Name: analysis of motility patterns of stentor during and after oral apparatus regeneration using cell tracking
Uploaded: 2021-04-26T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Motility Patterns of Stentor During and After Oral Apparatus Regeneration Using Cell Tracking at JoVE.com

تم دعم هذا العمل ، جزئيا ، من قبل زمالة ويتمان للمختبر البيولوجي البحري المبكر (JYS). نحن نقدر إيفان بيرنز وميت باتيل وميلاني ميلو وسكايلار ويدمان للمساعدة في بعض التحليلات الأولية واختبار الشفرات. ونشكر مارك سلابودنيك على المناقشة والاقتراحات. تعترف WFM بالدعم المقدم من منحة المعاهد الوطنية للصحة R35 GM130327.

ملاحظة: تم استزراع مجموعة من حوالي مائة خلية S. coeruleus وفقا لبروتوكول JoVE8 المنشور سابقا.
1. إعداد العينات
<ol><li>قطع قطعة من ورقة فاصل السيليكون بسماكة 250 ميكرومتر (جدول المواد) أصغر قليلا في كل من الارتفاع والعرض من شريحة المجهر. باستخدام ثقب 5/16 "لكمة ، ?...

<ol>
	<li>Lillie, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+smallest+parts+of+stentor+capable+of+regeneration;+a+contribution+on+the+limits+of+divisibility+of+living+matter.">On the smallest parts of stentor capable of regeneration; a contribution on the limits of divisibility of living matter.</a> Journal of Morphology. 12 (1), 239-249 (1896).</li><li>Morgan, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+proportionate+structures+in+Stentor.">Regeneration of proportionate structures in Stentor.</a> The Biological Bulletin. 2 (6), 311-328 (1901).</li><li>Tartar, V., Kerkut, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Biology of Stentor. , (1961).</li><li>Tartar, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactions+of+Stentor+coeruleus+to+certain+substances+added+to+the+medium.">Reactions of Stentor coeruleus to certain substances added to the medium.</a> Experimental Cell Research. 13 (2), 317-332 (1957).</li><li>Kelleher, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+kinetic+model+for+microtubule+polymerization+during+oral+regeneration+in+Stentor+coeruleus.">A kinetic model for microtubule polymerization during oral regeneration in Stentor coeruleus.</a> Biosystems. 9 (4), 269-279 (1977).</li><li>Slabodnick, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+kinase+regulator+Mob1+acts+as+a+patterning+protein+for+Stentor+morphogenesis.">The kinase regulator Mob1 acts as a patterning protein for Stentor morphogenesis.</a> PLOS Biology. 12 (5), 1001861 (2014).</li><li>Wan, K. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reorganization+of+complex+ciliary+flows+around+regenerating+Stentor+coeruleus.">Reorganization of complex ciliary flows around regenerating Stentor coeruleus.</a> Philosophical Transactions of the Royal Society B: Biological Sciences. 375 (1792), 20190167 (2020).</li><li>Lin, A., Makushok, T., Diaz, U., Marshall, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+the+study+of+regeneration+in+Stentor.">Methods for the study of regeneration in Stentor.</a> Journal of Visualized Experiments JoVE. (136), e57759 (2018).</li><li>Sood, P., McGillivary, R., Marshall, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+transcriptional+program+of+regeneration+in+the+giant+single+cell,+Stentor+coeruleus.">The transcriptional program of regeneration in the giant single cell, Stentor coeruleus.</a> bioRxiv. , 240788 (2017).</li><li>Onsbring, H., Jamy, M., Ettema, T. J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+sequencing+of+Stentor+cell+fragments+reveals+transcriptional+changes+during+cellular+regeneration.">RNA sequencing of Stentor cell fragments reveals transcriptional changes during cellular regeneration.</a> Current Biology. 28 (8), 1281-1288 (2018).</li></ol>

توجد حاليا العديد من خوارزميات تتبع الجسيمات والخلايا ، بعضها مجاني تماما. غالبا ما تكون التكلفة وسهولة الاستخدام مقايضات تتطلب حلا وسطا. بالإضافة إلى ذلك ، تم تصميم العديد من برامج تتبع الخلايا الحالية لتتبع حركة الزحف البطيئة لخلايا زراعة الأنسجة ، بدلا من حركة السباحة السريعة ل Stentor<...

Stentor coeruleus (Stentor) هو كائن حي نموذجي معروف تم استخدامه لدراسة التجديد أحادي الخلية بسبب حجمه الكبير ، وقدرته على تحمل العديد من تقنيات الجراحة المجهرية ، وسهولة الاستزراع في بيئة مختبرية1،2،3. ركزت دراسات التجديد المبكر على أكبر ميزة وأكثرها تميزا من الناحية المورفولوجية في Stentor - OA - التي يتم إلقاؤها بالكامل على الصدمة الكيميائية4،5،6. يبدأ استبدال OA المفقود بظهور نطاق غشائي جديد - مجموعة من الأهداب التي تتحول تدريجيا نحو الجزء الأمامي من الخلية قبل تشكيل OA وظيفي على مدى ثماني مراحل مورفولوجية3. وقد لوحظت هذه المراحل بالتتابع، بغض النظر عن درجة الحرارة، وتوفر نقطة مرجعية عالمية لجميع الدراسات تقريبا5.
يتطلب التحليل الميكانيكي لتجديد Stentor أدوات لقياس توقيت التجديد قوية وبسيطة بما يكفي لتطبيقها على عينات متعددة كجزء من شاشة كيميائية أو جزيئية. الطريقة القياسية لإجراء الفحص القائم على الخلايا هي التصوير ، في هذه الحالة ، تصوير تكوين OA جديد أثناء التجديد. ومع ذلك ، فإن هذه الفحوصات القائمة على التصوير تكون أكثر فعالية عندما تحتوي البنية المجددة على مكونات جزيئية متميزة يمكن استخدامها كعلامات ، بحيث يمكن اكتشافها بسهولة في صورة فلورية. في حالة Stentor OA ، توجد المكونات المعروفة (الأهداب ، الأجسام القاعدية) أيضا على بقية سطح الخلية. لذلك ، لا يمكن تحقيق الاعتراف باستعادة النفاذ المفتوح بمجرد البحث عن وجود أو عدم وجود مكون.
بدلا من ذلك ، ستكون هناك حاجة إلى شكل من أشكال التعرف على الشكل للكشف عن OA ، وهذا قد يكون صعبا للغاية بالنظر إلى حقيقة أن خلايا Stentor غالبا ما تغير شكلها عبر عملية انقباض سريعة. تقدم هذه الورقة مقايسة بديلة للتجديد تعتمد على النشاط الحركي للجسم وأهداب الزراعة العضوية المفتوحة. مع تجديد OA ، تخضع الأهداب المشكلة حديثا لتغييرات قابلة للتكرار في الموضع والنشاط ، والتي بدورها تؤثر على حركة السباحة للخلية. من خلال تحليل الحركة ، من الممكن إجراء فحص ل "التجديد الوظيفي" الذي يحدد التجديد كميا عن طريق تحديد وظيفة الهياكل المجددة. استخدم التحليل السابق للدالة الهدبية Stentor أثناء التجديد قياس سرعة صورة الجسيمات ، جنبا إلى جنب مع حبات التتبع المضافة إلى الوسائط الخارجية ، لمراقبة التغيرات في نمط التدفق في مراحل مختلفة من التجديد7 ؛ ومع ذلك ، يتطلب هذا النهج تصويرا شاقا للخلايا الفردية وحقول التدفق المرتبطة بها ، واحدة تلو الأخرى.
باستخدام حركة الخلية نفسها كوكيل للتدفق الناتج عن الأهداب ، سيكون من الممكن تحليل أعداد أكبر من الخلايا بالتوازي ، باستخدام أنظمة تصوير منخفضة الدقة متوافقة مع منصات الفحص عالية الإنتاجية. يمكن استخدام هذا الفحص ، من حيث المبدأ ، لدراسة التطور والتجديد الوظيفي في الكائنات الحية الأخرى التي تعمل بمئات الميكرونات إلى الملليمترات على نطاق الحجم. يصف القسم 1 من البروتوكول بناء شريحة عينة متعددة الآبار ، والتي تسمح بتصوير عالي الإنتاجية لمجموعة من الخلايا على مدار يوم كامل. يتم توفير تفاصيل حول كيفية الضبط للاستخدام مع أنواع الخلايا الأخرى. يغطي القسم 2 من البروتوكول الحصول على بيانات الفيديو لهذا الفحص ، والتي يمكن إنجازها على مجهر تشريح باستخدام كاميرا انعكاسية رقمية أحادية العدسة. يوفر القسم 3 من البروتوكول تفصيلا لتتبع الخلايا وحساب سرعة الخلية باستخدام رمز MATLAB (المعلومات التكميلية). يشرح القسم 4 من البروتوكول كيفية تحويل النتائج العددية إلى مخططات كما هو موضح في الشكل 1C-F والشكل 2C لسهولة تفسير النتائج.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.25 mm-thick silicone sheet</td>
			<td>Grace Bio-Labs</td>
			<td>CWS-S-0.25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 x 50 mm, #1.5 coverglass</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC1034527</td>
			<td>As noted in Discussion, smaller coverglass can be used if fewer sample wells are placed on one slide.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCD camera</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>We used Nikon D750</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlamydomonas 137c WT strain</td>
			<td>Chlamydomonas Resource Center</td>
			<td>CC-125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB</td>
			<td>MATHWORKS</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB Image Processing Toolbox</td>
			<td>MATHWORKS</td>
			<td></td>
			<td>needed for TrackCells.m and CleanTraces.m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB Statistics and Machine Learning Toolbox</td>
			<td>MATHWORKS</td>
			<td></td>
			<td>needed for TrackCells.m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope with camera port</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>We used Zeiss AxioZoom v1.6 and Leica S9E</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasteurized Spring Water</td>
			<td>Carolina</td>
			<td>132458</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TAP Growth Media</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A1379801</td>
			<td>Can also be made for much cheaper following recipe from Chlamy Resource Center</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of motility patterns of stentor during and after oral apparatus regeneration using cell tracking

Stentor coeruleus هو كائن حي نموذجي معروف لدراسة التجديد أحادي الخلية. كشف التحليل النسخي للخلايا الفردية عن مئات الجينات - العديد منها غير مرتبط بالجهاز الفموي (OA) - التي يتم تنظيمها بشكل تفاضلي على مراحل طوال عملية التجديد. كان من المفترض أن إعادة التنظيم المنهجي وتعبئة الموارد الخلوية نحو نمو OA جديد سيؤدي إلى تغييرات ملحوظة في الحركة والسلوك المقابلة في الوقت المناسب لمراحل التعبير الجيني التفاضلي. ومع ذلك ، فإن التعقيد المورفولوجي ل S. coeruleus استلزم تطوير فحص لالتقاط الإحصاءات والجدول الزمني. تم استخدام برنامج نصي مخصص لتتبع الخلايا في مقاطع فيديو قصيرة ، وتم تجميع الإحصاءات على عدد كبير من السكان (N ~ 100). عند فقدان OA ، يفقد S. coeruleus في البداية القدرة على الحركة الموجهة ؛ ثم بدءا من ~ 4 ساعات ، فإنه يظهر انخفاضا كبيرا في السرعة حتى ~ 8 ساعات. يوفر هذا الفحص أداة مفيدة لفحص الأنماط الظاهرية الحركية ويمكن تكييفها للتحقيق في الكائنات الحية الأخرى.

الهدف من هذا الفحص هو تحديد التغير التدريجي لأنماط الحركة والزيادة التدريجية في سرعة الحركة من الخلايا داخل مجموعة كبيرة (N ~ 100) من Stentor المجددة. للمساعدة في تفسير النتائج ، يولد الرمز المخصص المضمن في هذا البروتوكول نوعين من المؤامرات: تراكب لجميع آثار حركة الخلية في مجموعة من بيانات ?...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Motility Patterns of Stentor During and After Oral Apparatus Regeneration Using Cell Tracking at JoVE.com

Analysis of Motility Patterns of Stentor During and After Oral Apparatus Regeneration Using Cell Tracking

نقدم بروتوكولا لتوصيف حركية وسلوك مجموعة من مائة خلية بحجم ميكرون إلى ملليمتر باستخدام المجهر الساطع وتتبع الخلايا. يكشف هذا الفحص أن Stentor coeruleus ينتقل عبر أربع مراحل متميزة سلوكيا عند تجديد جهاز فموي مفقود.

تحليل أنماط حركية السدادة أثناء وبعد تجديد الجهاز الفموي باستخدام تتبع الخلايا

Stentor coeruleus is a well-known model organism for the study of unicellular regeneration. Transcriptomic analysis of individual cells revealed hundreds ...

منذ فترة طويلة تم استخدام Stentor coeruleus ككائن حي نموذجي لفهم التجديد أحادي الخلية. في حين أن الجدول الزمني للتجديد المورفولوجي البصري معروف ، إلا أن الجدول الزمني للتجديد الوظيفي لا يزال غير معروف. يتتبع هذا الفحص حركية سكان المركز الذين يخضعون للتجديد المتزامن بحيث يمكن تحديد وظيفة استرداد الخسارة.يمكن تكييفه للاستخدام مع أنواع الخلايا الأخرى. سيؤدي عدم وجود ختم آمن لغرفة التصوير إلى تسرب الآبار إلى بعضها البعض أو تشكل فقاعات الهواء داخل الآبار. بالنسبة للباحثين غير المطلعين على استخدام فواصل السيليكون ، نوصي بشدة بأن يتم سحب PSW أو أي وسيط نظيف آخر في كل بئر من الآبار لاختبار التسرب قبل الاستخدام.يتم عرض بناء غرف العينة بشكل أسهل من وصفه شفهيا. كما هي عملية استخراج أنماط الحركة من بيانات الفيديو المكتسبة. للبدء ، قم بقطع قطعة من ورقة فاصل السيليكون بسماكة 250 ميكرومتر أصغر قليلا في كل من الارتفاع والعرض من شريحة المجهر.استخدم لكمة كاملة لإنشاء آبار دائرية تترك مساحة كافية بين الآبار المجاورة لضمان ختم جيد. بدء تجديد الجهاز الفموي عن طريق احتضان الخلايا المنتفخة coeruleus في 10٪ السكروز أو 2٪ uria لمدة دقيقتين. ثم يغسل ثلاث مرات مع وسط طازج.ماصة بلطف ما يقرب من 10 دعامات في كل بئر. الحرص على مطابقة حجم العينة مع حجم البئر قدر الإمكان. أغلق الآبار عن طريق خفض قطعة من زجاج الغطاء برفق فوق الآبار بدءا من حافة واحدة.استخدم جسما ضيقا ومرنا قليلا ، مثل طرف ماصة 10 ميكرولتر للضغط لأسفل على زجاج الغطاء حيث يلامس ورقة السيليكون لضمان ختم جيد. ضع العينة على مرحلة المجهر واضبط المجهر على أدنى تكبير متاح بحيث يتناسب المرء بشكل جيد مع الإطار. ابدأ الفاصل الزمني واحصل على فيديو مدته عشر ثوان بمعدل 30 إطارا في الثانية من كل بئر في كل نقطة زمنية.للمعايرة، احصل على صورة واضحة لشريحة معايرة أو مسطرة واضحة في نفس إعدادات التكبير مثل مقاطع الفيديو. باستخدام أي برنامج لعرض الصور ، قم بحساب عدد وحدات البكسل بين علامات المسافة المادية المعروفة. قم بتنزيل البرنامجين النصيين وخلايا التتبع وتنظيف الآثار إلى موقع يسهل تذكره على الكمبيوتر ونقل مقاطع فيديو البيانات إلى هذا الكمبيوتر أيضا.تنظيم مقاطع فيديو البيانات في مجلدات. واحد لكل نقطة زمنية. استخدم خلايا تتبع البرنامج النصي لإجراء تتبع تلقائي للخلايا في مقاطع فيديو البيانات عن طريق فتح خلايا المسار وتشغيل البرنامج النصي اختر إضافة إلى المسار "إذا طلب منك ذلك من خلال نافذة منبثقة والتي لن تحدث عادة إلا عند تشغيل البرنامج النصي لأول مرة من مجلد معين.عند المطالبة، حدد مقطع فيديو بيانات واحدا أو أكثر لبدء التتبع. انتقل إلى مقاطع فيديو البيانات وبمجرد الرضا عن قائمة الملفات ، انقر فوق فتح"لرفض الآثار الشاذة أو الخاطئة يدويا ، افتح الآثار النظيفة في نافذة محرر MATLAB بالنقر المزدوج على الملف. في المطالبة ، حدد إخراج مجلد البيانات بواسطة خلايا التعقب.انتقل إلى أحد المجلدات التي تم إنشاؤها وحدده. عند المطالبة، أدخل واحدا للاحتفاظ بالتتبع وصفرا لرفض التتبع. ثم اضغط على Enter للانتقال إلى التتبع التالي.ابدأ بتنزيل البرنامج النصي بعنوان مؤامرات السباغيتي. افتح البرنامج النصي وقم بتشغيله. عندما تنبثق نافذة مستعرض الملفات مع المطالبة، حدد المجلد المراد فتحه.انتقل إلى مجلد إحدى النقاط الزمنية. عند المطالبة، المعايرة، ما هو عدد وحدات البكسل لكل ملليمتر؟ اكتب قيمة المعايرة واضغط على مفتاح الإدخال Enter.اضبط محاور المؤامرة حسب الضرورة عن طريق تغيير السطر 55 من البرنامج النصي ، والذي يتم تعيينه افتراضيا إلى RR يساوي أربعة. لتضمين دائرة نصف قطرها تصل إلى أربعة ملليمترات. حفظ المؤامرة.تظهر النتائج الحركة الجماعية لسكان الخلايا الجذعية في ساعتين وثلاث وسبع وثماني ساعات من عملية تجديد الجهاز الفموي. تظهر هذه المؤامرات كلا من الزيادة المتوقعة في عدد الأفراد المتحركين والزيادة أربعة أضعاف في نطاق الخلايا الأكثر حركة داخل السكان. أسرع خلايا السباحة ، إذا بدأت بالقرب من الحافة ، يتم تقييدها من السباحة بالكامل في خط مستقيم ويبدو نطاق حركتها أصغر.تم تصنيف خلايا المسالك إلى ثلاث فئات متميزة ، غير متحركة مع عدم وجود ثبات مرئي ، وغير متحركة مع ثبات مرئي ، ومتحركة. أظهرت النتيجة رسما بيانيا مكدسا يلخص عدد الخلايا النسبية عبر هذه الفئات كدالة لنا في التجديد. في أوقات لاحقة ، تم العثور على عدد كبير من الخلايا في مستعمرات ذات صيام مرئي يشير بقوة إلى أنها استكشفت البيئة وربطت بشكل تفضيلي بالقرب من الآخرين من نوعهم.من المهم اختيار أبعاد بئر العينة التي تعمل بشكل جيد مع coeruleus السدادة التي يبلغ حجمها حوالي ملليمتر واحد. ويشمل ذلك سمك فاصل السيليكون 5/16 بوصة في القطر ، و 10 خلايا لكل بئر. يجب ضبط هذه الأرقام عند تكييف هذا البروتوكول مع أنواع الخلايا الأخرى.يمكن إجراء هذا الفحص بالاقتران مع RNA-I للتحقيق في تجديد الأنماط الظاهرية المختلفة للدعامات ومقارنتها.

Research

JoVE Journal

Biology

Analysis of Motility Patterns of Stentor During and After Oral Apparatus Regeneration Using Cell Tracking

Assessing Neural Stem Cell Motility Using an Agarose Gel-based Microfluidic Device

تقييم العصبية على الحركة باستخدام الخلايا الجذعية جل المستندة Agarose الأجهزة ميكروفلويديك

While microfluidic technology is reaching a new level of maturity for macromolecular assays, cell-based assays are still at an infant stage1. This is ...

Visually Mediated Odor Tracking During Flight in Drosophila

تتبع الرائحة بصريا وساطة خلال الطيران في ذبابة الفاكهة

Flying insects use visual cues to stabilize their heading in a wind stream. Many animals additionally track odors carried in the wind. As such, visual ...

Immunocytochemical Analysis of Human Pluripotent Stem Cells using a Self-Made Cytospin Apparatus

Immunocytochemical تحليل الإنسان الخلايا الجذعية المحفزة باستخدام جهاز Cytospin عصامي

Human pluripotent stem cells (hPSCs) that include human embryonic stem cells (hESCs) and human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) are exciting cell ...

Quantitative Analysis of Random Migration of Cells Using Time-lapse Video Microscopy

التحليل الكمي للهجرة عشوائية من الخلايا باستخدام الوقت الفاصل بين الميكروسكوب فيديو

Cell migration is a dynamic process, which is important for embryonic development, tissue repair, immune system function, and tumor invasion 1, 2. During ...

Optimized Staining and Proliferation Modeling Methods for Cell Division Monitoring using Cell Tracking Dyes

الأمثل أساليب النمذجة وتلوين لرصد انتشار استخدام الأصباغ انقسام الخلية خلية تتبع

Fluorescent cell tracking dyes, in combination with flow and image cytometry, are powerful tools with which to study the interactions and fates of ...

Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

تحليل سريع لالوراثية طلائي-الوسيطة اشارة خلال تجديد الشعر

Hair follicle morphogenesis, a complex process requiring interaction between epithelia-derived keratinocytes and the underlying mesenchyme, is an ...

Cell Tracking Using Photoconvertible Proteins During Zebrafish Development

تتبع الخلية عن طريق البروتينات Photoconvertible خلال التنمية اسماك الزرد

Embryogenesis is a dynamic process that is best studied by using techniques that allow the documentation of developmental changes in vivo. The use of ...

Visualizing Cytoplasmic Flow During Single-cell Wound Healing in Stentor coeruleus

Visualizing Cytoplasmic Flow During Single-cell Wound Healing in Stentor coeruleus

Although wound-healing is often addressed at the level of whole tissues, in many cases individual cells are able to heal wounds within themselves, ...

Temporal Tracking of Cell Cycle Progression Using Flow Cytometry without the Need for Synchronization

تتبع الزمني للتقدم دورة الخلية باستخدام التدفق الخلوي دون الحاجة إلى مزامنة

This protocol describes a method to permit the tracking of cells through the cell cycle without requiring the cells to be synchronized. Achieving cell ...

FRET Imaging in Three-dimensional Hydrogels

الحنق التصوير في الهلاميات المائية ثلاثية الأبعاد

Imaging of F&#246;rster resonance energy transfer (FRET)&#160;is a powerful tool for examining cell biology in real-time. Studies utilizing FRET commonly ...