Name: intranasal immunization and milk collection in studies of maternal immunization in new zealand white rabbits (oryctolagus cuniculus)
Uploaded: 2021-07-31T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus at JoVE.com

Författarna vill erkänna avdelningen för laboratoriedjurresurser vid Duke University och deras djurhållningsteam för deras hjälp och stora omsorg till djuren. Dessutom vill författarna känna igen PhotoPath-teamet inom institutionen för patologi för deras hjälp med ljud- och videodelarna i manuskriptet. Detta arbete stöddes av diskretionära forskningsfonder från Staats-laboratoriet.

Alla procedurer godkändes och utfördes i enlighet med Duke University IACUC:s policyer.
OBS: Material som behövs finns i materialförteckningen.
1. Kanin sedering och anestesi
<ol><li>Sedera den kvinnliga kaninen (sexuellt mogen; cirka 5-30 månader gammal) genom att administrera acepromazin intramuskulärt (IM) med en dos av 1 mg/kg. Beroende på djurets storlek, använd en 1 eller 3 ml spruta med en 25 G nål. Epaxial muskler är den föredra...

Även om det inte beskrivs i ovanstående protokoll är framgångsrik uppfödning av kaninerna nödvändig för denna modersmodell och för att möjliggöra mjölkuppsamling. Kaniner odlas lätt av levande skydd i en forskningsmiljö. Det rekommenderas att överföras till bockens bur för avel, liksom kan vara territoriell och aggressiv om den hålls i sin egen bur med bocken. Om kvinnor inte är mottagliga efter 15 minuter (som anges genom att springa iväg bitande eller vokalisera), bör doe placeras tillbaka i sin eg...

Studier av moderns immunisering och antikroppsöverföring är ovärderliga av många skäl, eftersom detta är den första vägen för immunitetsöverföring och efterföljande skydd mot patogener och sjukdomar hos nyfödda och spädbarn. Moderns immunisering har potential att positivt påverka både mödra- och spädbarns-/barnhälsan på global nivå genom att minska sjuklighet och dödlighet i samband med vissa patogener under denna sårbara period1. Huvudsyftet med denna strategi är att öka nivåerna av specifika moderns antikroppar under hela graviditeten. Dessa antikroppar kan sedan överföras till nyfödda och spädbarn på nivåer som är tillräckliga för att skydda mot infektioner tills deras immunsystem är tillräckligt moget för att på ett adekvat sättsvara på utmaningar 1,2,3. Tidigare arbete har visat att högre antikroppstitrar vid födseln är förknippade med antingen fullständigt skydd eller en fördröjd inset och minskad svårighetsgrad av många olika infektionssjukdomar hos nyfödda, inklusive stelkramp, kikhosta, respiratoriskt syncytial virus (RSV), influensa och grupp B streptokockinfektioner1,2,3.
Hos människor överförs moderns antikroppar passivt över moderkakan och överförs också genom bröstmjölken via omvårdnad. Tidigare arbete har visat att HIV-specifika IgA nivåer i human bröstmjölk från mödrar smittade med viruset var associerade med minskad postnatala överföring av viruset, vilket tyder på en skyddande roll för bröstmjölk anti-HIV IgA4. Studier på icke-mänskliga primater har visat att immunisering mot HIV kan inducera ett signifikant antikroppssvar i bröstmjölken, och även om liknande serum IgG-svar inducerades efter systemisk kontra slemhinna immunisering, inducerade slemhinna immunisering ett betydligt högre IgA-svar inommjölken 5,6.
Vid fastställandet av en översättningsanpassad djurmodell för dessa studier bör hänsyn tas till placentationstypen och mekanismerna för passiv antikroppsöverföring samt överföringen av antikroppar genom bröstmjölk. Det finns tre huvudtyper av placentation hos däggdjur baserade på vävnadstyperna och lagren vid materno-fetala gränssnittet, inklusive hemokorial (primater, gnagare och kaniner), endotheliochorial (köttätare) och epitheliochorial (hästar, grisar och idisslare). Den hemochorial moderkakan är den mest invasiva typen, vilket möjliggör direkt kommunikation mellan moderns blodtillförsel och chorion, eller det yttersta fetala membranet. Baserat på antalet trophoblast lager, det finns flera variationer av hemochorial placentation, inklusive hemomonochorial moderkakan finns i primater, hemodichorial moderkakan hos kaniner och hemotrichorial moderkakan observeras hos råttor och möss7. Denna direkta kontakt mellan moderns blodtillförsel och chorion möjliggör passiv överföring av antikroppar över moderkakan under dräktigheten. IgG är den enda antikroppsklassen som avsevärt korsar den mänskliga placentan8, medan IgA är den dominerande klassen av Ig som finns i bröstmjölk9. Av de vetenskapligt relevanta modellerna överför endast primater (inklusive människor), kaniner och marsvin IgG in utero och IgA i mjölken10,11. Därför innehåller kaninmodellen faktorer som är jämförbara med de hos människor som kontrollerar transplacental överföring av IgG och laktationell överföring av IgA.
Förutom att fungera som en exceptionell modell för moderns immunitet och vaccinutveckling, gör likheter mellan kaninen och mänskliga näshålor dem till en lämplig modell för intranasal immunisering. Volymen av kaninen nasala hålighet är mer lik människor än gnagare modeller baserade på relativ kroppsmassa12. Dessutom visade Casteleyn et al. 12 att den nasala associerade lymfoida vävnaden (NALT) är mer voluminös hos kaninen jämfört med gnagare. NALT ligger främst vid ventral och ventromedial aspekten av ventrala nasala meatus och vid den laterala och dorsolateral aspekten av nasopharyngeal meatus hos kaniner, medan lymfoida vävnaden hos gnagare endast finns längs den ventrala aspekten av nasopharyngeal meatus12. Hos kaniner liknar strukturen och platsen för intraepitheliala och lamina propria lymfocyter, liksom de isolerade lymfoida folliklarna, människor12.
Ytterligare fördelar med att använda kaninen som modell för moderns och slemhinnor immunitet inkluderar deras höga fecundity och relativt kort graviditetsperiod. Stora auricular blodkärl möjliggör relativt enkel tillgång till stora volymer blod för seriella samlingar. En mängd slemhinnor kan samlas in för antigenspecifika antikroppssvarsanalyser. inklusive bröstmjölk13 (vid laktation), slemhinnor eller tvättar (t.ex. oral14,15,16,bronkolveolär lavage13,17,18,19,vaginal20,21,22) och avföring20,23,24,25. Mjölkprover kan enkelt samlas in under amning för att bedöma förekomsten av antigenspecifika antikroppssvar. Även om det inte är lika rikligt som för människor och möss, finns ett brett utbud av experimentella reagenser tillgängliga för kaninspecifika studier och analyser. I den här artikeln kommer vi att beskriva och demonstrera intranasal immunisering och mjölksamling i Nya Zeeland Vita kaniner (Oryctolagus cuniculus).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Intranasal Immunization</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Machine/Vaporizer</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>901807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (25 g)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>07-806-7584</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (250 mL Bottle)</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td>2-4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Syringe (1 mL)</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>07-892-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mucosal Vaccine</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Experimental Vaccine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nose Cone</td>
			<td>McCulloch Medical</td>
			<td>07891-1097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Tips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>53503-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettor</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89079-962</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PromAce (Acepromazine maleate)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>07-893-5734</td>
			<td>1mg/kg IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Sterile Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>07-888-2572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milk Collection</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol Prep 2-ply</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>07-839-8871</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Machine/Vaporizer</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>901807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needles (25 g)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>07-806-7584</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane (250 mL Bottle)</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td>2-4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Syringe (1 mL)</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>07-892-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Woven Sponge (4x4)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>07-891-5815</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nose Cone</td>
			<td>McCulloch Medical</td>
			<td>07891-1097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PromAce (Acepromazine Maleate)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>07-893-5734</td>
			<td>1mg/kg IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Sterile Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>07-888-2572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Conical Vial (15 mL)</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>14-959-49B</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intranasal immunization and milk collection in studies of maternal immunization in new zealand white rabbits (oryctolagus cuniculus)

På grund av likheter i placentation och antikroppsöverföring med människor är kaniner en utmärkt modell av moderns immunisering. Ytterligare fördelar med denna forskningsmodell är enkel avel och provsamling, relativt kort graviditetsperiod och stora kullstorlekar. Allmänt bedömda vägar för immunisering inkluderar subkutan, intramuskulär, intranasal och intradermal. Icke-terminal prov insamling för kronologisk detektion av immunologiska svar på dessa immuniseringar inkluderar insamling av blod, från både dammar och satser, och mjölk från lakterande gör. I den här artikeln kommer vi att demonstrera tekniker som vårt labb har använt i studier av moderns immunisering hos nya zeeland vita kaniner (Oryctolagus cuniculus), inklusive intranasal immunisering och mjölksamling.

En översikt över en typisk moderns intranasala immuniseringsstudiedesign avbildas i figur 1, som innehåller immuniseringar, avel, kindling, laktation och antikroppsöverföring. Även om det inte illustreras bör blod samlas in före den första immuniseringen för baslinjemätningar och under resten av studien med jämna mellanrum. Blod erhålls lätt via den centrala öronartären med mild sedering och ett aktuellt smärtstillande medel (t.ex. lidokain 2,5% och prilocaine 2,5% kräm). F...

Watch this Scientific Journal Video about Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus at JoVE.com

Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits Oryctolagus cuniculus

Denna artikel beskriver och visar administrering av intranasala vacciner och insamling av mjölk från lakterande kaniner (Oryctolagus cuniculus) som ett sätt att bedöma slemhinnor immunitet i en översättnings lämpligt modell av moderns immunisering.

Intranasal immunisering och mjölksamling i studier av moderns immunisering i Nya Zeeland Vita Kaniner (Oryctolagus cuniculus)

Due to similarities in placentation and antibody transfer with humans, rabbits are an excellent model of maternal immunization. Additional advantages of ...

Studier av moderns immunisering och antikropp överföring är ovärderliga av många skäl eftersom detta är den första vägen för immunitet överföring och efterföljande skydd mot patogener och sjukdom hos nyfödda och spädbarn. På grund av likheter i placentation och antikroppsöverföring med människor är kaniner en utmärkt modell av moderns immunisering. I denna videoartikel visar vi tekniker som vårt labb har använt i studier av moderns immunisering i Nya Zeeland White Rabbits, inklusive intranasal immunisering och mjölksamling.Vi kommer först att beskriva ett exempel tidslinje och serie händelser för en mucosal moderns immunisering studie i Nya Zeeland Vita kaniner. Kvinnliga kaniner immuniseras via intranasalvägen, vilket visas i denna video. Beroende på studien kan vaccinet kräva ett uppsving eller behöva ges via en ytterligare väg, såsom intramuskulär immunisering.Även om det inte avbildas, bör blod samlas in före den första immuniseringen för baslinjemätningar och under resten av studien med jämna mellanrum. Blod erhålls lätt av den centrala öronartären med mild sedering och ett aktuellt smärtstillande medel. Förekomsten av antigenspecifika IgG-nivåer kan mätas i dessa prover.Kaniner föds sedan upp. Vi föredrar att köpa beprövade uppfödare från leverantörer att använda för att säkerställa en högre graviditetsfrekvens för dessa studier. Beroende på immuniseringstidslinjen kan kaniner få ytterligare immuniseringar under hela graviditeten.Antigenspecifik IgG överförs transplacentally till satserna. Vid cirka 30 till 32 dagar efter avel kommer gravida att kindle. Vi rekommenderar att du begränsar hanteringen av satserna under de första dagarna för att minimera avstötning från gör.Blodprover kan samlas in från satserna för att bedöma antigenspecifika IgG-nivåer som överfördes övergående. Blod kan samlas in från ett litet antal satser vid eller nära födelsetiden för att bedöma tidiga antigenspecifika antikroppsnivåer. Förutom ett brett utbud av näringsämnen får kit antigenspecifik IgA från lakterande dos medan du ammar.Kit avvänjas vanligtvis vid fyra till åtta veckors ålder. Före avtning kan mjölk enkelt samlas in från lakterande gör som visas i denna video. De insamlade mjölkproverna bearbetas sedan för påvisande av antigenspecifik IgA.Beroende på studien kan vacciner och ett uppsving administreras till satserna och seriella blodprover kan samlas in från satserna i mycket tidig ålder med hjälp av den laterala saphenous venen. Vi kommer nu att demonstrera intranasal immunisering och mjölk insamling i Nya Zeeland White Rabbits.Protocol. Alla procedurer godkändes och utfördes i enlighet med Duke University Institutional Animal Care And Use Committee policyer.Intranasal immunisering. Material som behövs: Acepromazin, spruta och nål, oftalmiskt smörjmedel, Isofluran, noskon, pipett och pipettspetsar, slemhinnor vaccin. Förbered immuniseringslösningen före djurhantering.Kaniner sederas med Acepromazine ett milligram per kilo intramuskulärt och bedövas med Isoflurane med en näskon. När helt bedövas som bedöms av ögonlock reflex, tillsätts ett oftalmiskt smörjmedel till varje öga för att förhindra torkning av ögonen och efterföljande hornhinnans ulceration. När labbmedlemmen är redo att administrera vaccinet och kaninen är i ett tillräckligt anestesiplan, stäng av isofluran och syre och ta bort näskonen.Placera kaninen i dorsal recumbency och prop nacke och huvud i en ungefärlig 45 graders vinkel som möjliggör enkel åtkomst och visualisering av båda alars av labbmedlemmen som administrerar vaccinet. Ladda pipetten med högst 100 mikroliter vaccinlösningen och administrera snabbt lösningen till en näsborre och upprepa proceduren för den andra näsborren. Pipetten ska hållas i ungefär 45 graders vinkel.Vinkel mot den mediala aspekten av näspassagen. Målet med immunisering är att lösningen ska kontakta nares slemhinnor. Så spetsen bör inte placeras inom narerna eftersom detta kan leda till nötning eller irritation i slemhinnorna och potentiellt påverka immunogeniciteten hos det nasally administrerade vaccinet.Vaccinet ska administreras snabbt och göras på samma sätt i den andra näsborren. Efter administrering i båda näspassagen hålls kaninen i dorsal recumbency i 30 sekunder för att minimera läckage av vaccinlösningen. Labbet administrerar vanligtvis inte mer än 100 mikroliter per näsborre åt gången.Om en större volym ska administreras med en maximal total volym på 500 mikroliter kan vaccinet ges i 100 mikroliter alikvoter med en 30 sekunders viloperiod mellan immuniseringarna. Och ytterligare administreringar av vaccin upprepas med 30 sekunders vila mellan varje administrering tills den totala vaccinvolymen levereras. Efter immunisering, placera kaninen på ventrumet för återhämtning och övervaka djuret noggrant tills det kan upprätthålla sternal spermier.I vissa fall kan vaccinformuleringen inte helt levereras till näshålan och en del av vaccinformuleringen kan finnas kvar på den yttre delen av nares. I det här fallet, eftersom det inte är klart den exakta volymen av vaccinet som levererades korrekt till näshålan, rekommenderar du inte att ytterligare vaccinmaterial återkommer eftersom detta skulle lägga till en odefinierad variabel till experimentet. Det är viktigt att använda en vaccinleveransteknik som ger fullständig och konsekvent leverans av vaccinformuleringen till narerna.Mjölksamling. Material som behövs: Acepromazin, sprutor och nålar, alkoholpinne, gasväv, oftalmiskt smörjmedel, Isofluran, noskon, oxytocin och en uppsamlingsflaska. Kaniner sederas med Acepromazine ett milligram per kilo intramuskulärt och bedövas med Isoflurane med en näskon.När helt bedövas som bedöms av ögonlock reflex, en oftalmisk smörjmedel tillämpas på varje öga för att förhindra torkning av ögonen och efterföljande hornhinnans ulceration. Rengör huden över den marginella öron venen med alkoholpinnen. Använd en enmilsspruta och 25 gauge nål, administrera ungefär en till två internationella enheter oxytocin intravenöst av den marginella öronvenen för att inducera mjölk sviken.På grund av den smidiga muskelavslappningen är det vanligt att kaninen urinerar eller defekerar efter administrering av oxytocin. Efter administrering av oxytocin, tryck på injektionsstället med en gasväv för att ge hemostas. Medan du upprätthåller anestesimasken eller näskonen över kaninens näsa, prop kaninen upp på bakkvartsparterna.Som en sidoanteckning kan mjölksamling också utföras med djuret i lateral återskum, men labbet finner att insamlingen är lättare när kaninen är uppspänd på rumpan med en assistent som håller kaninen upprätt med anestesimasken. Öppna det sterila röret för att förbereda för mjölkuppsamling och lokalisera bröstvävnaden och tillhörande spenar. Kaniner har vanligtvis fyra till fem par bröstkörtlar.Spenarna är vanligtvis omgivna av våt päls från ny amning och bröstvävnaden är lätt påtaglig när den är full av mjölk. Greppa vid bröstvävnaden i samband med spenen mellan tummen och pekfingret och applicera ett mjukt masseringstryck på körtelvävnaden i spenens riktning. Placera uppsamlingsröret över spenen för att samla den uttryckta mjölken.Det kan ibland ta flera minuter för oxytocinet att vara effektivt, och mjölkproduktionen verkar variera mellan bröstkörtlarna. Om mjölkuttrycket inte lyckas, vänta flera minuter eller rotera runt till en extra bröstkörtel. Mjölk från alla spenar kan samlas i samma vidriga.Vanligtvis kan flera milliliter mjölk lätt samlas in från en lakterande doe. När önskad mjölkvolym har samlats in, stäng av isofluran och syre och ta bort näskonen från kaninen och låt kaninen återhämta sig medan den övervakas noggrant tills djuret kan upprätthålla sternal tillförsel. Representativa resultat.Bild ett. För moderns studier är det bra att bestämma graviditeten så tidigt som möjligt för att bekräfta att doe inte behöver uppfödas igen. Alternativ för graviditet upptäckt inkluderar palpation, ultraljud, röntgenundersökningar, viktökning, och molekylära tekniker såsom mätningar av insulin tillväxtfaktorer och progesteron.Adekvata progesteronnivåer är nödvändiga för att upprätthålla graviditeten hos kaniner. Därför har flera studier också bedömt progesteronnivåer hos gravida kaniner och visat förhöjda nivåer i förhållande till icke-gravida kaniner, särskilt under organogenes runt mitten av graviditeten. Som visas i figur ett kan förhöjda progesteronnivåer detekteras hos gravida kaniner jämfört med icke-gravida kaniner även efter parning med en dollar bekräftades för alla gör.Serum progesteron nivåer mättes med hjälp av en automatiserad chemiluminescent analys. Figur två. Antigenspecifik IgG som överfördes övergående under dräktigheten kan mätas i serumet i satserna av Elisa.Blod kan samlas in från ett litet antal satser vid eller nära födelsetiden för att bedöma tidiga antigenspecifika antikroppsnivåer. Seriell blodsamling är tekniskt mycket lättare eftersom satserna åldras och ökar i storlek. Som avbildas i figur två kan serumnivåer av antigenspecifik IgG i satserna mätas och jämföras med moderns nivåer.Maternally överförda IgG nivåer är högre vid födseln och minskar med tiden. Bild tre. Kaninmjölk kan samlas in som visas i denna video och bearbetas för att mäta totala och antigenspecifika antikroppsnivåer av Elisa.Som framgår av denna siffra utgör IgA en betydande del av de totala antikropparna i bröstmjölken som är tillgängliga för passiv överföring till satserna. Både IgA- och IgG-nivåerna är betydligt högre än IgM.Summary. Denna videoartikel beskriver och visar administrering av intranasala vacciner och insamling av mjölk från lakterande kaniner som ett sätt att bedöma slemhinnor immunitet i en translationellt lämplig modell av moderns immunisering.Avbildad är en sammanfattande bild för en typisk moderns intranasala immunisering studie design som innehåller immuniseringar, avel, kindling, laktation och antikropp överföring.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Intranasal Immunization and Milk Collection in Studies of Maternal Immunization in New Zealand White Rabbits (Oryctolagus cuniculus)

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

Retroviral Transduction av T-cell receptorer i Mus T-celler

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Att upprätta en flytande täckt kultur av polariserad Human luftvägsepitelceller Calu-3 celler för att studera svar värdcellen för luftvägspatogener<em&gt; In vitro</em

The  apical and basolateral surfaces of airway epithelial cells demonstrate  directional responses to pathogen exposure in  vivo. Thus, ideal in vitro ...

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Övervaknings Förändringar i Membrane polaritet, Membrane Integritet och intracellulära jonkoncentrationer i<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; Med hjälp av fluorescerande färger

Membrane depolarization and ion fluxes are events that have been studied extensively in biological systems due to their ability to profoundly impact ...

Myeloid Cell Isolation from Mouse Skin and Draining Lymph Node Following Intradermal Immunization with Live Attenuated Plasmodium Sporozoites

Myeloid Cell Isolation from Mouse Skin and Draining Lymph Node Following Intradermal Immunization with Live Attenuated Plasmodium Sporozoites

Myeloid cellisolering från mushud och dränerande lymfkörteln Efter Intradermal immunisering med levande försvagade<em&gt; Plasmodium</em&gt; Sporozoiter

Malaria infection begins when the sporozoite stage of Plasmodium is inoculated into the skin of a mammalian host through a mosquito bite. The highly ...

Human Placental and Decidual Organ Cultures to Study Infections at the Maternal-fetal Interface

Human placenta och decidual Organ kulturer att studera Infektioner hos moder och foster gränssnitt

The placenta shows a large degree of interspecies anatomic variability. To best understand biology and pathophysiology of the human placenta, it is ...

Noninvasive Sampling of Mucosal Lining Fluid for the Quantification of In Vivo Upper Airway Immune-mediator Levels

Noninvasive Sampling of Mucosal Lining Fluid for the Quantification of In Vivo Upper Airway Immune-mediator Levels

Icke-invasiv provtagning av slemhinna slemhinnan vätska för kvantifiering av In Vivo övre luftvägarna immun-medlare nivåer

This protocol describes noninvasive sampling of undisturbed upper airway mucosal lining fluid. It also details the extraction procedure used prior to the ...

A Method for Targeted 16S Sequencing of Human Milk Samples

En metod för riktade 16S sekvensering av bröstmjölk prover

Studies of microbial communities have become widespread with the development of relatively inexpensive, rapid, and high throughput sequencing. However, as ...

Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay

Karakterisering av Thymus-beroende och oberoende av Thymus immunglobulin isotypen Svaren hos möss använder Enzyme-linked Immunosorbent Assay

Antibodies, also termed as immunoglobulins (Ig), secreted by differentiated B lymphocytes, plasmablasts/plasma cells, in humoral immunity provide a ...

Immunization of Adult Zebrafish for the Preclinical Screening of DNA-based Vaccines

Immunisering av vuxen zebrafiskar för prekliniska Screening av DNA-baserad vacciner

The interest in DNA-based vaccination has increased during the past two decades. DNA vaccination is based on the cloning of a sequence of a selected ...

Human Colonoid Monolayers to Study Interactions Between Pathogens, Commensals, and Host Intestinal Epithelium

Mänskliga Colonoid enskiktslager att studera interaktioner mellan patogener, förknippas och värd Intestinal epitel

Human 3-dimensional (3D) enteroid or colonoid cultures derived from crypt base stem cells are currently the most advanced ex vivo model of the intestinal ...