Name: isolation of mouse interstitial valve cells to study the calcification of the aortic valve in vitro
Uploaded: 2021-05-10T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro at JoVE.com

ملاحظة: تمت الموافقة على جميع الإجراءات الحيوانية الموصوفة هنا من قبل كلية إيكان للطب في لجنة النواة المؤسسية والاستخدام في جبل سيناء.
1. إعداد قبل عزل خلية صمام من الفئران الكبار
<ol><li>تنظيف وتعقيم جميع الأدوات الجراحية المبينة في الشكل 1A باستخدام 70٪ v/v الإي...

<ol>
	<li>Rostagno, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+valve+disease+in+elderly.">Heart valve disease in elderly.</a> World Journal of Cardiology. 11 (2), 71-83 (2019).</li><li>Stewart, B. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+factors+associated+with+calcific+aortic+valve+disease.+Cardiovascular+Health+Study.">Clinical factors associated with calcific aortic valve disease. Cardiovascular Health Study.</a> Journal of the American College of Cardiology. 29 (3), 630-634 (1997).</li><li>Marquis-Gravel, G., Redfors, B., Leon, M. B., G&#233;n&#233;reux, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medical+treatment+of+aortic+stenosis.">Medical treatment of aortic stenosis.</a> Circulation. 134 (22), 1766-1784 (2016).</li><li>Spitzer, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortic+stenosis+and+heart+failure:+disease+ascertainment+and+statistical+considerations+for+clinical+trials.">Aortic stenosis and heart failure: disease ascertainment and statistical considerations for clinical trials.</a> Cardiac Failure Review. 5 (2), 99-105 (2019).</li><li>Hinton, R. B., Yutzey, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+valve+structure+and+function+in+development+and+disease.">Heart valve structure and function in development and disease.</a> Annual Review of Physiology. 73, 29-46 (2011).</li><li>Simionescu, D. T., Chen, J., Jaeggli, M., Wang, B., Liao, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Form+follows+function:+advances+in+trilayered+structure+replication+for+aortic+heart+valve+tissue+engineering.">Form follows function: advances in trilayered structure replication for aortic heart valve tissue engineering.</a> Journal of Healthcare Engineering. 3 (2), 179-202 (2012).</li><li>Bouchareb, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+platelets+promote+an+osteogenic+programme+and+the+progression+of+calcific+aortic+valve+stenosis.">Activated platelets promote an osteogenic programme and the progression of calcific aortic valve stenosis.</a> European Heart Journal. 40 (17), 1362-1373 (2019).</li><li>Rutkovskiy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Valve+interstitial+cells:+the+key+to+understanding+the+pathophysiology+of+heart+valve+calcification.">Valve interstitial cells: the key to understanding the pathophysiology of heart valve calcification.</a> Journal of the American Heart Association. 6 (9), (2017).</li><li>Bosse, Y., Mathieu, P., Pibarot, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomics:+the+next+step+to+elucidate+the+etiology+of+calcific+aortic+valve+stenosis.">Genomics: the next step to elucidate the etiology of calcific aortic valve stenosis.</a> Journal of the American College of Cardiology. 51 (14), 1327-1336 (2008).</li><li>Drexler, H. G., Uphoff, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mycoplasma+contamination+of+cell+cultures:+Incidence,+sources,+effects,+detection,+elimination,+prevention.">Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention.</a> Cytotechnology. 39 (2), 75-90 (2002).</li><li>Richards, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Side-specific+endothelial-dependent+regulation+of+aortic+valve+calcification:+interplay+of+hemodynamics+and+nitric+oxide+signaling.">Side-specific endothelial-dependent regulation of aortic valve calcification: interplay of hemodynamics and nitric oxide signaling.</a> American Journal of Pathology. 182 (5), 1922-1931 (2013).</li><li>Bouchareb, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+strain+induces+the+production+of+spheroid+mineralized+microparticles+in+the+aortic+valve+through+a+RhoA/ROCK-dependent+mechanism.">Mechanical strain induces the production of spheroid mineralized microparticles in the aortic valve through a RhoA/ROCK-dependent mechanism.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 67, 49-59 (2014).</li><li>Lerman, D. A., Prasad, S., Alotti, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcific+aortic+valve+disease:+molecular+mechanisms+and+therapeutic+approaches.">Calcific aortic valve disease: molecular mechanisms and therapeutic approaches.</a> European Cardiology. 10 (2), 108-112 (2015).</li><li>Janssen, J. W., Helbing, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arsenazo+III:+an+improvement+of+the+routine+calcium+determination+in+serum.">Arsenazo III: an improvement of the routine calcium determination in serum.</a> European Journal of Clinical Chemistry and Clinical Biochemistry. 29 (3), 197-201 (1991).</li><li>Ortlepp, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lower+serum+calcium+levels+are+associated+with+greater+calcium+hydroxyapatite+deposition+in+native+aortic+valves+of+male+patients+with+severe+calcific+aortic+stenosis.">Lower serum calcium levels are associated with greater calcium hydroxyapatite deposition in native aortic valves of male patients with severe calcific aortic stenosis.</a> Journal of Heart Valve Disease. 15 (4), 502-508 (2006).</li></ol>

تقدم هذه المقالة بروتوكول مفصل عزل خلية صمام الماوس للثقافة الأساسية. تم تجميع ثلاثة صمامات الأبهر من الفئران البالغة من العمر 8 أسابيع للحصول على عدد كاف من الخلايا. وبالإضافة إلى ذلك، يصف هذا البروتوكول توصيف النمط الظاهري في مركز فيينا الدولي ومقايسة التمعدن في المختبر. تم تك...

مرض الصمام الأبهري المتكلس (CAVD) هو مرض القلب الصمامي الأكثر انتشارا في السكان الغربيين ، ويؤثر على ما يقرب من 2.5٪ من الأفراد المسنين الذين تزيد أعمارهم عن 65 عاما. CAVD يؤثر على أكثر من ستة ملايين أميركي ويرتبط مع التغيرات في الخصائص الميكانيكية للمنشورات التي تضعف تدفق الدم العادي من خلال1،2. حاليا، لا يوجد علاج دوائي لوقف تطور المرض أو لتنشيط الانحدار المعدني. العلاج الفعال الوحيد لعلاج CAVD هو استبدال الصمام الأبهري عن طريق الجراحة أو استبدال الصمام الأبهري عبر القسطرة3. ولذلك فمن الضروري التحقيق في الآليات الجزيئية المؤدية إلى تمعدن الصمام لتحديد أهداف دوائية جديدة. في الواقع، تضيق الأبهر غير المعالجة له عدة عواقب سلبية مثل ضعف البطين الأيسر وفشل القلب4.
يتكون الصمام الأبهري من ثلاث طبقات تعرف باسم فيروسا وسبونغيوسا والبطين ، والتي تحتوي على VICs كنوع الخلية السائد5. وتغطي فيبرسا البطين بطبقة من الخلايا البطانية الوعائية (VECs)5. تنظم VECs نفاذية الخلايا الالتهابية وكذلك إشارات الباراكورين. زيادة الإجهاد الميكانيكي قد تؤثر على سلامة VECs وتعكر صفو التوازن من الصمام الأبهري، مما يؤدي إلى غزو الخلايا الالتهابية6. أظهرت تحليلات المجهر الإلكتروني المسح الضوئي تعطل بطانة الرحم في صمام الأبهر المتكلس الإنسان7. 
تكشف التحليلات النسيجية للأنسجة المتكلسة عن وجود أوبلاستات والعظام. وعلاوة على ذلك، لوحظ التمايز العظمي للمركبات VICs في المختبر وفي أنسجة الصمام البشري8. يتم تنظيم هذه العملية بشكل رئيسي من قبل عامل النسخ المرتبط رونت 2 (Runx2) والبروتينات مورفوجينية العظام (BMPs)8،9.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3 mm cutting edge scissors</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>15000-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-alpha smooth muscle Actin antibody</td>
			<td>abcam</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-mouse, Alexa Fluor 488 conjugate</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>4412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arsenazo-III reagent set</td>
			<td>POINT SCIENTIFIC</td>
			<td>C7529-500</td>
			<td>a Kit to measure the concentration of calcium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonn Scissors</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14184-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium hydroxide</td>
			<td>SIGMA -Aldrich 31219</td>
			<td>31219</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD31</td>
			<td>Novusbio</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase type I&#160; (125 units/mg)</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>17018029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Tthermofisher</td>
			<td>11965092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra fine graefe forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Gibco 16000044</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>F.S.T Dumont</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCl</td>
			<td>SIGMA-ALDRICH</td>
			<td>H1758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES 1 M solution</td>
			<td>STEMCELLS TECHNOLOGIES</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine 100x</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>25030081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mycozap</td>
			<td>Lanza</td>
			<td>VZA-2011</td>
			<td>Mycoplasma elimination reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS 10x</td>
			<td>SIGMA-ALDRICH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penecillin streptomycin 100x</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>10378016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate 100 mM</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>11360070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard pattern forceps</td>
			<td>&#160;F.S.T</td>
			<td>11000-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors - Sharp-Blunt</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14008-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin 0.05%</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>25300054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vimentin</td>
			<td>abcam</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of mouse interstitial valve cells to study the calcification of the aortic valve in vitro

تكلس خلايا الصمام الأبهري هو السمة المميزة للتضيق الأبهري ويرتبط مع تليف أعتاب الصمام. تلعب الخلايا الخلالية للصمامات (VICs) دورا مهما في عملية تكلس تضيق الأبهر من خلال تفعيل برنامجها للتمايز إلى خلايا تشبه الأرومة العظمية. MOUSE VICs هي أداة جيدة في المختبر لتوضيح مسارات الإشارات التي تقود تمعدن خلية الصمام الأبهري. الطريقة الموصوفة هنا، التي استخدمها هؤلاء المؤلفون بنجاح، تشرح كيفية الحصول على خلايا معزولة حديثا. تم إجراء عملية كولاجيناز من خطوتين مع 1 ملغم/مل و4.5 ملغم/مل. الخطوة الأولى حاسمة لإزالة طبقة الخلية البطانية وتجنب أي تلوث. حضانة الكولاجين الثانية هي تسهيل هجرة VICs من الأنسجة إلى اللوحة. بالإضافة إلى ذلك ، تتم مناقشة إجراء تلطيخ immunofluorescence لتوصيف النمط الظاهري لخلايا صمام الماوس المعزولة. وعلاوة على ذلك، تم إجراء فحص تكلس في المختبر باستخدام إجراء قياس كاشف الكالسيوم وتلطيخ أحمر alizarin. استخدام الخلايا صمام الماوس الثقافة الأولية أمر ضروري لاختبار أهداف الدوائية الجديدة لمنع تمعدن الخلايا في المختبر.

وبما أن قطر الصمامات الأبهرية المورينية يبلغ عادة 1 مم، يجب تجميع ثلاثة صمامات على الأقل لجمع مليون خلية قابلة للحياة لإجراء عمليات تجريبية مختلفة. تظهر الخطوات المختلفة لعملية عزل مركز فيينا الدولي في الشكل 1 والشكل 2. كما أنه من الصعب كشط يدويا أنسجة صمام،...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro at JoVE.com

Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro

توضح هذه المقالة عزل خلايا الصمام الأبهري للفأرة بواسطة إجراء كولاجيناز من خطوتين. خلايا صمام الماوس المعزولة مهمة لإجراء فحوصات مختلفة، مثل هذا المقايسة تكلس المختبر، والتحقيق في المسارات الجزيئية المؤدية إلى تمعدن الصمام الأبهري.

عزل خلايا الصمام الخلالي الماوس لدراسة تكلس الصمام الأبهري في المختبر

The calcification of aortic valve cells is the hallmark of aortic stenosis and is associated with valve cusp fibrosis. Valve interstitial cells (VICs) ...

استخدام خلايا صمام الماوس معزولة أمر ضروري للتحقيق في مسار الإشارات المؤدية إلى تكلس صمام في استخدام الخلايا المعدلة وراثيا من الفئران المعدلة وراثيا. الهضم من خطوتين هو طريقة سريعة وفعالة. الجزء الأكثر تحديا من هذا البروتوكول هو عزل الصمام الأبهري من الفئران ثمانية أسابيع.فمن الأفضل لممارسة على الفئران الأكبر سنا لتصور الصمام الأبهري بشكل أفضل. قبل البدء في التجربة، تنظيف وتعقيم جميع الأدوات الجراحية ومساحة العمل مع 70٪ الإيثانول وautclave الأدوات الجراحية لمدة 30 دقيقة. عندما يكون الإعداد الأولي جاهزا، ابدأ بتنظيف منطقة الصدر والبطن من فأرة القتل الرحيم التي يبلغ عمرها ثمانية أسابيع باستخدام الإيثانول.باستخدام مقص، افتح البطن وصدر الفأرة، ثم قطع بين الأذين الأيسر والبطين الأيسر مع مقص الجراحية الصغيرة. إزالة الدم من القلب عن طريق غرس 10 ملليلتر من برنامج تلفزيوني الباردة وقطع القلب، والحفاظ على ثلاثة ملليمترات من الشريان الأورطي الصاعد. تحت منظار مجسم، قم بتشريح الصمام الأبهري عن طريق قطع القلب أفقيا في منتصف البطينين وقطع البطين الأيسر نحو الشريان الأبهري، ثم تشريح الصمام الأبهري بعناية.تجمع الصمامات معا في طبق صغير 35 ملليمتر زراعة الأنسجة. اغسل الصمامات المعزولة في طبق ثقافة الخلايا 75 ملليلتر مع خمسة ملليلترات من HEPES الباردة الطازجة 10 ملليمولار تكملها المضادات الحيوية واحتضانها في خمسة ملليلترات من نوع الكولاجيناز واحد لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية مع اهتزاز مستمر. بعد الحضانة، طرد المركزي أنبوب لمدة خمس دقائق، في 150 مرة G وغسل بيليه مرة واحدة مع اثنين من ملليلتر من HEPES 10 ملليمولار مع دوامة بسرعة عالية لمدة 30 ثانية.جمع تعليق الناتجة من الأنبوب إلى طبق ثقافة 35 ملليمتر واستخدام ملاقط رقيقة لنقل بعناية شظايا الأنسجة في أنبوب جديد. ثم احتضان بيليه في أنبوب 15 ملليلتر مع خمسة ملليلتر من نوع الكولاجيناز واحد في 37 درجة مئوية تحت التحريض المستمر لمدة 35 دقيقة. فصل الخلايا عن طريق إعادة تعليق مع ماصة ملليلتر واحد والطرد المركزي في 150 مرة G لمدة خمس دقائق في أربع درجات مئوية.تنظيف الخلايا مرتين عن طريق إعادة تعليق بيليه فصل في اثنين من ملليلتر من DMEM كاملة والطرد المركزي في 150 مرة G لمدة خمس دقائق في أربع درجات مئوية. للطلاء، resuspend بيليه في ملليلتر واحد من المتوسطة كاملة وإضافته إلى بئر واحد من ستة طبق ثقافة الخلايا جيدا في الحد الأدنى من المتوسطة. الحفاظ على لوحات دون عائق في 37 درجة مئوية مع 5٪ ثاني أكسيد الكربون.بعد ثلاثة أيام من الحضانة ، تأكد من النمو بالقرب من حطام الأنسجة من خلال مراقبة الخلايا تحت المجهر. مرة واحدة 1, 000 الخلايا مرئية, إزالة بعناية حطام الأنسجة مع ملاقط autoclaved وتغيير المتوسطة. جرب الخلايا بعد الوصول إلى التقاء 70٪ ونقلها إلى طبق زراعة الأنسجة 75 ملليلتر.قبل البدء في الفحص، قم بتنظيف غطاء السلامة البيولوجية باستخدام الإيثانول بنسبة 70٪، ودفئ متوسط DMEM إلى 37 درجة مئوية. بعد ذلك ، البذور 100،000 خلية لكل حالة في ست لوحات بئر في DMEM كاملة والثقافة في 37 درجة مئوية. بعد 24 ساعة، استبدل الوسط الفائق بالمتوسط المتكلس واحتضن الخلايا لمدة سبعة أيام عند 37 درجة مئوية، ليحل محل الوسط في اليوم الثالث.بعد سبعة أيام، قم بقياس تركيز الكالسيوم في لوحة بئر 96 باستخدام كاشف أرسينازو الثالث وتسجيل الامتصاص عند 650 نانومتر. في التحليل التمثيلي ، تم تحديد الأنماط الظاهرية المختلفة لخلايا الصمام مع تلطيخ المناعة بعد ثلاثة إلى خمسة أيام من الثقافة. الماوس VIC أعرب vimentin وألفا SMA، علامات هامة من خلايا صمام.بالإضافة إلى ذلك، تحققت تلطيخات المناعة CD31 من عدم وجود تلوث من الخلايا البطانية في ثقافة مركز فيينا الدولي. زراعة مركز فيينا الدولي مع الفوسفات الغنية تكلس المتوسطة تحفيز تكلس في الخلايا، وأكد كذلك مع تلطيخ إيجابية حمراء لعقد الكالسيوم. ويستند البروتوكول على مجموعة من ثلاثة إلى خمسة صمام من الفئران المختلفة.ومن المهم استخدام رفيقة القمامة وثلاث نسخ بيولوجية مختلفة للتحقق من صحة النتائج. استخدام خلايا صمام الماوس أمر حيوي لفهم المسار الجزيئي المؤدي إلى تضيق الأبهر عن طريق عزل الخلايا من الفئران المعدلة وراثيا. وقد استخدم هذا البروتوكول سابقا للتحقيق في الآثار المترتبة على المسار إلى مستقبلات في الانحدار المعدني للصمام الأبهري المتكلس.

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro

Testing Visual Sensitivity to the Speed and Direction of Motion in Lizards

اختبار الحساسية البصرية للسرعة واتجاه الحركة في السحالي

Testing visual sensitivity in any species provides basic information regarding behaviour, evolution, and ecology. However, testing specific features of ...

Isolation of Retinal Stem Cells from the Mouse Eye

عزل الخلايا الجذعية من شبكية العين بالعين ماوس

The adult mouse retinal stem cell (RSC) is a rare quiescent cell found within the ciliary epithelium (CE) of the mammalian eye1,2,3. The CE is made up of ...

Visualization of the Interstitial Cells of Cajal (ICC) Network in Mice

Visualization of the Interstitial Cells of Cajal ICC Network in Mice

تصور من خلايا خلالية لشبكة (ICC) في الفئران كاجال

The interstitial cells of Cajal (ICC) are mesenchymal derived "pacemaker cells" of the gastrointestinal (GI) tract that generate spontaneous slow waves ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

جيل من الفئران المستمدة من الخلايا الجذعية المحفزة المستحثة

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

التفريق بين الأطفال حديثي الولادة ماوس خلايا الجلد الجذعية المشتقة في مثل جرثومة خلايا<em&gt; في المختبر</em

Studying  germ cell formation and differentiation has traditionally been very difficult  due to low cell numbers and their location deep within developing ...

Isolation of Murine Valve Endothelial Cells

عزل خلايا الفئران صمام غشائي

Normal valve structures consist of stratified layers of specialized extracellular matrix (ECM) interspersed with valve interstitial cells (VICs) and ...

Protein Isolation from the Developing Embryonic Mouse Heart Valve Region

عزل بروتين من الفأر الجنينية القلب صمام منطقة نامية

Western blot analysis is a commonly employed technique for detecting and quantifying protein levels. However, for small tissue samples, this analysis ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

العزلة والثقافة الابتدائية من خلايا الفأر الأورطي غشائي

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation and 3D Collagen Sandwich Culture of Primary Mouse Hepatocytes to Study the Role of Cytoskeleton in Bile Canalicular Formation In Vitro

العزلة والكولاجين 3D ساندويتش الثقافة من الخلايا الكبدية الماوس الاساسيه لدراسة دور Cytoskeleton في الصفراء الصفراوية تكوين في المختبر

Hepatocytes are the central cells of the liver responsible for its metabolic function. As such, they form a uniquely polarized epithelium, in which two or ...

Isolation of Human Primary Valve Cells for In vitro Disease Modeling

عزل خلايا الصمام الأولي البشري لنمذجة الأمراض في المختبر

Calcific aortic valve disease (CAVD) is present in nearly a third of the elderly population. Thickening, stiffening, and calcification of the aortic valve ...