Name: visualization and quantification of brown and beige adipose tissues in mice using [18f]fdg micro-pet/mr imaging
Uploaded: 2021-07-01T14:00:00
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Agradecemos el apoyo de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (NSFC) - Excellent Young Scientists Fund (Hong Kong y Macao) (81922079), Hong Kong Research Grants Council General Research Fund (GRF 17121520 y 17123419) y Hong Kong Research Grants Council Collaborative Research Fund (CRF C7018-14E) para experimentos de imágenes en animales pequeños.

El protocolo que se describe a continuación sigue las pautas de cuidado animal de la Universidad de Hong Kong. Los animales utilizados en el estudio fueron ratones C57BL / 6J de 8 semanas de edad.
1. Procedimientos quirúrgicos en animales y desafío al frío
<ol><li>Realizar disección interescapular BAT (iBAT).<ol>
<li>Anestesiar a los ratones mediante inyección intraperitoneal de ketamina/xilazina (100 mg/kg de ketamina de peso corporal y 10 mg/kg de xilazina de peso corporal). Después...

<ol>
	<li>Rosen, E. D., Spiegelman, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+we+talk+about+when+we+talk+about+fat.">What we talk about when we talk about fat.</a> Cell. 156 (1-2), 20-44 (2014).</li><li>Cannon, B., Brown Nedergaard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=adipose+tissue:+function+and+physiological+significance.">adipose tissue: function and physiological significance.</a> Physiological Review. 84 (1), 277-359 (2004).</li><li>Jal Wu, ., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beige+adipocytes+are+a+distinct+type+of+thermogenic+fat+cell+in+mouse+and.">Beige adipocytes are a distinct type of thermogenic fat cell in mouse and.</a> 150 (2), 366-376 (2012).</li><li>Cypess, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+human+brown+adipose+tissue+by+a+beta3-adrenergic+receptor+agonist.">Activation of human brown adipose tissue by a beta3-adrenergic receptor agonist.</a> Cell Metabolism. 21 (1), 33-38 (2015).</li><li>Ishibashi, J., Seale, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beige+can+be+slimming.">Beige can be slimming.</a> Science. 328 (5982), 1113-1114 (2010).</li><li>Jal Schulz, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brown-fat+paucity+due+to+impaired+BMP+signalling+induces+compensatory+browning+of+white+fat.">Brown-fat paucity due to impaired BMP signalling induces compensatory browning of white fat.</a> Nature. 495 (7441), 379-383 (2013).</li><li>Pal Cohen, ., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ablation+of+PRDM16+and+beige+adipose+causes+metabolic+dysfunction+and+a+subcutaneous+to+visceral+fat+switch.">Ablation of PRDM16 and beige adipose causes metabolic dysfunction and a subcutaneous to visceral fat switch.</a> Cell. 156 (1-2), 304-316 (2014).</li><li>Mal Cypess, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+importance+of+brown+adipose+tissue+in+adult+humans.">Identification and importance of brown adipose tissue in adult humans.</a> New England Journal of Medicine. 360 (15), 1509-1517 (2009).</li><li>Aal vander Lans, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cold+acclimation+recruits+human+brown+fat+and+increases+nonshivering+thermogenesis.">Cold acclimation recruits human brown fat and increases nonshivering thermogenesis.</a> Journal of Clinical Investigation. 123 (8), 3395-3403 (2013).</li><li>Jal Hanssen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short-term+cold+acclimation+improves+insulin+sensitivity+in+patients+with+type+2+diabetes+mellitus.">Short-term cold acclimation improves insulin sensitivity in patients with type 2 diabetes mellitus.</a> Nature Medicine. 21 (8), 863-865 (2015).</li><li>Wang, X., Minze, L. J., Shi, Z. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+imaging+of+brown+fat+in+mice+with+18F-FDG+micro-PET/CT.">Functional imaging of brown fat in mice with 18F-FDG micro-PET/CT.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. 69, (2012).</li><li>Greenwood, H. E., Nyitrai, Z., Mocsai, G., Hobor, S., Witney, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+PET/CT+imaging+using+a+multiple-mouse+imaging+system.">High-throughput PET/CT imaging using a multiple-mouse imaging system.</a> Journal of Nuclear Medicine: Official Publication, Scoiety of Nuclear Medicine. 61 (2), 292-297 (2020).</li><li>Carter, L. M., Henry, K. E., Platzman, A., Lewis, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D-printable+platform+for+high-throughput+small-animal+imaging.">3D-printable platform for high-throughput small-animal imaging.</a> Journal of Nuclear Medicine: Official Publication, Scoiety of Nuclear Medicine. 61 (11), 1691-1692 (2020).</li><li>Jal Andersson, ., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimating+the+cold-induced+brown+adipose+tissue+glucose+uptake+rate+measured+by+(18)F-FDG+PET+using+infrared+thermography+and+water-fat+separated+MRI.">Estimating the cold-induced brown adipose tissue glucose uptake rate measured by (18)F-FDG PET using infrared thermography and water-fat separated MRI.</a> Scientific Reports. 9 (18), 12358 (2019).</li><li>Eal Lundstrom, ., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brown+adipose+tissue+estimated+with+the+magnetic+resonance+imaging+fat+fraction+is+associated+with+glucose+metabolism+in+adolescents.">Brown adipose tissue estimated with the magnetic resonance imaging fat fraction is associated with glucose metabolism in adolescents.</a> Pediatric Obesity. 14 (9), (2019).</li><li>Eal Lundstrom, ., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+resonance+imaging+cooling-reheating+protocol+indicates+decreased+fat+fraction+via+lipid+consumption+in+suspected+brown+adipose+tissue.">Magnetic resonance imaging cooling-reheating protocol indicates decreased fat fraction via lipid consumption in suspected brown adipose tissue.</a> PLoS One. 10 (4), 0126705 (2015).</li><li>Nakamura, Y., Yanagawa, Y., Morrison, S. F., Nakamura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medullary+reticular+neurons+mediate+neuropeptide+Y-induced+metabolic+inhibition+and+mastication.">Medullary reticular neurons mediate neuropeptide Y-induced metabolic inhibition and mastication.</a> Cell Metabolism. 25 (2), 322-334 (2017).</li><li>Jal Fueger, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+animal+handling+on+the+results+of+18F-FDG+PET+studies+in+mice.">Impact of animal handling on the results of 18F-FDG PET studies in mice.</a> Journal of Nuclear Medicine: Official Publication, Scoiety of Nuclear Medicine. 47 (6), 999-1006 (2006).</li><li>Vines, D. C., Green, D. E., Kudo, G., Keller, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+mouse+tail-vein+injections+both+qualitatively+and+quantitatively+on+small-animal+PET+tail+scans.">Evaluation of mouse tail-vein injections both qualitatively and quantitatively on small-animal PET tail scans.</a> Journal of Nuclear Medicine Technology. 39 (4), 264-270 (2011).</li></ol>

En este estudio, se describió una imagen basada en PET / MR y cuantificación del tejido adiposo marrón y beige funcional en animales pequeños. Este método utiliza el análogo de glucosa no metabolizable [18F]FDG como biomarcador de imagen para identificar los tejidos adiposos con alta demanda de glucosa de una manera no invasiva. La RM ofrece un buen contraste de tejidos blandos y puede diferenciar mejor los tejidos grasos adiposos de los tejidos blandos y músculos vecinos. Cuando se combina con PET, est...

En respuesta a las necesidades nutricionales cambiantes, el tejido adiposo sirve como un depósito de energía para adoptar el almacenamiento de lípidos o el modo de movilización para satisfacer las necesidades del cuerpo1. Además, el tejido adiposo también desempeña una función clave en la termorregulación, a través de un proceso llamado termogénesis no temblorosa, también llamada termogénesis facultativa. Esto se logra típicamente por el tejido adiposo marrón (BAT), que expresa un nivel abundante de proteína de desacoplamiento de la membrana mitocondrial proteína 1 (UCP1). Como portador de protones, UCP1 genera calor al desacoplar el transporte de protones y la producción de ATP2. Tras la estimulación en frío, la termogénesis en BAT se pone en marcha mediante la activación del sistema nervioso simpático (SNS), seguida de la liberación de norepinefrina (NE). NE se une a los receptores adrenérgicos β3 y conduce a la elevación del AMP cíclico intracelular (cAMP). Como consecuencia, la participación dependiente de cAMP/PKA de CREB (cAMP response element-binding protein) estimula la transcripción de Ucp1 a través de la unión directa a elementos de respuesta CREB (CRE)2. Además de bat, los adipocitos de color marrón también se encuentran dentro del tejido adiposo blanco y, por lo tanto, se denominan células beige o brite (marrón en blanco)1,3. En respuesta a estímulos específicos (como el frío), estas células beige inactivas se remodelan para exhibir múltiples características similares al marrón, incluidas gotas lipídicas multiloculares, mitocondrias densamente empaquetadas y expresión aumentada de UCP13,4,5.
Estudios en animales han demostrado que los adipocitos marrones y beige poseen múltiples beneficios metabólicos más allá de su efecto reductor de grasa, incluyendo sensibilización a la insulina, hipolipemiante, antiinflamación y antiaterosclerosis6,7. En humanos, la cantidad de grasa beige/marrón se correlaciona inversamente con la edad, el índice de resistencia a la insulina y los trastornos cardiometabólicos8. Además, la activación de los adipocitos beige/marrón en humanos por aclimatación en frío o agonista del receptor adrenérgico β3 confiere protección frente a una serie de trastornos metabólicos4,9,10. Estas evidencias indican colectivamente que la inducción de tejido adiposo marrón y beige es una estrategia terapéutica potencial para el manejo de la obesidad y sus complicaciones médicas relacionadas8.
Curiosamente, aunque comparten una función similar, los adipocitos beige y marrón clásico se derivan de diferentes precursores y se activan por mecanismos superpuestos pero distintos1. Por lo tanto, la imagen in vivo y la cuantificación de los adipocitos marrón y beige son esenciales para lograr una mejor comprensión del control molecular de estos tejidos adiposos. Actualmente, la tomografía por emisión de positrones (PET) con 18F-fluorodesoxiglucosa ([18F]FDG) combinada con tomografía computarizada (TC) sigue siendo el estándar de oro para la caracterización de células termogénicas de color marrón y beige en estudios clínicos8. La resonancia magnética (MRI) utiliza potentes campos magnéticos y pulsos de radiofrecuencia para producir estructuras anatómicas detalladas. En comparación con la tomografía computarizada, la resonancia magnética genera imágenes de órganos y tejidos blandos con una resolución más alta. Aquí se proporciona un protocolo para la visualización y cuantificación de las adiposas funcionales de color marrón y beige en modelos de ratón después de la aclimatación a la exposición al frío, una forma común y más confiable de inducir el pardeamiento adiposo. Este método se puede aplicar para caracterizar los depósitos adiposos termogénicos en modelos de animales pequeños con alta precisión.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% sterile saline</td>
			<td>BBraun</td>
			<td></td>
			<td>0.9% sodium chloride intravenous infusion, 500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL syringe</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SS05L</td>
			<td>5 mL syringe Luer Lock</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dose Calibrator</td>
			<td>Biodex</td>
			<td></td>
			<td>Atomlab 500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye lubricant</td>
			<td>Alcon Duratears</td>
			<td></td>
			<td>Sterile ocular lubricant ointment, 3.5 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>10ME2913</td>
			<td>1 mL insulin syringe with needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>InterView Fusion software</td>
			<td>Mediso</td>
			<td>Version 3.03</td>
			<td>Post-processing and image analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Chanelle Pharma</td>
			<td></td>
			<td>Iso-Vet, inhalation anesthetic, 250 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Alfasan International B.V.</td>
			<td>HK-37715</td>
			<td>Ketamine 10% injection solution, 10 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical oxygen</td>
			<td>Linde HKO</td>
			<td>101-HR</td>
			<td>compressed gas, 99.5% purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metacam</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td></td>
			<td>5 mg/mL Meloxicam solution for injection for dogs and cats, 10 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>nanoScan PET/MR Scanner</td>
			<td>Mediso</td>
			<td></td>
			<td>3 Tesla MR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nucline nanoScan software</td>
			<td>Mediso</td>
			<td>Version 3.0</td>
			<td>Scanner operating software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wound clips</td>
			<td>Reflex 7</td>
			<td>203-100</td>
			<td>7mm Stainless steel wound clips, 20 clips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Alfasan International B.V.</td>
			<td>HK-56179</td>
			<td>Xylazine 2% injection solution, 30 mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visualization and quantification of brown and beige adipose tissues in mice using [18f]fdg micro-pet/mr imaging

Los adipocitos marrones y beige ahora se reconocen como posibles objetivos terapéuticos para la obesidad y los síndromes metabólicos. Los métodos de imágenes moleculares no invasivas son esenciales para proporcionar información crítica sobre estos depósitos adiposos termogénicos. Aquí, el protocolo presenta un método basado en imágenes PET / MR para evaluar la actividad de los adipocitos marrón y beige en el tejido adiposo marrón interescapular de ratón (iBAT) y el tejido adiposo blanco subcutáneo inguinal (iWAT). La visualización y cuantificación de los depósitos adiposos termogénicos se logró utilizando [18F]FDG, el análogo de glucosa no metabolizable, como radiotrazador, cuando se combinó con la información anatómica precisa proporcionada por las imágenes de RM. La imagen PET/MR se realizó 7 días después de que se realizara la aclimatación en frío y la cuantificación de la señal [18F]FDG en diferentes depósitos adiposos para evaluar la movilización relativa de los tejidos adiposos termogénicos. La eliminación de iBAT aumentó sustancialmente la absorción de FDG evocada por frío [18F] en iWAT de los ratones.

Tres grupos de ratones (n = 3 por grupo) se sometieron a imágenes micro-PET / MR en este estudio, donde fueron alojados en termoneutralidad (30 ° C) o frío (6 ° C) durante 7 días. A un grupo de ratones (n = 3) se les extirpó el iBAT (iBATx) antes del tratamiento con frío (Figura 1A). Este método condujo a una alteración de la actividad del tejido adiposo blanco en los tres ratones. En particular, se observó un aumento notable en la captación de [18F]FDG en iWAT utilizan...

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Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

Imágenes funcionales y cuantificación de depósitos adiposos termogénicos en ratones utilizando un enfoque basado en imágenes micro-PET / MR.

Visualización y cuantificación de tejidos adiposos marrones y beige en ratones utilizando [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

Brown and beige adipocytes are now recognized as potential therapeutic targets for obesity and metabolic syndromes. Non-invasive molecular imaging methods ...

Las imágenes PET/MR permiten mediciones cualitativas y cuantitativas de estos adipocitos marrón y beige metabólicamente activos en animales vivos para que la actividad de estos llamados adipocitos termogénicos se pueda medir sobre una base funcional. La principal ventaja de esta técnica es que permite la adquisición y combinación de pet y resonancia magnética sobre el mismo sujeto, permitiendo así la adquisición precisa y simultánea de adipocitos termogénicos en diferentes depósitos del pequeño animal. Este método se puede transferir fácilmente a cualquier sistema preclínico o modificarse a un formato de alto rendimiento mediante la obtención simultánea de imágenes de múltiples ratones, lo que aumenta el poder estadístico de los datos de imágenes a un costo y tiempo reducidos.Para cosechar el tejido adiposo marrón interescapular, coloque un ratón C57 Black 6 anestesiado de 8 semanas de edad sobre una almohadilla térmica y haga una incisión de 2 centímetros a lo largo de la línea media dorsal. Retire las almohadillas iBAT de la región interescapular. Después de que el sangrado se detenga, use clips de acero inoxidable de 7 milímetros para cerrar la incisión.Cuando se haya recolectado todo el iBAT, aloje a los ratones en una unidad de cuidados intensivos durante 14 días. Administre 5 miligramos por kilogramo de Meloxicam a los ratones durante seis días y retire los clips tan pronto como la herida haya cicatrizado. Para habilitar las exploraciones secuenciales automatizadas de PET/MR antes de la sesión de imágenes, establezca el nivel de discriminación en 400 a 600 kiloelectronvoltios, el modo de confianza en 1-3, el tiempo de escaneo en 20 minutos y el isótopo de estudio en F-18 para establecer el flujo de trabajo para la adquisición de PET.Para adquirir la resonancia magnética ponderada en T1 para la corrección de la atenuación, establezca los parámetros gradient Echo-3D. Para adquirir la resonancia magnética ponderada en T2 como referencia anatómica, establezca los parámetros Fast-spin Echo 2D. Para permitir la reconstrucción de las imágenes PET, utilice el algoritmo Tera-Tomo 3D con el modo de coincidencia establecido en 1-3 y con las correcciones de decaimiento, tiempo muerto, aleatorio, atenuación y dispersión establecidas para crear imágenes con un tamaño general de vóxel de 0,3 milímetros cúbicos.Un día antes del inicio del estudio de imagen para comprobar la exactitud de la cuantificación del PET, póngase el EPI adecuado y llene una jeringa de 5 mililitros con F18-FDG según lo recomendado por el fabricante. Utilice un calibrador de dosis para registrar la actividad de la jeringa y anotar el tiempo de la medición. En el software, utilice el ROI de elipse interpolada para dibujar un volumen de interés en la imagen reconstruida de la jeringa y comparar la actividad recuperada con el valor medido con el calibrador de dosis.El día del experimento de imágenes, use fórceps para colocar cuidadosamente el vial de stock 18F-FDG detrás de un escudo de mesa de bloque L y diluya una alícuota de radioisótopo en 100 a 150 microlitros de solución salina estéril a una concentración de actividad total de 200 a 250 microcuries. Extraiga la solución 18F-FDG en una jeringa de 1 mililitro equipada con una aguja y mida la radiactividad con el calibrador de dosis como se ha demostrado. Registre el peso del ratón que se va a tomar como imagen antes de inyectar la solución 18F-FDG en una vena de la cola.Tome nota del tiempo de inyección y de la radiactividad residual de la jeringa para permitir la corrección de la descomposición. Luego coloque el mouse de nuevo en su jaula durante 60 minutos. Para calcular la actividad 18F-FDG inyectada, reste la actividad en la jeringa antes de la inyección de la actividad medida después de la inyección.Al final del período de absorción de radioisótopos, encienda el calentador de aire para el lecho del ratón del escáner micro-PET/MR. Coloque el ratón anestesiado inyectado con FDG en una almohadilla respiratoria en la cama del escáner y realice una vista de exploración para determinar la posición del ratón. Ajuste la posición de la cama del ratón de modo que se pueda observar todo el cuerpo, asegurando que el centro del campo de visión de la resonancia magnética coincida con el centro del cuerpo.En Adquisición de PET, seleccione Rango de escaneo en Adquisición anterior para usar la posición de vista de explorador y haga clic en Preparar para mover la cama del animal de MR a PET. Seleccione Aceptar para iniciar la exploración PET. Registre la dosis de inyección y el tiempo medido antes y después de la administración de 18F-FDG en el Editor de radiofármacos e introduzca el peso del ratón en el menú Información del sujeto.Una vez completada la TEP, seleccione Prepararse para pasar a la rmografía por rmn y completar todas las adquisiciones por resonancia magnética en la ventana de la lista de estudios. Seleccione Aceptar para iniciar los análisis de RM. Una vez que se haya completado todo el flujo de trabajo, evalúe brevemente la calidad de las imágenes de RM adquiridas en el software de posprocesamiento y haga clic en Inicio para mover la cama del mouse de la RM a la posición original.Cuando se hayan creado imágenes de todos los ratones, para reconstruir los datos en el menú Escaneo sin procesar, seleccione Adquisición de PET para cargar el escaneo PET completado y seleccione Adquisición de RM ponderada en T1 para permitir que se cree un mapa de materiales. Luego use el algoritmo Tera-Tomo 3D para reconstruir los datos como se demostró. La eliminación de iBAT antes del tratamiento en frío altera la actividad del iWAT, como lo indica el notable aumento en la absorción de 18F-FDG observada en iWAT por imágenes micro-PET / MR.Además, los adipocitos multiloculares, que se observan característicamente en el tejido adiposo beige, son más pronunciados en iWAT de ratones después de la eliminación de iBAT en comparación con la morfología de adipocitos observada en iWAT de animales operados simuladamente. Los ratones tratados en frío y operados simuladamente demuestran una absorción marcadamente elevada de 18F-FDG en iBAT. Los ratones con su iBAT eliminado antes del tratamiento en frío muestran la mayor absorción de 18F-FDG en el iWAT.De hecho, la exposición al frío causa un aumento de siete veces en la absorción de 18F-FDG en el iBAT de ratones operados simuladamente, mientras que la eliminación de iBAT en los ratones inducidos por el frío resulta en un aumento de ocho veces en la absorción de 18F-FDG en comparación con los ratones termo-neutros en los que solo se observa un modesto aumento de dos veces. Al intentar este procedimiento, colocar a cada ratón en una misma posición para cada adquisición de PET / MRI es importante para mejorar la visualización y cuantificación de los adipocitos marrones y beige en diferentes regiones. Utilizando este método y junto con otros métodos de resonancia magnética, como la difusión con imágenes o termometría, pueden comenzar más conocimientos sobre la distribución espacial y la prevalencia de los adipocitos marrón y beige en ratones, que potencialmente se pueden traducir a humanos.Este método permite a los investigadores estudiar la función de estos adipocitos termogénicos de color marrón y beige. Por lo tanto, son especialmente poderosos cuando se estudian las vías termogénicas no clínicas en las que esos marcadores clásicos no se alteran ni se regulan al alza.

Research

JoVE Journal

Biology

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

Functional Imaging of Brown Fat in Mice with 18F-FDG micro-PET/CT

Functional Imaging of Brown Fat in Mice with 18F-FDG micro-PET/CT

Imagen funcional de grasa marrón en ratones con FDG micro-PET/CT

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Investigación

Biología

Visualization and Quantification of Mesenchymal Cell Adipogenic Differentiation Potential with a Lineage Specific Marker

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Visualization of 3D White Adipose Tissue Structure Using Whole-mount Staining

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Exploring Adipose Tissue Structure by Methylsalicylate Clearing and 3D Imaging

Explorar la estructura del tejido adiposo mediante la limpieza de metilsalicilatos y las imágenes 3D

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Preparation of Adipose Progenitor Cells from Mouse Epididymal Adipose Tissues

Preparación de células progenitoras adiposas de tejidos adiposos epidídicos del ratón

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Isolation and Differentiation of Primary White and Brown Preadipocytes from Newborn Mice

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Quantification of Skeletal Muscle Fatty Infiltration via Decellularization

Decellularization-Based Quantification of Skeletal Muscle Fatty Infiltration

Decellularization-Based Quantification of Skeletal Muscle Fatty Infiltration (Video) | JoVE 

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Estrategias de cuantificación, evaluación de viabilidad y visualización de biopelículas de Acinetobacter

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