Name: isolation of mouse interstitial valve cells to study the calcification of the aortic valve in vitro
Uploaded: 2021-05-10T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro at JoVE.com

הערה: כל ההליכים בבעלי חיים המתוארים כאן אושרו על ידי בית הספר לרפואה איקאן בהר סיני הליבה המוסדית וועדת השימוש.
1. הכנה לפני בידוד תא שסתום מעכברים בוגרים
<ol><li>נקו ועקרו את כל המכשירים הכירורגיים המוצגים באיור 1A באמצעות 70% v/v אתנול ולאחר מכן תעבדו אותם אוטומ?...

<ol>
	<li>Rostagno, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+valve+disease+in+elderly.">Heart valve disease in elderly.</a> World Journal of Cardiology. 11 (2), 71-83 (2019).</li><li>Stewart, B. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+factors+associated+with+calcific+aortic+valve+disease.+Cardiovascular+Health+Study.">Clinical factors associated with calcific aortic valve disease. Cardiovascular Health Study.</a> Journal of the American College of Cardiology. 29 (3), 630-634 (1997).</li><li>Marquis-Gravel, G., Redfors, B., Leon, M. B., G&#233;n&#233;reux, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medical+treatment+of+aortic+stenosis.">Medical treatment of aortic stenosis.</a> Circulation. 134 (22), 1766-1784 (2016).</li><li>Spitzer, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortic+stenosis+and+heart+failure:+disease+ascertainment+and+statistical+considerations+for+clinical+trials.">Aortic stenosis and heart failure: disease ascertainment and statistical considerations for clinical trials.</a> Cardiac Failure Review. 5 (2), 99-105 (2019).</li><li>Hinton, R. B., Yutzey, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+valve+structure+and+function+in+development+and+disease.">Heart valve structure and function in development and disease.</a> Annual Review of Physiology. 73, 29-46 (2011).</li><li>Simionescu, D. T., Chen, J., Jaeggli, M., Wang, B., Liao, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Form+follows+function:+advances+in+trilayered+structure+replication+for+aortic+heart+valve+tissue+engineering.">Form follows function: advances in trilayered structure replication for aortic heart valve tissue engineering.</a> Journal of Healthcare Engineering. 3 (2), 179-202 (2012).</li><li>Bouchareb, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+platelets+promote+an+osteogenic+programme+and+the+progression+of+calcific+aortic+valve+stenosis.">Activated platelets promote an osteogenic programme and the progression of calcific aortic valve stenosis.</a> European Heart Journal. 40 (17), 1362-1373 (2019).</li><li>Rutkovskiy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Valve+interstitial+cells:+the+key+to+understanding+the+pathophysiology+of+heart+valve+calcification.">Valve interstitial cells: the key to understanding the pathophysiology of heart valve calcification.</a> Journal of the American Heart Association. 6 (9), (2017).</li><li>Bosse, Y., Mathieu, P., Pibarot, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomics:+the+next+step+to+elucidate+the+etiology+of+calcific+aortic+valve+stenosis.">Genomics: the next step to elucidate the etiology of calcific aortic valve stenosis.</a> Journal of the American College of Cardiology. 51 (14), 1327-1336 (2008).</li><li>Drexler, H. G., Uphoff, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mycoplasma+contamination+of+cell+cultures:+Incidence,+sources,+effects,+detection,+elimination,+prevention.">Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention.</a> Cytotechnology. 39 (2), 75-90 (2002).</li><li>Richards, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Side-specific+endothelial-dependent+regulation+of+aortic+valve+calcification:+interplay+of+hemodynamics+and+nitric+oxide+signaling.">Side-specific endothelial-dependent regulation of aortic valve calcification: interplay of hemodynamics and nitric oxide signaling.</a> American Journal of Pathology. 182 (5), 1922-1931 (2013).</li><li>Bouchareb, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+strain+induces+the+production+of+spheroid+mineralized+microparticles+in+the+aortic+valve+through+a+RhoA/ROCK-dependent+mechanism.">Mechanical strain induces the production of spheroid mineralized microparticles in the aortic valve through a RhoA/ROCK-dependent mechanism.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 67, 49-59 (2014).</li><li>Lerman, D. A., Prasad, S., Alotti, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcific+aortic+valve+disease:+molecular+mechanisms+and+therapeutic+approaches.">Calcific aortic valve disease: molecular mechanisms and therapeutic approaches.</a> European Cardiology. 10 (2), 108-112 (2015).</li><li>Janssen, J. W., Helbing, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arsenazo+III:+an+improvement+of+the+routine+calcium+determination+in+serum.">Arsenazo III: an improvement of the routine calcium determination in serum.</a> European Journal of Clinical Chemistry and Clinical Biochemistry. 29 (3), 197-201 (1991).</li><li>Ortlepp, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lower+serum+calcium+levels+are+associated+with+greater+calcium+hydroxyapatite+deposition+in+native+aortic+valves+of+male+patients+with+severe+calcific+aortic+stenosis.">Lower serum calcium levels are associated with greater calcium hydroxyapatite deposition in native aortic valves of male patients with severe calcific aortic stenosis.</a> Journal of Heart Valve Disease. 15 (4), 502-508 (2006).</li></ol>

מאמר זה מציג פרוטוקול מפורט של בידוד תא שסתום עכבר עבור התרבות הראשית. שלושה שסתומי אבי העורקים מעכברים בני 8 שבועות אוגדו כדי להשיג מספר מספיק של תאים. בנוסף, פרוטוקול זה מתאר את האפיון של פנוטיפ VIC ואת in vitro mineralization assay. השיטה הותאמה מהפרוטוקול שתואר קודם לכן מאתיו ואח'7</...

מחלת שסתום אבי העורקים מסוידת (CAVD) היא מחלת הלב valvular הנפוצה ביותר באוכלוסיות המערביות, המשפיעה על כמעט 2.5% מהקשישים מעל גיל65 . CAVD משפיע על יותר משישה מיליון אמריקאים והוא קשור לשינויים בתכונות המכניות של העלונים הפוגעים בזרימת הדם הרגילה עד1,2. נכון לעכשיו, אין טיפול תרופתי כדי לעצור את התקדמות המחלה או להפעיל רגרסיה מינרלית. הטיפול היעיל היחיד לטיפול CAVD הוא החלפת שסתום אבי העורקים על ידי ניתוח או החלפת שסתום אבי העורקים transcatheter3. לכן חובה לחקור את המנגנונים המולקולריים המובילים מינרליזציה שסתום כדי לזהות מטרות פרמקולוגיות חדשות. אכן, היצרות בוני העורקים שאינה מטופלת יש כמה השלכות שליליות כגון תפקוד לקוי החדר השמאלי ואי ספיקת לב4.
שסתום אבי העורקים מורכב משלוש שכבות המכונות פיברוסה, ספונגיוסה, חדרית, אשר מכילים VICs כמו סוג התא השולט5. הפיברוסה וה חדרית מכוסים בשכבה של תאי אנדותל וסקולריים (VECs)5. VECs לווסת את החדירות של תאים דלקתיים, כמו גם אותות paracrine. מתח מכני מוגבר עשוי להשפיע על שלמות VECs ולהפריע הומאוסטזיס של שסתום אבי העורקים, המוביל לפלישה לתא דלקתי6. סריקת ניתוחי מיקרוסקופיה אלקטרונים הראתה אנדותל משובש בשסתום אבי העורקים מסויד אנושי7. 
ניתוחים היסטולוגיים של רקמה מסוידת חושפים את נוכחותם של אוסטאובלסטים ואוסטאוקלסטים. יתר על כן, הבחנה אוסטאוגנית של VICs נצפתה הן במבחנה והן ברקמת שסתום אנושי8. תהליך זה מתוזמר בעיקר על ידי גורם שעתוק הקשורים גונט 2 (Runx2) ואת חלבונים מורפוגנטי עצם (BMPs)8,9.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3 mm cutting edge scissors</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>15000-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-alpha smooth muscle Actin antibody</td>
			<td>abcam</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-mouse, Alexa Fluor 488 conjugate</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>4412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arsenazo-III reagent set</td>
			<td>POINT SCIENTIFIC</td>
			<td>C7529-500</td>
			<td>a Kit to measure the concentration of calcium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonn Scissors</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14184-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium hydroxide</td>
			<td>SIGMA -Aldrich 31219</td>
			<td>31219</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD31</td>
			<td>Novusbio</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase type I&#160; (125 units/mg)</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>17018029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Tthermofisher</td>
			<td>11965092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra fine graefe forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Gibco 16000044</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>F.S.T Dumont</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCl</td>
			<td>SIGMA-ALDRICH</td>
			<td>H1758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES 1 M solution</td>
			<td>STEMCELLS TECHNOLOGIES</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine 100x</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>25030081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mycozap</td>
			<td>Lanza</td>
			<td>VZA-2011</td>
			<td>Mycoplasma elimination reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS 10x</td>
			<td>SIGMA-ALDRICH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penecillin streptomycin 100x</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>10378016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate 100 mM</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>11360070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard pattern forceps</td>
			<td>&#160;F.S.T</td>
			<td>11000-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors - Sharp-Blunt</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14008-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin 0.05%</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>25300054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vimentin</td>
			<td>abcam</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of mouse interstitial valve cells to study the calcification of the aortic valve in vitro

הסתיידות של תאי שסתום אבי העורקים הוא סימן ההיכר של היצרות אבי העורקים והוא קשור פיברוזיס סף שסתום. תאים ביניים שסתום (VICs) לשחק תפקיד חשוב בתהליך הסתיידות היצרות אבי העורקים באמצעות ההפעלה של תוכנית הדיפרנציאציה שלהם לתאים דמויי אוסטאובלסט. עכבר VICs הם כלי במבחנה טובה עבור ההבהרה של מסלולי איתות המניעים מינרליזציה של תא שסתום אבי העורקים. השיטה המתוארת כאן, בשימוש מוצלח על ידי מחברים אלה, מסבירה כיצד להשיג תאים מבודדים טריים. הליך קולגנאז דו-שלטי בוצע עם 1 מ"ג/מ"ל ו-4.5 מ"ג/מ"ל. השלב הראשון הוא חיוני כדי להסיר את שכבת התא אנדותל ולהימנע כל זיהום. הדגירה השנייה של קולגנאז היא להקל על נדידת אח"מים מהרקמה לצלחת. בנוסף, נדון הליך הכתמת אימונופלואורסצנטיות לאפיון הפנוטיפ של תאי שסתום העכבר המבודדים. יתר על כן, בדיקת הסתיידות בוצעה במבחנה באמצעות הליך מדידת ריאגנט סידן והכתמה אדומה alizarin. השימוש בתרבית הראשית של תאי שסתום העכבר חיוני לבדיקת מטרות פרמקולוגיות חדשות לעיכוב מינרליזציה של תאים במבחנה.

כמו שסתומי אבי העורקים מורין הם בדרך כלל 1 מ"מ קוטר, לפחות שלושה שסתומים חייב להיות מלומה כדי לאסוף מיליון תאים קיימא עבור הליכים ניסיוניים שונים. השלבים השונים של תהליך הבידוד של VIC מוצגים באיור 1 ובאיור 2. כפי שקשה לגרד באופן ידני את רקמת השסתום, עדיף להשתמש ?...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro at JoVE.com

Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro

מאמר זה מתאר את הבידוד של תאי שסתום אבי העורקים עכבר על ידי הליך collagenase דו שלבי. תאי שסתום עכבר מבודדים חשובים לביצוע מבדקים שונים, כגון בדיקה זו של הסתיידות במבחנה, ולחקירת המסלולים המולקולריים המובילים מינרליזציה שסתום אבי העורקים.

בידוד של תאי שסתום ביניים עכבר ללמוד את הסתיידות של שסתום אבי העורקים במבחנה

The calcification of aortic valve cells is the hallmark of aortic stenosis and is associated with valve cusp fibrosis. Valve interstitial cells (VICs) ...

השימוש בתאי שסתום עכבר מבודדים חיוני כדי לחקור את מסלול האיתות המוביל להסתיידות שסתום בשימוש בתאים מהונדסים גנטית מעכברים מהונדסים. העיכול הדו-שלטי הוא שיטה מהירה ויעילה. החלק המאתגר ביותר בפרוטוקול זה הוא בידוד שסתום אבי העורקים משמונה שבועות עכברים.עדיף להתאמן על עכברים מבוגרים כדי לדמיין את שסתום אבי העורקים טוב יותר. לפני תחילת הניסוי, לנקות ולחטא את כל המכשירים הכירורגיים ואת סביבת העבודה עם 70% אתנול ו autoclave המכשירים כירורגיים במשך 30 דקות. כאשר ההתקנה הראשונית מוכנה, להתחיל עם ניקוי החזה ואת אזור הבטן של עכבר מורדם בן שמונה שבועות באמצעות אתנול.באמצעות מספריים, לפתוח את הבטן ואת החזה של העכבר, ולאחר מכן לחתוך בין האטריום השמאלי ואת החדר השמאלי עם מספריים כירורגיים קטנים. הסר דם מהלב על ידי זלוף 10 מיליליטר של PBS קר לחתוך את הלב, שמירה על שלושה מילימטרים של אב העורקים עולה. תחת סטרימוקרופ, לנתח את שסתום אבי העורקים על ידי חיתוך הלב אופקית באמצע החדרים וחיתוך החדר השמאלי לכיוון אבי העורקים, ולאחר מכן לנתח בזהירות את שסתום אבי העורקים.איחדו את השסתומים בצלחת קטנה של תרבית רקמות 35 מ"מ. לשטוף את השסתומים המבודדים בצלחת תרבית תאים 75 מיליליטר עם חמישה מיליליטר של HEPES קר מוכן טרי 10 מילימולר בתוספת אנטיביוטיקה ודגרה בחמישה מיליליטר של קולגנאז סוג אחד במשך 30 דקות ב 37 מעלות צלזיוס עם רעד מתמשך. לאחר הדגירה, צנטריפוגה הצינור במשך חמש דקות, ב 150 פעמים G ולשטוף את הכדור פעם אחת עם שני מיליליטר של HEPES 10 מילימולר עם מערבולת במהירות גבוהה במשך 30 שניות.לאסוף את המתלים הנובעים מן הצינור לתוך צלחת תרבות 35 מ"מ ולהשתמש פינצטה דקה להעביר בזהירות את שברי הרקמה לתוך צינור טרי. ואז לדגור את הכדור בצינור 15 מיליליטר עם חמישה מיליליטר של קולגנאז סוג אחד ב 37 מעלות צלזיוס תחת תסיסה מתמשכת במשך 35 דקות. הפרד את התאים על ידי שימוש חוזר עם פיפטה אחת מיליליטר וצנטריפוגה ב 150 פעמים G במשך חמש דקות בארבע מעלות צלזיוס.נקה את התאים פעמיים על ידי שימוש חוזר בגלולה המופרדת בשני מיליליטרים של DMEM מלא וצנטריפוגה ב 150 פעמים G במשך חמש דקות בארבע מעלות צלזיוס. לציפוי, resuspend הכדור במיליליטר אחד של מדיום שלם ולהוסיף אותו לבאר אחת של צלחת תרבית התא שש היטב בכמות מינימלית של בינוני. שמור את הלוחות ללא הפרעה ב 37 מעלות צלזיוס עם 5% פחמן דו חמצני.לאחר שלושה ימים של דגירה, לאשר צמיחה קרוב לפסולת הרקמה על ידי התבוננות בתאים מתחת למיקרוסקופ. פעם 1, 000 תאים נראים, בזהירות להסיר את פסולת הרקמה עם פינצטה autoclaved ולשנות את המדיום. Trypsinize התאים לאחר שהגיע 70% conהשפעה ולהעביר אותם צלחת תרבית רקמות 75 מיליליטר.לפני תחילת ההסתה, נקו את מכסה המנוע הבטיחות הביולוגית עם 70% אתנול וחמימו את ה-DMEM בינוני עד 37 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, זרע 100, 000 תאים לכל תנאי לתוך שש לוחות באר ב DMEM מלא ותרבות ב 37 מעלות צלזיוס. לאחר 24 שעות, להחליף את המדיום supernatant עם בינוני מסויד ודגורת התאים במשך שבעה ימים ב 37 מעלות צלזיוס, להחליף את המדיום ביום השלישי.לאחר שבעה ימים, למדוד את ריכוז הסידן בצלחת 96 היטב באמצעות ריאגנט ארסנזו השלישי ולרשום את הספיגה ב 650 ננומטר. בניתוח הייצוגי, פנוטיפים שונים של תאי שסתום זוהו עם כתמים חיסוניים לאחר שלושה עד חמישה ימים של תרבות. עכבר VIC של מבוטא vimentin ואלפא SMA, הסמנים המשמעותיים של תאי שסתום.בנוסף, מכתמים אימונופלואורסצנטיים CD31 אימתו ללא זיהום מתאי אנדותל בתרבית VIC. Culturing VIC של עם פוספט עשיר הסתיידות מדיום לעורר הסתיידות בתאים, עוד יותר אישר עם כתמים חיוביים אדומים עבור צמתי סידן. הפרוטוקול מבוסס על מאגר של שלושה עד חמישה שסתומים מעכברים שונים.השימוש בהמלטה ושלושה שכפולים ביולוגיים שונים חשוב כדי לאמת את הממצאים. השימוש בתאי שסתום עכבר חיוני כדי להבין את המסלול המולקולרי המוביל היצרות אבי העורקים על ידי בידוד תאים מעכברים מהונדסים. פרוטוקול זה שימש בעבר כדי לחקור את המשמעות של מסלול קולטן רגרסיה מינרלית של שסתום אבי העורקים מסויד.

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro

Testing Visual Sensitivity to the Speed and Direction of Motion in Lizards

בדיקת רגישות חזותית על מהירות ועל כיוון התנועה של לטאות

Testing visual sensitivity in any species provides basic information regarding behaviour, evolution, and ecology. However, testing specific features of ...

Isolation of Retinal Stem Cells from the Mouse Eye

בידוד של גזע תאים רשתית העין של העכבר

The adult mouse retinal stem cell (RSC) is a rare quiescent cell found within the ciliary epithelium (CE) of the mammalian eye1,2,3. The CE is made up of ...

Visualization of the Interstitial Cells of Cajal (ICC) Network in Mice

Visualization of the Interstitial Cells of Cajal ICC Network in Mice

ויזואליזציה של תאים ביניים של רשת (ICC) קחאל ב עכברים

The interstitial cells of Cajal (ICC) are mesenchymal derived "pacemaker cells" of the gastrointestinal (GI) tract that generate spontaneous slow waves ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

דור של עכברים שמקורם בתאי גזע pluripotent מושרים

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

התמיינות של תאי העור של עכבר יילוד נגזר גזע לתאים דמוי נבט<em&gt; במבחנה</em

Studying  germ cell formation and differentiation has traditionally been very difficult  due to low cell numbers and their location deep within developing ...

Isolation of Murine Valve Endothelial Cells

בידוד של תאי Murine Valve האנדותל

Normal valve structures consist of stratified layers of specialized extracellular matrix (ECM) interspersed with valve interstitial cells (VICs) and ...

Protein Isolation from the Developing Embryonic Mouse Heart Valve Region

בידוד חלבון מהעכבר עוברי שסתום לב אזור פיתוח

Western blot analysis is a commonly employed technique for detecting and quantifying protein levels. However, for small tissue samples, this analysis ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

בידוד והתרבות ראשית של לתאי אנדותל עכבר אב העורקים

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation and 3D Collagen Sandwich Culture of Primary Mouse Hepatocytes to Study the Role of Cytoskeleton in Bile Canalicular Formation In Vitro

בידוד וכריך קולגן 3D תרבות של העכבר הראשי Hepatocytes כדי ללמוד את התפקיד של שלד ציטוזה היווצרות של המרה בתוך מחוץ לגופית

Hepatocytes are the central cells of the liver responsible for its metabolic function. As such, they form a uniquely polarized epithelium, in which two or ...

Isolation of Human Primary Valve Cells for In vitro Disease Modeling

בידוד תאי שסתום ראשוניים אנושיים למידול מחלות חוץ גופיות

Calcific aortic valve disease (CAVD) is present in nearly a third of the elderly population. Thickening, stiffening, and calcification of the aortic valve ...