Name: in vitro induction of human dental pulp stem cells toward pancreatic lineages
Uploaded: 2021-09-25T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vitro Induction of Human Dental Pulp Stem Cells Toward Pancreatic Lineages at JoVE.com

एसके, डब्ल्यूआर, और क्यूडीएल को वेटनरी स्टेम सेल और बायोइंजीनियरिंग रिसर्च यूनिट, राचडाफिसेकसोम्फॉट एंडोमेंट फंड, चुलालोंग्कोर्न विश्वविद्यालय द्वारा समर्थित किया गया था। टू और पीपी को अपनी2 शताब्दी परियोजना में चुलालोंग्कोर्न अकादमिक उन्नति द्वारा समर्थित किया गया था। सीएस को पशु चिकित्सा विज्ञान संकाय, चुलालोंग्कोर्न अकादमिक उन्नति को अपनीदूसरी शताब्दी परियोजना, पशु चिकित्सा स्टेम सेल और बायोइंजीनियरिंग रिसर्च यूनिट, राचडाफिसेकसोम्फॉट एंडोमेंट फंड, चुलालोंग्कोर्न विश्वविद्यालय और सरकारी अनुसंधान निधि में एक शोध का समर्थन करने वाले शोध द्वारा समर्थित किया गया था।

यह काम हेलसिंकी की घोषणा के अनुसार किया गया था और मानव अनुसंधान आचार समिति, दंत चिकित्सा संकाय, चुलालोंग्कोर्न विश्वविद्यालय द्वारा अनुमोदित किया गया था। मानव डीपीएससी (एचडीपीएससी) को ज्ञान दांतों क?...

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	<li>Cho, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IDF+diabetes+atlas:+Global+estimates+of+diabetes+prevalence+for+2017+and+projections+for+2045.">IDF diabetes atlas: Global estimates of diabetes prevalence for 2017 and projections for 2045.</a> Diabetes Research and Clinical Practice. 138, 271-281 (2018).</li><li>Danaei, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=National,+regional,+and+global+trends+in+fasting+plasma+glucose+and+diabetes+prevalence+since+1980:+systematic+analysis+of+health+examination+surveys+and+epidemiological+studies+with+370+country-years+and+2.7+million+participants.">National, regional, and global trends in fasting plasma glucose and diabetes prevalence since 1980: systematic analysis of health examination surveys and epidemiological studies with 370 country-years and 2.7 million participants.</a> Lancet. 378 (9785), 31-40 (2011).</li><li>Diabetes Care. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimizing+hypoglycemia+in+diabetes.">Minimizing hypoglycemia in diabetes.</a> Diabetes Care. 38 (8), 1583 (2015).</li><li>Health Quality Ontario. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+transplantation:+an+evidence-based+analysis.">Islet transplantation: an evidence-based analysis.</a> Ontario Health Technology Assessment Series. 3 (4), 1-45 (2003).</li><li>Brennan, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+follow-up+of+the+Edmonton+protocol+of+islet+transplantation+in+the+United+States.">Long-term follow-up of the Edmonton protocol of islet transplantation in the United States.</a> American Journal of Transplantation. 16 (2), 509-517 (2016).</li><li>Korsgren, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+encapsulation:+Physiological+possibilities+and+limitations.">Islet encapsulation: Physiological possibilities and limitations.</a> Diabetes. 66 (7), 1748-1754 (2017).</li><li>Kuncorojakti, S., Srisuwatanasagul, S., Kradangnga, K., Sawangmake, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-Producing+Cell+Transplantation+Platform+for+Veterinary+Practice.">Insulin-Producing Cell Transplantation Platform for Veterinary Practice.</a> Frontiers in Veterinary Science. 7, 4 (2020).</li><li>Sawangmake, C., Nowwarote, N., Pavasant, P., Chansiripornchai, P., Osathanon, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+feasibility+study+of+an+in+vitro+differentiation+potential+toward+insulin-producing+cells+by+dental+tissue-derived+mesenchymal+stem+cells.">A feasibility study of an in vitro differentiation potential toward insulin-producing cells by dental tissue-derived mesenchymal stem cells.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 452 (3), 581-587 (2014).</li><li>Sawangmake, C., Rodprasert, W., Osathanon, T., Pavasant, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrative+protocols+for+an+in+vitro+generation+of+pancreatic+progenitors+from+human+dental+pulp+stem+cells.">Integrative protocols for an in vitro generation of pancreatic progenitors from human dental pulp stem cells.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 530 (1), 222-229 (2020).</li><li>Kuncorojakti, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alginate/Pluronic+F127-based+encapsulation+supports+viability+and+functionality+of+human+dental+pulp+stem+cell-derived+insulin-producing+cells.">Alginate/Pluronic F127-based encapsulation supports viability and functionality of human dental pulp stem cell-derived insulin-producing cells.</a> Journal of Biological Engineering. 14, 23 (2020).</li><li>Ritz-Laser, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ectopic+expression+of+the+beta-cell+specific+transcription+factor+Pdx1+inhibits+glucagon+gene+transcription.">Ectopic expression of the beta-cell specific transcription factor Pdx1 inhibits glucagon gene transcription.</a> Diabetologia. 46 (6), 810-821 (2003).</li><li>Pampusch, M. S., Skinner, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transduction+and+expansion+of+primary+T+cells+in+nine+days+with+maintenance+of+central+memory+phenotype.">Transduction and expansion of primary T cells in nine days with maintenance of central memory phenotype.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (157), (2020).</li><li>Fraga, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+influencing+transfection+efficiency+of+pIDUA/nanoemulsion+complexes+in+a+mucopolysaccharidosis+type+I+murine+model.">Factors influencing transfection efficiency of pIDUA/nanoemulsion complexes in a mucopolysaccharidosis type I murine model.</a> International Journal of Nanomedicine. 12, 2061-2067 (2017).</li><li>Balak, J. R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+efficient+ex+vivo+lentiviral+transduction+of+primary+human+pancreatic+exocrine+cells.">Highly efficient ex vivo lentiviral transduction of primary human pancreatic exocrine cells.</a> Scientific Reports. 9 (1), 15870 (2019).</li><li>Balaji, S., Zhou, Y., Opara, E. C., Soker, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combinations+of+Activin+A+or+nicotinamide+with+the+pancreatic+transcription+factor+PDX1+support+differentiation+of+human+amnion+epithelial+cells+toward+a+pancreatic+lineage.">Combinations of Activin A or nicotinamide with the pancreatic transcription factor PDX1 support differentiation of human amnion epithelial cells toward a pancreatic lineage.</a> Cellular Reprogramming. 19 (4), 255-262 (2017).</li><li>Spaeth, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+a+novel+role+for+the+Pdx1+transcription+factor+in+islet+&#946;-Cell+maturation+and+proliferation+during+weaning.">Defining a novel role for the Pdx1 transcription factor in islet &#946;-Cell maturation and proliferation during weaning.</a> Diabetes. 66 (11), 2830-2839 (2017).</li><li>Bastidas-Ponce, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Foxa2+and+Pdx1+cooperatively+regulate+postnatal+maturation+of+pancreatic+&#946;-cells.">Foxa2 and Pdx1 cooperatively regulate postnatal maturation of pancreatic &#946;-cells.</a> Molecular Metabolism. 6 (6), 524-534 (2017).</li><li>Zhu, Y., Liu, Q., Zhou, Z., Ikeda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PDX1,+Neurogenin-3,+and+MAFA:+critical+transcription+regulators+for+beta+cell+development+and+regeneration.">PDX1, Neurogenin-3, and MAFA: critical transcription regulators for beta cell development and regeneration.</a> Stem Cell Research &amp; Therapy. 8 (1), 240 (2017).</li><li>Ma, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culturing+and+transcriptome+profiling+of+progenitor-like+colonies+derived+from+adult+mouse+pancreas.">Culturing and transcriptome profiling of progenitor-like colonies derived from adult mouse pancreas.</a> Stem Cell Research &amp; Therapy. 8 (1), 172 (2017).</li><li>Tiedemann, H. B., Schneltzer, E., Beckers, J., Przemeck, G. K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hrabe+de+Angelis,+M.+Modeling+coexistence+of+oscillation+and+Delta/Notch-mediated+lateral+inhibition+in+pancreas+development+and+neurogenesis.">Hrabe de Angelis, M. Modeling coexistence of oscillation and Delta/Notch-mediated lateral inhibition in pancreas development and neurogenesis.</a> Journal of Theoretical Biology. 430, 32-44 (2017).</li><li>Xu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+culture+promotes+the+differentiation+of+human+dental+pulp+mesenchymal+stem+cells+into+insulin-producing+cells+for+improving+the+diabetes+therapy.">Three-dimensional culture promotes the differentiation of human dental pulp mesenchymal stem cells into insulin-producing cells for improving the diabetes therapy.</a> Frontiers in Pharmacology. 10, 1576 (2019).</li><li>Grimm, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+engineering+under+microgravity+conditions-use+of+stem+cells+and+specialized+cells.">Tissue engineering under microgravity conditions-use of stem cells and specialized cells.</a> Stem Cells and Development. 27 (12), 787-804 (2018).</li><li>Tran, R., Moraes, C., Hoesli, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+clustering+enhances+PDX1+and+NKX6.1+expression+in+pancreatic+endoderm+cells+derived+from+pluripotent+stem+cells.">Controlled clustering enhances PDX1 and NKX6.1 expression in pancreatic endoderm cells derived from pluripotent stem cells.</a> Scientific Reports. 10 (1), 1190 (2020).</li><li>Li, X. Y., Zhai, W. J., Teng, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notch+signaling+in+pancreatic+development.">Notch signaling in pancreatic development.</a> International Journal of Molecular Sciences. 17 (1), 48 (2015).</li><li>Motoyama, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+with+specific+soluble+factors+promotes+the+functional+maturation+of+transcription+factor-mediated,+pancreatic+transdifferentiated+cells.">Treatment with specific soluble factors promotes the functional maturation of transcription factor-mediated, pancreatic transdifferentiated cells.</a> PLoS One. 13 (5), 0197175 (2018).</li><li>Baldan, J., Houbracken, I., Rooman, I., Bouwens, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+human+pancreatic+acinar+cells+dedifferentiate+into+an+embryonic+progenitor-like+state+in+3D+suspension+culture.">Adult human pancreatic acinar cells dedifferentiate into an embryonic progenitor-like state in 3D suspension culture.</a> Scientific Reports. 9 (1), 4040 (2019).</li><li>Wedeken, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+murine+pancreatic+progenitors+require+epidermal+growth+factor+and+nicotinamide+for+self-renewal+and+differentiation+in+a+serum-+and+conditioned+medium-free+culture.">Adult murine pancreatic progenitors require epidermal growth factor and nicotinamide for self-renewal and differentiation in a serum- and conditioned medium-free culture.</a> Stem Cells and Development. 26 (8), 599-607 (2017).</li><li>Trott, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+culture+of+self-renewing+pancreatic+progenitors+derived+from+human+pluripotent+stem+cells.">Long-term culture of self-renewing pancreatic progenitors derived from human pluripotent stem cells.</a> Stem Cell Reports. 8 (6), 1675-1688 (2017).</li><li>Kim, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Construction+of+EMSC-islet+co-localizing+composites+for+xenogeneic+porcine+islet+transplantation.">Construction of EMSC-islet co-localizing composites for xenogeneic porcine islet transplantation.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 497 (2), 506-512 (2018).</li><li>Gauthaman, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extra-embryonic+human+Wharton's+jelly+stem+cells+do+not+induce+tumorigenesis,+unlike+human+embryonic+stem+cells.">Extra-embryonic human Wharton's jelly stem cells do not induce tumorigenesis, unlike human embryonic stem cells.</a> Reproductive BioMedicine Online. 24 (2), 235-246 (2012).</li><li>Schiesser, J. V., Wells, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+beta+cells+from+human+pluripotent+stem+cells:+are+we+there+yet.">Generation of beta cells from human pluripotent stem cells: are we there yet.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1311, 124-137 (2014).</li><li>Chmielowiec, J., Borowiak, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+differentiation+and+expansion+of+human+pluripotent+stem+cell-derived+pancreatic+progenitors.">In vitro differentiation and expansion of human pluripotent stem cell-derived pancreatic progenitors.</a> The Review of Diabetic Studies. 11 (1), 19-34 (2014).</li></ol>

एमएससी से उच्च आईपीसी उत्पादन प्राप्त करना मधुमेह चिकित्सा में एक आवश्यक भूमिका निभाता है। एकीकृत प्रोटोकॉल के महत्वपूर्ण कदम ट्रांसडक्शन और ट्रांसड्यूडेड कोशिकाओं की गुणवत्ता के लिए उपयोग की जान?...

मधुमेह मेलिटस एक सतत वैश्विक चिंता का विषय है । इंटरनेशनल डायबिटीज फेडरेशन (आईडीएफ) की एक रिपोर्ट में अनुमान लगाया गया है कि मधुमेह की वैश्विक व्यापकता 2000 के 151 मिलियन से बढ़कर 2015 में 415 मिलियन हो जाएगी। नवीनतम महामारी विज्ञान आधारित अध्ययन में भविष्यवाणी की गई है कि दुनिया भर में मधुमेह की अनुमानित व्यापकता २०१७ में ४५१,०,००० से बढ़कर २०४५ १ में६९३,०,०हो जाएगी । एडमोंटन प्रोटोकॉल का उपयोग करके अग्नाशय आइलेट प्रत्यारोपण की सफलता पहली बार 2000 में प्रदर्शित की गई थी, जब इसे अंतर्जात इंसुलिन उत्पादन को बनाए रखने और टाइप I मधुमेह रोगियों में नॉर्मोग्लिेमिक स्थिति को स्थिर करने के लिए दिखाया गया था3। हालांकि, एडमोंटन प्रोटोकॉल के आवेदन अभी भी एक अड़चन समस्या का सामना करना पड़ता है । कैडेनिक अग्न्याशय दाताओं की सीमित संख्या मुख्य मुद्दा है क्योंकि प्रकार के साथ प्रत्येक रोगी मैं मधुमेह कम से कम 2-4 आइलेट दाताओं की आवश्यकता है। इसके अलावा, इम्यूनोसप्रेसिव एजेंटों के दीर्घकालिक उपयोग से जीवन-धमकी देने वाले दुष्प्रभाव4,5 होसकतेहैं। इसका समाधान करने के लिए, पिछले एक दशक में मधुमेह के लिए एक संभावित चिकित्सा के विकास ने मुख्य रूप से स्टेम सेल 6 के विभिन्न स्रोतों से प्रभावीइंसुलिनउत्पादक कोशिकाओं (आईपीसी) की पीढ़ी पर ध्यान केंद्रित किया है।
स्टेम सेल मधुमेह टाइप I सहित कई बीमारियों में एक वैकल्पिक उपचार बन गया, जो बीटा कोशिकाओं के नुकसान के कारण होता है। इन रोगियों में रक्त ग्लूकोज कोनियंत्रितकरने के लिए आईपीसी का प्रत्यारोपण नई आशाजनक विधि है । इस लेख में आईपीसी, इंटीग्रेटिव और नॉन-इंटीग्रेटिव इंडक्शन प्रोटोकॉल जेनरेट करने के लिए दो दृष्टिकोण प्रस्तुत किए गए हैं । इंडक्शन प्रोटोकॉल ने परिपक्व और कार्यात्मक आईपीसी8,9प्राप्त करने के लिए प्राकृतिक अग्नाशय की विकास प्रक्रिया की नकल की .
इस अध्ययन के लिए, एचडीपीएससी को एमएससी सतह मार्कर डिटेक्शन, मल्टीलाइनेज भेदभाव क्षमता, और आरटी-क्यूपीसीआर के लिए प्रवाह साइटोमेट्री की विशेषता थी, जो स्टेमनेस संपत्ति और प्रोलिफेरेटिव जीन मार्कर (डेटा नहीं दिखाए गए)8,9,10की अभिव्यक्ति निर्धारित करने के लिए था। एचडीपीएससी को क्रमशः7निश्चित एंडोडर्म, अग्नाशय के एंडोडर्म, अग्नाशय के अंतःस्रावी, और अग्नाशय बीटा-कोशिकाओं या आईपीसी(चित्रा 1)की ओर प्रेरित किया गया था। कोशिकाओं को प्रेरित करने के लिए, एक रीढ़ प्रोटोकॉल के रूप में एक तीन कदम प्रेरण दृष्टिकोण का उपयोग किया गया था। इस प्रोटोकॉल को नॉन इंटीग्रेटिव प्रोटोकॉल कहा जाता था। एकीकृत प्रोटोकॉल के मामले में, आवश्यक अग्नाशय के ट्रांसक्रिप्शन फैक्टर, पीडीएक्स 1को एचडीपीएससी में अतिउपसारित किया गया था जिसके बाद तीन चरणों वाले भेदभाव प्रोटोकॉल का उपयोग करके एचडीपीएससी में अतिएक्सप्रेस्ड पीडीएक्स1 को शामिल किया गया था। गैर-एकीकृत और एकीकृत प्रोटोकॉल के बीच अंतर एकीकृत प्रोटोकॉल में पीडीएक्स 1 का अतिव्यवसंगतता है न कि गैर-एकीकृत प्रोटोकॉल में। अग्नाशय के भेदभाव की तुलना इस अध्ययन में एकीकृत और गैर-एकीकृत प्रोटोकॉल के बीच की गई थी।

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	<tbody>
		<tr>
			<td>Cell Culture</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic-Antimycotic</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Corporation, USA</td>
			<td>15240062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning&#174; 60 mm TC-treated Culture Dish</td>
			<td>Corning&#174;</td>
			<td>430166</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle Medium (DMEM)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Corporation</td>
			<td>12800017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Corporation</td>
			<td>10270106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMAX&#8482;</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Corporation</td>
			<td>35050061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS) powder, pH 7.4</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P3813-10PAK</td>
			<td>One pack is used for preparing 1 L of PBS solution with sterile DDI</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA (0.25%)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Corporation</td>
			<td>25200072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lentiviral Vector Carrying PDX1 Preparation</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amicon&#174; Ultra-15 Centrifugal Filter</td>
			<td>Merck Millipore, USA</td>
			<td>UFC910024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human pWPT-PDX1 plasmid</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>12256</td>
			<td>Gift from Didier Trono; http://n2t.net/addgene:12256; RRID: Addgene_12256</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millex-HV Syringe Filter Unit, 0.45&#160;&#181;m</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>SLHV033RB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pMD2.G plasmid</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>12259</td>
			<td>Gift from Didier Trono; http://n2t.net/addgene:12259; RRID: Addgene_12259</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polybrene Infection / Transfection Reagent</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>TR-1003-G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>psPAX2 plasmid</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>12260</td>
			<td>Gift from Didier Trono; http://n2t.net/addgene:12260; RRID: Addgene_12260</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Three-step Induction Protocol</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Activin A Recombinant Human Protein</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>GF300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beta-mercaptoethanol</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Corporation</td>
			<td>21985-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (BSA, Cohn fraction V, fatty acid free)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A6003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucagon-like peptide (GLP)-1</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G3265</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin-Transferrin-Selenium (ITS)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>41400-045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nicotinamide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N0636</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Essential Amino Acids (NEAAs)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Corporation</td>
			<td>11140-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-treated cell culture dish, 60mm</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>30701011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium butyrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>B5887</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taurine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T0625</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro induction of human dental pulp stem cells toward pancreatic lineages

2000 के रूप में, अग्नाशय आइलेट प्रत्यारोपण की सफलता एडमोंटन प्रोटोकॉल का उपयोग करने के लिए प्रकार मैं मधुमेह मेलिटस के इलाज के लिए अभी भी कुछ बाधाओं का सामना करना पड़ा. इनमें शव अग्न्याशय दाताओं की सीमित संख्या और इम्यूनोसप्रेसेंट का दीर्घकालिक उपयोग शामिल है। मेसेंचिमल स्टेम सेल (एमएससी) को आइलेट जैसे सेल जनरेशन के वैकल्पिक स्रोत के रूप में संभावित उम्मीदवार माना गया है । हमारी पिछली रिपोर्टों में इंसुलिन उत्पादक कोशिकाओं (आईपीसी) के लिए मानव दंत लुगदी स्टेम कोशिकाओं (एचडीपीएससी) में अंतर करने के लिए प्रेरण प्रोटोकॉल की स्थापना को सफलतापूर्वक दर्शाया गया है । हालांकि, प्रेरण दक्षता बहुत भिन्न थी। इस पेपर में, हम एचडीपीएससी-व्युत्पन्न आईपीसी (एचएसपीएससी-आईपीसी) देने के लिए एकीकृत (माइक्रोएनवायरमेंटल और जेनेटिक हेरफेर) और गैर-एकीकृत (माइक्रोएनवायरमेंटल हेरफेर) प्रेरण प्रोटोकॉल के माध्यम से एचडीपीएससी अग्नाशय की प्रेरण दक्षता की तुलना प्रदर्शित करते हैं। परिणाम बहु-खुराक ग्लूकोज चुनौती पर 3-आयामी कॉलोनी संरचना, उपज, अग्नाशय एमआरएनए मार्कर और कार्यात्मक संपत्ति के संदर्भ में दोनों प्रेरण दृष्टिकोणों के लिए अलग-अलग प्रेरण दक्षता का सुझाव देते हैं। ये निष्कर्ष चिकित्सकीय रूप से लागू आईपीसी और अग्नाशय वंश उत्पादन मंच की भावी स्थापना का समर्थन करेंगे।

इस लेख में, दोनों इंडक्शन प्रोटोकॉल के परिणामों की तुलना की गई थी। दोनों इंडक्शन प्रोटोकॉल के आरेख चित्र 2ए,सीमें दर्शाए गए हैं। दोनों प्रोटोकॉल में, मूल्यांकन एक हल्के माइक्रोस्कोप ?...

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In vitro Induction of Human Dental Pulp Stem Cells Toward Pancreatic Lineages

यह प्रोटोकॉल विट्रो मेंअग्नाशय के वंश की ओर मानव दंत लुगदी स्टेम कोशिकाओं (एचडीपीएससी) में अंतर करने के लिए दो अलग-अलग प्रेरण प्रोटोकॉलों के बीच तुलना प्रस्तुत करता है: एकीकृत प्रोटोकॉल और गैर-एकीकृत प्रोटोकॉल। इंटीग्रेटिव प्रोटोकॉल अधिक इंसुलिन उत्पादक कोशिकाओं (आईपीसी) उत्पन्न करता है।

इन विट्रो अग्नाशय के वंश की ओर मानव दंत लुगदी स्टेम सेल का प्रेरण

As of 2000, the success of pancreatic islet transplantation using the Edmonton protocol to treat type I diabetes mellitus still faced some obstacles. ...

इस वीडियो अग्नाशय वंश की ओर मानव दंत लुगदी स्टेम कोशिकाओं के इन विट्रो प्रेरण दिखा रहा है । स्टेम सेल मधुमेह टाइप I सहित कई बीमारियों में वैकल्पिक उपचार देते हैं जो बीटा कोशिकाओं के बायोलैगिंग का कारण बनता है। इंसुलिन उत्पादन कोशिकाओं का प्रत्यारोपण आजीवन पैदा करने के लिए नई आशाजनक विधि होगी ।इस वीडियो में एकीकृत और गैर एकीकृत प्रेरण प्रोटोकॉल सहित इंसुलिन उत्पादन सेल पैदा करने के लिए दो दृष्टिकोणों का वर्णन किया गया है। और इस भाग में मानव दंत लुगदी स्टेम सेल से इंसुलिन उत्पादक कोशिकाओं को प्रेरित करने के लिए एकीकरण प्रोटोकॉल समझाया गया है। इंडक्शन प्रोटोकॉल के लिए प्राकृतिक अग्नाशय विकास प्रक्रिया को मिलाने के लिए है।प्राकृतिक और कार्यात्मक इंसुलिन उत्पादन कोशिकाओं को प्राप्त करने के लिए। डेंटल पल्प स्टेम सेल जैसे मेसेंचिमल स्टेम सेल से इंसुलिन उत्पादन कोशिकाओं को पैदा करने के लिए मल्टी स्टेप इंडक्शन प्रोटोकॉल नियोजित किया जाता है। Mesenchymal स्टेम कोशिकाओं शब्द निश्चित endoderm, अग्नाशय endoderm, अग्नाशय अंतःस्रावी और फिर अग्नाशय बीटा सेल या इंसुलिन उत्पादन कोशिकाओं क्रमशः में उपयोग किया जाता है ।कोशिकाओं को प्रेरित करने के लिए, तीन चरण प्रेरण दृष्टिकोण का उपयोग बैकबोन प्रोटोकॉल के रूप में किया जाता है। एकीकृत प्रोटोकॉल मानव दंत लुगदी स्टेम कोशिकाओं द्वारा आवश्यक अग्नाशय प्रतिलेखन कारक, पीडीएक्स-1 की समाप्ति से अधिक कार्यरत थे। फिर व्यक्त स्टेम सेल पर PDX-1 आगे तीन कदम भेदभाव प्रोटोकॉल का उपयोग कर प्रेरित किया जाएगा ।अग्नाशय भेदभाव क्षमता, एकीकृत प्रोटोकॉल द्वारा, एनीमेशन में सचित्र के रूप में गैर एकीकृत प्रोटोकॉल के साथ तुलना की जाएगी । यह विचार मानव अनुसंधान नीति समिति, दंत चिकित्सा संकाय, चुलालोंग्कोर्न विश्वविद्यालय द्वारा अनुमोदित प्रोटोकॉल के तहत रोगियों की सूचित सहमति के साथ किया गया था । यह प्रोटोकॉल पीडीएक्स-1 की समाप्ति के साथ शुरू हुआ।70-80% संगम के साथ 2 से 5 के कुछ हिस्सों में मानव दंत लुगदी स्टेम सेल का उपयोग ट्रांसडक्शन के लिए किया जाता है। कोशिकाओं को ट्राइपसिनाइज्ड और गिना जाता है। फिर १,०,० कोशिकाओं को ट्रांसफैक्शन पोत पर बैठाया जाता है और रातोंरात इनक्यूबेटेड किया जाता है ।24 घंटे बाद पीडीएक्स-1 जीन ले जाने वाले हौसले से तैयार एंटीवायरस को संक्रमण की वांछित बहुलता के अनुसार सुसंस्कृत पोत में जोड़ा जाता है । इसके बाद संक्रमित कोशिकाओं को 24 घंटे तक इनक्यूबेटर में रखा जाता है। फिर ताजा सुसंस्कृत माध्यम को बदल दिया जाता है और एक और 48 अवधि के लिए बनाए रखा जाता है।आगे प्रेरण चरण के लिए उपयोग करने से पहले संक्रमित कोशिकाओं की आकृति विज्ञान की जांच की जाती है। समाप्ति से अधिक पीडीएक्स-1 के साथ मानव दंत लुगदी स्टेम कोशिकाओं को पहले अग्नाशय के प्रेरण माध्यम में ट्राइप्टिमाइज्ड और निलंबित किया जाता है, इसलिए इस चरण A.In मध्यम कहा जाता है, कम लगाव सुसंस्कृत पोत का उपयोग किया जाता है। पीडीएक्स-1 की आकृति विज्ञान ने 3 दिन पर व्यक्त मानव दंत लुगदी स्टेम कोशिकाओं को मध्यम एक प्रेरण के बाद मनाया जाता है ।अच्छी आकृति विज्ञान वाली कोशिकाओं का उपयोग आगे के प्रेरण चरण के लिए किया जाएगा। अगला कदम, दूसरा प्रेरण माध्यम, तथाकथित मध्यम बी को सुसंस्कृत पोत में जोड़ा जाता है। मध्यम प्रेरण के बाद दो दिन पर व्यक्त मानव दंत लुगदी स्टेम कोशिकाओं पर पीडीएक्स-1 की आकृति विज्ञान मनाया जाता है ।अच्छी आकृति विज्ञान वाली कोशिकाओं का उपयोग आगे के प्रेरण चरण के लिए किया जाएगा। अगला कदम, तीसरा प्रेरण मीडिया, जिसे मध्यम सी कहा जाता है, को सुसंस्कृत पोत में जोड़ा जाता है। 5 दिन बाद सेल आकृति विज्ञान मनाया जाता है।सेल कालोनियों को आगे के विश्लेषण के लिए एकत्र किया जाता है। कॉलोनी आकृति विज्ञान और आकार, अग्नाशय जीन मार्कर अभिव्यक्ति और ग्लूकोज उत्तेजित सी-पेप्टाइड स्राव या GSCS परख के बारे में कार्यात्मक संपत्ति सहित । नॉन इंटीग्रेटिव इंडक्शन अप्रोच के लिए पहले बताए गए थ्री स्टेप इंडक्शन प्रोटोकॉल को नियोजित किया गया है ।कोशिकाओं के १,०,० फिर से मध्यम एक में निलंबित कर रहे है और कम लगाव संस्कृति पोत पर बैठा । फिर तीन दिन तक संस्कारी। आकृति विज्ञान की जांच के बाद, मध्यम बी और सी सहित प्रेरण माध्यम की श्रृंखला को बाद में क्रमशः तीन और पांच दिन सुसंस्कृत पोत में जोड़ा जाता है ।10 दिन में, सेल आकृति विज्ञान मनाया जाता है। सेल उपनिवेशों को आगे के विश्लेषण के लिए एकत्र किया जाता है, जिसमें कॉलोनी आकृति विज्ञान और आकार, अग्नाशय जीन मार्कर अभिव्यक्ति, और ग्लूकोज-उत्तेजित सी-पेप्टाइड स्राव या जीएसएक्सएस परख के बारे में कार्यात्मक संपत्ति शामिल है। दोनों इंडक्शन प्रोटोकॉल के परिणामों की तुलना दोनों प्रोटोकॉल में की जाती है ।मानव दंत लुगदी स्टेम सेल प्रेरण के पहले दिन के बाद से कॉलोनी जैसी संरचना बनाने में सक्षम हैं। कॉलोनियों की उपस्थिति गोल और घनी है। सभी उपनिवेश पूरे प्रेरण काल में संस्कृति के जहाजों में तैर रहे हैं।इंटीग्रेटिव इंडक्शन प्रोटोकॉल की कुल कॉलोनी गिनती गैर-एकीकृत प्रेरण से थोड़ी अधिक है। कॉलोनी आकार प्रतिशत के तहत विकास एक फायदेमंद प्रवृत्ति दिखाता है, छोटे से मध्यम आकार के कॉलोनी गठन पर एकीकृत प्रेरण पर, जो कॉलोनी के अंदर परिगलित कोर को कम करने के लिए महत्वपूर्ण है। अग्नाशय जीन मार्कर विश्लेषण से पता चला है कि एकीकृत प्रेरक प्रोटोकॉल मानचित्र-ए, भरमार-2, इंसुलिन, और GLP-1R सहित अग्नाशय मार्कर की उच्च समाप्ति के साथ कालोनियों पैदावार, मापा इंसुलिन उत्पादन कोशिकाओं की ओर भेदभाव का सुझाव ।समारोह के लिए ग्लूकोज सी-पेप्टाइड स्राव महत्वपूर्ण है। परिणाम बताते हैं कि दोनों इंडक्शन प्रोटोकॉल ग्लूकोज चैलेंज के लिए अच्छी प्रतिक्रिया के साथ कालोनियों पैदावार । इस अध्ययन से, अग्नाशय के प्रेरण प्रोटोकॉल दोनों अग्नाशय मार्कर समाप्ति और कार्यात्मक संपत्ति की अवधि में विट्रो में इंसुलिन उत्पादक कोशिकाओं को उत्पन्न करने में सक्षम हैं, प्रोटोकॉल इंसुलिन उत्पादन कोशिका गठन की बेहतर गुणवत्ता दिखाता है।निकट भविष्य में स्टेम सेल आधारित मधुमेह उपचार में मानव दंत लुगदी स्टेम सेल आवेदन की तरह मानव mesenchymal स्टेम सेल की प्रवृत्तियों का सुझाव ।

Research

JoVE Journal

Bioengineering

In vitro Induction of Human Dental Pulp Stem Cells Toward Pancreatic Lineages

Use of Human Perivascular Stem Cells for Bone Regeneration

अस्थि पुनर्जनन के लिए मानव Perivascular स्टेम सेल का उपयोग

Human perivascular stem cells (PSCs) can be isolated in sufficient numbers from multiple tissues for purposes of skeletal tissue engineering1-3. PSCs are ...

Alginate Microcapsule as a 3D Platform for Propagation and Differentiation of Human Embryonic Stem Cells (hESC) to Different Lineages

Alginate Microcapsule as a 3D Platform for Propagation and Differentiation of Human Embryonic Stem Cells hESC to Different Lineages

और मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं (hESC) के प्रसार और भेदभाव के लिए एक 3 डी मंच के रूप में विभिन्न प्रजातियों के लिए alginate microcapsule

Human embryonic stem cells (hESC) are emerging as an attractive alternative source for cell replacement therapy since they can be expanded in culture ...

Therapeutic Gene Delivery and Transfection in Human Pancreatic Cancer Cells using Epidermal Growth Factor Receptor-targeted Gelatin Nanoparticles

जीन और मानव अग्नाशय के कैंसर epidermal वृद्धि कारक का उपयोग कक्ष में डिलिवरी अभिकर्मक जिलेटिन आधारित इंजीनियर Nanovectors रिसेप्टर - लक्षित

More than 32,000 patients are diagnosed with pancreatic cancer in the United States per year and the disease is associated with very high mortality 1. ...

Development, Expansion, and In vivo Monitoring of Human NK Cells from Human Embryonic Stem Cells (hESCs) and Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs)

Development, Expansion, and In vivo Monitoring of Human NK Cells from Human Embryonic Stem Cells hESCs and Induced Pluripotent Stem Cells iPSCs

विकास, विस्तार, और<em&gt; विवो में</em&gt; मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं (hESCs) से मानव एन.के. कोशिकाओं की निगरानी और और प्रेरित pluripotent स्टेम सेल (iPSCs)

We present a method for deriving natural killer (NK) cells from undifferentiated hESCs and iPSCs using a feeder-free approach. This method gives rise to ...

Transplantation of Induced Pluripotent Stem Cell-derived Mesoangioblast-like Myogenic Progenitors in Mouse Models of Muscle Regeneration

मांसपेशियों के उत्थान के माउस मॉडल में प्रेरित Pluripotent स्टेम सेल-व्युत्पन्न मेसोंगियोब्लास्ट की तरह मायोजेनिक प्रोजेनिटर का प्रत्यारोपण

Patient-derived iPSCs could be an invaluable source of cells for future autologous cell therapy protocols. iPSC-derived myogenic stem/progenitor cells ...

Use of a High-throughput In Vitro Microfluidic System to Develop Oral Multi-species Biofilms

Use of a High-throughput In Vitro Microfluidic System to Develop Oral Multi-species Biofilms

एक उच्च throughput का प्रयोग करें<em&gt; इन विट्रो</em&gt; Microfluidic प्रणाली ओरल बहु प्रजातियों Biofilms विकसित करने के लिए

There are few high-throughput in vitro systems which facilitate the development of multi-species biofilms that contain numerous species commonly detected ...

Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial (RhCE) Tissue Model

Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model

खंगाला मानव कॉर्निया की तरह उपकला (RHCE) ऊतक मॉडल का उपयोग नेत्र परेशान रसायन का खतरा पहचान के लिए आंखों में जलन टेस्ट (ईआईटी)

To comply with the Seventh Amendment to the EU Cosmetics Directive and EU REACH legislation, validated non-animal alternative methods for reliable and ...

Efficient Generation and Editing of Feeder-free IPSCs from Human Pancreatic Cells Using the CRISPR-Cas9 System

कुशल पीढ़ी और फीडर का संपादन-CRISPR-Cas9 प्रणाली का उपयोग मानव अग्नाशय कोशिकाओं से मुक्त IPSCs

Embryonic and induced pluripotent stem cells can self-renew and differentiate into multiple cell types of the body. The pluripotent cells are thus coveted ...

Advanced 3D Liver Models for In vitro Genotoxicity Testing Following Long-Term Nanomaterial Exposure

लंबी अवधि के नैनोमैटेरियल एक्सपोजर के बाद इन विट्रो जेनोटॉक्सिसिटी परीक्षण के लिए उन्नत 3डी लिवर मॉडल

Due to the rapid development and implementation of a diverse array of engineered nanomaterials (ENM), exposure to ENM is inevitable and the development of ...

Single-Cell Optical Action Potential Measurement in Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes

मानव प्रेरित Pluripotent स्टेम सेल-व्युत्पन्न कार्डियोमायोसाइट्स में एकल सेल ऑप्टिकल एक्शन संभावित माप

Conventional intracellular microelectrode techniques to quantify cardiomyocyte electrophysiology are extremely complex, labor intensive, and typically ...