Name: microsurgical obstruction of testes fusion in spodoptera litura
Uploaded: 2021-07-16T13:00:00
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이 연구는 중국 국립 자연 과학 재단 (Nos.:31772519, 31720103916; )과 사우스 웨스트 대학 실크웜 게놈 생물학의 국가 핵심 연구소 (No.: sklsgb2013003)의 공개 보조금에 의해 지원되었습니다.

1. 곤충 사육 및 유지 보수
<ol><li>Spodoptera litura 유충을 6th instar (L6D4)의 4 일째에 도달 할 때까지 인공 식단으로 환경 시뮬레이션 챔버에서 배양하십시오. 벌레가 여덟 번째 복부의 역 삼각형 모양의 구조를 기반으로 6 번째 instar (L6D0)의 첫날에 들어갈 때 수컷 유충을 선택하십시오14. 참고 : 유충 사육 및 유지 보수 기술은 이전에 출판되었습니다<sup class="x...

<ol>
	<li>Zeitlinger, J., Bohmann, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thorax+closure+in+Drosophila:+involvement+of+Fos+and+the+JNK+pathway.">Thorax closure in Drosophila: involvement of Fos and the JNK pathway.</a> Development. 126 (17), 3947-3956 (1999).</li><li>Ray, H. J., Niswander, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+tissue+fusion+during+development.">Mechanisms of tissue fusion during development.</a> Development. 139 (10), 1701-1711 (2012).</li><li>Ducuing, A., Keeley, C., Mollereau, B., Vincent, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DPP-mediated+feed-forward+loop+canalizes+morphogenesis+during+Drosophila+dorsal+closure.">DPP-mediated feed-forward loop canalizes morphogenesis during Drosophila dorsal closure.</a> The Journal of Cell Biology. 208 (2), 239-248 (2015).</li><li>Du, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+functional+characterization+of+doublesex+gene+in+the+testis+of+Spodoptera+litura.">Identification and functional characterization of doublesex gene in the testis of Spodoptera litura.</a> Insect Science. 26 (6), 1000-1010 (2019).</li><li>Qin, H. G., Ding, J., Ye, Z. X., Huang, S. J., Luo, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+analysis+of+experimental+population+of+Spodoptera+litura.">Dynamic analysis of experimental population of Spodoptera litura.</a> Journal of Biosafety. 13 (2), 45-48 (2004).</li><li>Guan, B. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+research+in+biology+and+ecology+of+Spodoptera+litura.">The research in biology and ecology of Spodoptera litura.</a> Journal of Biosafety. 8 (1), 57-61 (1999).</li><li>Wen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+testis+development+and+spermatogenesis+in+Spodopture+litura+(lepidoptera:+noctuidae).">The testis development and spermatogenesis in Spodopture litura (lepidoptera: noctuidae).</a> Journal of South China Normal University (Natural Science Edition. 51 (4), 47-56 (2019).</li><li>Friedl&#228;nder, M., Seth, R. K., Reynolds, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eupyrene+and+apyrene+sperm:+dichotomous+spermatogenesis+in+Lepidoptera.">Eupyrene and apyrene sperm: dichotomous spermatogenesis in Lepidoptera.</a> Advances in Insect Physiology. 32, 206 (2010).</li><li>Cook, P. A., Wedell, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-fertile+sperm+delay+female+remating.">Non-fertile sperm delay female remating.</a> Nature. 397 (6719), 486 (1999).</li><li>Iriki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+function+of+apyrene+spermatozoa+in+the+silk+worm.">On the function of apyrene spermatozoa in the silk worm.</a> Zoological Magazine. 53, 123-124 (1941).</li><li>Liu, L., Feng, Q. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+study+of+fusion+of+testis+in+Lepidoptera+insects.">The study of fusion of testis in Lepidoptera insects.</a> Journal of South China Normal University (Natural Science Edition). 46 (5), 1-7 (2014).</li><li>Klowden, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Physiological systems in insects. , (2007).</li><li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+characterization+of+two+testis-specific+promoters+in+the+silkworm,+Bombyx+mori.">Transgenic characterization of two testis-specific promoters in the silkworm, Bombyx mori.</a> Insect Molecular Biology. 24 (2), 183-190 (2015).</li><li>Guo, X. R., Zheng, S. C., Liu, L., Feng, Q. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sterol+carrier+protein+2/3-oxoacyl-CoA+thiolase+(SCPx)+is+involved+in+cholesterol+uptake+in+the+midgut+of+Spodoptera+litura:+gene+cloning,+expression,+localization+and+functional+analyses.">The sterol carrier protein 2/3-oxoacyl-CoA thiolase (SCPx) is involved in cholesterol uptake in the midgut of Spodoptera litura: gene cloning, expression, localization and functional analyses.</a> BioMed Central Molecular Biology. 10, 102 (2009).</li><li>Kope&#263;, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+the+necessity+of+the+brain+for+the+inception+of+insect+metamorphosis.">Studies on the necessity of the brain for the inception of insect metamorphosis.</a> Biological Bulletin. 42 (6), 323-342 (1922).</li><li>Wigglesworth, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+controlling+moulting+and+'metamorphosis'+in+an+insect.">Factors controlling moulting and 'metamorphosis' in an insect.</a> Nature. 133 (5), 725-726 (1934).</li><li>Williams, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiology+of+insect+diapause;+the+role+of+the+brain+in+the+production+and+termination+of+pupal+dormancy+in+the+giant+silkworm,+Platysamia+cecropia.">Physiology of insect diapause; the role of the brain in the production and termination of pupal dormancy in the giant silkworm, Platysamia cecropia.</a> Biological Bulletin. 90 (3), 234-243 (1946).</li><li>Fukuda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hormonal+control+of+molting+and+pupation+in+the+silkworm.">Hormonal control of molting and pupation in the silkworm.</a> Proceedings of the Imperial Academy Tokyo. 16 (8), 417-420 (1940).</li><li>Tian, H. J., Liu, Z. P., Bai, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Common+methods+to+detect+Sperm+quality+of+mammalian.">Common methods to detect Sperm quality of mammalian.</a> Journal of Economic Zoology. 8 (4), 198-201 (2004).</li><li>Ji, X. S., Chen, S. L., Zhao, Y., Tian, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+the+quality+evaluation+of+fish+sperm.">Progress in the quality evaluation of fish sperm.</a> Chinese Fishery Science. 14 (6), 1048-1054 (2007).</li><li>Baulny, B. O. D., Vern, Y. L., Kerboeuf, D., Maisse, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+evaluation+of+mitochondrial+activity+and+membrane+integrity+in+fresh+and+cryopreserved+rainbow+trout+(Oncorhynchus+mykiss)+spermatozoa.">Flow cytometric evaluation of mitochondrial activity and membrane integrity in fresh and cryopreserved rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) spermatozoa.</a> Cryobiology. 34 (2), 141-149 (1997).</li><li>Krasznai, Z., M&#225;ri&#225;n, T., Balkay, I., Emri, M., Tr&#243;n, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permeabilization+and+structural+changes+in+the+membrane+of+common+carp+(Cyprinus+carpio+L.)+sperm+induced+by+hypo-osmotic+shock.">Permeabilization and structural changes in the membrane of common carp (Cyprinus carpio L.) sperm induced by hypo-osmotic shock.</a> Aquaculture. 129 (1), 134 (1995).</li><li>Kime, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computer-assisted+sperm+analysis+(CASA)+as+a+tool+for+monitoring+sperm+quality+in+fish.">Computer-assisted sperm analysis (CASA) as a tool for monitoring sperm quality in fish.</a> Comparative Biochemistry &amp; Physiology Toxicology &amp; Pharmacology Cbp. 130 (4), 425-433 (2001).</li><li>Rurangwa, E., Volckaert, F. A., Huyskens, G., Kime, D. E., Ollevier, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+control+of+refrigerated+and+cryopreserved+semen+using+computer-assisted+sperm+analysis+(CASA),+viable+staining+and+standardized+fertilization+in+African+catfish+(Clarias+gariepinus).">Quality control of refrigerated and cryopreserved semen using computer-assisted sperm analysis (CASA), viable staining and standardized fertilization in African catfish (Clarias gariepinus).</a> Theriogenology. 55 (3), 751-769 (2001).</li><li>Seth, R. K., Kaur, J. J., Rao, D. K., Reynolds, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+larval+exposure+to+sublethal+concentrations+of+the+ecdysteroid+agonists+RH-5849+and+tebufenozide+(RH-5992)+on+male+reproductive+physiology+in+Spodoptera+litura.">Effects of larval exposure to sublethal concentrations of the ecdysteroid agonists RH-5849 and tebufenozide (RH-5992) on male reproductive physiology in Spodoptera litura.</a> Journal of Insect Physiology. 50 (6), 505-517 (2004).</li><li>Sweeney, R. M., Watterson, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rib+development+in+chick+embryos+analyzed+by+means+of+tantalum+foil+blocks.">Rib development in chick embryos analyzed by means of tantalum foil blocks.</a> American Journal of Anatomy. 126 (2), 127-149 (1969).</li><li>Wilde, S., Logan, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+impermeable+barriers+combined+with+candidate+factor+soaked+beads+to+study+inductive+signals+in+the+chick.">Application of impermeable barriers combined with candidate factor soaked beads to study inductive signals in the chick.</a> Journal of Visualized Experiments. (117), e54618 (2016).</li></ol>

Spodoptera litura에서 미세 외과 적으로 고환 융합을 방해 한 후, 정자 다발의 수가 감소하여이 융합이 생식 능력에 도움이된다는 가설을지지했습니다. 외과 적 조작은 20 세기 초부터 곤충의 생리 학적 발달을 연구하는 데 사용되어 왔습니다. 두개골 신경이 곤충 변형에 의해 조절되는지 여부를 결정하기 위해 일부 연구자들은 다른 곤충 (Hemiptera의 Rhodnius prolixus, Lepidoptera의 Lym...

융합은 조직 또는 장기 발달에서 흔히 발생하는 현상입니다. 그 예로는 Drosophila1에서의 등쪽 폐쇄 및 흉부 폐쇄 및 구개골 형태형성, 신경관 형태형성, 및 마우스 및 닭에서의 심장 형태형성2이 포함된다. CRISPR 및 RNAi는 융합 과정에서 유전자의 역할을 조사하기 위해 적용되었습니다2,3,4.
Spodoptera litura (S. litura, Lepidoptera : Noctuidae)는 중국을 포함한 아시아의 열대 및 아열대 지역에 널리 분포하는 해로운 다식성 해충입니다4,5,6. S. litura의 광범위한 분포는 부분적으로 생식선 발달과 관련된 강력한 생식 능력에 기인합니다. 남성 불임은이 해충을 방제하는 한 가지 접근법입니다. 고환 구조의 개략적인 그림에서 볼 수 있듯이, 고환은 외부 외피 (복막 외피) 및 내부 기저 라미나를 포함한 고환 외피에 의해 둘러싸여 있습니다. 기저 라미나는 내부적으로 확장되어 여포 상피를 형성하고 고환의 내부 영역을 여포라는 네 개의 챔버로 분리합니다 (그림 1).
여포에서 정자는 유사분열과 meiosis 후에 정자로 발전하고, 정자 주머니의 정자는 같은 방향으로 정렬되어 정자 다발을 형성합니다7. 정자 생성 동안, 일차 정자 세포는 유피렌 정자 또는 아피렌 정자로 분화됩니다. 유충 단계의 정자 세포는 길쭉한 핵의 머리에 연결된 긴 꼬리를 가진 유피렌 정자로 발전합니다. 이들은 알을 비옥하게 할 수 있습니다. 반대로, 번데기 중반 단계의 정자 세포는 버려진 핵을 가진 아피렌 정자로 발전합니다. 이 정자는 유피렌 정자의 생존, 운동 및 수정을 돕습니다9,10. 번데기의 6 일째 날은 고환이 풍부한 유피렌과 아피렌 정자 번들을 가지고있는 기간입니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62524/62524fig01.jpg"> 그림 1 : Lepidoptera 곤충의 고환 구조의 개략도11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62524/62524fig01large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
고환 융합은 Lepidoptera 순서의 대부분의 곤충에서11,12, 특히 농업 해충 인 종에서 발생합니다. 고환 융합은 애벌레 단계에서 양측으로 자라는 한 쌍의 고환을 말하며, 서로 접근하고 고수하여 결국 단일 생식선으로 통합됩니다 11. Spodoptera litura에서는 애벌레에서 번데기 단계로 변태하는 동안 발생합니다. 5번째 인스타(L5D1)의 1일째부터 6번째 인스타(L6D4)의 4일째까지, 한 쌍의 고환은 점차 크기가 커지고, 색은 아이보리 화이트에서 연한 노란색으로 변합니다. 그것은 준비 단계 (L6D5 내지 L6D6)에 도달함에 따라 희미한 적색이된다. 두 개의 양측 대칭 고환이 준비 단계에서 서로 접근하고, 하나로 융합되고, 시계 반대 방향 (doral view)을 비틀어 번데기와 성인 단계에서 단일 고환을 생성합니다11. 이 현상은 상당한 경제적 중요성을 가지고 있으며 5000 년 동안 길들여진 누에에서는 발생하지 않습니다.13. 따라서 고환의 융합이 생식 능력을 향상시킨다고 가정합니다.
Spodoptera litura 고환 융합의 중요성을 결정하기 위해서는 과정을 막는 효과를 조사하는 것이 중요합니다. 이 프로토콜에서 알루미늄 호일은 고환 사이에 미세 외과 적으로 삽입되어 분리되도록 유지했으며 곤충과 고환의 발달에 따른 변화가 연구되었습니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>75% Rubbing alcohol</td>
			<td>Qingdao Hainuo Nuowei Disinfection Technology Co., Ltd</td>
			<td>Q/370285HNW 001-2019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Colored Push Pins</td>
			<td>Deli Group Co.,LTD</td>
			<td>0042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corneal Scissors</td>
			<td>Suzhou Xiehe Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>MR-S221A</td>
			<td>Curved and blunt tip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glad Aluminum Foil</td>
			<td>Clorox China(Guangzhou) Limited</td>
			<td>831457</td>
			<td>10 cm*2.5 cm*0.6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Cotton Swabs (Sterile)</td>
			<td>Winner Medical Co., Ltd.</td>
			<td>601-022921-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Iodine Cotton Swab</td>
			<td>Winner Medical Co., Ltd.</td>
			<td>608-000247</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td>
			<td>J32030</td>
			<td>14 cm fine needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile surgical blade</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., LTD</td>
			<td>#11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suigical Blade Holder</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., LTD</td>
			<td>K6-10</td>
			<td>Straight 3#</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture thread with needle</td>
			<td>Ningbo Medical Stitch Needle Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>needle: 3/8 Circle, 2.5*8 ; Thread: Nylon, 6/0, 25 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tying Forceps</td>
			<td>Suzhou Xiehe Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>MR-F201T-3</td>
			<td>Straight-pointed; long handle; 0.12 mm-wide-head</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microsurgical obstruction of testes fusion in spodoptera litura

RNA 간섭 (RNAi)과 같은 유전 적 방법을 사용하고 정기적으로 간격이 짧은 구두체 반복 (CRISPR) / CRISPR 관련 엔도뉴클레아제 Cas9와 같은 유전 적 방법을 사용하는 대신, 물리적 장벽이 Spodoptera litura 의 고환 사이에 미세 외과 적으로 삽입되어이 미세 수술이 성장과 번식에 미치는 영향을 연구했습니다. 고환 사이에 알루미늄 호일을 삽입 한 후, 변태 중 곤충 털갈이가 정상적으로 진행되었습니다. 곤충의 성장과 발달은 현저하게 변화되지 않았다. 그러나 고환 융합이 미세 수술에 의해 중단되면 정자 다발의 수가 변경되었습니다. 이러한 발견은 고환 융합을 차단하는 것이 남성 생식 능력에 영향을 줄 수 있음을 의미합니다. 이 방법은 특정 신호 전달 경로의 기능을 연구하기 위해 기관 간의 통신을 중단하는 데 더 적용될 수 있습니다. 기존의 수술에 비해, 미세수술은 동결마취만을 필요로 하며, 이는 이산화탄소 마취보다 바람직하다. 미세 수술은 또한 수술 부위 영역을 최소화하고 상처 치유를 용이하게합니다. 그러나 특정 기능을 가진 재료를 선택하려면 추가 조사가 필요합니다. 수술 중 절개를 할 때 조직 손상을 피하는 것이 중요합니다.

Spodoptera litura 성장 및 발달에 대한 미세 수술의 효과 미세 수술은 등쪽 유충 표피에 2mm 길이의 상처를 남겼고 결국 용혈림프가 새는 것을 멈추고 치유되었습니다. 유충은 준비 및 번데기 단계를 거쳐 폐쇄 된 것으로, 미세 수술이 성장과 발달에 큰 영향을 미치지 않았 음을 나타냅니다. 유충이 번데기로 털갈이했을 때, 봉합사 실은 표피와 함께 버려?...

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Microsurgical Obstruction of Testes Fusion in Spodoptera litura

알루미늄 호일은 고환의 융합을 방해하기 위해 Spodoptera litura 의 고환 사이에 미세 외과 적으로 삽입되었습니다. 절차에는 동결, 고정, 소독, 절개, 장벽 배치, 봉합, 수술 후 수유 및 검사가 포함됩니다. 이러한 접근법은 조직 형성을 방해하는 방법을 제공한다.

Spodoptera litura에서 Testes Fusion의 미세 외과 적 폐색

Instead of using genetic methods like RNA interference (RNAi) and clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)/CRISPR-associated ...

이 프로토콜은 생물학적 문제를 파악하는 데 도움이되는 물리적 방법을 채택 할 수 있음을 시사합니다. 이 기술은 최소한의 절개로 곤충에 물질을 배치하고 미세 수술이 개인의 발달에 미치는 영향을 연구하는 방법을 제공합니다. 이 방법은 다른 Lepidoptera 유충과 머리와 흉부를 포함한 곤충의 다른 부분에 적용 할 수 있습니다.특정 재료에 절개를 만들고 능숙하게 봉합하는 연습을하는 것이 매우 중요합니다. Spodoptera litura 수컷 유충을 6 번째 instar 또는 L6D4의 4 일째에 얼음 위에 10 ~ 30 분 동안 올려 놓고 수술 중에 마취 상태로 유지하십시오. 마취 된 유충을 등쪽 쪽을 위로 향하게하여 왁스 트레이에 놓습니다.유충의 머리와 꼬리를 핀과 실로 고정시키고 표피에 면봉으로 3 % 요오드 팅크를 바르고 70 % 알코올을 사용하여 수술 부위를 소독하십시오. 9 번째 신체 부위의 등쪽 표피를 2 밀리미터 길이로 절개하고 멸균 된 면봉을 사용하여 누출 된 용혈림프와 지방체를 제거하여 수술 부위를 명확하게 볼 수 있습니다. 외과 용 핀셋을 사용하여 고환 사이에 알루미늄 호일 조각을 삽입 한 다음 실행 봉합사로 표피를 닫습니다.바늘 홀더와 수술 핀셋의 도움으로 외과 사각형 매듭을 묶으십시오. 가위로 루프 꼬리에서 과도한 봉합사를 자르고 2 밀리미터 실을 남겨 둡니다. 봉합 후, 유충을 사육 상자에 부드럽게 놓고 지속적인 관찰을 통해 깨끗한 환경 시뮬레이션 챔버에 유지하십시오.미세 수술 후 Spodoptera litura 수컷 유충의 성장 및 발달을 모니터링하였다. 유충 사망률은 수술 그룹에서 약간 높았던 반면, 번데기, 성인 출현 및 성공적인 짝짓기의 비율은 대조군보다 수술 그룹에서 약간 낮았다. 실험군에서, 유피렌 및 아피렌 정자 다발의 총 정자 다발의 수는 대조군 및 가짜 대조군보다 현저히 낮았다.반면에, 유피렌 정자 다발의 비율은 세 그룹 모두에서 유의한 차이가 없었다. 유충의 일방적 고환을 제거한 후, 미세 수술군의 총 정자 다발과 유피렌 및 아피렌 정자 다발의 수는 대조군보다 현저히 낮았다. 번데기 단계의 여섯째 날에 유피렌 정자 다발의 비율은 세 그룹 모두에서 비교되었습니다.상처의 위치를 알아 차리고 절개 중에 다른 장기를 손상시키지 않는 것이 매우 중요합니다. 이 기술은 장기에 약물을 적용하여 고환 융합의 생물학적 중요성을 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 표적 장기에 대한 약물의 효과를 탐구 할 수 있습니다.

Research

JoVE Journal

Biology

Microsurgical Obstruction of Testes Fusion in Spodoptera litura

Microsurgical Clip Obliteration of Middle Cerebral Aneurysm Using Intraoperative Flow Assessment

Intraoperative 흐름 평가를 사용하여 중간 뇌동맥류야의 Microsurgical 클립 말살

Cerebral aneurysms are abnormal widening or ballooning of a localized segment of an intracranial blood vessel.  Surgical clipping is an important ...

연구

생물학

Anterior Cervical Discectomy and Fusion in the Ovine Model

양의 모델의 앞쪽에 자궁암 Discectomy와 퓨전

Anterior cervical discectomy and fusion (ACDF) is the most common surgical operation for cervical radiculopathy and/or myelopathy in patients who have ...

Isolation of Drosophila melanogaster Testes

Isolation of Drosophila melanogaster Testes

의 분리 Drosophila melanogaster Testes

The testes of Drosophila melanogaster provide an important model for the study of stem cell maintenance and differentiation, meiosis, and soma-germline ...

Analysis of SNARE-mediated Membrane Fusion Using an Enzymatic Cell Fusion Assay

효소 세포 융합 분석을 사용하여 올가미로 인한 막 퓨전 분석

The interactions of SNARE (soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptor)  proteins on vesicles (v-SNAREs) and on target membranes ...

Identification of Metabolically Active Bacteria in the Gut of the Generalist Spodoptera littoralis via DNA Stable Isotope Probing Using 13C-Glucose

Identification of Metabolically Active Bacteria in the Gut of the Generalist Spodoptera littoralis via DNA Stable Isotope Probing Using 13C-Glucose

제너럴의 장내 대사 활성 박테리아의 식별<em&gt; 스포 도프 테라 리토 랄</em&gt; DNA 안정 동위 원소를 통해 사용 프로빙<sup&gt; 13</sup&gt; C-포도당

Guts of most insects are inhabited by complex communities of symbiotic nonpathogenic bacteria. Within such microbial communities it is possible to ...

Imaging Centrosomes in Fly Testes

비행 고환에있는 영상 중심체

Centrosomes are conserved microtubule-based organelles whose structure and function change dramatically throughout the cell cycle and cell ...

Cytological Analysis of Spermatogenesis: Live and Fixed Preparations of Drosophila Testes

Cytological Analysis of Spermatogenesis: Live and Fixed Preparations of Drosophila Testes

정자의 세포 학적 분석 : 라이브와 고정 준비<em&gt; 초파리</em&gt; 고환

Drosophila melanogaster is a powerful model system that has been widely used to elucidate a variety of biological processes. For example, studies of both ...

Cryopreservation of Zebrafish Spermatogonia by Whole Testes Needle Immersed Ultra-Rapid Cooling

Zebrafish Spermatogonia 전체 Testes 바늘의 cryopreservation 몰입 울트라-빠른 냉각

Current trends in science and biotechnology lead to creation of thousands of new lines in model organisms thereby leading to the necessity for new methods ...

Assessing Urinary Tract Junction Obstruction Defects by Methylene Blue Dye Injection

Methylene 청색 색소를 주입 하 여 요로 분기점 방해 결함 평가

Urinary tract junction obstruction defects are congenital anomalies inducing hydronephrosis and hydroureter. Murine urinary tract junction obstruction ...

A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction

장 부분 방해의 마우스 모델

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including ...