Name: developing 3d organized human cardiac tissue within a microfluidic platform
Uploaded: 2021-06-15T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Developing 3D Organized Human Cardiac Tissue within a Microfluidic Platform at JoVE.com

Vi vil gerne takke NSF CAREER Award #1653193, Arizona Biomedical Research Commission (ABRC) New Investigator Award (ADHS18-198872) og Flinn Foundation Award for at yde finansieringskilder til dette projekt. HiPSC-linjen, SCVI20, blev hentet fra Joseph C. Wu, MD, ph.d. ved Stanford Cardiovascular Institute finansieret af NIH R24 HL117756. HiPSC-linjen, IMR90-4, blev hentet fra WiCell Research Institute55,56.

Udfør al cellehåndtering og reagensforberedelse i et biosikkerhedsskab. Sørg for, at alle overflader, materialer og udstyr, der kommer i kontakt med celler, er sterile (dvs. spray ned med 70% ethanol). Cellerne skal dyrkes i en befugtet 37 °C, 5% CO2 inkubator. Al hiPSC-kultur og differentiering udføres i 6-brønds plader.
1. Oprettelse af mikrofluidiske enheder (omtrentlig varighed: 1 uge)
<ol><li>
Fotolitografi BEMÆRK: Masken, der er designet ved hjælp...

Dannelsen af en in vitro human hjertevævsmodel med forbedrede cellecelleinteraktioner og biomimetisk 3D-struktur er afgørende for grundlæggende kardiovaskulær forskning og tilsvarende kliniske anvendelser1. Denne skitserede protokol forklarer udviklingen af 3D humant anisotropisk hjertevæv i en mikrofluidisk enhed ved hjælp af co-kultur af stamcelle-afledte CMs med bindeled CF'er indkapslet i en kollagen hydrogel, der tjener til at modellere den komplekse celle sammensætning og str...

Vævstekniske tilgange er blevet undersøgt bredt i de senere år for at ledsage in vivo kliniske fund i regenerativ medicin og sygdomsmodellering1,2. Der er især blevet lagt betydelig vægt på in vitro-hjertevævsmodellering på grund af de iboende vanskeligheder med at indkøbe humant primært hjertevæv og producere fysiologisk relevante in vitro-surrogater, hvilket begrænser den grundlæggende forståelse af de komplekse mekanismer for hjerte-kar-sygdomme (CVD'er)1,3. Traditionelle modeller har ofte involveret 2D monolayer kultur assays. Men vigtigheden af at dyrke hjerteceller i et 3D-miljø for at efterligne både det indfødte landskab af myokardiet og komplekse cellulære interaktioner er i vid udstrækning karakteriseret4,5. Derudover har de fleste modeller produceret hidtil inkluderet en mono-kultur af CMs differentieret fra stamceller. Hjertet består dog af flere celletyper6 inden for en kompleks 3D-arkitektur7, der berettiger det kritiske behov for at forbedre kompleksiteten af vævssammensætningen inden for 3D in vitro-modeller for bedre at efterligne cellulære bestanddele af det oprindelige myokardiium.
Til dato er mange forskellige tilgange blevet udforsket for at producere biomimetiske 3D-modeller af myocardium8. Disse tilgange spænder fra eksperimentelle opsætninger, der giver mulighed for realtidsberegning af genereret kraft, fra monokultur-CMs seedet på tynde film (anses for muskuløse tynde film (MTF'er))9, til co-kultur hjerteceller i 3D hydrogel matricer suspenderet blandt fritstående cantilevers (anses manipuleret hjertevæv (EHTs))10. Andre tilgange har fokuseret på at gennemføre micromolding teknikker til at efterligne myokardie anisotropi, fra mono-kultur CMs i en 3D hydrogel suspenderet blandt fremspringende mikropæle i et væv plaster11, til mono-kultur CMs seedet blandt indrykkede mikrogrooves12,13. Der er iboende fordele og ulemper ved hver af disse metoder, derfor er det relevant at bruge den teknik, der flugter med den påtænkte anvendelse og det tilsvarende biologiske spørgsmål.
Evnen til at forbedre modningen af stamcelle-afledte PM'er er afgørende for en vellykket in vitro engineering af voksen-lignende myokardievæv og oversættelse af efterfølgende resultater til kliniske fortolkninger. Til dette formål er metoder til at modne PM'er blevet bredt udforsket, både i 2D og 3D14,15,16. For eksempel fører elektrisk stimulation indarbejdet i EHT'er, tvungen tilpasning af CM'er med overfladetopografi, signaleringssignaler, vækstfaktorer fra co-kultur og / eller 3D hydrogelforhold osv., alle til en ændring til fordel for CM-modning i mindst en af følgende: cellemorfologi, calciumhåndtering, sarkomerisk struktur, genekspression eller kontraktil kraft.
Af disse modeller bevarer de tilgange, der bruger mikrofluidiske platforme, visse fordele i naturen, såsom kontrol af gradienter, begrænset celleinput og minimale nødvendige reagenser. Desuden kan mange biologiske replikater genereres på én gang ved hjælp af mikrofluidiske platforme, der tjener til bedre at dissekere den biologiske mekanisme af interesse og øge den eksperimentelle prøvestørrelse til fordel for statistisk effekt17,18,19. Derudover gør brugen af fotolitografi i mikrofluidisk enhedsfremstillingsproces det muligt at skabe præcise funktioner (f.eks. topografier) på mikro- og nanoniveau, der tjener som mesoskopiske signaler til at forbedre den omgivende cellulære struktur og vævsarkitektur på makroniveau18,20,21,22 til forskellige anvendelser i vævsregenerering og sygdomsmodellering.
Vi har tidligere demonstreret udviklingen af en ny 3D-hjertevæv on-chip model, der inkorporerer overfladetopografi i form af medfødte elliptiske mikropæle for at tilpasse hydrogelindkapslede co-dyrkede hjerteceller til et sammenkoblet, anisotropisk væv20. Efter 14 dages kultur er vævene dannet i den mikrofluidiske enhed mere modne i deres fænotype, genekspressionsprofil, calciumhåndteringskarakteristika og farmaceutisk respons sammenlignet med monolag og 3D-isotropisk kontrol23. Den protokol, der er beskrevet heri, skitserer metoden til oprettelse af dette 3D-kokulturerede, justerede (dvs. anisotropiske) humane hjertevæv i den mikrofluidiske enhed ved hjælp af hiPSC-afledte CMs. Specifikt forklarer vi metoderne til at differentiere og rense hiPSC'er mod CMs, tilskud af hCF'er med CMs til at producere en etableret co-kultur befolkning, indsættelse af cellepopulationen indkapslet i kollagen hydrogel i mikrofluidiske enheder, og efterfølgende analyse af 3D konstrueret væv gennem kontraktil og immunofluorescerende assays. De resulterende 3D-manipulerede mikrovæv er velegnede til forskellige anvendelser, herunder grundlæggende biologistudier, CVD-modellering og farmaceutisk testning.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.65 mL centrifuge tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>87003-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mm Biopsy punch</td>
			<td>VWR</td>
			<td>95039-090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mm Biopsy punch</td>
			<td>VWR</td>
			<td>95039-088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL Falcon tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89039-670</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18x18mm coverslips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>16004-308</td>
			<td>The coverslips should be No.1, to allow for high magnification imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>101176-014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well flat botttom tissue-culture plates</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82050-844</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 minus insulin</td>
			<td>LifeTech</td>
			<td>A1895602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 plus insulin</td>
			<td>LifeTech</td>
			<td>17504001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHIR99021</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10188-030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen I, rat tail</td>
			<td>Corning</td>
			<td>47747-218</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM F12</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>11330057</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>21600069</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E8</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>A1517001</td>
			<td>can also be made in house</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>VWR</td>
			<td>45001-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGM3</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10172-048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFR-Matrigel</td>
			<td>VWR</td>
			<td>47743-718</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G8898-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10152-212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hESC-Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>BD354277</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IPA</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IWP2</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I0536-5MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82003-820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTCS</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>440299-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaN3</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2002-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5881-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen/Strep</td>
			<td>VWR</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish (150x15mm)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25384-326</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish (60x15mm)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25384-092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol Red</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P3532-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>MT10040CM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 minus glucose</td>
			<td>VWR</td>
			<td>45001-110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon Wafers (100mm)</td>
			<td>University Wafer</td>
			<td>1196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium lactate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L4263-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SU8 2075</td>
			<td>Microchem</td>
			<td>Y111074 0500L1GL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SU8 Developer</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>NC9901158</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sylgard Elastomer</td>
			<td>Essex Brownell</td>
			<td>DC-184-1.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 flasks</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82050-856</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8787-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TrypLE</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>12604021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA (0.5%)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>15400054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween20</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9416-50ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y-27632</td>
			<td>Stem Cell Technologies</td>
			<td>72304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EVG620 Aligner</td>
			<td>EVG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasma cleaner PDC-32G</td>
			<td>Harrick Plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss AxioObserver Z1 microscope</td>
			<td>Nikon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica SP8 Confocal microscope</td>
			<td>Leica</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

developing 3d organized human cardiac tissue within a microfluidic platform

Den hyppigste dødsårsag på verdensplan fortsætter som hjerte-kar-sygdomme (CVD). Men modellering af den fysiologiske og biologiske kompleksitet af hjertemusklen, myokardiet, er notorisk svært at opnå in vitro. Hovedsageligt ligger forhindringer i behovet for menneskelige kardiomyocytter (CMs), der enten er voksne eller udviser voksenlignende fænotyper og med succes kan replikere myokardiets cellulære kompleksitet og indviklede 3D-arkitektur. Desværre, på grund af etiske bekymringer og mangel på tilgængelige primære patient-afledte humane hjertevæv, kombineret med den minimale spredning af CMs, sourcing af levedygtige menneskelige PM'er har været et begrænsende skridt for hjertevæv engineering. Til dette formål har de fleste forskning overgået til hjerte differentiering af menneskeskabte pluripotente stamceller (hiPSCs) som den primære kilde til menneskelige CMs, hvilket resulterer i en bred inkorporering af hiPSC-CMs i in vitro assays for hjertevæv modellering.
Her i dette arbejde demonstrerer vi en protokol for udvikling af et 3D-modent stamcelleafledt humant hjertevæv i en mikrofluidisk enhed. Vi forklarer og demonstrerer specifikt produktionen af en 3D in vitro anisotropisk hjertevæv-on-a-chip model fra hiPSC-afledte CMs. Vi beskriver primært en renselsesprotokol til udvælgelse af CMs, co-kultur af celler med et defineret forhold via blanding CMs med menneskelige FSR (hF'er), og suspension af denne co-kultur inden for kollagen-baserede hydrogel. Vi demonstrerer yderligere injektionen af den cellebelastede hydrogel i vores veldefinerede mikrofluidiske enhed, indlejret med forskudte elliptiske mikropæle, der tjener som overfladetopografi for at fremkalde en høj grad af tilpasning af de omgivende celler og hydrogelmatrixen, der efterligner arkitekturen i det indfødte myokardie. Vi forestiller os, at den foreslåede 3D-anisotropiske hjertevæv-on-chip-model er egnet til grundlæggende biologistudier, sygdomsmodellering og gennem dets anvendelse som screeningsværktøj farmaceutisk testning.

For at opnå en meget renset population af CMs fra hiPSC'er anvendes en modificeret version, der involverer en kombination af Lian differentieringsprotokol33 og Tohyama rensningstrin34 (se figur 1A for eksperimentel tidslinje). HiPSC'erne skal være kolonilignende, ~ 85% sammenflydende og jævnt fordelt over hele kulturen godt 3-4 dage efter passage ved starten af CM differentiering (Figur 1B). Specifikt bør hiPSC...

Watch this Scientific Journal Video about Developing 3D Organized Human Cardiac Tissue within a Microfluidic Platform at JoVE.com

Developing 3D Organized Human Cardiac Tissue within a Microfluidic Platform

Målet med denne protokol er at forklare og demonstrere udviklingen af en tredimensionel (3D) mikrofluidisk model af højt justeret humant hjertevæv, der består af stamcelle-afledte kardiomyocytter, der er co-dyrket med hjertefibroblaster (CF'er) inden for en biomimetisk, kollagenbaseret hydrogel til applikationer i hjertevævsteknik, lægemiddelscreening og sygdomsmodellering.

Udvikling af 3D-organiseret humant hjertevæv inden for en mikrofluidisk platform

The leading cause of death worldwide persists as cardiovascular disease (CVD). However, modeling the physiological and biological complexity of the heart ...

Hjerte-kar-sygdomme er fortsat den vigtigste dødsårsag på verdensplan. Traditionelle in vitro-modeller er afhængige af monolayerkultur. Men hjertet, specielt hjertemusklen eller myokardiet, er komplekst i sin 3D anisotropi og cellulære sammensætning.Derfor er det afgørende at forbedre kompleksiteten af vævssammensætningen inden for in vitro-modeller for bedre at efterligne både de cellulære bestanddele og strukturen af myokardiet. Her i dette arbejde demonstrerer vi en protokol for udvikling af et 3D-modent stamcelleafledt humant hjertevæv i en ny mikrofluidisk enhed. Denne enhed indeholder en 3D-hovedvævskanal med medfødte elliptiske mikropæle, der fremkalder høje grader af tilpasning af de omgivende hydrogel indkapslede hjerteceller.Hovedkanalen er flankeret af mediekanaler med injektionsporte, der muliggør en næringsstofspredning i hele vævet. På grund af den omhu, der kræves ved håndtering af mikrofluidiske enheder, er visuel repræsentation af denne protokol nyttig til korrekt at etablere 3D-hjertevæv i en mikrofluidisk enhed med indlejrede mikroposter for forbedret vævsjustering. For at adskille den menneskelige hjertefibroblast skal du først tage kolben ud af inkubatoren.Sæt inde i biosikkerhedsskabet og begynd at suge de brugte medier fra kolben. Derefter skal du tage tre MLs af PBS 1X for at vaske kolben. Luk hætten og svirr kolben, så bunden er korrekt belagt med PBS.Indsug PBS. Tag tre MLs af 37 graders trypsin og tilsæt til kolben. Derefter vippe kolben og hvirvle, så bunden er helt belagt.Sæt derefter inkubatoren i fire til seks minutter. Neutralisere trypsin med FGM3 ved at tage tre MLs og tilføje, at til kolben. Opløsningen pipetters op og ned for at løsne eventuelle celler, der forbliver på bagsiden af kolben.Opsamles celleaffjedringen i et 15 ML Falcon-rør. Tag 10 mikroliter af celleaffjedringen og dispenser i et hæmocytometer for at tælle cellerne med et mikroskop. Centrifuge celleaffjedringen ved 250 G i fire minutter.Efter centrifugering suges supernatanten til at være forsigtig med ikke at forstyrre cellepillen. Genbrug cellepille med frisk FGM3 for at lave de ønskede 75 millioner celler pr. ML-suspension. Genbrug cellerne, og sæt derefter røret ned med en løst monteret hætte.For at adskille kardiomyocytterne skal du tage pladen ud af inkubatoren og aspirere medierne. Tag seks MLs af PBS og vask brøndene, så der er en ML PBS i hver brønd. Indsug PBS'en, og pas på ikke at forstyrre de celler, der er fastgjort til pladen.Tilføj seks MLs af opvarmet trypLE Express, så der er en ML i hver brønd af en seks godt plade. Inkuber cellerne med trypLE i 10 minutter. Efter 10 minutter skal du neutralisere trypLE med seks MLs RPMI plus B27 plus insulin, så du tilføjer en ML RMPI til hver brønd.Brug en ML-pipette til at opsamle opløsningen og sprænge den mod bagsiden af brøndene for at sikre, at alle celler løftes af. Opsamles celleaffjedringen i et 15 ML Falcon-rør. Centrifuge røret ved 300 G i tre minutter.Efter centrifugering suges medierne og trypLE'en. Dette trin er vigtigt at vaske de følsomme kardiomyocytter. Dette trin sikrer, at alle trypLE er væk i 3D-hjertevævsdannelse.Genbrug cellepillen i fem MLs af RPMI plus B27 plus insulin. Brug en ML-pipette til at pipette opløsningen op og ned for at sikre en homogen celleaffjedring. Tag 10 mikroliter af celleaffjedringen til optælling med hæmometeret.Centrifuge cellerne ved 300 G i tre minutter. Aspirere medierne efter centrifugation for anden gang. Tilføj den passende mængde RPMI plus B27 plus insulin for at opnå en 75 millioner celler pr ML suspension, derefter genbruges.For at forberede kollagenopløsningen til indkapsling skal alle reagenser være på en isboks i emhætten. Så tag 75 mikroliter af bestanden kollagen. Kollagenen er meget tyktflydende, så langsomt optagelse med pipetten, og dispenser derefter i et mikrocentrifugerør på is.Tag 13,85 mikroliter RPMI og tilsæt til kollagen i Falcon-røret. Derefter tager 10 mikroliter phenolrød og tilsæt til blandingen på is og genbruges. Endelig skal du tage 1,15 mikroliter af en normal NaOH og tilføje til suspensionen for at neutralisere.Så tag en 200 mikroliter pipette spids og genbruge suspensionen. Næste skridt er indkapsling af cellerne i kollagen metrogel. Så tag en aliquot af otte mikroliter af CMs og tilføje til en frisk Falcon rør på is.Så tag to mikroliter af CS og tilføje til denne celle blanding. Genbrug celleaffjedringen og tag 5,6 mikroliter af celleaffjedringen og læg et frisk Falcon-rør i. Så tag det kollagen, du lige har forberedt, tag fire mikroliter af kollagen, og tag derefter 2,4 mikroliter metrogel.Blandingen pipetters op og ned for at sikre en homogen fordeling af cellehydrogelaffjedringen. Når gelindsprøjtningen er forberedt, kan du indsætte i enheder. Tag et nyt tip og genbrug.Tag petriskålen af enheder, indsæt spidsen i injektionsporten, og langsomt og støt injicere. Du vil se som enheden kanal fyldes op med cellen hydrogel suspension. Når den anden port er fyldt, skal du stoppe injektionen og fjerne spidsen.Efter injektion skal du vende enhederne med pincet og placere inde i den større petriskål med vand i inkubatoren i ni minutter. Efter ni minutter skal du tage enhederne ud af inkubatoren og vende oprejst og derefter placere tilbage i inkubatoren i ni minutter mere for at fuldføre hydrogel polymerisering. Nu er det tid til at tilføje medierne.Så tag RMPI plus B27 og indsæt spidsen i medieporten og begynd langsomt at skubbe. Så gør det på den modsatte medieport. Du kan opleve, at mediet ikke injicerer, så du kan lægge en dråbe medier oven på porten og derefter tage pipetten og bruge undertryk til at trække mediet igennem fra den anden side.Så du vil se som medierne begynder at få trukket gennem kanalen. Når mediet er føjet til alle mediekanalerne, sættes enhederne tilbage i inkubatoren ved 37 grader. Den mikrofluidiske enhed vises i øverste venstre hjørne.Dag et, syv og 14 af kulturen vises dette billede. Efter 14 dages kultur skal cellerne kondensere i stærkt justerede strukturer, der dannes omkring mikroposts. Spor af dag 14 er vist her i C af spontan sammentrækning, samt immunofluorescerende billeder af actin farvede og hjerte markør farvede væv.Hvad der skal ses, er stærkt justerede actinfibre, der dannes efter 14 dage i kultur, samt parallelle striated modne sarkomere og lokaliserede hulkryds. Under denne procedure er det vigtigt at holde alle materialer ved lave temperaturer på is under cellehydrogelindsprøjtning for at forhindre for tidlig polymerisering. De mikrofluidiske enheder skal håndteres med forsigtighed, både under fabrikation, injektion og udvidet vævskultur.Celleindsprøjtningerne skal være en stabil proces for at sikre, at hele kanalen er fyldt, mens den udføres hurtigt for at forhindre for tidlig polymerisering eller hydrogeludtørring før medietilsætning.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

High-throughput Protein Expression Generator Using a Microfluidic Platform

High-throughput Protein Expression Generator Ved hjælp af en Mikrofluid Platform

Rapidly increasing fields, such as systems biology, require the development and implementation of new technologies, enabling high-throughput and ...

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering af et menneske 3D<em&gt; In vitro</em&gt; Tumor Test System

Cancer is one of the leading causes of death worldwide.  Current therapeutic strategies are predominantly developed in 2D culture  systems, which ...

Cell Squeezing as a Robust, Microfluidic Intracellular Delivery Platform

Cell Klemme som en robust, Mikrofluid Intracellulær Delivery Platform

Rapid mechanical deformation of cells has emerged as a promising, vector-free method for intracellular delivery of macromolecules and nanomaterials. This ...

The Multi-organ Chip - A Microfluidic Platform for Long-term Multi-tissue Coculture

Multi-orgel Chip - En Mikrofluid platform for langsigtet Multi-væv cokultur

The ever growing amount of new substances released onto the market and the limited predictability of current in vitro test systems has led to a high need ...

A Microfluidic Platform for High-throughput Single-cell Isolation and Culture

En Mikrofluid platform for High-throughput Single-celle Isolering og Kultur

Studying the heterogeneity of single cells is crucial for many biological questions, but is technically difficult. Thus, there is a need for a simple, yet ...

Microfluidic Platform with Multiplexed Electronic Detection for Spatial Tracking of Particles

Mikrofluid Platform med Multiplexed Elektronisk Detection for fysisk sporing af partikler

Microfluidic processing of biological samples typically involves differential manipulations of suspended particles under various force fields in order to ...

Creation of Cardiac Tissue Exhibiting Mechanical Integration of Spheroids Using 3D Bioprinting

Oprettelse af hjertevæv, der udviser mekanisk integration af sfæroider ved hjælp af 3D bioprinting

This protocol describes 3D bioprinting of cardiac tissue without the use of biomaterials, using only cells. Cardiomyocytes, endothelial cells and ...

Assembly and Tracking of Microbial Community Development within a Microwell Array Platform

Samling og sporing af mikrobiell fællesskabsudvikling inden for en Microwell Array Platform

The development of microbial communities depends on a combination of complex deterministic and stochastic factors that can dramatically alter the spatial ...

Comparable Decellularization of Fetal and Adult Cardiac Tissue Explants as 3D-like Platforms for In Vitro Studies

Sammenlignelige Decellularization af føtale og voksne hjerte væv Explants som 3D-lignende platforme til i Vitro undersøgelser

Current knowledge of extracellular matrix (ECM)-cell communication translates to large two-dimensional (2D) in vitro culture studies where ECM components ...

A Microfluidic Platform for Longitudinal Imaging in Caenorhabditis elegans

A Microfluidic Platform for Longitudinal Imaging in Caenorhabditis elegans

En mikrofluid Platform for langsgående Imaging i Caenorhabditis elegans

In the last decade, microfluidic techniques have been applied to study small animals, including the nematode Caenorhabditis elegans, and have proved ...