Name: temperature-controlled assembly and characterization of a droplet interface bilayer
Uploaded: 2021-04-19T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Temperature-Controlled Assembly and Characterization of a Droplet Interface Bilayer at JoVE.com

Ekonomiskt stöd gavs av National Science Foundation Grant CBET-1752197 och Air Force Office of Scientific Research Grant FA9550-19-1-0213.

1. Uppvärmd fixturberedning
<ol><li>Samla 2 stycken 1 mm tjockt isolerande gummi trimmat till 25 mm x 40 mm i bredd respektive längd, 2 stycken av ett 6 mm tjockt gummi som också är 25 mm x 40 mm, en förberedd aluminiumbasfixturenhet och en akryloljebehållare som passar i visningsfönstret på aluminiumbasfixturen (se figurerna S1, S2 och S3 för detaljer om tillverkning och en exploderad monteringsvy). Förbered aluminiumfixturen först genom att fästa på botten av fixturen ett glaslocksvisnin...

Protokollet som beskrivs häri innehåller instruktioner för montering och drift av ett experimentellt system för att kontrollera temperaturen på den olja och droppar som används för att bilda DIB. Det är särskilt fördelaktigt för att möjliggöra DIB-bildning med lipider som har smälttemperaturer över RT. Dessutom, genom att exakt variera temperaturen på oljebehållaren, kan bilayer temperaturen manipuleras för att studera effekterna av förhöjda temperaturer på olika membran egenskaper och egenskaper, in...

Cellmembran är selektivt genomsläppliga barriärer bestående av tusentalslipidtyper 1, proteiner, kolhydrater och steroler som kapslar in och delar upp alla levande celler. Att förstå hur deras sammansättningar påverkar deras funktioner och avslöja hur naturliga och syntetiska molekyler interagerar med, följer, stör och flyttar cellmembran är därför viktiga forskningsområden med omfattande konsekvenser inom biologi, medicin, kemi, fysik och materialteknik.
Dessa mål för upptäckt drar direkt nytta av beprövade tekniker för montering, manipning och studier av modellmembran – inklusive lipid bilayers monterade från syntetiska eller naturligt förekommande lipider – som efterliknar sammansättningen, strukturen och transportegenskaperna hos deras cellulära motsvarigheter. Under de senaste åren har droppgränssnittet bilayer (DIB) metod2,3,4 för att konstruera en plana lipid bilayer mellan lipidbelagda vattendroppar i olja fått betydande uppmärksamhet5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17, 18,19,20,21,22,23, och har visat praktiska fördelar jämfört med andra metoder för modellmembranbildning: DIB-metoden är enkel att utföra, kräver ingen sofistikerad tillverkning eller beredning (t.ex. "målning") av ett substrat för att stödja membranet, ger konsekvent membran med överlägsen livslängd, möjliggör standardelektrofysiologiska mätningar och förenklar bildandet av modellmembran med asymmetriska broschyrkompositioner3. Eftersom bilayer bildas spontant mellan droppar och varje droppe kan skräddarsys i position och smink, DIB-tekniken har också lockat stort intresse för att utveckla cellinspirerade materialsystem som bygger på användningen av stimuli-responsivamembran 18,24,25,26,27,28,29,balanserad compartmentalization och transport14,30,31, och vävnadsliknande material17,23,32,33,34,35,36.
Majoriteten av publicerade experiment på modellmembran, inklusive de med DIB, har utförts vid rumstemperatur (RT, ~20-25 °C) och med en handfull syntetiska lipider (t.ex. DOPC, DPhPC, etc.). Denna praxis begränsar omfattningen av biofysiska frågor som kan studeras i modellmembran och, baserat på observation, kan det också begränsa de typer av lipider som kan användas för att montera DIB. Till exempel monterar en syntetisk lipid som DPPC, som har en smälttemperatur på 42 °C, inte tätt packade monoskikt eller bildar DIB vid RT37. DIB-formation vid rumstemperatur har också visat sig vara svårt för naturliga extrakt, såsom de från däggdjur (t.ex. hjärnans totala lipidextrakt, BTLE)38 eller bakterier (t.ex. Escherichia coli totalt lipidextrakt, ETLE)37, som innehåller många olika typer av lipider och kommer från celler som bor vid förhöjda temperaturer (37 °C). Att möjliggöra studier av olika kompositioner ger därmed möjligheter att förstå membranmedrerade processer under biologiskt relevanta förhållanden.
Att höja oljans temperatur kan tjäna två syften: det ökar kinetiken hos monolayerenheten och det kan orsaka att lipider genomgår en smältövergång för att nå en vätskestörningsfas. Båda konsekvenserna hjälper till i monolayerenheten39, en föres närvarande för en DIB. Förutom uppvärmning för bilayerbildning kan kylning av membranet efter bildandet användas för att identifiera termotropa övergångar i enkla lipid bilayers38, inklusive de i naturliga lipidblandningar (t.ex. BTLE) som kan vara svåra att upptäcka med hjälp av kalorimetri. Förutom att bedöma termotropa övergångar av lipider kan exakt varierande temperaturen på DIB användas för att studera temperaturinducerade förändringar imembranstrukturen 38 och undersöka hur lipidsammansättning och fluiditet påverkar kinetiken hos membranaktiva arter (t.ex. porbildande peptider och transmembranproteiner37), inklusive däggdjurs- och bakteriella modellmembran vid en fysiologiskt relevant temperatur (37 °C).
Häri kommer en beskrivning av hur man monterar en modifierad DIB-oljebehållare och använder en återkopplingstemperaturregulator för att möjliggöra monoskiktsmontering och bilayerbildning vid temperaturer högre än RT att förklaras. Särskiljande från ett tidigare protokoll40ingår uttryckliga detaljer om integration av instrumentering som behövs för att mäta och kontrollera temperaturen parallellt med montering och karakterisering av DIB i oljebehållaren. Förfarandet kommer således att göra det möjligt för en användare att tillämpa denna metod för att bilda och studera dib-ämnen över en rad olika temperaturer i olika vetenskapliga sammanhang. Dessutom ger de representativa resultaten specifika exempel på de typer av mätbara förändringar i både membranstruktur och jontransport som kan uppstå när temperaturen varierar. Dessa tekniker är viktiga tillägg till de många biofysiska studier som kan utformas och utföras effektivt i DIB, inklusive att studera kinetiken hos membranaktiva arter i olika membransammansättningar.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >25 mm x 40 mm x 1 mm insulative rubber (x2)</td>
			<td >Any</td>
			<td ></td>
			<td >Insulates the bottom of the aluminum fixture from the stage of the microscope</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >25 mm x 40 mm x 6 mm insulative rubber (x2)</td>
			<td >Any</td>
			<td ></td>
			<td >Protects heating elements from being damaged by the microscope stage clips and insulates the top of the heating elements.</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >3-(N-morpholino) propanesulfonic acid&#160;</td>
			<td >Sigma Aldrich</td>
			<td>M3183</td>
			<td >Buffering agent for lipid solution</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Acrylic substrate</td>
			<td >Fabricated in house</td>
			<td >HTD_STG_2</td>
			<td >~1000 uL acrylic well with a poka-yoke exterior profile to fix orientation</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Aluminum fixture</td>
			<td >Fabricated in house</td>
			<td >HTD_STG_1</td>
			<td >Base fixture with an oil well that holds the acylic fixture and includes two flat pads adjacent to the oil well for the heating elements&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Brain Total Lipid Extract</td>
			<td >Avanti</td>
			<td>131101C-100mg</td>
			<td >25 mg/mL porcine lipid extract&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Compact DAQ Chassis (cDAQ)</td>
			<td>National Instruments&#160;</td>
			<td>cDAQ-9174&#160;</td>
			<td >Chassis to house multiple types of sensor measurement or output modules</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Data Acquisition System (DAQ)</td>
			<td >Molecular Devices&#160;</td>
			<td>Digidata 1440A&#160;</td>
			<td >High resolution analog to digital converter</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fixed gain amplifier/power supply</td>
			<td >Hewlitt Packard</td>
			<td >HP 6826A</td>
			<td >Amplifies DC voltage output from the voltage output module</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Glass Cover Slip</td>
			<td >Corning</td>
			<td>CLS284525</td>
			<td >Seals bottom of aluminum base and allows for optical characterization of the bilayer</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Heating element (x2)</td>
			<td >Omega</td>
			<td >KHLV-101/5</td>
			<td >25 mm x 25 mm polymide film kapton heating element with a 5 watt power limit.&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >M3 Stainless Steel Screw</td>
			<td >McMaster Carr</td>
			<td >90116A150</td>
			<td >Secures thermocouple to aluminum fixture</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Patch clamp amplifier</td>
			<td >Molecular Devices&#160;</td>
			<td>AxoPatch 200B&#160;</td>
			<td >Measures current and outputs voltage to the headstage</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Personal computer</td>
			<td >Any</td>
			<td></td>
			<td >Computer with mulitiple high speed usb ports and a minimum of 6 Gb of ram</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Potassium Chloride</td>
			<td >Sigma Aldrich</td>
			<td>P3911</td>
			<td >Electrolyte solution of dissociated ions</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Temperature input module</td>
			<td >National Instruments&#160;</td>
			<td >NI 9211</td>
			<td >Enables open and cold junction thermocouple measurements for the cDAQ chassis</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Thermocouple</td>
			<td >Omega</td>
			<td>JMTSS-020U-6&#160;</td>
			<td >U-type thermocouple with a diameter of 0.02 inches and 6 inches in length</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >UV Curable Adhesive</td>
			<td >Loctite</td>
			<td>19739</td>
			<td >Secures glass coverslip to aluminum base fixture</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Voltage output module</td>
			<td >National Instruments&#160;</td>
			<td >NI 9263</td>
			<td >Analog voltage output module for use with the cDAQ chassis</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Waveform generator</td>
			<td >Agilent</td>
			<td>33210A&#160;</td>
			<td >Used to output a 10 mV 10 Hz sinusoidal waveform</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

temperature-controlled assembly and characterization of a droplet interface bilayer

Metoden droplet interface bilayer (DIB) för montering av lipid bilayers (dvs. DIBs) mellan lipidbelagda vattenhaltiga droppar i olja erbjuder viktiga fördelar jämfört med andra metoder: DIB är stabila och ofta långvariga, bilayerområdet kan justeras reversibelt, broschyrasymmetrin styrs lätt via droppkompositioner och vävnadsliknande nätverk av bilayers kan erhållas genom angränsande många droppar. Formning DIBs kräver spontan montering av lipider i lipidmonödlägg med hög densitet vid droppens ytor. Medan detta sker lätt vid rumstemperatur för vanliga syntetiska lipider, misslyckas en tillräcklig monolayer eller stabil bilayer att bildas vid liknande förhållanden för lipider med smältpunkter över rumstemperatur, inklusive vissa cellulära lipidextrakt. Detta beteende har sannolikt begränsat sammansättningen – och kanske den biologiska relevansen – av DIB i modellmembranstudier. För att ta itu med detta problem presenteras ett experimentellt protokoll för att noggrant värma oljereservoaren som är värd för DIB-droppar och karakterisera effekterna av temperaturen på lipidmembranet. Specifikt visar detta protokoll hur man använder en termiskt ledande aluminiumfixtur och resistiva värmeelement som styrs av en återkopplingsslinga för att förskriva förhöjda temperaturer, vilket förbättrar monoskiktsmontering och bilayerbildning för en bredare uppsättning lipidtyper. Membranets strukturella egenskaper, liksom termotropa fasövergångar hos lipider som består av bilayer, kvantifieras genom att mäta förändringarna i dib:s elektriska kapacitans. Tillsammans kan detta förfarande bidra till att utvärdera biofysiska fenomen i modellmembran över olika temperaturer, inklusive att bestämma en effektiv smälttemperatur(TM)för flerkomponents lipidblandningar. Denna förmåga kommer således att möjliggöra närmare replikering av naturliga fasövergångar i modellmembran och uppmuntra bildandet och användningen av modellmembran från en bredare mängd membranbeståndsdelar, inklusive de som bättre fångar heterogeniteten hos deras cellulära motsvarigheter.

Figur 1 visar hur aluminiumfixturen och akryloljebehållaren bereds på mikroskopstadiet för DIB-formation. Monteringsstegen 1.2-1.4 tjänar till att termiskt isolera fixturen från scenen för effektivare uppvärmning. Steg 1.5-1.7 visar hur termoelementet fästs korrekt på fixturen och placerar oljebehållaren, och steg 1.8 -1.9 visar rekommenderade platser för dispensering av olja i dessa bitar.
Figur 2 beskriver de komponenter ...

Watch this Scientific Journal Video about Temperature-Controlled Assembly and Characterization of a Droplet Interface Bilayer at JoVE.com

Temperature-Controlled Assembly and Characterization of a Droplet Interface Bilayer

Detta protokoll beskriver användningen av ett återkoppling temperaturstyrt värmesystem för att främja lipid monolayer montering och droppe gränssnitt bilayer bildas för lipider med förhöjda smälttemperaturer och kapacitans mätningar för att karakterisera temperaturdrivna förändringar i membranet.

Temperaturkontrollerad montering och karakterisering av ett droppgränssnitt Bilayer

The droplet interface bilayer (DIB) method for assembling lipid bilayers (i.e., DIBs) between lipid-coated aqueous droplets in oil offers key benefits ...

Detta protokoll gör det möjligt för forskare att exakt värma upp ett droppgränssnitt bilayer, eller DIB, modellmembran, vilket gör det möjligt att studera en mängd olika temperaturrelaterade effekter som uppstår i cellulära miljöer. Kärnfördelen härrör från förmågan att lokalt mäta och kontrollera badtemperaturen i en lågvolymreservoar utan att hindra åtkomsten för dib:s elektriska eller optiska karakteriseringar. Förmågan att exakt värma vätskebadet låser upp möjligheten att studera transport- och signalegenskaperna i DIB som bildas av ett mycket bredare utbud av membranbeståndsdelar, inklusive naturliga cellulära extrakt.Detta är ett flerstegsprotokoll som utnyttjar flera utrustningar som måste följas noggrant för att uppnå tillräcklig experimentell noggrannhet, så att eventuella tvetydigheter i den skriftliga processen kan klargöras genom visuell demonstration. För att börja samla två bitar av en millimeter tjockt isolerande gummi trimmat till 25 gånger 40 millimeter i längd, två bitar av ett sex millimeter tjockt gummi som också är 25 gånger 40 millimeter, en förberedd aluminiumbasfixturenhet och en akryloljebehållare som passar i visningsfönstret på aluminiumbasfixturen. Placera de tunnare gummibitarna på mikroskopets scen så att varje pjäss långkant tangentiell till scenöppningen.Placera aluminiumbasfixturen ovanpå de isolerande dynorna med fixturens visningsfönster centrerat ovanför objektivet. Placera en tjockare gummibit ovanpå varje resistivt värmeelement och använd sedan ett mikroskopstegsklämma för att hålla det på plats för att skydda värmeelementen från skador som orsakas av scenklämmorna och isolera mot oavsiktlig elektrisk kortslutning. Böj försiktigt mätänden på ett termoelement för att uppnå en 90-graders vinkel på cirka fyra millimeter från slutet.Sätt in termoelementens böjda spets i aluminiumfixturens nedre vänstra hörn och fäst den försiktigt med en låsskruv. Placera akrylbehållaren i aluminiumfixturens brunn innan du tillsätter hexadekanolja till aluminiumfixturens brunn för att minimera risken för att fånga luftbubblor mellan visningsfönstret och botten av akrylbehållaren. Dela ut cirka 1 000 mikroliter hexadekanolja i aluminiumfixturens brunn för att ge en maximal yta för värmeöverföring samtidigt som oljan inte kan spillas över fixturens kanter på mikroskopstadiet eller objektivlinsen.Dela ut ca 1 000 mikroliter hexadekanolja i akrylbehållaren utan att överfylla den. Mät membranets nominella kapacitans samtidigt som temperaturen på oljebadet sänks från en börvärde som gör det möjligt för bilayerbildning att identifiera termotropa fasövergångar för lipiderna i membranet. Högerklicka på temperaturdiagrammet på gui-fönstret och rensa visningsdata för att säkerställa att det finns tillräckligt med utrymme i bufferten för efterföljande inspelningar.Använd vågformsgeneratorn som är ansluten till patchklämmanförstärkaren, applicera en triangulär spänningsvågform över droppgränssnittet bilayer, eller DIB, elektroder och registrera det inducerade strömsvaret genom gallan. Kyl bilayer genom att minska börvärdets temperatur i fem graders steg och vänta minst fem minuter vid den nya steady-state temperaturen mellan temperaturförändringar tills önskad temperatur uppnås. När oljebadet har svalnat och kylt bilayern till önskad minimitemperatur högerklickar du på temperaturdiagrammet i GUI igen och exporterar temperaturdata kontra tid till ett kalkylbladsprogram.Stoppa den aktuella inspelningen. Från den uppmätta strömmen, beräkna den nominella kapacitansen för kvadratvågströmsresponsen kontra tiden under kylperioden. Rita nominell kapacitans kontra temperatur för att observera hur membran kapacitansen förändrades och lokalisera sedan icke-monotona förändringar i kapacitans kontra temperatur för att identifiera smälttemperaturen.På samma sätt, bedöma bilayerns kvasistatiska specifika kapacitans vid fasta temperaturer genom att successivt öka temperaturen på oljebadet och bilayerområdet. Ändra bördpunktstemperaturen i steg om 10 grader Celsius med hjälp av gui-systemet och låt systemet balansera till den nya temperaturen. Utför tidigare beskrivna steg för att initiera mätningen av kapacitiv ström och inspelning.Byt bilayerområdet genom att noggrant justera elektrodernas positioner med hjälp av mikromanipulatörerna. Låt den fyrkantiga vågströmmen nå en amplitud med fast tillstånd och samla in bilder av DIB för att möjliggöra beräkning av membranområde kontra tid. Använd en kamera monterad på mikroskopet för att avbilda bilayern sett från bländaren.Lägg samtidigt till en digital tagg i den aktuella inspelningsprogramvaran för att markera motsvarande tidpunkt för bildsamling. Få totalt fem DIB-bilder och steady-state-regioner med bilayerström, återställ sedan temperaturen och upprepa avbildningen. Analysera de aktuella inspelningarna och DIB-bilderna vid de taggade tidpunkterna som motsvarar steady state bilayer-områden, extrahera bilayer kapacitans och område för varje temperatur.Rita kapacitans kontra område för varje temperatur och beräkna lutningen på den första orderregressionen, vilket representerar bilayerns specifika kapacitans vid varje temperatur. Rita sedan värden för specifik kapacitans jämfört med deras respektive temperaturer. Undersök specifik kapacitans kontra temperaturdata för icke-monotona variationer för att identifiera smälttemperaturer.Utvärdera dynamiken i spänningsberoende jonkanalbildning genom att generera en dc-spänningsstegingång över bilayer. Ställ in initial spänning på önskat stegvärde i millivolt och den slutliga spänningen och stegstorleken till ett värde som är högre än önskat steg. Ställ in önskad varaktighetstid för stegingången i sekunder och välj sedan önskad polaritet för stegingången.Byt patchklämmaförstärkaren för att skicka kommandospänningen från labbvy eller spänningsutgångsmodul till huvudsteget, slå på spänningen och registrera det inducerade strömsvaret, vilket bör hämma ett S-format svar på en kritisk spänning. Erhåll separat dynamiska strömspänningsrelationer för ett membran vid önskade temperaturer för att avslöja spänningsberoende relationer som jonkanalbeteenden. Byt patchklämmaförstärkaren för att skicka kommandospänningen från vågformsgeneratorn till huvudsteget och initiera ströminspelningar.På vågformsgeneratorn, mata ut en kontinuerlig sinusformad vågform med önskad amplitud, förskjutning och frekvens. Registrera det inducerade aktuella svaret över en eller flera cykler och upprepa efter önskemål för olika sinusvågsamlituder, frekvenser och temperaturer. Temperaturkontrollsystemet användes för att visa upp temperaturberoendet av en DIB bildas från hjärnan totala lipid extrakt, eller BTLE, lipider.Mätningar av kapacitiv ström och temperatur kontra tid visas under en uppvärmningscykel från rumstemperatur till cirka 60 grader Celsius. Förändringar i nominell kapacitans kontra temperatur över en fullständig kylning /uppvärmning cykel, efter inledande bilayer bildandet vid 60 grader Celsius, dokumenterades. Kvasistatiska mätningar av specifik kapacitans vid olika temperaturer kan användas för att identifiera lipidsmältningstemperatur.Plotting kapacitans av en bilayer kontra bilayer område möjliggör en linjär regression, där lutningen representerar värdet av specifik kapacitans. DIB-bilden visar att när temperaturen är under smälttemperaturen antar membranet ett mycket självhäftande tillstånd, även under spänning från sträckta droppar orsakade av väl åtskilda elektroder. Ström kontra spänning spår som visas erhölls genom att tillämpa sinusoidal membran spänningar, mäta inducerad ström vid två olika temperaturer.Pilarna och efterföljande siffror hjälper till att visualisera de på varandra följande kvartalen av sinusformad spänning med avseende på tid. Den uppmätta strömtätheten för ett monazomycindidat BTLE-membran på samma spänningsnivå och två olika temperaturer visas här. Det är viktigt att dela ut hexadecaneoljan i aluminiumfixturens brunn korrekt.Om detta görs i fel ordning eller inte noggrant, kommer luftbubblor att bildas under akrylbrunnen, vilket kommer att hindra dib:s nedifrån och upp-vy. Användaren måste också komma ihåg att rensa databufferten i temperaturkontrollprogramvaran före varje mätning för att säkerställa fullständig registrering. Denna procedur gör det möjligt att karakterisera biomimetiska membran över en rad temperaturer, vilket behövs för att studera temperaturberoende av membranstruktur och transport.Dessutom skulle denna förmåga kunna användas för att avslöja nanoskala effekter av andra membranaktiva arter, såsom biologiska jonkanaler och konstruerade nanomaterial.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Synthesis, Assembly, and Characterization of Monolayer Protected Gold Nanoparticle Films for Protein Monolayer Electrochemistry

Syntes, församling, och karakterisering av monolager skyddade guld nanopartiklar Films för protein monolager Elektrokemi

Colloidal gold nanoparticles protected with alkanethiolate ligands called monolayer protected gold clusters (MPCs) are synthesized and subsequently ...

Lipid Bilayer Vesicle Generation Using Microfluidic Jetting

Lipiddubbelskiktet Blås Generation Använda Microfluidic Jetting

Bottom-up synthetic biology presents a novel approach for investigating and reconstituting biochemical systems and, potentially, minimal organisms. This ...

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer (SALB) Method

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer SALB Method

Biomembran Fabrication av lösningsmedel assisterad lipiddubbelskiktet (SALB) Metod

In order to mimic cell membranes, the supported lipid bilayer (SLB) is an attractive platform which enables in vitro investigation of membrane-related ...

Fluorescence Recovery after Merging a Droplet to Measure the Two-dimensional Diffusion of a Phospholipid Monolayer

Fluorescens Återhämtning efter Sammanfoga en droppe att mäta de tvådimensionella Spridning av en Phospholipid Mono

We introduce a new method to measure the lateral diffusivity of a surfactant monolayer at the fluid-fluid interface, called fluorescence recovery after ...

Automated Lipid Bilayer Membrane Formation Using a Polydimethylsiloxane Thin Film

Automatiserad lipidbiskiktmembranet bildning med användning av en Polydimetylsiloxan Thin Film

An artificial lipid bilayer, or black lipid membrane (BLM), is a powerful tool for studying ion channels and protein interactions, as well as for ...

Micropatterning and Assembly of 3D Microvessels

Micropatterning och montering av 3D mikrokärl

In vitro platforms to study endothelial cells and vascular biology are largely limited to 2D endothelial cell culture, flow chambers with polymer or glass ...

Ligand Nano-cluster Arrays in a Supported Lipid Bilayer

Ligand Nano-kluster arrayer i en stöds lipiddubbelskikt

Currently there is considerable interest in creating ordered arrays of adhesive protein islands in a sea of passivated surface for cell biological ...

Fabrication and Characterization of Optical Tissue Phantoms Containing Macrostructure

Tillverkning och karakterisering av optiska vävnad fantomer som innehåller Makrostrukturell

The rapid development of new optical imaging techniques is dependent on the availability of low-cost, customizable, and easily reproducible standards. By ...

Detection of Endotoxin in Nano-formulations Using Limulus Amoebocyte Lysate (LAL) Assays

Detection of Endotoxin in Nano-formulations Using Limulus Amoebocyte Lysate LAL Assays

Påvisande av Endotoxin i Nano-formuleringar använder Limulus immobiliserat Lysate (LAL) analyser

When present in pharmaceutical products, a Gram-negative bacterial cell wall component endotoxin (often also called lipopolysaccharide) can cause ...

Assembly and Characterization of Biomolecular Memristors Consisting of Ion Channel-doped Lipid Membranes

Montering och karakterisering av biomolekylär Memristors bestående av jonkanal-dopade Lipid membran

The ability to recreate synaptic functionalities in synthetic circuit elements is essential for neuromorphic computing systems that seek to emulate the ...