Name: temperature-controlled assembly and characterization of a droplet interface bilayer
Uploaded: 2021-04-19T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Temperature-Controlled Assembly and Characterization of a Droplet Interface Bilayer at JoVE.com

Den finansielle støtte blev ydet af National Science Foundation Grant CBET-1752197 og Air Force Office of Scientific Research Grant FA9550-19-1-0213.

1. Opvarmet armatur forberedelse
<ol><li>Der samles 2 stykker 1 mm tykt isolerende gummi trimmet til henholdsvis 25 mm x 40 mm i bredde og længde, 2 stykker af et 6 mm tykt gummi, der også er 25 mm x 40 mm, en forberedt aluminiumsbasearmarmatursamling og et akryloliereservoir, der passer ind i visningsvinduet i aluminiumsbasisarmaturet (se figur S1, S2 og S3 for detaljer om fabrikation og et eksploderet syn på samling). Forbered aluminium armatur først ved at fastgøre til bunden af armaturet et gl...

Den protokol, der er beskrevet heri, indeholder instruktioner til montering og drift af et eksperimentelt system til styring af temperaturen på den olie og de dråber, der bruges til at danne DIB'er. Det er især gavnligt at muliggøre DIB-dannelse ved hjælp af lipider, der har smeltetemperaturer over RT. Desuden kan bilayertemperaturen manipuleres ved præcist at variere temperaturen i oliereservoiret for at studere virkningerne af forhøjede temperaturer på forskellige membranegenskaber og egenskaber, herunder kapac...

Cellulære membraner er selektivt gennemtrængelige barrierer bestående af tusindvis af lipid typer1, proteiner, kulhydrater og steroler, der indkapsler og underinddeler alle levende celler. At forstå, hvordan deres kompositioner påvirker deres funktioner og afslører, hvordan naturlige og syntetiske molekyler interagerer med, overholder, forstyrrer og translokerer cellulære membraner, er derfor vigtige forskningsområder med vidtrækkende konsekvenser inden for biologi, medicin, kemi, fysik og materialeteknik.
Disse mål for opdagelse direkte drage fordel af gennemprøvede teknikker til at samle, manipulere og studere model membraner, herunder lipid bilayers samlet fra syntetiske eller naturligt forekommende lipider-at efterligne sammensætning, struktur og transport egenskaber af deres cellulære kolleger. I de senere år har dråbe interface bilayer (DIB) metode2,3,4 til opførelse af en planar lipid bilayer mellem lipid-belagt vanddråber i olie fået betydelig opmærksomhed5,6 ,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23, og har vist praktiske fordele i forhold til andre tilgange til modelmembrandannelse: DIB-metoden er enkel at udføre, kræver ingen avanceret fabrikation eller forberedelse (f.eks. "maleri") af et substrat til at støtte membranen, giver konsekvent membraner med overlegen levetid, giver mulighed for standard elektrofysiologi målinger, og forenkler dannelsen af modelmembraner med asymmetriske folder sammensætninger3. Fordi bilayer former spontant mellem dråber og hver dråbe kan skræddersys i position og makeup, DIB-teknikken har også tiltrukket sig stor interesse for at udvikle celleinspirerede materialesystemer, der bygger på brugen af stimuli-responsive membraner18,24,25,26,27,28,29, afbalanceret opdeling og transport14,30,31og vævslignende materialer17,23,32,33,34,35,36.
Størstedelen af de offentliggjorte forsøg med modelmembraner, herunder forsøg med DMB'er, er blevet udført ved stuetemperatur (RT, ~20-25 °C) og med en håndfuld syntetiske lipider (f.eks. DOPC, DPhPC osv.). Denne praksis begrænser omfanget af biofysiske spørgsmål, der kan studeres i modelmembraner, og baseret på observation kan den også begrænse de typer lipider, der kan bruges til at samle DIB'er. For eksempel samler en syntetisk lipid som DPPC, som har en smeltetemperatur på 42 °C, ikke tætpakkede monolag eller danner DIB'er ved RT37. DIB-dannelse ved stuetemperatur har også vist sig vanskelig for naturlige ekstrakter, såsom ekstrakter fra pattedyr (f.eks. hjernens samlede lipidekstrakt, BTLE)38 eller bakterier (f.eks. Escherichia coli total lipidekstrakt, ETLE)37, som indeholder mange forskellige typer lipider og stammer fra celler, der bor ved forhøjede temperaturer (37 °C). Aktivering af undersøgelse af forskellige sammensætninger giver således mulighed for at forstå membranmedierede processer under biologisk relevante forhold.
At hæve oliens temperatur kan tjene to formål: det øger monolayersamlingens kinetik, og det kan forårsage lipider at gennemgå en smeltende overgang for at nå en flydende uorganiseret fase. Begge konsekvenser støtte i monolayer samling39, en forudsætning for en DIB. Ud over opvarmning til bilayerdannelse kan afkøling af membranen efter dannelsen bruges til at identificere termotropiske overgange i enkelt lipid bilayers38, herunder dem i naturlige lipidblandinger (f.eks. BTLE), der kan være vanskelige at opdage ved hjælp af kalorimetri. Ud over at vurdere termotropiske overgange af lipider kan der anvendes præcist varierende DIB-temperatur til at studere temperaturinducerede ændringer i membranstrukturen38 og undersøge, hvordan lipidsammensætning og fluiditet påvirker kinetik hos membranaktive arter (f.eks. poredanne peptider og transmembranproteiner37), herunder pattedyrs- og bakteriemodelmembraner ved en fysiologisk relevant temperatur (37 °C).
Heri vil en beskrivelse af, hvordan man samler et modificeret DIB-oliereservoir og driver en feedback-temperaturregulator for at muliggøre monolayermontering og bilayerdannelse ved temperaturer højere end RT, forklares. Adskilt fra en tidligere protokol40er der medtaget eksplicitte detaljer om integration af instrumentering, der er nødvendig for måling og styring af temperatur parallelt med montering og karakterisering af DIB i oliereservoiret. Proceduren vil således gøre det muligt for en bruger at anvende denne metode til at danne og studere DIB'er på tværs af en række temperaturer i forskellige videnskabelige sammenhænge. Desuden giver de repræsentative resultater specifikke eksempler på de typer målbare ændringer i både membranstruktur og iontransport, der kan forekomme, efterhånden som temperaturen varieres. Disse teknikker er vigtige tilføjelser til de mange biofysiske undersøgelser, der kan designes og udføres effektivt i DIB'er, herunder undersøgelse af kinetik af membranaktive arter i forskellige membransammensætninger.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >25 mm x 40 mm x 1 mm insulative rubber (x2)</td>
			<td >Any</td>
			<td ></td>
			<td >Insulates the bottom of the aluminum fixture from the stage of the microscope</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >25 mm x 40 mm x 6 mm insulative rubber (x2)</td>
			<td >Any</td>
			<td ></td>
			<td >Protects heating elements from being damaged by the microscope stage clips and insulates the top of the heating elements.</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >3-(N-morpholino) propanesulfonic acid&#160;</td>
			<td >Sigma Aldrich</td>
			<td>M3183</td>
			<td >Buffering agent for lipid solution</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Acrylic substrate</td>
			<td >Fabricated in house</td>
			<td >HTD_STG_2</td>
			<td >~1000 uL acrylic well with a poka-yoke exterior profile to fix orientation</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Aluminum fixture</td>
			<td >Fabricated in house</td>
			<td >HTD_STG_1</td>
			<td >Base fixture with an oil well that holds the acylic fixture and includes two flat pads adjacent to the oil well for the heating elements&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Brain Total Lipid Extract</td>
			<td >Avanti</td>
			<td>131101C-100mg</td>
			<td >25 mg/mL porcine lipid extract&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Compact DAQ Chassis (cDAQ)</td>
			<td>National Instruments&#160;</td>
			<td>cDAQ-9174&#160;</td>
			<td >Chassis to house multiple types of sensor measurement or output modules</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Data Acquisition System (DAQ)</td>
			<td >Molecular Devices&#160;</td>
			<td>Digidata 1440A&#160;</td>
			<td >High resolution analog to digital converter</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fixed gain amplifier/power supply</td>
			<td >Hewlitt Packard</td>
			<td >HP 6826A</td>
			<td >Amplifies DC voltage output from the voltage output module</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Glass Cover Slip</td>
			<td >Corning</td>
			<td>CLS284525</td>
			<td >Seals bottom of aluminum base and allows for optical characterization of the bilayer</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Heating element (x2)</td>
			<td >Omega</td>
			<td >KHLV-101/5</td>
			<td >25 mm x 25 mm polymide film kapton heating element with a 5 watt power limit.&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >M3 Stainless Steel Screw</td>
			<td >McMaster Carr</td>
			<td >90116A150</td>
			<td >Secures thermocouple to aluminum fixture</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Patch clamp amplifier</td>
			<td >Molecular Devices&#160;</td>
			<td>AxoPatch 200B&#160;</td>
			<td >Measures current and outputs voltage to the headstage</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Personal computer</td>
			<td >Any</td>
			<td></td>
			<td >Computer with mulitiple high speed usb ports and a minimum of 6 Gb of ram</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Potassium Chloride</td>
			<td >Sigma Aldrich</td>
			<td>P3911</td>
			<td >Electrolyte solution of dissociated ions</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Temperature input module</td>
			<td >National Instruments&#160;</td>
			<td >NI 9211</td>
			<td >Enables open and cold junction thermocouple measurements for the cDAQ chassis</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Thermocouple</td>
			<td >Omega</td>
			<td>JMTSS-020U-6&#160;</td>
			<td >U-type thermocouple with a diameter of 0.02 inches and 6 inches in length</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >UV Curable Adhesive</td>
			<td >Loctite</td>
			<td>19739</td>
			<td >Secures glass coverslip to aluminum base fixture</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Voltage output module</td>
			<td >National Instruments&#160;</td>
			<td >NI 9263</td>
			<td >Analog voltage output module for use with the cDAQ chassis</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Waveform generator</td>
			<td >Agilent</td>
			<td>33210A&#160;</td>
			<td >Used to output a 10 mV 10 Hz sinusoidal waveform</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

temperature-controlled assembly and characterization of a droplet interface bilayer

Dråben interface bilayer (DIB) metode til samling af lipid bilayers (dvs. DIBs) mellem lipid-coated vandige dråber i olie giver vigtige fordele versus andre metoder: DIBs er stabile og ofte langvarige, bilayer område kan vendes, folder asymmetri er let kontrolleres via dråbe kompositioner, og væv-lignende netværk af bilayers kan opnås ved at vedlægge mange dråber. Dannelse af DIB'er kræver spontan samling af lipider i lipidmonomer med høj densitet på dråbernes overflader. Mens dette sker let ved stuetemperatur for fælles syntetiske lipider, en tilstrækkelig monolayer eller stabil bilayer undlader at danne på lignende betingelser for lipider med smeltepunkter over stuetemperatur, herunder nogle cellulære lipid ekstrakter. Denne adfærd har sandsynligvis begrænset sammensætningen - og måske den biologiske relevans - af DIB'er i modelmembranundersøgelser. For at løse dette problem præsenteres en eksperimentel protokol for omhyggeligt at opvarme oliereservoiret, der er vært for DIB-dråber og karakterisere virkningerne af temperatur på lipidmembranen. Specifikt viser denne protokol, hvordan man bruger en termisk ledende aluminiumsarmarmatur og resistive varmeelementer, der styres af en feedbacksløjfe til at ordinere forhøjede temperaturer, hvilket forbedrer monolayermontering og bilayerdannelse for et bredere sæt lipidtyper. Membranens strukturelle egenskaber samt lipidernes termotropiske faseovergange, der omfatter bilayeren, kvantificeres ved at måle ændringerne i DIB's elektriske kapacitance. Sammen kan denne procedure hjælpe med at evaluere biofysiske fænomener i modelmembraner over forskellige temperaturer, herunder bestemmelse af en effektiv smeltetemperatur (TM) for multikomponent lipidblandinger. Denne evne vil således give mulighed for tættere replikation af naturlige faseovergange i modelmembraner og tilskynde til dannelse og brug af modelmembraner fra et bredere skår af membranbestanddele, herunder dem, der bedre fanger heterogeniteten af deres cellulære modstykker.

Figur 1 viser, hvordan aluminiumsarmaturet og akryloliebeholderen fremstilles på mikroskopstadiet til DIB-dannelse. Montering trin 1.2-1.4 tjener til termisk at isolere armaturet fra scenen for mere effektiv opvarmning. Trin 1.5-1.7 viser, hvordan termoelementet fastgøres korrekt til armaturet, og placerer oliereservoiret, og trin 1.8 -1.9 viser anbefalede steder til udlevering af olie i disse stykker.
Figur 2 skitserer de komponent...

Watch this Scientific Journal Video about Temperature-Controlled Assembly and Characterization of a Droplet Interface Bilayer at JoVE.com

Temperature-Controlled Assembly and Characterization of a Droplet Interface Bilayer

Denne protokol beskriver brugen af et feedback temperaturstyret varmesystem til at fremme lipid monolayer samling og dråbe interface bilayer dannelse for lipider med forhøjede smeltetemperaturer, og kapacitance målinger til at karakterisere temperatur-drevet ændringer i membranen.

Temperaturstyret samling og karakterisering af en dråbe interface Bilayer

The droplet interface bilayer (DIB) method for assembling lipid bilayers (i.e., DIBs) between lipid-coated aqueous droplets in oil offers key benefits ...

Denne protokol gør det muligt for forskere præcist at opvarme en dråbegrænseflade bilayer, eller DIB, modelmembran, som giver mulighed for at studere en række temperaturrelaterede effekter, der opstår i cellulære miljøer. Den centrale fordel stammer fra evnen til lokalt at måle og kontrollere badetemperaturen i et lavvolumenreservoir uden at hindre adgangen til DIB's elektriske eller optiske karakteristik. Evnen til præcist at opvarme væskebadet åbner mulighed for at studere transport- og signalegenskaberne i DIB'er dannet af en meget bredere vifte af membranbestanddele, herunder naturlige cellulære ekstrakter.Dette er en flertrinsprotokol, der udnytter flere udstyr, der skal følges nøje for at opnå tilstrækkelig eksperimentel nøjagtighed, således at enhver tvetydighed i den skriftlige proces kan afklares via visuel demonstration. Til at begynde at samle to stykker af en millimeter tykt isolerende gummi trimmet til 25 af 40 millimeter i længden, to stykker af en seks millimeter tyk gummi, der også er 25 af 40 millimeter, en forberedt aluminium base armatur forsamling, og en akrylolie reservoir, der passer i visningsvinduet i aluminium base armatur. Placer tyndere gummistykker på scenen af mikroskopet, således at den lange kant af hvert stykke er tangential til scenen åbning.Placer aluminium base armatur på toppen af de isolerende puder med visning vinduet af armaturet centreret over den objektive linse. Placer et tykkere stykke gummi oven på hvert resistivt varmeelement, og brug derefter et mikroskopstadieklip til at holde det på plads for at beskytte varmeelementerne mod skader forårsaget af sceneklemmerne og for at isolere mod utilsigtet elektrisk shorting. Bøj forsigtigt måleenden af et termoelement for at opnå en 90-graders vinkel på omkring fire millimeter fra enden.Sæt termoelementets bøjede spids ind i nederste venstre hjørne af aluminiumsarmaturet, og fastgør den forsigtigt med en låseskrue. Placer akryl reservoir i brønden af aluminium armaturet før du tilføjer hexadecane olie til brønden af aluminium armaturet for at minimere risikoen for fældefangst luftbobler mellem visningsvinduet og bunden af akryl reservoir. Dispenser omkring 1.000 mikroliter af hexadecane olie i brønden af aluminium armaturet til at give et maksimalt overfladeareal for varmeoverførsel at forekomme, mens der ikke tillader olie til at spilde over kanterne af armaturet på mikroskop fase eller objektiv linse.Dispenser omkring 1.000 mikroliter af hexadecaneolie ind i akrylbeholderen uden at overfylde den. Mål membranens nominelle kapacitance, mens temperaturen i oliebadet sænkes fra et sætpunkt, der tillader bilayerdannelse at identificere termotropiske faseovergange af lipiderne i membranen. Højreklik på temperaturgrafen på den grafiske brugergrænseflade, og ryd visningsdataene for at sikre, at der er tilstrækkelig plads i bufferen til efterfølgende optagelser.Brug bølgeform generator forbundet til plasteret klemme forstærker, anvende en trekantet spænding bølgeform på tværs af dråbe interface bilayer, eller DIB, elektroder og registrere induceret strømrespons gennem bilayer. Bilayeren afkøles ved at reducere set-point-temperaturen i intervaller på fem grader og vente mindst fem minutter ved den nye steady-state temperatur mellem temperaturændringer, indtil den ønskede temperatur er opnået. Efter oliebadet og afkøling af bilayeren til den ønskede minimumstemperatur skal du højreklikke på temperaturgrafen i GUI igen og eksportere temperaturdata versus tid til et regnearkssoftware.Stop den aktuelle optagelse. Ud fra den målte strøm skal du beregne den nominelle kapacitance af kvadratbølgestrømmens respons i forhold til tiden i afkølingsperioden. Plot nominel kapacitance versus temperatur for at observere, hvordan membran kapacitance ændret, derefter finde ikke-monotoniske ændringer i kapacitance versus temperatur til at identificere smeltetemperatur.På samme måde skal du vurdere bilayerens kvasi statiske specifikke kapacitance ved faste temperaturer ved successivt at øge temperaturen i oliebadet og bilayerområdet. Skift set-point temperaturen i trin på 10 grader celsius ved hjælp af GUI og lad systemet udrede til den nye temperatur. Udfør tidligere beskrevne trin for at starte målingen af kapacitive strøm og optagelse.Skift bilayerområdet ved omhyggeligt at justere elektrodernes positioner ved hjælp af mikromanipulatorerne. Giv mulighed for, at den firkantede bølgestrøm når en stabil tilstands amplitude og indsamler billeder af DIB for at muliggøre beregning af membranområde versus tid. Brug et kamera monteret på mikroskopet for at billedet bilayer set fra blænden.Føj samtidig et digitalt mærke til den aktuelle optagelsessoftware for at markere det tilsvarende tidspunkt for billedsamling. Få i alt fem DIB-billeder og stabil tilstand regioner bilayer strøm, derefter nulstille temperaturen og gentag billedbehandling. Analyser de aktuelle optagelser og DIB-billeder på de mærkede tidspunkter, der svarer til stabil tilstand bilayer områder, udtrække bilayer kapacitance og areal for hver temperatur.Plot kapacitance versus område for hver temperatur og beregne hældningen af den første orden regression, som repræsenterer den specifikke kapacitance af bilayer ved hver temperatur. Derefter plot værdier af specifik kapacitance versus deres respektive temperaturer. Undersøg de specifikke kapacitance versus temperaturdata for ikke-monotoniske variationer for at identificere smeltetemperaturer.Vurder dynamikken i spændingsafhængig ionkanaldannelse ved at generere en DC-spændingstrinindgang på tværs af bilayeren. Indstil den indledende spænding til den ønskede trinværdi i millivolt og den endelige spænding og trinstørrelse til en værdi, der er højere end det ønskede trin. Angiv den ønskede varighedstid for trininputtet i sekunder, og vælg derefter den ønskede polaritet til trininputtet.Skift plasterklemmeforstærkeren for at sende kommandospændingen fra laboratorievisnings- eller spændingsudgangsmodulet til hovedstadiet, tænd spændingen og registrer den inducerede strømrespons, som skal hæmme en S-formet reaktion på en kritisk spænding. Opnå separat dynamiske strømspændingsforhold for en membran ved de ønskede temperaturer for at afsløre spændingsafhængige relationer såsom ionkanaladfærd. Skift plasterklemmeforstærkeren for at sende kommandospændingen fra bølgeformgeneratoren til hovedstadiet og starte aktuelle optagelser.På bølgeformgeneratoren skal du udsende en kontinuerlig sinusformet bølgeform med en ønsket amplitude, offset og frekvens. Registrer den inducerede aktuelle respons på tværs af en eller flere cyklusser, og gentag som ønsket for forskellige sinusbølgeforstærkninger, frekvenser og temperaturer. Temperaturstyringssystemet blev brugt til at fremvise temperaturafhængigheden af en DIB dannet af hjernens samlede lipidekstrakt, eller BTLE, lipider.Målinger af kapacitive strøm og temperatur versus tid vises under en opvarmningscyklus fra stuetemperatur til ca. 60 grader Celsius. Ændringer i nominel kapacitance versus temperatur på tværs af en komplet køling / opvarmning cyklus, efter indledende bilayer dannelse ved 60 grader Celsius, blev dokumenteret. Kvasi-statiske målinger af specifik kapacitance ved forskellige temperaturer kan bruges til at identificere lipid-smeltende temperatur.Plotning kapacitance af en bilayer versus bilayer område giver mulighed for en lineær regression, hvor hældningen repræsenterer værdien af specifikke kapacitance. DIB-billedet viser, at når temperaturen er under smeltetemperaturen, anvender membranen en meget klæbende tilstand, selv under spænding fra strakte dråber forårsaget af velseparerede elektroder. De viste strøm- versus spændingsspor blev opnået ved at anvende sinusformede membranspændinger, der måler den inducerede strøm ved to forskellige temperaturer.Pilene og de efterfølgende tal hjælper med at visualisere de efterfølgende kvartaler af sinusoidspændingen med hensyn til tid. Den målte strømtæthed for en monazomycin-dopet BTLE-membran ved samme spændingsniveau og to forskellige temperaturer er vist her. Det er afgørende at dispensere hexadecane olie i brønden af aluminium armatur korrekt.Hvis dette gøres ude af rækkefølge eller ikke omhyggeligt, vil luftbobler dannes under akrylbrønden, hvilket vil blokere bunden af DIB. Brugeren skal også huske at rydde databufferen i temperaturstyringssoftwaren før hver måling for at sikre fuld optagelse. Denne procedure giver mulighed for at karakterisere biomimetiske membraner på tværs af en række temperaturer, som er nødvendige for at studere temperaturafhængighed af membranstruktur og transport.Desuden kan denne evne bruges til at afsløre nanoskalaeffekter af andre membranaktive arter, såsom biologiske ionkanaler og manipulerede nanomaterialer.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Synthesis, Assembly, and Characterization of Monolayer Protected Gold Nanoparticle Films for Protein Monolayer Electrochemistry

Colloidal gold nanoparticles protected with alkanethiolate ligands called monolayer protected gold clusters (MPCs) are synthesized and subsequently ...

Lipid Bilayer Vesicle Generation Using Microfluidic Jetting

Lipiddobbeltlaget Vesikel Generation Brug Mikrofluid højtryksspuler

Bottom-up synthetic biology presents a novel approach for investigating and reconstituting biochemical systems and, potentially, minimal organisms. This ...

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer (SALB) Method

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer SALB Method

Biomembran Fabrication med opløsningsmidlet-assisteret lipiddobbeltlag (Salb) Metode

In order to mimic cell membranes, the supported lipid bilayer (SLB) is an attractive platform which enables in vitro investigation of membrane-related ...

Fluorescence Recovery after Merging a Droplet to Measure the Two-dimensional Diffusion of a Phospholipid Monolayer

Fluorescens Recovery efter Sammenlægning en Droplet at Mål Todimensional Diffusion af et Phospholipid Monolayer

We introduce a new method to measure the lateral diffusivity of a surfactant monolayer at the fluid-fluid interface, called fluorescence recovery after ...

Automated Lipid Bilayer Membrane Formation Using a Polydimethylsiloxane Thin Film

Automatiseret lipiddobbeltlagsmembranen Formation Ved hjælp af en Polydimethylsiloxan Thin Film

An artificial lipid bilayer, or black lipid membrane (BLM), is a powerful tool for studying ion channels and protein interactions, as well as for ...

Micropatterning and Assembly of 3D Microvessels

Micropatterning og Samling af 3D mikrokar

In vitro platforms to study endothelial cells and vascular biology are largely limited to 2D endothelial cell culture, flow chambers with polymer or glass ...

Ligand Nano-cluster Arrays in a Supported Lipid Bilayer

Ligand Nano-klynge Arrays i et understøttet lipid-dobbeltlag

Currently there is considerable interest in creating ordered arrays of adhesive protein islands in a sea of passivated surface for cell biological ...

Fabrication and Characterization of Optical Tissue Phantoms Containing Macrostructure

Fremstilling og karakterisering af optiske væv Phantoms indeholdende Macrostructure

The rapid development of new optical imaging techniques is dependent on the availability of low-cost, customizable, and easily reproducible standards. By ...

Detection of Endotoxin in Nano-formulations Using Limulus Amoebocyte Lysate (LAL) Assays

Detection of Endotoxin in Nano-formulations Using Limulus Amoebocyte Lysate LAL Assays

Påvisning af Endotoxin i Nano-formuleringer bruger Limulus Amoebocyte Lysate (LAL) Assays

When present in pharmaceutical products, a Gram-negative bacterial cell wall component endotoxin (often also called lipopolysaccharide) can cause ...

Assembly and Characterization of Biomolecular Memristors Consisting of Ion Channel-doped Lipid Membranes

Samling og karakterisering af Biomolekylær Memristors bestående af Ion-kanal-doped Lipid membraner

The ability to recreate synaptic functionalities in synthetic circuit elements is essential for neuromorphic computing systems that seek to emulate the ...