Name: a generalized method for determining free soluble phenolic acid composition and antioxidant capacity of cereals and legumes
Uploaded: 2022-06-10T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Generalized Method for Determining Free Soluble Phenolic Acid Composition and Antioxidant Capacity of Cereals and Legumes at JoVE.com

저자는 Alison Ser와 Hannah Oduro-Obeng의 기술 지원과 Janice Fajardo와 Miguel del Rosario의 비디오 편집 지원에 감사드립니다.

1. 샘플의 종류
<ol><li>이 연구를 위해 두 개의 곡물 (예 : 듀럼 밀 및 노란 옥수수)과 세 개의 콩과 식물 (예 : Blackeye cowpea 콩, 콩 및 붉은 신장 콩)으로 구성된 다섯 개의 전체 곡물 샘플을 사용하십시오.</li>
	<li>각 곡물 50g을 세 배로 분쇄하여 밀가루로 분쇄하고 커피 분쇄기를 사용하여 500 μm 체로 통과시킵니다.</li>
	<li>-20 °C에서 보관하십시오.</li>
</ol>2. 시료 준...

<ol>
	<li>Huitu, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicon,+endophytes+and+secondary+metabolites+as+grass+defenses+against+mammalian+herbivores.">Silicon, endophytes and secondary metabolites as grass defenses against mammalian herbivores.</a> Frontiers in Plant Science. 5, 478 (2014).</li><li>Joshi, J. R., Burdman, S., Lipsky, A., Yariv, S., Yedidia, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant+phenolic+acids+affect+the+virulence+of+Pectobacterium+aroidearum+and+P.+carotovorum+ssp.+brasiliense+via+quorum+sensing+regulation.">Plant phenolic acids affect the virulence of Pectobacterium aroidearum and P. carotovorum ssp. brasiliense via quorum sensing regulation.</a> Molecular Plant Pathology. 17 (4), 487-500 (2016).</li><li>Dykes, L., Rooney, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenolic+compounds+in+cereal+grains+and+their+health+benefits.">Phenolic compounds in cereal grains and their health benefits.</a> Cereal Foods World. 52 (3), 105-111 (2007).</li><li>Xiang, J., Apea-Bah, F. B., Ndolo, V. U., Katundu, M. C., Beta, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Profile+of+phenolic+compounds+and+antioxidant+activity+of+finger+millet+varieties.">Profile of phenolic compounds and antioxidant activity of finger millet varieties.</a> Food Chemistry. 275, 361-368 (2019).</li><li>Qiu, Y., Liu, Q., Beta, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antioxidant+properties+of+commercial+wild+rice+and+analysis+of+soluble+and+insoluble+phenolic+acids.">Antioxidant properties of commercial wild rice and analysis of soluble and insoluble phenolic acids.</a> Food Chemistry. 121 (1), 140-147 (2010).</li><li>Beverly, R. L., Motarjemi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Encyclopedia of Food Safety. 3, 309-314 (2014).</li><li>FAO. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+Outlook+-+Biannual+report+on+global+food+markets.">Food Outlook - Biannual report on global food markets.</a> Food and Agriculture Organization. , (2020).</li><li>Erbersdobler, H. F., Barth, C. A., Jahreis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Legumes+in+human+nutrition.+Nutrient+content+and+protein+quality+of+pulses.">Legumes in human nutrition. Nutrient content and protein quality of pulses.</a> Ernahrungs Umschau. 64 (9), 134-139 (2017).</li><li>Due&#241;as, M., Hern&#225;ndez, T., Estrella, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+in+vitro+antioxidant+capacity+of+the+seed+coat+and+the+cotyledon+of+legumes+in+relation+to+their+phenolic+contents.">Assessment of in vitro antioxidant capacity of the seed coat and the cotyledon of legumes in relation to their phenolic contents.</a> Food Chemistry. 98 (1), 95-103 (2006).</li><li>Khang, D. T., Dung, T. N., Elzaawely, A. A., Xuan, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenolic+profiles+and+antioxidant+activity+of+germinated+legumes.">Phenolic profiles and antioxidant activity of germinated legumes.</a> Foods. 5 (2), 27 (2016).</li><li>Hefni, M. E., Amann, L. S., Witth&#246;ft, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+HPLC-UV+method+for+the+quantification+of+phenolic+acids+in+cereals.">A HPLC-UV method for the quantification of phenolic acids in cereals.</a> Food Analytical Methods. 12 (12), 2802-2812 (2019).</li><li>AOAC. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Official Methods of Analysis. 17th edn. , (2000).</li><li>Apea-Bah, F. B., Head, D., Scales, R., Bazylo, R., Beta, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrothermal+extraction,+a+promising+method+for+concentrating+phenolic+antioxidants+from+red+osier+dogwood+(Cornus+stolonifer)+leaves+and+stems.">Hydrothermal extraction, a promising method for concentrating phenolic antioxidants from red osier dogwood (Cornus stolonifer) leaves and stems.</a> Heliyon. 6 (10), 05158 (2020).</li><li>Apea-Bah, F. B., Minnaar, A., Bester, M. J., Duodu, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sorghum-cowpea+composite+porridge+as+a+functional+food,+Part+II:+Antioxidant+properties+as+affected+by+simulated+in+vitro+gastrointestinal+digestion.">Sorghum-cowpea composite porridge as a functional food, Part II: Antioxidant properties as affected by simulated in vitro gastrointestinal digestion.</a> Food Chemistry. 197, 307-315 (2016).</li><li>Robbins, R. J., Bean, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+quantitative+high-performance+liquid+chromatography-photodiode+array+detection+measurement+system+for+phenolic+acids.">Development of a quantitative high-performance liquid chromatography-photodiode array detection measurement system for phenolic acids.</a> Journal of Chromatography A. 1038 (1-2), 97-105 (2004).</li><li>Singleton, V. L., Rossi, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colorimetry+of+total+phenolics+with+phosphomolybdic-phosphotungstic+acid+reagents.">Colorimetry of total phenolics with phosphomolybdic-phosphotungstic acid reagents.</a> American Journal of Enology and Viticulture. 16, 144-158 (1965).</li><li>Prior, R. L., Wu, X., Schaich, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+methods+for+the+determination+of+antioxidant+capacity+and+phenolics+in+foods+and+dietary+supplements.">Standardized methods for the determination of antioxidant capacity and phenolics in foods and dietary supplements.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 53 (10), 4290-4302 (2005).</li><li>Ainsworth, E. A., Gillespie, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimation+of+total+phenolic+content+and+other+oxidation+substrates+in+plant+tissues+using+Folin-Ciocalteu+reagent.">Estimation of total phenolic content and other oxidation substrates in plant tissues using Folin-Ciocalteu reagent.</a> Nature Protocols. 2 (4), 875-877 (2007).</li><li>Waterhouse, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+total+phenolics.">Determination of total phenolics.</a> Current Protocols in Food Analytical Chemistry. 1, 1-8 (2002).</li><li>Huang, D., Ou, B., Prior, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chemistry+behind+antioxidant+capacity+assays.">The chemistry behind antioxidant capacity assays.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 53 (6), 1841-1856 (2005).</li><li>Esterbauer, H., W&#228;g, G., Puhl, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+peroxidation+and+its+role+in+atherosclerosis.">Lipid peroxidation and its role in atherosclerosis.</a> British Medical Bulletin. 49 (3), 566-576 (1993).</li><li>Esterbauer, H., Gebicki, J., Puhl, H., J&#252;rgens, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+lipid+peroxidation+and+antioxidants+in+oxidative+modification+of+LDL.">The role of lipid peroxidation and antioxidants in oxidative modification of LDL.</a> Free Radical Biology and Medicine. 13 (4), 341-390 (1992).</li><li>Apea-Bah, F. B., Serem, J. C., Bester, M. J., Duodu, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenolic+composition+and+antioxidant+properties+of+Koose,+a+deep-fat+fried+cowpea+cake.">Phenolic composition and antioxidant properties of Koose, a deep-fat fried cowpea cake.</a> Food Chemistry. 237, 247-256 (2017).</li></ol>

전체 곡물은 전 세계적으로 광범위한 식품 응용 분야를 찾는 대표적인 시리얼 곡물과 콩과 식물로 선정되었습니다. 각 곡물의 품종 간에는 변형이 존재할 수 있지만,이 연구의 초점은 전체 곡물에 대한 유리 페놀산 추출 및 분석을위한 일반화 된 방법을 입증하는 것이 었습니다. 추출 방법은 그러한 실험이 수행될 때 환경으로 방출될 화학물질의 양을 감소시키기 위해 샘플 및 용매의 양을 실질적...

페놀산은 초식 및 곰팡이 감염에 대한 식물 방어뿐만 아니라 식물 조직의 구조적 지원 및 무결성을 유지하는 데 중요한 역할을하기 때문에 식물에서 연구 된 가장 중요한 식물 화학 물질 중 하나입니다 1,2. 그들은 곡물의 밀기울과 콩과 식물의 종자 코트에 풍부합니다3. 구조적으로 그들은 두 그룹으로 나뉩니다 : 히드록시벤조산 (그림 1)과 히드 록시 신남산 (그림 2). 곡물 및 콩과 식물에서 일반적인 히드록시벤조산은 갈릭산, p-히드록시벤조산, 2,4-디히드록시벤조산, 프로토카테추산, 바닐릭산, 시링산을 포함하며, 일반적인 히드록시신남산은 카페인, p-쿠마산, 페룰릭산, 시나프산3을 포함한다. 페놀산은 또한 지방에서 산화적 산패를 일으키는 자유 라디칼을 제거하고 생리 학적 시스템 4,5에서 라디칼로 인한 산화 스트레스를 시작하고 전파 할 수 있기 때문에 항산화 특성을 가지고 있습니다. 항산화 제로서의 중요한 생리적 역할로 인해, 그들은 최근 연구의 주제입니다. 식물성 식품의 구성 요소로 섭취하면 항산화 보호를 발휘할 수 있기 때문입니다.
곡물과 시리얼 제품은 전 세계적으로 인간과 동물을위한 주요 탄수화물 식품 공급원입니다6. 곡물에는 밀, 쌀, 옥수수 (옥수수), 보리, 트리티케일, 기장 및 수수가 포함됩니다. 그 중 옥수수가 가장 많이 활용되고 있으며, 2019/2020 년에 전 세계 사용률이 1,135.7 백만 톤으로 추정되며, 같은 기간 동안 전 세계 사용률이 757.5 백만 톤으로 추정되는 밀이 그 뒤를 잇고있습니다 7. 시리얼 식품은 탄수화물의 풍부한 원천이기 때문에 소비자에게 훌륭한 에너지 원입니다. 그들은 또한 단백질, 지방, 섬유질, 비타민 및 미네랄을 제공합니다6. 그들의 영양 가치 외에도, 곡물은 식물 화학적 항산화 제, 특히 페놀산의 좋은 원천이며, 이는 라디칼로 인한 산화 손상으로부터 생리 학적 시스템을 보호 할 수있는 잠재력을 가지고 있습니다3. 콩과 식물은 또한 영양소의 좋은 원천이며 일반적으로 곡물보다 단백질이 높습니다. 그들은 또한 비타민과 미네랄을 함유하고 있으며 다양한 음식의 준비에 사용됩니다8. 또한 콩과 식물은 페놀산, 플라보노이드, 안토시아닌, 프로안토시아니딘 9,10을 포함한 다양한 식물성 화학 항산화 물질의 좋은 공급원입니다. 곡물과 콩과 식물의 다른 품종은 다른 페놀산 조성을 가질 수 있습니다. 따라서 페놀 산화 방지제와 관련하여 잠재적 인 건강상의 이점을 알기 위해 곡물과 콩과 식물 및 그 품종의 페놀산 조성을 연구 할 필요가 있습니다.
시리얼과 콩과 식물 곡물에서 페놀 산의 양을 측정하고 항산화 활성을 결정하기 위해 많은 분석이보고되었습니다. 전체 곡물 페놀산에 대한 가장 일반적인 분석 방법은 분광 광도법 및 액체 크로마토그래피11입니다. 이 연구의 목적은 유리 가용성 페놀산 조성물을 결정하기위한 일반화 된 고압 액체 크로마토그래피 방법과 일부 전체 곡물 곡물 및 콩과 식물의 총 페놀 함량 및 항산화 능력을 결정하기위한 분광 광도 측정 방법을 입증하는 것이 었습니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>15 mL Falcon conical centrifuge tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>05-527-90</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 mL Amber glass ID Surestop vial</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>C5000-2W</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 mL Amber microcentrifuge tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>20170-084</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,2&#8242;-Azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>440914-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,2&#39;-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS) (C18H18N4O6S4) &#8805;98%,</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A1888-2G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,2-Diphenyl-1pikrylhydrazyl (DPPH) (C18H12N5O6)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D913-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-Hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid (Trolox) (C14H18O4), &#8805;98%</td>
			<td>Fluka Chemika</td>
			<td>56510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>9 mm Autosampler Vial Screw Thread Caps</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>60180-670</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well flat bottom plates</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12565501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agilent BioTek ELx800 microplate reader</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BT-ELX800NB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agilent BioTek Precision 2000 96/384 Automated Microplate Pipetting System</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agilent BioTek FLx800 Microplate Fluorescence Reader</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytical balance SI-114</td>
			<td>Denver Instrument</td>
			<td>SI-114.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autosampler, Waters 717 Plus</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT078900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD 3 mL syringe Luer-Lok Tip</td>
			<td>BD</td>
			<td>309657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bransonic ultrasonic cleaner, Branson 5510</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>Z245143</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning LSE Vortex Mixer</td>
			<td>Corning</td>
			<td>6775</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Durapore Filter (0.45 &#181;m PVDF Membrane)</td>
			<td>Merck Millipore Ltd</td>
			<td>HVLP04700&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Durapore Membrane Filters (0.45 &#181;m HV)</td>
			<td>Merck Millipore Ltd</td>
			<td>HVHP04700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Research&#160;plus, 0.5-10 &#181;L</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>3123000020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Research&#160;plus, 0.5-5 mL</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>3123000071</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Research&#160;plus, 100-1000 &#181;L</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>3123000063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Research&#160;plus, 10-100 &#181;L</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>3123000047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl acetate, HPLC grade</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>E195-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ferulic acid standard</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>128708-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescein</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AC119245000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Folin &#38; Ciocalteu phenol reagent</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F9252</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formic acid, 99%</td>
			<td>Acros Organics, Janssen Pharmaceuticalaan 3a</td>
			<td>27048-0010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gallic acid standard</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G7384</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High performance liquid chromatograph (HPLC), Waters 2695</td>
			<td>Waters</td>
			<td>960402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol, HPLC grade</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>A452-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro pipet tips, 0.5-10 &#181;L</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>21-197-2F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge Sorvall Legend Micro 21 centrifuge</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>75002435</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multichannel micropipette, Proline Plus, 30-300 &#181;L</td>
			<td>Sartorius</td>
			<td>728240</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photodiode array detector, Waters 2996</td>
			<td>Waters</td>
			<td>720000350EN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipet tips, 1000 &#181;L</td>
			<td>VWR</td>
			<td>83007-382</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipet tips, 1-5 mL</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82018-840</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium persulfate (K2S2O8), &#8805;99.0%</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>216224-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium phosphate dibasic anhydrous (K2HPO4)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P288-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium phosphate monobasic (KH2PO4)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P285-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PYREX 250 mL Short Neck Boiling Flask, Round Bottom</td>
			<td>Corning</td>
			<td>4321-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reversed phase C18 Analytical Column (100 x 3 mm) Accucore aQ</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>17326-103030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Roto evaporator, IKA RV 10</td>
			<td>IKA</td>
			<td>&#160;0010005185</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium carbonate (NaCO3) anhydrous</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>S263-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>Mallinckrodt AR&#174;</td>
			<td>7581</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate dibasic anhydrous (Na2HPO4)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP332-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate monobasic anhydrous (NaH2PO4)</td>
			<td>Fisher bioreagents</td>
			<td>BP329-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standardization pipet tips 0-200&#181;L</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>02-681-134</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Driven Filter unit (0.22 &#181;m)</td>
			<td>&#160;Millex&#174;-GV</td>
			<td>SLGVR04NL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Target micro-serts vial insert (400 &#181;L)</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>C4011-631</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure water (Direct Q-3 UV system with pump)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>ZRQSVP030</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a generalized method for determining free soluble phenolic acid composition and antioxidant capacity of cereals and legumes

페놀산은 페놀기와 카르복실기를 모두 포함하는 유기 화합물의 부류이다. 그들은 곡물에서 발견되며 곡물의 밀기울이나 콩과 식물의 종자 코트에 집중됩니다. 그들은 항산화 특성을 가지고 있으며, 최근 몇 년 동안 잠재적 인 항산화 보호 건강 기능에 대한 많은 연구 관심을 불러 일으켰습니다. 이 연구는 전체 곡물에서 유리 가용성 페놀 산을 추출하고 항산화 능력을 분석하기위한 일반화 된 방법을 제시합니다. 두 개의 곡물 (밀과 노란 옥수수)과 세 개의 콩과 식물 (카우완두콩, 신장 콩 및 콩)으로 구성된 다섯 개의 전체 곡물 샘플이 사용되었습니다. 곡물을 밀가루로 분쇄하고 그들의 유리 가용성 페놀산을 수성 메탄올을 사용하여 추출하였다. 이어서, 고압 액체 크로마토그래프(HPLC)를 이용하여 화합물을 동정하였다. Folin-Ciocalteu 방법을 사용하여 총 페놀 함량을 결정하고 항산화 능력은 DPPH 라디칼 소거능, Trolox 등가 항산화 능력 (TEAC) 및 산소 라디칼 흡광도 용량 (ORAC) 분석을 사용하여 결정되었습니다. 확인된 페놀산에는 바닐릭산, 카페인산, p-쿠마르산, 페룰산이 포함되었다. 바닐산은 카우완두에서만 확인되었으며 카페산은 신장 콩에서만 확인되었습니다. p-Coumaric acid는 노란색 옥수수, 카우완두콩 및 콩에서 확인되었으며, 페룰산은 모든 샘플에서 확인되었습니다. 페룰산이 우세한 페놀산이 확인되었다. 샘플에서 페놀산의 총 농도는 다음과 같은 순서로 감소했다 : 콩 > 카우완두> 황색 옥수수 = 신장 콩 > 밀. 총 항산화 능력 (DPPH, TEAC 및 ORAC 분석의 값의 합)은 다음과 같이 감소했다 : 대두 > 신장 콩 > 황색 옥수수 = 카우완두> 밀. 이 연구는 HPLC 분석뿐만 아니라 DPPH, TEAC 및 ORAC 분석이 페놀산 조성 및 전체 곡물의 항산화 특성에 대한 유용한 정보를 제공한다는 결론을 내렸다.

표 2는 곡류 및 콩과 식물 곡물에서 확인된 페놀산을 나타낸다. 사용 가능한 확실한 표준에 따라 샘플에서 네 개의 페놀산이 확인되었으며 바닐릭, 카페인, p-쿠마르산 및 페룰산입니다. 바닐산은 히드록시벤조산이고 다른 세 가지는 히드록시신남산이다. 바닐산은 Blackeye cowpea 콩에서만 확인되었으며 카페산은 신장 콩에서만 확인되었습니다. p-Coumaric acid는 노란 옥수수, ?...

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A Generalized Method for Determining Free Soluble Phenolic Acid Composition and Antioxidant Capacity of Cereals and Legumes

페놀산은 전체 곡물에 존재하는 중요한 식물 화학 물질입니다. 그들은 항산화 보호 기능과 같은 생리 활성 특성을 가지고 있습니다. 이 연구는 HPLC 식별, 총 페놀 함량 추정 및 곡물 및 콩과 식물에서 페놀산의 항산화 능력 결정을위한 일반화 된 방법을보고하는 것을 목표로했습니다.

유리 가용성 페놀산 조성물과 곡물 및 콩과 식물의 항산화 능력을 결정하는 일반화 된 방법

Phenolic acids are a class of organic compounds that bear both a phenolic group, and a carboxylic group. They are found in grains and concentrate in the ...

유리 가용성 페놀산 조성과 곡물 및 콩과 식물의 항산화 능력을 결정하기위한 일반화 된 방법. 곡물과 콩과 식물을 포함한 전체 곡물은 인간 식단의 상당 부분을 형성합니다. 인간과의 영양 관련성은 오랫동안 인정되어 왔습니다.그러나, 최근에는 항산화 보호 건강상의 이점이보고되었습니다. 곡물의 외부 곡물 층과 콩과 식물의 종자 코팅에서 발견되는 페놀산은 전체 곡물의 항산화 특성에 기여합니다. 그들은 생체 분자에 산화 적 손상을 일으키는 자유 라디칼을 제거합니다.전체 곡물에서 발견되는 페놀산의 두 부류는 히드록시벤조산과 히드록시신남산이다. 이 연구는 전체 곡물 페놀산을 추출하고 시험관 내 항산화 능력을 결정하는 간단한 방법을 제공합니다. 이 연구를 위해 다섯 개의 전체 곡물 샘플, 듀럼 밀, 노란 옥수수, 검은 눈 카우완두콩, 콩 및 붉은 신장 콩을 사용하십시오.전체 곡물 가루 샘플 100 밀리그램을 호박색의 두 밀리리터 용량의 마이크로 원심분리 튜브에 직접 칭량합니다. 튜브의 어두운 색은 혼합물이 빛에 노출되는 것을 방지하는 데 도움이됩니다. 한 밀리리터의 80% 수성 메탄올을 예를 함유하는 각각의 튜브에 첨가한다.메탄올 용액과 샘플을 혼합하기 위해 간단히 소용돌이친다. 샘플을 60분 동안 초음파 처리하여 유리 가용성 페놀 화합물을 추출한다. 빛으로부터의 추가 보호를 위해 초음파 처리 기간 동안 샘플 위에 덮개를 놓습니다.초음파 처리 후, 혼합물을 5분 동안 20, 000배 G에서 원심분리하여 고체 잔류물을 침전시키고, 상청액을 상부에 남겨둔다. 유리 페놀 화합물은 원심분리 후 상청액에 존재할 것이다. 상청액은 HPLC 기기에 주입하기 전에 여과되어야 한다.상층액을 여과하려면 3 mL 주사기의 플런저를 제거하고 주사기 필터를 부착하십시오. 필터의 기공 크기는 0.22마이크로미터보다 크지 않아야 합니다. 상청액의 약 0.4 밀리리터를 주사기 상단에 피펫.플런저를 다시 넣고 필터를 통해 액체를 바이알 인서트가 들어있는 HPLC 바이알에 밀어 넣습니다. HPLC 분석을 위해 원고에 설명 된 방법을 실행하도록 장비가 설정되면 샘플 목록과 일치하도록 바이알을 회전 목마에로드하십시오. 320 나노미터 및 280 나노미터에서 HPLC 크로마토그램을 구하여 서로 다른 페놀 화합물을 나타내는 뚜렷한 피크를 보여줍니다.적절한 표준 곡선을 사용하여 하이드록시신남산이 이 파장에서 최대 흡광도를 갖기 때문에 320나노미터에서 정량화합니다. 동일한 원리에 의해, 280 나노미터에서 히드록시벤조산을 정량화한다. 비타민 E의 수용성 유사체인 트롤록스를 표준으로 사용하여 전체 곡물 추출물의 시험관 내 항산화 능력을 추정하십시오.트롤록스 한 밀리그램의 무게를 팔콘 튜브에 정확하게 칭량합니다. 50% 수성 메탄올 네 밀리리터에 용해시켜 리터당 1밀리몰의 원액을 제조하고, 이는 리터당 1000마이크로몰과 동일하다. 리터당 50, 100, 200, 400, 600 및 800 마이크로몰인 트롤록스의 6개 농도를 준비하여 DPPH 라디칼 소거능 및 트롤록스의 동등한 항산화 용량인 TEAC의 추정을 위한 표준 곡선을 플롯한다.유사하게, 산소 라디칼 흡광도 용량을 추정하기 위해, ORAC 리터당 6.25, 12.5, 25, 및 50 마이크로몰 트롤록스 농도를 준비한다. 표 하나와 같이 각 농도의 총 부피를 500 마이크로리터로 구성한다. 분석 전에 샘플 추출물을 메탄올로 희석하십시오.여기에서, 노란 옥수수와 카우완아 추출물을 두 번 희석하였다. 밀과 강낭콩 추출물을 다섯 번 희석한 반면, 대두 추출물은 메탄올로 10배 희석하였다. 8.23 밀리그램의 ABTS를 깨끗하고 2 밀리리터 용량의 호박색 마이크로 원심 분리기 튜브에 넣으십시오.다음으로, 1.62 밀리그램의 과황산칼륨을 깨끗하고 2 밀리리터 용량의 호박색 마이크로 원심 분리 튜브에 넣으십시오. 칭량된 각각의 화학물질을 볼텍싱하여 한 밀리리터의 증류수에 녹인다. 이로 인해 16 밀리몰 ABTS 용액과 6 밀리몰 칼륨 과황산염 용액이 생성됩니다.ABTS 및 과황산칼륨 용액을 동일한 부피로 혼합하여 ABTS 원액을 제조하였다. 솔루션은 즉시 어두운 색으로 바뀝니다. 이 혼합물을 어둠 속에서 12 내지 16시간 동안 인큐베이션하도록 허용한다.ABTS 원액을 200밀리몰 인산염 완충 식염수로 30배 희석하여 ABTS 작동 용액을 형성한다. 이렇게하려면 58 밀리리터의 200 밀리몰 PBS를 ABTS 작업 용액 2 밀리리터에 첨가하십시오. 작업 용액은 0.27 밀리몰 ABTS 및 0.1 밀리몰 과황산칼륨을 함유할 것이다.분석을 위해, 희석된 각 추출물 10 마이크로리터를 96 웰 마이크로플레이트에 넣는다. 190 마이크로리터의 ABTS 작업 용액을 각 웰에 첨가하고 60분 동안 인큐베이션한다. 마이크로플레이트 판독기에서 750 나노미터에서 반응 혼합물의 흡광도를 측정하였다.리터당 100 ~ 800 마이크로몰 범위의 농도에서 Trolox 표준을 사용하여 보정 곡선을 플로팅합니다. DPPH 항산화제 분석법은 라디칼 생성 화합물인 DPPH를 필요로 한다. 1.2 밀리그램의 DPPH를 빈 15 밀리리터 용량의 원심 분리 튜브에 넣으십시오.DPPH를 메탄올에 용해시켜 60 마이크로몰 용액을 제조하였다. DPPH 분석은 DPPH에 의해 생성 된 자유 라디칼을 제거하는 샘플 추출물의 능력을 테스트합니다. 다섯 마이크로 리터의 샘플 추출물을 마이크로 플레이트 웰에 넣으십시오.다음으로, 195 마이크로리터의 60 마이크로몰 DPPH 메탄올 용액을 첨가하고, 60분 동안 인큐베이션한다. 515 나노미터에서 흡광도를 측정한다. Trolox 표준을 사용하여 보정 곡선을 플로팅합니다.도 하나는 전체 곡물에서 발견되는 히드록시벤조산의 구조를 보여준다. 이 현재의 연구에서, 바닐산은 유일하게 확인된 히드록시벤조산이었다. 도 두 개는 전체 곡물에서 발견되는 하이드록시신남산의 구조를 보여준다.현재 연구에서 p-coumaric, 카페인 및 페룰산이 샘플에서 확인되었습니다. 표 두 개는 샘플에서 확인된 페놀산을 나타낸다. 앞서 언급한 바와 같이, 바닐산은 샘플에서 확인된 유일한 히드록시벤조산이었다.카우완두콩 추출물에서만 확인되었다. 하이드록시신남산 카페산은 신장콩에서만 확인되었으며, p-쿠메르산은 노란 옥수수, 카우완두, 콩에서 확인되었다. 페룰산은 모든 샘플에서 확인되었고, 샘플에서 우세한 페놀산이었다.페놀산의 총 농도는 대두, 카우완두, 노란 옥수수, 및 강낭콩 또는 등가물 순이었고, 그 다음으로 밀이 뒤따랐다. 표 세 개는 시료의 총 페놀 함량 및 항산화 능력을 나타내었다. 항산화 능력은 DPPH 라디칼 소거능, TEAC, ORAC 및 샘플의 총 항산화 능력으로 구성되었습니다.총 항산화 용량은 DPPH, TEAC 및 ORAC 값의 합이다. 표 두 개와 유사하게, 대두는 가장 높은 총 항산화 능력을 가졌다. 그러나 카우완 대신에 카우완두는 두 번째로 높은 총 항산화 능력을 가진 신장 콩 이었지만 카우완은 두 번째로 높은 총 페놀산 함량을 가졌습니다.이 변칙성은 개별 페놀산의 구조 및 카우페아에서 히드록시신남산의 항산화 효과에 대한 히드록시벤조산 바닐산의 가능한 길항효과와 관련이 있다. 이 연구는 전체 곡물이 페놀산 조성이 다르다는 결론을 내렸다. 연구 된 전체 곡물 중에서 콩은 페놀산의 총량이 가장 많으며 그에 상응하여 항산화 능력이 가장 높습니다.

Research

JoVE Journal

Chemistry

Free Radicals in Chemical Biology: from Chemical Behavior to Biomarker Development

화학 생물학에서의 자유 부수 : 화학 행동의 Biomarker 개발에

The involvement of free radicals in life sciences has constantly increased with time and has been connected to several physiological and pathological ...

연구

화학

Preparation of Silica Nanoparticles Through Microwave-assisted Acid-catalysis

전자 레인지를 이용한 산 - 촉매 반응을 통해 실리카 나노 입자의 제조

Microwave-assisted synthetic techniques were used to quickly and reproducibly produce silica nanoparticle sols using an acid catalyst with nanoparticle ...

Towards Biomimicking Wood: Fabricated Free-standing Films of Nanocellulose, Lignin, and a Synthetic Polycation

Nanocellulose, 리그닌의 날조 된 자립형 필름, 및 합성 폴리 양이온 : Biomimicking 나무를 향하여

Woody materials are comprised of plant cell walls that contain a layered secondary cell wall composed of structural polymers of polysaccharides and ...

Synthesis of Cd-free InP/ZnS Quantum Dots Suitable for Biomedical Applications

바이오 메디컬 응용 프로그램에 적합 InP를 /의 ZnS 양자점 CD-자유의 합성

Fluorescent nanocrystals, specifically quantum dots, have been a useful tool for many biomedical applications. For successful use in biological systems, ...

Synthesis of a Water-soluble Metal&#8211;Organic Complex Array

Synthesis of a Water-soluble MetalÃƒÆ’Ã‚Â¢ÃƒÂ¢Ã¢â‚¬Å¡Ã‚Â¬ÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã…â€œOrganic Complex Array

수용성 유기 금속 복합 어레이의 합성

We demonstrate a method for the synthesis of a water-soluble multimetallic peptidic array containing a predetermined sequence of metal centers such as ...

Determining the Chemical Composition of Corrosion Inhibitor/Metal Interfaces with XPS: Minimizing Post Immersion Oxidation

XPS와 부식 억제제 / 금속 인터페이스의 화학 성분을 결정 : 최소화 포스트 집중 산화

An approach for acquiring more reliable X-ray photoelectron spectroscopy data from corrosion inhibitor/metal interfaces is described. More specifically, ...

Escherichia coli-Based Cell-Free Protein Synthesis: Protocols for a robust, flexible, and accessible platform technology

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대장균-셀 무료 단백질 합성 기반: 강력 하 고 유연 하며 액세스할 수 있는 플랫폼 기술에 대 한 프로토콜

Over the last 50 years, Cell-Free Protein Synthesis (CFPS) has emerged as a powerful technology to harness the transcriptional and translational capacity ...

Synthesis Method for Cellulose Nanofiber Biotemplated Palladium Composite Aerogels

셀룰로오스 나노 섬유 바이오 템플릿 팔라듐 복합 에어로겔에 대한 합성 방법

Here, a method to synthesize cellulose nanofiber biotemplated palladium composite aerogels is presented. Noble metal aerogel synthesis methods often ...

NMR-Based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC50 Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases

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화합물 억제, IC50 값, 관절 활성 및 뉴클레오시드 리보하이드라제의 전세포 활성을 결정하기 위한 NMR 기반 활성 반응

NMR spectroscopy is often used for the identification and characterization of enzyme inhibitors in drug discovery, particularly in the context of fragment ...

Ion Mobility-Mass Spectrometry Techniques for Determining the Structure and Mechanisms of Metal Ion Recognition and Redox Activity of Metal Binding Oligopeptides