Name: isolation of mouse interstitial valve cells to study the calcification of the aortic valve in vitro
Uploaded: 2021-05-10T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro at JoVE.com

NOTA: Tutte le procedure animali qui descritte sono state approvate dalla Icahn School of Medicine presso il nucleo istituzionale del Monte Sinai e il comitato per l'uso.
1. Preparazione prima dell'isolamento delle cellule valvolare dai topi adulti
<ol><li>Pulire e sterilizzare tutti gli strumenti chirurgici mostrati nella figura 1A utilizzando il 70% v/v di etanolo e successivamente autoclavandoli per 30 minuti pulire lo spazio di lavoro chirurgico con il 70% d...

<ol>
	<li>Rostagno, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+valve+disease+in+elderly.">Heart valve disease in elderly.</a> World Journal of Cardiology. 11 (2), 71-83 (2019).</li><li>Stewart, B. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+factors+associated+with+calcific+aortic+valve+disease.+Cardiovascular+Health+Study.">Clinical factors associated with calcific aortic valve disease. Cardiovascular Health Study.</a> Journal of the American College of Cardiology. 29 (3), 630-634 (1997).</li><li>Marquis-Gravel, G., Redfors, B., Leon, M. B., G&#233;n&#233;reux, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medical+treatment+of+aortic+stenosis.">Medical treatment of aortic stenosis.</a> Circulation. 134 (22), 1766-1784 (2016).</li><li>Spitzer, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortic+stenosis+and+heart+failure:+disease+ascertainment+and+statistical+considerations+for+clinical+trials.">Aortic stenosis and heart failure: disease ascertainment and statistical considerations for clinical trials.</a> Cardiac Failure Review. 5 (2), 99-105 (2019).</li><li>Hinton, R. B., Yutzey, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+valve+structure+and+function+in+development+and+disease.">Heart valve structure and function in development and disease.</a> Annual Review of Physiology. 73, 29-46 (2011).</li><li>Simionescu, D. T., Chen, J., Jaeggli, M., Wang, B., Liao, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Form+follows+function:+advances+in+trilayered+structure+replication+for+aortic+heart+valve+tissue+engineering.">Form follows function: advances in trilayered structure replication for aortic heart valve tissue engineering.</a> Journal of Healthcare Engineering. 3 (2), 179-202 (2012).</li><li>Bouchareb, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+platelets+promote+an+osteogenic+programme+and+the+progression+of+calcific+aortic+valve+stenosis.">Activated platelets promote an osteogenic programme and the progression of calcific aortic valve stenosis.</a> European Heart Journal. 40 (17), 1362-1373 (2019).</li><li>Rutkovskiy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Valve+interstitial+cells:+the+key+to+understanding+the+pathophysiology+of+heart+valve+calcification.">Valve interstitial cells: the key to understanding the pathophysiology of heart valve calcification.</a> Journal of the American Heart Association. 6 (9), (2017).</li><li>Bosse, Y., Mathieu, P., Pibarot, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomics:+the+next+step+to+elucidate+the+etiology+of+calcific+aortic+valve+stenosis.">Genomics: the next step to elucidate the etiology of calcific aortic valve stenosis.</a> Journal of the American College of Cardiology. 51 (14), 1327-1336 (2008).</li><li>Drexler, H. G., Uphoff, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mycoplasma+contamination+of+cell+cultures:+Incidence,+sources,+effects,+detection,+elimination,+prevention.">Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention.</a> Cytotechnology. 39 (2), 75-90 (2002).</li><li>Richards, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Side-specific+endothelial-dependent+regulation+of+aortic+valve+calcification:+interplay+of+hemodynamics+and+nitric+oxide+signaling.">Side-specific endothelial-dependent regulation of aortic valve calcification: interplay of hemodynamics and nitric oxide signaling.</a> American Journal of Pathology. 182 (5), 1922-1931 (2013).</li><li>Bouchareb, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+strain+induces+the+production+of+spheroid+mineralized+microparticles+in+the+aortic+valve+through+a+RhoA/ROCK-dependent+mechanism.">Mechanical strain induces the production of spheroid mineralized microparticles in the aortic valve through a RhoA/ROCK-dependent mechanism.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 67, 49-59 (2014).</li><li>Lerman, D. A., Prasad, S., Alotti, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcific+aortic+valve+disease:+molecular+mechanisms+and+therapeutic+approaches.">Calcific aortic valve disease: molecular mechanisms and therapeutic approaches.</a> European Cardiology. 10 (2), 108-112 (2015).</li><li>Janssen, J. W., Helbing, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arsenazo+III:+an+improvement+of+the+routine+calcium+determination+in+serum.">Arsenazo III: an improvement of the routine calcium determination in serum.</a> European Journal of Clinical Chemistry and Clinical Biochemistry. 29 (3), 197-201 (1991).</li><li>Ortlepp, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lower+serum+calcium+levels+are+associated+with+greater+calcium+hydroxyapatite+deposition+in+native+aortic+valves+of+male+patients+with+severe+calcific+aortic+stenosis.">Lower serum calcium levels are associated with greater calcium hydroxyapatite deposition in native aortic valves of male patients with severe calcific aortic stenosis.</a> Journal of Heart Valve Disease. 15 (4), 502-508 (2006).</li></ol>

Questo articolo presenta un protocollo dettagliato di isolamento delle celle della valvola del mouse per le impostazioni cultura primarie. Tre valvole aortiche di topi di 8 settimane sono state raggruppate per ottenere un numero adeguato di cellule. Inoltre, questo protocollo descrive la caratterizzazione del fenotipo VIC e il saggio di mineralizzazione in vitro . Il metodo è stato adattato dal protocollo precedentemente descritto da Mathieu etal.
Dur...

La malattia della valvola aortica calcificata (CAVD) è la malattia cardiaca valvulare più diffusa nelle popolazioni occidentali, che colpisce quasi il 2,5% degli individui anziani di età superiore ai 65anni 1. CAVD colpisce oltre sei milioni di americani ed è associato a cambiamenti nelle proprietà meccaniche dei volantini che compromettono il normale flusso sanguigno1,2. Attualmente, non esiste un trattamento farmacologico per fermare la progressione della malattia o attivare la regressione minerale. L'unica terapia efficace per trattare cavd è la sostituzione della valvola aortica con chirurgia o sostituzione della valvola aortica transcatetere3. È quindi indispensabile studiare i meccanismi molecolari che portano alla mineralizzazione delle valvole per identificare nuovi obiettivi farmacologici. In effetti, la stenosi aortica non trattata ha diverse conseguenze avverse come la disfunzione ventricolare sinistra e l'insufficienzacardiaca 4.
La valvola aortica è costituita da tre strati noti come fibrosa, spongiosa e ventricolare, che contengono VIC come cellula predominante ditipo 5. La fibrosa e il ventricolare sono coperti da uno strato di cellule endoteliali vascolari (CCI)5. I HC regolano la permeabilità delle cellule infiammatorie e dei segnali paracrini. L'aumento dello stress meccanico può influire sull'integrità dei CCI e disturbare l'omeostasi della valvola aortica, portando all'invasione infiammatoria dellecellule 6. Le analisi della microscopia elettronica a scansione hanno mostrato endotelio interrotto in una valvola aortica calcificata umana7. 
Le analisi istologiche del tessuto calcificato rivelano la presenza di osteoblasti e osteoclasti. Inoltre, è stata osservata la differenziazione osteogenica dei CCI sia in vitro che nel tessuto valvolareumano 8. Questo processo è orchestrato principalmente dal fattore di trascrizione correlato a Runt 2 (Runx2) e dalle proteine morfogenetiche ossee (BMP)8,9.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3 mm cutting edge scissors</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>15000-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-alpha smooth muscle Actin antibody</td>
			<td>abcam</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-mouse, Alexa Fluor 488 conjugate</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>4412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arsenazo-III reagent set</td>
			<td>POINT SCIENTIFIC</td>
			<td>C7529-500</td>
			<td>a Kit to measure the concentration of calcium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonn Scissors</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14184-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium hydroxide</td>
			<td>SIGMA -Aldrich 31219</td>
			<td>31219</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD31</td>
			<td>Novusbio</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase type I&#160; (125 units/mg)</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>17018029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Tthermofisher</td>
			<td>11965092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra fine graefe forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Gibco 16000044</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>F.S.T Dumont</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCl</td>
			<td>SIGMA-ALDRICH</td>
			<td>H1758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES 1 M solution</td>
			<td>STEMCELLS TECHNOLOGIES</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine 100x</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>25030081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mycozap</td>
			<td>Lanza</td>
			<td>VZA-2011</td>
			<td>Mycoplasma elimination reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS 10x</td>
			<td>SIGMA-ALDRICH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penecillin streptomycin 100x</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>10378016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate 100 mM</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>11360070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard pattern forceps</td>
			<td>&#160;F.S.T</td>
			<td>11000-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors - Sharp-Blunt</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14008-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin 0.05%</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>25300054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vimentin</td>
			<td>abcam</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of mouse interstitial valve cells to study the calcification of the aortic valve in vitro

La calcificazione delle cellule della valvola aortica è il segno distintivo della stenosi aortica ed è associata alla fibrosi della cuspide valvolare. Le cellule interstiziali valvolari (CCI) svolgono un ruolo importante nel processo di calcificazione nella stenosi aortica attraverso l'attivazione del loro programma di dedifferenziazione alle cellule simili agli osteoblasti. I VIC del topo sono un buon strumento in vitro per la spiegazione delle vie di segnalazione che guidano la mineralizzazione della cella della valvola aortica. Il metodo descritto nel presente documento, utilizzato con successo da questi autori, spiega come ottenere cellule appena isolate. È stata eseguita una procedura in due fase di collagenasi con 1 mg/mL e 4,5 mg/mL. Il primo passo è fondamentale per rimuovere lo strato cellulare endoteliale ed evitare qualsiasi contaminazione. La seconda incubazione di collagenasi è facilitare la migrazione dei CCI dal tessuto alla piastra. Inoltre, viene discussa una procedura di colorazione dell'immunofluorescenza per la caratterizzazione del fenotipo delle cellule isolate della valvola del topo. Inoltre, il saggio di calcificazione è stato eseguito in vitro utilizzando la procedura di misurazione del reagente del calcio e la colorazione rossa di alizarina. L'uso della coltura primaria delle celle della valvola del topo è essenziale per testare nuovi obiettivi farmacologici per inibire la mineralizzazione cellulare in vitro.

Poiché le valvole aortiche murine hanno in genere un diametro di 1 mm, almeno tre valvole devono essere raggruppate per raccogliere un milione di celle vitali per diverse procedure sperimentali. I diversi passaggi del processo di isolamento VIC sono riportati nella figura 1 e nella figura 2. Poiché è difficile raschiare manualmente il tessuto della valvola, è preferibile utilizzare la sollecitazione di taglio creata dal vortice per rimuovere i CCI. In effett...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro at JoVE.com

Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro

Questo articolo descrive l'isolamento delle cellule della valvola aortica del topo con una procedura in due fase di collagenasi. Le cellule isolate della valvola del topo sono importanti per eseguire diversi saggi, come questo saggio di calcificazione in vitro, e per studiare le vie molecolari che portano alla mineralizzazione della valvola aortica.

Isolamento delle celle della valvola interstiziale del topo per studiare la calcificazione della valvola aortica in vitro

The calcification of aortic valve cells is the hallmark of aortic stenosis and is associated with valve cusp fibrosis. Valve interstitial cells (VICs) ...

L'uso di cellule isolate della valvola del topo è essenziale per studiare la via di segnalazione che porta alla calcificazione delle valvole nell'uso di cellule geneticamente modificate da topi transgenici. La digestione in due fase è un metodo rapido ed efficiente. La parte più impegnativa di questo protocollo è l'isolamento della valvola aortica da topi di otto settimane.È meglio esercitarsi sui topi più anziani per visualizzare meglio la valvola aortica. Prima di iniziare l'esperimento, pulire e sterilizzare tutti gli strumenti chirurgici e lo spazio di lavoro con 70%etanolo e autoclave gli strumenti chirurgici per 30 minuti. Quando la configurazione iniziale è pronta, inizia con la pulizia del torace e della regione dell'addome di un topo eutanasiato di otto settimane usando l'etanolo.Usando le forbici, aprire l'addome e il petto del topo, quindi tagliare tra l'atrio sinistro e il ventricolo sinistro con piccole forbici chirurgiche. Rimuovere il sangue dal cuore perfondendo 10 millilitri di PBS freddo e tagliare il cuore, mantenendo tre millimetri dell'aorta ascendente. Sotto uno stereomicroscopio, sezionare la valvola aortica tagliando il cuore orizzontalmente al centro dei ventricoli e tagliando il ventricolo sinistro verso l'aorta, quindi sezionare attentamente la valvola aortica.Mettere insieme le valvole in un piccolo piatto di coltura tissutale di 35 millimetri. Lavare le valvole isolate in un piatto di coltura cellulare da 75 millilitri con cinque millilitri di HEPES freddo da 10 millimolare appena preparato integrato con antibiotici e incubare in cinque millilitri di collagenasi di tipo uno per 30 minuti a 37 gradi Celsius con scuotimento continuo. Dopo l'incubazione, centrifugare il tubo per cinque minuti, a 150 volte G e lavare il pellet una volta con due millilitri di HEPES da 10 millimolare con vortice ad alta velocità per 30 secondi.Raccogliere la sospensione risultante dal tubo in un piatto di coltura di 35 millimetri e utilizzare una pinzetta sottile per trasferire con cura i frammenti di tessuto in un tubo fresco. Quindi incubare il pellet in un tubo da 15 millilitri con cinque millilitri di collagenasi di tipo uno a 37 gradi Celsius sotto agitazione continua per 35 minuti. Separare le cellule riutilizzando con una pipetta millilitro e centrifugare a 150 volte G per cinque minuti a quattro gradi Celsius.Pulire le cellule due volte rimospendendo il pellet separato in due millilitri di DMEM completo e centrifugando a 150 volte G per cinque minuti a quattro gradi Celsius. Per la placcatura, risospendare il pellet in un millilitro di mezzo completo e aggiungerlo a un pozzo di un piatto di coltura a sei cellule di pozzo in una quantità minima di mezzo. Mantenere le piastre indisturbate a 37 gradi Celsius con 5% di anidride carbonica.Dopo tre giorni di incubazione, confermare la crescita vicino ai detriti tissutali osservando le cellule al microscopio. Una volta che 1.000 cellule sono visibili, rimuovere con cura i detriti del tessuto con pinzette autoclavate e cambiare il mezzo. Tripinare le cellule dopo aver raggiunto il 70% di confluenza e trasferirle in un piatto di coltura tissutale da 75 millilitri.Prima di iniziare il test, pulire la cappa di biosicurezza con 70%etanolo e riscaldare il mezzo DMEM a 37 gradi Celsius. Successivamente, semina 100.000 cellule per condizione in sei piastre di pozzo in DMEM completo e coltura a 37 gradi Celsius. Dopo 24 ore, sostituire il mezzo supernatante con il mezzo calcificatore e incubare le cellule per sette giorni a 37 gradi Celsius, sostituendo il mezzo il terzo giorno.Dopo sette giorni, misurare la concentrazione di calcio in una piastra di 96 pozza di calcio usando il reagente Arsenazo III e registrando l'assorbanza a 650 nanometri. Nell'analisi rappresentativa, vari fenotipi di cellule valvolari sono stati identificati con colorazione immunofluorescente dopo tre o cinque giorni di coltura. La vimentina espressa da Mouse VIC e alfa SMA, i marcatori significativi delle celle valvolari.Inoltre, la colorazione immunofluorescente CD31 non ha verificato alcuna contaminazione da cellule endoteliali nella coltura VIC. Coltivare VIC con mezzo calcificatore ricco di fosfati stimola una calcificazione nelle cellule, ulteriormente confermata con la colorazione rosso positiva per i nodi di calcio. Il protocollo si basa su un pool di tre o cinque valvole da diversi topi.L'uso del compagno di lettiera e di tre diverse repliche biologiche è importante per convalidare i risultati. L'uso di cellule della valvola del topo è vitale per comprendere la via molecolare che porta alla stenosi aortica isolando le cellule dai topi transgenici. Questo protocollo è stato usato in precedenza per indagare l'implicazione della via del recettore nella regressione minerale della valvola aortica calcificata.

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro

Testing Visual Sensitivity to the Speed and Direction of Motion in Lizards

Test di sensibilità visiva alla velocità e direzione del movimento in lucertole

Testing visual sensitivity in any species provides basic information regarding behaviour, evolution, and ecology. However, testing specific features of ...

Ricerca

Biologia

Isolation of Retinal Stem Cells from the Mouse Eye

Isolamento di cellule staminali della retina dalla Eye mouse

The adult mouse retinal stem cell (RSC) is a rare quiescent cell found within the ciliary epithelium (CE) of the mammalian eye1,2,3. The CE is made up of ...

Visualization of the Interstitial Cells of Cajal (ICC) Network in Mice

Visualization of the Interstitial Cells of Cajal ICC Network in Mice

Visualizzazione delle cellule interstiziali di Cajal (ICC) di rete in topi

The interstitial cells of Cajal (ICC) are mesenchymal derived "pacemaker cells" of the gastrointestinal (GI) tract that generate spontaneous slow waves ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

Generazione di topi derivati ​​da cellule staminali pluripotenti indotte

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

Differenziazione del neonato mouse pelle cellule staminali derivate in cellule germinali-simili<em&gt; In vitro</em

Studying  germ cell formation and differentiation has traditionally been very difficult  due to low cell numbers and their location deep within developing ...

Isolation of Murine Valve Endothelial Cells

Isolamento di cellule murine endoteliali Valve

Normal valve structures consist of stratified layers of specialized extracellular matrix (ECM) interspersed with valve interstitial cells (VICs) and ...

Protein Isolation from the Developing Embryonic Mouse Heart Valve Region

Proteine ​​Isolamento dal Sviluppare embrionali di topo Cuore Valve Regione

Western blot analysis is a commonly employed technique for detecting and quantifying protein levels. However, for small tissue samples, this analysis ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

Isolamento e colture primarie di cellule di topo aortica endoteliali

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation and 3D Collagen Sandwich Culture of Primary Mouse Hepatocytes to Study the Role of Cytoskeleton in Bile Canalicular Formation In Vitro

Isolamento e 3D Collagen Sandwich Cultura del topo primario Epatociti per studiare il ruolo del citoscheletro nella formazione canalicolare bile in vitro

Hepatocytes are the central cells of the liver responsible for its metabolic function. As such, they form a uniquely polarized epithelium, in which two or ...

Isolation of Human Primary Valve Cells for In vitro Disease Modeling

Isolamento di cellule valvolari primarie umane per la modellazione di malattie in vitro

Calcific aortic valve disease (CAVD) is present in nearly a third of the elderly population. Thickening, stiffening, and calcification of the aortic valve ...