Name: detection of sars-cov-2 receptor-binding domain antibody using a hibit-based bioreporter
Uploaded: 2021-08-12T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Detection of SARS-CoV-2 Receptor-Binding Domain Antibody using a HiBiT-Based Bioreporter at JoVE.com

シャオホン・ヘ、リカルド・マリウス、ジュリア・ペトリク、ブラッドリー・オースティン、クリスティアーノ・タネーゼ・デ・ソウザの技術支援に感謝し、感謝します。また、グラフィックデザインのためにミナ・ガーレマニに感謝します。また、この研究のために血液サンプルを参加し、寄付したすべての人に感謝したいと思います。DWCは、uOttawaの教員と医学部によって部分的にサポートされています。

注: 以下に説明するプロトコルは、プロトコル コード 20200371-01H に従ってすべての倫理ガイドラインに準拠しています。
1. HiBiT-RBDバイオレポーターの製造と評価
<ol><li>十分な量のHiBiT-RBDバイオレポーターを生産する<ol>
<li>細胞培養の準備<ol>
<li>10%のウシ胎児血清と1%ペニシリン/ストレプトマイシンを含む完全なDulbeccoの修飾イーグル培地(DMEM)を準備します。その後、37°C...

<ol>
	<li>Ullah, H., Ullah, A., Gul, A., Mousavi, T., Khan, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+coronavirus+2019+(COVID-19)+pandemic+outbreak:+A+comprehensive+review+of+the+current+literature.">Novel coronavirus 2019 (COVID-19) pandemic outbreak: A comprehensive review of the current literature.</a> Vacunas. , (2020).</li><li>Coronavirus update (Live). 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L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+accuracy+of+serological+tests+for+covid-19:+systematic+review+and+meta-analysis.">Diagnostic accuracy of serological tests for covid-19: systematic review and meta-analysis.</a> BMJ. 370, 2516 (2020).</li><li>Bioluminescent Reporters | Reporter Gene Applications | An Introduction to Reporter Genes. Promega Available from: <a target="_blank" href="https://www.promega.ca/resources/guides/cell-biology/bioluminescent-reporters/#references-6d127eb8-eeae-40b7-86e9-fe300545e8fa">https://www.promega.ca/resources/guides/cell-biology/bioluminescent-reporters/#references-6d127eb8-eeae-40b7-86e9-fe300545e8fa</a> (2021)</li><li>Fleiss, A., Sarkisyan, K. 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E. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+critical+determinants+of+ACE2-SARS+CoV-2+RBD+interaction.">Characterization of critical determinants of ACE2-SARS CoV-2 RBD interaction.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (5), 2268 (2021).</li><li>Azad, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+gain-of-functional+screen+identifies+the+Hippo+pathway+as+a+central+mediator+of+receptor+tyrosine+kinases+during+tumorigenesis.">A gain-of-functional screen identifies the Hippo pathway as a central mediator of receptor tyrosine kinases during tumorigenesis.</a> Oncogene. 39 (2), 334-355 (2020).</li><li>Schwinn, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRISPR-Mediated+tagging+of+endogenous+proteins+with+a+luminescent+peptide.">CRISPR-Mediated tagging of endogenous proteins with a luminescent peptide.</a> ACS Chemical Biology. 13 (2), 467-474 (2018).</li><li>Azad, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+NanoBiT-based+serological+assay+detects+SARS-CoV-2+seroconversion.">A high-throughput NanoBiT-based serological assay detects SARS-CoV-2 seroconversion.</a> Nanomaterials. 11 (3), 807 (2021).</li></ol>

SARS-CoV-2に感染する人が増え、世界的なワクチン接種に取り組むには、大規模な血清調査で使用できる敏感で速い血清学的検査が必要です。最近の研究では、分割ナノルシメラーゼベースのバイオレポーターを使用してアッセイを開発できることが示されています。最近、HiBiT-RBDバイオレポーターを開発し、患者血清中のSARS-CoV-2特異的抗体を迅速かつ信頼性の高い方法で検出するためのテス?...

最近の新しいコロナウイルスSARS-CoV21の出現により、2012年3月30日時点で2,800,000人以上の死亡者と1億2,800万人の感染が発生しました。SARS-CoV-2臨床療法のための信頼でき、確立された処置の欠如のために、より重要な効果的で強い処置またはワクチン3を開発するために、さらなるウイルス伝達を制限するために多くの努力がなされてきた。現在までに、世界保健機関(WHO4)が報告した試験には、50人以上のCOVID-19ワクチン候補があります。SARS-CoV-2に対する抗体の検出は、COVID-195の回復された患者において、ワクチンの投与時の液性応答の長期安定性を決定するために最も重要である。いくつかの研究は、回復したSARS-CoV-2患者が1年後にRBD結合抗体のほとんどを失う可能性があることを実証した5、6、7、8、9。永続的な免疫をよりよく理解するためにさらなる調査が必要であり、より敏感な抗体検出プラットフォームは、そのような作業をさらに助けることができます。長期抗体応答を示唆する軽度のSARS-CoV-2感染の持続的免疫の報告も興味深く、価値のある研究分野である。迅速かつ正確な検出方法は、集団の免疫に関するより多くの情報を提供するために、個人のセラの抗体を監視するために不可欠です。
他のコロナウイルスと同様に、SARS-CoV-2は突出したスパイク糖タンパク質を使用してアンジオテンシン変換酵素-2(ACE2)に結合し、ウイルス膜と細胞膜の融合につながるイベントのカスケードを開始する6,7。いくつかの研究は最近、スパイクタンパク質のRBDがSARS-CoV28,9,10,11に対する強力かつ特異的な抗体応答を引き出す上で重要な役割を果たすことを証明した。特に、RbD結合抗体の力価と患者の血漿中性SARS-CoV-2中和力との間にPremkumarらによって観察される相関は、RBDがウイルス構造の免疫原性コンパートメントであることと一致する。そのことを念頭に置いて、SARS-CoV-2抗体検出に利用可能な多くの診断テストは、時間とコストを要する、インキュベーションおよび洗浄(酵素結合免疫吸着アッセイ[ELISA])、または感度と精度(横流免疫測定[LFIA])12の長い手順を必要とする。したがって、高感度、高速応答、および比較的低コストのCOVID-19由来抗体検出の定量的かつ迅速な相補血清学的方法は、SARS-CoV-2疫学的サーベイランスのための信頼性の高い血清学的検査の必要性に役立ちます。
総称して、現在の血清学的アッセイの限界は、将来の血清調査における潜在的な診断薬としての生物発光報告システムの調査を促した。生物発光は、自然に発生する酵素/基質反応であり、発光を伴います。ナノルクルシメラーゼは最も小さい(19kDa)でありながら、レニラとホタルルシファーゼ(それぞれ36kDaと61kDa)に比べて最も明るいシステムです13,14。さらに、Nanolucは前述のシステムの中で最も高い信号対雑音比および安定性を有する。ナノルクの高い信号強度は、レポーター融合15の非常に少量の検出をサポートしています。ナノルクバイナリテクノロジー(NanoBiT)は、2つのセグメントで構成されているNanolucシステムの分割版です: 小さなBiT (11アミノ酸;SmBiT)および比較的低親和性相互作用を有する大型BiT(LgBiT)(KD = 190 μM)を有し、発光複合体16を形成する。NanoBiTは、タンパク質相互作用の同定15、17、18、19および細胞シグナル伝達経路11,20,21の様々な研究で広く使用されています。
最近、LgBiT(KD = 0.7 nM)に対する明らかに高い親和性を有する別の小さなペプチド、すなわち、SmBiTの代わりにHiBiTナノグロ系が導入された。Nano-Gloの「付加ミックス読み取り」アッセイの高い親和性と強いシグナルは、HiBiTを適切な定量的で発光性ペプチドタグにします。このアプローチでは、HiBiTタグは、最小限の構造干渉を課す構造を開発することによって標的タンパク質に付加される。HiBiTタンパク質融合は、LgBiTの対応物に積極的に結合し、検出試薬の存在下で検出可能な生物発光を生成する高活性ルシファーゼ酵素を産生する(図1)。同様に、SARS-CoV-2回収された個体のセラ中の中和抗体力素を容易に測定するHiBiT Nano-Gloベースのシステムを開発し、最近HiBiTタグ付きSARS-CoV-2 RBDを開発しました。本論文では、標準的な実験手順と装置を用いてHiBiT-RBDバイオレポーターを製造するためのプロトコルについて述べ、このバイオレポーターをSARS-CoV-2 RBD標的抗体を検出するための迅速かつ効率的なアッセイで使用する方法を示す。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5x Passive Lysis Buffer</td>
			<td>Promega</td>
			<td>E194A</td>
			<td>30 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Plex Handheld Magnetic Washer</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>171020100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D6429-500ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dual-Glo luciferase Assay System</td>
			<td>Promega</td>
			<td>E2940</td>
			<td>100 mL kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F1051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HiBiT-RBD Plasmid</td>
			<td></td>
			<td></td>
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				agaaaaataaacaaataggggttccgcgca
				catttccccgaaaagtgccacctgacgtc</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LgBiT</td>
			<td>Promega</td>
			<td>N3030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin Streptomycin</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pierce Protein G Magnetic Beads</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>88848</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PolyJet In Vitro DNA Transfection Reagent</td>
			<td>Signagen</td>
			<td>SL100688.5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Neutralizing Antibody, Mouse Mab</td>
			<td>SinoBiological</td>
			<td>40592-MM57</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Synergy Mx Microplate Reader</td>
			<td>BioTek</td>
			<td></td>
			<td>96-well plate reader luminometer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>2520056</td>
			<td>0.25%</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

detection of sars-cov-2 receptor-binding domain antibody using a hibit-based bioreporter

COVID-19パンデミックの出現は、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス2(SARS-CoV-2)の疫学的影響を決定するためのより良い血清学的検出方法の必要性を高めている。SARS-CoV-2感染の増加は、より良い抗体検出アッセイの必要性を高める。現在の抗体検出方法は、速度に対する感度を損なうか、感度は高いが時間がかかります。SARS-CoV-2中和抗体の大部分は、SARS-CoV-2の一次免疫原性コンパートメントの1つである受容体結合ドメイン(RBD)を標的とする。我々は最近、SARS-CoV-2抗体を検出するために、高感度な生物発光タグ付きRBD(NanoLuc HiBiT-RBD)を設計し、開発しました。以下のテキストは、このツールを用いてRBD標的抗体の存在を評価するHiBiT-RBD複合体および高速アッセイを製造する手順を説明する。HiBiT-RBDタンパク質製品の耐久性が広い温度で、1時間以内に完了できる短い実験手順のために、このプロトコルは患者血清サンプル中のSARS-CoV-2抗体を検出するより効率的な代替手段として考えることができます。

このトランスフェクト細胞のHiBit-RBD含有細胞ライセートと上清の両方からのシグナルを記録し(図2)、適切なタンパク源を評価した。HiBiT-RBDとLgBitはコントロールとして別々に使用され、データは両方の部分を組み合わせたときに強い信号と比較して低い背景を示しました。したがって、LgBiTとのHiBiT-RBD相互作用は、基質消化および生物発光活性のための活性酵素を生成す...

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Detection of SARS-CoV-2 Receptor-Binding Domain Antibody using a HiBiT-Based Bioreporter

概説されたプロトコルは、HiBiT受容体結合ドメインタンパク質複合体を産生するための手順と、SARS-CoV-2抗体の迅速かつ感度的な検出のためのその応用について説明する。

HiBiTベースバイオレポーターを用いたSARS-CoV-2受容体結合ドメイン抗体の検出

The emergence of the COVID-19 pandemic has increased the need for better serological detection methods to determine the epidemiologic impact of severe ...

私の研究室ではCOVID-19の研究に取り組んでおり、最近ではSARS-CoV-2抗体を迅速かつ正確に検出できる新しいアッセイを開発しました。このプロトコルは、現在のパンデミックを考えると重要である患者血清サンプル中の抗SARS-CoV-2抗体を検出するための高スループットアッセイを概説する。現在の血清学的アッセイの大部分は、感度の速度を犠牲にしたり、その逆を行ったりします。私たちのデータは、アッセイが敏感であり、迅速な応答時間を持っていることを示しています。十分な量の高いHiBiT-RBDバイオレポーターを製造するために、細胞培養の準備から始める。まず、10%のウシ胎児血清と1%ペニシリンとストレプトマイシンを含む完全なDulbeccoの改変ワシ培地を調製する。その後、37°Cの水浴でメディアを温めます。生物学的安全キャビネットをオンにし、キャビネット表面を殺菌するために70%エタノールを使用してください。細胞株を培養するには、マイナス80度または液体窒素から取り出し、37度の水浴で解凍します。解凍した細胞を完全な培地の少なくとも10ミリリットルと混合する。細胞懸濁液を15センチメートルのペトリ皿にピペットし、プレートを旋回して細胞を均一に分配する。37°C、5%の二酸化炭素、および85〜95%の湿度で細胞培養インキュベーターに皿を置きます。合流レベルが80〜90%に達するまで顕微鏡下で細胞を観察し、高い合流度で培地を取り除き、温かいPBSで細胞を洗い、0.25%トリプシンEDTAの3〜5ミリリットルを加えて細胞を表面から取り外します。約5分後、顕微鏡で細胞を見てください。すべての細胞が浮遊している場合は、少なくとも4ミリリットルの培地を加え、細胞懸濁液を新しい滅菌チューブに移します。ヘモサイトメーターを使用して細胞を数え、トランスフェクションのために6ウェルプレートの各ウェルに100万個の細胞を追加します。HiBiT-RBDプラスミドのトランスフェクションを行う場合は、適切なトランスフェクション試薬を用いて、1マイクログラムのHiBiT-RBD発現プラスミドを使用してください。室温で10〜15分間インキュベートし、プレートの各ウェルに合計体積を滴下します。翌日、トランスフェクション混合物を含む培地を完全な培地に交換します。トランスフェクション後48時間でトランスフェクションコントロールをよく観察します。1.5ミリリットルマイクロチューブで上清を収集します。1X受動リシスバッファーまたは PLB の 500 マイクロリットルを細胞に加え、細胞のリシスのために室温でプレートを 15 分間インキュベートして振ります。次に、ルシファーゼアッセイを用いて生体レポーターからの発光シグナルを評価し、まず、反応成分を調製し、その上清をバイオレポーターの供給源として使用する。大きなBiTと基板を使用前に1倍に希釈してください。各ウェルまたはチューブから上澄み液の50マイクロリットルを96ウェルプレートに移し、1X大BiTの50マイクロリットルを各ウェルに加えます。室温で5分間インキュベートします。ルミノメーターソフトウェアを開き、各ウェルに1X基板の50マイクロリットルを追加し、照明計にプレートを配置し、ソフトウェアを実行します。HiBiT-RBD抗体検出アッセイを実行するために、前述のようにHiBiT-RBDバイオレポーターを調製し、上澄み物を含むHiBiT-RBDの50マイクロリットルを1.5ミリリットルマイクロチューブで市販SARS-CoV-2 RBD抗体の1マイクログラムと組み合わせます。20マイクロリットルの免疫グロブリン結合タンパク質またはプロテインGを溶液に加えます。PBSを加えて、総容積を300マイクロリットルにする。チューブシェーカーまたはローテーター上のチューブを30分間インキュベートします。遠心分離機は12,000Gで30秒間。その後、上清を捨て、PBSで洗います。このプロセスを3回繰り返して、無料のHiBiT-RBDを削除します。細胞をPBSの50マイクロリットルで再懸濁し、96ウェルプレートに移します。1X大BiTの50マイクロリットルを加え、5分間待ちます。その後、1X NanoLuc基板の50マイクロリットルを加えます。すぐにルミネッセンス信号をルミノメーターで読み取ります。ハイスループットアッセイのためにHiBiT-RBDバイオレポーターを大量に準備し、各サンプルの96ウェルプレートの各ウェルに20マイクロリットルの磁気プロテインGとHiBiT-RBD上清の50マイクロリットルを組み合わせます。各ウェルに血清サンプル10マイクロリットルを加え、PBSを加えて合計体積を150マイクロリットルにします。室温でシェーカーで30分間インキュベートします。次に、プレートを磁気ワッシャーの上に置き、プロテインG抗体複合体を沈殿させます。各ウェルの中央部に溶液を捨て、洗浄用のPBSを加えます。過剰なHiBiT-RBDを除去するために、洗浄工程を少なくとも3回繰り返します。1X PBSの50マイクロリットルと1X大BiTの50マイクロリットルを加え、室温で少なくとも5分間インキュベートします。ルミノメーターソフトウェアを準備します。その後、50マイクロリットルの1X基板を加えます。マシンにプレートを置き、ソフトウェアを実行し、信号を記録します。空のウェルからの血清サンプル、コントロールサンプル、バックグラウンド信号からの信号を比較します。細胞のライセートを含むHiBiT-RBDとトランスフェクト細胞の上清の両方からのシグナルを記録し、適切なタンパク質源を評価した。データは、両方の部分を組み合わせたときに強い信号に比べて低い背景を示しました。プロテインGの添加は、抗体沈殿を助ける。このアッセイは、市販のSARS-CoV-2中和抗体からのシグナルをコントロールIgGと比較するために使用した。特異的抗体シグナルは堅牢で、対照抗体は発光バックグラウンドレベルに近かった。組換えは、外因性RBDを発現するMタンパク質の51位に変異を有する腫瘍溶質性小胞炎ウイルスまたはVSVを減弱し、マウスにワクチンを接種するために使用した。ワクチン接種されたマウスから採取された血清は、コントロールVSVを注射されたマウスのシグナルと比較して、堅牢なシグナルを産生した。このプロトコルは患者血清サンプルのSARS-CoV-2抗体の検出に使用することができる。タンパク質Gでのインキュベーション後の洗浄ステップは、バックグラウンドを減らすために重要です。また、信号損失を避けるために、できるだけ早く基板を追加することが重要です。いくつかの追加の最適化ステップにより、同じアッセイを使用して血液サンプルを分析することができ、患者の血液サンプル中の抗SARS-CoV-2抗体を決定する有効な方法となり得る。

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Visualization of SARS-CoV-2 using Immuno RNA-Fluorescence In Situ Hybridization

SITUハイブリダイゼーションにおける免疫RNA-蛍光を用いたSARS-CoV-2の可視化

This manuscript provides a protocol for in situ hybridization chain reaction (HCR) coupled with immunofluorescence to visualize severe acute respiratory ...

Detection of SARS-CoV-2 Neutralizing Antibodies using High-Throughput Fluorescent Imaging of Pseudovirus Infection

疑似ウイルス感染のハイスループット蛍光イメージングを用いたSARS-CoV-2中和抗体の検出

As the COVID-19 pandemic caused by severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) continues to evolve, it has become evident that the ...

A Rapid, Multiplex Dual Reporter IgG and IgM SARS-CoV-2 Neutralization Assay for a Multiplexed Bead-Based Flow Analysis System

多重化ビードベースの流れ分析システムのための高速多重デュアルレポーターIgGおよびIgM SARS-CoV-2中和アッセイ

The COVID-19 pandemic has underscored the need for rapid high-throughput methods for sensitive and specific serological detection of infection with novel ...

Live Imaging and Quantification of Viral Infection in K18 hACE2 Transgenic Mice Using Reporter-Expressing Recombinant SARS-CoV-2

レポーター発現組換えSARS-CoV-2を用いたK18 hACE2トランスジェニックマウスにおけるウイルス感染のライブイメージングと定量

The coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic has been caused by severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2). To date, SARS-CoV-2 has ...

Efficient SARS-CoV-2 Quantitative Reverse Transcriptase PCR Saliva Diagnostic Strategy utilizing Open-Source Pipetting Robots

オープンソースピペッティングロボットを活用した効率的なSARS-CoV-2定量逆転写酵素PCR唾液診断戦略

The emergence of the recent SARS-CoV-2 global health crisis introduced key challenges for epidemiological research and clinical testing. Characterized by ...

Multiplex Immunoassay for Borrelia-Specific IgG and IgM in Serum

Simultaneous Detection of Different Antibody Classes in a Multiplexed Serological Test

Expanding the Scope of Multiplex Immunoassays for Lyme Borreliosis Diagnostics and Pathogen Research (Video) | JoVE

マルチプレックス血清学的検査における異なる抗体クラスの同時検出(英語)

To monitor the progression of infectious diseases, it is useful to assess immunoreactivity against various antigenic determinants, and measure different ...

Quantifying Vaccine-Induced Neutralizing Antibodies in SARS-CoV-2 Variants

Application of Ha-CoV-2 Pseudovirus for Rapid Quantification of SARS-CoV-2 Variants and Neutralizing Antibodies

Author Spotlight: A Pseudotype Virus System for Assessing Omicron Subvariants and Neutralizing Antibodies in SARS-CoV-2 Research

The coronavirus disease 2019 pandemic (COVID-19) has highlighted the need for rapid assays to accurately measure the infectivity of emerging SARS-CoV-2 ...

Assessing Serum Neutralization Against SARS-CoV-2 with Pseudotyped Viruses

Pseudotyped Viruses As a Molecular Tool to Monitor Humoral Immune Responses Against SARS-CoV-2 Via Neutralization Assay

Studying Host-Virus Interactions with Pseudotyped Viruses (Video) | JoVE

中和アッセイを介してSARS-CoV-2に対する体液性免疫応答を監視するための分子ツールとしての偽型ウイルス

Pseudotyped viruses (PVs) are molecular tools that can be used to study host-virus interactions and to test the neutralizing ability of serum samples, in ...

Smartphone-Integrated Dengue NS1 Paper-Based Diagnostic Device

Portable Paper-Based Immunoassay Combined with Smartphone Application for Colorimetric and Quantitative Detection of Dengue NS1 Antigen

Author Spotlight: Development of a Smartphone-Enhanced Paper-Based Device for Rapid Dengue NS1 Detection

デング熱NS1抗原の比色および定量検出のためのスマートフォンアプリケーションと組み合わせたポータブル紙ベースのイムノアッセイ

Dengue virus (DENV) infection, which is transmitted by Aedes mosquitoes, is a major public health concern in tropical and subtropical countries. With an ...

Quick and Early Detection of Rabies Antibodies to Evaluate the Immune Response in a Patient

Detection of Rabies IgG and IgM Antibodies Using the Rabies Indirect Fluorescent Antibody Test

Rabies-Specific Antibody Isotypes Detection in Sera or Cerebral Spinal Fluid Using an IFA Test (Video) | JoVE

狂犬病間接蛍光抗体検査を用いた狂犬病IgGおよびIgM抗体の検出

The rabies indirect fluorescent antibody (IFA) test was developed to detect various rabies-specific antibody isotypes in sera or cerebral spinal fluid. ...