Name: microsurgical obstruction of testes fusion in spodoptera litura
Uploaded: 2021-07-16T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Microsurgical Obstruction of Testes Fusion in Spodoptera litura at JoVE.com

تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (Nos.:31772519, 31720103916; ) ومنحة مفتوحة من مختبر مفتاح الدولة لبيولوجيا جينوم دودة القز، جامعة ساوث ويست (رقم: sklsgb2013003).

1. تربية الحشرات وصيانتها
<ol><li>استزرع يرقات Spodoptera litura في غرف المحاكاة البيئية مع اتباع نظام غذائي اصطناعي حتى تصل إلى اليوم 4 من النجم السادس (L6D4). حدد يرقات الذكور عندما تدخل الديدان اليوم الأول من النجم السادس (L6D0) بناء على بنية المثلث العكسي على البطن الثامن14.</sup...

<ol>
	<li>Zeitlinger, J., Bohmann, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thorax+closure+in+Drosophila:+involvement+of+Fos+and+the+JNK+pathway.">Thorax closure in Drosophila: involvement of Fos and the JNK pathway.</a> Development. 126 (17), 3947-3956 (1999).</li><li>Ray, H. J., Niswander, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+tissue+fusion+during+development.">Mechanisms of tissue fusion during development.</a> Development. 139 (10), 1701-1711 (2012).</li><li>Ducuing, A., Keeley, C., Mollereau, B., Vincent, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DPP-mediated+feed-forward+loop+canalizes+morphogenesis+during+Drosophila+dorsal+closure.">DPP-mediated feed-forward loop canalizes morphogenesis during Drosophila dorsal closure.</a> The Journal of Cell Biology. 208 (2), 239-248 (2015).</li><li>Du, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+functional+characterization+of+doublesex+gene+in+the+testis+of+Spodoptera+litura.">Identification and functional characterization of doublesex gene in the testis of Spodoptera litura.</a> Insect Science. 26 (6), 1000-1010 (2019).</li><li>Qin, H. G., Ding, J., Ye, Z. X., Huang, S. J., Luo, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+analysis+of+experimental+population+of+Spodoptera+litura.">Dynamic analysis of experimental population of Spodoptera litura.</a> Journal of Biosafety. 13 (2), 45-48 (2004).</li><li>Guan, B. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+research+in+biology+and+ecology+of+Spodoptera+litura.">The research in biology and ecology of Spodoptera litura.</a> Journal of Biosafety. 8 (1), 57-61 (1999).</li><li>Wen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+testis+development+and+spermatogenesis+in+Spodopture+litura+(lepidoptera:+noctuidae).">The testis development and spermatogenesis in Spodopture litura (lepidoptera: noctuidae).</a> Journal of South China Normal University (Natural Science Edition. 51 (4), 47-56 (2019).</li><li>Friedl&#228;nder, M., Seth, R. K., Reynolds, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eupyrene+and+apyrene+sperm:+dichotomous+spermatogenesis+in+Lepidoptera.">Eupyrene and apyrene sperm: dichotomous spermatogenesis in Lepidoptera.</a> Advances in Insect Physiology. 32, 206 (2010).</li><li>Cook, P. A., Wedell, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-fertile+sperm+delay+female+remating.">Non-fertile sperm delay female remating.</a> Nature. 397 (6719), 486 (1999).</li><li>Iriki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+function+of+apyrene+spermatozoa+in+the+silk+worm.">On the function of apyrene spermatozoa in the silk worm.</a> Zoological Magazine. 53, 123-124 (1941).</li><li>Liu, L., Feng, Q. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+study+of+fusion+of+testis+in+Lepidoptera+insects.">The study of fusion of testis in Lepidoptera insects.</a> Journal of South China Normal University (Natural Science Edition). 46 (5), 1-7 (2014).</li><li>Klowden, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Physiological systems in insects. , (2007).</li><li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+characterization+of+two+testis-specific+promoters+in+the+silkworm,+Bombyx+mori.">Transgenic characterization of two testis-specific promoters in the silkworm, Bombyx mori.</a> Insect Molecular Biology. 24 (2), 183-190 (2015).</li><li>Guo, X. R., Zheng, S. C., Liu, L., Feng, Q. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sterol+carrier+protein+2/3-oxoacyl-CoA+thiolase+(SCPx)+is+involved+in+cholesterol+uptake+in+the+midgut+of+Spodoptera+litura:+gene+cloning,+expression,+localization+and+functional+analyses.">The sterol carrier protein 2/3-oxoacyl-CoA thiolase (SCPx) is involved in cholesterol uptake in the midgut of Spodoptera litura: gene cloning, expression, localization and functional analyses.</a> BioMed Central Molecular Biology. 10, 102 (2009).</li><li>Kope&#263;, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+the+necessity+of+the+brain+for+the+inception+of+insect+metamorphosis.">Studies on the necessity of the brain for the inception of insect metamorphosis.</a> Biological Bulletin. 42 (6), 323-342 (1922).</li><li>Wigglesworth, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+controlling+moulting+and+'metamorphosis'+in+an+insect.">Factors controlling moulting and 'metamorphosis' in an insect.</a> Nature. 133 (5), 725-726 (1934).</li><li>Williams, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiology+of+insect+diapause;+the+role+of+the+brain+in+the+production+and+termination+of+pupal+dormancy+in+the+giant+silkworm,+Platysamia+cecropia.">Physiology of insect diapause; the role of the brain in the production and termination of pupal dormancy in the giant silkworm, Platysamia cecropia.</a> Biological Bulletin. 90 (3), 234-243 (1946).</li><li>Fukuda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hormonal+control+of+molting+and+pupation+in+the+silkworm.">Hormonal control of molting and pupation in the silkworm.</a> Proceedings of the Imperial Academy Tokyo. 16 (8), 417-420 (1940).</li><li>Tian, H. J., Liu, Z. P., Bai, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Common+methods+to+detect+Sperm+quality+of+mammalian.">Common methods to detect Sperm quality of mammalian.</a> Journal of Economic Zoology. 8 (4), 198-201 (2004).</li><li>Ji, X. S., Chen, S. L., Zhao, Y., Tian, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+the+quality+evaluation+of+fish+sperm.">Progress in the quality evaluation of fish sperm.</a> Chinese Fishery Science. 14 (6), 1048-1054 (2007).</li><li>Baulny, B. O. D., Vern, Y. L., Kerboeuf, D., Maisse, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+evaluation+of+mitochondrial+activity+and+membrane+integrity+in+fresh+and+cryopreserved+rainbow+trout+(Oncorhynchus+mykiss)+spermatozoa.">Flow cytometric evaluation of mitochondrial activity and membrane integrity in fresh and cryopreserved rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) spermatozoa.</a> Cryobiology. 34 (2), 141-149 (1997).</li><li>Krasznai, Z., M&#225;ri&#225;n, T., Balkay, I., Emri, M., Tr&#243;n, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permeabilization+and+structural+changes+in+the+membrane+of+common+carp+(Cyprinus+carpio+L.)+sperm+induced+by+hypo-osmotic+shock.">Permeabilization and structural changes in the membrane of common carp (Cyprinus carpio L.) sperm induced by hypo-osmotic shock.</a> Aquaculture. 129 (1), 134 (1995).</li><li>Kime, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computer-assisted+sperm+analysis+(CASA)+as+a+tool+for+monitoring+sperm+quality+in+fish.">Computer-assisted sperm analysis (CASA) as a tool for monitoring sperm quality in fish.</a> Comparative Biochemistry &amp; Physiology Toxicology &amp; Pharmacology Cbp. 130 (4), 425-433 (2001).</li><li>Rurangwa, E., Volckaert, F. A., Huyskens, G., Kime, D. E., Ollevier, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+control+of+refrigerated+and+cryopreserved+semen+using+computer-assisted+sperm+analysis+(CASA),+viable+staining+and+standardized+fertilization+in+African+catfish+(Clarias+gariepinus).">Quality control of refrigerated and cryopreserved semen using computer-assisted sperm analysis (CASA), viable staining and standardized fertilization in African catfish (Clarias gariepinus).</a> Theriogenology. 55 (3), 751-769 (2001).</li><li>Seth, R. K., Kaur, J. J., Rao, D. K., Reynolds, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+larval+exposure+to+sublethal+concentrations+of+the+ecdysteroid+agonists+RH-5849+and+tebufenozide+(RH-5992)+on+male+reproductive+physiology+in+Spodoptera+litura.">Effects of larval exposure to sublethal concentrations of the ecdysteroid agonists RH-5849 and tebufenozide (RH-5992) on male reproductive physiology in Spodoptera litura.</a> Journal of Insect Physiology. 50 (6), 505-517 (2004).</li><li>Sweeney, R. M., Watterson, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rib+development+in+chick+embryos+analyzed+by+means+of+tantalum+foil+blocks.">Rib development in chick embryos analyzed by means of tantalum foil blocks.</a> American Journal of Anatomy. 126 (2), 127-149 (1969).</li><li>Wilde, S., Logan, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+impermeable+barriers+combined+with+candidate+factor+soaked+beads+to+study+inductive+signals+in+the+chick.">Application of impermeable barriers combined with candidate factor soaked beads to study inductive signals in the chick.</a> Journal of Visualized Experiments. (117), e54618 (2016).</li></ol>

بعد إعاقة اندماج الخصيتين جراحيا في Spodoptera litura، انخفض عدد حزم الحيوانات المنوية، مما دعم الفرضية القائلة بأن هذا الاندماج مفيد للقدرة الإنجابية. وقد استخدم التلاعب الجراحي لدراسة التطور الفسيولوجي للحشرات منذ أوائل القرن 20th. لتحديد ما إذا كان العصب القحفي ينظمه تحول الحشرات ، ?...

الانصهار هو ظاهرة شائعة في تطور الأنسجة أو الأعضاء. ومن الأمثلة على ذلك الإغلاق الظهري وإغلاق الصدر في ذبابة الفاكهة 1 ومورفوجينيا الحنك ، ومورفوجينيا الأنبوب العصبي ، ومورفوجينيا القلب في الفئران والدجاج 2. تم تطبيق كريسبر والحمض النووي الريبي للتحقيق في أدوار الجينات في عملية الانصهار2،3،4.
Spodoptera litura (S. litura, Lepidoptera: Noctuidae) هي آفة متعددة البلعوم ضارة تنتشر على نطاق واسع في المناطق الاستوائية وشبه الاستوائية في آسيا ، بما في ذلك China4,5,6. ويعزى التوزيع الواسع النطاق للبكتيريا S. litura جزئيا إلى قدرتها الإنجابية القوية ، والتي لها صلة بتطور الغدد التناسلية. العقم عند الذكور هو أحد الأساليب للسيطرة على هذه الآفة. كما هو موضح في الشكل التخطيطي لبنية الخصية ، يتم إحاطة الخصيتين بغمد الخصية ، بما في ذلك الغمد الخارجي (الغمد البريتوني) والصفيحة القاعدية الداخلية. تمتد الصفيحة القاعدية داخليا لتشكيل الظهارة الجريبية وتفصل المنطقة الداخلية من الخصية إلى أربع غرف تسمى البصيلات (الشكل 1).
في البصيلات، تتطور الحيوانات المنوية إلى منوية بعد الانقسام والانقسام الاختزالي، ثم تصطف الحيوانات المنوية في أكياس الحيوانات المنوية في نفس الاتجاه لتشكيل حزم الحيوانات المنوية7. أثناء تكوين الحيوانات المنوية ، تتمايز الخلايا المنوية الأولية إلى منوية من اليوبيرين أو الحيوانات المنوية من الأبيرين. تتطور الخلايا المنوية في مرحلة اليرقات إلى منوية من اليوبيرين مع ذيل طويل متصل برأس نواة ممدودة ؛ هذه يمكن أن تخصب البيض. على العكس من ذلك ، تتطور الخلايا المنوية في مرحلة منتصف العذراء إلى منوية من الأبيرين مع نواة مهملة. تساعد هذه الحيوانات المنوية على بقاء الحيوانات المنوية وحركتها وإخصابها 9,10. اليوم 6 من الخادرة هو الفترة التي تحتوي خلالها الخصيتان على حزم وفيرة من الحيوانات المنوية من اليوبيرين والأبيرين.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62524/62524fig01.jpg"> الشكل 1: مخطط تخطيطي لبنية الخصية لحشرات Lepidoptera11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62524/62524fig01large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.</a>
يحدث اندماج الخصية في معظم الحشرات من ترتيب Lepidoptera11,12 ، وخاصة في تلك الأنواع التي هي الآفات الزراعية. يشير اندماج الخصية إلى زوج من الخصيتين ينمو بشكل ثنائي في مرحلة اليرقات ، ويقترب ويلتصق ببعضهما البعض ، ويندمج في النهاية في غدد غدد غصني واحد11. في Spodoptera litura، يحدث ذلك أثناء التحول من اليرقات إلى مرحلة العذراء. من اليوم 1 من النجم الخامس (L5D1) إلى اليوم 4 من النجم السادس (L6D4) ، ينمو زوج الخصيتين تدريجيا في الحجم ، ويتحول اللون إلى اللون الأصفر الفاتح من الأبيض العاجي. يصبح أحمر باهت عندما يصل إلى المرحلة القبلية (L6D5 إلى L6D6). تقترب خصيتان متماثلتان ثنائيتان من بعضهما البعض خلال مرحلة ما قبل العذراء، وتندمجان في واحدة، وتلتوي عكس اتجاه عقارب الساعة (الرؤية الدوارة) لإنتاج خصية واحدة في مرحلتي العذراء والبالغين11. لا تحدث هذه الظاهرة في ديدان القز ، التي لها أهمية اقتصادية كبيرة وتم تدجينها لمدة 5000 عام13. وبالتالي ، من المفترض أن اندماج الخصيتين يحسن القدرة الإنجابية.
لتحديد أهمية اندماج الخصية Spodoptera litura ، من المهم التحقيق في آثار منع العملية. في هذا البروتوكول ، تم إدخال رقائق الألومنيوم بشكل مجهري بين الخصيتين لإبقائهما منفصلين ، وتمت دراسة التغيرات الناتجة في تطور الحشرات والخصيتين.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>75% Rubbing alcohol</td>
			<td>Qingdao Hainuo Nuowei Disinfection Technology Co., Ltd</td>
			<td>Q/370285HNW 001-2019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Colored Push Pins</td>
			<td>Deli Group Co.,LTD</td>
			<td>0042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corneal Scissors</td>
			<td>Suzhou Xiehe Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>MR-S221A</td>
			<td>Curved and blunt tip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glad Aluminum Foil</td>
			<td>Clorox China(Guangzhou) Limited</td>
			<td>831457</td>
			<td>10 cm*2.5 cm*0.6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Cotton Swabs (Sterile)</td>
			<td>Winner Medical Co., Ltd.</td>
			<td>601-022921-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Iodine Cotton Swab</td>
			<td>Winner Medical Co., Ltd.</td>
			<td>608-000247</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td>
			<td>J32030</td>
			<td>14 cm fine needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile surgical blade</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., LTD</td>
			<td>#11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suigical Blade Holder</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., LTD</td>
			<td>K6-10</td>
			<td>Straight 3#</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture thread with needle</td>
			<td>Ningbo Medical Stitch Needle Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>needle: 3/8 Circle, 2.5*8 ; Thread: Nylon, 6/0, 25 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tying Forceps</td>
			<td>Suzhou Xiehe Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>MR-F201T-3</td>
			<td>Straight-pointed; long handle; 0.12 mm-wide-head</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microsurgical obstruction of testes fusion in spodoptera litura

بدلا من استخدام الطرق الجينية مثل تداخل الحمض النووي الريبي (RNAi) وتكرار الباليندروميك القصير المتجمع بانتظام (CRISPR) / endonuclease Cas9 المرتبط بكريسبر ، تم إدخال حاجز مادي جراحيا مجهريا بين خصيتي Spodoptera litura لدراسة تأثير هذه الجراحة المجهرية على نموها وتكاثرها. بعد إدخال رقائق الألومنيوم بين الخصيتين ، استمر طرح الحشرات أثناء التحول بشكل طبيعي. لم يتغير نمو الحشرات وتطورها بشكل ملحوظ. ومع ذلك ، تغير عدد حزم الحيوانات المنوية إذا تم إيقاف اندماج الخصيتين عن طريق الجراحة المجهرية. تشير هذه النتائج إلى أن منع اندماج الخصية يمكن أن يؤثر على قدرة الذكور على الإنجاب. يمكن تطبيق هذه الطريقة بشكل أكبر لمقاطعة الاتصال بين الأعضاء لدراسة وظيفة مسارات إشارات محددة. بالمقارنة مع الجراحة التقليدية ، تتطلب الجراحة المجهرية فقط تخديرا مجمدا ، وهو أفضل من تخدير ثاني أكسيد الكربون. تقلل الجراحة المجهرية أيضا من منطقة موقع الجراحة وتسهل التئام الجروح. ومع ذلك ، فإن اختيار المواد ذات الوظائف المحددة يحتاج إلى مزيد من التحقيق. تجنب إصابة الأنسجة أمر بالغ الأهمية عند إجراء شقوق أثناء العملية.

آثار الجراحة المجهرية على نمو وتطور Spodoptera litura تركت الجراحة المجهرية جرحا طوله 2 مم على بشرة اليرقات الظهرية التي توقفت في النهاية عن تسرب الهيموليمف والتئمت. مرت اليرقات بمراحل ما قبل العذراء والعذراء وأغلقت ، مما يشير إلى أن الجراحة المجهرية لم يكن لها ?...

Watch this Scientific Journal Video about Microsurgical Obstruction of Testes Fusion in Spodoptera litura at JoVE.com

Microsurgical Obstruction of Testes Fusion in Spodoptera litura

تم إدخال رقائق الألومنيوم جراحيا بين خصيتي Spodoptera litura لعرقلة اندماج الخصية. يتضمن الإجراء التجميد والتثبيت والتطهير والشق ووضع الحاجز والخياطة والتغذية بعد العملية الجراحية والتفتيش. يوفر هذا النهج طريقة للتداخل مع تكوين الأنسجة.

انسداد الجراحة المجهرية لاندماج الخصيتين في Spodoptera litura

Instead of using genetic methods like RNA interference (RNAi) and clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)/CRISPR-associated ...

يقترح هذا البروتوكول أنه يمكن اعتماد طريقة فيزيائية للمساعدة في اكتشاف المشاكل البيولوجية. توفر هذه التقنية طريقة لوضع المواد في الحشرات مع الحد الأدنى من الشق ودراسة تأثير الجراحة المجهرية على نمو الأفراد. يمكن أن تنطبق هذه الطريقة على يرقات Lepidoptera الأخرى وأجزاء أخرى من الحشرات ، بما في ذلك الرأس والصدر.من المهم جدا ممارسة إجراء شقوق في مواد معينة وخياطة بمهارة. ابدأ بوضع يرقات الذكور Spodoptera litura في اليوم 4 من النجم السادس ، أو L6D4 ، على الجليد لمدة 10 إلى 30 دقيقة لإبقائها مخدرة أثناء العملية. ضع اليرقة المخدرة على صينية الشمع مع الجانب الظهري لأعلى.إصلاح رأس وذيل اليرقة مع دبابيس وخيوط وتطهير المنطقة الجراحية عن طريق تطبيق صبغة اليود 3 ٪ مع مسحة القطن على البشرة ، تليها 70 ٪ الكحول. قم بعمل شق بطول 2 ملليمتر على البشرة الظهرية في الجزء التاسع من الجسم واستخدم قطعة قطن معقمة لإزالة الأجسام الليمفاوية والدهون المتسربة للحصول على رؤية واضحة للمنطقة الجراحية. باستخدام ملاقط جراحية ، أدخل قطعة من رقائق الألومنيوم بين الخصيتين ، ثم أغلق البشرة بخياطة جارية.اربط عقدة مربعة جراحية بمساعدة حامل إبرة وملاقط جراحية. قطع خياطة زائدة من ذيول حلقة مع مقص ، وترك خيط 2 ملم وراءها. بعد الخياطة ، ضع اليرقة بلطف في صندوق التربية واحتفظ بها في غرفة محاكاة بيئية نظيفة مع مراقبة مستمرة.تم رصد نمو وتطور يرقات الذكور Spodoptera litura بعد الجراحة المجهرية. كان معدل وفيات اليرقات أعلى قليلا في المجموعة الجراحية ، في حين أن النسب المئوية للجرو ، وظهور البالغين ، والتزاوج الناجح كانت أقل قليلا في المجموعة الجراحية منها في المجموعة الضابطة. في المجموعة التجريبية ، كان عدد حزم الحيوانات المنوية الإجمالية في حزم الحيوانات المنوية من اليوبيرين والأبيرين أقل بكثير من المجموعة الضابطة والوهمية.من ناحية أخرى ، لم يكن للنسب المئوية لحزم الحيوانات المنوية اليوبيرين اختلافات كبيرة بين المجموعات الثلاث. بعد إزالة الخصية من جانب واحد من اليرقات ، كانت أعداد حزم الحيوانات المنوية الكلية وحزم الحيوانات المنوية اليوبيرين والأبيرين في مجموعات الجراحة المجهرية أقل بكثير من المجموعة الضابطة. كانت النسبة المئوية لحزم الحيوانات المنوية اليوبيرين في اليوم السادس من مرحلة العذراء قابلة للمقارنة في جميع المجموعات الثلاث.من المهم جدا ملاحظة موقع الجرح وتجنب إتلاف الأعضاء الأخرى أثناء الشق. يمكن استخدام هذه التقنية لدراسة الأهمية البيولوجية لاندماج الخصية عن طريق تطبيق الأدوية على الأعضاء. يمكن استكشاف تأثير الأدوية على العضو المستهدف.

Research

JoVE Journal

Biology

Microsurgical Obstruction of Testes Fusion in Spodoptera litura

Microsurgical Clip Obliteration of Middle Cerebral Aneurysm Using Intraoperative Flow Assessment

المجهرية طمس كليب من تمدد الأوعية الدموية الدماغية الأوسط عن طريق جراحة داخلية تقييم التدفق

Cerebral aneurysms are abnormal widening or ballooning of a localized segment of an intracranial blood vessel.  Surgical clipping is an important ...

Anterior Cervical Discectomy and Fusion in the Ovine Model

استئصال القرص العنقي الأمامي والانصهار في نموذج الأغنام

Anterior cervical discectomy and fusion (ACDF) is the most common surgical operation for cervical radiculopathy and/or myelopathy in patients who have ...

Isolation of Drosophila melanogaster Testes

Isolation of Drosophila melanogaster Testes

عزلة ذبابة الفاكهة السوداء البطن الخصيات

The testes of Drosophila melanogaster provide an important model for the study of stem cell maintenance and differentiation, meiosis, and soma-germline ...

Analysis of SNARE-mediated Membrane Fusion Using an Enzymatic Cell Fusion Assay

تحليل الانصهار الغشاء بوساطة كمين باستخدام الانصهار خلية الفحص الانزيمي

The interactions of SNARE (soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptor)  proteins on vesicles (v-SNAREs) and on target membranes ...

Identification of Metabolically Active Bacteria in the Gut of the Generalist Spodoptera littoralis via DNA Stable Isotope Probing Using 13C-Glucose

Identification of Metabolically Active Bacteria in the Gut of the Generalist Spodoptera littoralis via DNA Stable Isotope Probing Using 13C-Glucose

تحديد البكتيريا عملية الأيض نشطة في الوتر من اختصاصي<em&gt; ورق القطن littoralis</em&gt; عن طريق الحمض النووي النظائر مستقرة جس طريق<sup&gt; 13</sup&gt; C-الجلوكوز

Guts of most insects are inhabited by complex communities of symbiotic nonpathogenic bacteria. Within such microbial communities it is possible to ...

Imaging Centrosomes in Fly Testes

Centrosomes التصوير في يطير الخصية

Centrosomes are conserved microtubule-based organelles whose structure and function change dramatically throughout the cell cycle and cell ...

Cytological Analysis of Spermatogenesis: Live and Fixed Preparations of Drosophila Testes

Cytological Analysis of Spermatogenesis: Live and Fixed Preparations of Drosophila Testes

تحليل الخلوي الحيوانات المنوية: الأعمال التحضيرية لايف والثابتة من<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; الخصية

Drosophila melanogaster is a powerful model system that has been widely used to elucidate a variety of biological processes. For example, studies of both ...

Cryopreservation of Zebrafish Spermatogonia by Whole Testes Needle Immersed Ultra-Rapid Cooling

للواسمات Spermatogonia الزرد بأكملها الخصيتين إبرة مغمورة تبريد فائقة السرعة

Current trends in science and biotechnology lead to creation of thousands of new lines in model organisms thereby leading to the necessity for new methods ...

Assessing Urinary Tract Junction Obstruction Defects by Methylene Blue Dye Injection

تقييم العيوب عرقلة مفرق المسالك البولية عن طريق حقن صبغة أزرق الميثيلين

Urinary tract junction obstruction defects are congenital anomalies inducing hydronephrosis and hydroureter. Murine urinary tract junction obstruction ...

A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction

نموذج الفأر من انسداد الأمعاء الجزئي

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including ...