Name: investigating the phagocytosis of leishmania using confocal microscopy
Uploaded: 2021-07-29T13:45:00
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हम सहायता के लिए गोंकालो मोनिज़ इंस्टीट्यूट, फियोक्रूज़ बाहिया, ब्राजील और माइक्रोस्कोपी विभाग को धन्यवाद देते हैं। इस काम को इनोवा-फियोक्रूज नंबर 79700287000 द्वारा समर्थित किया गया था, पीएसटीवी सीएनपीक्यू (305235 / 2019-2) से अनुसंधान में उत्पादकता के लिए अनुदान रखता है। प्लास्मिड कृपया मौरिसियो टेरेबिज़निक, टोरंटो विश्वविद्यालय, सीए द्वारा प्रदान किए गए थे। लेखक अंग्रेजी भाषा संशोधन और पांडुलिपि कॉपीएडिटिंग सहायता के लिए एंड्रिस के वाल्टर को धन्यवाद देना चाहते हैं।

राष्ट्रीय अनुसंधान आचार समितियों (आईडी: 94648218.8.0000.0040) द्वारा प्रक्रियाओं के अनुमोदन के बाद स्वस्थ दाताओं से कोशिकाएं प्राप्त की गईं।
1. सेल संस्कृतियों
<ol><li>मानव मोनोसाइट-व्युत्पन्न मैक्रोफेज ?...

<ol>
	<li>Goto, H., Lauletta Lindoso, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cutaneous+and+mucocutaneous+leishmaniasis.">Cutaneous and mucocutaneous leishmaniasis.</a> Infectious Disease Clinics of North America. 26 (2), 293-307 (2012).</li><li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+the+leishmaniases.">Control of the leishmaniases.</a> World Health Organization Technical Report Series. (949), 1 (2010).</li><li>Alexander, J., Russell, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+interaction+of+Leishmania+species+with+macrophages.">The interaction of Leishmania species with macrophages.</a> Advances in Parasitology. 31, 175-254 (1992).</li><li>Mosser, D. M., Rosenthal, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leishmania-macrophage+interactions:+multiple+receptors,+multiple+ligands+and+diverse+cellular+responses.">Leishmania-macrophage interactions: multiple receptors, multiple ligands and diverse cellular responses.</a> Seminars in Cell Biology. 4 (5), 315-322 (1993).</li><li>Awasthi, A., Mathur, R. K., Saha, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+response+to+Leishmania+infection.">Immune response to Leishmania infection.</a> Indian Journal of Medical Research. 119 (6), 238-258 (2004).</li><li>Blackwell, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+macrophage+complement+and+lectin-like+receptors+in+binding+Leishmania+parasites+to+host+macrophages.">Role of macrophage complement and lectin-like receptors in binding Leishmania parasites to host macrophages.</a> Immunology Letters. 11 (3-4), 227-232 (1985).</li><li>Mosser, D. M., Edelson, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mouse+macrophage+receptor+for+C3bi+(CR3)+is+a+major+mechanism+in+the+phagocytosis+of+Leishmania+promastigotes.">The mouse macrophage receptor for C3bi (CR3) is a major mechanism in the phagocytosis of Leishmania promastigotes.</a> Journal of Immunology. 135 (4), 2785-2789 (1985).</li><li>Gough, P. J., Gordon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+scavenger+receptors+in+the+innate+immune+system.">The role of scavenger receptors in the innate immune system.</a> Microbes and Infection. 2 (3), 305-311 (2000).</li><li>Russell, D. G., Wilhelm, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+involvement+of+the+major+surface+glycoprotein+(gp63)+of+Leishmania+promastigotes+in+attachment+to+macrophages.">The involvement of the major surface glycoprotein (gp63) of Leishmania promastigotes in attachment to macrophages.</a> Journal of Immunology. 136 (7), 2613-2620 (1986).</li><li>Handman, E., Goding, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Leishmania+receptor+for+macrophages+is+a+lipid-containing+glycoconjugate.">The Leishmania receptor for macrophages is a lipid-containing glycoconjugate.</a> EMBO J. 4 (2), 329-336 (1985).</li><li>Holm, A., Tejle, K., Magnusson, K. E., Descoteaux, A., Rasmusson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leishmania+donovani+lipophosphoglycan+causes+periphagosomal+actin+accumulation:+correlation+with+impaired+translocation+of+PKCalpha+and+defective+phagosome+maturation.">Leishmania donovani lipophosphoglycan causes periphagosomal actin accumulation: correlation with impaired translocation of PKCalpha and defective phagosome maturation.</a> Cellular Microbiology. 3 (7), 439-447 (2001).</li><li>Vergne, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+phagolysosome+biogenesis+block+by+viable+Mycobacterium+tuberculosis.">Mechanism of phagolysosome biogenesis block by viable Mycobacterium tuberculosis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 102 (11), 4033-4038 (2005).</li><li>Courret, N., Lang, T., Milon, G., Antoine, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intradermal+inoculations+of+low+doses+of+Leishmania+major+and+Leishmania+amazonensis+metacyclic+promastigotes+induce+different+immunoparasitic+processes+and+status+of+protection+in+BALB/c+mice.">Intradermal inoculations of low doses of Leishmania major and Leishmania amazonensis metacyclic promastigotes induce different immunoparasitic processes and status of protection in BALB/c mice.</a> International Journal for Parasitology. 33 (12), 1373-1383 (2003).</li><li>Gutierrez, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autophagy+induction+favours+the+generation+and+maturation+of+the+Coxiella-replicative+vacuoles.">Autophagy induction favours the generation and maturation of the Coxiella-replicative vacuoles.</a> Cellular Microbiology. 7 (7), 981-993 (2005).</li><li>Dermine, J. F., Scianimanico, S., Prive, C., Descoteaux, A., Desjardins, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leishmania+promastigotes+require+lipophosphoglycan+to+actively+modulate+the+fusion+properties+of+phagosomes+at+an+early+step+of+phagocytosis.">Leishmania promastigotes require lipophosphoglycan to actively modulate the fusion properties of phagosomes at an early step of phagocytosis.</a> Cellular Microbiology. 2 (2), 115-126 (2000).</li><li>Desjardins, M., Descoteaux, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+phagolysosomal+biogenesis+by+the+Leishmania+lipophosphoglycan.">Inhibition of phagolysosomal biogenesis by the Leishmania lipophosphoglycan.</a> Journal of Experimental Medicine. 185 (12), 2061-2068 (1997).</li><li>Antoine, J. C., Prina, E., Lang, T., Courret, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biogenesis+and+properties+of+the+parasitophorous+vacuoles+that+harbour+Leishmania+in+murine+macrophages.">The biogenesis and properties of the parasitophorous vacuoles that harbour Leishmania in murine macrophages.</a> Trends in Microbiology. 6 (10), 392-401 (1998).</li><li>Alexander, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+essential+role+for+IL-13+in+maintaining+a+non-healing+response+following+Leishmania+mexicana+infection.">An essential role for IL-13 in maintaining a non-healing response following Leishmania mexicana infection.</a> European Journal of Immunology. 32 (10), 2923-2933 (2002).</li><li>Aderem, A., Underhill, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+phagocytosis+in+macrophages.">Mechanisms of phagocytosis in macrophages.</a> Annual Review of Immunology. 17, 593-623 (1999).</li><li>Olivier, M., Gregory, D. J., Forget, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subversion+mechanisms+by+which+Leishmania+parasites+can+escape+the+host+immune+response:+a+signaling+point+of+view.">Subversion mechanisms by which Leishmania parasites can escape the host immune response: a signaling point of view.</a> Clinical Microbiology Reviews. 18 (2), 293-305 (2005).</li><li>English, D., Andersen, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-step+separation+of+red+blood+cells.+Granulocytes+and+mononuclear+leukocytes+on+discontinuous+density+gradients+of+Ficoll-Hypaque.">Single-step separation of red blood cells. Granulocytes and mononuclear leukocytes on discontinuous density gradients of Ficoll-Hypaque.</a> Journal of Immunology Methods. 5 (3), 249-252 (1974).</li><li>Petersen, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17-AAG+kills+intracellular+Leishmania+amazonensis+while+reducing+inflammatory+responses+in+infected+macrophages.">17-AAG kills intracellular Leishmania amazonensis while reducing inflammatory responses in infected macrophages.</a> PLoS One. 7 (11), 49496 (2012).</li><li>Maess, M. B., Wittig, B., Lorkowski, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+efficient+transfection+of+human+THP-1+macrophages+by+nucleofection.">Highly efficient transfection of human THP-1 macrophages by nucleofection.</a> Journal of Visualized Experiments. (91), e51960 (2014).</li><li>Berges, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=End-binding+1+protein+overexpression+correlates+with+glioblastoma+progression+and+sensitizes+to+Vinca-alkaloids+in+vitro+and+in+vivo.">End-binding 1 protein overexpression correlates with glioblastoma progression and sensitizes to Vinca-alkaloids in vitro and in vivo.</a> Oncotarget. 5 (24), 12769-12787 (2014).</li><li>Franco, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Ubiquitin+Ligase+Smurf1+Functions+in+Selective+Autophagy+of+Mycobacterium+tuberculosis+and+Anti-tuberculous+Host+Defense.">The Ubiquitin Ligase Smurf1 Functions in Selective Autophagy of Mycobacterium tuberculosis and Anti-tuberculous Host Defense.</a> Cell Host &amp; Microbe. 22 (3), 421-423 (2017).</li><li>Corbett-Nelson, E. F., Mason, D., Marshall, J. G., Collette, Y., Grinstein, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling-dependent+immobilization+of+acylated+proteins+in+the+inner+monolayer+of+the+plasma+membrane.">Signaling-dependent immobilization of acylated proteins in the inner monolayer of the plasma membrane.</a> Journal of Cell Biology. 174 (2), 255-265 (2006).</li><li>Yeung, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Receptor+activation+alters+inner+surface+potential+during+phagocytosis.">Receptor activation alters inner surface potential during phagocytosis.</a> Science. 313 (5785), 347-351 (2006).</li><li>Romano, P. S., Gutierrez, M. G., Beron, W., Rabinovitch, M., Colombo, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+autophagic+pathway+is+actively+modulated+by+phase+II+Coxiella+burnetii+to+efficiently+replicate+in+the+host+cell.">The autophagic pathway is actively modulated by phase II Coxiella burnetii to efficiently replicate in the host cell.</a> Cellular Microbiology. 9 (4), 891-909 (2007).</li><li>Vieira, O. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+Rab5+and+Rab7+recruitment+to+phagosomes+by+phosphatidylinositol+3-kinase.">Modulation of Rab5 and Rab7 recruitment to phagosomes by phosphatidylinositol 3-kinase.</a> Molecular and Cellular Biology. 23 (7), 2501-2514 (2003).</li><li>Roberts, R. L., Barbieri, M. A., Ullrich, J., Stahl, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamics+of+rab5+activation+in+endocytosis+and+phagocytosis.">Dynamics of rab5 activation in endocytosis and phagocytosis.</a> Journal of Leukocyte Biology. 68 (5), 627-632 (2000).</li><li>Vitelli, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+the+small+GTPase+Rab7+in+the+late+endocytic+pathway.">Role of the small GTPase Rab7 in the late endocytic pathway.</a> Journal of Biological Chemistry. 272 (7), 4391-4397 (1997).</li><li>Matte, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leishmania+major+Promastigotes+Evade+LC3-Associated+Phagocytosis+through+the+Action+of+GP63.">Leishmania major Promastigotes Evade LC3-Associated Phagocytosis through the Action of GP63.</a> PLoS Pathogens. 12 (6), 1005690 (2016).</li><li>Dias, B. R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autophagic+Induction+Greatly+Enhances+Leishmania+major+Intracellular+Survival+Compared+to+Leishmania+amazonensis+in+CBA/j-Infected+Macrophages.">Autophagic Induction Greatly Enhances Leishmania major Intracellular Survival Compared to Leishmania amazonensis in CBA/j-Infected Macrophages.</a> Frontiers in Microbiology. 9, 1890 (2018).</li><li>Babcock, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitation+of+phagocytosis+by+confocal+microscopy.">Quantitation of phagocytosis by confocal microscopy.</a> Methods in Enzymology. 307, 319-328 (1999).</li><li>Sanderson, M. J., Smith, I., Parker, I., Bootman, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+microscopy.">Fluorescence microscopy.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2014 (10), 071795 (2014).</li><li>Lennartz, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phospholipases+and+phagocytosis:+the+role+of+phospholipid-derived+second+messengers+in+phagocytosis.">Phospholipases and phagocytosis: the role of phospholipid-derived second messengers in phagocytosis.</a> International Journal of Biochemistry &amp; Cell Biology. 31 (3-4), 415-430 (1999).</li><li>Rashidfarrokhi, A., Richina, V., Tafesse, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+the+Early+Stages+of+Phagocytosis.">Visualizing the Early Stages of Phagocytosis.</a> Journal of Visualized Experiments. (120), e54646 (2017).</li><li>Ramarao, N., Meyer, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Helicobacter+pylori+resists+phagocytosis+by+macrophages:+quantitative+assessment+by+confocal+microscopy+and+fluorescence-activated+cell+sorting.">Helicobacter pylori resists phagocytosis by macrophages: quantitative assessment by confocal microscopy and fluorescence-activated cell sorting.</a> Infection and Immunity. 69 (4), 2604-2611 (2001).</li><li>Bain, J., Gow, N. A., Erwig, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+insights+into+host-fungal+pathogen+interactions+derived+from+live-cell+imaging.">Novel insights into host-fungal pathogen interactions derived from live-cell imaging.</a> Seminars in Immunopathology. 37 (2), 131-139 (2015).</li></ol>

लीशमैनिया-मैक्रोफेज इंटरैक्शन एक जटिल प्रक्रिया है और इसमें कई चरण शामिल हैं जो रोग के विकास को प्रभावित कर सकते हैं5. अनऑप्सोनाइज्ड लीशमैनिया और मेजबान कोशिकाओं की बातचीत में शामिल त?...

लीशमैनियासिस जीनस लीशमैनिया के प्रोटोजोआ परजीवी के कारण एक उपेक्षित उष्णकटिबंधीय बीमारी है, जिसके परिणामस्वरूप कशेरुक मेजबान में नैदानिक अभिव्यक्तियों का एक व्यापक स्पेक्ट्रम होता है, जिसमें त्वचीय लीशमैनियासिस, म्यूकोक्यूटेनियस लीशमैनियासिस और आंत लीशमैनियासिस1 शामिल हैं। विश्व स्वास्थ्य संगठन (डब्ल्यूएचओ) का अनुमान है कि एक अरब से अधिक लोग जोखिम में हैं, प्रति वर्ष दस लाख से अधिक नए मामलेसामने आते हैं।
लीशमैनिया एसपीपी इंट्रासेल्युलर प्रोटोजोअन हैं जो मेजबान कोशिकाओं के अंदर जीवित रहते हैं, जिनमें मोनोसाइट्स, मैक्रोफेज और डेंड्राइटिक कोशिकाएंशामिल हैं 3. लीशमैनिया-मैक्रोफेज इंटरैक्शन एक जटिल प्रक्रिया है जिसमें कई मेजबान सेल रिसेप्टर्स और परजीवी लिगेंड या तो प्रत्यक्ष बातचीत के माध्यम से या पूरक रिसेप्टर्स 4,5 को शामिल करते हुए ऑप्सोनाइजेशन द्वारा शामिल होते हैं। शास्त्रीय सतह रिसेप्टर्स, जैसे सीआर 1, सीआर 3, मैनोज-फ्यूकोस, फाइब्रोनेक्टिन, टोल-जैसे और मेहतर रिसेप्टर्स, मैक्रोफेज 6,7,8 के लिए परजीवी लगाव की मध्यस्थता करते हैं। ये रिसेप्टर्स लीशमैनिया की सतह पर अणुओं को पहचानते हैं, जिसमें 63 केडीए ग्लाइकोप्रोटीन (जीपी 63) और ग्लाइकोलिपिड लिपोफॉस्फोग्लाइकन (एलपीजी) 9 शामिल हैं। ये प्रोमास्टिगोट्स की सतह पर सबसे प्रचुर मात्रा में अणु हैं और मेजबान प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के विध्वंस में एक आवश्यक भूमिका निभाते हैं, स्तनधारी कोशिकाओं में परजीवी संक्रमण की स्थापना के पक्ष में10. परजीवी सतह लिगेंड मैक्रोफेज रिसेप्टर्स से बांधने के बाद, एफ-एक्टिन स्तनधारी कोशिका सतहों पर जमा होता है, परजीवी के आसपास के रूप में वे फागोसाइटोस्ड होते हैं। इसके बाद, यह परजीवी-प्रेरित डिब्बे के गठन की ओर जाता है जिसे पैरासिटोफोरस रिक्तिका (पीवी) कहा जाता है, जो फागोलिसोसोमल विशेषताओं को प्रस्तुत करता है11. एक बार इन फागोलिसोसोम के अंदर, परजीवी जीवित रहने और गुणा के लिए आवश्यक कई परिवर्तनों से गुजरते हैं3.
पीवी का बायोजेनेसिस एक अत्यधिक विनियमित झिल्ली तस्करी प्रक्रिया है जो इस रोगज़नक़ के इंट्रासेल्युलर अस्तित्व के लिए महत्वपूर्ण है12. इस डिब्बे का गठन मेजबान एंडोसाइटिक मार्ग के फागोसोम और डिब्बों के बीच अनुक्रमिक संलयन घटनाओं के परिणामस्वरूप होता है। शास्त्रीय कोशिका जीव विज्ञान अध्ययनों से पता चला है कि पीवी की परिपक्वता में मोनोमेरिक जी प्रोटीन रब 5 और रब 7 प्रोटीन का अधिग्रहण शामिल है, जो मुख्य रूप से क्रमशः प्रारंभिक और देर से एंडोसोम परिपक्वता से जुड़ेहैं। इसके अलावा, ये डिब्बे लाइसोसोम से जुड़े झिल्ली प्रोटीन 1 और 2 (एलएएमपी 1, एलएएमपी 2), लाइसोसोमल झिल्ली के प्रमुख प्रोटीन घटक और सूक्ष्मनलिकाएं से जुड़े प्रोटीन 1 ए / स्पष्ट समानता के बावजूद, पीवी गठन15,16 के कैनेटीक्स और इन डिब्बों की आकृति विज्ञान लीशमैनिया प्रजातियों के आधार पर भिन्न होती है। उदाहरण के लिए, एल मैक्सिकना या एल अमेज़ॅनेंसिस के कारण संक्रमण बड़ी संख्या में परजीवी वाले बड़े डिब्बों के गठन को प्रेरित करता है17. इसके विपरीत, अन्य प्रजातियां, जैसे कि एल ब्राजीलिएंसिस तथा एल शिशु, छोटे रिक्तिकाएं बनाते हैं जिनमें आमतौर पर प्रत्येक रिक्तिका18 में केवल एक या दो परजीवी होते हैं।
मेजबान सेल-लीशमैनिया इंटरैक्शन के आसपास के इस ज्ञान के बावजूद, मेजबान रिसेप्टर्स और परजीवी लिगेंड के बीच संपर्क से शुरू होने वाली प्रारंभिक घटनाओं को पूरी तरह से स्पष्ट नहीं किया गया है। इन घटनाओं को परजीवी संक्रमण के परिणाम के निर्धारक के रूप में जाना जाता है और परजीवी प्रजातियों पर निर्भर हैं, परजीवी को पहचानने के लिए भर्ती किए गए मेजबान सेल रिसेप्टर्स के प्रकार और मैक्रोफेज सिग्नलिंग मार्गों की सक्रियता19,20। इसलिए, लीशमैनिया-प्रेरित पीवी के बायोजेनेसिस में शामिल अणुओं की पहचान करना और संक्रमण की स्थापना और परिणाम में इन अणुओं द्वारा निभाई गई भूमिका (ओं) को निर्धारित करना आवश्यक है। यहां, हम लीशमैनिया के फागोसाइटोसिस के दौरान होने वाली प्रारंभिक घटनाओं की निगरानी की एक विधि का वर्णन करते हैं, जिसमें बाध्यकारी, आंतरिककरण, फागोसोम गठन और परिपक्वता शामिल है। यह काम विभिन्न लीशमैनिया प्रजातियों द्वारा प्रेरित पीवी के गठन में पीएलसी, एक्ट, रब 5, रब 7 और एलसी 3 की भागीदारी को स्पष्ट करने में सहायता कर सकता है। महत्वपूर्ण बात यह है कि इस प्रोटोकॉल का उपयोग पीवी परिपक्वता में शामिल अन्य प्रोटीन की भागीदारी की जांच करने के लिए किया जा सकता है। भविष्य के अध्ययन लीशमैनिया-होस्ट सेल इंटरैक्शन में शामिल तंत्र के आसपास के ज्ञान का विस्तार करेंगे और उपन्यास कीमोथेरेप्यूटिक रणनीतियों के डिजाइन में योगदान देंगे।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-mercaptoethanol</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>21985023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AlexaFluor 488-conjugated goat anti-rabbit IgG</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Tem varios no site</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-LC3 antibody</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>NB600-1384</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (BSA)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CellStripper</td>
			<td>Corning</td>
			<td>25-056-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CellTracker Red (CMTPX) Dye</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>C34552</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centr&#237;fuga</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ciprofloxacin</td>
			<td>Isofarma</td>
			<td>X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 incubator</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal fluorescence microscope (Leica SP8)</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Leica SP8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10270106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscope (Olympus Lx73)</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>Olympus Lx73</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15750045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamine</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>35050-061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES (N- 2-hydroxyethyl piperazine-N&#8217;-2-ethane-sulfonic acid)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histopaque</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>10771</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M-CSF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>300-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NH4Cl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9434</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal goat serum</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>NS02L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nucleofector 2b Device</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>AAB-1001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nucleofector solution</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>VPA-1007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>158127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phalloidin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A12379</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phorbol myristate acetate (PMA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P1585</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer solution (PBS)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>10010023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong Gold Antifade kit</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>P36931</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11875-093</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saponin</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schneider&#39;s Insect medium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S0146</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5761</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium pyruvate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S8636</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>X</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

investigating the phagocytosis of leishmania using confocal microscopy

फागोसाइटोसिस एक ऑर्केस्ट्रेटेड प्रक्रिया है जिसमें अलग-अलग चरण शामिल हैं: मान्यता, बाध्यकारी और आंतरिककरण। पेशेवर फागोसाइट्स फागोसाइटोसिस द्वारा लीशमैनिया परजीवी लेते हैं, जिसमें कई मेजबान सेल रिसेप्टर्स द्वारा परजीवी सतहों पर लिगेंड को पहचानना शामिल है। मैक्रोफेज झिल्ली के लिए लीशमैनिया का बंधन पूरक रिसेप्टर प्रकार 1 (सीआर 1) और पूरक रिसेप्टर प्रकार 3 (सीआर 3) और पैटर्न मान्यता रिसेप्टर्स के माध्यम से होता है। लिपोफॉस्फोग्लाइकन (एलपीजी) और 63 केडीए ग्लाइकोप्रोटीन (जीपी 63) मैक्रोफेज-लीशमैनिया इंटरैक्शन में शामिल मुख्य लिगेंड हैं। मेजबान सेल रिसेप्टर्स द्वारा परजीवी लिगेंड की प्रारंभिक मान्यता के बाद, परजीवी आंतरिक हो जाते हैं, जीवित रहते हैं, और परजीवी रिक्तिकाओं के भीतर गुणा करते हैं। लीशमैनिया-प्रेरित रिक्तिकाओं की परिपक्वता प्रक्रिया में इंट्रासेल्युलर पुटिकाओं से अणुओं का अधिग्रहण शामिल है, जिसमें मोनोमेरिक जी प्रोटीन रब 5 और रब 7, लाइसोसोमल जुड़े झिल्ली प्रोटीन 1 (एलएएमपी -1), लाइसोसोमल जुड़े झिल्ली प्रोटीन 2 (एलएएमपी -2), और सूक्ष्मनलिका से जुड़े प्रोटीन 1 ए /
यहां, हम कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके मेजबान कोशिकाओं के साथ लीशमैनिया इंटरैक्शन के दौरान होने वाली शुरुआती घटनाओं का मूल्यांकन करने के तरीकों का वर्णन करते हैं, जिसमें (i) बाध्यकारी (ii) आंतरिककरण, और (iii) फागोसोम परिपक्वता शामिल है। संक्रमण के परिणाम के इन निर्धारकों के आसपास के ज्ञान के शरीर को जोड़कर, हम लीशमैनिया संक्रमण के रोगजनन की समझ में सुधार करने और उपन्यास कीमोथेरेप्यूटिक लक्ष्यों के लिए अंतिम खोज का समर्थन करने की उम्मीद करते हैं।

इस रिपोर्ट का उद्देश्य एल ब्राजीलिएंसिस-एलसीएल या सीएल के एल ब्राजीलिएंसिस-डीएल रूप को प्रस्तुत करने वाले रोगियों से पृथक एल ब्राजीलिएंसिस के फागोसाइटोसिस के दौरान होने वाली शुरुआती घटना?...

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Investigating the Phagocytosis of Leishmania using Confocal Microscopy

लीशमैनिया संक्रमण में फागोसाइटोसिस से जुड़े तंत्र को खराब तरीके से समझा जाता है। यहां, हम मेजबान कोशिकाओं के साथ लीशमैनिया बातचीत के दौरान होने वाली शुरुआती घटनाओं का मूल्यांकन करने के तरीकों का वर्णन करते हैं।

कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके लीशमैनिया के फागोसाइटोसिस की जांच करना

Phagocytosis is an orchestrated process that involves distinct steps: recognition, binding, and internalization. Professional phagocytes take up ...

लीशमैनिया संक्रमण में फागोसाइटोसिस से जुड़े तंत्र को खराब समझा जाता है। यहां हम मेजबान कोशिकाओं के लिए लीशमैनिया इंटरैक्शन के दौरान इलाज के शुरुआती राज्यों का मूल्यांकन करने के तरीकों का वर्णन करते हैं। यह तकनीक मुख्य लाभ के रूप में प्रस्तुत करती है, जिससे लीशमैनिया फागोसाइटोसिस के विभिन्न राज्यों के अध्ययन और कई प्रोटीनों की भागीदारी की अनुमति मिलती है।यह ध्यान देने योग्य है कि इस तकनीक को अन्य प्रकार के अध्ययनों तक भी बढ़ाया जा सकता है, जिसमें बैक्टीरिया, खमीर द्वारा संक्रमण, या यह अन्य प्रकार की कोशिकाओं द्वारा संलग्न हो सकता है। इस तकनीक की कोशिश करने वाले लोगों को न्यूक्लियोफेक्टर समाधान के लिए कोशिकाओं के जोखिम समय का ख्याल रखना चाहिए। इसके अलावा, हम अधिकतम दो प्लास्मिड का उपयोग करके अभिकर्मक का परीक्षण शुरू करने का सुझाव देते हैं।प्रक्रिया का प्रदर्शन अमांडा रिबौकास, हमारी प्रयोगशाला से पीएचडी छात्र होगा। शुरू करने के लिए, 13 मिलीमीटर ग्लास कवरलिप्स के साथ 24 अच्छी तरह से प्लेट पर 500 माइक्रोलीटर आरपीएमआई में 0.2 मिलियन टीएचपी -1 कोशिकाओं, या मानव मोनोसाइट-व्युत्पन्न मैक्रोफेज बीज। 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत 37 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे के लिए सेते हैं, 0.9% खारा के साथ दो बार कोशिकाओं को धोलें और एक पूर्ण आरपीएमआई माध्यम में कोशिकाओं सेते हैं।10 परजीवी पर कोशिकाओं में स्थिर चरण लीशमैनिया प्रजातियों को जोड़ें एक मेजबान सेल अनुपात है, और फिर, चार डिग्री सेल्सियस पर 10 मिनट के लिए 720 गुना ग्राम पर अपकेंद्रित्र। पांच मिनट के लिए चार डिग्री सेल्सियस पर कोशिकाओं को इनक्यूबेट करने के बाद, किसी भी गैर-आंतरिक प्रोमास्टिगोट्स को हटाने के लिए 0.9% खारा समाधान के साथ कोशिकाओं को दो बार धो लें। एक घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर पूरक आरपीएमआई मध्यम में कोशिकाओं सेते हैं, और फिर, 15 मिनट के लिए 4% पीएफए के साथ कोशिकाओं को ठीक करें।अगला, पसंदीदा बढ़ते मीडिया का उपयोग करके कवरलिप्स माउंट करें। फिर, प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप के तहत यादृच्छिक क्षेत्रों में कम से कम 400 कोशिकाओं की गणना करें। लीशमैनिया-प्रेरित पीवी बायोजेनेसिस की जांच करने के लिए, 75 वर्ग सेंटीमीटर टिशू कल्चर फ्लास्क में 15 मिलियन टीएचपी -1 कोशिकाओं को प्लाज्मिड के साथ ट्रांसफेक्ट करना शुरू करें, जिसमें 10 मिलीलीटर पूर्ण आरपीएमआई माध्यम 100 नैनोग्राम प्रति मिलीलीटर पीएमए के साथ पूरक है, और 50 माइक्रोमोलर से मर्कैप्टोथेनॉल 48 घंटे के लिए।फिर, 0.9% खारा समाधान में एक बार कोशिकाओं को धो लें और गैर-एंजाइमी सेल पृथक्करण समाधान का उपयोग करके कोशिकाओं को अलग करें। फिर, कमरे के तापमान पर पांच मिनट के लिए 250 गुना ग्राम पर अपकेंद्रित्र। इसके बाद, आरपीएमआई मीडियम के एक मिलीलीटर में टीएचपी -1 कोशिकाओं को फिर से निलंबित करें और न्यूबॉयर कक्ष में गिनती करें।कमरे के तापमान पर 10 मिनट के लिए 250 बार जी पर फिर से कोशिकाओं को अपकेंद्रित्र करें और सतह पर तैरनेवाला त्यागें। न्यूक्लियोफेक्टर समाधान के 100 माइक्रोलीटर में 2 मिलियन कोशिकाओं को फिर से निलंबित करें और फ्लोरोसेंट प्रोटीन के साथ टैग किए गए ब्याज के प्रोटीन के लिए 0.5 माइक्रोग्राम प्लास्मिड कोटिंग के साथ सेते हैं। न्यूक्लियोफेक्टर क्यूवेट में टीएचपी -1 कोशिकाओं और न्यूक्लिक एसिड युक्त निलंबन को स्थानांतरित करें।फिर, न्यूक्लियोफेक्टर प्रोग्राम वाई वन का उपयोग करके कोशिकाओं को ट्रांसफेक्ट करें। 13 मिलीमीटर ग्लास कवरलिप्स के साथ 24 अच्छी तरह से प्लेटों पर आरपीएमआई मीडियम के 500 माइक्रोलीटर में ट्रांसफेक्टेड कोशिकाओं और बीज को पुनर्प्राप्त करें। 0.5, 2, 4, 6, 12, और 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर कोशिकाओं और पूर्ण आरपीएमआई मध्यम सेते हैं।कमरे के तापमान पर 13 मिलीमीटर ग्लास कवरलिप्स छोड़ दें और अधिग्रहण से कम से कम 30 मिनट पहले उन्हें प्रकाश से बचाएं। कवरलिप्स को शोषक ऊतक के साथ साफ करें। अगला, उद्देश्य में विसर्जन तेल की एक बूंद जोड़ें, और फिर स्लाइड जोड़ें।उद्देश्य को तब तक ले जाएं जब तक कि तेल स्लाइड को स्पर्श न करे। निरीक्षण और माइक्रोस्कोप पर ध्यान समायोजित करें और तेल के साथ विकल्प 63x उद्देश्य का चयन करें। LIQA कार्यक्रम खोलें और 488, 552 और 405 तरंग दैर्ध्य में पराबैंगनीकिरण को समायोजित करें।छवि रिज़ॉल्यूशन को 1024 x 1024 के रूप में चुनें। लाइव बटन पर क्लिक करने के बाद, जेड-स्टैक सेट करें और स्टार्ट ऑप्शन दबाएं। छवि अधिग्रहण के लिए प्रतीक्षा करें और फिर उपकरणों में विकल्प, अधिकतम प्रक्षेपण का चयन करें।प्रयोग सहेजें, और TIFF स्वरूप छवियों को कंप्यूटर पर निर्यात करें। परिणामों से पता चला है कि लीशमैनिया ब्राजीलियन्सिस एलसीएल, और लीशमैनिया ब्राजीलिएंसिस डीएल दोनों, समान रूप से मैक्रोफेज से बंधते हैं। इसके अलावा, मेजबान कोशिकाओं द्वारा लीशमैनिया ब्राजीलिएंसिस एलसीएल और लीशमैनिया ब्राजीलिएंसिस डीएल फागोसाइटोसिस के बारे में कोई अंतर नहीं देखा गया।लीशमैनिया ब्राजीलियन्सिस एलसीएल या लीशमैनिया ब्राजीलियन्सिस डीएल द्वारा प्रेरित परजीवी रिक्तिका, या पीवी के लिए एलसी 3 की भर्ती की तुलना संक्रमित कोशिकाओं में की गई थी। संक्रमण के चार घंटे बाद, लीशमैनिया ब्राजीलिएंसिस एलसीएल और लीशमैनिया ब्राजीलिएंसिस डीएल संक्रमित मैक्रोफेज में एलसी 3-सजाए गए पीवी के समान प्रतिशत देखे गए। इस प्रकार, परिणामों से पता चला है कि लीशमैनिया ब्राजीलियन्सिस एलसीएल और लीशमैनिया ब्राजीलिएंसिस डीएल इसी तरह एलसी 3 भर्ती के विषय में पीवी के बाध्यकारी, फागोसाइटोसिस और बायोजेनेसिस के दौरान मैक्रोफेज के साथ बातचीत करते हैं।प्रतिनिधि सूक्ष्म छवियों ने पीएलसी-जीएफपी, रब 5-जीएफपी, रब 7-जीएफपी प्लास्मिड के साथ टीएचपी -1 कोशिकाओं के कुशल अभिकर्मक का प्रदर्शन किया। इस प्रोटोकॉल की कोशिश कर रहे लोगों को तापमान इनक्यूबेशन पर ध्यान देना चाहिए और प्रकाश से माइक्रोस्कोप नमूनों की रक्षा करनी चाहिए, सभी प्रकार। लीशमैनिया फागोसाइटोसिस को अवक्षेपित करने वाले पहचाने गए प्रोटीन की अभिव्यक्ति को संशोधित करना लीशमैनिया संक्रमण परिणाम में उन प्रोटीनों के महत्व को प्रदर्शित करेगा।हम चिकित्सीय रणनीतियों के विकास के लिए परजीवी स्थापना और लक्ष्य पहचान से जुड़े विभिन्न प्रकार के पैथोलॉजी अध्ययनों और तंत्रों की ओर इस तकनीक का विस्तार कर सकते हैं।

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Investigating the Phagocytosis of Leishmania using Confocal Microscopy

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

ट्रांसजेनिक लीशमैनिया परजीवियों की एक लाइव होस्ट में vivo इमेजिंग में

Distinct species of Leishmania, a protozoan parasite of the family Trypanosomatidae, typically cause different human disease manifestations. The most ...

Visualizing Cell-to-cell Transfer of HIV using Fluorescent Clones of HIV and Live Confocal Microscopy

Visualizing एचआईवी के स्थानांतरण सेल के लिए सेल एचआईवी और लाइव confocal माइक्रोस्कोपी के प्रतिदीप्त क्लोन का उपयोग

By fusing the green fluorescent protein to their favorite proteins, biologists now have the ability to study living complex cellular processes using ...

Direct Observation of Phagocytosis and NET-formation by Neutrophils in Infected Lungs using 2-photon Microscopy

2-photon माइक्रोस्कोपी का उपयोग संक्रमित फेफड़े में neutrophils द्वारा phagocytosis और NET गठन के प्रत्यक्ष अवलोकन

After the gastrointestinal tract, the lung is the second largest surface for interaction between the vertebrate body and the 
environment. Here, an ...

Intravital Microscopy of the Spleen: Quantitative Analysis of Parasite Mobility and Blood Flow

प्लीहा के intravital माइक्रोस्कोपी: परजीवी गतिशीलता और रक्त प्रवाह के मात्रात्मक विश्लेषण

The advent of intravital microscopy in experimental rodent malaria models has allowed major advances to the knowledge of parasite-host interactions 1,2. ...

Live-cell Video Microscopy of Fungal Pathogen Phagocytosis

लाइव सेल कवक रोगज़नक़ phagocytosis के वीडियो माइक्रोस्कोपी

Phagocytic clearance of fungal pathogens, and microorganisms more generally, may be considered to consist of four distinct stages: (i) migration of ...

Investigating the Effects of Probiotics on Pneumococcal Colonization Using an In Vitro Adherence Assay

Investigating the Effects of Probiotics on Pneumococcal Colonization Using an In Vitro Adherence Assay

एक का प्रयोग न्यूमोकोकल औपनिवेशीकरण पर प्रोबायोटिक्स के प्रभाव की जांच<em&gt; इन विट्रो</em&gt; पालन परख

Adherence of Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus) to the epithelial lining of the nasopharynx can result in colonization and is considered a ...

Assessing Anti-fungal Activity of Isolated Alveolar Macrophages by Confocal Microscopy

Confocal माइक्रोस्कोपी द्वारा अलग वायुकोशीय मैक्रोफेज की एंटी फंगल गतिविधि का आकलन

The lung is an interface where host cells are routinely exposed to microbes and microbial products. Alveolar macrophages are the first-line phagocytic ...

Intravital Microscopy Imaging of the Liver following Leishmania Infection: An Assessment of Hepatic Hemodynamics

Intravital Microscopy Imaging of the Liver following Leishmania Infection: An Assessment of Hepatic Hemodynamics

निम्नलिखित जिगर के intravital माइक्रोस्कोपी इमेजिंग<em&gt; लीशमैनिया</em&gt; संक्रमण: यकृत hemodynamics के एक आकलन

Intravital microscopy (IVM) is a powerful optical imaging technique that has made possible the visualization, monitoring and quantification of various ...

A New Method for Qualitative Multi-scale Analysis of Bacterial Biofilms on Filamentous Fungal Colonies Using Confocal and Electron Microscopy

एक filamentous फफूंद कालोनियों पर बैक्टीरियल biofilms के गुणात्मक बहु पैमाने विश्लेषण के लिए नई विधि का उपयोग Confocal और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी

Bacterial biofilms frequently form on fungal surfaces and can be involved in numerous bacterial-fungal interaction processes, such as metabolic ...

Visualizing Macrophage Extracellular Traps Using Confocal Microscopy

visualizing Macrophage Extracellular जाल का उपयोग कर फोकल माइक्रोस्कोपी

A primary method used to define the presence of neutrophil extracellular traps (NETs) is confocal microscopy. We have modified established confocal ...