Name: analysis of motility patterns of stentor during and after oral apparatus regeneration using cell tracking
Uploaded: 2021-04-26T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Motility Patterns of Stentor During and After Oral Apparatus Regeneration Using Cell Tracking at JoVE.com

עבודה זו נתמכה, בין השאר, על ידי מלגת ויטמן לקריירה מוקדמת במעבדה הביולוגית הימית (JYS). אנו מודים לאוון ברנס, מיט פאטל, מלאני מלו וסקיילר וידמן על שעזרו בחלק מהניתוח הראשוני ובדיקת הקוד. אנו מודים למארק סלבודניק על הדיון וההצעות. WFM מכיר בתמיכה ממענק NIH R35 GM130327.

הערה: אוכלוסייה של כמאה תאי S. coeruleus עברו תרבית בהתאם לפרוטוקול JoVE8 שפורסם בעבר.
1. הכנה לדוגמה
<ol><li>חותכים חתיכה של יריעת ספייסר סיליקון בעובי 250 מיקרומטר (טבלת חומרים) מעט קטנה יותר הן בגובה והן ברוחב מאשר מגלשת מיקרוסקופ. באמצעות ניקוב חור בגודל 5/16...

<ol>
	<li>Lillie, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+smallest+parts+of+stentor+capable+of+regeneration;+a+contribution+on+the+limits+of+divisibility+of+living+matter.">On the smallest parts of stentor capable of regeneration; a contribution on the limits of divisibility of living matter.</a> Journal of Morphology. 12 (1), 239-249 (1896).</li><li>Morgan, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+proportionate+structures+in+Stentor.">Regeneration of proportionate structures in Stentor.</a> The Biological Bulletin. 2 (6), 311-328 (1901).</li><li>Tartar, V., Kerkut, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Biology of Stentor. , (1961).</li><li>Tartar, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactions+of+Stentor+coeruleus+to+certain+substances+added+to+the+medium.">Reactions of Stentor coeruleus to certain substances added to the medium.</a> Experimental Cell Research. 13 (2), 317-332 (1957).</li><li>Kelleher, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+kinetic+model+for+microtubule+polymerization+during+oral+regeneration+in+Stentor+coeruleus.">A kinetic model for microtubule polymerization during oral regeneration in Stentor coeruleus.</a> Biosystems. 9 (4), 269-279 (1977).</li><li>Slabodnick, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+kinase+regulator+Mob1+acts+as+a+patterning+protein+for+Stentor+morphogenesis.">The kinase regulator Mob1 acts as a patterning protein for Stentor morphogenesis.</a> PLOS Biology. 12 (5), 1001861 (2014).</li><li>Wan, K. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reorganization+of+complex+ciliary+flows+around+regenerating+Stentor+coeruleus.">Reorganization of complex ciliary flows around regenerating Stentor coeruleus.</a> Philosophical Transactions of the Royal Society B: Biological Sciences. 375 (1792), 20190167 (2020).</li><li>Lin, A., Makushok, T., Diaz, U., Marshall, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+the+study+of+regeneration+in+Stentor.">Methods for the study of regeneration in Stentor.</a> Journal of Visualized Experiments JoVE. (136), e57759 (2018).</li><li>Sood, P., McGillivary, R., Marshall, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+transcriptional+program+of+regeneration+in+the+giant+single+cell,+Stentor+coeruleus.">The transcriptional program of regeneration in the giant single cell, Stentor coeruleus.</a> bioRxiv. , 240788 (2017).</li><li>Onsbring, H., Jamy, M., Ettema, T. J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+sequencing+of+Stentor+cell+fragments+reveals+transcriptional+changes+during+cellular+regeneration.">RNA sequencing of Stentor cell fragments reveals transcriptional changes during cellular regeneration.</a> Current Biology. 28 (8), 1281-1288 (2018).</li></ol>

קיימים כיום אלגוריתמים רבים למעקב אחר חלקיקים ותאים, חלקם חופשיים לחלוטין. עלות וידידותיות למשתמש הן לעתים קרובות פשרות הדורשות פשרה. בנוסף, רבות מתוכניות המעקב הקיימות אחר תאים נועדו לעקוב אחר תנועת זחילה איטית של תאי תרבית רקמה, במקום תנועת השחייה המהירה של סטנטור, שמסתובבת תוך כדי...

Stentor coeruleus (Stentor) הוא אורגניזם מודל ידוע ששימש לחקר התחדשות חד-תאית בשל גודלו הגדול, יכולתו לעמוד במספר טכניקות מיקרו-כירורגיות וקלות התרבות בסביבת מעבדהשל 1,2,3. מחקרי התחדשות מוקדמים התמקדו בתכונה הגדולה והמורפולוגית המורפולוגית הגדולה ביותר בסטנטור – ה-OA – אשר נשפכת לחלוטין על הלם כימי 4,5,6. החלפת דה נובו של OA אבוד מתחילה עם הופעתה של רצועת ממברנה חדשה – מערך של ריסונים הנעים בהדרגה לכיוון החלק הקדמי של התא לפני שהם יוצרים OA פונקציונלי על פני שמונה שלבים מורפולוגיים3. שלבים אלה נצפו ברצף, ללא קשר לטמפרטורה, ומספקים נקודת ייחוס אוניברסלית כמעט לכל המחקרים5.
ניתוח מכניסטי של התחדשות סטנטור דורש כלים למדידת תזמון ההתחדשות שהם חזקים ופשוטים מספיק כדי להיות מיושמים על דגימות מרובות כחלק ממסך כימי או מולקולרי. השיטה הסטנדרטית לביצוע בדיקה מבוססת תאים היא הדמיה, במקרה זה, הדמיה של היווצרות OA חדש במהלך התחדשות. עם זאת, מבחנים מבוססי הדמיה כאלה יעילים ביותר כאשר המבנה המתחדש מכיל רכיבים מולקולריים מובחנים שיכולים לשמש כסמנים, כך שהם יזוהו בקלות בתמונה פלואורסצנטית. במקרה של Stentor OA, הרכיבים הידועים (ריסונים, גופים בסיסיים) נמצאים גם על שאר פני השטח של התא; לכן, הכרה בשיקום של OA לא יכולה להיות מושגת פשוט על ידי חיפוש נוכחות או היעדר של רכיב.
במקום זאת, תידרש צורה כלשהי של זיהוי צורה כדי לזהות OA, וזה עלול להיות מאתגר מאוד בהתחשב בעובדה שתאי סטנטור לעתים קרובות משנים צורה באמצעות תהליך כיווץ מהיר. מאמר זה מציג בדיקה חלופית להתחדשות המסתמכת על פעילות תנועתית של הגוף וריסוני OA. כאשר ה- OA מתחדש, הריסונים החדשים שנוצרו עוברים שינויים הניתנים לשחזור במיקום ובפעילות, אשר בתורם משפיעים על תנועתיות השחייה של התא. על ידי ניתוח תנועתיות, ניתן לבצע בדיקה עבור "התחדשות פונקציונלית" המכמתת התחדשות על ידי כימות הפונקציה של המבנים המתחדשים. ניתוח קודם של תפקוד Stentor ciliary במהלך התחדשות השתמש בוולוצימטריה של תמונת חלקיקים, בשילוב עם חרוזי עקיבה שנוספו למדיה החיצונית, כדי לבחון שינויים בתבנית הזרימה בשלבים שונים של התחדשות7; עם זאת, גישה זו דורשת הדמיה מייגעת של תאים בודדים ושדות הזרימה הקשורים אליהם, בזה אחר זה.
על ידי שימוש בתנועת התא עצמו כפרוקסי לזרימה שנוצרה על ידי ריסונים, ניתן יהיה לנתח מספר גדול יותר של תאים במקביל, באמצעות מערכות הדמיה ברזולוציה נמוכה התואמות לפלטפורמות סינון בתפוקה גבוהה. בדיקה זו יכולה, באופן עקרוני, לשמש לחקר התפתחות והתחדשות תפקודית באורגניזמים שוחים אחרים בקנה מידה של מאות מיקרונים עד מילימטרים. סעיף 1 של הפרוטוקול מתאר את בנייתה של שקופית דגימה רב-תחומית, המאפשרת הדמיה בתפוקה גבוהה של אוכלוסיית תאים במשך עד יום שלם. מפורטים כיצד להתאים את עצמם לשימוש עם סוגי תאים אחרים. חלק 2 של הפרוטוקול מכסה את רכישת נתוני הווידאו עבור בדיקה זו, אשר ניתן לבצע על מיקרוסקופ דיסקציה עם מצלמת רפלקס דיגיטלית עם עדשה אחת. סעיף 3 של הפרוטוקול מספק מעבר של מעקב אחר תאים וחישוב מהירות התא באמצעות קוד MATLAB (מידע משלים). סעיף 4 של הפרוטוקול מסביר כיצד להפוך את התוצאות המספריות לחלקות כפי שמוצג באיור 1C-F ובאיור 2C לפענוח קל של התוצאות.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.25 mm-thick silicone sheet</td>
			<td>Grace Bio-Labs</td>
			<td>CWS-S-0.25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 x 50 mm, #1.5 coverglass</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC1034527</td>
			<td>As noted in Discussion, smaller coverglass can be used if fewer sample wells are placed on one slide.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCD camera</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>We used Nikon D750</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlamydomonas 137c WT strain</td>
			<td>Chlamydomonas Resource Center</td>
			<td>CC-125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB</td>
			<td>MATHWORKS</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB Image Processing Toolbox</td>
			<td>MATHWORKS</td>
			<td></td>
			<td>needed for TrackCells.m and CleanTraces.m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB Statistics and Machine Learning Toolbox</td>
			<td>MATHWORKS</td>
			<td></td>
			<td>needed for TrackCells.m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope with camera port</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>We used Zeiss AxioZoom v1.6 and Leica S9E</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasteurized Spring Water</td>
			<td>Carolina</td>
			<td>132458</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TAP Growth Media</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A1379801</td>
			<td>Can also be made for much cheaper following recipe from Chlamy Resource Center</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of motility patterns of stentor during and after oral apparatus regeneration using cell tracking

Stentor coeruleus הוא אורגניזם מודל ידוע לחקר ההתחדשות החד-תאית. ניתוח תעתיק של תאים בודדים גילה מאות גנים – רבים מהם אינם קשורים למנגנון הפה (OA) – המווסתים באופן דיפרנציאלי בשלבים לאורך תהליך ההתחדשות. ההשערה הייתה כי ארגון מחדש מערכתי זה וגיוס משאבים תאיים לקראת צמיחה של OA חדש יובילו לשינויים נצפים בתנועה ובהתנהגות המתאימים בזמן לשלבים של ביטוי גנים דיפרנציאליים. עם זאת, המורכבות המורפולוגית של S. coeruleus חייבה פיתוח של מבחן כדי ללכוד את הסטטיסטיקה ואת ציר הזמן. סקריפט מותאם אישית שימש למעקב אחר תאים בסרטונים קצרים, וסטטיסטיקות נאספו על פני אוכלוסייה גדולה (N ~ 100). עם אובדן ה- OA, S. coeruleus מאבד בתחילה את היכולת לתנועה מכוונת; ואז מתחיל ב~ 4 שעות, הוא מציג ירידה משמעותית במהירות עד ~ 8 שעות. בדיקה זו מספקת כלי שימושי לסינון של פנוטיפים של תנועתיות וניתן להתאים אותה לחקירת אורגניזמים אחרים.

מטרתו של מבחן זה היא לכמת את השינוי ההדרגתי של דפוסי התנועה ואת העלייה המדורגת במהירות התנועה מתאים בתוך אוכלוסיית סטנטור גדולה (N ~ 100) המתחדשת. כדי לסייע בפרשנות התוצאות, הקוד המותאם אישית הכלול בפרוטוקול זה יוצר שני סוגים של חלקות: שכבה של כל עקבות תנועת התאים בסדרת נתוני וידאו (<strong cl...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Motility Patterns of Stentor During and After Oral Apparatus Regeneration Using Cell Tracking at JoVE.com

Analysis of Motility Patterns of Stentor During and After Oral Apparatus Regeneration Using Cell Tracking

אנו מציגים פרוטוקול לאפיון תנועתיות והתנהגות של אוכלוסייה של תאים בגודל של מאה מיקרון עד מילימטר באמצעות מיקרוסקופיית שדה בהיר ומעקב אחר תאים. בדיקה זו מגלה כי Stentor coeruleus עובר דרך ארבעה שלבים שונים מבחינה התנהגותית כאשר הוא מחדש מנגנון אוראלי אבוד.

ניתוח דפוסי תנועתיות של סטנטור במהלך ואחרי התחדשות מנגנון הפה באמצעות מעקב אחר תאים

Stentor coeruleus is a well-known model organism for the study of unicellular regeneration. Transcriptomic analysis of individual cells revealed hundreds ...

Stentor coeruleus משמש זה מכבר כאורגניזם מודל להבנת התחדשות חד-תאית. בעוד שציר הזמן להתחדשות מורפולוגית חזותית ידוע, ציר הזמן להתחדשות תפקודית נותר לא ידוע. בדיקה זו עוקבת אחר התנועתיות של אוכלוסיית המרכז העוברת התחדשות מסונכרנת כך שניתן לכמת את התאוששות תפקוד האובדן.ניתן להתאים אותו לשימוש עם סוגי תאים אחרים. היעדר חותם מאובטח של תא ההדמיה יגרום לדליפת בארות זו לתוך זו או להיווצרות בועות אוויר בתוך הבארות. עבור חוקרים שאינם מכירים את השימוש במרווחי סיליקון אנו ממליצים בחום להכניס PSW או מדיום נקי אחר לתוך כל אחת מהבארות כדי לבדוק אם יש דליפה לפני השימוש.בניית תאי המדגם קלה יותר להצגה מאשר לתיאור מילולי. וכך גם התהליך לחילוץ דפוסי תנועתיות מנתוני הווידאו שנרכשו. כדי להתחיל, חותכים חתיכה של יריעת ספייסר סיליקון בעובי 250 מיקרומטר מעט קטנה יותר הן בגובה והן ברוחב מאשר שקופית מיקרוסקופ.השתמש באגרוף שלם כדי ליצור בארות עגולות המשאירות מספיק מקום בין בארות שכנות כדי להבטיח אטימה טובה. ליזום התחדשות של מנגנון הפה על ידי דגירה של תאי stentor coeruleus ב 10% סוכרוז או 2% אוריה במשך שתי דקות. לאחר מכן יש לשטוף שלוש פעמים עם מדיום טרי.בעדינות פיפטה כ 10 stentor לתוך כל באר. הקפדה על התאמת נפח הדגימה לנפח הבאר קרוב ככל האפשר. סגרו את הבארות על ידי הנמכה עדינה של פיסת זכוכית כיסוי מעל הבארות החל מקצה אחד.השתמש באובייקט צר ומעט גמיש, כגון קצה פיפטה של 10 מיקרוליטר כדי ללחוץ על זכוכית הכיסוי במקום שבו הוא יוצר קשר עם יריעת הסיליקון כדי להבטיח אטימה טובה. מניחים את הדגימה על שלב המיקרוסקופ ומניחים את המיקרוסקופ להגדלה הנמוכה ביותר הזמינה כך שאחד מהם יתאים היטב למסגרת. התחילו את קיטועי הזמן ורכשו סרטון של עשר שניות בקצב של 30 פריימים לשנייה מכל באר בכל נקודת זמן.כדי לכייל, קבל תמונה ברורה של שקופית כיול או סרגל ברור באותן הגדרות הגדלה כמו הסרטונים. באמצעות כל תוכנית צפייה בתמונות, ספרו את מספר הפיקסלים בין סימנים של מרחק פיזי ידוע. הורד את שני הסקריפטים, תאי המעקב והמעקבות הנקיים למיקום קל לזכירה במחשב והעבר את סרטוני הנתונים גם למחשב זה.ארגן את סרטוני הנתונים בתיקיות. אחד לכל נקודת זמן. השתמש בתאי המסלול של Script כדי לבצע מעקב אוטומטי אחר תאים בסרטוני הנתונים על-ידי פתיחת תאי רצועה והפעלת הסקריפט בחר הוסף לנתיב "אם תתבקש על-ידי חלון קופץ אשר בדרך כלל יקרה רק כאשר הסקריפט מופעל בפעם הראשונה מתיקייה נתונה.כשתתבקש, בחר סרטון נתונים אחד או יותר כדי להתחיל במעקב. נווט אל סרטוני הנתונים ולאחר שהיית מרוצה מרשימת הקבצים לחץ על open"כדי לדחות באופן ידני עקבות חריגים או כוזבים, פתח עקבות נקיים בחלון עורך MATLAB על ידי לחיצה כפולה על הקובץ. בבקשת הבקשה בחר פלט תיקיית נתונים לפי תאי מעקב.נווט אל אחת התיקיות שנוצרו ובחר אותה. כשתתבקש, הזן אחד כדי לשמור על המעקב ואפס כדי לדחות את המעקב. לאחר מכן לחץ על Enter כדי לעבור לעקבה הבאה.התחל על ידי הורדת התסריט שכותרתו עלילות ספגטי. פתח והפעל את הסקריפט. כאשר חלון דפדפן הקבצים צץ עם הבקשה, בחר תיקיה לפתיחה.נווט אל התיקיה של אחת מנקודות הזמן. כאשר מתבקש, כיול, מהו מספר הפיקסלים למילימטר? הקלד את ערך הכיול והקש Enter.התאם את צירי העלילה לפי הצורך על ידי שינוי שורה 55 של הסקריפט, אשר כברירת מחדל מוגדר ל- RR שווה לארבעה. עבור הכללת רדיוס של עד ארבעה מילימטרים. שמור את העלילה.התוצאות מראות את התנועתיות הקולקטיבית של אוכלוסיית תאי הסטנטור בשעתיים, שלוש, שבע ושמונה שעות לתוך תהליך התחדשות המנגנון האוראלי. חלקות אלה מראות הן את הגידול הצפוי במספר הפרטים תנועתיים והן את הגידול הגדול פי ארבעה בטווח התאים תנועתיים ביותר באוכלוסייה. תאי השחייה המהירים ביותר, אם הם מתחילים קרוב לקצה, מוגבלים משחייה לחלוטין בקו ישר וטווח התנועה שלהם נראה קטן יותר.תאי המערכת סווגו לשלוש קטגוריות נפרדות, לא תנועתיים ללא אחיזה נראית לעין במהירות, לא תנועתיים עם אחיזה נראית מהר, ותנועתית. התוצאה הראתה היסטוגרמה מוערמת המסכמת את ספירת התאים היחסית בקטגוריות אלה כפונקציה שלנו להתחדשות. בתקופות מאוחרות יותר, מספר משמעותי של תאים נמצאו במושבות עם צום אחיזה נראה לעין, מה שמרמז מאוד על כך שהם חקרו את הסביבה והתחברו באופן מועדף ליד אחרים מסוגם.חשוב לבחור את מידות הבאר לדוגמה שעובדות היטב עבור stentor coeruleus שגודלם כמילימטר אחד. זה כולל עובי ספייסר סיליקון בקוטר 5/16 אינץ', ו-10 תאים לכל באר. יש להתאים מספרים אלה בעת התאמת פרוטוקול זה לסוגי תאים אחרים.ניתן לבצע בדיקה זו בשילוב עם RNA-I כדי לחקור ולהשוות את ההתחדשות של פנוטיפים שונים של סטנטור.

Research

JoVE Journal

Biology

Analysis of Motility Patterns of Stentor During and After Oral Apparatus Regeneration Using Cell Tracking

Assessing Neural Stem Cell Motility Using an Agarose Gel-based Microfluidic Device

הערכת תנועתיות עצבי לתאי גזע באמצעות התקן הג&#39;ל מבוסס agarose Microfluidic

While microfluidic technology is reaching a new level of maturity for macromolecular assays, cell-based assays are still at an infant stage1. This is ...

Visually Mediated Odor Tracking During Flight in Drosophila

ראייה ריח מעקב מתווכת במהלך טיסה ב תסיסנית

Flying insects use visual cues to stabilize their heading in a wind stream. Many animals additionally track odors carried in the wind. As such, visual ...

Immunocytochemical Analysis of Human Pluripotent Stem Cells using a Self-Made Cytospin Apparatus

ניתוח Immunocytochemical של בתאי גזע האדם pluripotent באמצעות מנגנון מתוצרת עצמית Cytospin

Human pluripotent stem cells (hPSCs) that include human embryonic stem cells (hESCs) and human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) are exciting cell ...

Quantitative Analysis of Random Migration of Cells Using Time-lapse Video Microscopy

ניתוח כמותי של הגירה אקראית של תאים באמצעות זמן לשגות מיקרוסקופית וידאו

Cell migration is a dynamic process, which is important for embryonic development, tissue repair, immune system function, and tumor invasion 1, 2. During ...

Optimized Staining and Proliferation Modeling Methods for Cell Division Monitoring using Cell Tracking Dyes

אופטימיזציה שיטות דוגמנות מכתימה והפצת נשק לניטור חלוקת תא באמצעות צבעי מעקב סלולרי

Fluorescent cell tracking dyes, in combination with flow and image cytometry, are powerful tools with which to study the interactions and fates of ...

Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

ניתוח גנטי מהיר של איתות אפיתל-mesenchymal במהלך התחדשות שיער

Hair follicle morphogenesis, a complex process requiring interaction between epithelia-derived keratinocytes and the underlying mesenchyme, is an ...

Cell Tracking Using Photoconvertible Proteins During Zebrafish Development

מעקב נייד באמצעות חלבוני Photoconvertible במהלך פיתוח דג זברה

Embryogenesis is a dynamic process that is best studied by using techniques that allow the documentation of developmental changes in vivo. The use of ...

Visualizing Cytoplasmic Flow During Single-cell Wound Healing in Stentor coeruleus

Visualizing Cytoplasmic Flow During Single-cell Wound Healing in Stentor coeruleus

Although wound-healing is often addressed at the level of whole tissues, in many cases individual cells are able to heal wounds within themselves, ...

Temporal Tracking of Cell Cycle Progression Using Flow Cytometry without the Need for Synchronization

מעקב זמני של התקדמות תא מחזור שימוש cytometry הזרימה ללא הצורך בסנכרון

This protocol describes a method to permit the tracking of cells through the cell cycle without requiring the cells to be synchronized. Achieving cell ...

FRET Imaging in Three-dimensional Hydrogels

סריג הדמיה ב הידרוג תלת ממדי

Imaging of F&#246;rster resonance energy transfer (FRET)&#160;is a powerful tool for examining cell biology in real-time. Studies utilizing FRET commonly ...