levert til nesehulen, anbefaler ikke å bruke ekstra vaksinemateriale på nytt, da dette vil legge til en udefinert variabel til eksperimentet. Det er viktig å bruke en vaksineleveringsteknikk som gir fullstendig og konsistent levering av vaksineformuleringen til nares.Melk samling. Materialer som trengs:Acepromazin, sprøyter og nåler, alkoholpinne, gasbind, oftalmisk smøremiddel, Isofluran, nesekjegle, oksytocin og et oppsamlingsvæske. Kaniner er bedøvet med Acepromazin ett milligram per kilo intramuskulært, og bedøvet med Isofluran ved hjelp av en nesekegle.Når det er fullstendig bedøvet som vurdert av øyelokk refleks, påføres et oftalmisk smøremiddel på hvert øye for å forhindre tørking av øynene og påfølgende hornhinnen sårdannelse. Rengjør huden over den marginale ørevenen med alkoholpinnen. Bruk en en mil sprøyte og 25 gauge nål, administrere omtrent en til to internasjonale enheter av oksytocin intravenøst av marginal øret venen for å indusere melk sviktet.På grunn av den glatte muskelavslapningen er det vanlig at kaninen urinerer eller avfeirer etter administrering av oksytocin. Etter oksytocin administrering, bruk trykk på injeksjonsstedet med et stykke gasbind for å gi hemostase. Mens du opprettholder anestesimasken eller nesekjeglen over kaninens nese, kan du støtte kaninen opp på bakkvarteret.Som et sidenotat kan melkekolleksjon også utføres med dyret i lateral recumbency, men laboratoriet finner at samlingen er lettere når kaninen er proppet opp på dens rumpe med en assistent som holder kaninen oppreist med anestesimasken. Åpne det sterile røret for å forberede melkeoppsamling og lokalisere pattedyrvevet og tilhørende teats. Kaniner har vanligvis fire til fem par brystkjertler.Smokkene er vanligvis omgitt av våt pels fra nyere sykepleie, og pattedyrvevet er lett håndgripelig når det er fullt av melk. Grip på brystvevet forbundet med smokken mellom tommelen og pekefingeren og påfør et forsiktig massasjetrykk på kjertelen vev i retning av smokken. Plasser oppsamlingsrøret over smokken for å samle den uttrykte melken.Det kan noen ganger ta flere minutter før oksytocinet er effektivt, og melkeproduksjonen ser ut til å variere mellom brystkjertlene. Hvis melkeuttrykket ikke lykkes, vent flere minutter eller roter rundt til en ekstra brystkjertel. Melk fra alle teats kan samles i samme sjofel.Vanligvis kan flere milliliter melk lett samles fra en lakterende doe. Etter at ønsket volum melk er samlet inn, slå av Isofluran og oksygen og fjern nesekjeglen fra kaninen, og la kaninen komme seg mens den overvåkes nøye til dyret er i stand til å opprettholde sternal heftelse. Representative resultater.Figur én. For mors studier er det nyttig å bestemme graviditet så tidlig som mulig for å bekrefte at doe ikke trenger å bli oppdrettet på nytt. Alternativer for graviditet deteksjon inkluderer palpasjon, ultralyd, radiografer, vektøkning, og molekylære teknikker som målinger av insulin vekstfaktorer og progesteron.Tilstrekkelig progesteronnivåer er nødvendige for vedlikehold av graviditet hos kaniner. Derfor har flere studier også vurdert progesteronnivåer hos gravide kaniner og vist forhøyede nivåer i forhold til ikke-gravide kaniner, spesielt under organogenese rundt midten av svangerskapet. Som vist i figur en, kan forhøyede progesteronnivåer oppdages hos gravide kaniner sammenlignet med ikke-gravide kaniner, selv etter at parringer med en dollar ble bekreftet for alle gjør det.Serum progesteron nivåer ble målt ved hjelp av en automatisert chemiluminescent analyse. Figur to. Antigenspesifikk IgG som ble overført transplacent under svangerskapet, kan måles i serumet på settene av Elisa.Blod kan samles fra et lite antall sett på eller i nærheten av fødselstidspunktet for å vurdere tidlige antigenspesifikke antistoffnivåer. Seriell blodoppsamling er teknisk mye enklere ettersom settene eldes og øker i størrelse. Som avbildet i figur to, kan serumnivåer av antigenspesifikk IgG i settene måles og sammenlignes med mors nivåer.Maternalt overførtE IgG-nivåer er høyere ved fødselen og reduseres over tid. Figur tre. Kaninmelk kan samles som vist i denne videoen, og behandles for å måle totale og antigenspesifikke antistoffnivåer av Elisa.Som vist i denne figuren utgjør IgA en betydelig del av de totale antistoffene i morsmelken som er tilgjengelige for passiv overføring til settene. Både IgA- og IgG-nivåene er betydelig høyere enn IgM.Summary. Denne videoartikkelen beskriver og demonstrerer administrering av intranasale vaksiner og innsamling av melk fra lakterende kaniner som et middel til å vurdere slimhinneimmunitet i en oversettelsesmessig passende modell for mors immunisering.Avbildet er et sammendragsbilde for en typisk mors intranasal immuniseringsstudiedesign som omfatter immuniseringer, avl, opptenning, amming og antistoffoverføring.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits (Oryctolagus cuniculus)

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Etablering av en flytende dekket Culture of Polarized Menneskelig Airway Epiteliale Calu-3 Cells å studere Host Cell Response til luftveispatogener<em&gt; In vitro</em

The  apical and basolateral surfaces of airway epithelial cells demonstrate  directional responses to pathogen exposure in  vivo. Thus, ideal in vitro ...

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Overvåking Endringer i Membrane polaritet, Membran Integrity, og intracellulær ionekonsentrasjoner i<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; Ved hjelp av fluorescerende fargestoffer

Membrane depolarization and ion fluxes are events that have been studied extensively in biological systems due to their ability to profoundly impact ...

Myeloid Cell Isolation from Mouse Skin and Draining Lymph Node Following Intradermal Immunization with Live Attenuated Plasmodium Sporozoites

Myeloid Cell Isolation from Mouse Skin and Draining Lymph Node Following Intradermal Immunization with Live Attenuated Plasmodium Sporozoites

Myelogen Cell Isolasjon fra Mouse Hud og Drenering Lymph Node Etter Intradermal Immunisering med levende svekket<em&gt; Plasmodium</em&gt; Sporozoitter

Malaria infection begins when the sporozoite stage of Plasmodium is inoculated into the skin of a mammalian host through a mosquito bite. The highly ...

Human Placental and Decidual Organ Cultures to Study Infections at the Maternal-fetal Interface

Menneskemorkake og decidual orgel kulturer å studere Infeksjoner ved maternal-føtal Interface

The placenta shows a large degree of interspecies anatomic variability. To best understand biology and pathophysiology of the human placenta, it is ...

Noninvasive Sampling of Mucosal Lining Fluid for the Quantification of In Vivo Upper Airway Immune-mediator Levels

Noninvasive Sampling of Mucosal Lining Fluid for the Quantification of In Vivo Upper Airway Immune-mediator Levels

Noninvasiv prøvetaking slimhinnene slimhinnen væske for kvantifisering av In Vivo øvre luftveier immun-megler nivåer

This protocol describes noninvasive sampling of undisturbed upper airway mucosal lining fluid. It also details the extraction procedure used prior to the ...

A Method for Targeted 16S Sequencing of Human Milk Samples

En metode for målrettet 16S sekvensering av morsmelk prøver

Studies of microbial communities have become widespread with the development of relatively inexpensive, rapid, and high throughput sequencing. However, as ...

Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay

Karakteristikk av Thymus avhengig og uavhengig av Thymus immunglobulin Isotype svar i mus med enzym knyttet Immunosorbent analysen

Antibodies, also termed as immunoglobulins (Ig), secreted by differentiated B lymphocytes, plasmablasts/plasma cells, in humoral immunity provide a ...

Immunization of Adult Zebrafish for the Preclinical Screening of DNA-based Vaccines

Immunisering av voksen sebrafisk for prekliniske Screening av DNA-baserte vaksiner

The interest in DNA-based vaccination has increased during the past two decades. DNA vaccination is based on the cloning of a sequence of a selected ...

Human Colonoid Monolayers to Study Interactions Between Pathogens, Commensals, and Host Intestinal Epithelium

Menneskelig Colonoid Monolayers å studere interaksjonen mellom patogener, Commensals og vert Intestinal epitel

Human 3-dimensional (3D) enteroid or colonoid cultures derived from crypt base stem cells are currently the most advanced ex vivo model of the intestinal ...