Name: monitoring dynamic growth of retinal vessels in oxygen-induced retinopathy mouse model
Uploaded: 2021-04-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Monitoring Dynamic Growth of Retinal Vessels in Oxygen-Induced Retinopathy Mouse Model at JoVE.com

Мы благодарим всех членов нашей лаборатории и лаборатории офтальмологических животных Чжуншаньского офтальмологического центра за их техническую помощь. Мы также благодарим профессора Чуньцяо Лю за экспериментальную поддержку. Эта работа была поддержана грантами Национального фонда естественных наук Китая (NSFC: 81670872; Пекин, Китай), Фонд естественных наук провинции Гуандун, Китай (грант No 2019A1515011347) и проект строительства больницы высокого уровня из Государственной ключевой лаборатории офтальмологии в Офтальмологическом центре Чжуншань (грант No 303020103; Гуанчжоу, провинция Гуандун, Китай).

Все процедуры, связанные с использованием мышей, были одобрены комитетом по экспериментальной этике животных Офтальмологического центра Чжуншань Университета Сунь Ятсена, Китай (авторизованный номер: 2020-082), и в соответствии с утвержденными руководящими принципами Комитета по уходу и...

На восприимчивость мышей к ОИР влияют многие факторы. Детенышей разного генетического происхождения и штаммов сравнивать нельзя. У мышей-альбиносов BALB/c сосуды быстро возвращаются в область VO со значительным снижением неоваскулярных пучков38, что создает некоторые трудно?...

Неоваскуляризация сетчатки (РНВ), которая определяется как состояние, при котором новые патологические сосуды возникают из существующих вен сетчатки, обычно простирается вдоль внутренней поверхности сетчатки и прорастает в стекловидное тело (или субретинальное пространство при некоторых условиях)1. Это отличительная черта и общая черта многих ишемических ретинопатий, включая ретинопатию недоношенных (РН), окклюзию вен сетчатки (RVO) и пролиферативную диабетическую ретинопатию (PDR)2.
Многочисленные клинические и экспериментальные наблюдения показали, что ишемия является основной причиной неоваскуляризации сетчатки 3,4. При РН новорожденные подвергаются воздействию кислорода высокого уровня в закрытых инкубаторах для повышения выживаемости, что также является важным фактором для остановки роста сосудов. После того, как лечение сделано, сетчатка новорожденных испытывает относительно гипоксический период5. Другие ситуации наблюдаются при окклюзии центральных или ветвистых вен сетчатки в RVO, а также наблюдается повреждение капилляров сетчатки, которое вызвано микроангиопатией в PDR2. Гипоксия дополнительно увеличивает экспрессию ангиогенных факторов, таких как фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) через сигнальный путь, вызванный гипоксией фактор-1α (HIF-1α), который, в свою очередь, направляет эндотелиальные клетки сосудов для роста в гипоксическую область и образования новых сосудов 6,7.
РН является разновидностью сосудистой пролиферативной ретинопатии у недоношенных детей и ведущей причиной детской слепоты 8,9, для которой характерны гипоксия сетчатки, неоваскуляризация сетчатки и фиброзная гиперплазия 10,11,12. В 1950-х годах исследователи обнаружили, что высокая концентрация кислорода может значительно улучшить респираторные симптомы недоношенных детей13,14. В результате кислородная терапия все чаще применялась у недоношенных детей в то время15 лет. Однако, одновременно с широким использованием кислородной терапии у недоношенных детей, заболеваемость РН увеличивалась с каждым годом. С тех пор исследователи связали кислород с РН, изучая различные животные модели, чтобы понять патогенез РН и РНВ16.
У человека большая часть развития сосудистой системы сетчатки завершается до рождения, в то время как у грызунов сосудистая система сетчатки развивается после рождения, обеспечивая доступную модельную систему для изучения ангиогенеза в сосудистой системе сетчатки2. С непрерывным прогрессом исследований модели кислород-индуцированной ретинопатии (OIR) стали основными моделями для имитации патологического ангиогенеза в результате ишемии. В исследовании модели OIR нет конкретных видов животных, и модель была разработана для различных видов животных, включая котенка17, крысу18, мышь19, щенка бигля20 и рыбку данио21. Все модели имеют один и тот же механизм, с помощью которого они подвергаются гипероксии во время раннего развития сетчатки, а затем возвращаются в нормоксическую среду. Смит и др. отметили, что подвергание детенышей мышей гипероксии от Р7 в течение 5 дней индуцировало крайнюю форму регрессии сосудов в центральной сетчатке и возвращение их в комнатный воздух при Р12 постепенно вызывало неоваскулярные пучки, которые росли к стекловидному телу19. Это была стандартизированная модель мыши OIR, также называемая моделью Смита. Connor et al. дополнительно оптимизировали протокол и предоставили универсально применимый метод количественной оценки области VO (vaso-obliteration) и NV (неоваскуляризация) в 2009 году, что увеличило принятие и использование модели22. Модель мыши OIR по-прежнему является наиболее широко используемой моделью в настоящее время из-за ее небольшого размера, быстрого размножения, четкого генетического фона, хорошей повторяемости и высокого уровня успеха.
У мышей васкуляризация сетчатки начинается после рождения с врастанием сосудов от головки зрительного нерва во внутреннюю сетчатку к ora serrata. Во время нормального развития сетчатки первые сосуды сетчатки прорастают из головки зрительного нерва вокруг рождения, образуя расширяющуюся сеть (первичное сплетение), которая достигает периферии вокруг постнатального дня 7 (P7) 23. Затем сосуды начинают расти в сетчатку, образуя глубокий слой, проникая в сетчатку и создавая ламинарную сеть вокруг внутреннего ядерного слоя (INL), как у человека24. К концу третьей постнатальной недели (Р21) развитие более глубокого сплетения почти завершено. Для мышиной модели OIR сосудистая окклюзия всегда появляется в центральной сетчатке из-за быстрой дегенерации большого количества незрелых сосудистых сетей в центральной области во время воздействия гипероксии. Так, рост патологической неоваскуляризации происходит и в средне периферической сетчатке, которая является границей неперфузионной области и сосудистой области. Однако сосуды сетчатки человека почти сформировались еще до рождения. Что касается недоношенных детей, то периферическая сетчатка не полностью васкуляризуется при воздействии гипероксии25,26. Так окклюзия сосудов и неоваскуляризация в основном появляются в периферической сетчатке27,28. Несмотря на эти различия, мышиная модель OIR точно повторяет патологические события, которые происходят во время неоваскуляризации, вызванной ишемией.
Индукцию модели OIR можно разделить на две фазы29: в фазе 1 (фаза гипероксии) развитие сосудов сетчатки останавливается или замедляется при окклюзии и регрессии кровеносных сосудов в результате снижения VEGF и апоптоза эндотелиальных клеток 24,30; в фазе 2 (фаза гипоксии) снабжение сетчатки кислородом станет недостаточным в условиях воздуха в помещении29, что необходимо для развития нервной системы и гомеостаза 19,31. Эта ишемическая ситуация обычно приводит к нерегулируемой, аномальной неоваскуляризации.
В настоящее время широко используемым методом моделирования является чередование высокого / низкого воздействия кислорода: матери и их детеныши подвергаются воздействию 75% кислорода в течение 5 дней при P7, а затем 5 дней в комнатном воздухе, пока P17 не продемонстрирует сопоставимые результаты22, что является конечной точкой индукции мышиной модели OIR. (Рисунок 1). В дополнение к моделированию РН, эта опосредованная ишемией патологическая неоваскуляризация также может быть использована для изучения других ишемических заболеваний сетчатки. Основные измерения этой модели включают количественную оценку площади VO и NV, которые анализируются из плоских креплений сетчатки путем иммунофлуоресцентного окрашивания или перфузии FITC-декстрана. Каждую мышь можно изучить только один раз из-за смертельной операции. В настоящее время существует мало методов наблюдения динамических изменений сосудистой системы сетчатки непрерывно в процессе сосудистой регрессии и патологического ангиогенеза32. В этой статье мы предоставляем подробный протокол индукции модели OIR, анализ плоских креплений сетчатки, а также рабочий процесс флуоресцеиновой ангиографии глазного дна (FFA) на мышах, что было бы полезно для получения более полного понимания сосудистых динамических изменений в течение двух фаз мышиной модели OIR.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 mL sterile syringe</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>YA0550</td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts and intraperitoneal injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1&#215; Phosphate buffered saline (PBS)</td>
			<td>Transgen Biotech</td>
			<td>&#160;FG701-01</td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 ml Microcentrifuge Tube</td>
			<td>Corning</td>
			<td>MCT-200-C</td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>48 Well Clear TC-Treated Multiple Well Plates</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3548</td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhesive microscope slides</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adobe Photoshop CC 2019</td>
			<td>Adobe Inc.</td>
			<td></td>
			<td>For image analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon dioxide gas</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td>For sacrifice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover slide</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>14127</td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI staining solution</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab228549</td>
			<td>For labeling nucleus on retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting microscope</td>
			<td>Olmpus</td>
			<td>SZ61</td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescein sodium</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F6377</td>
			<td>For in vivo imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent Microscope</td>
			<td>&#160;Zeiss</td>
			<td>AxioImager.Z2</td>
			<td>For acquisition of fluorescence images of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoromount-G Mounting media</td>
			<td>SouthernBiotech</td>
			<td>&#160;0100-01</td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydroxypropyl Methylcellulose</td>
			<td>Maya</td>
			<td>89161</td>
			<td>For in vivo imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isolectin B4 594 antibody</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>I21413</td>
			<td>For labeling retinal vasculature on retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice C57/BL6J</td>
			<td>GemPharmatech of Jiangsu Province</td>
			<td></td>
			<td>For OIR model induction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro dissecting scissors-straight blade</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>503242</td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No.4 straight forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>&#160;501978-6</td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal donkey serum</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab7475</td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O2 sensor</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td>For monitoring the level of O2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OxyCycler</td>
			<td>Biospherix</td>
			<td>A84XOV</td>
			<td>For OIR model induction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde (PFA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P6148-1KG</td>
			<td>For tissue fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital sodium</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soda lime</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td>For absorbing excess CO2 in the oxygen chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPECTRALIS HRA+OCT</td>
			<td>Heidelberg</td>
			<td>HC00500002</td>
			<td>For in vivo imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPSS Statistics 22.0</td>
			<td>IBM</td>
			<td></td>
			<td>For statistical analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tansference decloring shaker</td>
			<td>Kylin-Bell</td>
			<td>ZD-2008</td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dish (Low attachment)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3261-20EA</td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipettes</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>&#160;SLBW6818</td>
			<td>For preparation of retinal flat mounts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td>For in vivo imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZEN Imaging Software</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td></td>
			<td>For image acquisition and export</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

monitoring dynamic growth of retinal vessels in oxygen-induced retinopathy mouse model

Кислород-индуцированная ретинопатия (OIR) широко используется для изучения аномального роста сосудов при ишемических заболеваниях сетчатки, включая ретинопатию недоношенных (РН), пролиферативную диабетическую ретинопатию (PDR) и окклюзию вен сетчатки (RVO). В большинстве исследований OIR наблюдается неоваскуляризация сетчатки в определенные моменты времени; однако динамический рост сосудов у живых мышей в течение определенного времени, который необходим для понимания заболеваний сосудов, связанных с OIR, был недостаточно изучен. Здесь мы описываем пошаговый протокол для индукции мышиной модели OIR, выделяя потенциальные подводные камни и предоставляя улучшенный метод для быстрой количественной оценки областей вазооблитерации (VO) и неоваскуляризации (NV) с использованием иммунофлуоресцентного окрашивания. Что еще более важно, мы контролировали возобновление роста сосудов у живых мышей от P15 до P25, выполняя флуоресцеиновую ангиографию глазного дна (FFA) в мышиной модели OIR. Применение FFA к мышиной модели OIR позволяет наблюдать процесс ремоделирования во время роста сосудов.

В мышиной модели OIR наиболее важным и базовым результатом является количественная оценка области VO и NV. После проживания в среде гипероксии в течение 5 дней от Р7 центральная сетчатка детенышей показала наибольшую неперфузионную площадь. При стимуляции гипоксии еще через 5 дней постепе?...

Watch this Scientific Journal Video about Monitoring Dynamic Growth of Retinal Vessels in Oxygen-Induced Retinopathy Mouse Model at JoVE.com

Monitoring Dynamic Growth of Retinal Vessels in Oxygen-Induced Retinopathy Mouse Model

Этот протокол описывает подробный метод приготовления и иммунофлуоресцентного окрашивания мышей с плоскими креплениями и анализа. Также подробно описано использование флуоресцеиновой ангиографии глазного дна (FFA) для детенышей мышей и обработка изображений.

Мониторинг динамического роста сосудов сетчатки в мышиной модели инсулин-индуцированной ретинопатии

Oxygen-induced retinopathy (OIR) is widely used to study abnormal vessel growth in ischemic retinal diseases, including retinopathy of prematurity (ROP), ...

Этот протокол может помочь исследователям легко отделить сетчатку мышей и наблюдать динамические изменения в сосудистой системе сетчатки мышиной модели OIR. Основными преимуществами этого метода являются сохранение целостности отделенных сетчаток и возможность каждой мыши служить своим собственным контролем, что делает результаты более сопоставимыми. Исследователи, впервые попробовавшие этот метод, могут испытывать трудности при получении пяти ориентационных изображений, потому что немного трудно поместить детенышей в правильное положение.Чтобы собрать ткань для крепления всей сетчатки, используйте изогнутые ножницы, чтобы отсоединить глазные яблоки от орбитальной ткани усыпленного щенка C57-Black/6. Затем вставьте изогнутые щипцы в заднюю часть глазного яблока, зажав зрительный нерв и быстро подняв глаз с орбиты. Поместите глазные яблоки в предварительно охлажденный PBS, чтобы удалить волосы и кровь с поверхности.Когда все глазные яблоки будут собраны, перенесите очищенные глазные яблоки в двухмиллилитровую микроцентрифужную трубку, содержащую 4% параформальдегида, и инкубируйте в течение 15 минут при комнатной температуре и от 12 до 15 оборотов в минуту. В конце инкубации добавьте каплю PBS в центр чашки культуры под рассекающим микроскопом и поместите одно глазное яблоко в каплю. Удерживая глазное яблоко парой щипцов, используйте иглу шприца в один миллилитр, чтобы аккуратно проколоть роговицу в лимбе роговицы.Вставьте кончик ножниц в прокол и срежьте роговицу вдоль лимбуса роговицы, стараясь не разрезать сетчатку. Используйте щипцы, чтобы удалить радужную оболочку и хрусталик, а оставшийся глазник поместить в 4% параформальдегид для 45-минутной инкубации при комнатной температуре на шейкере. В конце инкубации поместите неподвижный наглазник в свежую каплю PBS в центр нового блюда культуры.Удерживая наглаз одной парой щипцов, используйте вторую пару щипцов, чтобы аккуратно разделить слои сетчатки и склеры. Поместите кончик ножниц между слоями сетчатки и склеры и разрезайте склеру по направлению к зрительному нерву. Очистите склеру от сетчатки, чтобы получить чашечку сетчатки.С помощью щипцов освобождают связь между радиальными гиалоидными сосудами и периферической сетчаткой. Используйте двухмиллилитровую пипетку с отрезанным наконечником, чтобы перенести чашку сетчатки в одну лунку из 48-луночной пластины для трех пятиминутных промывок при комнатной температуре PBS на шейкере. После последней стирки высиживают чашку в 1% Triton X-100 и 5% нормальной ослиной сыворотке в PBS на ночь при четырех градусах Цельсия.Чтобы маркировать сосудистую сетчатку изолектином B4, инкубируйте сетчатку в одной лунке 48-луночной пластины в 400 микролитров 0,1% нормальной ослиной сыворотки, дополненной изолектином B4-594 на ночь при 4 градусах Цельсия на шейкере. При необходимости одновременно может быть добавлено еще одно первичное антитело. На следующий день промыть сетчатку тремя 20-минутными промываниями в 0,1% PBST на шейкере.После последней промывки инкубируют сетчатку с соответствующим высокоаффинным вторичным антителом в течение одного часа при комнатной температуре, прежде чем маркировать образец DAPI в течение 20-25 минут. В конце инкубации промыть сетчатку тремя 30-минутными промываниями в 0,1% ПБСТ при комнатной температуре с встряхиванием. После последней промывки перенесите чашку сетчатки на чистый слайд с отверстием, обращенным вверх, и используйте микроскоп, чтобы разрезать сетчатку радиально в трех, шести, девяти и 12-часовых положениях от периферии к центру, до одного до 1,5 миллиметра от головки зрительного нерва.Промыть сетчатку три раза несколькими каплями PBS за одно стирку перед использованием бумаги, уложенной воздухом, чтобы высушить и сплющить сетчатку. Добавьте каплю монтажной среды к центру крышки до тех пор, пока диаметр капли не покроет половину крышки. Затем быстро поместите крышку, крепежную среднюю стороной вниз, на сетчатку с распростертым покрытием.После того, как все плоские крепления сетчатки были подготовлены, образцы могут быть визуализированы с помощью конфокальной флуоресцентной микроскопии. Для визуализации in vivo добавьте 20 микролитров мидриатических глазных капель для достижения длительного расширения зрачка. Через пять минут поместите детенышей в стабильное положение на небольшую грелку перед устройством визуализации.Чтобы сохранить влагу в роговице, регулярно добавляйте искусственные слезы на протяжении всей процедуры визуализации. Затем нажмите Инфракрасное изображение глазного дна на устройстве, чтобы настроить головку зрительного нерва в центр экрана. Внутрибрюшинно вводят 150 микролитров 0,5% флуоресцеина раствора натриевой соли и сразу же нажимают кнопки FA и Injection на сенсорной панели устройства визуализации, чтобы запустить таймер.Через три минуты, когда кровообращение сетчатки вошло в венозную фазу, приобретите первое изображение центральной сетчатки. Переместите линзу устройства визуализации горизонтально к носовой стороне глаза, пока головка зрительного нерва не будет расположена в средней точке одной стороны области получения изображения, и сделайте второе изображение. Продолжайте двигать хрусталиком и получать изображения височной, верхней и нижней сетчатки таким же образом.Чтобы обработать изображения сетчатки в соответствующей программе обработки изображений, откройте меню Файл и нажмите кнопку Создать, чтобы создать новый холст с черным фоном. Откройте изображение центральной сетчатки. Затем нажмите Файл, чтобы добавить второе изображение.Отрегулируйте непрозрачность второго изображения до 60%, перемещайте и изменяйте размер изображения до тех пор, пока два изображения не будут перекрываться. Нажмите «Переключаться между режимами свободного преобразования» и «Деформация» и при необходимости внесите тонкие коррективы в сосуды. Затем установите для параметра непрозрачность второго изображения значение 100%Выберите оба изображения и нажмите кнопку «Автоматическое наложение слоев».Установите флажок Панорама в качестве метода наложения, а также установите флажки Бесшовные тона и Цвета и Прозрачные области заливки с учетом содержимого. Нажмите кнопку ОК, чтобы завершить сшивание первых двух изображений. Затем добавьте третье изображение и сложите это изображение к первым двум изображениям, как показано до тех пор, пока все пять изображений с одной сетчатки не будут сшиты.Когда все изображения из анализа будут обработаны, используйте инструмент обрезки, чтобы обрезать изображения FFA до однородного размера, чтобы облегчить наблюдение за изменениями в динамике сосудистой системы сетчатки в разных точках времени развития. После пяти дней воздействия гипероксии центральные сетчатки послеродовых щенков 12-го дня демонстрируют большую неперфузионную площадь. При переходе на пять дней гипоксических состояний сетчатка постепенно неоваскуляризируется, проявляя увеличение сигнала флуоресценции сильнее, чем наблюдаемое в окружающих нормальных сосудах.После 17-го послеродового дня патологическая неоваскуляризация быстро регрессирует и к 25-му дню сетчатка демонстрирует совершенно нормальный внешний вид. Хорошая повторяемость и стабильность модели ретинопатии, индуцированной кислородом, может быть достигнута путем контроля размера помета и постнатального увеличения веса щенков. Как уже отмечалось, вазооблитерация обычно достигает пика на 12-й послеродовой день и исчезает на 25-й послеродовой день, в то время как неоваскуляризация достигает пика на 17-й послеродовой день и регрессирует к 25-му послеродовому дню.В постнатальный день от 15 до 25 кислородно-индуцированных мышей с ретинопатией диаметр кровеносных сосудов сетчатки увеличивается и становится очень мучительным по сравнению с тем, что наблюдалось у сетчатки нормальных мышей. Щипцы в левой руке в основном играют вспомогательную роль. Следите за тем, чтобы не сдавить глазное яблоко, которое может деформировать или разорвать его.

Research

JoVE Journal

Biology

Application of Light-cured Dental Adhesive Resin for Mounting Electrodes or Microdialysis Probes in Chronic Experiments

Применение Светоотверждаемый Стоматологическая смолы Клей для монтажа электродов или Микродиализ зонды в хронических опытах

In chronic recording experiments, self-curing dental acrylic resins have been used as a mounting base of electrodes or microdialysis-probes. Since these ...

Whole-cell Recordings of Light Evoked Excitatory Synaptic Currents in the Retinal Slice

Всего-клеточные Recordings Света Вызванные Возбуждающие Synaptic токи в сетчатке глаза фрагмент

We use the whole-cell patch clamp technique to study the synaptic circuitry that underlies visual information processing in the retina. In this video, we ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

В естественных изображений и лечебных процедур в Ортотопическая мышиной модели рака яичников

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Isolation of Retinal Stem Cells from the Mouse Eye

Выделение стволовых клеток сетчатки от мыши глаз

The adult mouse retinal stem cell (RSC) is a rare quiescent cell found within the ciliary epithelium (CE) of the mammalian eye1,2,3. The CE is made up of ...

Monitoring Dynamic Changes In Mitochondrial Calcium Levels During Apoptosis Using A Genetically Encoded Calcium Sensor

Мониторинг динамических изменений в митохондриальной уровня кальция во время апоптоза Использование генетически закодированные Кальций датчика

Dynamic changes in intracellular calcium concentration in response to various stimuli regulates many cellular processes such as proliferation, ...

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

Долгосрочные Смертельное испытания токсичности с ракообразных Артемия franciscana</em

Our research activities target the use of biological methods for the evaluation of environmental quality, with particular reference to saltwater/brackish ...

Validation of a Mouse Model to Disrupt LINC Complexes in a Cell-specific Manner

Валидация модели мышей, чтобы сорвать ЛИНК Комплексы в манере соты

Nuclear migration and anchorage within developing and adult tissues relies heavily upon large macromolecular protein assemblies called LInkers of the ...

En Face Preparation of Mouse Blood Vessels

En Face Preparation of Mouse Blood Vessels

Подготовка к зачатию кровеносных сосудов мыши

Sections of paraffin embedded tissues are routinely used for studying tissue histology and histopathology. However, it is difficult to determine what the ...

A Graphical User Interface for Software-assisted Tracking of Protein Concentration in Dynamic Cellular Protrusions

Графический пользовательский интерфейс для отслеживания концентрации белка в программном сопровождении в динамических клеточных выпячиваниях

Filopodia are dynamic, finger-like cellular protrusions associated with migration and cell-cell communication. In order to better understand the complex ...

Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

Транс внутренняя ячейка массы впрыска эмбриональных стволовых клеток приводит к более высоким ставкам химеризма

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current ...