Name: temperature-controlled assembly and characterization of a droplet interface bilayer
Uploaded: 2021-04-19T14:00:00
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Il sostegno finanziario è stato fornito dalla National Science Foundation Grant CBET-1752197 e dall'Air Force Office of Scientific Research Grant FA9550-19-1-0213.

1. Preparazione dell'apparecchio riscaldato
<ol><li>Raccogliere 2 pezzi di gomma isolante spessa 1 mm tagliati a 25 mm x 40 mm di larghezza e lunghezza, rispettivamente, 2 pezzi di gomma spessa 6 mm che sono anche 25 mm x 40 mm, un gruppo di fissaggio di base in alluminio preparato e un serbatoio di olio acrilico che si adatta alla finestra di visualizzazione dell'apparecchio di base in alluminio (vedi figure S1, S2 e S3 per i dettagli sulla fabbricazione e una vista esplosa del gruppo). Preparare prim...

Il protocollo qui descritto fornisce istruzioni per assemblare e far funzionare un sistema sperimentale per controllare la temperatura dell'olio e delle goccioline utilizzate per formare DIB. È particolarmente utile per consentire la formazione di DIB utilizzando lipidi che hanno temperature di fusione superiori a RT. Inoltre, variando con precisione la temperatura del serbatoio dell'olio, la temperatura del bistrato può essere manipolata per studiare gli effetti di temperature elevate su varie proprietà e caratterist...

Le membrane cellulari sono barriere selettivamente permeabili composte da migliaia di tipi lipidici1,proteine, carboidrati e steroli che incapsulano e suddividono tutte le cellule viventi. Comprendere come le loro composizioni influenzano le loro funzioni e rivelare come le molecole naturali e sintetiche interagiscono, aderiscono, interrompono e traslocano le membrane cellulari sono, quindi, importanti aree di ricerca con implicazioni di vasta portata in biologia, medicina, chimica, fisica e ingegneria dei materiali.
Questi obiettivi di scoperta beneficiano direttamente di tecniche comprovate per assemblare, manipolare e studiare membrane modello , inclusi bistrati lipidici assemblati da lipidi sintetici o presenti in natura, che imitano la composizione, la struttura e le proprietà di trasporto delle loro controparti cellulari. Negli ultimi anni, il bistrato di interfaccia a goccia (DIB)metodo 2,3,4 per la costruzione di un bistrato lipidico planare tra goccioline d'acqua rivestite di lipidi nell'olio ha ricevutoun'attenzione significativa 5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23,e ha dimostrato vantaggi pratici rispetto ad altri approcci per la formazione della membrana modello: il metodo DIB è semplice da eseguire, non richiede una fabbricazione o una preparazione sofisticata (ad es. "pittura") di un substrato per sostenere la membrana, produce costantemente membrane con longevità, consente misurazioni elettrofisiologia standard e semplifica la formazione di membrane modello con composizioni asimmetriche di volantini3. Poiché il bistrato si forma spontaneamente tra goccioline e ogni goccia può essere su misura in posizione e trucco, la tecnica DIB ha anche attirato notevole interesse nello sviluppo di sistemi di materiali ispirati alle cellule che si basano sull'uso di membrane stimolanti-reattive18,24,25,26,27,28,29,compartimentazione e trasportobilanciati 14,30,31e materiali tissutali17,23,32,33,34,35,36.
La maggior parte degli esperimenti pubblicati sulle membrane modello, comprese quelle con DIB, sono stati eseguiti a temperatura ambiente (RT, ~ 20-25 ° C) e con una manciata di lipidi sintetici (ad esempio, DOPC, DPhPC, ecc.). Questa pratica limita la portata delle domande biofisiche che possono essere studiate nelle membrane modello e, in base all'osservazione, può anche limitare i tipi di lipidi che possono essere utilizzati per assemblare DIB. Ad esempio, un lipide sintetico come il DPPC, che ha una temperatura di fusione di 42 °C, non assembla monostrati ben imballati o forma DIB a RT37. La formazione di DIB a temperatura ambiente si è dimostrata difficile anche per gli estratti naturali, come quelli provenienti da mammiferi (ad esempio, estratto lipidico totale cerebrale, BTLE)38 o batteri (ad esempio, estratto lipidico totale di Escherichia coli, ETLE)37, che contengono molti tipi diversi di lipidi e provengono da cellule che risiedono a temperature elevate (37 °C). Consentire lo studio di diverse composizioni offre quindi l'opportunità di comprendere i processi mediati dalla membrana in condizioni biologicamente rilevanti.
Aumentare la temperatura dell'olio può servire a due scopi: aumenta la cinetica dell'assemblaggio monostrato e può causare ai lipidi di subire una transizione di fusione per raggiungere una fase disordinata liquida. Entrambe le conseguenze aiutanonell'assemblaggio monostrato 39, un prerequisito per un DIB. Oltre al riscaldamento per la formazione di due strato, il raffreddamento della membrana dopo la formazione può essere utilizzato per identificare le transizioni termotropiche in singoli bistrati lipidici38, compresi quelli in miscele lipidiche naturali (ad esempio, BTLE) che possono essere difficili da rilevare usando la calorimetria. Oltre a valutare le transizioni termotropiche dei lipidi, variare con precisione la temperatura del DIB può essere utilizzato per studiare i cambiamenti indotti dalla temperatura nella struttura della membrana38 ed esaminare in che modo la composizione lipidica e la fluidità influenzano la cinetica delle specie attive della membrana (ad esempio, peptidi che formano pori e proteine transmembrana37), comprese le membrane modello di mammiferi e batteriche a una temperatura fisiologicamente rilevante (37 °C).
Nel presente documento verrà spiegata una descrizione di come assemblare un serbatoio di olio DIB modificato e utilizzare un regolatore di temperatura di feedback per consentire l'assemblaggio monostrato e la formazione di due livelli a temperature superiori a RT. Distinto da un precedente protocollo40, è inclusoun dettaglio esplicito per quanto riguarda l'integrazione della strumentazione necessaria per misurare e controllare la temperatura in parallelo all'assemblaggio e alla caratterizzazione del DIB nel serbatoio dell'olio. La procedura consentirà quindi all'utente di applicare questo metodo per la formazione e lo studio dei DIB in una serie di temperature in una varietà di contesti scientifici. Inoltre, i risultati rappresentativi forniscono esempi specifici per i tipi di cambiamenti misurabili sia nella struttura della membrana che nel trasporto ionica che possono verificarsi man mano che la temperatura è varia. Queste tecniche sono importanti aggiunte ai numerosi studi biofisici che possono essere progettati ed eseguiti efficacemente nei DIB, incluso lo studio della cinetica delle specie attive a membrana in diverse composizioni di membrana.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >25 mm x 40 mm x 1 mm insulative rubber (x2)</td>
			<td >Any</td>
			<td ></td>
			<td >Insulates the bottom of the aluminum fixture from the stage of the microscope</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >25 mm x 40 mm x 6 mm insulative rubber (x2)</td>
			<td >Any</td>
			<td ></td>
			<td >Protects heating elements from being damaged by the microscope stage clips and insulates the top of the heating elements.</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >3-(N-morpholino) propanesulfonic acid&#160;</td>
			<td >Sigma Aldrich</td>
			<td>M3183</td>
			<td >Buffering agent for lipid solution</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Acrylic substrate</td>
			<td >Fabricated in house</td>
			<td >HTD_STG_2</td>
			<td >~1000 uL acrylic well with a poka-yoke exterior profile to fix orientation</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Aluminum fixture</td>
			<td >Fabricated in house</td>
			<td >HTD_STG_1</td>
			<td >Base fixture with an oil well that holds the acylic fixture and includes two flat pads adjacent to the oil well for the heating elements&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Brain Total Lipid Extract</td>
			<td >Avanti</td>
			<td>131101C-100mg</td>
			<td >25 mg/mL porcine lipid extract&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Compact DAQ Chassis (cDAQ)</td>
			<td>National Instruments&#160;</td>
			<td>cDAQ-9174&#160;</td>
			<td >Chassis to house multiple types of sensor measurement or output modules</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Data Acquisition System (DAQ)</td>
			<td >Molecular Devices&#160;</td>
			<td>Digidata 1440A&#160;</td>
			<td >High resolution analog to digital converter</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fixed gain amplifier/power supply</td>
			<td >Hewlitt Packard</td>
			<td >HP 6826A</td>
			<td >Amplifies DC voltage output from the voltage output module</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Glass Cover Slip</td>
			<td >Corning</td>
			<td>CLS284525</td>
			<td >Seals bottom of aluminum base and allows for optical characterization of the bilayer</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Heating element (x2)</td>
			<td >Omega</td>
			<td >KHLV-101/5</td>
			<td >25 mm x 25 mm polymide film kapton heating element with a 5 watt power limit.&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >M3 Stainless Steel Screw</td>
			<td >McMaster Carr</td>
			<td >90116A150</td>
			<td >Secures thermocouple to aluminum fixture</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Patch clamp amplifier</td>
			<td >Molecular Devices&#160;</td>
			<td>AxoPatch 200B&#160;</td>
			<td >Measures current and outputs voltage to the headstage</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Personal computer</td>
			<td >Any</td>
			<td></td>
			<td >Computer with mulitiple high speed usb ports and a minimum of 6 Gb of ram</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Potassium Chloride</td>
			<td >Sigma Aldrich</td>
			<td>P3911</td>
			<td >Electrolyte solution of dissociated ions</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Temperature input module</td>
			<td >National Instruments&#160;</td>
			<td >NI 9211</td>
			<td >Enables open and cold junction thermocouple measurements for the cDAQ chassis</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Thermocouple</td>
			<td >Omega</td>
			<td>JMTSS-020U-6&#160;</td>
			<td >U-type thermocouple with a diameter of 0.02 inches and 6 inches in length</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >UV Curable Adhesive</td>
			<td >Loctite</td>
			<td>19739</td>
			<td >Secures glass coverslip to aluminum base fixture</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Voltage output module</td>
			<td >National Instruments&#160;</td>
			<td >NI 9263</td>
			<td >Analog voltage output module for use with the cDAQ chassis</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Waveform generator</td>
			<td >Agilent</td>
			<td>33210A&#160;</td>
			<td >Used to output a 10 mV 10 Hz sinusoidal waveform</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

temperature-controlled assembly and characterization of a droplet interface bilayer

Il metodo di battiscopi di interfaccia a goccia (DIB) per assemblare bistrati lipidici (cioè DIB) tra goccioline acquose rivestite di lipidi nell'olio offre vantaggi chiave rispetto ad altri metodi: i DIB sono stabili e spesso di lunga durata, l'area bistrato può essere sintonizzata in modo reversibile, l'asimmetria del foglio illustrativo è prontamente controllata tramite composizioni di goccioline e reti tissutali di bistrati possono essere ottenute confinando con molte goccioline. La formazione di DIB richiede l'assemblaggio spontaneo di lipidi in monostrati lipidici ad alta densità sulle superfici delle goccioline. Mentre questo si verifica prontamente a temperatura ambiente per i comuni lipidi sintetici, un monostrato o un bistrato stabile sufficiente non riesce a formarsi in condizioni simili per i lipidi con punti di fusione sopra la temperatura ambiente, inclusi alcuni estratti lipidici cellulari. Questo comportamento ha probabilmente limitato le composizioni - e forse la rilevanza biologica - dei DIB negli studi di membrana modello. Per affrontare questo problema, viene presentato un protocollo sperimentale per riscaldare attentamente il serbatoio dell'olio che ospita goccioline DIB e caratterizzare gli effetti della temperatura sulla membrana lipidica. In particolare, questo protocollo mostra come utilizzare un apparecchio in alluminio termoduttivo e elementi riscaldanti resistivi controllati da un circuito di feedback per prescrivere temperature elevate, che migliora l'assemblaggio monostrato e la formazione di due livelli per un set più ampio di tipi di lipidi. Le caratteristiche strutturali della membrana, così come le transizioni di fase termotropiche dei lipidi che compongono il bistrato, sono quantificate misurando i cambiamenti nella capacità elettrica del DIB. Insieme, questa procedura può aiutare a valutare i fenomeni biofisici nelle membrane modello a varie temperature, compresa la determinazione di una temperatura di fusione efficace(TM)per miscele lipidiche multicomponente. Questa capacità consentirà quindi una più stretta replicazione delle transizioni di fase naturali nelle membrane modello e incoraggerà la formazione e l'uso di membrane modello da una fascia più ampia di costituenti della membrana, compresi quelli che catturano meglio l'eterogeneità delle loro controparti cellulari.

La figura 1 mostra come l'apparecchio in alluminio e il serbatoio dell'olio acrilico sono preparati sullo stadio del microscopio per la formazione di DIB. I passaggi di assemblaggio 1.2-1.4 servono a isolare termicamente l'apparecchio dal palco per un riscaldamento più efficiente. I passaggi 1.5-1.7 mostrano come collegare correttamente la termocopia all'apparecchio e posizionare il serbatoio dell'olio, e i passaggi 1.8 -1.9 mostrano le posizioni consigliate per l'erogazione dell'olio in qu...

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Temperature-Controlled Assembly and Characterization of a Droplet Interface Bilayer

Questo protocollo descrive in dettaglio l'uso di un sistema di riscaldamento a temperatura controllata a retroazione per promuovere l'assemblaggio monostrato lipidico e la formazione di bistrati di interfaccia a goccia per lipidi con temperature di fusione elevate e misurazioni della capacità per caratterizzare i cambiamenti guidati dalla temperatura nella membrana.

Assemblaggio a temperatura controllata e caratterizzazione di un bistrato di interfaccia a goccia

The droplet interface bilayer (DIB) method for assembling lipid bilayers (i.e., DIBs) between lipid-coated aqueous droplets in oil offers key benefits ...

Questo protocollo consente ai ricercatori di riscaldare con precisione un bistrato di interfaccia a goccia, o DIB, membrana modello, che consente di studiare una varietà di effetti legati alla temperatura che si verificano in ambienti cellulari. Il vantaggio principale deriva dalla capacità di misurare e controllare localmente la temperatura del bagno in un serbatoio a basso volume senza ostacolare l'accesso per le caratterizzazioni elettriche o ottiche del DIB. La capacità di riscaldare con precisione il bagno fluido sblocca la possibilità di studiare le proprietà di trasporto e segnalazione nei DIB formati da una varietà molto più ampia di costituenti della membrana, compresi gli estratti cellulari naturali.Si tratta di un protocollo in più fasi che sfrutta più apparecchiature che devono essere seguite da vicino per ottenere una sufficiente precisione sperimentale, quindi qualsiasi ambiguità nel processo scritto può essere chiarita tramite dimostrazione visiva. Per iniziare raccogliere due pezzi di gomma isolante spessa un millimetro tagliati a 25 per 40 millimetri di lunghezza, due pezzi di gomma spessa sei millimetri che sono anche 25 per 40 millimetri, un assemblaggio di fissaggio di base in alluminio preparato e un serbatoio di olio acrilico che si adatta alla finestra di visualizzazione dell'apparecchio di base in alluminio. Posizionare i pezzi di gomma più sottili sul palco del microscopio in modo che il bordo lungo di ogni pezzo sia tangenziale all'apertura del palco.Posizionare l'apparecchio di base in alluminio sopra i cuscinetti isolanti con la finestra di visualizzazione dell'apparecchio centrata sopra l'obiettivo. Posizionare un pezzo di gomma più spesso sopra ogni elemento riscaldante resistivo, quindi utilizzare una clip da palco del microscopio per tenerlo in posizione per proteggere gli elementi riscaldanti dai danni causati dalle clip del palco e isolare da cortocircuiti elettrici accidentali. Piegare con cura l'estremità di misura di una termocopia per ottenere un angolo di 90 gradi a circa quattro millimetri dall'estremità.Inserire la punta piegata della termocopia nell'angolo in basso a sinistra dell'apparecchio in alluminio e fissarla delicatamente con una vite di bloccaggio. Posizionare il serbatoio acrilico nel pozzo dell'apparecchio in alluminio prima di aggiungere olio di esadecano al pozzo dell'apparecchio in alluminio per ridurre al minimo il rischio di intrappolare bolle d'aria tra la finestra di visualizzazione e il fondo del serbatoio acrilico. Erogare circa 1.000 microlitri di olio di esadecano nel pozzo dell'apparecchio in alluminio per fornire una superficie massima per il trasferimento di calore, senza consentire all'olio di riversarsi sui bordi dell'apparecchio sullo stadio del microscopio o sulla lente oggettiva.Distribuire circa 1.000 microlitri di olio di esadecano nel serbatoio acrilico senza riempirlo esorcizzarlo. Misurare la capacità nominale della membrana abbassando la temperatura del bagno d'olio da un set point che consente la formazione di due livelli per identificare le transizioni di fase termotropiche dei lipidi nella membrana. Fare clic con il pulsante destro del mouse sul grafico della temperatura nell'interfaccia utente grafica e cancellare i dati di visualizzazione per assicurarsi che sia disponibile spazio sufficiente nel buffer per le registrazioni successive.Utilizzando il generatore di forme d'onda collegato all'amplificatore patch clamp, applicare una forma d'onda di tensione triangolare attraverso il bistrato di interfaccia a goccia, o DIB, e registrare la risposta di corrente indotta attraverso il bistrato. Raffreddare il bistrato riducendo la temperatura del set-point in incrementi di cinque gradi, aspettando un minimo di cinque minuti alla nuova temperatura stazionaria tra le variazioni di temperatura fino al conse raggiunto la temperatura desiderata. Dopo il bagno d'olio e il raffreddamento del bistrato alla temperatura minima desiderata, fare di nuovo clic con il pulsante destro del mouse sul grafico della temperatura nell'interfaccia utente grafica ed esportare i dati sulla temperatura rispetto al tempo in un software per fogli di calcolo.Interrompere la registrazione corrente. Dalla corrente misurata, calcolare la capacità nominale della risposta di corrente dell'onda quadra rispetto al tempo durante il periodo di raffreddamento. Tracciare la capacità nominale rispetto alla temperatura per osservare come è cambiata la capacità della membrana, quindi individuare i cambiamenti non monotoni nella capacità rispetto alla temperatura per identificare la temperatura di fusione.Analogamente, valutare la capacità quasi statica specifica del bistrato a temperature fisse incrementando successivamente la temperatura del bagno d'olio e dell'area bistrato. Modificare la temperatura del set-point in incrementi di 10 gradi Celsius utilizzando la GUI e consentire al sistema di equilibrare alla nuova temperatura. Eseguire i passaggi descritti in precedenza per avviare la misurazione della corrente capacitiva e della registrazione.Modificare l'area del bistrato regolando attentamente le posizioni degli elettrodi utilizzando i micro manipolatori. Consentire alla corrente dell'onda quadrata di raggiungere un'ampiezza dello stato stazionario e raccogliere immagini del DIB per consentire il calcolo dell'area della membrana rispetto al tempo. Utilizzare una fotocamera montata al microscopio per immagini il bistrato visto dall'apertura.Aggiungere contemporaneamente un tag digitale al software di registrazione corrente per contrassegnare il punto di tempo corrispondente per la raccolta delle immagini. Ottenere un totale di cinque immagini DIB e regioni stazionarie di corrente bistrato, quindi reimpostare la temperatura e ripetere l'imaging. Analizza le registrazioni correnti e le immagini DIB nei punti di tempo taggati corrispondenti alle aree bistrato a stato stazionario, estrai la capacità e l'area bistrato per ogni temperatura.Traccia la capacità rispetto all'area per ogni temperatura e calcola la pendenza della regressione del primo ordine, che rappresenta la capacità specifica del bistrato ad ogni temperatura. Quindi tracciare i valori di capacità specifica rispetto alle rispettive temperature. Esaminare i dati specifici sulla capacità rispetto alla temperatura per individuare le variazioni non monotone per identificare le temperature di fusione.Valutare la dinamica della formazione del canale ionio dipendente dalla tensione generando un ingresso del passo di tensione CC attraverso il bistrato. Impostare la tensione iniziale sul valore del passo desiderato in millivolt e la tensione finale e la dimensione del passo su un valore superiore al passo desiderato. Impostate un tempo di durata desiderato per l'input del passo in secondi, quindi scegliete la polarità desiderata per l'input del passo.Commutare l'amplificatore del morsetto patch per inviare la tensione di comando proveniente dalla vista di laboratorio o dal modulo di uscita di tensione allo stadio di testa, accendere la tensione e registrare la risposta di corrente indotta, che dovrebbe inibire una risposta a forma di S a una tensione critica. Ottenere separatamente relazioni di tensione di corrente dinamica per una membrana alle temperature desiderate per rivelare relazioni dipendenti dalla tensione come i comportamenti del canale ionica. Commutare l'amplificatore del morsetto patch per inviare la tensione di comando proveniente dal generatore di forme d'onda allo stadio di testa e avviare le registrazioni di corrente.Sul generatore di forme d'onda, emettere una forma d'onda sinusoidale continua con ampiezza, offset e frequenza desiderati. Registrare la risposta di corrente indotta in uno o più cicli e ripetere come desiderato per diverse ampiezze, frequenze e temperature dell'onda sine. Il sistema di controllo della temperatura è stato utilizzato per mostrare la dipendenza dalla temperatura di un DIB formato da estratto lipidico totale cerebrale, o BTLE, lipidi.Le misurazioni della corrente capacitiva e della temperatura rispetto al tempo vengono visualizzate durante un ciclo di riscaldamento dalla temperatura ambiente a circa 60 gradi Celsius. Sono state documentate le variazioni di capacità nominale rispetto alla temperatura in un ciclo completo di raffreddamento/riscaldamento, dopo la formazione iniziale di due strato a 60 gradi Celsius. Misurazioni quasi statiche di capacità specifica a diverse temperature possono essere utilizzate per identificare la temperatura di fusione lipidica.La capacità di plottaggio di un'area bistrato contro bistrato consente una regressione lineare, in cui la pendenza rappresenta il valore di capacità specifica. L'immagine DIB mostra che, quando la temperatura è inferiore alla temperatura di fusione, la membrana adotta uno stato altamente adesivo, anche sotto tensione da goccioline allungate causate da elettrodi ben separati. Le tracce di corrente rispetto alla tensione mostrate sono state ottenute applicando tensioni della membrana sinusoidale, misurando la corrente indotta a due temperature diverse.Le frecce e i numeri successivi aiutano a visualizzare i trimestri successivi della tensione sinusoidale rispetto al tempo. Qui viene mostrata la densità di corrente misurata per una membrana BTLE drogata da monazomicina allo stesso livello di tensione e due temperature diverse. È fondamentale erogare correttamente l'olio di esadecano nel pozzo dell'apparecchio in alluminio.Se questo viene fatto fuori sequenza o non con attenzione, le bolle d'aria si formeranno sotto il pozzo acrilico, che ostruirà la vista dal basso verso l'alto del DIB. L'utente deve anche ricordarsi di cancellare il buffer di dati nel software di controllo della temperatura prima di ogni misurazione per garantire la registrazione completa. Questa procedura consente di caratterizzare le membrane biomimetiche attraverso una gamma di temperature, necessaria per studiare la dipendenza dalla temperatura della struttura e del trasporto della membrana.Inoltre, questa capacità potrebbe essere utilizzata per rivelare effetti su scala nanometrica di altre specie attive su membrana, come i canali ionici biologici e i nanomateriali ingegnerizzati.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Synthesis, Assembly, and Characterization of Monolayer Protected Gold Nanoparticle Films for Protein Monolayer Electrochemistry

Sintesi, assemblaggio e caratterizzazione di film monostrato Protetta delle nanoparticelle d&#39;oro per Elettrochimica proteine ​​monostrato

Colloidal gold nanoparticles protected with alkanethiolate ligands called monolayer protected gold clusters (MPCs) are synthesized and subsequently ...

Ricerca

Bioingegneria

Lipid Bilayer Vesicle Generation Using Microfluidic Jetting

Doppio strato lipidico delle vescicole Generation Uso Microfluidic getto

Bottom-up synthetic biology presents a novel approach for investigating and reconstituting biochemical systems and, potentially, minimal organisms. This ...

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer (SALB) Method

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Biomembrane Fabrication dal solvente assistita doppio strato lipidico (SALB) Metodo

In order to mimic cell membranes, the supported lipid bilayer (SLB) is an attractive platform which enables in vitro investigation of membrane-related ...

Fluorescence Recovery after Merging a Droplet to Measure the Two-dimensional Diffusion of a Phospholipid Monolayer

Recupero della fluorescenza dopo Fusione di una Droplet misurare la diffusione bidimensionale di un fosfolipide monostrato

We introduce a new method to measure the lateral diffusivity of a surfactant monolayer at the fluid-fluid interface, called fluorescence recovery after ...

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Formazione automatizzato doppio strato lipidico della membrana Utilizzando un Polidimetilsilossano Thin Film

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Micropatterning and Assembly of 3D Microvessels

Micropatterning e montaggio dei microvasi 3D

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