Name: isolation of mouse interstitial valve cells to study the calcification of the aortic valve in vitro
Uploaded: 2021-05-10T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro at JoVE.com

NOT: Burada açıklanan tüm hayvan prosedürleri Mount Sinai kurumsal çekirdek ve kullanım komitesinde Icahn Tıp Fakültesi tarafından onaylanmıştır.
1. Yetişkin farelerden valf hücresi izolasyonundan önce hazırlık
<ol><li>Şekil 1A'da gösterilen tüm cerrahi aletleri % 70 v/v etanol kullanarak ve daha sonra 30 dakika boyunca otomatik olarak kapatarak temizleyin ve sterilize edin.</li>
	<li>10 mm HEPES'in 50 mL'sine 500 μL penisilin-streptomisiin ...

<ol>
	<li>Rostagno, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+valve+disease+in+elderly.">Heart valve disease in elderly.</a> World Journal of Cardiology. 11 (2), 71-83 (2019).</li><li>Stewart, B. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+factors+associated+with+calcific+aortic+valve+disease.+Cardiovascular+Health+Study.">Clinical factors associated with calcific aortic valve disease. Cardiovascular Health Study.</a> Journal of the American College of Cardiology. 29 (3), 630-634 (1997).</li><li>Marquis-Gravel, G., Redfors, B., Leon, M. B., G&#233;n&#233;reux, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medical+treatment+of+aortic+stenosis.">Medical treatment of aortic stenosis.</a> Circulation. 134 (22), 1766-1784 (2016).</li><li>Spitzer, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortic+stenosis+and+heart+failure:+disease+ascertainment+and+statistical+considerations+for+clinical+trials.">Aortic stenosis and heart failure: disease ascertainment and statistical considerations for clinical trials.</a> Cardiac Failure Review. 5 (2), 99-105 (2019).</li><li>Hinton, R. B., Yutzey, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+valve+structure+and+function+in+development+and+disease.">Heart valve structure and function in development and disease.</a> Annual Review of Physiology. 73, 29-46 (2011).</li><li>Simionescu, D. T., Chen, J., Jaeggli, M., Wang, B., Liao, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Form+follows+function:+advances+in+trilayered+structure+replication+for+aortic+heart+valve+tissue+engineering.">Form follows function: advances in trilayered structure replication for aortic heart valve tissue engineering.</a> Journal of Healthcare Engineering. 3 (2), 179-202 (2012).</li><li>Bouchareb, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+platelets+promote+an+osteogenic+programme+and+the+progression+of+calcific+aortic+valve+stenosis.">Activated platelets promote an osteogenic programme and the progression of calcific aortic valve stenosis.</a> European Heart Journal. 40 (17), 1362-1373 (2019).</li><li>Rutkovskiy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Valve+interstitial+cells:+the+key+to+understanding+the+pathophysiology+of+heart+valve+calcification.">Valve interstitial cells: the key to understanding the pathophysiology of heart valve calcification.</a> Journal of the American Heart Association. 6 (9), (2017).</li><li>Bosse, Y., Mathieu, P., Pibarot, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomics:+the+next+step+to+elucidate+the+etiology+of+calcific+aortic+valve+stenosis.">Genomics: the next step to elucidate the etiology of calcific aortic valve stenosis.</a> Journal of the American College of Cardiology. 51 (14), 1327-1336 (2008).</li><li>Drexler, H. G., Uphoff, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mycoplasma+contamination+of+cell+cultures:+Incidence,+sources,+effects,+detection,+elimination,+prevention.">Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention.</a> Cytotechnology. 39 (2), 75-90 (2002).</li><li>Richards, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Side-specific+endothelial-dependent+regulation+of+aortic+valve+calcification:+interplay+of+hemodynamics+and+nitric+oxide+signaling.">Side-specific endothelial-dependent regulation of aortic valve calcification: interplay of hemodynamics and nitric oxide signaling.</a> American Journal of Pathology. 182 (5), 1922-1931 (2013).</li><li>Bouchareb, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+strain+induces+the+production+of+spheroid+mineralized+microparticles+in+the+aortic+valve+through+a+RhoA/ROCK-dependent+mechanism.">Mechanical strain induces the production of spheroid mineralized microparticles in the aortic valve through a RhoA/ROCK-dependent mechanism.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 67, 49-59 (2014).</li><li>Lerman, D. A., Prasad, S., Alotti, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcific+aortic+valve+disease:+molecular+mechanisms+and+therapeutic+approaches.">Calcific aortic valve disease: molecular mechanisms and therapeutic approaches.</a> European Cardiology. 10 (2), 108-112 (2015).</li><li>Janssen, J. W., Helbing, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arsenazo+III:+an+improvement+of+the+routine+calcium+determination+in+serum.">Arsenazo III: an improvement of the routine calcium determination in serum.</a> European Journal of Clinical Chemistry and Clinical Biochemistry. 29 (3), 197-201 (1991).</li><li>Ortlepp, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lower+serum+calcium+levels+are+associated+with+greater+calcium+hydroxyapatite+deposition+in+native+aortic+valves+of+male+patients+with+severe+calcific+aortic+stenosis.">Lower serum calcium levels are associated with greater calcium hydroxyapatite deposition in native aortic valves of male patients with severe calcific aortic stenosis.</a> Journal of Heart Valve Disease. 15 (4), 502-508 (2006).</li></ol>

Bu makalede, birincil kültür için fare valfi hücre yalıtımının ayrıntılı bir protokolü sunulmaktadır. 8 haftalık farelerden alınan üç aort kapakçığı, yeterli sayıda hücre elde etmek için birikti. Ek olarak, bu protokol VIC fenotipinin karakterizasyonu ve in vitro mineralizasyon testini açıklar. Yöntem, Mathieu ve ark.7'den daha önce açıklanan protokolden uyarlanmıştır.
Aort kapaklarının izolasyonu sırasında, hücrel...

Kireçlenmiş aort kapak hastalığı (CAVD), 65 yaş üstü yaşlı bireylerin yaklaşık% 2,5'ini etkileyen batı popülasyonlarında en yaygın valvüler kalphastalığıdır. CAVD altı milyondan fazla Amerikalıyı etkiler ve normal kan akışını bozan broşürlerin mekanik özelliklerindeki değişikliklerle ilişkilidir1,2. Şu anda hastalığın ilerlemesini durdurmak veya mineral gerilemesini aktive etmek için farmakolojik bir tedavi yoktur. CAVD tedavisinde tek etkili tedavi cerrahi veya transktheter aort kapak replasmanı ile aort kapak değişimi3' dür. Bu nedenle, yeni farmakolojik hedefleri belirlemek için kapak mineralizasyonuna yol açan moleküler mekanizmaların araştırılması zorunludur. Gerçekten de, tedavi edilmeyen aort darlığı sol ventrikül disfonksiyonu ve kalp yetmezliği gibi birkaç olumsuz sonucu vardır4.
Aort kapakçığı fibrosa, spongiosa ve ventrikülaris olarak bilinen ve vic'leri baskın hücre tipi5olarak içeren üç katmandan oluşur. Fibrosa ve ventriküller bir damar endotel hücreleri (VC) tabakası ile kaplıdır5. GC'ler, enflamatuar hücrelerin ve parakrin sinyallerin geçirgenliğini düzenler. Artan mekanik stres, VC'lerin bütünlüğünü etkileyebilir ve aort kapakçığının homeostazını bozabilir ve enflamatuar hücre istilasına yol açabilir6. Taramalı elektron mikroskopi analizleri, insan kireçlenmiş aort kapağında endotelin bozulduğunu göstermiştir7.
Kireçlenmiş dokunun histolojik analizleri osteoblastların ve osteoklastların varlığını ortaya koymaktadır. Ayrıca, VC'lerin osteojenik farklılaşması hem in vitro hem de insan kapak dokusunda gözlenmiştir8. Bu işlem esas olarak Runt ile ilgili transkripsiyon faktörü 2 (Runx2) ve kemik morfogenetik proteinleri (BMP'ler) 8,9tarafından düzenlenir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3 mm cutting edge scissors</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>15000-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-alpha smooth muscle Actin antibody</td>
			<td>abcam</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-mouse, Alexa Fluor 488 conjugate</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>4412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arsenazo-III reagent set</td>
			<td>POINT SCIENTIFIC</td>
			<td>C7529-500</td>
			<td>a Kit to measure the concentration of calcium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonn Scissors</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14184-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium hydroxide</td>
			<td>SIGMA -Aldrich 31219</td>
			<td>31219</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD31</td>
			<td>Novusbio</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase type I&#160; (125 units/mg)</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>17018029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Tthermofisher</td>
			<td>11965092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra fine graefe forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Gibco 16000044</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>F.S.T Dumont</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCl</td>
			<td>SIGMA-ALDRICH</td>
			<td>H1758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES 1 M solution</td>
			<td>STEMCELLS TECHNOLOGIES</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine 100x</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>25030081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mycozap</td>
			<td>Lanza</td>
			<td>VZA-2011</td>
			<td>Mycoplasma elimination reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS 10x</td>
			<td>SIGMA-ALDRICH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penecillin streptomycin 100x</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>10378016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate 100 mM</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>11360070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard pattern forceps</td>
			<td>&#160;F.S.T</td>
			<td>11000-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors - Sharp-Blunt</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14008-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin 0.05%</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>25300054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vimentin</td>
			<td>abcam</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of mouse interstitial valve cells to study the calcification of the aortic valve in vitro

Aort kapak hücrelerinin kireçlenmesi aort darlığı ayırt edici özelliğidir ve kapak cusp fibrozisi ile ilişkilidir. Kapak geçiş hücreleri (VC'ler), aort darlığında kireçlenme sürecinde osteoblast benzeri hücrelere ayırıcı programlarının aktivasyonu ile önemli bir rol oynar. Fare VIC'leri, aort kapak hücresinin mineralizasyonunu yönlendiren sinyal yollarının aydınlatılması için iyi bir in vitro araçtır. Burada açıklanan yöntem, bu yazarlar tarafından başarıyla kullanılan, taze izole hücrelerin nasıl elde edildiğini açıklar. 1 mg/mL ve 4.5 mg/mL ile iki aşamalı kollajenaz işlemi yapıldı. İlk adım, endotel hücre tabakasını çıkarmak ve herhangi bir kirlenmeyi önlemek için çok önemlidir. İkinci kollajenaz inkübasyonu, VC'lerin dokudan plakaya geçişini kolaylaştırmaktır. Ayrıca izole edilmiş fare valf hücrelerinin fenotip karakterizasyonu için bir immünofluoresans boyama prosedürü tartışılmıştır. Ayrıca kalsiyum reaktif ölçüm işlemi ve alizarin kırmızısı lekelenme kullanılarak kireçlenme tahlil in vitro olarak gerçekleştİrilmiştir. Fare kapak hücresi birincil kültürünün kullanımı, hücre mineralizasyon in vitrosunu inhibe etmek için yeni farmakolojik hedeflerin test edilmesi için gereklidir.

Murine aort kapakçıkları tipik olarak 1 mm çapında olduğundan, farklı deneysel prosedürler için bir milyon uygun hücre toplamak için en az üç valf birikmelidir. VIC yalıtım işleminin farklı adımları Şekil 1 ve Şekil 2'de gösterilmiştir. Kapak dokusunu elle kazımak zor olduğundan, VORTEXING tarafından oluşturulan kesme stresinin IC'leri çıkarmak için kullanılması tercih edilir. Gerçekten de, CD31 immünofluoresans boyama sonuçlar...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro at JoVE.com

Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro

Bu makalede, fare aort kapak hücrelerinin iki adımlı bir kollajenaz prosedürü ile izolasyonu açıklanmaktadır. İzole fare valf hücreleri, bu in vitro kireçlenme tahlilleri gibi farklı tahlillerin yapılması ve aort kapak mineralizasyonuna yol açan moleküler yolların araştırılması için önemlidir.

Aort Kapak In Vitro Kalsifikasyonu Çalışmak için Fare Interstisyel Kapak Hücrelerinin İzolasyonu

The calcification of aortic valve cells is the hallmark of aortic stenosis and is associated with valve cusp fibrosis. Valve interstitial cells (VICs) ...

Transgenik farelerden genetiği değiştirilmiş hücrelerin kullanımında valf kireçlenmesine yol açan sinyal yolunu araştırmak için izole fare valf hücrelerinin kullanımı esastır. İki aşamalı sindirim hızlı ve verimli bir yöntemdir. Bu protokolün en zorlu kısmı, aort kapakçığının sekiz haftalık farelerden izole olmasıdır.Aort kapakçığını daha iyi görselleştirmek için yaşlı fareler üzerinde pratik yapmak daha iyidir. Deneye başlamadan önce tüm cerrahi aletleri ve çalışma alanını %70 etanol ile temizleyip sterilize edin ve cerrahi aletleri 30 dakika boyunca otoklavlayın. İlk kurulum hazır olduğunda, etanol kullanarak sekiz haftalık ötenazili bir farenin göğsünü ve karın bölgesini temizlemekle başlayın.Makas kullanarak, farenin karnını ve göğsünü açın, ardından küçük cerrahi makasla sol atriyum ve sol ventrikül arasında kesin. 10 mililitre soğuk PBS perfüzyon yaparak kalpten kan alın ve yükselen aortu üç milimetre tutarak kalbi kesin. Stereomikroskop altında, kalbi ventriküllerin ortasında yatay olarak keserek ve sol ventrikülü aorta doğru keserek aort kapağını parçalara ayırın, ardından aort kapağını dikkatlice parçalara ayırın.Vanaları 35 milimetrelik küçük bir doku kültürü çanağını bir araya getir. İzole vanaları 75 mililitrelik hücre kültürü çanağını antibiyotiklerle desteklenmiş beş mililitre taze hazırlanmış 10 milimolar soğuk HEPES ile yıkayın ve beş mililitre kollajenaz tip birde 37 santigrat derecede 30 dakika boyunca sürekli sallanarak kuluçkaya yatırın. Kuluçkadan sonra, tüpü beş dakika boyunca, 150 kat G'de santrifüjleyin ve peletin iki mililitre 10 milimolar HEPES ile bir kez 30 saniye boyunca yüksek hızda girdapla yıkayın.Sonuçta elde edilen süspansiyonu tüpten 35 milimetrelik bir kültür kabına toplayın ve doku parçalarını dikkatlice taze bir tüpe aktarmak için ince cımbız kullanın. Daha sonra peleti 35 dakika boyunca sürekli ajitasyon altında 37 santigrat derecede beş mililitre kollajenaz tip bir ile 15 mililitrelik bir tüpte kuluçkaya yatırın. Hücreleri, dört santigrat derecede beş dakika boyunca 150 kez G'de bir mililitre pipet ve santrifüj ile yeniden direrek ayırın.Ayrılmış peletin iki mililitrelik tam DMEM'de yeniden süngüle edilmesi ve dört santigrat derecede beş dakika boyunca 150 kez G'de santrifüjlenerek hücreleri iki kez temizleyin. Kaplama için, peletin bir mililitrelik tam orta dereceli olarak yeniden ıslatır ve minimum miktarda orta miktarda altı kuyu hücreli kültür çanağının bir kuyusuna ekleyin. Plakaları % 5 karbondioksit ile 37 santigrat derecede bozulmadan tutun.Üç günlük kuluçkadan sonra, mikroskop altındaki hücreleri gözlemleyerek doku kalıntılarına yakın büyümeyi onaylayın. 1.000 hücre görünür olduğunda, doku kalıntılarını otomatik kapatılmış cımbızla dikkatlice çıkarın ve ortamı değiştirin. %70 izdiah ettikten sonra hücreleri deneyin ve 75 mililitrelik doku kültürü çanağını aktarın.Teste başlamadan önce, biyogüvenlik davlumbazını% 70 etanol ile temizleyin ve DMEM ortamını 37 santigrat dereceye ısıtın. Daha sonra, tohum 100,000 hücre başına altı kuyu plakasına tam DMEM ve kültür 37 santigrat derecede. 24 saat sonra, süpernatant ortamı kireçleme ortamıyla değiştirin ve hücreleri üçüncü gün ortamın yerini alarak 37 santigrat derecede yedi gün kuluçkaya yatırın.Yedi gün sonra, Arsenazo III reaktifini kullanarak ve emiciyi 650 nanometrede kaydederek 96 kuyu plakasındaki kalsiyum konsantrasyonu ölçün. Temsili analizde, üç ila beş günlük kültürden sonra immünofluoresan lekeleme ile çeşitli kapak hücresi fenotipleri tespit edildi. Fare VIC'leri vimentin ve alfa SMA'sını ifade etti, valf hücrelerinin önemli belirteçleri.Ek olarak, CD31 immünofluoresan boyama VIC kültüründeki endotel hücrelerinden bulaşma olmadığını doğruladı. Fosfat bakımından zengin kalsilme ortamı ile VIC'leri kültleme, hücrelerde bir kireçlenmeyi uyarır, kalsiyum düğümleri için kırmızı pozitif lekelenme ile daha da doğrulanmıştır. Protokol, farklı farelerden üç ila beş valflik bir havuza dayanmaktadır.Bulguları doğrulamak için çöp eşi ve üç farklı biyolojik kopyanın kullanılması önemlidir. Fare valf hücrelerinin kullanımı, hücreleri transgenik farelerden izole ederek aort darlığı ile giden moleküler yolu anlamak için hayati öneme sahiptir. Bu protokol daha önce kireçlenmiş aort kapakçığının mineral gerilemesinde reseptöre giden yolun imasını araştırmak için kullanılmıştır.

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro

Testing Visual Sensitivity to the Speed and Direction of Motion in Lizards

Kertenkeleler Hareket Hız ve Yön Visual Hassasiyet Test

Testing visual sensitivity in any species provides basic information regarding behaviour, evolution, and ecology. However, testing specific features of ...

Isolation of Retinal Stem Cells from the Mouse Eye

Fare Göz Retina Kök Hücre İzolasyonu

The adult mouse retinal stem cell (RSC) is a rare quiescent cell found within the ciliary epithelium (CE) of the mammalian eye1,2,3. The CE is made up of ...

Visualization of the Interstitial Cells of Cajal (ICC) Network in Mice

Visualization of the Interstitial Cells of Cajal ICC Network in Mice

Farelerde Cajal (ICC) Ağ İnterstisyel Hücreler Görselleştirme

The interstitial cells of Cajal (ICC) are mesenchymal derived "pacemaker cells" of the gastrointestinal (GI) tract that generate spontaneous slow waves ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

İsteyerek Pluripotent Kök Hücrelerinin Elde Edilen Fare Üretimi

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

Differentiation of Newborn Mouse Skin Derived Stem Cells into Germ-like Cells In vitro

Germ benzeri hücreler içine Yenidoğan Fare Cilt Türetilmiş Kök Hücre Farklılaşma<em&gt; In vitro</em

Studying  germ cell formation and differentiation has traditionally been very difficult  due to low cell numbers and their location deep within developing ...

Isolation of Murine Valve Endothelial Cells

Murin Vana Endotel Hücreleri İzolasyon

Normal valve structures consist of stratified layers of specialized extracellular matrix (ECM) interspersed with valve interstitial cells (VICs) and ...

Protein Isolation from the Developing Embryonic Mouse Heart Valve Region

Gelişmekte Embriyonik Fare Kalp Vana Bölgesi&#39;nde Protein İzolasyonu

Western blot analysis is a commonly employed technique for detecting and quantifying protein levels. However, for small tissue samples, this analysis ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

İzolasyon ve Fare aort endotel hücreleri İlköğretim Kültür

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation and 3D Collagen Sandwich Culture of Primary Mouse Hepatocytes to Study the Role of Cytoskeleton in Bile Canalicular Formation In Vitro

İzolasyon ve 3D Kollajen Sandviç Kültürü Birincil Fare Hepatositler Safra Canaliküler Oluşumunda Sitoskeleton Rolünü Çalışma In Vitro

Hepatocytes are the central cells of the liver responsible for its metabolic function. As such, they form a uniquely polarized epithelium, in which two or ...

Isolation of Human Primary Valve Cells for In vitro Disease Modeling

In vitro Hastalık Modellemesi için İnsan Primer Kapak Hücrelerinin İzolasyonu

Calcific aortic valve disease (CAVD) is present in nearly a third of the elderly population. Thickening, stiffening, and calcification of the aortic valve ...