Name: pre-chiasmatic, single injection of autologous blood to induce experimental subarachnoid hemorrhage in a rat model
Uploaded: 2021-06-18T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model at JoVE.com

Arbeidet ble støttet av Lundbeck Foundation og Lundbeck Grant of Excellence (nr. R59-A5404). Finansiører hadde ingen rolle i noen del av manuskriptet.

Denne prosedyren utføres i samsvar med EUs direktiv 2010/63/EU om beskyttelse av dyr som brukes til vitenskapelige formål og godkjent av det danske dyreforsøkstilsynet (lisensnr. 2016-15-0201-00940). Kirurgi utføres ved hjelp av aseptisk teknikk i størst mulig grad, inkludert sterile instrumenter, hansker, katetre og suturer. Studien brukte mannlige og kvinnelige Sprague-Dawley-rotter som veier 230-350 g, gruppe plassert i 12-timers lys / mørk syklus, med konstant temperatur på 22 ° C (± 2 ° C) og fuktighet på...

<ol>
	<li>van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+haemorrhage.">Subarachnoid haemorrhage.</a> Lancet. 369 (9558), 306-318 (2007).</li><li>de Rooij, N. K., Linn, F. H. H., vander Plas, J. A., Algra, A., Rinkel, G. J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+subarachnoid+haemorrhage:+a+systematic+review+with+emphasis+on+region,+age,+gender+and+time+trends.">Incidence of subarachnoid haemorrhage: a systematic review with emphasis on region, age, gender and time trends.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 78 (12), 1365-1372 (2007).</li><li>Feigin, V. L., Lawes, C. M., Bennett, D. A., Barker-Collo, S. L., Parag, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Worldwide+stroke+incidence+and+early+case+fatality+reported+in+56+population-based+studies:+a+systematic+review.">Worldwide stroke incidence and early case fatality reported in 56 population-based studies: a systematic review.</a> The Lancet, Neurology. 8 (4), 355-369 (2009).</li><li>Maher, M., Schweizer, T. A., Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+spontaneous+subarachnoid+hemorrhage:+guidelines+and+gaps.">Treatment of spontaneous subarachnoid hemorrhage: guidelines and gaps.</a> Stroke. 51 (4), 1326-1332 (2020).</li><li>Pickard, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+oral+nimodipine+on+cerebral+infarction+and+outcome+after+subarachnoid+haemorrhage:+British+aneurysm+nimodipine+trial.">Effect of oral nimodipine on cerebral infarction and outcome after subarachnoid haemorrhage: British aneurysm nimodipine trial.</a> British Medical Journal (Clinical Research ed.). 298 (6674), 636-642 (1989).</li><li>Daou, B. J., Koduri, S., Thompson, B. G., Chaudhary, N., Pandey, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+and+experimental+aspects+of+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">Clinical and experimental aspects of aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> CNS Neuroscience and Therapeutics. 25 (10), 1096-1112 (2019).</li><li>Fujii, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+brain+injury,+an+evolving+frontier+in+subarachnoid+hemorrhage+research.">Early brain injury, an evolving frontier in subarachnoid hemorrhage research.</a> Translational Stroke Research. 4 (4), 432-446 (2013).</li><li>Roos, Y. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complications+and+outcome+in+patients+with+aneurysmal+subarachnoid+haemorrhage:+A+prospective+hospital+based+cohort+study+in+the+Netherlands.">Complications and outcome in patients with aneurysmal subarachnoid haemorrhage: A prospective hospital based cohort study in the Netherlands.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 68 (3), 337-341 (2000).</li><li>Vergouwen, M. D. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Definition+of+delayed+cerebral+ischemia+after+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage+as+an+outcome+event+in+clinical+trials+and+observational+studies:+proposal+of+a+multidisciplinary+research+group.">Definition of delayed cerebral ischemia after aneurysmal subarachnoid hemorrhage as an outcome event in clinical trials and observational studies: proposal of a multidisciplinary research group.</a> Stroke. 41 (10), 2391-2395 (2010).</li><li>Brown, R. J., Kumar, A., Dhar, R., Sampson, T. R., Diringer, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+delayed+infarcts+and+angiographic+vasospasm+after+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">The relationship between delayed infarcts and angiographic vasospasm after aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 72 (5), 702-707 (2013).</li><li>Dhar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+angiographic+vasospasm+and+regional+hypoperfusion+in+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">Relationship between angiographic vasospasm and regional hypoperfusion in aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Stroke. 43 (7), 1788-1794 (2012).</li><li>Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+neurological+deterioration+after+subarachnoid+haemorrhage.">Delayed neurological deterioration after subarachnoid haemorrhage.</a> Nature Reviews. Neurology. 10 (1), 44-58 (2014).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+review+of+in+vivo+animal+models+of+subarachnoid+hemorrhage:+species,+standard+parameters,+and+outcomes.">Systematic review of in vivo animal models of subarachnoid hemorrhage: species, standard parameters, and outcomes.</a> Translational Stroke Research. 10 (3), 250-258 (2019).</li><li>Prunell, G. F., Mathiesen, T., Svendgaard, N. -. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+experimental+model+in+rats+for+study+of+the+pathophysiology+of+subarachnoid+hemorrhage.">A new experimental model in rats for study of the pathophysiology of subarachnoid hemorrhage.</a> Neuroreport. 13 (18), 2553-2556 (2002).</li><li>Prunell, G. F., Mathiesen, T., Diemer, N. H., Svendgaard, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+subarachnoid+hemorrhage:+subarachnoid+blood+volume,+mortality+rate,+neuronal+death,+cerebral+blood+flow,+and+perfusion+pressure+in+three+different+rat+models.">Experimental subarachnoid hemorrhage: subarachnoid blood volume, mortality rate, neuronal death, cerebral blood flow, and perfusion pressure in three different rat models.</a> Neurosurgery. 52 (1), 165-176 (2003).</li><li>Prunell, G. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Subarachnoid+Hemorrhage:+Cerebral+blood+flow+and+brain+metabolism+during+the+acute+phase+in+three+different+models+in+the+rat.">Experimental Subarachnoid Hemorrhage: Cerebral blood flow and brain metabolism during the acute phase in three different models in the rat.</a> Neurosurgery. 54 (2), 426-437 (2004).</li><li>Velthuis, B. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+hemorrhage:+Aneurysm+detection+and+preoperative+evaluation+with+CT+angiography.">Subarachnoid hemorrhage: Aneurysm detection and preoperative evaluation with CT angiography.</a> Radiology. 208 (2), 423-430 (1998).</li><li>Leclerc, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+pathophysiology+in+humans+and+rodent+models+of+subarachnoid+hemorrhage.">A comparison of pathophysiology in humans and rodent models of subarachnoid hemorrhage.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 11, 71 (2018).</li><li>Prunell, G. F., Svendgaard, N. A., Alkass, K., Mathiesen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+in+the+brain+after+experimental+subarachnoid+hemorrhage.">Inflammation in the brain after experimental subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 56 (5), 1082-1091 (2005).</li><li>Prunell, G. F., Svendgaard, N. A., Alkass, K., Mathiesen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+cell+death+related+to+acute+cerebral+blood+flow+changes+following+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat+brain.">Delayed cell death related to acute cerebral blood flow changes following subarachnoid hemorrhage in the rat brain.</a> Journal of Neurosurgery. 102 (6), 1046-1054 (2005).</li><li>Spray, S., Haanes, K. A., Edvinsson, L., Johansson, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subacute+phase+of+subarachnoid+haemorrhage+in+female+rats:+increased+intracranial+pressure,+vascular+changes+and+impaired+sensorimotor+function.">Subacute phase of subarachnoid haemorrhage in female rats: increased intracranial pressure, vascular changes and impaired sensorimotor function.</a> Microvascular Research. 135, 104127 (2020).</li><li>Ansar, S., Vikman, P., Nielsen, M., Edvinsson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebrovascular+ETB,+5-HT1B,+and+AT1+receptor+upregulation+correlates+with+reduction+in+regional+CBF+after+subarachnoid+hemorrhage.">Cerebrovascular ETB, 5-HT1B, and AT1 receptor upregulation correlates with reduction in regional CBF after subarachnoid hemorrhage.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 293 (6), 3750-3758 (2007).</li><li>Hansen-Schwartz, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+hemorrhage+enhances+endothelin+receptor+expression+and+function+in+rat+cerebral+arteries.">Subarachnoid hemorrhage enhances endothelin receptor expression and function in rat cerebral arteries.</a> Neurosurgery. 52 (5), 1188-1194 (2003).</li><li>Hayman, E. G., Wessell, A., Gerzanich, V., Sheth, K. N., Simard, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+global+cerebral+edema+formation+in+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">Mechanisms of global cerebral edema formation in aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Neurocritical Care. 26 (2), 301-310 (2017).</li><li>Miyata, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vasa+vasorum+formation+is+associated+with+rupture+of+intracranial+aneurysms.">Vasa vasorum formation is associated with rupture of intracranial aneurysms.</a> Journal of Neurosurgery. , 1-11 (2019).</li><li>Tada, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+hypertension+in+the+rupture+of+intracranial+aneurysms.">Roles of hypertension in the rupture of intracranial aneurysms.</a> Stroke. 45 (2), 579-586 (2014).</li><li>Nuki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastase-induced+intracranial+aneurysms+in+hypertensive+mice.">Elastase-induced intracranial aneurysms in hypertensive mice.</a> Hypertension. 54 (6), 1337-1344 (1979).</li><li>Marbacher, S., Wanderer, S., Strange, F., Gr&#252;ter, B. E., Fandino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Saccular+aneurysm+models+featuring+growth+and+rupture:+A+systematic+review.">Saccular aneurysm models featuring growth and rupture: A systematic review.</a> Brain Sciences. 10 (2), 101 (2020).</li><li>Altay, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isoflurane+on+brain+inflammation.">Isoflurane on brain inflammation.</a> Neurobiology of Disease. 62, 365-371 (2014).</li><li>Hockel, K., Trabold, R., Sch&#246;ller, K., T&#246;r&#246;k, E., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+anesthesia+on+pathophysiology+and+mortality+following+subarachnoid+hemorrhage+in+rats.">Impact of anesthesia on pathophysiology and mortality following subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Experimental and Translational Stroke Medicine. 4 (1), 5 (2012).</li><li>Kamp, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Systematic+and+meta-analysis+of+mortality+in+experimental+mouse+models+analyzing+delayed+cerebral+ischemia+after+subarachnoid+hemorrhage.">A Systematic and meta-analysis of mortality in experimental mouse models analyzing delayed cerebral ischemia after subarachnoid hemorrhage.</a> Translational Stroke Research. 8 (3), 206-219 (2017).</li><li>Povlsen, G. K., Johansson, S. E., Larsen, C. C., Samraj, A. K., Edvinsson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+events+triggering+delayed+vasoconstrictor+receptor+upregulation+and+cerebral+ischemia+after+subarachnoid+hemorrhage.">Early events triggering delayed vasoconstrictor receptor upregulation and cerebral ischemia after subarachnoid hemorrhage.</a> BMC Neuroscience. 14, 34 (2013).</li></ol>

Den pre-chiasmatiske enkeltinjeksjonsmodellen til SAH etterligner flere viktige elementer i human SAH, inkludert piggen i ICP, reduksjon av CBF, forbigående global iskemi, oppregulering av nevroinflammatoriske markører og CVS 14,15,16,18,19,20. ICP-sonden ble også brukt som port for intratekal administrering (<strong class...

Ikke-traumatisk subaraknoidalblødning (SAH) er en form for hjerneslag, som representerer rundt 5% av alle tilfeller. Den vanligste årsaken til ikke-traumatisk SAH er den plutselige brudd på en aneurisme (aSAH), som står for 85% av SAH. Andre årsaker inkluderer brudd på en arteriovenøs misdannelse, koagulopatier og brudd på vener i perimesencephalic blødning1. Insidensraten er 9 per 100 000 personår, med dødelighet rundt en av tre og en annen tredjedel som krever støtte fra dagliglivet etter SAH 2,3.
Etter innledende stabilisering og diagnosebekreftelse avhenger behandlingen av alvorlighetsgraden av blødningen. De hardest rammede pasientene vil få inn et ekstraventrikkeldren i ventriklene for å redusere det intracerebrale trykket (ICP) og bli innlagt på nevrointensivavdelingen, hvor de overvåkes nøye. Pasienter vil gjennomgå en angiografi for å identifisere (sannsynlig) aneurisme og etterpå har aneurisme kveilet eller klippet for å hindre ny blødning4. Til tross for mange studier av farmakologiske terapier, har bare nimodipin, en kalsiumkanalantagonist, vist seg å forbedre resultatene5. Flere kliniske studier er for tiden i gang. Se gjennomgangen av Daou og kolleger for en omfattende liste6.
Brudd på en aneurisme har blitt beskrevet som den plutselige utbruddet av den verste hodepine noensinne opplevd eller en tordenskrall hodepine. Bruddet resulterer i en bratt økning i ICP etterfulgt av en reduksjon i cerebral blodstrøm (CBF). Denne reduksjonen resulterer i global iskemi i hjernen, noe som kan føre til tap av bevissthet. Denne mer mekanistiske banen, sammen med den initierte nedbrytningen av de ekstravaserte elementene i blodet, gir opphav til cytokinfrigjøring og aktivering av det medfødte immunsystemet som resulterer i steril nevroinflammasjon. Videre observeres ofte nedbrytning av blod-hjernebarrieren, noe som resulterer i cerebralt ødem og forstyrrelse i ionhomeostasen. Alle disse endringene og mer, myntet tidlig hjerneskade (EBI), forekommer i løpet av de første par dagene og resulterer i nevrontap og apoptose7.
Omtrent 1/3 av pasientene som er rammet av aSAH vil utvikle forsinket cerebral iskemi (DCI) mellom dag 4-148. DCI er definert som enten debut av fokal, nevrologisk svekkelse eller et fall på minimum to punkter på komaskalaen i Glasgow som varer i minimum 1 time, når andre årsaker, inkludert kramper og ny blødning er utelukket. DCI er forbundet med økt risiko for død og redusert funksjonsutfall etter aSAH9. Cerebral vasospasme (CVS), innsnevring av cerebrale arterier, har vært kjent for å være assosiert med DCI i flere tiår og ble tidligere antatt å være den eneste årsaken til DCI. Det har siden blitt vist at CVS kan oppstå uten utvikling av DCI og flere faktorer, inkludert mikrovaskulær trombose og innsnevring, kortikal spredningsdepresjon og en inflammatorisk respons av EBI har siden blitt identifisert10,11,12.
På grunn av den store innflytelsen fra EBI og DCI på sykdomsforløpet og utfallet av pasientene som rammes, må dyremodeller etterligne disse i størst mulig grad, samtidig som de er reproduserbare. Forskere har brukt et bredt spekter av forskjellige modeller i en rekke dyr fra mus til ikke-menneskelige primater for å prøve å simulere aSAH. Sprague-Dawley og Wistar villtyperotter er for tiden de mest brukte laboratoriedyrene, og de vanligste modellene er endovaskulær perforasjonsmodell, cisterna-magna dobbeltinjeksjonsmodell, og til slutt den pre-chiasmatiske enkeltinjeksjonsmodellen, som vil bli beskrevet i denne artikkelen13.
Den pre-chiasmatiske, enkeltinjeksjonsmodellen ble opprinnelig utviklet av Prunell og kolleger for å motvirke noen av manglene i de andre eksperimentelle modellene14. Operasjonen, når den mestres, er svært reproduserbar og minimerer variasjon mellom dyr. Modellen etterligner SAH hos mennesker på flere punkter, inkludert den plutselige økningen i ICP etter injeksjon av blod, noe som resulterer i forbigående global iskemi på grunn av et fall i CBF15,16. Det påvirker den fremre sirkulasjonen, som er der de fleste aSAH hos mennesker forekommer17. Dødeligheten varierer fra 10% -33% avhengig av studien og mengden blod injisert14,18. Forsinket celledød og nevroinflammasjon kan påvises dag 2 og 7 og dermed gi variabler for å studere konsekvensene av EBI og DCI19,20.
Studien presenterer en oppdatert beskrivelse av den prechiasmatiske enkeltinjeksjonsmodellen hos rotte sammen med en beskrivelse av hvordan ICP-sonden kan brukes som en port for intratekal administrering av legemidler.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>16 G peripheral vein catheter</td>
			<td>BD Venflon</td>
			<td>393229</td>
			<td>Needle shortened, distal 1 cm curved. Wings removed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia bell/ chamber</td>
			<td>Unknown</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood gas analyzer</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td>ABL80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood pressure (BP) monitor</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>ML117</td>
			<td>Connects to Powerlab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps, 12 cm x 3</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11001-12</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cylindrical pillow, 28 cm x 4 cm</td>
			<td>Homemade</td>
			<td></td>
			<td>Made from surgical towels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquisition hardware</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>ML870 Powerlab</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquistion software</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>LabChart 6.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drill</td>
			<td>KMD</td>
			<td>1189</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drill controller</td>
			<td>Silfradent</td>
			<td>300 IN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexible light</td>
			<td>Schott</td>
			<td>KL200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Minco</td>
			<td>1135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic needle, 20 G</td>
			<td>KD Medical</td>
			<td>301300</td>
			<td>Connects to stereotaxic frame</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ICP monitor</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>ML117</td>
			<td>Connects to Powerlab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane vaporizer</td>
			<td>Ohmeda</td>
			<td>TEC3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laptop</td>
			<td>Lenovo</td>
			<td>T410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser doppler monitor</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>ML191</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser doppler probe</td>
			<td>Oxford Optronics</td>
			<td>MSF100XP</td>
			<td>Connects to laser doppler monitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder, 13 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12001-13</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision syringe, 0.025 mL</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>547407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotaxic frame</td>
			<td>Kopf Instruments</td>
			<td>M900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>F170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture needle</td>
			<td>Allgaier</td>
			<td>1245</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temperaure controller</td>
			<td>CWE,INC.</td>
			<td>TC-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transducer x 2</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>MLT0699</td>
			<td>Connects to BP and ICP monitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilator</td>
			<td>Ugo Basile</td>
			<td>7025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary clipper</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>GT421</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-pronged Blair retractor, 13.5 cm</td>
			<td>Agnthos</td>
			<td>17022--13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt Alm retractor</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>17008-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps, 12 cm x 2</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11001-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder, 13 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Dumont forceps, 11 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11252-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Halsted-Mosquito hemostat x 2</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>13008-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Iris scissor, 9 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14090-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Vannas scissor, 10.5 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>15018-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Absorpable swabs</td>
			<td>Kettenbach</td>
			<td>31603</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black silk thread, 4-0, 5 x 15 cm</td>
			<td>V&#246;mel</td>
			<td>14757</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bone wax</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>1029754</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbomer eye gel 2 mg/g</td>
			<td>Paranova</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swab</td>
			<td>Heinz Herenz</td>
			<td>WA-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton tipped applicator x 4</td>
			<td>Selefa</td>
			<td>120788</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic needle, 23 G x2</td>
			<td>KD Medical</td>
			<td>900284</td>
			<td>Connects to stopcock. Remove distal end</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic needle, 23 G x3</td>
			<td>KD Medical</td>
			<td>900284</td>
			<td>Remove distal end. 2 connects to stopcock, 1 to syringe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ICP probe:</td>
			<td>Homemade</td>
			<td></td>
			<td>Made of the following:</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polythene tubing, 20 mm</td>
			<td>Smiths medical</td>
			<td>800/100/200</td>
			<td>Inner diameter (ID): 0.58 mm, Outer diameter (OD): 0.96 mm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone tubing, 10 mm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>15202710</td>
			<td>ID: 0.76 mm, OD: 2.4 mm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone tubing, 2 mm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>11716513</td>
			<td>ID: 1.0 mm, OD: 3.0 mm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro hematocrit tubes</td>
			<td>Brand</td>
			<td>7493 11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OP-towel, 45 cm x75 cm</td>
			<td>M&#246;lnlycke</td>
			<td>800430</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PinPort adapter, 22 G</td>
			<td>Instech</td>
			<td>PNP3F22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PinPort injector</td>
			<td>Instech</td>
			<td>PNP3M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polythene tubing, 2 x 20 cm</td>
			<td>Smiths medical</td>
			<td>800/100/200</td>
			<td>Connects to syringe. ID: 0.58 mm, OD: 0.96 mm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubberband</td>
			<td>Unknown</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel, 10 blade</td>
			<td>Kiato</td>
			<td>23110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinalneedle, 25 G x 3.5&#39;&#39;</td>
			<td>Braun</td>
			<td>5405905-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stopcock system, Discofix x 2</td>
			<td>Braun</td>
			<td>16494C</td>
			<td>Connects to transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture, 4-0, monofil, non-resorbable x 3</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>EH7145H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 1 mL</td>
			<td>BD Plastipak</td>
			<td>1710023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, luer-lock, 10 mL x 4</td>
			<td>BD Plastipak</td>
			<td>305959</td>
			<td>Connects to transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue adhesive glue</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5% Chlorhexidine spirit</td>
			<td>Faaborg Pharma</td>
			<td>210918</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen 50 mg/mL</td>
			<td>ScanVet</td>
			<td>43715</td>
			<td>Diluted 1:10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isotonic saline</td>
			<td>Amgros</td>
			<td>16404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine-Adrenaline 10 mg/5 &#181;g/mL</td>
			<td>Amgros</td>
			<td>16318</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

pre-chiasmatic, single injection of autologous blood to induce experimental subarachnoid hemorrhage in a rat model

Til tross for fremskritt i behandlingen de siste tiårene, fortsetter subaraknoidalblødning (SAH) å bære en høy byrde av sykelighet og dødelighet, i stor grad plager en ganske ung befolkning. Flere dyremodeller av SAH er utviklet for å undersøke de patofysiologiske mekanismene bak SAH og for å teste farmakologiske inngrep. Den pre-chiasmatiske, enkeltinjeksjonsmodellen i rotte presentert i denne artikkelen er en eksperimentell modell av SAH med et forhåndsbestemt blodvolum. Kort fortalt blir dyret bedøvet, intubert og holdt under mekanisk ventilasjon. Temperaturen reguleres med en varmepute. Et kateter er plassert i halearterien, noe som muliggjør kontinuerlig blodtrykksmåling samt blodprøvetaking. Den atlantooccipitale membranen snittes og et kateter for trykkregistrering plasseres i cisterna magna for å muliggjøre intracerebral trykkmåling. Dette kateteret kan også brukes til intratekale terapeutiske inngrep. Rotta er plassert i en stereotaktisk ramme, et burrhull bores fremre for bregma, og et kateter settes inn gjennom burrhullet og plasseres like foran den optiske chiasmen. Autologt blod (0,3 ml) trekkes ut av halekateteret og injiseres manuelt. Dette resulterer i en økning av intracerebral trykk og en reduksjon av cerebral blodstrøm. Dyret holdes bedøvet i 30 min og gis subkutan saltvann og smertestillende midler. Dyret er ekstubert og returnert til buret. Den pre-chiasmatiske modellen har høy reproduserbarhetshastighet og begrenset variasjon mellom dyr på grunn av det forhåndsbestemte blodvolumet. Det etterligner SAH hos mennesker, noe som gjør det til en relevant modell for SAH-forskning.

Kvinner har økt risiko for aSAH sammenlignet med menn. Til tross for dette brukes mannlige gnagere primært i eksperimenter på grunn av mulig skjevhet fra heterogenitet av østrussyklus hos kvinner. De representative resultatene som presenteres her er fra en nylig publikasjon som sammenligner hunn- og hannrotter, og bekrefter at modellen gir lignende resultater hos hunndyr sammenlignet med hannrotter21. Studien inkluderte 34 kvinnelige Sprague-Dawley-rotter (18 SAH og 16 humbug). Shams hadde ikk...

Watch this Scientific Journal Video about Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model at JoVE.com

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

Subaraknoidalblødning fortsetter å bære en høy byrde av dødelighet og sykelighet hos mennesker. For å lette videre forskning på tilstanden og dens patofysiologi, presenteres en pre-chiasmatisk, enkeltinjeksjonsmodell.

Pre-chiasmatisk, enkelt injeksjon av autologt blod for å indusere eksperimentell subaraknoid blødning i en rottemodell

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...

Denne modellen av subarachnoid blødning hjelper oss bedre å forstå de patofysiologiske mekanismene og konsekvensene. Dette vil forhåpentligvis resultere i å generere terapier, redusere sykdomsbyrden hos rammede pasienter. Den største fordelen med denne teknikken er dens svært reproduserbare, da en fast mengde blod injiseres.Videre ligner det en menneskelig subaraknoidalblødning i viktige parametere. For å lage ICP-sonden, brenn den ene enden av et 20 millimeter stykke polyetenrør, gjør en sirkulær plate og hold lumen åpen. Fest deretter en millimeter silikonrørring over polyetenrøret før du kobler et 10 millimeter stykke silikonrør til enden av polyetenrøret.Deretter bedøver, intuberer og kateteriserer du en Sprague Dawley-rotte før du plasserer den i en stereotaktisk ramme. Etter administrering av lokalbedøvelse, gjør en åtte millimeter hud snitt caudally fra nålen punktering i midtlinjen. Under et dissekerende mikroskop, dissekere alle musklene sløvt i lag for å identifisere atlantooccipital membran.Bruk deretter armretractoren til å begrense nakkemuskulaturen, og plasser retractoren kaudalt om nødvendig. Etter å ha kontrollert at den sterile ICP-sonden er koblet til ICP-svingeren, skyll ICP-sonden med saltvann, og kontroller at det ikke er luftbobler i sonden. Bruk en 23 gauge nål, snitt atlantooccipital membran, noe som gjør et hull for å forsiktig coax ICP sonden gjennom membranen.Trekk sonden lett og sørg for at den viser en pulserende kurve som varierer mellom null til fem millimeter kvikksølv. Hvis ikke, fjern sonden, kontroller tilkoblingen til transduseren på nytt og bekreft strømmen gjennom lumen. I området der atlantooccipitalmembranen brytes rundt sonden, bruk to dråper vevslim.Flytt deretter silikonslangen på en millimeter fremover mot membranen, før du påfører ekstra lim for å minimere risikoen for ICP-sondeforskyvning. Når ICP-sonden er limt, fjern tilbaketrekkeren. Deretter, ved hjelp av en ikke-resorberbar monofilament 4-0 sutur, plasser en horisontal madrass sutur på den kaudale enden av snittet og en enkel avbrutt sutur i cephalic enden.For å plassere laserdopplersonden, gjør du et 15 millimeter snitt kaudalt i midtlinjen, og starter like foran øynene. Etter å ha fjernet bindevevet og musklene med tang, bruk enden av en steril bomullspinne som en rougine for å identifisere bregma og koronale suturer. Etter å ha plassert den væpnede retractoren, plasser en 25 gauge spinal nål i den stereotaksiske rammen nøyaktig på bregma og noter posisjonen.Fjern deretter nålen fra bregma. Flytt rammen anteriort med 6,5 millimeter. Sett deretter kanylen i midtlinjen for å markere siden av boringen.Bor til dura materen er identifisert under beinet. Bruk rette tang, fjern forsiktig beinfragmentene. Fyll deretter hulrommet med beinvoks.Deretter, tre til fire millimeter lateralt til høyre for bregma og like foran koronal sutur for laserdoppleren, bor et nytt hull. Pass på at du ikke trenger inn i dura materen. Se etter fartøyene der laserdoppleren kan måle blodstrømmen.Plasser laserdoppleren og kontroller verdiene. En minimumsverdi på 100 fluksenheter kreves. Hvis verdiene forblir akseptable etter at mikroskopet er fjernet, legger du til en dråpe lim for å fikse sonden.Kontroller på nytt for å bekrefte om verdien er over 80 fluksenheter. For å indusere subarachnoid blødning, sett nålen forsiktig gjennom skallen i midtlinjen mellom halvkule til motstand er følt på grunn av bunnen av skallen. Trekk nålen inn en millimeter for å sikre riktig plassering rett foran chiasmen.For å sikre det mest homogene resultatet når blodet injiseres, vri nålen 90 grader med klokken slik at nålespissen peker mot høyre. Fjern deretter stilettoen. Etter en 15 minutters likevekt, juster nivået av anestesi for å oppnå et gjennomsnittlig arterielt blodtrykk i området 80 til 100 millimeter kvikksølv.Utfør deretter en blodgassanalyse for å bekrefte at pH, partialtrykk av karbondioksid og partialtrykk av oksygen er innenfor fysiologiske parametere. Deretter bruker du en milliliter sprøyte med en stump 23 gauge nål, trekker 500 mikroliter blod fra halekateteret. For å unngå injeksjon av luft, fyll det døde rommet i spinalnålkammeret med blod.Etter å ha justert volumet av blodet i sprøyten til 300 mikroliter, koble sprøyten til ryggraden. Deretter griper du godt rundt sprøyten, injiserer blodet manuelt for å overgå gjennomsnittlig arterielt trykk. Vær oppmerksom på en bratt økning i det intracerebrale trykket og et samtidig bratt fall i den cerebrale blodstrømmen.30 minutter etter induksjon av subarachnoid blødning, fjern nålen og laserdopplersonden. Og fyll hulrommene med beinvoks. Bruk ikke-resorberbar monofilament 4-0 sutur, lukk snittet med to horisontale madrassuturer.For å bruke ICP-sonden til injeksjonsvæsker i cisterna magna, fjern silikonslangen og sett inn en pinportadapter til polyetenslangen. For å utføre en intratekal administrasjon mens dyret er våkent, plasser en pinportinjektor på en presisjonssprøyte. Administrer deretter behandlingen gjennom pinportadapteren.Hvis intratekal administrering ikke må utføres, kutt den enkle avbrutte suturen. Deretter, ved hjelp av saks, forkorte ICP-sonden så mye som mulig og lim enden for å forhindre lekkasje av cerebrospinalvæske. Lukk snittet med en ikke-absorberbar monofilament 4-0 sutur.I evalueringen av grov sensorisk motorisk funksjon ved hjelp av den roterende poltesten, utførte rotter med eksperimentelt indusert subaraknoidalblødning signifikant verre 24 og 48 timer etter operasjonen sammenlignet med skamdyr. Følsomheten for endotelin-1, en agonist for endotelin-1-reseptorfamilien, økte signifikant to dager etter subaraknoidalblødning i basilær og midtre cerebrale arterier hos eksperimentelle rotter sammenlignet med de av sham kontrollene. Begge arteriene til eksperimentelle rotter viste også en lignende økning i følsomhet for 5-karboksamidotryptamin, en agonist for 5-hydroksytryptaminreseptorfamilien.Etter prosedyren kan nevroatferdstester samt vevsanalyse inkludert immunhistokjemi, PCR, vestlig blottingsanalysator utføres for å analysere konsekvenser og mekanismer.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Autologous Blood Injection to Model Spontaneous Intracerebral Hemorrhage in Mice

Investigation of the pathophysiology of injury after intracerebral
hemorrhage (ICH) requires a reproducible animal model.  While ICH
accounts for 10-15% ...

Visual Evoked Potential Recording in a Rat Model of Experimental Optic Nerve Demyelination

Visuell fremkalt potensial Opptak i en rottemodell of Experimental Optic Nerve Demyelinisering

The visual evoked potential (VEP) recording is widely used in clinical practice to assess the severity of optic neuritis in its acute phase, and to ...

Rat Model of Widespread Cerebral Cortical Demyelination Induced by an Intracerebral Injection of Pro-Inflammatory Cytokines

Rottemodell av utbredt cerebral kortikale demyelinering indusert av en intracerebral injeksjon av proinflammatoriske cytokiner

Multiple sclerosis (MS) is the most common immune-mediated disease of the central nervous system (CNS) and progressively leads to physical disability and ...

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

Volumetrisk metode for kvantifisering av Cerebral vasospasme i en Murine modell av Hjernehinneblødning

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

A Benchtop Approach to the Location Specific Blood Brain Barrier Opening using Focused Ultrasound in a Rat Model

En benchtop tilnærming til plasseringen spesifikke blod hjernebarriere åpning ved hjelp av fokusert ultralyd i en rotte modell

Stereotaxic surgery is the gold standard for localized drug and gene delivery to the rodent brain. This technique has many advantages over systemic ...

Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

Dobbel direkte injeksjon av blod inn i Cisterna Magna som modell av Subaraknoid blødning

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...

Massive Pontine Hemorrhage by Dual Injection of Autologous Blood

Massiv Pontine blødning ved dobbel injeksjon av autologt blod

We provide a protocol to establish a massive pontine hemorrhage model in a rat. Rats weighing about 250 grams were used in this study. One hundred ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

En rottemodell av EcoHIV hjerneinfeksjon

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

Analyse av cerebral vasospasme i en murine modell av subarachnoid blødning med høyfrekvent transkraniell dupleks ultralyd

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging (MRI)

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI

Endovaskulær perforeringsmodell for subarachnoid blødning kombinert med magnetisk resonansavbildning (MR)

The endovascular filament perforation model to mimic subarachnoid hemorrhage (SAH) is a commonly used model - however, the technique can cause a high ...