Name: developing 3d organized human cardiac tissue within a microfluidic platform
Uploaded: 2021-06-15T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Developing 3D Organized Human Cardiac Tissue within a Microfluidic Platform at JoVE.com

Мы хотели бы поблагодарить NSF CAREER Award #1653193, Arizona Biomedical Research Commission (ABRC), New Investigator Award (ADHS18-198872) и Flinn Foundation Award за предоставление источников финансирования для этого проекта. Линия hiPSC, SCVI20, была получена от Джозефа С. Ву, доктора медицинских наук, доктора философии в Стэнфордском сердечно-сосудистом институте, финансируемом NIH R24 HL117756. Линия hiPSC, IMR90-4, была получена из WiCell Research Institute55,56.

Выполнять все обработки клеток и подготовку реагентов в шкафу биобезопасности. Убедитесь, что все поверхности, материалы и оборудование, которые вступают в контакт с клетками, стерильны (т. Е. Распыляйте 70% этанола). Клетки следует культивировали в увлажненный инкубатор при 37 °C, 5% CO2.</s...

Формирование модели сердечной ткани человека in vitro с усиленными клеточными взаимодействиями и биомиметической 3D-структурой является обязательным для фундаментальных сердечно-сосудистых исследований и соответствующих клинических применений1. Этот описанный проток...

В последние годы широко изучены подходы к тканевой инженерии для сопровождения клинических результатов in vivo в регенеративной медицине и моделировании заболеваний1,2. Значительное внимание было уделено моделированию сердечной ткани in vitro из-за присущих трудностей в поиске первичной сердечной ткани человека и производстве физиологически значимых суррогатов in vitro, ограничивая фундаментальное понимание сложных механизмов сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ)1,3. Традиционные модели часто включали 2D-анализы монослойной культуры. Тем не менее, важность культивирования сердечных клеток в 3D-среде для имитации как нативного ландшафта миокарда, так и сложных клеточных взаимодействий была широко охарактеризована4,5. Кроме того, большинство моделей, произведенных до сих пор, включали монокультуру КМ, дифференцированных от стволовых клеток. Тем не менее, сердце состоит из нескольких типов клеток6 в сложной 3D-архитектуре7,что оправдывает критическую необходимость улучшения сложности состава тканей в рамках 3D-моделей in vitro для лучшей имитации клеточных компонентов нативного миокарда.
На сегодняшний день было изучено много различных подходов к созданию биомиметических 3D-моделей миокарда8. Эти подходы варьируются от экспериментальных установок, которые позволяют в режиме реального времени рассчитывать генерируемую силу, от монокультурных КМ, посеянных на тонких пленках (считающихся мышечными тонкими пленками (MTF))9,до совместной культивирования сердечных клеток в 3D-гидрогелевых матрицах, взвешенных среди отдельно стоящих кантилеверов (считающихся инженерными тканями сердца (ET))10. Другие подходы были сосредоточены на реализации методов микроформования для имитации анизотропии миокарда, от монокультурных КМ в 3D-гидрогеле, суспендированном среди выступающих микропостов в тканевомпятне 11,до монокультурных КМ, посеянных среди вдавленных микроплодов12,13. Каждому из этих методов присущи ими преимущества и недостатки, поэтому уместно использовать технику, которая согласуется с предполагаемым применением и соответствующим биологическим вопросом.
Способность усиливать созревание КМ, полученных из стволовых клеток, имеет важное значение для успешной инженерии in vitro взрослой ткани миокарда и трансляции последующих результатов в клинические интерпретации. С этой целью методы зрелых КМ были широко исследованы, как в 2D, так и в 3D14,15,16. Например, электрическая стимуляция, включенная в ЭХТ, принудительное выравнивание КМ с топографией поверхности, сигнальными сигналами, факторами роста от кокультуры и / или условиями 3D-гидрогеля и т. Д., Все это приводит к изменению в пользу созревания СМ по меньшей мере в одном из следующих: морфология клеток, обработка кальция, саркомерная структура, экспрессия генов или сократительная сила.
Из этих моделей подходы, использующие микрофлюидные платформы, сохраняют определенные преимущества в природе, такие как контроль градиентов, ограниченный ввод клеток и минимальные необходимые реагенты. Кроме того, многие биологические реплики могут быть сгенерированы одновременно с использованием микрофлюидных платформ, служащих для лучшего препарирования интересующего биологического механизма и увеличения размера экспериментальной выборки в пользу статистической мощности17,18,19. Кроме того, использование фотолитографии в процессе изготовления микрофлюидных устройств позволяет создавать точные признаки (например, топографии) на микро- и наноуровне, которые служат мезоскопическими сигналами для улучшения окружающей клеточной структуры и архитектуры тканей на макроуровне18,20,21, 22 для различных применений в регенерации тканей и моделировании заболеваний.
Ранее мы продемонстрировали разработку новой 3D-модели сердечной ткани на чипе, которая включает топографию поверхности в виде врожденных эллиптических микропостов для выравнивания гидрогелево-инкапсулированных кокумулированных сердечных клеток во взаимосвязанную анисотропную ткань20. После 14 дней культивирования ткани, образующиеся в микрофлюидном устройстве, являются более зрелыми по своему фенотипу, профилю экспрессии генов, характеристикам обработки кальция и фармацевтическому ответу по сравнению с монослойным и 3D-изотропным контролем23. Протокол, описанный в настоящем описании, описывает способ создания этой 3D-совместно культивируемой, выровненной (т.е. анизотропной) сердечной ткани человека в микрофлюидном устройстве с использованием ХМ, полученных из hiPSC. В частности, мы объясняем способы дифференцировки и очистки hiPSC в сторону КМ, добавление hCF с КМ для получения установленной популяции кокультур, введение клеточной популяции, инкапсулированной в гидрогеле коллагена, в микрофлюидные устройства, и последующий анализ 3D-сконструированных тканей с помощью сократительных и иммунофлуоресцентных анализов. Полученные 3D-инженерные микроткани подходят для различных применений, включая фундаментальные биологические исследования, моделирование сердечно-сосудистых заболеваний и фармацевтические испытания.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.65 mL centrifuge tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>87003-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mm Biopsy punch</td>
			<td>VWR</td>
			<td>95039-090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mm Biopsy punch</td>
			<td>VWR</td>
			<td>95039-088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL Falcon tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89039-670</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18x18mm coverslips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>16004-308</td>
			<td>The coverslips should be No.1, to allow for high magnification imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>101176-014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well flat botttom tissue-culture plates</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82050-844</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 minus insulin</td>
			<td>LifeTech</td>
			<td>A1895602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 plus insulin</td>
			<td>LifeTech</td>
			<td>17504001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHIR99021</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10188-030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen I, rat tail</td>
			<td>Corning</td>
			<td>47747-218</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM F12</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>11330057</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>21600069</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E8</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>A1517001</td>
			<td>can also be made in house</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>VWR</td>
			<td>45001-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGM3</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10172-048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFR-Matrigel</td>
			<td>VWR</td>
			<td>47743-718</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G8898-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10152-212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hESC-Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>BD354277</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IPA</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IWP2</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I0536-5MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82003-820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTCS</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>440299-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaN3</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2002-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5881-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen/Strep</td>
			<td>VWR</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish (150x15mm)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25384-326</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish (60x15mm)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25384-092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol Red</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P3532-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>MT10040CM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 minus glucose</td>
			<td>VWR</td>
			<td>45001-110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon Wafers (100mm)</td>
			<td>University Wafer</td>
			<td>1196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium lactate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L4263-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SU8 2075</td>
			<td>Microchem</td>
			<td>Y111074 0500L1GL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SU8 Developer</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>NC9901158</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sylgard Elastomer</td>
			<td>Essex Brownell</td>
			<td>DC-184-1.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 flasks</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82050-856</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8787-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TrypLE</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>12604021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA (0.5%)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>15400054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween20</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9416-50ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y-27632</td>
			<td>Stem Cell Technologies</td>
			<td>72304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EVG620 Aligner</td>
			<td>EVG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasma cleaner PDC-32G</td>
			<td>Harrick Plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss AxioObserver Z1 microscope</td>
			<td>Nikon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica SP8 Confocal microscope</td>
			<td>Leica</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

developing 3d organized human cardiac tissue within a microfluidic platform

Основной причиной смерти во всем мире по-прежнему является сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ). Тем не менее, моделирование физиологической и биологической сложности сердечной мышцы, миокарда, как известно, трудно выполнить in vitro. В основном, препятствия заключаются в потребности в кардиомиоцитах человека (КМ), которые либо являются взрослыми, либо демонстрируют взрослые фенотипы и могут успешно воспроизводить клеточную сложность миокарда и сложную 3D-архитектуру. К сожалению, из-за этических проблем и отсутствия доступной первичной сердечной ткани человека, полученной от пациента, в сочетании с минимальным распространением КМ, поиск жизнеспособных человеческих КМ был ограничивающим шагом для инженерии сердечной ткани. С этой целью большинство исследований перешли к сердечной дифференцировке индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клеток (hiPSCs) в качестве основного источника ЧЕЛОВЕЧЕСКИХ СМ, что привело к широкому включению hiPSC-CMs в анализы in vitro для моделирования сердечной ткани.
Здесь, в этой работе, мы демонстрируем протокол для разработки 3D-зрелой сердечной ткани человека, полученной из стволовых клеток, в микрофлюидном устройстве. Мы специально объясняем и визуально демонстрируем производство 3D-модели анизотропной сердечной ткани in vitro на чипе из КМ, полученных из hiPSC. Мы в первую очередь описываем протокол очистки для выбора для КМ, ко-культуру клеток с определенным соотношением путем смешивания КМ с человеческими ХФ (hCF) и суспензию этой кокультуры в гидрогеле на основе коллагена. Далее мы демонстрируем инъекцию нагруженного клетками гидрогеля в наше четко определенное микрофлюидное устройство, встроенное в шахматном порядке эллиптические микропосты, которые служат топографией поверхности, чтобы вызвать высокую степень выравнивания окружающих клеток и гидрогелевой матрицы, имитируя архитектуру нативного миокарда. Мы предполагаем, что предлагаемая 3D-анисотропная модель сердечной ткани на чипе подходит для фундаментальных биологических исследований, моделирования заболеваний и, благодаря ее использованию в качестве инструмента скрининга, фармацевтического тестирования.

Для получения высокоочищеной популяции КМ из hiPSCs используется модифицированная версия, включающая комбинацию протокола дифференциацииЛиан 33 и этапов очистки Тохьямы34 (см. Фиг.1A для экспериментальной временной шкалы). HiPSCs должны быть колониео...

Watch this Scientific Journal Video about Developing 3D Organized Human Cardiac Tissue within a Microfluidic Platform at JoVE.com

Developing 3D Organized Human Cardiac Tissue within a Microfluidic Platform

Целью этого протокола является объяснение и демонстрация разработки трехмерной (3D) микрофлюидной модели высокоровневой сердечной ткани человека, состоящей из кардиомиоцитов, полученных из стволовых клеток, совместно культивируемых с сердечными фибробластами (FF) в биомиметическом гидрогеле на основе коллагена, для применения в инженерии сердечной ткани, скрининге лекарств и моделировании заболеваний.

Разработка 3D-организованной сердечной ткани человека в рамках микрофлюидной платформы

The leading cause of death worldwide persists as cardiovascular disease (CVD). However, modeling the physiological and biological complexity of the heart ...

Сердечно-сосудистые заболевания остаются причиной смерти номер один во всем мире. Традиционные модели in vitro опираются на монослойную культуру. Однако сердце, в частности сердечная мышца или миокард, является сложным по своей 3D-анизотропии и клеточному составу.Поэтому крайне важно улучшить сложность состава тканей в моделях in vitro, чтобы лучше имитировать как клеточные компоненты, так и структуру миокарда. Здесь, в этой работе, мы демонстрируем протокол для разработки 3D-зрелой сердечной ткани человека, полученной из стволовых клеток, в новом микрофлюидном устройстве. Это устройство включает в себя 3D-основной тканевой канал с врожденными эллиптическими микропостами, которые вызывают высокие степени выравнивания окружающих гидрогелевых инкапсулированных сердечных клеток.Основной канал окружен медиа-каналами с инъекционными портами, которые обеспечивают диффузию питательных веществ по всей ткани. Из-за осторожности, необходимой при обращении с микрофлюидными устройствами, визуальное представление этого протокола полезно для правильного установления 3D-сердечной ткани в микрофлюидном устройстве со встроенными микропостами для улучшения выравнивания тканей. Чтобы диссоциировать сердечный фибробласт человека, сначала выньте колбу из инкубатора.Поместите внутрь шкафа биобезопасности и начните аспирировать отработанные среды из колбы. Затем возьмите три МЛ PBS 1X, чтобы промыть колбу. Закройте колпачок и закрутите колбу так, чтобы дно было правильно покрыто PBS.Аспирировать PBS. Возьмите три МЛ 37 градусов трипсина и добавьте в колбу. Затем наклоните колбу и закрутите так, чтобы дно было полностью покрыто.Затем помещают в инкубатор на четыре-шесть минут. Нейтрализуйте трипсин с помощью FGM3, взяв три МЛ и добавив их в колбу. Пипетка раствором вверх и вниз, чтобы выбить любые клетки, которые остаются на задней части колбы.Соберите клеточную суспензию в 15 мл трубки Falcon. Возьмите 10 микролитров клеточной суспензии и дозируют в гемоцитометре для подсчета клеток с помощью микроскопа. Центрифугировать клеточную суспензию при 250 Г в течение четырех минут.После центрифугирования аспирировать супернатант, стараясь не потревожить клеточную гранулу. Повторно суспендировать клеточную гранулу свежим FGM3, чтобы получить желаемые 75 миллионов клеток на суспензию ML. Повторно суспендируете ячейки, затем установите трубку со свободно установленным колпачком.Чтобы диссоциировать кардиомиоциты, выньте пластину из инкубатора и аспирируют медиа. Возьмите шесть МЛ PBS и промыть скважины так, чтобы в каждой скважине было по одному ML PBS. Аспирировать PBS, стараясь не потревожить клетки, прикрепленные к пластине.Добавьте шесть МЛ подогретого trypLE Express, чтобы в каждой скважине из шести скважин было по одному ML. Инкубировать клетки с трипле в течение 10 минут. Через 10 минут нейтрализуйте trypLE шестью МЛ RPMI плюс B27 плюс инсулин, чтобы вы добавили один мл RMPI в каждую скважину.Используйте одну пипетку ML, чтобы собрать раствор и взорвать его о задней части скважин, чтобы обеспечить снятие всех ячеек. Соберите клеточную суспензию в 15 мл трубки Falcon. Центрифугировать трубку при 300 Г в течение трех минут.После центрифугирования аспирируют жим и триплЕ. Этот шаг важен для промывания чувствительных кардиомиоцитов. Этот шаг гарантирует, что все trypLE исчезнет в 3D-образовании сердечной ткани.Повторное суспендирование клеточной гранулы в пяти МЛ RPMI плюс B27 плюс инсулин. Используйте одну пипетку ML, чтобы пипетку раствора вверх и вниз, чтобы обеспечить однородную клеточную суспензию. Возьмите 10 микролитров клеточной суспензии для подсчета гемоцитометром.Центрифугировать ячейки при 300 Г в течение трех минут. Аспирировать жижи после центрифугирования во второй раз. Добавьте соответствующее количество RPMI плюс B27 плюс инсулин, чтобы достичь 75 миллионов клеток на суспензию ML, а затем повторно суспендировать.Чтобы приготовить коллагеновый раствор для инкапсуляции, все реагенты должны быть на ледяной коробке в капюшоне. Затем возьмите 75 микролитров запасного коллагена. Коллаген очень вязкий, поэтому медленно усваивается пипеткой, затем дозируется в микроцентрифужной трубке на льду.Возьмите 13,85 микролитра RPMI и добавьте к коллагену в трубку Falcon. Затем берут 10 микролитров фенола красного цвета и добавляют в смесь на льду и повторно суспендировали. Наконец, возьмите 1,15 микролитра одного нормального NaOH и добавьте в суспензию для нейтрализации.Затем возьмите наконечник пипетки на 200 микролитров и повторно суспензию. Следующим шагом является инкапсуляция клеток внутри коллагенового метрогеля. Затем возьмите аликвоту из восьми микролитров КМ и добавьте в свежую трубку Falcon на льду.Затем возьмите два микролитра CS и добавьте к этой клеточной смеси. Повторно суспендирует клеточную суспензию и захватите 5,6 микролитра клеточной суспензии и поместите в свежую трубку Falcon. Затем возьмите коллаген, который вы только что приготовили, возьмите четыре микролитра коллагена, затем возьмите 2,4 микролитра метрогеля.Пипетка смеси вверх и вниз для обеспечения однородного распределения клеточной гидрогелевой суспензии. После того, как инъекция геля приготовлена, вы можете вставлять в устройства. Возьмите новый наконечник и повторно суспендируете.Возьмите чашку Петри из устройств, вставьте наконечник в инъекционный порт и медленно и неуклонно вводите. Вы увидите, как канал устройства заполняется клеточной гидрогелевой суспензией. Как только другой порт будет заполнен, остановите инъекцию и снимите наконечник.После инъекции переверните приборы пинцетем и поместите внутрь большую чашку Петри с водой в инкубаторе на девять минут. Через девять минут выньте устройства из инкубатора и переверните вертикально, затем поместите обратно в инкубатор еще на девять минут, чтобы завершить полимеризацию гидрогеля. Теперь пришло время добавить медиа.Итак, возьмите RMPI плюс B27 и вставьте наконечник в медиапорт и начните медленно нажимать. Затем сделайте это на противоположном медиапорте. Вы можете обнаружить, что носитель не вводится, поэтому вы можете поместить каплю носителя поверх порта, а затем взять пипетку и использовать отрицательное давление, чтобы протащить носитель с другой стороны.Таким образом, вы увидите, как медиа начинают тянуться через канал. Как только медиа будет добавлено во все медиаканалы, устройства будут помещены обратно в инкубатор при 37 градусах. Микрофлюидное устройство показано в левом верхнем углу.На этом изображении показаны первый, седьмой и 14-й дни культуры. После 14 дней культивирования клетки должны конденсироваться в высоко выровненные структуры, которые образуются вокруг микропостов. Следы 14-го дня показаны здесь в С спонтанного сокращения, а также иммунофлуоресцентные изображения окрашенных актинами и окрашенных сердечными маркерами тканей.Что следует видеть, так это высокоровненные актиновые волокна, которые образуются через 14 дней в культуре, а также параллельные полосатые зрелые саркомери и локализованные щелевидные соединения. Во время этой процедуры очень важно держать все материалы при низких температурах на льду во время инъекции гидрогеля в клетку, чтобы предотвратить преждевременную полимеризацию. С микрофлюидными устройствами следует обращаться осторожно, как во время изготовления, инъекции, так и при расширенной культуре тканей.Инъекции клеток должны быть устойчивым процессом, чтобы гарантировать, что весь канал заполнен во время быстрого выполнения, чтобы предотвратить преждевременную полимеризацию или высыхание гидрогеля перед добавлением среды.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

High-throughput Protein Expression Generator Using a Microfluidic Platform

Высокая пропускная способность экспрессии белков генератора с использованием платформы Микрофлюидных

Rapidly increasing fields, such as systems biology, require the development and implementation of new technologies, enabling high-throughput and ...

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Тканевая инженерия человеческого 3D<em&gt; В пробирке</em&gt; Опухоль Тестовая система

Cancer is one of the leading causes of death worldwide.  Current therapeutic strategies are predominantly developed in 2D culture  systems, which ...

Cell Squeezing as a Robust, Microfluidic Intracellular Delivery Platform

Сотовый Сжатие как Robust, микрофлюидных внутриклеточного Delivery Platform

Rapid mechanical deformation of cells has emerged as a promising, vector-free method for intracellular delivery of macromolecules and nanomaterials. This ...

The Multi-organ Chip - A Microfluidic Platform for Long-term Multi-tissue Coculture

Multi-орган Chip - Микрожидкостных Платформа для долгосрочных Multi-ткани сокультивирования

The ever growing amount of new substances released onto the market and the limited predictability of current in vitro test systems has led to a high need ...

A Microfluidic Platform for High-throughput Single-cell Isolation and Culture

Микрожидком Платформа с высокой пропускной способностью изоляции одноклеточные и культуры

Studying the heterogeneity of single cells is crucial for many biological questions, but is technically difficult. Thus, there is a need for a simple, yet ...

Microfluidic Platform with Multiplexed Electronic Detection for Spatial Tracking of Particles

Микрожидкостных Платформа с уплотненными электронным детектором для пространственного слежения частиц

Microfluidic processing of biological samples typically involves differential manipulations of suspended particles under various force fields in order to ...

Creation of Cardiac Tissue Exhibiting Mechanical Integration of Spheroids Using 3D Bioprinting

Создание сердечной ткани, обеспечивающей механическую интеграцию сфероидов с использованием 3D-биопреобразования

This protocol describes 3D bioprinting of cardiac tissue without the use of biomaterials, using only cells. Cardiomyocytes, endothelial cells and ...

Assembly and Tracking of Microbial Community Development within a Microwell Array Platform

Сборка и отслеживание развития микробного сообщества в рамках платформы массивов микролистов

The development of microbial communities depends on a combination of complex deterministic and stochastic factors that can dramatically alter the spatial ...

Comparable Decellularization of Fetal and Adult Cardiac Tissue Explants as 3D-like Platforms for In Vitro Studies

Сопоставимых Decellularization плода и взрослых сердечной ткани эксплантов как 3D-как платформы для в исследованиях in Vitro

Current knowledge of extracellular matrix (ECM)-cell communication translates to large two-dimensional (2D) in vitro culture studies where ECM components ...

A Microfluidic Platform for Longitudinal Imaging in Caenorhabditis elegans

A Microfluidic Platform for Longitudinal Imaging in Caenorhabditis elegans

Microfluidic платформа для продольной Imaging в Caenorhabditis elegans

In the last decade, microfluidic techniques have been applied to study small animals, including the nematode Caenorhabditis elegans, and have proved ...