Name: precision cut lung slices as an efficient tool for ex vivo pulmonary vessel structure and contractility studies
Uploaded: 2021-05-24T13:00:00
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Die Autoren danken Dr. Yuan Hao und Dr. Kaifeng Liu für ihre technische Unterstützung. Diese Arbeit wurde durch ein NIH 1R01 HL150106-01A1, das Parker B. Francis Fellowship und den Aldrighetti Research Award der Pulmonary Hypertension Association an Dr. Ke Yuan unterstützt.

Die gesamte Tierpflege entsprach den Richtlinien des Boston Children's Hospital und den vom Institutional Animal Care and Use Committee genehmigten Protokollen. Die in dieser Studie verwendeten Mäuse sind Wildtyp C57/B6 Mäuse und Cdh5-CreERT2 x Ai14 tdTomato gekreuzte Mäuse.
1. Herstellung von Lösungen
<ol><li>Bereiten Sie die während des Experiments erforderliche Phosphatpufferlösung (1x PBS) und 2% ige Agaroselösung im Voraus vor.<ol>
<li>Mischen Sie 2 g Agarosepulver in 100 ml auto...

<ol>
	<li>Sparrow, D., Weiss, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Respiratory+physiology.">Respiratory physiology.</a> Annual Review of Gerontology &amp; Geriatrics. 6, 197-214 (1986).</li><li>Gerckens, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+human+3D+lung+tissue+cultures+(3D-LTCs)+for+disease+modeling.">Generation of human 3D lung tissue cultures (3D-LTCs) for disease modeling.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. 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Lung Cellular and Molecular Physiology. 295 (5), 727-732 (2008).</li><li>Gonzalez-Tajuelo, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+pulmonary+hypertension+associated+with+systemic+sclerosis+in+P-selectin+glycoprotein+Ligand+1-deficient+mice.">Spontaneous pulmonary hypertension associated with systemic sclerosis in P-selectin glycoprotein Ligand 1-deficient mice.</a> Arthritis &amp; Rheumatology. 72 (3), 477-487 (2020).</li><li>Bai, Y., Sanderson, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+the+Ca2++sensitivity+of+airway+smooth+muscle+cells+in+murine+lung+slices.">Modulation of the Ca2+ sensitivity of airway smooth muscle cells in murine lung slices.</a> American Journal of Physiology. 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W., Imig, J. D., Cook, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Afferent+and+efferent+arteriolar+vasoconstriction+to+angiotensin+II+and+norepinephrine+involves+release+of+Ca2++from+intracellular+stores.">Afferent and efferent arteriolar vasoconstriction to angiotensin II and norepinephrine involves release of Ca2+ from intracellular stores.</a> Hypertension. 29, 222-227 (1997).</li><li>Vecchione, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+from+angiotensin+II-mediated+vasculotoxic+and+hypertensive+response+in+mice+lacking+PI3Kgamma.">Protection from angiotensin II-mediated vasculotoxic and hypertensive response in mice lacking PI3Kgamma.</a> The Journal of Experimental Medicine. 201 (8), 1217-1228 (2005).</li></ol>

In diesem Manuskript wird eine verbesserte Methode zur Herstellung hochauflösender Bilder von murinem Lungengewebe beschrieben, die die Gefäßstruktur bewahrt und die experimentelle Flexibilität optimiert, insbesondere unter Verwendung der Anwendung von PCLS, um Mikroläuse aus Lungengewebe zu erhalten, die dreidimensional mit erhaltener Kontraktilität des Gefäßsystems betrachtet werden können. Unter Verwendung des Lebensfähigkeitsreagenzes zeigt das Protokoll, dass sorgfältig vorbereitete und konservierte Schei...

Fortschritte in der Präparation und Bildgebung von Lungengewebe, das zelluläre Komponenten bewahrt, ohne die anatomische Struktur zu beeinträchtigen, liefern ein detailliertes Verständnis von Lungenerkrankungen. Die Fähigkeit, Proteine, RNA und andere biologische Verbindungen unter Beibehaltung der physiologischen Struktur zu identifizieren, bietet wichtige Informationen über die räumliche Anordnung von Zellen, die das Verständnis der Pathophysiologie bei zahlreichen Lungenerkrankungen erweitern können. Diese detaillierten Bilder können zu einem besseren Verständnis von pulmonalen Gefäßerkrankungen wie der pulmonalen Arterienhypertonie führen, wenn sie auf Tiermodelle angewendet werden, was möglicherweise zu verbesserten therapeutischen Strategien führt.
Trotz technologischer Fortschritte bleibt es eine Herausforderung, qualitativ hochwertige Bilder von murinem Lungengewebe zu erhalten. Der Atemzyklus wird durch einen negativen intrathorakalen Druck angetrieben, der während der Inhalation erzeugt wird1. Bei der traditionellen Gewinnung von Biopsien und der Vorbereitung von Lungenproben für die Bildgebung geht der Unterdruckgradient verloren, was zum Kollaps der Atemwege und des Gefäßsystems führt, das sich nicht mehr in seinem gegenwärtigen Zustand darstellt. Um realistische Bilder zu erhalten, die die aktuellen Bedingungen widerspiegeln, müssen die Lungenatemwege wieder aufgepumpt und das Gefäßsystem perfundiert werden, wodurch die dynamische Lunge in eine statische Vorrichtung umgewandelt wird. Die Anwendung dieser unterschiedlichen Techniken ermöglicht die Erhaltung der strukturellen Integrität, des Lungengefäßsystems und der zellulären Komponenten, einschließlich Immunzellen wie Makrophagen, so dass das Lungengewebe so nah wie möglich an seinem physiologischen Zustand betrachtet werden kann.
Precision Cut Lung Slicing (PCLS) ist ein ideales Werkzeug zur Untersuchung der Anatomie und Physiologie des Lungengefäßsystems2. PCLS ermöglicht eine detaillierte Bildgebung des Lungengewebes in drei Dimensionen unter Beibehaltung struktureller und zellulärer Komponenten. PCLS wurde in Tier- und Humanmodellen verwendet, um hochauflösende Live-Bilder von Zellfunktionen in drei Dimensionen zu ermöglichen, was es zu einem idealen Werkzeug macht, um potenzielle therapeutische Ziele zu untersuchen, kleine Atemwegskontraktionen zu messen und die Pathophysiologie chronischer Lungenerkrankungen wie COPD, ILD und Lungenkrebs zu untersuchen3. Mit ähnlichen Techniken kann die Exposition von PCLS-Proben gegenüber Vasokonstriktoren die Lungenstruktur und die Gefäßkontraktilität erhalten und In-vitro-Bedingungen replizieren. Neben der Erhaltung der Kontraktilität können vorbereitete Proben bei korrekter Vorbereitung zusätzlichen Analysen wie RNA-Sequenzierung, Western Blot und Durchflusszytometrie unterzogen werden. Schließlich können reporterfarben markierte Zellen, die nach der Lungenernte mit tdTomato-Fluoreszenz markiert sind, die Markierung nach der Herstellung von Mikroläusen beibehalten, was sie ideal für Zell-Tracking-Studien macht. Die Integration dieser Techniken liefert ein ausgeklügeltes Modell, das die räumliche Anordnung von Zellen und Gefäßkontraktilität bewahrt und zu einem detaillierteren Verständnis der Signalkaskaden und möglichen therapeutischen Optionen bei pulmonalen Gefäßerkrankungen führen kann.
In diesem Manuskript wird PCLS murines Lungengewebe Vasokonstriktoren ausgesetzt, was eine erhaltene strukturelle Integrität und Gefäßkontraktilität zeigt. Die Studie zeigt, dass das entsprechend zubereitete und behandelte Gewebe 10 Tage lang lebensfähig bleiben kann. Die Studie zeigt auch die Erhaltung von Zellen mit endogener Fluoreszenz (tdTomato), so dass Proben hochauflösende Bilder des Lungengefäßsystems und der Architektur liefern können. Schließlich wurden Möglichkeiten zur Handhabung und Vorbereitung von Gewebeschnitten für die RNA-Messung und Western Blot zur Untersuchung der zugrunde liegenden Mechanismen beschrieben.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.5cc of fractionated heparin in syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>100 USP units per mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1X PBS</td>
			<td>Corning</td>
			<td>&#160;21-040-CM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 1/2 inch gauge blunt end needle for trachea cannulation</td>
			<td>Cml Supply</td>
			<td>90120050D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30cc syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Anti solution</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15240096</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated vibrating blade microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>VT1200S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Viability Reagent (alamarBlue)</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>DAL1025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>880</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle Medium and GLutaMAX, supplemented with 10% FBS, 1% Pen/Strep</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10569-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endothelin-1</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E7764</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>7447-40-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mortar and Pestle</td>
			<td>Amazon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RIPA lysis and extraction buffer</td>
			<td>Thermoscientific</td>
			<td>89900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical suture 6/0</td>
			<td>FST</td>
			<td>18020-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRIzol Reagent</td>
			<td>Invitrogen, Thermofisher</td>
			<td>15596026</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UltraPure Low Melting Point Agarose</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>16520050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vibratome</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>VT1200 S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Winged blood collection set (Butterfly needle) 25-30G</td>
			<td>BD</td>
			<td>25-30G</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

precision cut lung slices as an efficient tool for ex vivo pulmonary vessel structure and contractility studies

Die Visualisierung des murinen Lungengewebes liefert wertvolle strukturelle und zelluläre Informationen über die darunter liegenden Atemwege und das Gefäßsystem. Die Erhaltung der Lungengefäße, die wirklich physiologische Bedingungen darstellt, stellt jedoch immer noch Herausforderungen dar. Darüber hinaus führt die empfindliche Konfiguration der murinen Lunge zu technischen Herausforderungen bei der Vorbereitung von Proben für qualitativ hochwertige Bilder, die sowohl die zelluläre Zusammensetzung als auch die Architektur bewahren. In ähnlicher Weise können zelluläre Kontraktilitätsassays durchgeführt werden, um das Potenzial von Zellen zu untersuchen, auf Vasokonstriktoren in vitrozu reagieren, aber diese Assays reproduzieren nicht die komplexe Umgebung der intakten Lunge. Im Gegensatz zu diesen technischen Fragestellungen kann die Precision-Cut Lung Slice (PCLS)-Methode als effiziente Alternative zur dreidimensionalen Visualisierung von Lungengewebe in drei Dimensionen ohne regionale Verzerrung eingesetzt werden und als Live-Surrogat-Kontraktilitätsmodell für bis zu 10 Tage dienen. Gewebe, das mit PCLS hergestellt wurde, hat Struktur und räumliche Orientierung bewahrt, was es ideal macht, um Krankheitsprozesse ex vivo zu untersuchen. Die Position von endogenen tdTomato-markierten Zellen in PCLS, die aus einem induzierbaren tdTomato-Reporter-Murinenmodell gewonnen wurden, kann durch konfokale Mikroskopie erfolgreich visualisiert werden. Nach der Exposition gegenüber Vasokonstriktoren zeigt PCLS die Erhaltung sowohl der Gefäßkontraktilität als auch der Lungenstruktur, die durch ein Zeitraffermodul erfasst werden kann. In Kombination mit den anderen Verfahren, wie der Western-Blot- und RNA-Analyse, kann PCLS zum umfassenden Verständnis von Signalkaskaden beitragen, die einer Vielzahl von Erkrankungen zugrunde liegen und zu einem besseren Verständnis der Pathophysiologie bei pulmonalen Gefäßerkrankungen führen.

Wenn es zu Zellen oder Gewebe hinzugefügt wird, wird das Lebensfähigkeitsreagenz durch die reduzierende Umgebung von lebensfähigem Gewebe modifiziert und färbt sich rosa / rot, wodurch es stark fluoreszierend wird. Die repräsentativen Farbveränderungen, die ab Tag 0-1 und Tag 9-10 festgestellt wurden, sind in Abbildung 3 dargestellt. Wie bereits erwähnt, begann die Lösung blau und wurde über Nacht rosa, was die Lebensfähigkeit demonstrierte. Farbänderungen treten typischerweise in...

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Precision Cut Lung Slices as an Efficient Tool for Ex vivo Pulmonary Vessel Structure and Contractility Studies

Hier wird ein Protokoll zur Erhaltung der vaskulären Kontraktilität von PCLS-murinem Lungengewebe vorgestellt, was zu einem anspruchsvollen dreidimensionalen Bild des Lungengefäßsystems und der Atemwege führt, das bis zu 10 Tage konserviert werden kann und für zahlreiche Verfahren anfällig ist.

Präzisionsschnitt-Lungenschnitte als effizientes Werkzeug für Ex-vivo-Studien zur Struktur und Kontraktilität von Lungengefäßen

The visualization of murine lung tissue provides valuable structural and cellular information regarding the underlying airway and vasculature. However, ...

Die Methode der präzisionsgeschnittenen Lungenschnitte bewahrt die Struktur und die räumlichen Orientierungen in drei Dimensionen ohne regionale Verzerrung und kann als Live-Surrogatmodell für Gefäß- und Atemwegskontraktilitätsmessungen dienen. In Kombination mit Zeitraffer-Bildgebung, Western Blot und RNA-Analyse tragen präzisionsgeschnittene Lungenschnitte zum umfassenden Verständnis von Signalkaskaden bei, die einer Vielzahl von Erkrankungen zugrunde liegen und zu einem besseren Verständnis der Pathophysiologie bei pulmonalen Gefäßerkrankungen führen. Legen Sie zunächst die eingeschläferte erwachsene Maus in Rückenlage und befestigen Sie sie, indem Sie die Pfoten und die Nase mit Klebeband an den Tisch kleben.Besprühen Sie die ventrale Oberfläche der Maus mit 70% Ethanol. Verwenden Sie eine Pinzette, um die Bauchhaut der Maus an der Stelle der Blase anzuheben, und eine chirurgische Schere, um an der Mittellinie zu schneiden und sich überlegen zur Zervixregion zu bewegen, um die Luftröhre freizulegen. Verwenden Sie dann eine Pinzette, um die darunter liegende Faszienschicht anzuheben, und verwenden Sie eine chirurgische Schere, um die viszeralen Organe und das mediastinale Kompartiment freizulegen, die wiederum minderwertig als überlegen schneiden.Schneiden Sie das Brustbein an der Mittellinie ab, um Herz und Lunge freizulegen. Sezieren Sie das Zwerchfell vorsichtig von der Leber und dem Bauchkompartiment. Lokalisieren Sie die untere Hohlvene unter dem Darm und schneiden Sie sie.Nachdem Sie den rechten Ventrikel lokalisiert haben, verwenden Sie eine 25 bis 30 Gauge Schmetterlingsnadel, um 0,5 Milliliter 1% fraktioniertes Heparin in den rechten Ventrikel zu injizieren und ihn langsam aber stetig mit 10 bis 15 Millimeter PBS zu spülen. Nachdem Sie den Kehlkopf lokalisiert haben, verwenden Sie eine stumpfe Spitzenpinzette, um die umgebende Faszie und das Gewebe zu sezieren, legen Sie dann die chirurgische Naht unter die Luftröhre und binden Sie locker einen chirurgischen Knoten. Legen Sie ein kleines Loch in die Luftröhre, das der Schnur überlegen ist, und kanülieren Sie mit einer 20-Gauge-Stumpfnadel.Ziehen Sie die Naht um die Nadel und die Luftröhre mit einem chirurgischen Knoten fest. Dann injizieren Sie 2,5 bis 4 Milliliter Agarose in die Luftröhre und überwachen Sie die Inflation der Lunge. Nach der Agarose-Injektion kaltes PBS über die Lunge gießen, um die Agarose zu verfestigen.Schneiden Sie dann die Luftröhre der chirurgischen Naht überlegen und sezieren Sie die Lunge und das Herz vom Mediastinum, indem Sie Alle Adhäsionen und Faszien entfernen. Legen Sie das Gewebe nach der Erstarrung in DMEM in eine Petrischale auf Eis und schneiden Sie sofort einen Lappen mit einer Vibratommaschine auf. Um die Lungenscheiben vorzubereiten, befestigen Sie die Probe mit Sekundenkleber an der Plattform, wobei die mediale Seite nach oben gerichtet bleibt.Füllen Sie dann den Probenbehälter mit PBS. Füllen Sie den Behälter mit Eis, um das umgebende PBS und die Probe kalt zu halten. Schalten Sie das Vibratom ein.Stellen Sie die Dicke auf 300 Mikrometer, die Frequenz auf 100 Hertz, die Amplitude auf 0,6 Millimeter und die Geschwindigkeit auf fünf Mikrometer pro Sekunde ein. Drehen Sie den Klingenhalter mit einem Inbusschlüssel in die sichere Position und öffnen Sie die Backen, um eine Klinge einzuführen. Ziehen Sie dann die Kiefer mit einem Inbusschlüssel fest.Legen Sie die Probe auf die Box und stellen Sie sicher, dass sie in PBS eingetaucht ist. Schieben Sie die Box in die richtige Position und stellen Sie sicher, dass sie sicher ist. Drehen Sie den Klingenhalter in die richtige Position zum Schneiden.Bringen Sie die Vibrationsklinge an den Rand des Blocks und senken Sie die Klinge manuell ab, bis sie sich mit der Oberseite der Probe befindet. Bestätigen Sie die Einstellungen und führen Sie das Vibratom aus. Nachdem die frischen Scheiben geschnitten wurden, entfernen Sie die Proben aus dem PBS und legen Sie sie in eine sterile Petrischale mit 10 Millilitern DMEM, die ein einmaliges antimykotisches Antibiotikum enthalten.Nachdem Sie alle Scheiben in eine Petrischale gelegt haben, ziehen Sie die Klinge vollständig ein und verwenden Sie den Inbusschlüssel, um die Klinge in eine sichere Position zu bringen. Lagern Sie die Proben in DMEM bei 37 Grad Celsius. Und legen Sie eine Vibratomscheibe auf einen Objektträger.Verwenden Sie ein Reinigungstuch, um überschüssiges Medium zu entfernen. Legen Sie die Probe auf die Phasenkontrastmikroskopie und verwenden Sie eine 10- bis 20-fache Vergrößerung, um ein Gefäß zu identifizieren. Dann fügen Sie 500 Mikroliter Vasokonstriktoren hinzu, wie 60 Millimolar Kaliumchlorid oder ein mikromolares Endothelin-1, um den Objektträger vollständig zu untertauchen.Beobachten und erfassen Sie das Video, indem Sie es 30 bis 60 Sekunden lang aufnehmen. Bevor Sie mit dem Experiment beginnen, füllen Sie eine kleine Polystyrolschaumbox mit einem Liter flüssigem Stickstoff und legen Sie zwei 1,5-Milliliter-Mikrozentrifugenröhrchen in den Behälter mit flüssigem Stickstoff. Vier bis fünf frische Vibratomscheiben in eine Mörtelschüssel geben.Gießen Sie 5 bis 10 Milliliter flüssigen Stickstoff auf die Scheiben und verwenden Sie den Stößel schnell, um die Scheiben zu Pulver zu mahlen, bevor der flüssige Stickstoff verdampft. Verwenden Sie einen vorgekühlten Stahl-Laborschaufel, um das Pulver in die beiden gekühlten Mikrozentrifugenröhrchen zu schöpfen und das Pulver zu lysieren, indem Sie 500 Mikroliter RNA-Extraktionsreagenz für die RNA-Isolierung oder 500 Mikroliter RIPA-Puffer für die Proteinlyse hinzufügen. Im repräsentativen Lebensfähigkeitsexperiment wurde die Farbänderung der PCLS-Scheiben von Tag Null auf Eins und Tag neun auf 10 nachgewiesen.Die Lösung war zunächst blau und wurde über Nacht rosa, was die Lebensfähigkeit demonstrierte. Farbwechsel traten typischerweise innerhalb von ein bis vier Stunden auf, aber eine längere Zeit kann notwendig sein. Der tägliche Unterschied zwischen der Absorption bei 562 und 613 Nanometer Wellenlängen für das vibratomvorbereitete Gewebe wird hier gezeigt.Die Verengung des Gefäßsystems in einem vibromvorbereiteten Lungengewebe mit Endothelin-1 und Kaliumchlorid kann hier visualisiert werden. Die Konservierung der tdTomato-Markierung in Zellen eine Woche nach der Tamoxifen-Injektion wird in diesen Lungenschnitten demonstriert. Es ist am wichtigsten, den Lungenreinigungs- und Aufblasschritt gut durchzuführen, um das gesamte Blut vor zusätzlichen Experimenten und Bildgebung aus dem Kreislauf zu entfernen.Zusätzlich zu Gefäßerkrankungen kann PCLS angewendet werden, um die Physiobiologie von Atemwegserkrankungen zu untersuchen, und kann in klinisch relevanten Szenarien an menschlichem Lungengewebe weiter getestet werden.

Research

JoVE Journal

Medicine

Precision Cut Lung Slices as an Efficient Tool for Ex vivo Pulmonary Vessel Structure and Contractility Studies

Videomorphometric Analysis of Hypoxic Pulmonary Vasoconstriction of Intra-pulmonary Arteries Using Murine Precision Cut Lung Slices

Videomorphometrische Analyse der hypoxischen Lungenvasokonstriktion der intrapulmonalen Arterien mit Murine Precision Cut Lung Slices

Acute alveolar hypoxia causes pulmonary vasoconstriction (HPV) - also known as von Euler-Liljestrand mechanism - which serves to match lung perfusion to ...

Forschung

Medizin

Fundus Photography as a Convenient Tool to Study Microvascular Responses to Cardiovascular Disease Risk Factors in Epidemiological Studies

Fundusfotografie als geeignetes Mittel, um mikrovaskuläre Antworten zu Herz-Kreislauf-Erkrankungen Risikofaktoren in epidemiologischen Studien Studieren

The microcirculation consists of blood vessels with diameters less than 150 &#181;m. It makes up a large part of the circulatory system and plays an ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Methode Isolated<em&gt; Ex vivo</em&gt; Lung Perfusion in einem Rattenmodell: Lehren aus Entwicklung einer Ratte EVLP Programm gelernt

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Ex vivo Live Imaging of Lung Metastasis and Their Microenvironment

Ex vivo Live Imaging of Lung Metastasis and Their Microenvironment

Ex-vivo-Live-Imaging von Lungenmetastasen und deren Mikromilieu

Metastasis is a major cause for cancer-related morbidity and mortality. Metastasis is a multistep process and due to its complexity, the exact cellular ...

The 4-vessel Sampling Approach to Integrative Studies of Human Placental Physiology In Vivo

The 4-vessel Sampling Approach to Integrative Studies of Human Placental Physiology In Vivo

Der 4-Gefäß-Stichprobenansatz für integrative Studien der menschlichen Plazenta-Physiologie<em&gt; In vivo</em

The human placenta is highly inaccessible for research while still in utero. The current understanding of human placental physiology in vivo is therefore ...

Combining Volumetric Capnography And Barometric Plethysmography To Measure The Lung Structure-function Relationship

Kombination von volumetrischen Capnographie und barometrischen Plethysmographie der Lunge-Struktur-Funktions-Beziehung zu messen

Tools to measure lung and airways volume are critical for pulmonary researchers interested in evaluating the impact of disease or novel therapies on the ...

Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies

Ex Vivo Wundheilung Hornhaut Orgel Kulturmodells für Studien

The cornea has been used extensively as a model system to study wound healing. The ability to generate and utilize primary mammalian cells in two ...

Quantitative Mapping of Specific Ventilation in the Human Lung using Proton Magnetic Resonance Imaging and Oxygen as a Contrast Agent

Quantitative Mapping spezieller Belüftung in der menschlichen Lung mit Proton-Magnetresonanztomographie und Sauerstoff als Kontrastmittel

Specific ventilation imaging (SVI) is a functional magnetic resonance imaging technique capable of quantifying specific ventilation &#8213; the ratio of ...

Optocardiography and Electrophysiology Studies of Ex Vivo Langendorff-perfused Hearts

Optokardiographie und Elektrophysiologie Studien an Ex Vivo Langendorff-perfundierten Herzen

Small animal models are most commonly used in cardiovascular research due to the availability of genetically modified species and lower cost compared to ...

Murine Precision-Cut Liver Slices as an Ex Vivo Model of Liver Biology

Murine Präzisionsgeschnittene Leberscheiben als Ex-Vivo-Modell der Leberbiologie

Understanding the mechanisms of liver injury, hepatic fibrosis, and cirrhosis that underlie chronic liver diseases (i.e., viral hepatitis, non-alcoholic ...