Name: developing 3d organized human cardiac tissue within a microfluidic platform
Uploaded: 2021-06-15T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Developing 3D Organized Human Cardiac Tissue within a Microfluidic Platform at JoVE.com

Vi vil takke NSF CAREER Award #1653193, Arizona Biomedical Research Commission (ABRC) New Investigator Award (ADHS18-198872) og Flinn Foundation Award for å ha gitt finansieringskilder til dette prosjektet. HiPSC-linjen, SCVI20, ble hentet fra Joseph C. Wu, MD, PhD ved Stanford Cardiovascular Institute finansiert av NIH R24 HL117756. HiPSC-linjen, IMR90-4, ble hentet fra WiCell Research Institute55,56.

Utfør all cellehåndtering og reagensforberedelse i et Biosafety Cabinet. Sørg for at alle overflater, materialer og utstyr som kommer i kontakt med celler er sterile (dvs. spray ned med 70% etanol). Celler skal dyrkes i en fuktet 37 °C, 5 % CO 2-inkubator. All hiPSC-kultur og differensiering utføres i 6-brønnsplater.
1. Opprettelse av mikrofluidisk enhet (omtrentlig varighet: 1 uke)
<ol><li>
Fotolitografi MERK: Masken, designet med CAD-filen (leveres som ...

Dannelsen av en in vitro menneskelig hjertevevsmodell med forbedrede cellecelleinteraksjoner og biomimetisk 3D-struktur er avgjørende for grunnleggende kardiovaskulær forskning og tilsvarende kliniske applikasjoner1. Denne skisserte protokollen forklarer utviklingen av 3D humant anisotropisk hjertevev i en mikrofluidisk enhet, ved hjelp av samkultur av stamcelleavledede CMer med bindende CFer innkapslet i en kollagenhydrgel, som tjener til å modellere den komplekse cellesammensetningen...

Vevsteknikk tilnærminger har blitt mye utforsket, de siste årene, for å følge in vivo kliniske funn i regenerativ medisin og sykdom modellering1,2. Det er spesielt lagt særlig vekt på in vitro hjertevevsmodellering på grunn av de iboende vanskelighetene med å skaffe humant primært hjertevev og produsere fysiologisk relevante in vitro surrogater, noe som begrenser den grunnleggende forståelsen av de komplekse mekanismene for kardiovaskulære sykdommer (CVDs)1,3. Tradisjonelle modeller har ofte involvert 2D monolayer kulturanalyser. Imidlertid har viktigheten av å dyrke hjerteceller i et 3D-miljø for å etterligne både det opprinnelige landskapet i myokardiet og komplekse cellulære interaksjoner blitt omfattende karakterisert4,5. I tillegg har de fleste modeller produsert så langt inkludert en monokultur av CMs differensiert fra stamceller. Imidlertid består hjertet av flere celletyper6 i en kompleks 3D-arkitektur7, som garanterer det kritiske behovet for å forbedre kompleksiteten i vevssammensetningen i 3D in vitro-modeller for bedre å etterligne cellulære bestanddeler av det opprinnelige myokardiet.
Til dags dato har mange forskjellige tilnærminger blitt utforsket for å produsere biomimetiske 3D-modeller av myokardiet8. Disse tilnærmingene spenner fra eksperimentelle oppsett som tillater sanntidsberegning av generert kraft, fra monokultur CMs frøet på tynne filmer (ansett som muskuløse tynne filmer (MTFer))9, til samkulturelle hjerteceller i 3D hydrogelmatriser suspendert blant frittstående cantilevers (ansett konstruert hjertevev (EHTs))10. Andre tilnærminger har fokusert på å implementere mikromolding teknikker for å etterligne myokardanisotropi, fra monokultur CMs i en 3D hydrogel suspendert blant fremspringende mikroposter i en vev patch11, til mono-kultur CMs frø blant innrykkede mikrogroover12,13. Det er iboende fordeler og ulemper ved hver av disse metodene, derfor er det relevant å bruke teknikken som samsvarer med den tiltenkte applikasjonen og det tilsvarende biologiske spørsmålet.
Evnen til å forbedre modningen av stamcelleavledede CMs er avgjørende for vellykket in vitro-prosjektering av voksenlignende myokardvev og oversettelse av påfølgende funn til kliniske tolkninger. For dette formål har metoder for modne CMs blitt mye utforsket, både i 2D og 3D14,15,16. For eksempel fører elektrisk stimulering innlemmet i EHTs, tvungen justering av CMs med overflatetopografi, signalsignaler, vekstfaktorer fra samkultur og / eller 3D-hydrogelforhold, etc., alle til en endring til fordel for CM-modning i minst ett av følgende: cellemorfologi, kalsiumhåndtering, sarkomisk struktur, genuttrykk eller kontraktskraft.
Av disse modellene beholder tilnærmingene som bruker mikrofluidiske plattformer visse fordeler i naturen, for eksempel kontroll av gradienter, begrenset celleinngang og minimale nødvendige reagenser. Videre kan mange biologiske replikeringer genereres samtidig ved hjelp av mikrofluidiske plattformer, som tjener til bedre å dissekere den biologiske interessemekanismen og øke den eksperimentelle prøvestørrelsen til fordel for statistisk kraft17,18,19. I tillegg gjør bruk av fotolitografi i den mikrofluidiske enhet fabrikasjonsprosessen det mulig å lage presise funksjoner (f.eks. topografier) på mikro- og nanonivå, som tjener som mesoskopiske signaler for å forbedre den omkringliggende cellulære strukturen og makronivåvevsarkitekturen18,20,21,22 for forskjellige applikasjoner i vevregenerering og sykdomsmodellering.
Vi har tidligere demonstrert utviklingen av en ny 3D-hjertevevs on-chip-modell som inkorporerer overflatetopografi, i form av medfødte elliptiske mikroposter, for å justere hydrogel-innkapslede kokulturerte hjerteceller i et sammenkoblet, anisotropt vev20. Etter 14 dager med kultur er vevene dannet i mikrofluidisk enhet mer modne i fenotypen, genuttrykksprofilen, kalsiumhåndteringsegenskapene og farmasøytisk respons sammenlignet med monolayer og 3D isotrope kontroller23. Protokollen som er beskrevet her, skisserer metoden for å lage denne 3D-kokulturerte, justerte (dvs. anisotropiske) menneskelige hjertevev i den mikrofluidiske enheten ved hjelp av hiPSC-avledede CMs. Spesielt forklarer vi metodene for å differensiere og rense hiPSCer mot CMs, tilskudd av hCFer med CMs for å produsere en etablert samkulturpopulasjon, innsetting av cellepopulasjonen innkapslet i kollagenhydrgelen i mikrofluidiske enheter, og etterfølgende analyse av 3D-konstruert vev gjennom kontraktile og immunofluoreserende analyser. Det resulterende 3D-konstruerte mikrovevet er egnet for ulike bruksområder, inkludert grunnleggende biologistudier, CVD-modellering og farmasøytisk testing.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.65 mL centrifuge tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>87003-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mm Biopsy punch</td>
			<td>VWR</td>
			<td>95039-090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mm Biopsy punch</td>
			<td>VWR</td>
			<td>95039-088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL Falcon tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89039-670</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18x18mm coverslips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>16004-308</td>
			<td>The coverslips should be No.1, to allow for high magnification imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>101176-014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well flat botttom tissue-culture plates</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82050-844</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 minus insulin</td>
			<td>LifeTech</td>
			<td>A1895602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 plus insulin</td>
			<td>LifeTech</td>
			<td>17504001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHIR99021</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10188-030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen I, rat tail</td>
			<td>Corning</td>
			<td>47747-218</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM F12</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>11330057</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>21600069</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E8</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>A1517001</td>
			<td>can also be made in house</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>VWR</td>
			<td>45001-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGM3</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10172-048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFR-Matrigel</td>
			<td>VWR</td>
			<td>47743-718</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G8898-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10152-212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hESC-Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>BD354277</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IPA</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IWP2</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I0536-5MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82003-820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTCS</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>440299-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaN3</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2002-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5881-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen/Strep</td>
			<td>VWR</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish (150x15mm)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25384-326</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish (60x15mm)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25384-092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol Red</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P3532-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>MT10040CM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 minus glucose</td>
			<td>VWR</td>
			<td>45001-110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon Wafers (100mm)</td>
			<td>University Wafer</td>
			<td>1196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium lactate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L4263-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SU8 2075</td>
			<td>Microchem</td>
			<td>Y111074 0500L1GL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SU8 Developer</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>NC9901158</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sylgard Elastomer</td>
			<td>Essex Brownell</td>
			<td>DC-184-1.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 flasks</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82050-856</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8787-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TrypLE</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>12604021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA (0.5%)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>15400054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween20</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9416-50ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y-27632</td>
			<td>Stem Cell Technologies</td>
			<td>72304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EVG620 Aligner</td>
			<td>EVG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasma cleaner PDC-32G</td>
			<td>Harrick Plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss AxioObserver Z1 microscope</td>
			<td>Nikon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica SP8 Confocal microscope</td>
			<td>Leica</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

developing 3d organized human cardiac tissue within a microfluidic platform

Den ledende dødsårsaken over hele verden vedvarer som kardiovaskulær sykdom (CVD). Men modellering av hjertemuskelens fysiologiske og biologiske kompleksitet, myokardiet, er notorisk vanskelig å oppnå in vitro. Hovedsakelig ligger hindringer i behovet for menneskelige kardiomyocytter (CMs) som enten er voksne eller viser voksenlignende fenotyper og kan med hell gjenskape myokardiets cellulære kompleksitet og intrikate 3D-arkitektur. Dessverre, på grunn av etiske bekymringer og mangel på tilgjengelig primær pasient-avledet menneskelig hjertevev, kombinert med minimal spredning av CMs, har sourcing av levedyktige menneskelige CMs vært et begrensende skritt for hjertevevsteknikk. For dette formål har de fleste undersøkelser gått over til hjertedifferensiering av menneskeskapte pluripotente stamceller (hiPSCer) som den primære kilden til menneskelige CMs, noe som resulterer i bred inkorporering av hiPSC-CMs innen in vitro-analyser for hjertevevsmodellering.
Her i dette arbeidet demonstrerer vi en protokoll for å utvikle et 3D-modent stamcelle-avledet menneskelig hjertevev i en mikrofluidisk enhet. Vi forklarer og visuelt produksjonen av en 3D in vitro anisotropisk hjertevev-på-en-chip-modell fra hiPSC-avledede CMs. Vi beskriver først og fremst en renseprotokoll for å velge for CMs, kokulturen av celler med et definert forhold ved å blande CMs med menneskelige CFer (hCFer), og suspensjon av denne medkulturen i kollagenbasert hydrogel. Vi demonstrerer videre injeksjonen av den cellebelastede hydrogelen i vår veldefinerte mikrofluidiske enhet, innebygd med forskjøvet elliptiske mikroposter som tjener som overflatetopografi for å indusere en høy grad av justering av de omkringliggende cellene og hydrogelmatrisen, etterligne arkitekturen til det opprinnelige myokardiet. Vi ser for oss at den foreslåtte 3D-anisotropiske hjertevev-på-chip-modellen er egnet for grunnleggende biologistudier, sykdomsmodellering og, gjennom bruk som screeningverktøy, farmasøytisk testing.

For å få en svært renset populasjon av CMer fra hiPSCer, brukes en modifisert versjon som involverer en kombinasjon av Lian differensieringsprotokoll33 og Tohyama rensing trinn34 (se figur 1A for eksperimentell tidslinje). HiPSCene må være kolonilignende, ~ 85% sammenfallende, og jevnt spredt gjennom kulturbrønnen 3-4 dager etter passasje, ved utbruddet av CM-differensiering (Figur 1B). Spesielt på dag 0 bø...

Watch this Scientific Journal Video about Developing 3D Organized Human Cardiac Tissue within a Microfluidic Platform at JoVE.com

Developing 3D Organized Human Cardiac Tissue within a Microfluidic Platform

Målet med denne protokollen er å forklare og demonstrere utviklingen av en tredimensjonal (3D) mikrofluidisk modell av høyt justert humant hjertevev, sammensatt av stamcelleavledede kardiomyocytter som er dyrket med hjertefibroblaster (CFer) innenfor en biomimetisk, kollagenbasert hydrogel, for anvendelser innen hjertevevsteknikk, legemiddelscreening og sykdomsmodellering.

Utvikle 3D-organisert humant hjertevev i en mikrofluidisk plattform

The leading cause of death worldwide persists as cardiovascular disease (CVD). However, modeling the physiological and biological complexity of the heart ...

Kardiovaskulær sykdom er fortsatt den viktigste dødsårsaken over hele verden. Tradisjonelle in vitro-modeller er avhengige av monolayerkultur. Imidlertid er hjertet, spesielt hjertemuskelen eller myokardiet, komplekst i sin 3D-anisotropi og cellulære sammensetning.Derfor er det viktig å forbedre kompleksiteten i vevssammensetningen i in vitro-modeller for bedre å etterligne både cellulære bestanddeler og myokardiets struktur. Her i dette arbeidet demonstrerer vi en protokoll for utvikling av et 3D modent stamcelle-avledet menneskelig hjertevev i en ny mikrofluidisk enhet. Denne enheten inkorporerer en 3D hovedvevskanal med medfødte elliptiske mikroposter som induserer høye grader av justering av de omkringliggende hydrogelinnkapslede hjertecellene.Hovedkanalen er flankert av mediekanaler med injeksjonsporter som muliggjør næringsspredning i hele vevet. På grunn av den omsorg som kreves for å håndtere mikrofluidiske enheter, er visuell representasjon av denne protokollen nyttig for å etablere 3D-hjertevev riktig i en mikrofluidisk enhet med innebygde mikroposter for forbedret vevsjustering. For å dissosiere den menneskelige hjertefibroblasten, ta først ut kolben fra inkubatoren.Sett inn i biosikkerhetsskapet og begynn å aspirere de brukte mediene fra kolben. Ta deretter tre MLs PBS 1X for å vaske kolben. Lukk hetten og virvle kolben slik at bunnen er riktig belagt i PBS.Aspirer PBS. Ta tre MLs av 37 graders trypsin og legg til kolben. Vipp deretter kolben og virvle slik at bunnen er helt belagt.Sett deretter inn inkubatoren i fire til seks minutter. Nøytraliser trypsin med FGM3 ved å ta tre MLs og legge det til kolben. Pipette løsningen opp og ned for å løsne celler som forblir på baksiden av kolben.Samle cellefjæringen i et 15 ML Falcon-rør. Ta 10 mikroliter av cellefjæringen og dispenser i et hemocytometer for å telle cellene med et mikroskop. Sentrifuger cellefjæringen ved 250 G i fire minutter.Etter sentrifugering aspirerer du supernatanten og er forsiktig så du ikke forstyrrer cellepelleten. Resuspend cellepellet med fersk FGM3 for å lage ønsket 75 millioner celler per ML suspensjon. Resuspend cellene, og sett deretter røret ned med en løst montert hette.For å dissosiere kardiomyocyttene, ta platen ut av inkubatoren og aspirer media. Ta seks ML PBS og vask brønnene slik at det er én ML PBS i hver brønn. Aspirer PBS, vær forsiktig så du ikke forstyrrer cellene som er festet til platen.Tilsett seks ML varmede trypLE Express slik at det er én ML i hver brønn på seks brønnplater. Inkuber cellene med trypLE i 10 minutter. Etter 10 minutter nøytraliserer du trypLE med seks ML RPMI pluss B27 pluss insulin, slik at du legger til en ML RMPI til hver brønn.Bruk en ML pipette for å samle løsningen og sprenge den mot baksiden av brønnene for å sikre at alle cellene løftes av. Samle cellefjæringen i et 15 ML Falcon-rør. Sentrifuger røret ved 300 G i tre minutter.Etter sentrifugering aspirerer du media og trypLE. Dette trinnet er viktig for å vaske de følsomme kardiomyocyttene. Dette trinnet sikrer at all trypLE er borte i 3D hjertevevsdannelse.Resuspend cellepellet i fem MLs av RPMI pluss B27 pluss insulin. Bruk en ML pipette for å pipette oppløsningen opp og ned for å sikre en homogen celleoppheng. Ta 10 mikroliter av cellefjæringen for telling med hemocytometeret.Sentrifuger cellene ved 300 G i tre minutter. Aspirer media etter sentrifugering for andre gang. Tilsett riktig mengde RPMI pluss B27 pluss insulin for å oppnå en 75 millioner celler per ML suspensjon, og deretter resuspend.For å forberede kollagenoppløsningen for innkapsling, ha alle reagensene på en isboks i hetten. Ta deretter 75 mikroliter av lager kollagenet. Kollagenet er veldig viskøs, så sakte opptak med pipetten, og dispenser deretter i et mikrocentrifugerør på is.Ta 13,85 mikroliter RPMI og legg til kollagenet i Falcon-røret. Ta deretter 10 mikroliter fenolrød og legg til blandingen på is og resuspend. Til slutt, ta 1,15 mikroliter av en vanlig NaOH og legg til suspensjonen for å nøytralisere.Ta deretter en 200 mikroliter pipettespiss og resuspend suspensjonen. Neste trinn er innkapsling av cellene i kollagen metrogel. Ta deretter en aliquot på åtte mikroliter CMs og legg til et friskt Falcon-rør på is.Ta deretter to mikroliter CS og legg til den celleblandingen. Resuspend celle suspensjon og ta 5,6 mikroliter av celle suspensjon og sette i en frisk Falcon rør. Ta deretter tak i kollagenet du nettopp forberedte, ta fire mikroliter av kollagenet, og ta deretter 2,4 mikroliter metrogel.Pipette blandingen opp og ned for å sikre en homogen fordeling av cellehydrgelfjæringen. Når gelinjeksjonen er forberedt, kan du sette inn i enheter. Ta et nytt tips og resuspend.Ta Petri-parabolen på enhetene, sett spissen inn i injeksjonsporten, og injiser sakte og jevnt. Du vil se når enhetskanalen fylles opp med cellehydrgelfjæringen. Når den andre porten er fylt, stopp injeksjonen og fjern spissen.Etter injeksjon, vend enhetene med pinsett og plasser inne i den større Petri-parabolen med vann i inkubatoren i ni minutter. Etter ni minutter, ta enhetene ut av inkubatoren og vend oppreist, og plasser deretter tilbake i inkubatoren i ni minutter for å fullføre hydrogelpolymerisering. Nå er det på tide å legge til media.Så ta RMPI pluss B27 og sett spissen inn i medieporten og begynn sakte å skyve. Gjør det deretter på motsatt medieport. Du kan oppleve at mediet ikke injiserer, slik at du kan sette et dråpe medier på toppen av porten og deretter ta pipetten og bruke negativt trykk for å trekke mediet gjennom fra den andre siden.Så du vil se når media begynner å bli trukket gjennom kanalen. Når media er lagt til alle mediekanalene, vil enhetene bli satt tilbake i inkubatoren ved 37 grader. Den mikrofluidiske enheten vises øverst til venstre.Dager én, syv og 14 av kulturen vises dette bildet. Etter 14 dager med kultur, bør cellene kondensere til svært justerte strukturer som dannes rundt mikropostene. Spor av dag 14 er vist her i C av spontan sammentrekning, samt immunfluorescent bilder av aktin farget og hjertemarkør farget vev.Det som bør sees er høyt justerte aktinfibre som dannes etter 14 dager i kulturen, samt parallelle strikkede modne sarkomer og lokaliserte gapkryss. Under denne prosedyren er det viktig å holde alle materialer ved lave temperaturer på is under cellehydrgelinjeksjon for å forhindre for tidlig polymerisering. De mikrofluidiske enhetene bør håndteres med forsiktighet, både under fabrikasjon, injeksjon og utvidet vevskultur.Celleinjeksjonene bør være en jevn prosess for å sikre at hele kanalen har fylt mens den utføres raskt for å forhindre for tidlig polymerisering eller hydrogeltørking før medietilsetning.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

High-throughput Protein Expression Generator Using a Microfluidic Platform

High-throughput Protein Expression Generator Ved hjelp av en Microfluidic Platform

Rapidly increasing fields, such as systems biology, require the development and implementation of new technologies, enabling high-throughput and ...

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering av en menneskelig 3D<em&gt; In vitro</em&gt; Tumor Test System

Cancer is one of the leading causes of death worldwide.  Current therapeutic strategies are predominantly developed in 2D culture  systems, which ...

Cell Squeezing as a Robust, Microfluidic Intracellular Delivery Platform

Cell klemme som en robust, Microfluidic Intracellulær Levering Platform

Rapid mechanical deformation of cells has emerged as a promising, vector-free method for intracellular delivery of macromolecules and nanomaterials. This ...

The Multi-organ Chip - A Microfluidic Platform for Long-term Multi-tissue Coculture

Multi-orgel Chip - En mikrofluid plattform for langsiktig Multi-vev coculture

The ever growing amount of new substances released onto the market and the limited predictability of current in vitro test systems has led to a high need ...

A Microfluidic Platform for High-throughput Single-cell Isolation and Culture

En mikrofluid plattform for High-throughput encellede Isolering og kultur

Studying the heterogeneity of single cells is crucial for many biological questions, but is technically difficult. Thus, there is a need for a simple, yet ...

Microfluidic Platform with Multiplexed Electronic Detection for Spatial Tracking of Particles

Microfluidic Plattform med multiplekset Electronic Detection for Spatial Sporing av partikler

Microfluidic processing of biological samples typically involves differential manipulations of suspended particles under various force fields in order to ...

Creation of Cardiac Tissue Exhibiting Mechanical Integration of Spheroids Using 3D Bioprinting

Opprettelse av hjertevæv som viser mekanisk integrasjon av sfæroider ved hjelp av 3D bioprinting

This protocol describes 3D bioprinting of cardiac tissue without the use of biomaterials, using only cells. Cardiomyocytes, endothelial cells and ...

Assembly and Tracking of Microbial Community Development within a Microwell Array Platform

Montering og sporing av mikrobiel samfunnsutvikling innenfor en Microwell Array-plattform

The development of microbial communities depends on a combination of complex deterministic and stochastic factors that can dramatically alter the spatial ...

Comparable Decellularization of Fetal and Adult Cardiac Tissue Explants as 3D-like Platforms for In Vitro Studies

Sammenlignbare Decellularization av Fetal og voksen hjerte vev Explants som 3D-lignende plattformer for i Vitro studier

Current knowledge of extracellular matrix (ECM)-cell communication translates to large two-dimensional (2D) in vitro culture studies where ECM components ...

A Microfluidic Platform for Longitudinal Imaging in Caenorhabditis elegans

A Microfluidic Platform for Longitudinal Imaging in Caenorhabditis elegans

En Microfluidic plattform for langsgående Imaging i Caenorhabditis elegans

In the last decade, microfluidic techniques have been applied to study small animals, including the nematode Caenorhabditis elegans, and have proved ...