Name: modeling stroke in mice: focal cortical lesions by photothrombosis
Uploaded: 2021-05-06T14:00:00
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우리는 제안과 토론을 위한 면역 스트로크 컨소시엄 (FOR 2879, 치기 복구에 면역 세포에서)의 우리의 모든 협력 파트너에게 감사드립니다. 이 작품은 독일 시스템 신경학을 위한 뮌헨 클러스터(EXC 2145 SyNergy - ID 390857198)의 틀 내에서 독일의 우수 전략에 따라 도이치 포르스충스게마인샤프트(DFG, 독일 연구 재단)와 LI-2534/6-1, LI-2534/7-1 및 LL-112-122/1의 보조금하에 지원되었다.

이 비디오에서 보고된 실험은 실험 동물의 사용에 대한 국가 지침에 따라 수행되었으며, 의정서는 독일 정부 위원회(독일 뮌헨 의 레지에룽 폰 오버바이엔)에 의해 승인되었다. 이 연구에서 사용된 마우스는 남성 C57Bl/6J 마우스, 10-12주 된, 찰스 강 독일에 의해 파견되었다. 동물은 12h 빛-어두운 주기 기간과 펠릿 식품 및 물 광고 리비툼에 대한 액세스와 함께 제어 온도 (22 ° C ± 2 °C)에서 보?...

<ol>
	<li>GBD 2016 Causes of Death Collaborators. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global,+regional,+and+national+age-sex+specific+mortality+for+264+causes+of+death,+1980-2016:+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2016.">Global, regional, and national age-sex specific mortality for 264 causes of death, 1980-2016: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2016.</a> Lancet. 390 (10100), 1151-1210 (2017).</li><li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+stroke:+size,+mechanism,+and+purpose.">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx: The Journal of the American Society for Experimental Neuro Therapeutics. 2 (3), 396-409 (2005).</li><li>Rosenblum, W. I., El-Sabban, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+aggregation+in+the+cerebral+microcirculation:+effect+of+aspirin+and+other+agents.">Platelet aggregation in the cerebral microcirculation: effect of aspirin and other agents.</a> Circulation Research. 40 (3), 320-328 (1977).</li><li>Watson, B. D., Dietrich, W. D., Busto, R., Wachtel, M. S., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+reproducible+brain+infarction+by+photochemically+initiated+thrombosis.">Induction of reproducible brain infarction by photochemically initiated thrombosis.</a> Annals of Neurology. 17 (5), 497-504 (1985).</li><li>Bergeron, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducing+photochemical+cortical+lesions+in+rat+brain.">Inducing photochemical cortical lesions in rat brain.</a> Current Protocols in Neuroscience. , (2003).</li><li>Lee, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+induced+cerebral+ischemia+in+a+mouse+model.">Photochemically induced cerebral ischemia in a mouse model.</a> Surgical Neurology. 67 (6), 620-625 (2007).</li><li>Dietrich, W. D., Watson, B. D., Busto, R., Ginsberg, M. D., Bethea, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+induced+cerebral+infarction.+I.+Early+microvascular+alterations.">Photochemically induced cerebral infarction. I. Early microvascular alterations.</a> Acta Neuropathologica. 72 (4), 315-325 (1987).</li><li>Labat-gest, V., Tomasi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photothrombotic+ischemia:+a+minimally+invasive+and+reproducible+photochemical+cortical+lesion+model+for+mouse+stroke+studies.">Photothrombotic ischemia: a minimally invasive and reproducible photochemical cortical lesion model for mouse stroke studies.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (76), e50370 (2013).</li><li>McNutt, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Journals+unite+for+reproducibility.">Journals unite for reproducibility.</a> Science. 346 (6210), 679 (2014).</li><li>Llovera, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Results+of+a+preclinical+randomized+controlled+multicenter+trial+(pRCT):+Anti-CD49d+treatment+for+acute+brain+ischemia.">Results of a preclinical randomized controlled multicenter trial (pRCT): Anti-CD49d treatment for acute brain ischemia.</a> Science Translational Medicine. 7 (299), (2015).</li><li>Dirnagl, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+concerted+appeal+for+international+cooperation+in+preclinical+stroke+research.">A concerted appeal for international cooperation in preclinical stroke research.</a> Stroke. 44 (6), 1754-1760 (2013).</li><li>Bath, P. M., Macleod, M. R., Green, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emulating+multicentre+clinical+stroke+trials:+a+new+paradigm+for+studying+novel+interventions+in+experimental+models+of+stroke.">Emulating multicentre clinical stroke trials: a new paradigm for studying novel interventions in experimental models of stroke.</a> International Journal of Stroke: Official Journal of the INternational Stroke Society. 4 (6), 471-479 (2009).</li><li>Kilkenny, C., Browne, W. J., Cuthill, I. C., Emerson, M., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+bioscience+research+reporting:+The+ARRIVE+guidelines+for+reporting+animal+research.">Improving bioscience research reporting: The ARRIVE guidelines for reporting animal research.</a> Journal of Pharmacology &amp; Pharmacotherapeutics. 1 (2), 94-99 (2010).</li><li>Llovera, G., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+next+step+in+translational+research:+lessons+learned+from+the+first+preclinical+randomized+controlled+trial.">The next step in translational research: lessons learned from the first preclinical randomized controlled trial.</a> Journal of Neurochemistry. 139, 271-279 (2016).</li><li>Gnyawali, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retooling+laser+speckle+contrast+analysis+algorithm+to+enhance+non-invasive+high+resolution+laser+speckle+functional+imaging+of+cutaneous+microcirculation.">Retooling laser speckle contrast analysis algorithm to enhance non-invasive high resolution laser speckle functional imaging of cutaneous microcirculation.</a> Scientific Reports. 7, 41048 (2017).</li><li>Swanson, G. M., Satariano, E. R., Satariano, W. A., Threatt, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Racial+differences+in+the+early+detection+of+breast+cancer+in+metropolitan+Detroit,+1978+to+1987.">Racial differences in the early detection of breast cancer in metropolitan Detroit, 1978 to 1987.</a> Cancer. 66 (6), 1297-1301 (1990).</li><li>Clark, W. M., Lessov, N. S., Dixon, M. P., Eckenstein, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monofilament+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse.">Monofilament intraluminal middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Neurological Research. 19 (6), 641-648 (1997).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).</li><li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+stroke+in+mice+-+middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model.">Modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (47), e2423 (2011).</li><li>Tamura, A., Graham, D. I., McCulloch, J., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat:+1.+Description+of+technique+and+early+neuropathological+consequences+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Focal cerebral ischaemia in the rat: 1. Description of technique and early neuropathological consequences following middle cerebral artery occlusion.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 1 (1), 53-60 (1981).</li><li>Chen, S. T., Hsu, C. Y., Hogan, E. L., Maricq, H., Balentine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+focal+ischemic+stroke+in+the+rat:+reproducible+extensive+cortical+infarction.">A model of focal ischemic stroke in the rat: reproducible extensive cortical infarction.</a> Stroke. 17 (4), 738-743 (1986).</li><li>Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infarct+volume+quantification+in+mouse+focal+cerebral+ischemia:+a+comparison+of+triphenyltetrazolium+chloride+and+cresyl+violet+staining+techniques.">Infarct volume quantification in mouse focal cerebral ischemia: a comparison of triphenyltetrazolium chloride and cresyl violet staining techniques.</a> Journal of Neuroscience Methods. 139 (2), 203-207 (2004).</li><li>Llovera, G., Roth, S., Plesnila, N., Veltkamp, R., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+stroke+in+mice:+permanent+coagulation+of+the+distal+middle+cerebral+artery.">Modeling stroke in mice: permanent coagulation of the distal middle cerebral artery.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (89), e511729 (2014).</li><li>Cramer, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+widefield+calcium+imaging+of+the+mouse+cortex+for+analysis+of+network+connectivity+in+health+and+brain+disease.">In vivo widefield calcium imaging of the mouse cortex for analysis of network connectivity in health and brain disease.</a> Neuroimage. 199, 570-584 (2019).</li><li>Heindl, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+morphological+analysis+of+microglia+after+stroke.">Automated morphological analysis of microglia after stroke.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 12, 106 (2018).</li><li>Nih, L. R., Gojgini, S., Carmichael, S. T., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual-function+injectable+angiogenic+biomaterial+for+the+repair+of+brain+tissue+following+stroke.">Dual-function injectable angiogenic biomaterial for the repair of brain tissue following stroke.</a> Nature Materials. 17 (7), 642-651 (2018).</li><li>Rust, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nogo-A+targeted+therapy+promotes+vascular+repair+and+functional+recovery+following+stroke.">Nogo-A targeted therapy promotes vascular repair and functional recovery following stroke.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 116 (28), 14270-14279 (2019).</li><li>Kitano, H., Kirsch, J. R., Hurn, P. D., Murphy, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhalational+anesthetics+as+neuroprotectants+or+chemical+preconditioning+agents+in+ischemic+brain.">Inhalational anesthetics as neuroprotectants or chemical preconditioning agents in ischemic brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 27 (6), 1108-1128 (2007).</li><li>Farr, T. D., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+and+qualitative+impairments+in+skilled+reaching+in+the+mouse+(Mus+musculus)+after+a+focal+motor+cortex+stroke.">Quantitative and qualitative impairments in skilled reaching in the mouse (Mus musculus) after a focal motor cortex stroke.</a> Stroke. 33 (7), 1869-1875 (2002).</li><li>Kassem-Moussa, H., Graffagnino, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonocclusion+and+spontaneous+recanalization+rates+in+acute+ischemic+stroke:+a+review+of+cerebral+angiography+studies.">Nonocclusion and spontaneous recanalization rates in acute ischemic stroke: a review of cerebral angiography studies.</a> Archives of Neurology. 59 (12), 1870-1873 (2002).</li><li>Sigler, A., Goroshkov, A., Murphy, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hardware+and+methodology+for+targeting+single+brain+arterioles+for+photothrombotic+stroke+on+an+upright+microscope.">Hardware and methodology for targeting single brain arterioles for photothrombotic stroke on an upright microscope.</a> Journal of Neuroscience Methods. 170 (1), 35-44 (2008).</li></ol>

제시된 프로토콜은 로즈 벵골의 이전 복막 주사와 함께 561 nm 레이저로 손상되지 않은 두개골을 조명하여 포토스혈전증의 실험적인 스트로크 모델을 설명합니다. 최근까지이 모델의 사용은 낮았지만 꾸준히 증가하고 있습니다.
이 모델에서 뇌졸중 유도 중 사망률은 존재하지 않습니다. 5% 미만의 전반적인 사망률은 배제 기준을 충족한 후 마취 학적 합병증이나 희생으로 인해...

허혈성 뇌졸중은 2017년 전 세계1개국에서약 270만 명의 사망자를 차지하는21세기 선진국에서 사망 및 성인 장애의 주요 원인으로 남아 있다. 과학 계의 엄청난 노력에도 불구하고, 몇 가지 치료를 사용할 수 있습니다. 더욱이, 이러한 높은 배제 기준으로, 이러한 이미 제한된 옵션은 많은 환자가 접근 할 수 없으므로 뇌졸중 후 기능적 회복을 개선하기 위한 새로운 치료법이 절실히 필요합니다.
뇌의 복잡한 상호 작용을 복제하는 체외 모델의 무능력을 고려, 동물 모델은 전 임상 뇌졸중 연구에 필수적이다. 마우스는 뇌졸중 연구 분야에서 가장 자주 사용되는 동물 모델입니다. 이러한 마우스 모델의 대다수는 MCA 영토2에위치하기 때문에 중대뇌 동맥(MCA) 내의 혈류를 차단하여 경색을 유도하는 것을 목표로 한다. 이 모형은 더 나은 인간 적인 치기 병변을 다시 상피하더라도, 그(것)들은 높은 극단적인 볼륨 가변성을 가진 경련한 수술을 관련시킵니다.
로젠블룸과 엘사반이 1977년 3년 포토스혈전 모델의제안을 제안한 이후, 이후 왓슨 외4를쥐에게 이 모델을 적용한 후, 허혈성 뇌졸중 연구5,6에서널리 사용되고 있다. 광혈전 뇌졸중 모델은 이전에 혈류에 주입된 빛에 민감한 염료의 광활성화의 결과로 국소 및 정의된 피질 경색을 유도한다. 이것은 빛에 노출된 지역에 있는 혈관의 현지 혈전증을 일으키는 원인이 됩니다. 간략하게, 주입된 감광성 염료로부터 빛에 노출되면, 내피 세포막의 국소화된 산화 손상이 유도되어 혈소판 응집 및 혈전 형성으로 이어지고, 대뇌 혈류량의 국소중단7.
이 기술의 주요 장점은 실행의 단순성과 병변을 원하는 영역으로 유도할 수 있는 가능성에 있습니다. 다른 실험적인 뇌졸중 모델과 달리, 병변이 손상되지 않은 두개골의 조명을 통해 유도되기 때문에 광혈전 뇌졸중 모델을 수행하기 위해서는 경미한 외과 적 전문 지식이 필요합니다. 더욱이, 잘 제한된테두리(도 2A 및 도 5B)와특정 뇌 부위에 병변을 유도하는 유연성은 허혈성 또는 그대로 피질 영역 내의 세포 반응연구를 용이하게 할 수있다. 이러한 이유로, 이 접근은 피질 가소성의 세포 및 분자 기계장치의 연구 결과에 적합합니다.
지난 수십 년 동안 연구 그룹 간의 재현성 부족에 대한 우려가 커지면서 이른바 복제 위기9가만들어졌습니다. 2015년 제1차 전임상 무작위 대조멀티센터 시험연구의 조정 후, 전임상 연구(11,12,13)를개선하기 위한 제안된 도구는, 독립적인 실험실에서 전임상 연구 사이의 재현성에 실패한 한 가지 원인이 실험스트로크 모델 및 결과 파라미터(14)의 충분한 표준화가 부족한 것으로 확인되었다. 이에 따라, 면역스트로크 컨소시엄이 설립되었을 때(https://immunostroke.de/), 뇌졸중 회복의 기계론적 원리에 기초한 뇌면역 상호작용을 이해하는 것을 목표로 하는 협력은 각 연구그룹 간의 모든 실험적 뇌졸중 모델의 표준화가 필수적이었다.
여기에 기재된 상기 연구 컨소시엄에서 사용되는 바와 같이 광혈전형 모델의 유도를 위한 표준화된 절차이다. 간단히, 동물은 마취를 겪고, 로즈 벵골 주사(10 μL/g)를 관전적으로 받았고, 브레그마에서 남은 3mm의 그대로 두개골은 즉시 561 nm 레이저로 20분(그림1)에의해 조명되었다. 또한, 이 모델에서 스트로크 결과를 분석하는 관련 조직학적 및 행동 방법이 보고된다. 모든 방법은 실험실에서 개발 및 사용되는 표준 작동 절차를 기반으로 합니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>561 nm wavelenght laser</td>
			<td>Solna</td>
			<td>Cobolt HS-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic Acid</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>695092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia system for isoflurane</td>
			<td>Drager</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ApopTag Peroxidase In Situ Apoptosis Detection Kit</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>S7100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthen pomade</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>1578681</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57Bl/6J mice</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>000664</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collimeter</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>F240APC-A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotons</td>
			<td>NOBA Verbondmitel Danz</td>
			<td>974116</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cresyl violet</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>C5042-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Thermo Scientific CryoStarNX70</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 70%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>521005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 96%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>522078</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 99%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>ETO-5000-99-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper</td>
			<td>Macherey-Nagel</td>
			<td>432018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>15000-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11616-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating blanket</td>
			<td>FHC DC Temperature Controller</td>
			<td>&#160;40-90-8D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abbot</td>
			<td>B506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopentane</td>
			<td>Fluka</td>
			<td>59070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Inresa Arzneimittel GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser Speckle</td>
			<td>Perimed</td>
			<td>PeriCam PSI HR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mayor Scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>1410-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline PH: 7.4</td>
			<td>Apotheke Innestadt Uni Munchen</td>
			<td>P32799</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protective glasses</td>
			<td>Laser 2000</td>
			<td>NIR-ZS2-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rose Bengal</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>198250-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Roti-Histokit mounting medium</td>
			<td>Roth</td>
			<td>6638.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline solution</td>
			<td>Braun</td>
			<td>131321</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomikroskop</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Stemi DV4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotactic frame</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>51500U</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost Plus Slides</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>J1800AMNZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylacine</td>
			<td>Albrecht</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling stroke in mice: focal cortical lesions by photothrombosis

뇌졸중은 선진국에서 사망및 성인 장애의 주요 원인입니다. 새로운 치료 전략에 대한 광범위한 조사에도 불구하고 뇌졸중 환자를위한 제한된 치료 옵션이 남아 있습니다. 따라서 뇌졸중 후 염증, 혈관 신생, 신경 가소성 및 재생과 같은 병리학적 경로에 대한 연구가 더 필요합니다. 뇌의 복잡성을 재현하는 시험관 내 모델의 무능력을 감안할 때, 실험적인 치기 모형은 이 기계장치에 대한 새로운 약 표적의 분석 그리고 후속 평가에 필수적입니다. 또한, 소위 복제 위기를 극복하기 위해 모든 절차에 대한 자세한 표준화 모델이 시급히 필요합니다. ImmunoStroke 연구 컨소시엄 내에서의 노력으로, 로즈 벵골의 관면 주사와 561 nm 레이저를 가진 손상되지 않은 두개골의 조명을 사용하여 표준화 된 광혈전 마우스 모델이 설명된다. 이 모델은 침습적 인 수술없이 뇌의 피질 영역에 할당 마우스에서 뇌졸중의 성능을 허용; 따라서, 뇌의 다양 한 영역에서 뇌졸중의 연구를 가능하게. 이 비디오에서는 조직학적 분석과 함께 광혈전성 모델에서 뇌졸중 유도의 수술 방법이 입증된다.

여기에 설명된 모델은 로즈 벵골 주입및 20분 동안 손상되지 않은 두개골 조명에 의한 광혈증 뇌졸중 모델이며, 섬유에서 일정한 561nm 파장 및 25mW 출력 전력에서. 완전한 광혈증 수술은 30 분 동안 지속되지만 동물은 낮은 마취 하에 유지되고 뇌 손상은 보통입니다. 케이지로 옮겨진 지 약 10분 후, 모든 동물들이 깨어 있었고, 케이지에서 자유롭게 움직이고, 쓰레기와 상호 작용했다.
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Modeling Stroke in Mice: Focal Cortical Lesions by Photothrombosis

여기에 설명된 광혈증 뇌졸중 모델은 감광성 염료투여 후 레이저 조명을 이용하여 영구 미생물 폐색을 유도하여 손상되지 않은 두개골을 통해 뇌졸중이 생성된다.

마우스에서 뇌졸중 모델링: 포심 피질 병변

Stroke is a leading cause of death and acquired adult disability in developed countries. Despite extensive investigation for novel therapeutic strategies, ...

상기 광혈전증 뇌졸중 모델 접근법은 피질의 다른 영역에서 부상을 유도하는 제한된 테두리와 유연성 때문에 피질 가소성의 세포 및 분자 연구에 적합할 수 있다. 세 가지 원리 장점은 다른 스트로크 모델과 포토스혈 전증 모델을 구별하고, 병변을 원하는 영역으로 유도할 가능성, 높은 재현성 및 낮은 사망률을 구별합니다. 적절한 장미 벵골 어세팅은 성공과 모델의 안정성에 매우 중요합니다.결과는 레이저 전력, 교차 적용 타이밍 및 영향을 받지 않는 피질의 광학 실링과 같은 기술적 사양에 따라 달라집니다. 밀리리터당 10밀리그램의 최종 농도를 위해 0.9%의 식염수 용액으로 장미 벵골을 용해하는 것으로 시작하십시오. 뜨거운 납 소독제를 사용하여 모든 기기를 꼼꼼하게 살균하고 수술 전후의 모든 표면을 미생물 소독제 스프레이로 소독합니다.식염수 용액으로 채워진 주사기를 준비하여 수화된 작동 영역을 유지하고 마취 가스를 준비합니다. 주입되는 장미 벵골의 복용량을 조정하기 위해 마우스의 체중을 측정합니다. 마우스 체온을 유지하기 위해 관련 피드백 제어 가열 패드를 설정합니다.마우스가 완전히 마취되고 고정 프레임에 고정되면 직장 프로브를 부드럽게 삽입하여 수술 시술 전반에 걸쳐 마우스의 체온을 모니터링합니다. 덱스 판테놀 눈 연고를 눈에 바르고 소독제로 피부와 주변 털을 청소합니다. 가위를 사용하여 2-2 센티미터 반 의 세로 절개를 하고 다시 길어 두개골을 노출하십시오.면화를 사용하여 간음막을 부드럽게 제거하고 관상 봉합사를 찾습니다. 561 나노미터 레이저를 켜는 동안 보호 안경을 착용하고 왼쪽에 3밀리미터를 표시한 다음 레이저를 끄고 표시된 좌표에 직경 4mm의 구멍으로 스티커를 연결합니다. 장미 벵골마우스 함정을 주입합니다.레이저 빔을 두개골에서 4~5센티미터 거리에 놓습니다. 레이저를 켜고 20 분 동안 두개골을 비춥습니다. 0.9%의 식염수를 두 방울로 바르면 두개골을 다시 수분화합니다.상처를 봉합 한 후, 마취에서 회복하기 위해 섭씨 37도에서 회복실에 마우스를 놓습니다. 1시간 후, 온도 조절실에 마우스를 다시 케이지에 놓습니다. 직렬 관상 뇌 섹션에 크리스탈 보라색 얼룩은 뇌졸중 유도의 24 시간 후 광피 볼륨 항목 분석에 사용되었다.이 뇌졸중 모델의 가변성은 낮았으며 평균 경색 부피는 29.3 입방 밀리미터였으며, 이는 한 뇌 반구의 23%를 나타냅니다. 광장전증 병변은 복합 신경 점수에 의해 표시된 중등도 및 장기 감각 운동 장애를 일으켰습니다. 뇌졸중 동물은 수술 후 24 시간 신경 점수에 상당한 변화가 있었다.비록 차이가 지속, 스트로크 마우스 시간이 지남에 따라 향상. 장미 벵골 플러스 조명을 실시 하는 마우스에서, 체중및 체온 감소 24 수술 후 시간. 그러나 수술 후 3일 이내에 회복이 관찰되었습니다.허혈성 변화는 레이저 이미징을 사용하여 확인되었다. 결과는 장미 벵골 또는 레이저 조명 만으로는 병변을 생성하지 않았음을 나타내었고, 둘 다 동시 적용하면 좁은 올리고메릭 영역으로 둘러싸인 둥근 저포화 영역이 생성되었습니다. 수술 후 24시간 동안 경피량 평가를 위한 크리스탈 바이올렛 및 터널 염색은 장미 벵골 또는 레이저 조명 수술에서 조직 손상이 없음을 밝혔다.한편, 장미 벵골 플러스 레이저 조명은 잘 경계병변을 생성했다. 장미 벵골 주입을 조정 하는 동물의 체중을 측정 하는 것이 중요 합니다. 검시관 스위처의 올바른 상태는 동물 간의 일관된 병변을 유도하는 것이 중요합니다.이 프로토콜은 두개골을 그대로 두고 두개골 창을 통해 수행 할 수 있기 때문에 생체 이미징에서 넓은 필드 또는 멀티 광자와 결합 할 수 있습니다.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

쥐 중간 대뇌 동맥의 폐색의 Endovascular 봉합사에 의해 초점 대뇌 국소 빈혈 모델

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

연구

신경과학

In utero Electroporation followed by Primary Neuronal Culture for Studying Gene Function in Subset of Cortical Neurons

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utero에서 Electroporation은 두피 뉴런의 하위 집합의 유전자 기능을 학습에 대한 기본의 연결을 문화 뒤에

In vitro study of primary neuronal cultures allows for quantitative analyses of neurite outgrowth. In order to study how genetic alterations affect ...

Measurement of Total Calcium in Neurons by Electron Probe X-ray Microanalysis

전자관 X-선 마이크로 분석에 의한 뉴런의 총 칼슘의 측정

In this article the tools, techniques, and instruments appropriate for quantitative measurements of intracellular elemental content using the technique ...

Modeling Astrocytoma Pathogenesis In Vitro and In Vivo Using Cortical Astrocytes or Neural Stem Cells from Conditional, Genetically Engineered Mice

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모델링 성상 세포종 병인<em&gt; 체외</em&gt;와<em&gt; 생체</em&gt; 대뇌 피질의 성상이나 조건, 유전자 조작 쥐에서 신경 줄기 세포를 사용하여

Current astrocytoma models are limited in their ability to define the roles of oncogenic mutations in specific brain cell types during disease ...

Experimental Demyelination and Remyelination of Murine Spinal Cord by Focal Injection of Lysolecithin

리소 레시틴의 초점 주사 실험 탈수 초화 및 설치류 척수의 재유 수화

Multiple sclerosis is an inflammatory demyelinating disease of the central nervous system characterized by plaque formation containing lost ...

Quantification of Filamentous Actin (F-actin) Puncta in Rat Cortical Neurons

Quantification of Filamentous Actin F-actin Puncta in Rat Cortical Neurons

쥐 두피 뉴런의 사상 액틴 (F - 굴지) puncta의 정량

Filamentous actin protein (F-actin) plays a major role in spinogenesis, synaptic plasticity, and synaptic stability. Changes in dendritic F-actin rich ...

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

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측면 만성 두개골 창 준비 활성화<em&gt; 생체</em&gt; 마우스의 말초 중간 대뇌 동맥 폐색에 따라 관측

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of ...

Modeling Charcot-Marie-Tooth Disease In Vitro by Transfecting Mouse Primary Motoneurons

Modeling Charcot-Marie-Tooth Disease In Vitro by Transfecting Mouse Primary Motoneurons

마우스 기본 Motoneurons Transfecting으로 Charcot Marie이 질병에서 체 외에서 모델링

Neurodegeneration of spinal motoneurons (MNs) is implicated in a large spectrum of neurological disorders including amyotrophic lateral sclerosis, ...

In Vivo Two-photon Imaging of Cortical Neurons in Neonatal Mice

In Vivo Two-photon Imaging of Cortical Neurons in Neonatal Mice

Vivo에서 신생아 쥐에 있는 대뇌 피 질의 뉴런의 두 광자 영상

Two-photon imaging is a powerful tool for the in vivo analysis of neuronal circuits in the mammalian brain. However, a limited number of in vivo imaging ...

Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery

마우스에서 뇌졸중 모델링: 외부 경동맥을 통한 일시적인 중간 뇌동맥 폐색

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options ...