Name: pre-chiasmatic, single injection of autologous blood to induce experimental subarachnoid hemorrhage in a rat model
Uploaded: 2021-06-18T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model at JoVE.com

Arbejdet er støttet af Lundbeckfonden og Lundbeck Grant of Excellence (nr. R59-A5404). Funders havde ingen rolle i nogen del af manuskriptet.

Denne procedure udføres i overensstemmelse med EU's direktiv 2010/63/EU om beskyttelse af dyr, der anvendes til videnskabelige formål og er godkendt af Dyreforsøgstilsynet (licens nr. 2016-15-0201-00940). Kirurgi udføres ved hjælp af aseptisk teknik i videst muligt omfang, herunder sterile instrumenter, handsker, katetre og suturer. Undersøgelsen anvendte han- og hunrotter fra Sprague-Dawley, der vejede 230-350 g, grupperet i 12-timers lys/mørk cyklus med konstant temperatur på 22 °C (± 2 °C) og fugtighed på ...

<ol>
	<li>van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+haemorrhage.">Subarachnoid haemorrhage.</a> Lancet. 369 (9558), 306-318 (2007).</li><li>de Rooij, N. K., Linn, F. H. H., vander Plas, J. A., Algra, A., Rinkel, G. J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+subarachnoid+haemorrhage:+a+systematic+review+with+emphasis+on+region,+age,+gender+and+time+trends.">Incidence of subarachnoid haemorrhage: a systematic review with emphasis on region, age, gender and time trends.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 78 (12), 1365-1372 (2007).</li><li>Feigin, V. L., Lawes, C. M., Bennett, D. A., Barker-Collo, S. L., Parag, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Worldwide+stroke+incidence+and+early+case+fatality+reported+in+56+population-based+studies:+a+systematic+review.">Worldwide stroke incidence and early case fatality reported in 56 population-based studies: a systematic review.</a> The Lancet, Neurology. 8 (4), 355-369 (2009).</li><li>Maher, M., Schweizer, T. A., Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+spontaneous+subarachnoid+hemorrhage:+guidelines+and+gaps.">Treatment of spontaneous subarachnoid hemorrhage: guidelines and gaps.</a> Stroke. 51 (4), 1326-1332 (2020).</li><li>Pickard, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+oral+nimodipine+on+cerebral+infarction+and+outcome+after+subarachnoid+haemorrhage:+British+aneurysm+nimodipine+trial.">Effect of oral nimodipine on cerebral infarction and outcome after subarachnoid haemorrhage: British aneurysm nimodipine trial.</a> British Medical Journal (Clinical Research ed.). 298 (6674), 636-642 (1989).</li><li>Daou, B. J., Koduri, S., Thompson, B. G., Chaudhary, N., Pandey, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+and+experimental+aspects+of+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">Clinical and experimental aspects of aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> CNS Neuroscience and Therapeutics. 25 (10), 1096-1112 (2019).</li><li>Fujii, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+brain+injury,+an+evolving+frontier+in+subarachnoid+hemorrhage+research.">Early brain injury, an evolving frontier in subarachnoid hemorrhage research.</a> Translational Stroke Research. 4 (4), 432-446 (2013).</li><li>Roos, Y. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complications+and+outcome+in+patients+with+aneurysmal+subarachnoid+haemorrhage:+A+prospective+hospital+based+cohort+study+in+the+Netherlands.">Complications and outcome in patients with aneurysmal subarachnoid haemorrhage: A prospective hospital based cohort study in the Netherlands.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 68 (3), 337-341 (2000).</li><li>Vergouwen, M. D. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Definition+of+delayed+cerebral+ischemia+after+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage+as+an+outcome+event+in+clinical+trials+and+observational+studies:+proposal+of+a+multidisciplinary+research+group.">Definition of delayed cerebral ischemia after aneurysmal subarachnoid hemorrhage as an outcome event in clinical trials and observational studies: proposal of a multidisciplinary research group.</a> Stroke. 41 (10), 2391-2395 (2010).</li><li>Brown, R. J., Kumar, A., Dhar, R., Sampson, T. R., Diringer, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+delayed+infarcts+and+angiographic+vasospasm+after+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">The relationship between delayed infarcts and angiographic vasospasm after aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 72 (5), 702-707 (2013).</li><li>Dhar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+angiographic+vasospasm+and+regional+hypoperfusion+in+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">Relationship between angiographic vasospasm and regional hypoperfusion in aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Stroke. 43 (7), 1788-1794 (2012).</li><li>Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+neurological+deterioration+after+subarachnoid+haemorrhage.">Delayed neurological deterioration after subarachnoid haemorrhage.</a> Nature Reviews. Neurology. 10 (1), 44-58 (2014).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+review+of+in+vivo+animal+models+of+subarachnoid+hemorrhage:+species,+standard+parameters,+and+outcomes.">Systematic review of in vivo animal models of subarachnoid hemorrhage: species, standard parameters, and outcomes.</a> Translational Stroke Research. 10 (3), 250-258 (2019).</li><li>Prunell, G. F., Mathiesen, T., Svendgaard, N. -. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+experimental+model+in+rats+for+study+of+the+pathophysiology+of+subarachnoid+hemorrhage.">A new experimental model in rats for study of the pathophysiology of subarachnoid hemorrhage.</a> Neuroreport. 13 (18), 2553-2556 (2002).</li><li>Prunell, G. F., Mathiesen, T., Diemer, N. H., Svendgaard, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+subarachnoid+hemorrhage:+subarachnoid+blood+volume,+mortality+rate,+neuronal+death,+cerebral+blood+flow,+and+perfusion+pressure+in+three+different+rat+models.">Experimental subarachnoid hemorrhage: subarachnoid blood volume, mortality rate, neuronal death, cerebral blood flow, and perfusion pressure in three different rat models.</a> Neurosurgery. 52 (1), 165-176 (2003).</li><li>Prunell, G. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Subarachnoid+Hemorrhage:+Cerebral+blood+flow+and+brain+metabolism+during+the+acute+phase+in+three+different+models+in+the+rat.">Experimental Subarachnoid Hemorrhage: Cerebral blood flow and brain metabolism during the acute phase in three different models in the rat.</a> Neurosurgery. 54 (2), 426-437 (2004).</li><li>Velthuis, B. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+hemorrhage:+Aneurysm+detection+and+preoperative+evaluation+with+CT+angiography.">Subarachnoid hemorrhage: Aneurysm detection and preoperative evaluation with CT angiography.</a> Radiology. 208 (2), 423-430 (1998).</li><li>Leclerc, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+pathophysiology+in+humans+and+rodent+models+of+subarachnoid+hemorrhage.">A comparison of pathophysiology in humans and rodent models of subarachnoid hemorrhage.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 11, 71 (2018).</li><li>Prunell, G. F., Svendgaard, N. A., Alkass, K., Mathiesen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+in+the+brain+after+experimental+subarachnoid+hemorrhage.">Inflammation in the brain after experimental subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 56 (5), 1082-1091 (2005).</li><li>Prunell, G. F., Svendgaard, N. A., Alkass, K., Mathiesen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+cell+death+related+to+acute+cerebral+blood+flow+changes+following+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat+brain.">Delayed cell death related to acute cerebral blood flow changes following subarachnoid hemorrhage in the rat brain.</a> Journal of Neurosurgery. 102 (6), 1046-1054 (2005).</li><li>Spray, S., Haanes, K. A., Edvinsson, L., Johansson, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subacute+phase+of+subarachnoid+haemorrhage+in+female+rats:+increased+intracranial+pressure,+vascular+changes+and+impaired+sensorimotor+function.">Subacute phase of subarachnoid haemorrhage in female rats: increased intracranial pressure, vascular changes and impaired sensorimotor function.</a> Microvascular Research. 135, 104127 (2020).</li><li>Ansar, S., Vikman, P., Nielsen, M., Edvinsson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebrovascular+ETB,+5-HT1B,+and+AT1+receptor+upregulation+correlates+with+reduction+in+regional+CBF+after+subarachnoid+hemorrhage.">Cerebrovascular ETB, 5-HT1B, and AT1 receptor upregulation correlates with reduction in regional CBF after subarachnoid hemorrhage.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 293 (6), 3750-3758 (2007).</li><li>Hansen-Schwartz, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+hemorrhage+enhances+endothelin+receptor+expression+and+function+in+rat+cerebral+arteries.">Subarachnoid hemorrhage enhances endothelin receptor expression and function in rat cerebral arteries.</a> Neurosurgery. 52 (5), 1188-1194 (2003).</li><li>Hayman, E. G., Wessell, A., Gerzanich, V., Sheth, K. N., Simard, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+global+cerebral+edema+formation+in+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">Mechanisms of global cerebral edema formation in aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Neurocritical Care. 26 (2), 301-310 (2017).</li><li>Miyata, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vasa+vasorum+formation+is+associated+with+rupture+of+intracranial+aneurysms.">Vasa vasorum formation is associated with rupture of intracranial aneurysms.</a> Journal of Neurosurgery. , 1-11 (2019).</li><li>Tada, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+hypertension+in+the+rupture+of+intracranial+aneurysms.">Roles of hypertension in the rupture of intracranial aneurysms.</a> Stroke. 45 (2), 579-586 (2014).</li><li>Nuki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastase-induced+intracranial+aneurysms+in+hypertensive+mice.">Elastase-induced intracranial aneurysms in hypertensive mice.</a> Hypertension. 54 (6), 1337-1344 (1979).</li><li>Marbacher, S., Wanderer, S., Strange, F., Gr&#252;ter, B. E., Fandino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Saccular+aneurysm+models+featuring+growth+and+rupture:+A+systematic+review.">Saccular aneurysm models featuring growth and rupture: A systematic review.</a> Brain Sciences. 10 (2), 101 (2020).</li><li>Altay, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isoflurane+on+brain+inflammation.">Isoflurane on brain inflammation.</a> Neurobiology of Disease. 62, 365-371 (2014).</li><li>Hockel, K., Trabold, R., Sch&#246;ller, K., T&#246;r&#246;k, E., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+anesthesia+on+pathophysiology+and+mortality+following+subarachnoid+hemorrhage+in+rats.">Impact of anesthesia on pathophysiology and mortality following subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Experimental and Translational Stroke Medicine. 4 (1), 5 (2012).</li><li>Kamp, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Systematic+and+meta-analysis+of+mortality+in+experimental+mouse+models+analyzing+delayed+cerebral+ischemia+after+subarachnoid+hemorrhage.">A Systematic and meta-analysis of mortality in experimental mouse models analyzing delayed cerebral ischemia after subarachnoid hemorrhage.</a> Translational Stroke Research. 8 (3), 206-219 (2017).</li><li>Povlsen, G. K., Johansson, S. E., Larsen, C. C., Samraj, A. K., Edvinsson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+events+triggering+delayed+vasoconstrictor+receptor+upregulation+and+cerebral+ischemia+after+subarachnoid+hemorrhage.">Early events triggering delayed vasoconstrictor receptor upregulation and cerebral ischemia after subarachnoid hemorrhage.</a> BMC Neuroscience. 14, 34 (2013).</li></ol>

Den præchiasmatiske enkeltinjektionsmodel af SAH efterligner flere vigtige elementer i human SAH, herunder stigningen i ICP, reduktion af CBF, forbigående global iskæmi, opregulering af neuroinflammatoriske markører og CVS 14,15,16,18,19,20. ICP-sonden blev også anvendt som port til intratekal administration (<strong cla...

Ikke-traumatisk subaraknoid blødning (SAH) er en form for slagtilfælde, der repræsenterer omkring 5% af alle tilfælde. Den mest almindelige årsag til ikke-traumatisk SAH er den pludselige brud på en aneurisme (aSAH), som tegner sig for 85% af SAH'erne. Andre årsager omfatter brud på en arterio-venøs misdannelse, koagulopatier og brud på vener i perimesencephalic blødning1. Incidensraten er 9 pr. 100.000 personår med dødelighed omkring en ud af tre og en anden tredjedel, der kræver støtte fra dagligdagen efter SAH 2,3.
Efter indledende stabilisering og diagnosebekræftelse afhænger behandlingen af blødningens sværhedsgrad. De hårdest ramte patienter vil få indsat et ekstraventrikulært dræn i ventriklerne for at reducere det intracerebrale tryk (ICP) og blive indlagt på neurointensivafdelingen, hvor de overvåges nøje. Patienterne vil gennemgå en angiografi for at identificere den (sandsynlige) aneurisme og derefter få aneurismet oprullet eller klippet for at forhindre genblødning4. På trods af adskillige forsøg med farmakologiske terapier har kun nimodipin, en calciumkanalantagonist, vist sig at forbedre resultaterne5. Flere kliniske forsøg er i øjeblikket i gang. Se anmeldelsen af Daou og kolleger for en omfattende liste6.
Bruddet af en aneurisme er blevet beskrevet som den pludselige indtræden af den værste hovedpine, der nogensinde er oplevet, eller en tordenklaphovedpine. Bruddet resulterer i en kraftig stigning i ICP efterfulgt af en reduktion i cerebral blodgennemstrømning (CBF). Denne reduktion resulterer i global iskæmi i hjernen, hvilket kan resultere i bevidsthedstab. Denne mere mekanistiske vej sammen med den initierede nedbrydning af de ekstravaserede elementer i blodet giver anledning til cytokinfrigivelse og aktivering af det medfødte immunsystem, hvilket resulterer i steril neuroinflammation. Desuden observeres ofte nedbrydning af blod-hjerne-barrieren, hvilket resulterer i cerebralt ødem og forstyrrelse i ionhomeostasen. Alle disse ændringer og mere, opfundet tidlig hjerneskade (EBI), forekommer inden for de første par dage og resulterer i neuronalt tab og apoptose7.
Ca. 1/3 af patienterne ramt af aSAH vil udvikle forsinket cerebral iskæmi (DCI) mellem dag 4-148. DCI defineres som enten debut af en fokal, neurologisk svækkelse eller et fald på mindst to point på Glasgow komaskalaen, der varer i mindst 1 time, når andre årsager, herunder anfald og genblødning, er udelukket. DCI er forbundet med en øget risiko for død og nedsat funktionsresultat efter aSAH9. Cerebral vasospasme (CVS), indsnævring af cerebrale arterier, har været kendt for at være forbundet med DCI i årtier og blev tidligere anset for at være den eneste årsag til DCI. Det er siden blevet vist, at CVS kan forekomme uden udvikling af DCI, og flere faktorer, herunder mikrovaskulær trombose og indsnævring, kortikal spredningsdepression og et inflammatorisk respons af EBI er siden blevet identificeret10,11,12.
På grund af EBI's og DCI's store indflydelse på sygdomsforløbet og udfaldet af de ramte patienter, skal dyremodeller efterligne disse i videst muligt omfang, samtidig med at de stadig er reproducerbare. Forskere har anvendt en bred vifte af forskellige modeller i en række dyr fra mus til ikke-menneskelige primater for at forsøge at simulere aSAH. Sprague-Dawley og Wistar vildtype rotter er i øjeblikket de mest almindeligt anvendte forsøgsdyr, og de mest almindelige modeller er den endovaskulære perforeringsmodel, cisterna-magna dobbeltinjektionsmodellen og endelig den præ-chiasmatiske enkeltinjektionsmodel, som vil blive beskrevet i denne artikel13.
Den præ-chiasmatiske, enkeltinjektionsmodel blev oprindeligt udviklet af Prunell og kolleger for at imødegå nogle af manglerne ved de andre eksperimentelle modeller14. Når operationen mestres, er den meget reproducerbar og minimerer variation mellem dyr. Modellen efterligner SAH hos mennesker på flere punkter, herunder den pludselige stigning i ICP efter injektion af blod, hvilket resulterer i forbigående global iskæmi på grund af et fald i CBF15,16. Det påvirker den forreste cirkulation, hvor de fleste aSAH hos mennesker forekommer17. Dødeligheden varierer fra 10% -33% afhængigt af undersøgelsen og mængden af injiceret blod14,18. Forsinket celledød og neuroinflammation kan påvises på dag 2 og 7, hvorved der tilvejebringes variabler til undersøgelse af konsekvenserne af EBI og DCI 19,20.
Studiet præsenterer en opdateret beskrivelse af den præchiasmatiske enkeltinjektionsmodel hos rotter sammen med en beskrivelse af, hvordan ICP-sonden kan udnyttes som port til intratekal administration af lægemidler.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>16 G peripheral vein catheter</td>
			<td>BD Venflon</td>
			<td>393229</td>
			<td>Needle shortened, distal 1 cm curved. Wings removed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia bell/ chamber</td>
			<td>Unknown</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood gas analyzer</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td>ABL80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood pressure (BP) monitor</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>ML117</td>
			<td>Connects to Powerlab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps, 12 cm x 3</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11001-12</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cylindrical pillow, 28 cm x 4 cm</td>
			<td>Homemade</td>
			<td></td>
			<td>Made from surgical towels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquisition hardware</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>ML870 Powerlab</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquistion software</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>LabChart 6.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drill</td>
			<td>KMD</td>
			<td>1189</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drill controller</td>
			<td>Silfradent</td>
			<td>300 IN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexible light</td>
			<td>Schott</td>
			<td>KL200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Minco</td>
			<td>1135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic needle, 20 G</td>
			<td>KD Medical</td>
			<td>301300</td>
			<td>Connects to stereotaxic frame</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ICP monitor</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>ML117</td>
			<td>Connects to Powerlab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane vaporizer</td>
			<td>Ohmeda</td>
			<td>TEC3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laptop</td>
			<td>Lenovo</td>
			<td>T410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser doppler monitor</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>ML191</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser doppler probe</td>
			<td>Oxford Optronics</td>
			<td>MSF100XP</td>
			<td>Connects to laser doppler monitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder, 13 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12001-13</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision syringe, 0.025 mL</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>547407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotaxic frame</td>
			<td>Kopf Instruments</td>
			<td>M900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>F170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture needle</td>
			<td>Allgaier</td>
			<td>1245</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temperaure controller</td>
			<td>CWE,INC.</td>
			<td>TC-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transducer x 2</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>MLT0699</td>
			<td>Connects to BP and ICP monitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilator</td>
			<td>Ugo Basile</td>
			<td>7025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary clipper</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>GT421</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-pronged Blair retractor, 13.5 cm</td>
			<td>Agnthos</td>
			<td>17022--13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt Alm retractor</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>17008-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps, 12 cm x 2</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11001-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder, 13 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Dumont forceps, 11 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11252-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Halsted-Mosquito hemostat x 2</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>13008-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Iris scissor, 9 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14090-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Vannas scissor, 10.5 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>15018-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Absorpable swabs</td>
			<td>Kettenbach</td>
			<td>31603</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black silk thread, 4-0, 5 x 15 cm</td>
			<td>V&#246;mel</td>
			<td>14757</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bone wax</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>1029754</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbomer eye gel 2 mg/g</td>
			<td>Paranova</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swab</td>
			<td>Heinz Herenz</td>
			<td>WA-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton tipped applicator x 4</td>
			<td>Selefa</td>
			<td>120788</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic needle, 23 G x2</td>
			<td>KD Medical</td>
			<td>900284</td>
			<td>Connects to stopcock. Remove distal end</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic needle, 23 G x3</td>
			<td>KD Medical</td>
			<td>900284</td>
			<td>Remove distal end. 2 connects to stopcock, 1 to syringe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ICP probe:</td>
			<td>Homemade</td>
			<td></td>
			<td>Made of the following:</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polythene tubing, 20 mm</td>
			<td>Smiths medical</td>
			<td>800/100/200</td>
			<td>Inner diameter (ID): 0.58 mm, Outer diameter (OD): 0.96 mm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone tubing, 10 mm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>15202710</td>
			<td>ID: 0.76 mm, OD: 2.4 mm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone tubing, 2 mm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>11716513</td>
			<td>ID: 1.0 mm, OD: 3.0 mm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro hematocrit tubes</td>
			<td>Brand</td>
			<td>7493 11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OP-towel, 45 cm x75 cm</td>
			<td>M&#246;lnlycke</td>
			<td>800430</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PinPort adapter, 22 G</td>
			<td>Instech</td>
			<td>PNP3F22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PinPort injector</td>
			<td>Instech</td>
			<td>PNP3M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polythene tubing, 2 x 20 cm</td>
			<td>Smiths medical</td>
			<td>800/100/200</td>
			<td>Connects to syringe. ID: 0.58 mm, OD: 0.96 mm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubberband</td>
			<td>Unknown</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel, 10 blade</td>
			<td>Kiato</td>
			<td>23110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinalneedle, 25 G x 3.5&#39;&#39;</td>
			<td>Braun</td>
			<td>5405905-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stopcock system, Discofix x 2</td>
			<td>Braun</td>
			<td>16494C</td>
			<td>Connects to transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture, 4-0, monofil, non-resorbable x 3</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>EH7145H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 1 mL</td>
			<td>BD Plastipak</td>
			<td>1710023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, luer-lock, 10 mL x 4</td>
			<td>BD Plastipak</td>
			<td>305959</td>
			<td>Connects to transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue adhesive glue</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5% Chlorhexidine spirit</td>
			<td>Faaborg Pharma</td>
			<td>210918</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen 50 mg/mL</td>
			<td>ScanVet</td>
			<td>43715</td>
			<td>Diluted 1:10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isotonic saline</td>
			<td>Amgros</td>
			<td>16404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine-Adrenaline 10 mg/5 &#181;g/mL</td>
			<td>Amgros</td>
			<td>16318</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

pre-chiasmatic, single injection of autologous blood to induce experimental subarachnoid hemorrhage in a rat model

På trods af fremskridt i behandlingen i løbet af de sidste årtier bærer subaraknoid blødning (SAH) fortsat en høj byrde af sygelighed og dødelighed, der stort set rammer en ret ung befolkning. Flere dyremodeller af SAH er blevet udviklet til at undersøge de patofysiologiske mekanismer bag SAH og til at teste farmakologiske interventioner. Den præ-chiasmatiske, enkelt injektionsmodel i rotten, der præsenteres i denne artikel, er en eksperimentel model af SAH med et forudbestemt blodvolumen. Kort sagt bedøves dyret, intuberes og holdes under mekanisk ventilation. Temperaturen reguleres med en varmepude. Et kateter placeres i halearterien, hvilket muliggør kontinuerlig blodtryksmåling samt blodprøvetagning. Atlantooccipitalmembranen skæres, og et kateter til trykoptagelse placeres i cisterna magna for at muliggøre intracerebral trykmåling. Dette kateter kan også bruges til intratekale terapeutiske indgreb. Rotten placeres i en stereotaksisk ramme, et burrhul bores anteriort til bregmaen, og et kateter indsættes gennem burrhullet og placeres lige foran den optiske chiasme. Autologt blod (0,3 ml) trækkes ud af halekateteret og injiceres manuelt. Dette resulterer i en stigning i intracerebralt tryk og et fald i cerebral blodgennemstrømning. Dyret holdes bedøvet i 30 minutter og gives subkutan saltvand og smertestillende midler. Dyret ekstuberes og returneres til sit bur. Den præchiasmatiske model har en høj reproducerbarhedshastighed og begrænset variation mellem dyr på grund af det forudbestemte blodvolumen. Det efterligner SAH hos mennesker, hvilket gør det til en relevant model for SAH-forskning.

Kvinder har en øget risiko for aSAH sammenlignet med mænd. På trods af dette anvendes mandlige gnavere primært i forsøg på grund af mulig bias fra heterogenitet af østruscyklus hos kvinder. De repræsentative resultater, der præsenteres her, er fra en nylig publikation, der sammenligner hun- og hanrotter, hvilket bekræfter, at modellen giver lignende resultater hos hundyr sammenlignet med hanrotterpå 21 år. Undersøgelsen omfattede 34 hunrotter fra Sprague-Dawley (18 SAH'er og 16 shams)...

Watch this Scientific Journal Video about Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model at JoVE.com

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

Subarachnoid blødning fortsætter med at bære en høj byrde af dødelighed og sygelighed hos mennesket. For at lette yderligere forskning i tilstanden og dens patofysiologi præsenteres en præ-chiasmatisk, enkelt injektionsmodel.

Pre-chiasmatisk, enkelt injektion af autologt blod for at inducere eksperimentel subaraknoid blødning i en rottemodel

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...

Denne model af subarachnoid blødning hjælper os med bedre at forstå de patofysiologiske mekanismer og konsekvenserne. Dette vil forhåbentlig resultere i at generere terapier, der reducerer sygdomsbyrden hos ramte patienter. Den største fordel ved denne teknik er dens meget reproducerbare, da en fast mængde blod injiceres.Desuden ligner det en human subaraknoid blødning i nøgleparametre. For at fremstille ICP-sonden skal du brænde den ene ende af et 20 millimeter stykke polyethylenrør, lave en cirkulær plade og holde lumen åben. Slip derefter en en millimeter silikoneslangering over polyethylenslangen, inden du tilslutter et 10 millimeter stykke silikoneslange til enden af polyethylenslangen.Derefter bedøves, intuberes og kateteriseres en Sprague Dawley-rotte, inden den placeres i en stereotaksisk ramme. Efter administration af lokalbedøvelse foretages et otte millimeter hudsnit caudalt fra nålepunktionen i midterlinjen. Under et dissekerende mikroskop dissekeres alle musklerne stump i lag for at identificere atlantooccipitalmembranen.Brug derefter armretraktoren til at begrænse nakkemuskulaturen, og placer retraktoren kausalt, hvis det er nødvendigt. Når det er kontrolleret, at den sterile ICP-sonde er forbundet med ICP-transduceren, skylles ICP-sonden med saltvand, og det kontrolleres, at der ikke er luftbobler i sonden. Brug en 23 gauge nål til at skære atlantooccipital membranen, hvilket gør et hul til forsigtigt at lokke ICP-sonden gennem membranen.Træk sonden let og sørg for, at den viser en pulserende kurve på mellem nul og fem millimeter kviksølv. Hvis ikke, skal du fjerne sonden, kontrollere forbindelsen til transduceren igen og bekræfte strømmen gennem lumen. I det område, hvor atlantooccipitalmembranen vikles rundt om sonden, påføres to dråber vævslim.Flyt derefter silikoneslangen på en millimeter fremad mod membranen, inden du påfører yderligere lim for at minimere risikoen for ICP-sondeforskydning. Når ICP-sonden er limet, fjernes retractoren. Derefter placeres en vandret madrassutur ved hjælp af en ikke-resorberbar monofilament 4-0 sutur i den kaudale ende af snittet og en simpel afbrudt sutur i den cephaliske ende.For at placere laser-dopplersonden skal du lave et 15 millimeter snit caudalt i midterlinjen, der starter lige foran øjnene. Efter fjernelse af bindevæv og muskler med tang, brug enden af en steril vatpind som en rougine til at identificere bregma og koronale suturer. Når du har placeret den væbnede retraktor, skal du placere en 25 gauge rygnål i stereotaksrammen nøjagtigt på bregma og notere positionen.Fjern derefter nålen fra bregmaen. Flyt rammen anteriort med 6,5 millimeter. Udskift derefter nålen i midterlinjen for at markere siden af boringen.Bor indtil dura mater er identificeret under knoglen. Brug lige tang til forsigtigt at fjerne knoglefragmenterne. Fyld derefter hulrummet med knoglevoks.Dernæst tre til fire millimeter lateralt til højre for bregma og lige foran den koronale sutur til laser-doppleren, bor et andet hul. Pas på ikke at trænge ind i dura mater. Se efter de skibe, hvor laser-doppleren kan måle blodgennemstrømningen.Placer laserdoppleren, og kontroller værdierne. Der kræves en minimumsværdi på 100 fluxenheder. Hvis værdierne forbliver acceptable efter fjernelse af mikroskopet, skal du tilføje en dråbe lim for at fastgøre sonden.Kontroller igen, om værdien er over 80 fluxenheder. For at fremkalde subaraknoid blødning skal du indsætte nålen forsigtigt gennem kraniet i midterlinjen mellem halvkuglerne, indtil modstanden mærkes på grund af bunden af kraniet. Træk nålen en millimeter tilbage for at sikre korrekt placering lige foran den optiske chiasme.For at sikre det mest homogene resultat ved injektion af blodet drejes nålen 90 grader med uret, så nålespidsen peger mod højre. Fjern derefter stiletten. Efter en 15 minutters ligevægt justeres anæstesiniveauet for at opnå et gennemsnitligt arterielt blodtryk i området 80 til 100 millimeter kviksølv.Udfør derefter en blodgasanalyse for at bekræfte, at pH, partialtryk af kuldioxid og partialtryk af ilt er inden for fysiologiske parametre. Brug derefter en milliliter sprøjte med en stump 23 gauge nål til at trække 500 mikroliter blod ud af halekateteret. For at undgå injektion af luft skal du fylde det døde rum i rygmarvsnålkammeret med blod.Efter justering af blodvolumenet i sprøjten til 300 mikroliter, tilslut sprøjten til rygmarven. Tag derefter godt fat i sprøjten, injicer blodet manuelt for at overskride det gennemsnitlige arterielle tryk. Observer en stejl stigning i det intracerebrale tryk og et samtidigt stejlt fald i cerebral blodgennemstrømning.30 minutter efter induktion af subaraknoid blødning fjernes nålen og laser-dopplersonden. Og fyld hulrummene med knoglevoks. Brug ikke-resorberbar monofilament 4-0 sutur til at lukke snittet med to vandrette madrassuturer.For at bruge ICP-sonden til injektioner i cisterna magna skal du fjerne silikoneslangen og indsætte en pinportadapter i polyethylenslangen. For at udføre en intratekal administration, mens dyret er vågen, skal du placere en pinportinjektor på en præcisionssprøjte. Administrer derefter behandlingen via pinportadapteren.Hvis intratekale administrationer ikke skal udføres, skal du skære den enkle afbrudte sutur. Brug derefter en saks til at forkorte ICP-sonden så meget som muligt og lim enden for at forhindre lækage af cerebrospinalvæske. Luk snittet med en ikke-absorberbar monofilament 4-0 sutur.I evalueringen af grov sensorisk motorisk funktion ved hjælp af den roterende poltest klarede rotter med eksperimentelt induceret subaraknoid blødning signifikant dårligere 24 og 48 timer efter operationen sammenlignet med falske dyr. Følsomheden over for endothelin-1, en agonist for endothelin-1-receptorfamilien, steg signifikant to dage efter subaraknoid blødning i basilar og de midterste cerebrale arterier hos forsøgsrotterne sammenlignet med dem hos shamkontrollerne. Begge arterier hos forsøgsrotterne udviste også en lignende stigning i følsomhed over for 5-carboxamidotryptamin, en agonist for 5-hydroxytryptaminreceptorfamilien.Efter proceduren kan neuroadfærdsmæssige tests samt vævsanalyse, herunder immunhistokemi, PCR, western blotting analysator udføres for at analysere konsekvenser og mekanismer.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Autologous Blood Injection to Model Spontaneous Intracerebral Hemorrhage in Mice

Investigation of the pathophysiology of injury after intracerebral
hemorrhage (ICH) requires a reproducible animal model.  While ICH
accounts for 10-15% ...

Visual Evoked Potential Recording in a Rat Model of Experimental Optic Nerve Demyelination

Visuelt fremkaldt Potentiel optagelse i en rotte model for Eksperimentel Optic Nerve Demyelinisering

The visual evoked potential (VEP) recording is widely used in clinical practice to assess the severity of optic neuritis in its acute phase, and to ...

Rat Model of Widespread Cerebral Cortical Demyelination Induced by an Intracerebral Injection of Pro-Inflammatory Cytokines

Rottemodel af udbredt cerebral kortikal demyelinering induceret af en intracerebral injektion af proinflammatoriske cytokiner

Multiple sclerosis (MS) is the most common immune-mediated disease of the central nervous system (CNS) and progressively leads to physical disability and ...

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

En volumetriske metode til kvantificering af Cerebral vasospasme i en Murine Model af subaraknoid blødning

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

A Benchtop Approach to the Location Specific Blood Brain Barrier Opening using Focused Ultrasound in a Rat Model

En benchtop tilgang til placeringsspecifik blodhjernebarriereåbning ved hjælp af fokuseret ultralyd i en rottemodel

Stereotaxic surgery is the gold standard for localized drug and gene delivery to the rodent brain. This technique has many advantages over systemic ...

Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

Dobbelt direkte injektion af blod i Cisterna Magna som en model af Subarachnoid Blødning

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...

Massive Pontine Hemorrhage by Dual Injection of Autologous Blood

Massiv Pontine Blødning ved dobbelt injektion af autologt blod

We provide a protocol to establish a massive pontine hemorrhage model in a rat. Rats weighing about 250 grams were used in this study. One hundred ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

En rottemodel af EcoHIV-hjerneinfektion

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

Analyse af Cerebral Vasospasm i en Murine Model af Subarachnoid Blødning med højfrekvent transkranial dupleks Ultralyd

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging (MRI)

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI

Endovaskulær perforeringsmodel for subarachnoid blødning kombineret med magnetisk resonansbilleddannelse (MRI)

The endovascular filament perforation model to mimic subarachnoid hemorrhage (SAH) is a commonly used model - however, the technique can cause a high ...