Name: retinal organoid induction system for derivation of 3d retinal tissues from human pluripotent stem cells
Uploaded: 2021-04-12T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Retinal Organoid Induction System for Derivation of 3D Retinal Tissues from Human Pluripotent Stem Cells at JoVE.com

इस अध्ययन को चीन के राष्ट्रीय प्रमुख अनुसंधान और विकास कार्यक्रम (2016YFC11011103, 2017YFA010101), ग्वांग्झू विज्ञान और प्रौद्योगिकी परियोजना कोष (201803010078), गुआंगदोंग प्रांत की विज्ञान और प्रौद्योगिकी परियोजना (2017B02020230003), चीन के प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (NSF) द्वारा समर्थित किया गया था ( 81570874, 81970842), सन यात-सेन विश्वविद्यालय (PT1001010) के सौ प्रतिभा कार्यक्रम, और नेत्र विज्ञान के राज्य कुंजी प्रयोगशाला के मौलिक अनुसंधान कोष ।

1. एचएसएससी की संस्कृति और विस्तार
<ol><li>एचपीएससी संस्कृति
	<ol>
<li>एक्सट्रासेलुलर मैट्रिक्स (ईसीएम, एचईएससी-योग्य मैट्रिक्स) के साथ 6-वेल प्लेट के दो कुओं को कोट करें। दुलबेको के संशोधित ईगल मीडियम (डी?...

<ol>
	<li>Flaxman, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+causes+of+blindness+and+distance+vision+impairment+1990-2020:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Global causes of blindness and distance vision impairment 1990-2020: a systematic review and meta-analysis.</a> The Lancet Global Health. 5 (12), 1221-1234 (2017).</li><li>Sayed, N., Liu, C., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translation+of+human-induced+pluripotent+stem+cells:+From+clinical+trial+in+a+dish+to+precision+medicine.">Translation of human-induced pluripotent stem cells: From clinical trial in a dish to precision medicine.</a> Journal of American College of Cardiology. 67 (18), 2161-2176 (2016).</li><li>Capowski, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproducibility+and+staging+of+3D+human+retinal+organoids+across+multiple+pluripotent+stem+cell+lines.">Reproducibility and staging of 3D human retinal organoids across multiple pluripotent stem cell lines.</a> Development. 146 (1), (2019).</li><li>Brooks, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+retinal+organoid+differentiation+by+modulating+signaling+pathways+revealed+by+comparative+transcriptome+analyses+with+development+in+vivo.">Improved retinal organoid differentiation by modulating signaling pathways revealed by comparative transcriptome analyses with development in vivo.</a> Stem Cell Reports. 13 (5), 891-905 (2019).</li><li>Zerti, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developing+a+simple+method+to+enhance+the+generation+of+cone+and+rod+photoreceptors+in+pluripotent+stem+cell-derived+retinal+organoids.">Developing a simple method to enhance the generation of cone and rod photoreceptors in pluripotent stem cell-derived retinal organoids.</a> Stem Cells. 38 (1), 45-51 (2020).</li><li>Osakada, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+the+generation+of+rod+and+cone+photoreceptors+from+mouse,+monkey+and+human+embryonic+stem+cells.">Toward the generation of rod and cone photoreceptors from mouse, monkey and human embryonic stem cells.</a> Nature Biotechnology. 26 (2), 215-224 (2008).</li><li>Nakano, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-formation+of+optic+cups+and+storable+stratified+neural+retina+from+human+ESCs.">Self-formation of optic cups and storable stratified neural retina from human ESCs.</a> Cell Stem Cell. 10 (6), 771-785 (2012).</li><li>Zhong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+three-dimensional+retinal+tissue+with+functional+photoreceptors+from+human+iPSCs.">Generation of three-dimensional retinal tissue with functional photoreceptors from human iPSCs.</a> Nature Communication. 5, 4047 (2014).</li><li>Liu, C., Oikonomopoulos, A., Sayed, N., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+human+diseases+with+induced+pluripotent+stem+cells:+from+2D+to+3D+and+beyond.">Modeling human diseases with induced pluripotent stem cells: from 2D to 3D and beyond.</a> Development. 145 (5), (2018).</li><li>Lamba, D. A., Gust, J., Reh, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+human+embryonic+stem+cell-derived+photoreceptors+restores+some+visual+function+in+Crx-deficient+mice.">Transplantation of human embryonic stem cell-derived photoreceptors restores some visual function in Crx-deficient mice.</a> Cell Stem Cell. 4 (1), 73-79 (2009).</li><li>Reichman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+confluent+human+iPS+cells+to+self-forming+neural+retina+and+retinal+pigmented+epithelium.">From confluent human iPS cells to self-forming neural retina and retinal pigmented epithelium.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 111 (23), 8518-8523 (2014).</li><li>Maeda, A., Mandai, M., Takahashi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+and+Induced+Pluripotent+Stem+Cell+Therapy+for+Retinal+Diseases.">Gene and Induced Pluripotent Stem Cell Therapy for Retinal Diseases.</a> Annual Review Genomics and Human Genetics. 20, 201-216 (2019).</li><li>Kruczek, K., Swaroop, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pluripotent+stem+cell-derived+retinal+organoids+for+disease+modeling+and+development+of+therapies.">Pluripotent stem cell-derived retinal organoids for disease modeling and development of therapies.</a> Stem Cells. 38 (10), 1206-1215 (2020).</li><li>O'Hara-Wright, M., Gonzalez-Cordero, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+organoids:+a+window+into+human+retinal+development.">Retinal organoids: a window into human retinal development.</a> Development. 147 (24), (2020).</li><li>Eckert, P., Knickmeyer, M. D., Schutz, L., Wittbrodt, J., Heermann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphogenesis+and+axis+specification+occur+in+parallel+during+optic+cup+and+optic+fissure+formation,+differentially+modulated+by+BMP+and+Wnt.">Morphogenesis and axis specification occur in parallel during optic cup and optic fissure formation, differentially modulated by BMP and Wnt.</a> Open Biology. 9 (2), 180179 (2019).</li><li>Patel, A., Sowden, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genes+and+pathways+in+optic+fissure+closure.">Genes and pathways in optic fissure closure.</a> Seminals in Cell and Development Biology. 91, 55-65 (2019).</li><li>Chan, B. H. C., Moosajee, M., Rainger, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Closing+the+Ggap:+Mechanisms+of+epithelial+fusion+during+optic+fissure+closure.">Closing the Ggap: Mechanisms of epithelial fusion during optic fissure closure.</a> Frontiers in Cell and Developmental Biology. 8, (2021).</li><li>Li, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+retinal+organoids+with+mature+rods+and+cones+from+urine-derived+human+induced+pluripotent+stem+cells.">Generation of retinal organoids with mature rods and cones from urine-derived human induced pluripotent stem cells.</a> Stem Cells International. 2018, 4968658 (2018).</li><li>Liu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-formation+of+RPE+spheroids+facilitates+enrichment+and+expansion+of+hiPSC-derived+RPE+generated+on+retinal+organoid+induction+platform.">Self-formation of RPE spheroids facilitates enrichment and expansion of hiPSC-derived RPE generated on retinal organoid induction platform.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 59 (13), 5659-5669 (2018).</li><li>Luo, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+optimized+system+for+effective+derivation+of+three-dimensional+retinal+tissue+via+Wnt+signaling+regulation.">An optimized system for effective derivation of three-dimensional retinal tissue via Wnt signaling regulation.</a> Stem Cells. 36 (11), 1709-1722 (2018).</li><li>Li, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+and+characterization+of+induced+pluripotent+stem+cells+and+retinal+organoids+from+a+leber's+congenital+amaurosis+patient+with+novel+RPE65+mutations.">Generation and characterization of induced pluripotent stem cells and retinal organoids from a leber's congenital amaurosis patient with novel RPE65 mutations.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 12, 212 (2019).</li><li>Matsa, E., Ahrens, J. H., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+induced+pluripotent+stem+cells+as+a+platform+for+personalized+and+precision+cardiovascular+medicine.">Human induced pluripotent stem cells as a platform for personalized and precision cardiovascular medicine.</a> Physiology Reviews. 96 (3), 1093-1126 (2016).</li><li>Wahlin, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoreceptor+outer+segment-like+structures+in+long-term+3d+retinas+from+human+pluripotent+stem+cells.">Photoreceptor outer segment-like structures in long-term 3d retinas from human pluripotent stem cells.</a> Science Reports. 7 (1), 766 (2017).</li><li>Eiraku, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-organizing+optic-cup+morphogenesis+in+three-dimensional+culture.">Self-organizing optic-cup morphogenesis in three-dimensional culture.</a> Nature. 472 (7341), 51-56 (2011).</li><li>Reichman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+storable+retinal+organoids+and+retinal+pigmented+epithelium+from+adherent+human+iPS+cells+in+xeno-free+and+feeder-free+conditions.">Generation of storable retinal organoids and retinal pigmented epithelium from adherent human iPS cells in xeno-free and feeder-free conditions.</a> Stem Cells. 35 (5), 1176-1188 (2017).</li><li>Lamba, D. A., Karl, M. O., Ware, C. B., Reh, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+generation+of+retinal+progenitor+cells+from+human+embryonic+stem+cells.">Efficient generation of retinal progenitor cells from human embryonic stem cells.</a> Proceedings of the National Academy of Science U. S. A. 103 (34), 12769-12774 (2006).</li><li>Kuwahara, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+a+ciliary+margin-like+stem+cell+niche+from+self-organizing+human+retinal+tissue.">Generation of a ciliary margin-like stem cell niche from self-organizing human retinal tissue.</a> Nature Communication. 6, 6286 (2015).</li><li>da Silva, S., Cepko, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fgf8+expression+and+degradation+of+retinoic+acid+are+required+for+patterning+a+high-acuity+area+in+the+retina.">Fgf8 expression and degradation of retinoic acid are required for patterning a high-acuity area in the retina.</a> Developmental Cell. 42 (1), 68-81 (2017).</li><li>Mitchell, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinoic+acid+signaling+regulates+differential+expression+of+the+tandemly-duplicated+long+wavelength-sensitive+cone+opsin+genes+in+zebrafish.">Retinoic acid signaling regulates differential expression of the tandemly-duplicated long wavelength-sensitive cone opsin genes in zebrafish.</a> PLoS Genetics. 11 (8), 1005483 (2015).</li><li>Stevens, C. B., Cameron, D. A., Stenkamp, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasticity+of+photoreceptor-generating+retinal+progenitors+revealed+by+prolonged+retinoic+acid+exposure.">Plasticity of photoreceptor-generating retinal progenitors revealed by prolonged retinoic acid exposure.</a> BMC Developmental Biology. 11 (1), (2011).</li><li>Eldred, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thyroid+hormone+signaling+specifies+cone+subtypes+in+human+retinal+organoids.">Thyroid hormone signaling specifies cone subtypes in human retinal organoids.</a> Science. 362 (6411), (2018).</li><li>Yang, F., Ma, H., Ding, X. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thyroid+hormone+signaling+in+retinal+development,+survival,+and+disease.">Thyroid hormone signaling in retinal development, survival, and disease.</a> Vitamins and Hormones. 106, 333-349 (2018).</li><li>Brzezinski, J. A., Reh, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoreceptor+cell+fate+specification+in+vertebrates.">Photoreceptor cell fate specification in vertebrates.</a> Development. 142 (19), 3263-3273 (2015).</li><li>Kim, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation,+transcriptome+profiling,+and+functional+validation+of+cone-rich+human+retinal+organoids.">Generation, transcriptome profiling, and functional validation of cone-rich human retinal organoids.</a> Proceedings of the National Academy of Science U. S. A. 116 (22), 10824-10833 (2019).</li><li>Lowe, A., Harris, R., Bhansali, P., Cvekl, A., Liu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intercellular+adhesion-dependent+cell+survival+and+ROCK-regulated+actomyosin-driven+forces+mediate+self-formation+of+a+retinal+organoid.">Intercellular adhesion-dependent cell survival and ROCK-regulated actomyosin-driven forces mediate self-formation of a retinal organoid.</a> Stem Cell Reports. 6 (5), 743-756 (2016).</li><li>Carcamo-Orive, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+transcriptional+variability+in+a+large+human+ipsc+library+reveals+genetic+and+non-genetic+determinants+of+heterogeneity.">Analysis of transcriptional variability in a large human ipsc library reveals genetic and non-genetic determinants of heterogeneity.</a> Cell Stem Cell. 20 (4), 518-532 (2017).</li><li>DeBoever, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+profiling+reveals+the+influence+of+genetic+variation+on+gene+expression+in+human+induced+pluripotent+stem+cells.">Large-scale profiling reveals the influence of genetic variation on gene expression in human induced pluripotent stem cells.</a> Cell Stem Cell. 20 (4), 533-546 (2017).</li></ol>

इस बहु-कदम रेटिना प्रेरण प्रोटोकॉल में, एचपीएससी को रेटिना भाग्य हासिल करने के लिए कदम से कदम पर निर्देशित किया गया था, और टुकड़े टुकड़े में भरे एनआर और आरपीई युक्त रेटिना ऑर्गेनॉइड में स्वयं-संगठित कि?...

रेटिना अपक्षयी रोग (आरडीएस), जैसे उम्र से संबंधित मैकुलर डिजनरेशन (एएमडी) और रेटिनाइटिस पिगमेंटोसा (आरपी), फोटोरिसेप्टर कोशिकाओं की शिथिलता और मृत्यु की विशेषता है और आम तौर पर1को ठीक करने के प्रभावी तरीकों के बिना अपरिवर्तनीय दृष्टि हानि का कारण बनता है। इन रोगों में अंतर्निहित तंत्र मानव रोग मॉडल2की कमी के कारण आंशिक रूप से अज्ञात है । पिछले दशकों में, स्टेम सेल प्रौद्योगिकी के माध्यम से पुनर्योजी चिकित्सा में महत्वपूर्ण प्रगति को पूरा किया गया है । अपने आप सहित कई शोधकर्ताओं ने दिखाया है कि मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं (एचएससी) और मानव प्रेरित pluripotent स्टेम सेल (hiPSCs) सहित मानव pluripotent स्टेम सेल (hPSCs), रेटिना कोशिकाओं के सभी प्रकार में अंतर कर सकते हैं, यहां तक कि विभिन्न भेदभाव दृष्टिकोण के माध्यम से मिनी रेटिना ऊतक3,4,5,6,7,8,9,10, 11, रोग मॉडलिंग और सेल थेरेपी में अपार संभावनाएं प्रदान करना12,13,14.
हालांकि, एचपीएससी से रेटिना कोशिकाओं में प्रेरण प्रक्रिया अत्यधिक जटिल और कम पुनरावृत्ति के साथ समय लेने वाली है, जिसके लिए शोधकर्ताओं को समृद्ध अनुभव और उच्च कौशल की आवश्यकता होती है । जटिल और गतिशील प्रेरण प्रक्रिया के दौरान, कई कारक रेटिना ऊतकों की उपजको प्रभावित करेंगे 15,16,17। इसके अलावा, रेटिना मार्कर के समय और मजबूत अभिव्यक्ति में अक्सर विभिन्न प्रेरण विधियां काफी भिन्न होती हैं, जो नमूना संग्रह और डेटा व्याख्या3को चकित कर सकती हैं। इसलिए, कदम-दर-कदम मार्गदर्शन के साथ एचपीएससी से रेटिना भेदभाव का एक सीधा प्रोटोकॉल मांग में होगा ।
यहां, हमारे प्रकाशित अध्ययनों के आधार पर18,19,20,21,एचपीएससी से समृद्ध शंकु फोटोरिसेप्टर के साथ रेटिना ऑर्गेनॉइड (आरओ) उत्पन्न करने के लिए एक अनुकूलित रेटिना प्रेरण प्रोटोकॉल का वर्णन किया गया है, जिसके लिए रेटिनोइक एसिड (आरए) के पूरक की आवश्यकता नहीं है। यह प्रोटोकॉल तंत्रिका रेटिना और आरपीई उत्पन्न करने के लिए बहु-चरण विधि के विवरण पर केंद्रित है। ईबी गठन प्रारंभिक प्रेरण चरण का अनिवार्य हिस्सा है। ईबी के आकार और चढ़ाना घनत्व दोनों मात्रात्मक रूप से अनुकूलित होते हैं, जो वैज्ञानिक रूप से रेटिना ऊतकों की उपज को बढ़ाता है और पुनरावृत्ति को बढ़ावा देता है। प्रेरण के दूसरे भाग में, ऑप्टिक वेसिकल्स (ओवी) निलंबन संस्कृति में पालन संस्कृति और आरओ रूप में स्वयं व्यवस्थित करते हैं; इस भाग के समय पाठ्यक्रम और क्षमता विभिन्न एचपीपीएससी लाइनों में काफी भिन्न होती है। आरओ में रेटिना कोशिकाओं की परिपक्वता और विनिर्देश मुख्य रूप से प्रेरण के मध्य और देर चरण में होते हैं। आरए के अलावा, अमीर शंकु और छड़ दोनों के साथ परिपक्व फोटोरिसेप्टर का उत्पादन किया जा सकता है।
इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य अनुभवहीन शोधकर्ताओं को दोहराने के लिए प्रत्येक कदम का मात्रात्मक रूप से वर्णन और विस्तार करना है। विभिन्न एचपीएससी लाइनों को इस प्रोटोकॉल द्वारा सफलतापूर्वक आरओ में प्रेरित किया गया है जिसमें शंकु से भरपूर रेटिना ऊतकों की मजबूत उपज और उच्च पुनरावृत्ति क्षमता है। इस प्रोटोकॉल के साथ एचपीएससी-व्युत्पन्न आरओ वीवो मेंरेटिना विकास के मुख्य चरणों को फिर से पुनर्पूंजीकरण कर सकते हैं, और दीर्घकालिक जीवित रह सकते हैं, जो रोग मॉडलिंग, दवा स्क्रीनिंग और सेल थेरेपी जैसे डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगों की सुविधा प्रदान करता है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>(&#8722;)-Blebbistatin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>B0560-5mg</td>
			<td>ROCK-inhibitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 ml tips</td>
			<td>Kirgen</td>
			<td>KG1313</td>
			<td>1 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 ml pipette</td>
			<td>Sorfa</td>
			<td>3141001</td>
			<td>Pipette</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm Tissue culture</td>
			<td>BIOFIL</td>
			<td>TCD000100</td>
			<td>100 mm Petri dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm Tissue culture</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>353003</td>
			<td>100 mm Petri dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml Centrifuge tubes</td>
			<td>BIOFIL</td>
			<td>CFT011150</td>
			<td>Centrifuge tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35 mm Tissue culture dishes</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>353001</td>
			<td>35 mm Petri dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 ml pipette</td>
			<td>Sorfa</td>
			<td>313000</td>
			<td>Pipette</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml Centrifuge tubes</td>
			<td>BIOFIL</td>
			<td>CFT011500</td>
			<td>Centrifuge tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6 wells tissue culture plates</td>
			<td>Costar</td>
			<td>3516</td>
			<td>Culture plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-AP2&#945; Antibody</td>
			<td>DSHB</td>
			<td>3b5</td>
			<td>Primary&#160;antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ANTIBIOTIC ANTIMYCOTIC 100X</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15240062</td>
			<td>Antibiotic-Antimycotic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-ISL1 Antibody</td>
			<td>Boster</td>
			<td>BM4446</td>
			<td>Primary&#160;antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Ki67 Antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab15580</td>
			<td>Primary&#160;antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-L/M opsin Antibody</td>
			<td>gift from Dr. jeremy</td>
			<td>/</td>
			<td>Primary&#160;antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-PAX6 Antibody</td>
			<td>DSHB</td>
			<td>pax6</td>
			<td>Primary&#160;antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-rabbit 555</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A31572</td>
			<td>Donkey anti-Rabbit IgG (H+L) 
			Secondary Antibody, Alexa Fluor 555</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Recoverin Antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>ab5585</td>
			<td>Primary&#160;antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Rhodopsin Antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab5417</td>
			<td>Primary&#160;antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-sheep 555</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A21436</td>
			<td>Donkey anti-Sheep IgG (H+L) 
			Secondary Antibody, Alexa Fluor 555</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-SOX9 Antibody</td>
			<td>Abclonal</td>
			<td>A19710</td>
			<td>Primary&#160;antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-VSX2 Antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>ab9016</td>
			<td>Primary&#160;antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B-27 supplement W/O VIT A (50X)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12587010</td>
			<td>Supplement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryotube vial</td>
			<td>Thermo scientific-NUNC</td>
			<td>375418</td>
			<td>1.8 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>DOJINDO</td>
			<td>D532</td>
			<td>4&#39;,6-Diamidino-2-phenylindole 
			dihydrochloride; multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulphoxide(DMSO) Hybri-max</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D2650-100ML</td>
			<td>Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C11995500BT</td>
			<td>Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM /F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C11330500BT</td>
			<td>Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15575-020</td>
			<td>0.5 M PH 8.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>NATOCOR</td>
			<td>SFBE</td>
			<td>Serum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SLGP033RB</td>
			<td>0.22&#956;m, sterile Millex filter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMax, 100X</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>35050061</td>
			<td>L-alanyl-L-glutamine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3149</td>
			<td>2 mg/ml in PBS to use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel, 100x</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354277</td>
			<td>Extracellular matrix (ECM)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Non-Essential Amino Acids Solution (100X)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140050</td>
			<td>MEM NEAA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mTeSR1</td>
			<td>STEM CELL</td>
			<td>85850</td>
			<td>hPSCs maintenance medium (MM)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2 supplement</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17502048</td>
			<td>Supplement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline (PBS) buffer</td>
			<td>GNM</td>
			<td>GNM10010</td>
			<td>Without Ca+,Mg+,PH7.2&#177;0.1 0.1M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taurine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T0625</td>
			<td>Supplement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-low attachment culture dishes 100mm petri dish, low-attachment</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CLS3262-20EA</td>
			<td>Petri dish</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

retinal organoid induction system for derivation of 3d retinal tissues from human pluripotent stem cells

रेटिना अपक्षयी रोग प्रभावी उपचार के बिना अपरिवर्तनीय अंधापन के मुख्य कारण हैं। Pluripotent स्टेम सेल है कि रेटिना कोशिकाओं के सभी प्रकार में अंतर करने की क्षमता है, यहां तक कि मिनी रेटिना ऊतकों, इन रोगों और रोग मॉडलिंग और दवा स्क्रीनिंग में कई अवसरों के साथ रोगियों के लिए भारी वादों पकड़ो । हालांकि, एचपीएससी से रेटिना कोशिकाओं में शामिल करने की प्रक्रिया जटिल और समय लेने वाली है। यहां, हम उच्च प्रजनन क्षमता और दक्षता के साथ रेटिना ऊतक उत्पन्न करने के लिए एक अनुकूलित रेटिना प्रेरण प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं, जो विभिन्न मानव बहुलता स्टेम कोशिकाओं के लिए उपयुक्त है। यह प्रोटोकॉल रेटिनोइक एसिड के अलावा किया जाता है, जो शंकु फोटोरिसेप्टर्स के संवर्धन को लाभ पहुंचाता है। इस प्रोटोकॉल का लाभ रेटिना प्रेरण की दक्षता और पुनरावृत्ति को बढ़ाने के लिए ईबी आकार और चढ़ाना घनत्व का मात्राकरण है। इस विधि के साथ, सभी प्रमुख रेटिना कोशिकाएं क्रमिक रूप से दिखाई देती हैं और रेटिना विकास के मुख्य चरणों को पुन: रीकैपिटल करती हैं। इसमें डाउनस्ट्रीम एप्लीकेशंस जैसे डिजीज मॉडलिंग और सेल थेरेपी की सुविधा होगी ।

इस प्रोटोकॉल में रेटिना प्रेरण प्रक्रिया मानव भ्रूण रेटिना के विकास की नकल करती है। रेटिना भेदभाव शुरू करने के लिए, एचपीएससी को छोटे झुरमुटों में अलग किया गया था और निलंबन में सुसंस्कृत किया गया था ता?...

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Retinal Organoid Induction System for Derivation of 3D Retinal Tissues from Human Pluripotent Stem Cells

यहां हम एक अनुकूलित रेटिना ऑर्गेनॉइड इंडक्शन सिस्टम का वर्णन करते हैं, जो उच्च प्रजनन क्षमता और दक्षता के साथ रेटिना ऊतक उत्पन्न करने के लिए विभिन्न मानव बहुलता स्टेम सेल लाइनों के लिए उपयुक्त है।

मानव प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल से 3 डी रेटिना ऊतकों के व्युत्पन्न के लिए रेटिना ऑर्गेनॉइड इंडक्शन सिस्टम

Retinal degenerative diseases are the main causes of irreversible blindness without effective treatment. Pluripotent stem cells that have the potential to ...

एचपीएससी से रेटिना कोशिकाओं में शामिल करने की प्रक्रिया जटिल और समय लेने वाली है। यह अनुकूलित प्रोटोकॉल उच्च प्रजनन क्षमता और कोई लागत के साथ रेटिना ऊतक उत्पन्न कर सकता है। इस प्रोटोकॉल का लाभ एचपीएससी से रेटिना इंडक्शन की दक्षता और पुनरावृत्ति को बढ़ाने के लिए ईबी आकार और चढ़ाना घनत्व का मात्राकरण है।इस विधि के साथ, सभी प्रमुख रेटिना कोशिकाएं क्रमिक रूप से दिखाई देती हैं और रेटिना विकास के मुख्य चरणों को पुन: रीकैपिटल करती हैं। इसमें रेटिना अपक्षयी रोगों के लिए डिजीज मॉडलिंग और सेल थेरेपी की सुविधा मिलेगी। प्रक्रिया का प्रदर्शन करते हुए, हम एक पीएचडी छात्र युआनयुआन गुआन और प्रयोगशाला के एक तकनीशियन बिंगबिंग Xie के साथ हैं।डीएमईएम के 50 एमएल में तीसरे 50 गुना स्टॉक सॉल्यूशन के 1 एमएल जोड़कर ईसीएम सॉल्यूशन की 50 एमएल तैयार करके शुरुआत करें। फिर, एक छह अच्छी तरह से प्लेट के प्रत्येक कुएं में इस तैयार ईसीएम समाधान के 1 मिलीएल जोड़ें और इसे 37 डिग्री सेल्सियस और 5% कार्बन डाइऑक्साइड पर एक घंटे के लिए इनक्यूबेट करें। निर्माता के निर्देश के अनुसार एचपीपीएससी रखरखाव माध्यम तैयार करें और इसे 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर प्रीवार्म करें।30 सेकंड के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर पानी के स्नान में इनक्यूबेटिंग करके एक तरल नाइट्रोजन टैंक से एचपीएससी की क्रायोजेनिक शीशी डालें। ध्यान से इसे 75% अल्कोहल स्प्रे का उपयोग करके कीटाणुरहित करें और इसे जैव सुरक्षा कैबिनेट में रखें। कोशिका निलंबन को शीशी से 15 मिलीमीटर ट्यूब में स्थानांतरित करें।फिर, 5 एमएल पिपेट का उपयोग करके ट्यूब में प्री-वार्म्ड रखरखाव मध्यम ड्रॉप-बाय-ड्रॉप के 5 एमएल जोड़ें, जबकि एचपीएससी को मिश्रित करने के लिए धीरे-धीरे ट्यूब को मिलाते हुए। पांच मिनट के लिए 170 बार जी पर ट्यूब अपकेंद्रित्र करें। कोशिकाओं को खोने से बचने के लिए सुपरनेट के लगभग 50 माइक्रोलीटर को पीछे छोड़ते हुए, 1 एमएल पिपेट का उपयोग करके अधिकांश सुपरनेट को सावधानी से हटा दें।ऊपर और नीचे पाइपिंग करके रखरखाव माध्यम के 1 एमएल के साथ गोली को फिर से निलंबित करें। पूर्व-लेपित कुओं से ईसीएम निकालें और प्रत्येक कुएं में 1.5 मिलीलीटर रखरखाव माध्यम जोड़ें। फिर प्रत्येक कुएं में 0.5 मिलीलीटर सेल निलंबन वितरित करें।एचपीएससी को समान रूप से वितरित करने के लिए प्लेट को धीरे-धीरे हिलाएं। सेल पालन को बढ़ावा देने के लिए कम से कम 24 घंटे के लिए एक इनक्यूबेटर में 37 डिग्री सेल्सियस और 5% कार्बन डाइऑक्साइड में प्लेट रखें। हर दिन माध्यम बदलें और 80% संगम पर एचपीएससी को पारित करें।दिन-0 पर, छह अच्छी तरह से थाली के एक कुएं से ८०% संगम कोशिकाओं को हटाकर भेदभाव शुरू करते हैं । पाठ पांडुलिपि में वर्णित EDTA वियोजन समाधान के साथ कोशिकाओं को ले लीजिए। EDTA समाधान निकालें और सेल वियोजन को रोकने के लिए 10 माइक्रोमोलर फ्लूवास्टिन युक्त रखरखाव माध्यम के 1 एमएल जोड़ें।1 एमएल पिपेट के साथ कोशिकाओं को इकट्ठा करें। सेल सस्पेंशन को 100 मिलीमीटर अल्ट्रा-कम अटैच पेट्री डिश में ट्रांसफर करें और डिश में 10 माइक्रोमोलर फ्लूवास्टिन युक्त मेंटेनेंस मीडियम के 9 एमएल जोड़ें। कोशिकाओं को समान रूप से वितरित करने के लिए दो बार पकवान को धीरे से हिलाएं।इसके बाद इसे इनक्यूबेटर में 37 डिग्री सेल्सियस और 5 फीसद कार्बन डाई ऑक्साइड में डाल दें। कोशिकाओं को कम से कम 24 घंटे तक सुसंस्कृत होने के बाद, उन्हें माइक्रोस्कोप के नीचे देखें। मेंटेनेंस मीडियम का 9 एमएल और एनआईएम का 3 एमएल 15 एमएल ट्यूब में डालें।सेल संस्कृतियों को 15 एमएल सेंट्रलाइज ट्यूब में स्थानांतरित करें और डिश में प्री-गर्म निम मिश्रण के 10 एमएल जोड़ें। समुच्चय इकट्ठा करने के लिए 3 मिनट के लिए 60 बार जी पर ट्यूब को सेंट्रलाइज करें। फिर कोशिकाओं को खोने से बचने के लिए लगभग 500 माइक्रोलीटर को पीछे छोड़ते हुए 5 एमएल पिपेट का उपयोग करके सुपरनेट निकालें।मिश्रण के 2 एमएल को ट्यूब में डालें और सस्पेंशन को वापस उसी पेट्री डिश में ट्रांसफर करें। धीरे-धीरे सेल समुच्चय वितरित करने के लिए पकवान हिलाएं। इसके बाद डिश को वापस इनक्यूबेटर में डाल दें।दिन-5 पर, पूर्व-लेपित व्यंजनों से ईसीएम निकालें और प्रत्येक डिश में 10 एमएल प्री-गर्म एनआईएम जोड़ें। ईबीएस युक्त पकवान को बाहर निकालें और माइक्रोस्कोप के नीचे ईबी की गुणवत्ता की जांच करें, जिससे यह सुनिश्चित हो जाए कि वे उज्ज्वल और गोल हैं। 15 एमएल ट्यूब में सभी ईबी ले लीजिए और उन्हें 5 मिनट के लिए व्यवस्थित करने की अनुमति दें।इसके बाद मीडियम के करीब 2 एमएल को पीछे छोड़ते हुए ज्यादातर सुपरनेट को हटा दें। ईबी की गिनती के बाद, उन्हें लगभग 2-3 ईबी प्रति वर्ग सेंटीमीटर के घनत्व पर छोड़-बूंद को एनआईएम के 10 एमएल वाले लेपित व्यंजनों में बीज दें। धीरे-धीरे ईबीएस को समान रूप से वितरित करने के लिए व्यंजन हिलाएं और उन्हें कम से कम 24 घंटे के लिए इनक्यूबेटर में रखें।28 से 35 दिनों पर आसन्न रेटिना वर्णक एपिथेलियम के साथ-साथ रूपात्मक रूप से पहचाने जाने योग्य ऑप्टिक वेसिकल्स को यांत्रिक रूप से अलग करने के लिए 1 मिली हुई सिरिंज के साथ टंगस्टन सुई या सुई का उपयोग करें। उन्हें निलंबन में संस्कृति। प्रत्येक 100 मिलीमीटर कम अटैचमेंट कल्चर डिश में 50-60 ऑप्टिक वेसिकल्स डालें, जिसमें रेटिना ऑर्गेनॉइड फॉर्मेशन के लिए आरडीएम का 15 एमएल होता है।दिन-42 तक हर 2 से 3 दिन में माध्यम बदलें। रेटिना भेदभाव शुरू करने के लिए, एचपीएससी को छोटे झुरमुटों में अलग किया गया था और निलंबन में सुसंस्कृत किया गया था, जिसने दिन-1 से ईबी का गठन किया था । दिन-5 ईबी को ईसीएम-लेपित संस्कृति व्यंजनों पर चढ़ाया गया था और कोशिकाएं धीरे-धीरे ईबी से बाहर निकल गईं।दिन-16 पर, इंडक्शन माध्यम को आरडीएम द्वारा प्रतिस्थापित किया गया था, जिससे तंत्रिका रेटिना डोमेन बनाने के लिए और धीरे-धीरे पकवान से फैलते हैं, साथ ही, आरपीई कोशिकाओं से घिरे ऑप्टिक वेसिकल जैसी संरचनाएं सेल बनाते हैं। दिन-28 से 35 के दौरान, रेटिना ऑर्गेनॉइड जिसमें न्यूरल रेटिना होता है, जो आरपीई क्षेत्र से जुड़ा होता है। एक तरफ कोशिकाओं का गठन किया।रेटिना भेदभाव और विनिर्देश के रूप में प्रगति की, एचपीएससी ने तंत्रिका रेटिना के उपप्रकार का उत्पादन किया जो धीरे-धीरे परतों में लाइन में खड़ा होता है, जो देशी मानव रेटिना की वास्तुशिल्प विशेषताओं की नकल करता है। रेटिना गैंगलियन कोशिकाओं को पहले रेटिना जनकों से उत्पन्न किया गया था और न्यूरो रेटिना के बेसल साइड में जमा किया गया था। इस प्रोटोकॉल के साथ, रेटिना ऑर्गेनॉइड दोनों, समृद्ध छड़ और शंकु के साथ अत्यधिक परिपक्व फोटोरिसेप्टर में विकसित हुए।फोटोरिसेप्टर कोशिकाएं एपिकल साइड में स्थित थीं, जबकि अमैक्रिन कोशिकाएं, क्षैतिज कोशिकाएं, द्विध्रुवी कोशिकाएं और मूलर ग्लियल कोशिकाएं सभी तंत्रिका रेटिना की मध्यवर्ती परत में स्थित थीं। इस प्रोटोकॉल के प्रमुख बिंदु ईबीएस की उच्च गुणवत्ता पैदा कर रहे हैं और उन्हें सही घनत्व पर सीडिंग कर रहे हैं।

Research

JoVE Journal

Medicine

A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

एक सरल तकनीक के लिए<em&gt; स्वस्थानी में</em&gt; और मानव नेत्र ग्लोब से रेटिना ऊतक की अंतड़ी निकालना कॉर्निया की छांटना

Enucleation is the process of retrieving the ocular globe from a cadaveric donor leaving the rest of the globe undisturbed. Excision refers to the ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

मानव दंत लुगदी स्टेम सेल के अलगाव विशेषता, और तुलनात्मक भेदभाव दो अलग अलग तरीकों का उपयोग करके स्थायी दांत से व्युत्पन्न

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Transcriptomic Analysis of Human Retinal Surgical Specimens Using jouRNAl

पत्रिका का उपयोग मानव रेटिना सर्जिकल नमूने के transcriptomic विश्लेषण

Retinal detachment (RD) describes a separation of the neurosensory retina  from the retinal pigmented epithelium (RPE). The RPE is essential for normal  ...

Enrichment for Chemoresistant Ovarian Cancer Stem Cells from Human Cell Lines

मानव कोशिका लाइनों से Chemoresistant डिम्बग्रंथि के कैंसर स्टेम सेल के लिए संवर्धन

Cancer stem cells (CSCs) are defined as a subset of slow cycling and undifferentiated cells that divide asymmetrically to generate highly proliferative, ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

अग्नाशय के कैंसर नई उपचार रणनीतियों के विकास के लिए सेल के लक्षण स्टेम का अध्ययन

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Quantitative Fundus Autofluorescence for the Evaluation of Retinal Diseases

रेटिना रोगों के मूल्यांकन के लिए मात्रात्मक बुध्न Autofluorescence

The retinal pigment epithelium (RPE) is juxtaposed to the overlying sensory retina, and supports the function of the visual system. Among the tasks ...

An Acute Retinal Model for Evaluating Blood Retinal Barrier Breach and Potential Drugs for Treatment

उपचार के लिए रक्त रेटिना बैरियर से ब्रीच और संभावित दवाओं का मूल्यांकन के लिए एक तीव्र रेटिना मॉडल

A low-cost, easy-to-use and powerful model system is established to evaluate potential treatments that could ameliorate blood retinal barrier breach. An ...

Forskolin-induced Swelling in Intestinal Organoids: An In Vitro Assay for Assessing Drug Response in Cystic Fibrosis Patients

Forskolin-induced Swelling in Intestinal Organoids: An In Vitro Assay for Assessing Drug Response in Cystic Fibrosis Patients

Forskolin प्रेरित आंतों में सूजन Organoids: एक<em&gt; इन विट्रो</em&gt; सिस्टिक फाइब्रोसिस रोगियों में दवा प्रतिक्रिया का आकलन करने के लिए परख

Recently-developed cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR)-modulating drugs correct surface expression and/or function of the mutant ...

Using Retinal Imaging to Study Dementia

मनोभ्रंश का अध्ययन करने के लिए रेटिना इमेजिंग का उपयोग

The retina offers a unique &#8220;window&#8221; to study pathophysiological processes of dementia in the brain, as it is an extension of the central ...

Induction and Analysis of Oxidative Stress in Sleeping Beauty Transposon-Transfected Human Retinal Pigment Epithelial Cells

Induction and Analysis of Oxidative Stress in Sleeping Beauty Transposon-Transfected Human Retinal Pigment Epithelial Cells

स्लीपिंग ब्यूटी ट्रांसपोसन-ट्रांस संक्रमित मानव रेटिना वर्णक एपिथेलियल कोशिकाओं में ऑक्सीडेटिव तनाव का प्रेरण और विश्लेषण

Oxidative stress plays a critical role in several degenerative diseases, including age-related macular degeneration (AMD), a pathology that affects ~30 ...